專利名稱：鹽酸頭孢吡肟原料及其制劑中n-甲基吡咯烷的含量的測定方法
技術領域：
本發(fā)明涉及鹽酸頭孢吡躬原料及其制劑的質量檢測定方法。
技術背景N-甲基吡咯烷既是鹽酸頭孢吡肟合成過程原料又是其降解產(chǎn)物。目前，中 國藥典2005版暫時未收載頭孢吡肟及其制劑。其它品種也暫無N-甲基吡咯垸的 測定。國外藥典目前只有USP.26, JPXIV收載，均以鍵合磺酸基的硅膠柱為分 析柱的高效液相色譜法，使用該方法測定時，色譜系統(tǒng)很難平衡且測定時間長 (檢測一個樣品約兩小時)，保留時間重現(xiàn)性差，基線漂移明顯，柱壽命短。中 國新藥雜志2004年第13巻第8期中"鹽酸頭孢吡肟中N-甲基吡咯垸測定方法 的比較"中報導"受主藥鹽酸頭孢的影響，供試品溶液中N-甲基吡咯烷峰峰型 差，保留時間漂移較大，與對照品溶液中N-甲基吡咯垸峰的保留時間相差常超 過10%以上"，"費時， 一次進樣需2h"，而國內有文獻資料報導用氣相色譜法 測定其含量，但由于N-甲基吡咯烷既是合成的原料又是頭孢吡肟的降解產(chǎn)物， 且鹽酸頭孢吡肟為酸性物質，N-甲基吡咯烷為堿性物質，兩者共存時部分N-甲 基吡咯垸被中和成鹽，成鹽的N-甲基吡咯烷無法直接氣化等特性，使采用氣相 色譜法測定鹽酸頭孢吡肟中N-甲基吡咯烷變得復雜。若采用直接進樣，氣化時 的高溫會使鹽酸頭孢吡肟降解，而成鹽的N-甲基吡咯垸不能氣化，從而影響測 定結果；若采用有機溶劑萃取， 一方面樣品不溶解會包裹N-甲基吡咯垸，另一 方面鹽酸頭孢吡肟是酸性，在酸性條件下成鹽的N-甲基吡咯垸萃取不完全，因 此，有機溶劑萃取法也不能準確測定鹽酸頭孢吡肟中N-甲基吡咯垸的含量。目 前采用氣相色譜法并不能準確測得鹽酸頭孢吡肟中微量N-甲基吡咯烷雜質的含發(fā)明內容本發(fā)明的目的是提供一種鹽酸頭孢吡肟原料及其制劑中N-甲基吡咯垸的含 量的測定方法，它是提供一種以羧酸型陽離子柱為分析柱，以電導檢測器進行檢測的液相色譜法測定鹽酸頭孢吡肟原料與制劑中N-甲基吡咯烷的含量的方法。本發(fā)明目的可以通過如下措施來實現(xiàn)鹽酸頭孢吡肟原料及其制劑中N-甲基吡咯烷的含量的測定方法，本發(fā)明是 以羧酸型陽離子柱為分析柱，以電導檢測器進行檢測的一種液相色譜法流動相的配制0.001mol/L至0.05mol/L的硝酸溶液、O.OOlmol/L至 0.005mol/L硫酸溶液或者是O.Olmol/L至O.lmol/L甲基磺酸，配合乙腈、甲醇 或者是1%至10%丙酮，其酸與有機溶劑比值是90至100: IO至O;供試品溶液的制備取鹽酸頭孢吡肟原料或者是制劑適量，加稀釋劑稀釋 至每1ml中含lmg至10mg的溶液；對照品溶液的制備取N-甲基吡咯烷對照品，加稀釋劑稀釋至每lml中含 O.lmg至lmg的溶液；測定法取供試品溶液10至30ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，另取對照 品溶液10至30ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法計算出供試品中N-甲基吡咯烷的含量。以上所述羧酸型陽離子柱為鍵合羧酸基的硅膠柱，或者是以填料為乙基乙 烯基苯與55%的二乙烯基苯交聯(lián)的羧酸型陽離子柱，或者丙烯酸型羧酸陽離子柱。本發(fā)明所指羧酸型陽離子杵為鍵合羧酸基的硅膠柱。 以上本發(fā)明所述羧酸型陽離子柱的柱溫是10°C 50°C。 本發(fā)明所述的羧酸型陽離子柱的柱溫是35°C。本發(fā)明所述的常選用的流動相0.01mol硝酸溶液-乙腈，其比值是99: 1。 以上本發(fā)明所述的稀釋劑是流動相、水、0.001 0.05mol/L硝酸溶液、0.001 0.005mol/L硫酸溶液或者是0.01 0.1moVL甲基磺酸。 本發(fā)明所述的稀釋劑是0. Olmol硝酸溶液。 以上本發(fā)明所述的供試品溶液是每lml中含頭孢吡肟5mg。以上本發(fā)明所述的對照品溶液每lml中含N-甲基吡咯垸O. 5mg。 以上本發(fā)明所述的測定法中，取供試品溶液20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，另取對照品溶液20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法計算出供試品中N-甲基吡咯垸的含量。本發(fā)明相比現(xiàn)有技術具有如下優(yōu)點用以羧酸型陽離子柱為分析柱的填充劑的液相色譜法測定N-甲基吡咯烷的含量，在國內外為首創(chuàng)，色譜系統(tǒng)易于平衡，樣品測定時間短(檢測一個樣品約30分鐘)，保留時間重復性好，基線平穩(wěn)，柱耐用，N-甲基吡咯烷的色譜峰的質量好、重復性好，測定方法準確、方便、可靠。


圖1: N-甲基吡咯烷對照品圖譜(6. 1010.2X0 METROSEP C 2羧酸基陽離子柱)；圖2:注射用鹽酸頭孢吡肟中N-甲基吡咯烷的含量測定圖譜(6.1010.2X0 METROSEP C 2羧酸基陽離子柱)；圖3: N-甲基吡咯垸對照品圖譜(Ionpac csl6羧酸陽離子柱)； 圖4:注射用鹽酸頭孢吡肟中N-甲基吡咯烷的含量測定圖譜(Io叩ac csl6 羧酸陽離子柱)。
具體實施方式
下面列舉實施例，對本發(fā)明加以進一步說明。 實施例11、 儀器日本島津LC-10A高效液相色譜儀，包括LC-IOAT泵，CDD-10A電導 檢測器，CT0-10A柱溫相，HW-2000工作站，色譜柱6. 1010. 2X0 METROSEP C 2。2、 試劑乙腈Tidea公司，色譜純，批號AS-1122硝酸廣州化學試劑廠，分析純，批號20060512 水超純水3、 N-甲基吡咯烷含量測定方法液相色譜條件與系統(tǒng)適應性照中國藥典高效液相色譜法試驗，以鍵合羧酸基的硅膠柱為分析柱，0. Olmol/L硝酸溶液一乙腈(99: 1)為流動相，柱溫 35°C。取對照品溶液數(shù)次進樣，其相對標準差(RSD)不得過5.0%。供試品溶液的制備精密稱取本品適量，加0. Olmol/L硝酸溶液制成每lml 含相當于頭孢吡肟約5mg的溶液，作為供試品溶液。對照品溶液的制備精密稱取N-甲基吡咯烷對照品，加水制成每lml中含 0.5mg的溶液，精密量取此溶液5ml，加0. 01raol/L硝酸溶液稀釋成100ml，搖 勻，作為對照品溶液。測定法準確量取上述兩種溶液各20ul，分別注入液相色譜儀，并記錄色 譜圖。供試品溶液的色譜圖(見圖2，峰a是N-甲基吡咯垸峰，峰b是精氨酸峰， 峰c是頭孢吡肟峰)中如出現(xiàn)與對照品溶液色譜圖(見圖l，峰a是N-甲基吡 咯烷峰)相應的N-甲基吡咯烷色譜峰，按外標法測定其含量。實例2同實施例1，只是流動相是0.001mol/L硫酸溶液-乙睛(95: 5)，柱溫10°C, 供試品溶液每lml中含lmg鹽酸頭孢吡肟原料或者是制劑的溶液。對照品溶液 每lml中含N-甲基吡咯烷對照品0. lmg的溶液。稀釋劑是0. 001mol/L硫酸溶液。 測定法中，供試品溶液以及對照品溶液均取30ul分別注入液相色譜儀，均記錄 色譜圖。實施例3同實施例1，只是流動相是0. 05mol/L硝酸溶液-甲醇(90: 10)，柱溫50°C， 供試品溶液每lml中含10mg鹽酸頭孢吡肟原料或者是制劑的溶液。對照品溶液 每lml中含N-甲基吡咯烷對照品lmg的溶液。稀釋劑是0. 05mol/L硝酸溶液。 測定法中，供試品溶液以及對照品溶液均取10ul分別注入液相色譜儀，均記錄 色譜圖。實施例41、儀器戴安ICS90型離子色譜儀，色譜柱Ionpac csl2、 試劑乙腈Tidea公司，色譜純，批號AS-1202硝酸廣州化學試劑廠，分析純，批號20060810 水超純水3、 N-甲基吡咯垸含量測定方法液相色譜條件與系統(tǒng)適應性以填料為乙基乙烯基苯與55%的二乙烯基苯交聯(lián)，與親水的羧酸基團鍵合的多孔樹脂為分析柱，0.01mol/L硝酸溶液一乙腈 (99: 1)為流動相，柱溫35'C。取對照品溶液數(shù)次進樣，其相對標準差(RSD) 不得過5. 0%。供試品溶液的制備精密稱取本品適量，加0. 01mol/L硝酸溶液制成每lml 含相當于頭孢吡肟約5mg的溶液，作為供試品溶液。對照品溶液的制備精密稱取N-甲基吡咯烷對照品，加水制成每lml中含 0.5mg的溶液，精密量取此溶液5ml，加0. 01mol/L硝酸溶液稀釋成100ml，搖 勻，作為對照品溶液。測定法準確量取上述兩種溶液各20ul，分別注入液相色譜儀，并記錄色 譜圖。供試品溶液的色譜圖(見圖4，峰a是N-甲基吡咯烷峰，峰b是精氨酸峰， 峰c是頭孢吡肟峰)中如出現(xiàn)與對照品溶液色譜圖(見圖3，峰a是N-甲基吡 咯垸峰)相應的N-甲基吡咯垸色譜峰，按外標法測定其含量。實施例5同實施例4，只是硝酸溶液是0. 001mol/L硝酸溶液。 實施例6同實施例4，只是流動相是0. 005mol/L硫酸溶液-丙酮(95: 5)，柱溫10 。C，供試品溶液每lml中含10mg頭孢吡肟的溶液。對照品溶液每lml中含N-甲 基吡咯垸對照品lmg的溶液。稀釋劑是0.005mol/L硫酸溶液。測定法中，供試 品溶液以及對照品溶液均取15ul分別注入液相色譜儀，均記錄色譜圖。實施例7同實施例4，只是流動相是0. 01mol/L硝酸溶液-甲醇(90: 10)，柱溫50°C，供試品溶液每lml中含10g鹽酸頭孢吡肟原料或者是制劑的溶液。對照品溶 液每lml中含N-甲基吡咯烷對照品0. 6mg的溶液。稀釋劑是0. Olmol/L硫酸溶 液。測定法中，供試品溶液以及對照品溶液均取25ul分別注入液相色譜儀，均 記錄色譜圖。 實施例8同實施例4，只是流動相是0.03mol/L硝酸溶液。稀釋劑是水。 實施例9同實施例4，只是流動相和稀釋劑均是0. 05mol/L甲基磺酸溶液。
權利要求
1、鹽酸頭孢吡肟原料及其制劑中N-甲基吡咯烷的含量的測定方法，其特征是以羧酸型陽離子柱為分析柱，以電導檢測器進行檢測的一種液相色譜法流動相的配制0.001mol/L至0.05mol/L的硝酸溶液、0.001mol/L至0.005mol/L硫酸溶液或者是0.01mol/L至0.1mol/L甲基磺酸，配合乙腈、甲醇或者是丙酮，其酸與有機溶劑比值是90至100∶10至0；供試品溶液的制備取鹽酸頭孢吡肟原料或者是制劑適量，加稀釋劑稀釋至每1ml中含1mg至10mg的溶液；對照品溶液的制備取N-甲基吡咯烷對照品，加稀釋劑稀釋至每1ml中含0.1mg至1mg的溶液；測定法取供試品溶液10至30ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，另取對照品溶液10至30ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法計算出供試品中N-甲基吡咯烷的含量。
2、 根據(jù)權利要求1所述的鹽酸頭孢吡肟原料及其制劑中N-甲基吡咯烷的含 量的測定方法，其特征是所述羧酸型陽離子柱為鍵合羧酸基的硅膠柱，或者是 以填料為乙基乙烯基苯與二乙烯基苯交聯(lián)的羧酸型陽離子柱，或者丙烯酸型羧 酸陽離子柱。
3、 根據(jù)權利要求2所述的鹽酸頭孢吡肟原料及其制劑中N-甲基吡咯烷的含 量的測定方法，其特征是羧酸型陽離子柱為鍵合羧酸基的硅膠柱。
4、 根據(jù)權利要求1或2所述的鹽酸頭孢吡肟原料及其制劑中N-甲基吡咯垸 的含量的測定方法，其特征是羧酸型陽離子柱的柱溫是10°C 50°C。
5、 根據(jù)權利要求3所述的鹽酸頭孢吡肟原料及其制劑中N-甲基吡咯烷的含 量的測定方法，其特征是羧酸型陽離子柱的柱溫是35。C。
6、 根據(jù)權利要求1所述的鹽酸頭孢吡肟原料及其制劑中N-甲基吡咯烷的含量測定方法，其特征是流動相0.01mol硝酸溶液-乙腈，其比值是99: 1。
7、 根據(jù)權利要求1所述的鹽酸頭孢吡肟原料及其制劑中N-甲基吡咯烷的含 量的測定方法，其特征是稀釋劑是流動相、水、0.001 0.05mol/L硝酸溶液、 0.001 0.005mol/L硫酸溶液或者是0.01 0.1mol/L甲基磺酸。
8、 根據(jù)權利要求7所述的鹽酸頭孢吡咯肟原料及其制劑中N-甲基吡咯烷的 含量的測定方法，其特征是稀釋劑是0.01mol/L硝酸溶液。
9、 根據(jù)權利要求1所述的鹽酸頭孢吡咯肟原料及其制劑中N-甲基吡咯烷的 含量的測定方法，其特征是供試品溶液是每lml中含頭孢吡肟5mg，對照品溶 液每lml中含N-甲基吡咯垸0.5mg。
10、 根據(jù)權利要求1所述的鹽酸頭孢吡咯肟原料及其制劑中N-甲基吡咯烷 的含量的測定方法，其特征是測定法中，取供試品溶液20ul注入液相色譜儀， 記錄色譜圖，另取對照品溶液20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法計 算出供試品中N-甲基吡咯烷的含量。
全文摘要
本發(fā)明涉及鹽酸頭孢吡肟原料及其制劑中N-甲基吡咯烷的含量的測定方法，用于鹽酸頭孢吡肟原料及其制劑的質量評價，它公開了以羧型陽離子柱為分析柱，以電導檢測器進行檢測，通過流動相的配制，供試品溶液及對照品溶液的制取，再按測定法，取供試品溶液以及對照品溶液分別注入液相色譜儀，分別記錄色譜圖，按外標法計算出供試品中N-甲基吡咯烷含量的一種液相色譜法。本發(fā)明色譜系統(tǒng)易于平衡，樣品測定時間短，保留時間重復性好，基線平穩(wěn)，柱耐用，N-甲基吡咯烷的色譜峰的質量好，重復性好，測定方法準確，方便，可靠。
文檔編號G01N30/00GK101226174SQ200810026150
公開日2008年7月23日 申請日期2008年1月31日 優(yōu)先權日2008年1月31日
發(fā)明者傅紅燕, 譚勝連, 閔翠娥, 媛 陸 申請人:廣州白云山天心制藥股份有限公司