專利名稱::一種食品安全檢測裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
:本實(shí)用新型涉及生物檢測裝置,尤其涉及一種用于食品安全的檢測裝置。
背景技術(shù):
:食品的安全性強(qiáng)調(diào)食品中不應(yīng)含有可能損害或威脅人體健康的物質(zhì)或因素。20世紀(jì)80年代以來,由于一系列食品原料的化學(xué)污染、瘋牛病的爆發(fā)、口蹄疫疾病的出現(xiàn)和自然毒素的影響,以及畜牧業(yè)中抗生素的應(yīng)用、基因工程技術(shù)的應(yīng)用,使食品安全成為全世界關(guān)注的問題。食品安全問題主要集中在以下幾個(gè)方面家禽和養(yǎng)殖魚中大量的抗生素等殘留在食品動(dòng)物組織中;不當(dāng)使用飼料添加劑,使其在食品動(dòng)物體內(nèi)殘留;轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品安全性監(jiān)控的問題等。目前在動(dòng)物養(yǎng)殖中使用得比較多的抗生素氯霉素(chloramphenicol,Chloromycetin)(氯胺苯醇)危害很大:1、造成骨髓造血機(jī)能紊亂氯霉素對(duì)骨髓販造血機(jī)能有抑制作用,可引起血小板減少性紫殿、粒細(xì)胞缺乏癥、再生障礙性貧血、溶血性等,多數(shù)在長期或多次用藥的過程中發(fā)生。骨髓的毒性分為兩類一是可逆性抑制。主要影響紅細(xì)胞、血小板和白細(xì)胞的形成。二是再生障礙性貧血。后者雖然少見,但極為嚴(yán)重,與氯霉素的每日用量和總量均無直接關(guān)系。2、對(duì)早產(chǎn)兒和新生兒的毒性在早產(chǎn)兒和新生兒肝內(nèi)有些酶系統(tǒng)發(fā)育尚不完全,葡萄糖醒酸結(jié)合的能力較差,因此影響氯霉素在肝中的解毒過程;此外,腎臟排泄能力亦較弱,能招致藥物蓄積中毒。3、胃腸道癥狀、口部癥狀胃腸道反應(yīng)主要有腹脹、腹瀉、食欲減退惡心、嘔吐則少見??诓堪Y狀如口腔粘膜充血、疼痛、糜爛、口角炎和舌炎等。4、其它不良反應(yīng)可引起視神經(jīng)炎、視力障礙、多發(fā)性神經(jīng)炎、神經(jīng)性耳聾'以及嚴(yán)重失眠。有時(shí)發(fā)生中毒性精神病,主要表現(xiàn)為幻視、幻聽、定向力喪失、精神失常等。對(duì)此,各國都規(guī)定氯霉素在所有食品動(dòng)物的可食用組織中不得檢出。瘦肉精,學(xué)名鹽酸克倫特羅,是一種02-受體激動(dòng)劑,20世紀(jì)80年代初,美國一家公司開始將其添加到飼料中,增加瘦肉率,但如果作為飼料添加劑,使用劑量是人用藥劑量的IO倍以上,才能達(dá)到提高瘦肉率的效果。它用量大、使用的時(shí)間長、代謝慢,所以在屠宰前到上市,在豬體內(nèi)的殘留量都很大。這個(gè)殘留量通過食物進(jìn)入人體,就使人體漸漸地中毒,積蓄中毒。如果一次攝入量過大,就會(huì)產(chǎn)生異常生理反應(yīng)的中毒現(xiàn)象激動(dòng)e—2受體,對(duì)心臟有興奮作用,對(duì)支氣管平滑肌有較強(qiáng)而持久的擴(kuò)張作用;口服后較易經(jīng)胃腸道吸收。因此瘦肉精在各國都被禁用。1983年世界上第一種轉(zhuǎn)基因作物問世,目前全球轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物種植已達(dá)到5000萬公頃以上,大量的轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品已被直接或間接地制成人類的食品,呈迅猛發(fā)展的趨勢。但是轉(zhuǎn)基因植物作為一個(gè)新物種,其對(duì)自然環(huán)境所帶來的潛在危害是不容忽視的,如自然環(huán)境生態(tài)平衡的破壞、原有物種的消亡以及人類的身心健康等。因此對(duì)于轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品安全性監(jiān)控的問題也就成為國際共同關(guān)注的問題。鑒于此,對(duì)上述這些物質(zhì)殘留量的測定便尤為重要。目前,用于食品安全檢測的方法有液相色譜法、氣相色譜法,氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用,液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用等。這些方法雖能準(zhǔn)確定量,但操作過程很繁瑣,例如目前檢測限可達(dá)到0.lppb的色-質(zhì)聯(lián)用方法還需要進(jìn)行衍生化反應(yīng)等;而且這些方法所使用的儀器體積龐大、價(jià)格非常昂貴,使用范圍極其有限。因此目前常用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)進(jìn)行篩選,然后再用色譜或色-質(zhì)聯(lián)用的方法進(jìn)行確證。目前用于轉(zhuǎn)基因檢測的方法主要有兩類1)在核酸水平上進(jìn)行檢測,即通過PCR和Southern雜交的方法檢測基因組DNA中的轉(zhuǎn)基因片段,或用RT-PCR和Northern雜交檢測轉(zhuǎn)基因植物mRNA和反義RNA。2)在蛋白水平上進(jìn)行檢測,包括轉(zhuǎn)基因植物中目的基因表達(dá)蛋白的ELISA方法和檢測表達(dá)蛋白生化活性的生化檢測法。而PCR法檢測轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品是目前應(yīng)用最為廣泛的方法,理論上能用于所有轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測,但易出現(xiàn)假陽性。ELISA的原理是利用免疫學(xué)抗原抗體特異性結(jié)合和酶的高效催化作用,通過化學(xué)方法形成酶耦聯(lián)待測物。將固相載體上已包被的抗體與特異性的抗抗體結(jié)合,然后加入待測物質(zhì)和酶耦聯(lián)待測物,它們競爭性與待測物抗體結(jié)合,洗滌后加底物,根據(jù)有色物的變化計(jì)量待測物的量。若待測物多,則被結(jié)合的酶耦聯(lián)氯霉素少,有色物量就少。用目測法或比色法測定樣品中的待測物含量。可見目前使用的ELISA檢測裝置,檢驗(yàn)人員需要經(jīng)過繁瑣的操作步驟,耗時(shí)多,不同操作者之間的檢驗(yàn)結(jié)果也有較大的誤差;用以判斷結(jié)果的儀器構(gòu)造復(fù)雜,而且價(jià)格貴。因此,本領(lǐng)域迫切需要提供一種能進(jìn)行快速、簡便的食品安全檢測的裝置,它能減少操作步驟、操作時(shí)間和檢驗(yàn)誤差;而且該裝置所需要的測量儀器簡便、多樣。
實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型旨在提供一種食品安全檢測裝置。在本實(shí)用新型的第一方面,提供了一種食品安全檢測裝置,它包括一底板;一電極層,所述的電極層上涂布有第一抗體,并且所述的電極層設(shè)置在底板上,電極層的一端是可插入一測量器的接口;一導(dǎo)流層,設(shè)置在電極層上;一釋放層,所述的釋放層中含有第二抗體,并且所述的釋放層設(shè)置在導(dǎo)流層上,位于電極層接口的近端,所述的第二抗體與第一抗體是不同的。在另一優(yōu)選例中,它還包括一吸水層,在導(dǎo)流層上,位于電極層接口的遠(yuǎn)端;一頂板,在與釋放層對(duì)應(yīng)的位置有一開口;一按鈕,設(shè)置在頂板中,并帶有一釋放槽隨之上下移動(dòng);一釋放針,設(shè)置在底板上,可刺穿釋放槽,使其中的顯色劑流到導(dǎo)流層。在另一優(yōu)選例中所述的釋放針為一高度為卜5毫米,直徑為3-5毫米,頂部為錐體的柱狀物。在另一優(yōu)選例中,所述的釋放針為一高度為1-5毫米,直徑為3-5毫米,頂部為錐體的柱狀物。在另一優(yōu)選例中,所述的柱狀物為圓柱體。'在另一優(yōu)選例中,電極層上涂布的第一抗體選自食品中待測物的抗體、酶標(biāo)記的食品中待測物的抗體或食品中待測物的抗抗體。在另一優(yōu)選例中,釋放層中含有的第二抗體選自食品中待測物的抗體或酶標(biāo)記的食品中待測物的抗體。在另一優(yōu)選例中,釋放層中含有的第二抗體是酶標(biāo)記的食品中待測物的抗體A,電極層上涂布的第一抗體是食品中待測物的抗體B,所述的抗體A和抗體B具有不同的抗原決定族。在另一優(yōu)選例中,釋放層中含有的第二抗體是食品中待測物的抗體A,電極層上涂布的第二抗體是酶標(biāo)記的食品中待測物的抗體B,所述的抗體A和抗體B具有不同的抗原決定族。在另一優(yōu)選例中,電極層上涂布的第一抗體是食品中待測物的抗抗體。在另一優(yōu)選例中,所述的第一、第二抗體是多克隆抗體或單克隆抗體。在另一優(yōu)選例中,所述的食品中的待測物選自氯霉素、鹽酸克侖特羅、BT轉(zhuǎn)基因蛋白。在另一優(yōu)選例中,所述的電極層包括-一銀膠,形成在底板上;一碳膠,形成在銀膠上,使銀膠不被氧化;一絕緣膠,局部形成在該碳膠上;其中,該碳膠未形成有絕緣膠的一端涂布有可與待測物進(jìn)行免疫反應(yīng)的反應(yīng)物,該碳膠未形成有絕緣膠的另一端可插入一測量器。在另一優(yōu)選例中,所述銀膠的長20-50毫米,寬度1-3毫米;所述碳膠的長20-50毫米,寬1.5-3.5毫米;所述絕緣膠長12-32毫米,寬6-18毫米。在另一優(yōu)選例中,所述銀膠的長35-42毫米,寬度1.5-2.5毫米;所述碳膠的長35-42毫米,寬2-3毫米;所述絕緣膠長22-30毫米,寬9-15毫米。在另一優(yōu)選例中,電極層的寬度為6-18毫米,更佳地為9-15毫米。在另一優(yōu)選例中,可插入測量器的電極層一端伸出底板4-8毫米,更佳地為5-7毫米。在另一優(yōu)選例中,將吸水層、釋放層和導(dǎo)流層粘合成導(dǎo)流組件,固定在電極層一端°在另一優(yōu)選例中,所述的導(dǎo)流層用雙面膠固定在電極層上。在另一優(yōu)選例中,用固定片將吸水層、釋放層與導(dǎo)流層粘合,在固定片上定出切'割線,固定片長度為10-25毫米,寬度為6-18毫米。更佳地,固定片長度為15-20毫米,寬度為9-15毫米。固定片上有一開口。在另一優(yōu)選例中,將吸水層、釋放層與導(dǎo)流層組合時(shí),去除自粘貼紙。在另一優(yōu)選例中,所述的釋放槽為底面積5-30平方毫米,高度6-10毫米的空間。在另一優(yōu)選例中,所述的釋放槽為底面積5-30平方毫米,高度6-IO毫米的空間。在另一優(yōu)選例中,所述按鈕開口的面積為5-30平方毫米,按鈕高度為6-10毫米。在另一優(yōu)選例中,所述按鈕開口的面積為5-30平方毫米,按鈕高度為6-10毫米。在另一優(yōu)選例中,所述的按鈕開口的面積為8-12平方毫米,按鈕高度為7.5-9毫米。在另一優(yōu)選例中,所述的按鈕可完全降至底部。在另一優(yōu)選例中,所述食品安全檢測裝置的底板或頂板的橫截面為長方形,其中長20-51毫米,寬10-20毫米。在另一優(yōu)選例中,所述食品安全檢測裝置的底板或頂板的橫截面為長方形,其中長20-51毫米,寬10-20毫米。更佳地長35-42毫米,寬9-15毫米。在另一優(yōu)選例中,所述的底板和頂板能扣合,扣合縫隙高度為0.5-0.9毫米。更佳地為0.6-0.8毫米。在另一優(yōu)選例中,所述頂板上一開口的面積為3-15平方毫米。在另一優(yōu)選例中,所述的頂板上一開口的面積為6-12平方毫米。在本實(shí)用新型的第二方面,提供了一種進(jìn)行多通道食品安全檢測裝置,它含有2-10個(gè)如上所述的食品安全檢測裝置。在另一優(yōu)選例中,所述的多通道食品安全檢測裝置可同時(shí)檢測不同的樣品。所述的樣品包括水產(chǎn)品、牛奶、肝臟、雞蛋、蜜蜂、動(dòng)物的體液樣品等。所述的體液包括血液、膽汁、胰液、胃液、腸液、腦髓液、關(guān)節(jié)腔滑液、唾液、尿液等。所述的動(dòng)物包括哺乳動(dòng)物、家禽等。'據(jù)此,本實(shí)用新型提供了一種能進(jìn)行快速、簡便的食品安全檢測的裝置,它能減少操作步驟、操作時(shí)間和檢驗(yàn)誤差;而且該裝置所需要的測量儀器簡便、多樣。圖1是本實(shí)用新型提供的食品安全檢測裝置側(cè)面圖。圖2是本實(shí)用新型提供的食品安全檢測裝置俯視圖。圖3是本實(shí)用新型提供的食品安全檢測裝置中的電極片。圖4A-1說明本實(shí)用新型第一個(gè)實(shí)施例的制備過程。圖5是本實(shí)用新型提供的食品安全檢測裝置中的電極。圖6顯示了本實(shí)用新型多項(xiàng)式電極的主要組成部分。圖7是本實(shí)用新型多項(xiàng)式電極的俯視圖。圖8是本實(shí)用新型多項(xiàng)式電極側(cè)面立體圖。圖9是本實(shí)用新型提供的食品安全檢測裝置的立體圖。圖10顯示了本實(shí)用新型實(shí)施例7中檢測蜜蜂中的氯霉素時(shí)氯霉素的標(biāo)準(zhǔn)曲線;其中y軸是電流訊號(hào)值。圖11顯示了本實(shí)用新型實(shí)施例8中檢測飼料中的氯霉素時(shí)氯霉素的標(biāo)準(zhǔn)曲線;其中y軸是電流訊號(hào)值。圖12顯示了本實(shí)用新型實(shí)施例9中檢測豬肉中的瘦肉精時(shí)鹽酸克倫特羅的標(biāo)準(zhǔn)曲線;其中y軸是電流訊號(hào)值。圖13顯示了本實(shí)用新型實(shí)施例IO中檢測玉米中的BT轉(zhuǎn)基因蛋白時(shí)BT轉(zhuǎn)基因蛋白的標(biāo)準(zhǔn)曲線;其中y軸是電流訊號(hào)值。具體實(shí)施方式本實(shí)用新型發(fā)明人經(jīng)過廣泛而深入的研究,發(fā)現(xiàn)一種食品安全檢測裝置,它包括吸水層,釋放層,釋放槽,導(dǎo)流層,電極層;電極層上涂布有第一抗體,釋放層中含有第二抗體。電極層上涂布的第一抗體選自待測物抗體、酶標(biāo)待測物抗體或待測物抗抗體;釋放層中含有的第二抗體選自待測物抗體或酶標(biāo)待測物抗體。電極層與導(dǎo)流層接觸,導(dǎo)流層上放置吸水層和釋放層,并固定在電極層一端,電極層的另一端可插入一測量器,以測量所產(chǎn)生的電訊號(hào)大小,而直接得到檢驗(yàn)結(jié)果。》口本文所用,酶聯(lián)免疫吸附測定裝置(ELISA裝置)是指能進(jìn)行抗原抗體結(jié)合,并能進(jìn)行酶促反應(yīng),放出電子的裝置。如本文所用,待測物選自氯霉素、鹽酸克侖特羅、BT轉(zhuǎn)基因蛋白。如本文所用,第一抗體是指涂布在電極層上的抗體,它選自待測物抗體、酶標(biāo)待測物抗體或待測物抗抗體。所述的抗體可以是多克隆抗體,也可以是單克隆抗體??梢允褂帽绢I(lǐng)域熟知的酶標(biāo)記抗體,其中優(yōu)選辣根過氧化物酶(HRP)??梢允褂帽绢I(lǐng)域熟知的抗抗體,如羊抗兔IgG抗體,或山羊抗人IgG抗體等,其中優(yōu)選羊抗兔IgG抗體。如本文所用,第二抗體是釋放層中含有的抗體,它選自待測物抗體或酶標(biāo)待測物抗體。所述的抗體可以是多克隆抗體,也可以是單克隆抗體??梢允褂帽绢I(lǐng)域熟知的酶標(biāo)記抗體,其中優(yōu)選辣根過氧化物酶(冊(cè)P)。本實(shí)用新型提供的食品安全檢測裝置,包含電極和與該電極一端相連接的ELISA裝置。所述的ELISA裝置包括吸水層1、釋放層2、釋放槽6、導(dǎo)流層3和電極層4。吸水層1或釋放層2可以為厚度為0.5-2毫米的片狀物,更佳地厚度為0.8-2毫米。所述的片狀吸水層1或釋放層2的橫截面可以為任意形狀,優(yōu)選方形或圓形,其橫截面的面積為6-60平方毫米,更佳地為20-50平方毫米。所述的吸水層1可以使用本領(lǐng)域熟知的材料制成,其中優(yōu)選的材質(zhì)為棉質(zhì)吸水紙。所述的釋放層2可以使用本領(lǐng)域熟知的材料制成,其中優(yōu)選的材質(zhì)為玻璃纖維。釋放槽6內(nèi)含可進(jìn)行酶促反應(yīng)的顯色劑(如四甲聯(lián)苯胺TMB)。釋放槽6的厚度為6-10毫米,更佳地為7.5-9毫米。釋放槽6的橫截面可以為任意形狀,優(yōu)選圓形或方形,其橫截面的面積為5-15平方毫米,更佳地為8-12平方毫米。導(dǎo)流層3可使通過釋放層的待測物與抗體或酶標(biāo)抗體的混合溶液均勻分布其中。導(dǎo)流層3的厚度為0.3-1.5毫米,更佳地為0.4-1.5毫米。導(dǎo)流層3可以為任意形狀,優(yōu)選方形或圓形,更優(yōu)選方形;其橫截面的面積為60-300平方毫米,更佳地為100-200平方毫米。所述的導(dǎo)流層3可以使用本領(lǐng)域熟知的材料制成,其中優(yōu)選的材質(zhì)為硝化纖維素。所述的電極層4與導(dǎo)流層3接觸,并在與釋放層2對(duì)應(yīng)的部分涂布有可與待測物進(jìn)行免疫反應(yīng)的反應(yīng)物(如待測物抗體、酶標(biāo)待測物抗體或待測物抗抗體)。在一個(gè)優(yōu)選例中,釋放層中含有酶標(biāo)待測物抗體A,電極層上涂布待測物抗體B,其中待測物抗體A和B具有不同的抗原決定族。在一個(gè)優(yōu)選例中,釋放層中含有待測物抗體A,電極層上涂布酶標(biāo)待測物抗體B,其中待測物抗體A和B具有不同的抗原決定族??梢允褂帽绢I(lǐng)域熟知的酶對(duì)待測物或待測物抗體進(jìn)行標(biāo)記,其中優(yōu)選辣根過氧化物酶。在一個(gè)優(yōu)選例中,釋放層中含有待測物抗體,電極層上涂布待測物抗抗體,可以使用本領(lǐng)域熟知的抗抗體,如羊抗兔IgG抗體,或山羊抗人IgG抗體等,其中優(yōu)選羊抗兔IgG抗體。所述的導(dǎo)流層3的一個(gè)表面上放置吸水層1和釋放層2,另一個(gè)表面則固定在電極層4一端,電極層4的另一端可插入一測量器,以測量所產(chǎn)生的電訊號(hào)大小,而直接得到檢驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果的測量方法可參照US6,670,115Bl,簡而言之,通過測定標(biāo)準(zhǔn)品而獲得反應(yīng)物濃度和電流之間的標(biāo)準(zhǔn)曲線,再通過該標(biāo)準(zhǔn)曲線得到所測樣品中待測物的濃度。本實(shí)用新型提供的食品安全檢測裝置中的電極層4包括一銀膠i4、一碳膠15和一絕緣膠16。如圖8所示,在塑料板上以往版印刷方式,依序涂上銀膠M、碳膠15和絕緣膠16。所述的碳膠15形成在銀膠14上,使銀膠14不被氧化;所述的絕緣膠16局部形成在該碳膠15上,其中,該碳膠15未形成有絕緣膠16的一端涂布有可與待測物進(jìn)行免疫反應(yīng)的反應(yīng)物,該碳膠15未形成有絕緣膠16的另一端可插入一測量器。所述的絕緣膠16可用本領(lǐng)域熟知的材料制成。本實(shí)用新型提供的食品安全檢測裝置,還可以包括一底板IO和一頂板11。所述的底板10或頂板11的橫截面為長方形,其中長20-51毫米,寬10-20毫米;更佳地長35-42毫米,寬9-15毫米。所述的底板10和頂板11能扣合,扣合縫隙0.5-0.9毫米,更佳地為0.6-0.8毫米??刹迦霚y量器的電極層4一端伸出底板104-8毫米,更佳地5-7毫米。如圖7所示,底板10上設(shè)置一釋放針5,該釋放針5可刺穿釋放槽,使其中的顯色劑流到導(dǎo)流層3而與其中的酶標(biāo)記物結(jié)合。釋放針5的頂部是尖的,所述的形狀包括針狀體、尖錐體,優(yōu)選一高度為1-4毫米,直徑為3-10毫米,頂部為錐體的柱狀物,所述的柱狀物更優(yōu)選圓柱體。如圖7所示,所述的銀膠14也形成在該底板10上,增加導(dǎo)電性。本實(shí)用新型提供的食品安全檢測裝置的頂板11上有一開口12和一按鈕13。所述的開口12設(shè)置在釋放層之上,由該開口12滴入待測物。開口12的面積為3-15平方fe米,更佳地為6-12平方毫米。開口12可為任意形狀的,優(yōu)選條形、方形和圓形,更優(yōu)選方形。所述的按鈕13設(shè)置在頂板11中,其位置對(duì)應(yīng)于底板上的釋放針5,釋放槽6可隨該按鈕13上下移動(dòng),按下按鈕13可使釋放針5刺破釋放槽6,而將其中的顯色劑放出。按下的按鈕13可置于釋放針5的上部、中部或底部,更優(yōu)選的是所述的按鈕13可完全降至釋放針5的底部。所述按鈕13開口12的面積為3-30平方毫米,按鈕13高度為6-10毫米;優(yōu)選地按鈕13開口12的面積為6-30平方毫米,按鈕13高度為7.5-9毫米。本實(shí)用新型提供的食品安全檢測裝置中的吸水層1、釋放層2與導(dǎo)流層3可粘合成一導(dǎo)流組件,固定在電極層4一端;可以用快檢試劑的背卡將吸水層l、釋放層2與導(dǎo)流層3粘合,并利用自粘標(biāo)簽紙?jiān)诒晨ㄉ隙ǔ銮懈罹€。固定片的長度為10-25毫米,優(yōu)選的長度為15-20毫米??梢詫?dǎo)流層3用雙面膠固定在電極層4上。在另一優(yōu)選例中,將吸水層l、釋放層2與導(dǎo)流層3組合,固定到電極層4上后,去除自粘貼紙。本實(shí)用新型提供的食品安全檢測裝置還可以上述的結(jié)構(gòu)為一結(jié)構(gòu)單元,同時(shí)并聯(lián)2-10個(gè)這樣的結(jié)構(gòu)單元,進(jìn)行平行檢測。本實(shí)用新型的主要優(yōu)點(diǎn)在于1、結(jié)構(gòu)簡單,使操作步驟減少,從而減少操作時(shí)間和檢驗(yàn)誤差;2、該裝置可與多種測量儀器配合使用,且所需要的測量儀器簡便。以下通過特定的使用實(shí)例更進(jìn)一步地說明本實(shí)用新型的結(jié)構(gòu),本領(lǐng)域技術(shù)人員可通過實(shí)施例所揭示的內(nèi)容輕易地了解本實(shí)用新型的其它優(yōu)點(diǎn)與功效。本實(shí)用新型也可通過其它不同的具體實(shí)施例加以施行或應(yīng)用,本說明書中的各項(xiàng)細(xì)節(jié)也可基于不同觀點(diǎn)與應(yīng)用,在不背離本實(shí)用新型的精神下進(jìn)行各種修飾與變更。實(shí)施例1食品安全檢測裝置I依以下步驟裝配一本實(shí)用新型所提供的食品安全檢測裝置I一氯霉素測定裝置I:'1、如圖6所示,以往版印刷方式,依序涂上銀膠14、碳膠15,再貼上絕緣膠16,組成電極片18。圖6中四角圓直徑0.8毫米,兩邊六個(gè)半圓直徑2毫米。2、在電極片18上貼上AE100(材質(zhì)為Nitrocellulose,作為導(dǎo)流層3),并對(duì)齊電極片18上緣(見圖7A)。3、將釋放層2(所述的釋放層中含有酶標(biāo)氯霉素抗體(如辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的氯霉素抗體),購自捷門保林邁)與吸水層1切割成5毫米的長條(見圖7B);固定片上有一開口19,開口的大小與頂板上的開口12相仿;將吸水層1依圖7B所示位置黏貼于固定片17上;將釋放層2依圖7C所示位置黏貼于固定片17上,固定片上的開口19被釋放層2完全遮住,黏貼完成的固定片的背面如圖7D所示,其正面如圖7E所示。(固定片的作用是固定釋放層與吸水層的位置)4、沿切割線將單一固定片組171切下,完成的固定片組171背面如圖7F所示。5、將牛血清白蛋白(BSA)與氯霉素的耦聯(lián)物均勻后涂布在電極層4的碳膠15上(該電極成為工作電極,另一個(gè)作為參考電極),然后,將其置入除濕箱進(jìn)行干燥固定。6、將貼有AEIOO、涂布有牛血清白蛋白(BSA)與氯霉素的耦聯(lián)物的電極片18放在底板IO上(見圖7G),再將固定片組171放在電極片18上,貼有釋放層2和吸水層1的面朝下(見圖7H)。7、將顯色劑TMB存放在釋放槽6中。8、蓋上頂板ll,頂板上的開口12正對(duì)著固定片17上的開口19(見圖71)。所用的固定片17和電極片18在使用前將覆蓋于電極上方,可避免電極刮傷的紙質(zhì)保護(hù)膜撕去。實(shí)施例2食品安全檢測裝置II如實(shí)施例i所述的步驟裝配一食品安全檢測裝置n—氯霉素測定裝置n,其中釋放層2中含有酶標(biāo)氯霉素(如辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的氯霉素(購自捷門保林邁);均勻涂布在電極層4的碳膠15上的是氯霉素抗體購自捷門保林邁)。實(shí)施例3'食品安全檢測裝置III如實(shí)施例1所述的步驟裝配一食品安全檢測裝置III一氯霉素測定裝置工II,其中釋放層2中含有氯霉素抗體;均勻涂布在電極層4的碳膠15上的是氯霉素抗抗體(羊抗兔IgG抗體,購自捷門保林邁)。實(shí)施例4食品安全檢測裝置IV如實(shí)施例1所述的步驟裝配一食品安全檢測裝置IV—鹽酸克倫特羅測定裝置I,其中釋放層2中含有酶標(biāo)鹽酸克倫特羅抗體(如辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鹽酸克倫特羅抗體,購自捷門保林邁);均勻地涂布電極片18上的是牛血清白蛋白(BSA)與鹽酸克倫特羅的耦聯(lián)物。實(shí)施例5食品安全檢測裝置V如實(shí)施例1所述的步驟裝配一食品安全檢測裝置V—鹽酸克倫特羅測定裝置III,其中釋放層2中含有鹽酸克倫特羅抗體;均勻涂布在電極層4的碳膠15上的是鹽酸克倫特羅抗抗體(羊抗兔IgG抗體,購自捷門保林邁)。實(shí)施例6食品安全檢測裝置VI如實(shí)施例1所述的步驟裝配一食品安全檢測裝置VI—BT轉(zhuǎn)基因蛋白測定裝置I,其中釋放層2中含有酶標(biāo)BT轉(zhuǎn)基因蛋白抗體(如辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的BT轉(zhuǎn)基因蛋白抗體),購自捷門保林邁);均勻地涂布在電極層4的碳膠15上的是BT轉(zhuǎn)基因蛋白抗體'(該抗體'與釋放層中的酶標(biāo)BT轉(zhuǎn)基因蛋白抗體具有不同的抗原決定簇,購自捷門保林邁),電極片18上涂布有BT轉(zhuǎn)基因蛋白抗體'。測試實(shí)施例7檢測蜂蜜中的氯霉素一、樣品處理a.稱取2g蜂蜜加入4ml蒸餾水溶解均勻;b.加入4ml乙酸乙酯后,上下振蕩10分鐘;'c.3000g離心15分鐘;d.取上層清液(乙酸乙酯層)lral,5(TC蒸千;e.蒸干殘留物中加入500nl蒸餾水混合,溶解。取lOOy1作為待測物。二、樣品測定將氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品(濃度為0卯b(ng/ml),0.05卯b,0.3卯b,l卯b,3卯b,和10卯b,購自捷門保林邁)或待測物分別重復(fù)下述步驟a-c的過程a.將氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品或待測物由實(shí)施例1制得的氯霉素測定裝置I的頂板11上的開口12滴入到含有酶標(biāo)氯霉素抗體(辣根過氧化物酶(服P)標(biāo)記的氯霉素抗體)的釋放層2中。加在釋放層2內(nèi)的酶標(biāo)抗體可與通過釋放層2的氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品或待測物結(jié)合,并過濾掉其它不需檢測的物質(zhì)。b.由釋放層2過濾后的酶標(biāo)抗體及酶標(biāo)抗體和抗原結(jié)合物流入導(dǎo)流層3,未與抗原結(jié)合的酶標(biāo)抗體被在工作電極上的BSA與氯霉素耦聯(lián)物捕捉,其余的酶標(biāo)抗體由導(dǎo)流層3流至吸水層1。c.按下按鈕13,使釋放槽6向釋放針5移動(dòng),由釋放針5刺穿釋放槽6,而使釋放槽6中的顯色劑(如TMB)與酶標(biāo)氯霉素抗體結(jié)合,并使酶標(biāo)氯霉素抗體中的HRPO釋放出電子。釋放出電子將使插入測量器的碳膠15的兩端產(chǎn)生很大的電動(dòng)勢(potential),從而測量器測得足夠大的電流訊號(hào),得到不同濃度的氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品或待測物測得的相應(yīng)數(shù)值。三、檢測結(jié)果a.根據(jù)氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品測得的數(shù)值作出標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖IO所示-表l氯霉素(CAP)檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線(檢測范圍0.05ng-10ng/ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>b.根據(jù)圖10的標(biāo)準(zhǔn)曲線及由待測物得到的電流訊號(hào)數(shù)值1346測得待測物中氯霉素的含量為3.8ng/mL。測試實(shí)施例8檢測飼料樣品中的氯霉素一、樣品處理a.稱取2g粉碎過的飼料樣品,加入4ml的乙酸乙酯;'b.充分振蕩混合1分鐘,然后3000g離心10分鐘;c.取2ml上層清液(乙酸乙酯層),50°C,氮?dú)獯蹈?;d.蒸干殘留物中加入lml異辛垸/氯仿(v/v二2:3)混合溶液,溶解充分;e.再加入lml蒸餾水,振蕩混合一分鐘,然后3000g離心IO分鐘。取lOOu1上層水相作為待測物。二、樣品測定將氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品(濃度為Oppb(ng/ml),0.05卯b,0.3卯b,l卯b,3卯b,和10卯b,購自捷門保林邁)和酶標(biāo)記氯霉素(辣根過氧化物酶(冊(cè)P)標(biāo)記的氯霉素,購自捷門保林邁)的混合物分別重復(fù)下述步驟a-c的過程a.將混合物由實(shí)施例3制得的氯霉素測定裝置III的頂板11上的開口12滴入到含有氯霉素抗體的釋放層2中。加在釋放層2內(nèi)的抗體可與通過釋放層2的氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品或酶標(biāo)記氯霉素結(jié)合。b.由釋放層2過濾后的抗體和抗原或酶標(biāo)記抗原結(jié)合物流入導(dǎo)流層3,并被涂布在工作電極上的氯霉素抗抗體捕捉,而未結(jié)合的抗體由導(dǎo)流層3流至吸水層1。c.按下按鈕13,使釋放槽6向釋放針5移動(dòng),由釋放針5刺穿釋放槽6,而使釋放槽6中的顯色劑(如TMB)與酶標(biāo)氯霉素結(jié)合,并使酶標(biāo)氯霉素中的服PO釋放出電子。釋放出電子將使插入測量器的碳膠15的兩端產(chǎn)生很大的電動(dòng)勢(potential),從而測量器測得足夠大的電流訊號(hào),得到不同濃度的氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品測得的相應(yīng)數(shù)值。d.將待測物(含或不含游離氯霉素)和酶標(biāo)記氯霉素(辣根過氧化物酶(服P)標(biāo)記的氯霉素,購自捷門保林邁)的混合物分別重復(fù)上述述步驟a-c的過程,得到待測物測得的相應(yīng)數(shù)值。三、檢測結(jié)果a.當(dāng)氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品的濃度升高,競爭結(jié)合氯霉素抗體的酶標(biāo)記氯霉素就減少,酶標(biāo)氯霉素中的服PO所釋放的電子也減少,兩者呈反比;a.根據(jù)氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品測得的數(shù)值如表2和圖ll所示;表2氯霉素(CAP)檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線(檢測范圍0.05ng-10ng/ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>b.根據(jù)表2和圖11的標(biāo)準(zhǔn)曲線及由待測物得到的電流訊號(hào)數(shù)值1342測得待j蜂蜜中氯霉素的含量為4.4ng/mL。測試實(shí)施例9檢測豬肉中的瘦肉精一、樣品處理a.將豬肉樣本4g剪碎,裝入5mL的離心管中,蓋緊管蓋。b.90攝氏度以上水浴鍋中加熱IO分鐘,取出冷卻至室溫。c.吸取100pL煮出的樣品滲出液到1.5mL的離心管中加入lOOpL的展開液,混勻。二、樣品測定將鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品(濃度為Oppb(ng/ml),lppb,5ppb,10卯b,25ppb,和50卯b)或待測物分別重復(fù)下述步驟a-c的過程a.將鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品或待測物由實(shí)施例4制得的鹽酸克倫特羅測定裝置I的頂板ll上的開口12滴入到含有酶標(biāo)鹽酸克倫特羅抗體(辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鹽酸克倫特羅抗體)的釋放層2中。加在釋放層2內(nèi)的酶標(biāo)抗體可與通過釋放層2的鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品或待測物結(jié)合,并過濾掉其它不需檢測的物質(zhì)。b.由釋放層2過濾后的酶標(biāo)抗體和抗原結(jié)合物流入導(dǎo)流層3,并被涂布在工作電極上的鹽酸克倫特羅抗體'捕捉,而未結(jié)合的酶標(biāo)抗體由導(dǎo)流層3流至吸水層1。c.按下按鈕13,使釋放槽6向釋放針5移動(dòng),由釋放針5刺穿釋放槽6,而使釋放槽6中的顯色劑(如TMB)與酶標(biāo)鹽酸克倫特羅抗體結(jié)合,并使酶標(biāo)鹽酸克倫特羅抗體中的HRPO釋放出電子。釋放出電子將使插入測量器的碳膠15的兩端產(chǎn)生很大的電動(dòng)勢(potential),從而測量器測得足夠大的電流訊號(hào),得到不同濃度的鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品或待測物測得的相應(yīng)數(shù)值。三、檢測結(jié)果a.根據(jù)瘦肉精標(biāo)準(zhǔn)品測得的數(shù)值如圖12所示表3瘦肉精(CLB)檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線(檢測范圍lng-50ng/ml)CLB濃度(ng/ml)015102550OD值153015231406128611251005b.根據(jù)如圖12的標(biāo)準(zhǔn)曲線及由待測物得到的電流訊號(hào)數(shù)值1437測得待測蜂蜜中鹽酸克倫特羅的含量為4.9ng/mL。,測試實(shí)施例10'檢測玉米中的BT轉(zhuǎn)基因蛋白一、樣品處理a.將待測樣品粉碎,每O.lg樣品加入lml樣品抽提液,充分混合并持續(xù)振蕩1分鐘,靜置。取上清液作為待測液。二、樣品測定將BT轉(zhuǎn)基因蛋白標(biāo)準(zhǔn)品(濃度為0卯b(ng/ml),7.5卯b,15ppb,31卯b,62卯b,125ppb和250ppb)或待測物分別重復(fù)下述步驟a-c的過程a.將BT轉(zhuǎn)基因蛋白標(biāo)準(zhǔn)品或待測物由實(shí)施例7制得的BT轉(zhuǎn)基因蛋白測定裝置I的頂板11上的開口12滴入到含有酶標(biāo)BT轉(zhuǎn)基因蛋白抗體(辣根過氧化物酶(服P)標(biāo)記的BT轉(zhuǎn)基因蛋白抗體)的釋放層2中。加在釋放層2內(nèi)的酶標(biāo)抗體可與通過釋放層2的BT轉(zhuǎn)基因蛋白標(biāo)準(zhǔn)品或待測物結(jié)合,并過濾掉其它不需檢測的物質(zhì)。b.由釋放層2過濾后的酶標(biāo)抗體和抗原結(jié)合物流入導(dǎo)流層3,并被涂布在工作電極上的BT轉(zhuǎn)基因蛋白抗體'捕捉,而未結(jié)合的酶標(biāo)抗體由導(dǎo)流層3流至吸水層1。c.按下按鈕13,使釋放槽6向釋放針5移動(dòng),由釋放針5刺穿釋放槽6,而使釋放槽6中的顯色劑(如TMB)與酶標(biāo)BT轉(zhuǎn)基因蛋白抗體結(jié)合,并使酶標(biāo)BT轉(zhuǎn)基因蛋白抗體中的HRP0釋放出電子。釋放出電子將使插入測量器的碳膠15的兩端產(chǎn)生很大的電動(dòng)勢(potential),從而測量器測得足夠大的電流訊號(hào),得到不同濃度的BT轉(zhuǎn)基因蛋白標(biāo)準(zhǔn)品或待測物測得的相應(yīng)數(shù)值。三、檢測結(jié)果a.根據(jù)BT轉(zhuǎn)基因蛋白標(biāo)準(zhǔn)品測得的數(shù)值如表4和圖13所示;表4BT轉(zhuǎn)基因蛋白檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線(檢測范圍7.5ng-250ng/ml)BT濃度(ng/ml)07.5153162125250OD值3543684054605527241036b.根據(jù)如圖13的標(biāo)準(zhǔn)曲線及由待測物得到的電流訊號(hào)數(shù)值420測得待測蜂蜜中BT轉(zhuǎn)基因蛋白的含量為19ng/mL。實(shí)施例11多項(xiàng)式電極本實(shí)施例中,提供了多項(xiàng)式電極,它含有并聯(lián)的5個(gè)電極4,及覆蓋于上的導(dǎo)流層3,導(dǎo)流層3上覆蓋有吸水層1和釋放層2。見圖8-10。三個(gè)工作電極41上都涂'布有氯霉素抗體',而釋放層上含有酶標(biāo)氯霉素抗體(如辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的氯霉素抗體,該酶標(biāo)氯霉素抗體與電極層中的抗體'具有不同的抗原決定簇)。在釋放層上分別滴加不同的檢測樣品(如血液、尿液、牛奶、蜂蜜等)時(shí),樣品中的氯霉素會(huì)與釋放層中的酶標(biāo)氯霉素抗體結(jié)合,分別形成復(fù)合物;經(jīng)由釋放層的導(dǎo)引流向三個(gè)電極41上獨(dú)立的導(dǎo)流層,復(fù)合物被三個(gè)電極41上涂布的氯霉素抗體'捕捉;當(dāng)顯色劑(如TMB)與酶標(biāo)氯霉素抗體結(jié)合,并使酶標(biāo)氯霉素抗體中的HRPO釋放出電子后,測量器便能測得足夠大的電流訊號(hào)。由此同時(shí)完成了對(duì)不同樣品中的氯霉素的同時(shí)檢測。以上實(shí)施并非用以限定本實(shí)用新型的實(shí)質(zhì)技術(shù)內(nèi)容范圍,本實(shí)用新型的實(shí)質(zhì)技術(shù)內(nèi)容是廣義地定義于申請(qǐng)的權(quán)利要求范圍中,任何他人完成的技術(shù)實(shí)體或方法,若是與申請(qǐng)的權(quán)利要求范圍所定義的完全相同,也或是一種等效的變更,均將被視為涵蓋于該權(quán)利要求范圍之中。權(quán)利要求1.一種食品安全檢測裝置,其特征在于,它包括一底板;一電極層,所述的電極層上涂布有第一抗體,并且所述的電極層設(shè)置在底板上,電極層的一端是可插入一測量器的接口;一導(dǎo)流層,設(shè)置在電極層上;一釋放層,所述的釋放層中含有第二抗體,并且所述的釋放層設(shè)置在導(dǎo)流層上,位于電極層接口的近端,所述的第二抗體與第一抗體是不同的。2.如權(quán)利要求1所述的裝置,其特征在于,它還包括一吸水層,在導(dǎo)流層上,位于電極層接口的遠(yuǎn)端;一頂板,在與釋放層對(duì)應(yīng)的位置有一開口;一按鈕,設(shè)置在頂板中,并帶有一釋放槽隨之上下移動(dòng);一釋放針,設(shè)置在底板上,可刺穿釋放槽,使其中的顯色劑流到導(dǎo)流層。3.如權(quán)利要求1所述的裝置,其特征在于,電極層上涂布的第一抗體選自食品中待測物的抗體、酶標(biāo)記的食品中待測物的抗體或食品中待測物的抗抗體。4.如權(quán)利要求1所述的裝置,其特征在于,釋放層中含有的第二抗體選自食品中待測物的抗體或酶標(biāo)記的食品中待測物的抗體。5.如權(quán)利要求1所述的裝置,其特征在于,釋放層中含有的第二抗體是酶標(biāo)記的食品中待測物的抗體A,電極層上涂布的第一抗體是食品中待測物的抗體B,所述的抗體A和抗體B具有不同的抗原決定族。6.如權(quán)利要求1所述的裝置,其特征在于,釋放層中含有的第二抗體是食品中待測物的抗體A,電極層上涂布的第二抗體是酶標(biāo)記的食品中待測物的抗體B,所述的抗體A和抗體B具有不同的抗原決定族。7.如權(quán)利要求1所述的裝置,其特征在于,電極層上涂布的第一抗體是食品中待測物的抗抗體。8.如權(quán)利要求3—7任一所述的裝置,其特征在于,所述的食品中的待測物選自氯霉素、鹽酸克侖特羅、BT轉(zhuǎn)基因蛋白。9.如權(quán)利要求1所述的裝置,其特征在于,所述的電極層包括一銀膠,形成在底板上;一碳膠,形成在銀膠上,使銀膠不被氧化;一絕緣膠,局部形成在該碳膠上;其中,該碳膠未形成有絕緣膠的一端涂布有可與待測物進(jìn)行免疫反應(yīng)的反應(yīng)物,該碳膠未形成有絕緣膠的另一端可插入一測量器。IO.—種進(jìn)行多通道食品安全檢測裝置,其特征在于,含有2-10個(gè)如權(quán)利要求1所述的食品安全檢測裝置。專利摘要本實(shí)用新型提供了一種食品安全檢測裝置,它包括一釋放層,含有第二抗體,可與通過這一釋放層的待測物混合;一釋放槽,內(nèi)含可與抗體或抗原上連接的酶結(jié)合的顯色劑;一導(dǎo)流層,使通過過濾層的待測物與第二抗體的混合溶液均勻分布其中;一電極層,涂布有第一抗體,設(shè)置在該食品安全檢測裝置的一個(gè)底板上,另一面與導(dǎo)流層接觸;所述的導(dǎo)流層上可放置吸水材料和釋放層,并固定在電極層一端,電極層的另一端可插入一測量器。所述的裝置結(jié)構(gòu)簡單,可使操作步驟減少,節(jié)約測定時(shí)間。該裝置能與多種簡便的測量儀器聯(lián)用。文檔編號(hào)G01N27/403GK201122160SQ20072007683公開日2008年9月24日申請(qǐng)日期2007年10月31日優(yōu)先權(quán)日2007年10月31日發(fā)明者王慧玲,翁祖增,鄧開宗申請(qǐng)人:上海芯寶生物科技有限公司