專利名稱：利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定煙草及煙草制品中西柏烷二萜醇的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及煙草測(cè)定方法，特別是一種利用氣相色譜-質(zhì)i普聯(lián)用測(cè)定煙草 及煙草制品中西柏烷二碎醇的方法，該技術(shù)利用超聲萃取，溶劑處理，衍生化 試劑衍生化和氣質(zhì)聯(lián)用分析從而實(shí)現(xiàn)快速準(zhǔn)確測(cè)定。
背景技術(shù)：
煙草中的化學(xué)成分是多種多樣和十分復(fù)雜的，西柏烷二薛醇是煙草中 一種 分布較廣泛的重要化學(xué)成分，它們被認(rèn)為是重要的香味物質(zhì)前體。但由于對(duì)西 柏烷二辟醇的提取和分離純化較為困難，因而它們被認(rèn)為是較難準(zhǔn)確測(cè)定的煙 草化學(xué)成分之一。目前煙草西柏烷二萜醇的分析方法大即有氣相色譜法、氣質(zhì) 聯(lián)用法，又有液質(zhì)聯(lián)用法，甚至連薄層色傳法都有應(yīng)用。因?yàn)闅庀嗪蜌赓|(zhì)聯(lián)用 方法分析時(shí)如果不進(jìn)行衍生化處理，則不能實(shí)現(xiàn)這兩種物質(zhì)的分離，進(jìn)行衍生 化處理時(shí)，對(duì)衍生化條件的掌握尺度又會(huì)導(dǎo)致精確定量的難以實(shí)現(xiàn)。對(duì)液相和
';M:條件而言，因萃取溶劑和進(jìn)樣溶劑的限制，對(duì)這兩種物質(zhì)實(shí)現(xiàn)基線分離和
精確定量分析是非常困難的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的正是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中所存在的不足之處，提供利用氣相色譜 -質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定煙草及煙草制品中西柏烷二萜醇的方法。該方法能夠有效地將 煙草中的西柏烷二辟醇首先實(shí)現(xiàn)完全萃取,再進(jìn)行一種行之有效的衍生化方法， 從而實(shí)現(xiàn)煙草中的西柏烷二薛醇的精確定量分析。
本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明的利用氣相色譜-質(zhì) 譜聯(lián)用測(cè)定煙草及煙草制品中西柏烷二碎醇的方法依次包括以下步驟
(1)、煙草制品中西柏烷二辟醇類化合物的萃取稱取煙草或煙草制品于 容器中，用一種卣代烴試劑l萃取煙草或煙草制品中的二萜醇類化合物；
(2 )、對(duì)萃取液進(jìn)行濃縮至干；
(3 )、應(yīng)用另一種氯代烴試劑2對(duì)樣品進(jìn)行洗滌，并定容； (4 )、移取步驟(3 )中定容后的溶液O. 5-5ml于一容器里，濃縮至干； (5 )、向該容器中加入一種難揮發(fā)溶劑，該難揮發(fā)溶劑為曱苯、二氯乙烷、 二曱基曱酰胺(DMF)或二曱基亞砜(DMS0)中的任意一種，加入量為步驟(4 ) 中干物質(zhì)的O. 2-l倍，同時(shí)加入與難揮發(fā)溶劑等量的硅烷化試劑，該該硅烷化 試劑為N，O-雙(三曱基硅烷基)三氟乙酰胺(BSTFA)或三曱基氯硅烷(TMCS)， 在30-9(TC的某一溫度下石圭烷化0. 5-5小時(shí)；
(6 )、對(duì)所得樣品進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)i普聯(lián)用分析，
氣相條件為色語(yǔ)柱DB-5MS， 3 Om x 0. 25mm x 2. 5 |a m,程序升溫120 。C (5min), 2 (TC/min升至210°C ，然后0. 5°C/min升至220°C, 10°C/min 升至280 °C。保留30min。
在本發(fā)明中，所述煙草或煙草制品可為煙草碎末、烤煙青煙葉或香料煙青 煙葉。所述萃取過(guò)程可為超聲波萃取，也可為浸泡萃取，或浸蘸萃取。
所述卣代烴試劑l可為包括一個(gè)、二個(gè)或三個(gè)碳原子的一取代或多取代烴 氯代烴，該試劑中內(nèi)含正十七烷醇和蔗糖八乙酸酯的內(nèi)標(biāo)。所述氯代烴試劑2 可為三氯甲烷、也可為曱苯或1，2-二氯乙烷。
在本發(fā)明中，萃取液進(jìn)行濃縮時(shí)可采用減壓濃縮，真空度在5 kPa—500 kPa 之間，溫度控制在20-6(TC之間。在步驟(4)中的濃縮至干過(guò)程是在惰性氣體 保護(hù)下進(jìn)行或在低溫下濃縮至干。
本發(fā)明的突出優(yōu)點(diǎn)在于能夠有效地將煙草中的西柏烷二萜醇首先實(shí)現(xiàn)完 全萃取，再進(jìn)行一種行之有效的衍生化方法，從而實(shí)現(xiàn)煙草中的西柏烷二萜醇 的精確定量分析。本發(fā)明的方法不僅具有可以進(jìn)行萃取分析諸如煙草這樣復(fù)雜 體系的西柏烷二萜醇，并且萃取效率高、操作簡(jiǎn)便、快速。


附圖為本發(fā)明方法的操作流程圖。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明以下將結(jié)合實(shí)施例作進(jìn)一步描述，但并不限制本發(fā)明 實(shí)施例1
a、 稱取過(guò)40目篩的煙草樣品0. 2-0. 5 g于玻璃燒瓶中，加入20-50ml的 二氯曱烷(內(nèi)含16mg/ml正十七烷醇和6mg/ml的蔗糖八乙酸酯的內(nèi)標(biāo))，在常 溫下、超聲波萃取頻率為50KHz和超聲功率350w下超聲10min,冷卻至室溫后， 用裝有5g無(wú)水辟u酸鈉的濾紙濾去煙末。
b、 將所得濾液在10-13kpa下濃縮至干。殘?jiān)萌燃淄槎ㄈ葜?-10ml。 取出1毫升，在惰性氣體保護(hù)下濃縮至干。加入500ul 1 : 1的DMF : BSTFA， 在60-80。C下反應(yīng)0. 5-1. 5小時(shí)。
c、 對(duì)所得樣品進(jìn)行GC-MS分析。 實(shí)施例2
a、 取兩片烤煙青煙葉，在5000ml的玻璃燒杯中加入2000ml的1， 2-二氯 乙烷，(內(nèi)含16mg/ml正十七烷醇和6 mg/ml的蔗糖八乙酸酯)，將煙葉在燒杯 中浸蘸三次，每次六秒種。蘸后溶液用裝有50克無(wú)水硫酸鈉的濾紙過(guò)濾。
b、 將所得濾液在10-13kpa下濃縮至干。殘?jiān)枚葧跬槎ㄈ葜?0ml。 取出1毫升，在惰性氣體保護(hù)下濃縮至干。加入500ul 1 : 1的DMSO : TMCS， 在60-80。C下反應(yīng)0. 5-1. 5小時(shí)。
c、 對(duì)所得樣品進(jìn)行GC-MS分析。 實(shí)施例3
a、 取五片香津+煙青煙葉，在2000ml的玻璃燒杯中加入500ml的三氯曱烷 (內(nèi)含16mg/ml正十七烷醇和6mg/ml的蔗糖八乙酸酯)，將煙葉在燒杯中浸蘸
五次，每次三秒種。蘸后溶液用裝有15克無(wú)水硫酸鈉的濾紙過(guò)濾。
b、 將所得濾液在10-13kpa下濃縮至干。殘?jiān)? ， 2-二氯乙烷定容至1 Oml 。 取出1毫升，在惰性氣體保護(hù)下濃縮至干。加入500ul 1 : 1的DMF : TMCS，在 60-80。C下反應(yīng)0. 5-1. 5小時(shí)。
c、 對(duì)所得樣品進(jìn)行GC-MS分析。
權(quán)利要求
1、一種利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定煙草及煙草制品中西柏烷二萜醇的方法，其特征在于該方法依次包括以下步驟(1)、煙草制品中西柏烷二萜醇類化合物的萃取稱取煙草或煙草制品于容器中，用一種鹵代烴試劑1萃取煙草或煙草制品中的二萜醇類化合物；(2)、對(duì)萃取液進(jìn)行濃縮至干；(3)、應(yīng)用另一種氯代烴試劑2對(duì)樣品進(jìn)行洗滌，并定容；(4)、移取步驟(3)中定容后的溶液0.5-5ml于一容器里，濃縮至干；(5)、向該容器中加入一種難揮發(fā)溶劑，該難揮發(fā)溶劑為甲苯、二氯乙烷、二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基甲酰胺(DMF)中的任意一種，加入量為步驟(4)中干物質(zhì)的0.2-1倍，同時(shí)加入與難揮發(fā)溶劑等量的硅烷化試劑，該硅烷化試劑為N，O-雙(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(BSTFA)或三甲基氯硅烷(TMCS)，在30-90℃的某一溫度下硅烷化0.5-5小時(shí)；(6)、對(duì)所得樣品進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析，氣相條件為色譜柱DB-5MS，30m×0.25mm×2.5μm，程序升溫120℃(5min)，20℃/min升至210℃，然后0.5℃/min升至220℃，10℃/min升至280℃。保留30min。
2 、根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定煙草及煙草制品中西柏烷二萜醇的方法， 其特征在于所述煙草或煙草制品可為煙草碎末、烤煙青煙葉或香料煙青煙葉。
3 、根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定煙草及煙草制品中西柏烷二萜醇的方法， 其特征在于所述萃取過(guò)程可為超聲波萃取，也可為浸泡萃取，或浸蘸萃取。
4 、根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定煙草及煙草制品中的西柏烷二萜醇的方法， 其特征在于卣代烴試劑l可為包括一個(gè)、二個(gè)或三個(gè)碳原子的一取代或多取 代烴氯代烴。
5 、才艮據(jù)外又利要求1所述的測(cè)定煙草及煙草制品中西柏烷二碎醇的方法， 其特征在于萃取液進(jìn)行濃縮時(shí)可釆用減壓濃縮，真空度在5kPa—S00kPa之 間，溫度控制在20-60。C之間。
6 、根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定煙草及煙草制品中西柏烷二碎醇的方法， 其特征在于氯代烴試劑2可為三氯甲烷、也可為二氯曱烷或1,2-二氯乙烷。
7、根據(jù)權(quán)利要求1所述的測(cè)定煙草及煙草制品中西柏烷二碎醇的方法，其 特征在于步驟(4)中的濃縮至干過(guò)程是在惰性氣體保護(hù)下進(jìn)行，或在低溫濃 縮過(guò)程下進(jìn)行。
全文摘要
一種利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定煙草及煙草制品中西柏烷二萜醇的方法，其特征在于包括下述步驟a.首先，取一定重量的煙草制品，加入一定的萃取溶劑鹵代烴類；之后，采用超聲波振蕩萃取出二萜醇類；b.將萃取溶劑在一定條件下蒸發(fā)至干后加入另一種鹵代烴類，溶解定容后取出適量；c.將取出的溶劑在一定條件下蒸干，加入一定體積的另一種難揮發(fā)溶劑和同比例的某種硅衍生化試劑，在一定溫度條件下進(jìn)行衍生化。衍生化完全后直接進(jìn)行色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法測(cè)定其中的西柏烷二萜醇。本發(fā)明的方法相比現(xiàn)有技術(shù)不僅具有可以進(jìn)行萃取分析諸如煙草這樣復(fù)雜體系的西柏烷二萜醇，而且萃取效率高、操作簡(jiǎn)便、快速。
文檔編號(hào)G01N30/02GK101178390SQ20071019309
公開(kāi)日2008年5月14日 申請(qǐng)日期2007年12月12日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月12日
發(fā)明者麗 丁, 劉克建, 謝復(fù)煒, 樂(lè) 趙 申請(qǐng)人:中國(guó)煙草總公司鄭州煙草研究院