專利名稱：一種處理生物液成分的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種處理生物液成分的方法，具體涉及一種處理生物液成分的一 體化方法，更具體地說是對生物液成分進行分離和檢測的一體化方法。
背景技術(shù)：
在對外周血、骨髓、細胞培養(yǎng)液、胎盤和臍帶血等生物液成分進行分離時， 通常利用其中包含的各種成分的密度不同而通過離心作用進行分離。例如在分離 含有造血干細胞的生物液時，通過離心作用將樣品中的各種成分進行分離，可以 得到目標分離產(chǎn)物。
現(xiàn)有技術(shù)中公開了一些技術(shù)方案以達到上述分離過程的機械化。如美國專利 US4120448所描述的一個連接到一個離心機上的腔室，生物液在該腔室中分離， 并且在該室中相應(yīng)于每種成分取決于密度而進行聚集的區(qū)域的各種位置上設(shè)置 多種收集方式。又如EP0912250中描述了一種可用于將生物液處理并分離成預(yù) 定成分的處理系統(tǒng)，其包括一組容器，用于盛放要分離的生物液和已分離的成分。 還包括一個空心離心處理室，該處理室靠與旋轉(zhuǎn)驅(qū)動單元嚙合，可圍繞轉(zhuǎn)軸旋轉(zhuǎn)； 處理室具有一軸向的用于要處理的生物液和該生物液己處理成分的進/出口。該 進/出口引入體積可變的分離艙，在其中進行生物液的整個離心處理過程。該系 統(tǒng)還可任選地包括一或多個添加劑溶液附加容器。還有如CN1658941A中所描 述的生物液成分的分離方法和裝置，使用一個獨立的袋裝置來收集樣品，然后將 該袋裝置放入適合裝配到離心機中的容器中用于成分分離。該容器中的一個可控 制用于指示每種成分收集的閥操作的傳感器，然后通過可根據(jù)密度來依次萃取每 種成分，每種成分然后可被分離到它們自己的儲存容器。還有如CN1331610A中所描述的分離系統(tǒng)，采用光學(xué)控制原理控制成分的分離。
在現(xiàn)有公開的技術(shù)方案中，對生物液成分分離的監(jiān)測和控制一種是基于其中 成分的密度差異進行分離，還有就是采用在線光學(xué)監(jiān)測方法，或者上述兩種監(jiān)測 指標的聯(lián)合使用。但如所公知的，由于生物液中成分復(fù)雜，完全基于密度差異進 行控制往往并非是完全可靠的，尤其在采取造血干細胞時。此外，普通光學(xué)監(jiān)測 和控制方法也存在有重大的局限性，包括不能測量從分離室中通過選取提取端口 流出的細胞物質(zhì)的通量或純度，不能提供目標分離產(chǎn)物的成分組成等等。而在實 際操作中，對從生物液分離的目標樣品進行全面評價在很多情況下是必需的。如 果要對這些指標進行評價，必須重新從分離樣品中取樣進行檢測，這些操作過程 不但增加了操作步驟，同時也確定無疑地增加了樣品污染的機會。對于生物樣品 而言，發(fā)生污染的后果是非常嚴重，在很多情況下甚至是不可挽救從而導(dǎo)致更嚴 重的后果。
因此，我們需要這樣一種方法，能夠?qū)⑸镆撼煞值姆蛛x與檢測在一個程序 中全部完成，而不需要多個歩驟進行。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種方法，能夠?qū)⑸镆撼煞值姆蛛x與檢測在一個程序中全部完 成，而不需要多個步驟進行。
本發(fā)明還提供適宜于本發(fā)明方法的一種生物液分離檢測系統(tǒng)，該系統(tǒng)可以采 用單件可重用硬件和易于裝載、易于使用的配置來完成整個過程，不需要操作者 常規(guī)的干預(yù)來完成選定成分的分離和檢測步驟。
本發(fā)明的處理生物液成分的方法，對生物液中成分的分離與檢測在一體化的 設(shè)備中完成。
本發(fā)明所述生物液包括外周血、骨髓、細胞培養(yǎng)液、胎盤和臍帶血。
本發(fā)明的處理生物液成分的方法，使用如下所述的一體化設(shè)備，包括以下幾 部分-盛裝待分離生物液的樣品容器；
離心分離裝置；
盛裝已分離樣品的成分容器；
流路裝置；
流路裝置的支路；
細胞檢測裝置；
上述流路裝置位于離心區(qū)外，分為兩個部分，第一部分將所述盛裝待分離生 物液容器與所述離心分離裝置相連，第二部分將所述離心分離裝置與所述盛裝已 分離成分容器相連；
上述流路裝置的支路一端與流路裝置的第二部分相連，另一端與所述細胞檢 測裝置相連；
上述構(gòu)件所構(gòu)成的系統(tǒng)在使用時構(gòu)成密閉系統(tǒng)。
一個技術(shù)方案為，本發(fā)明方法中所使用的離心分離裝置可繞軸旋轉(zhuǎn)，并具有 軸向的用于要分離的生物液和分離后的生物液的進口和出口，所述離心分離裝置 內(nèi)部構(gòu)成空腔，在空腔內(nèi)具有一軸向活動構(gòu)件，所述構(gòu)件限定接收的生物液的可 變體積的分離艙，該構(gòu)件可軸向運動，以通過所述進口將生物液吸入分離艙。
另一個技術(shù)方案為，本發(fā)明方法中所使用的流路裝置包括管道和閥門裝置， 所述闊門裝置可將樣品容器和離心裝置，離心裝置和成分容器之間建立聯(lián)通，或 將二者的聯(lián)系切斷。
另一個技術(shù)方案為，本發(fā)明方法中所使用的系統(tǒng)中包括多于一個的成分容 器，以及與之相應(yīng)的多于一個的閥門裝置。
另一個技術(shù)方案為，本發(fā)明方法中所使用的支路包括一個與分離裝置相連的 入口和一個與細胞檢測裝置而非分離裝置相連的出口、定量室、閥門裝置、壓力
調(diào)節(jié)系統(tǒng)，所述定量室包括一個可調(diào)節(jié)定量室容積的活動構(gòu)件，從而使定量室的 容積與細胞檢測裝置相適應(yīng)。本發(fā)明處理生物液成分的方法包括如下基本歩驟將盛裝待分離生物液的樣 品容器中的生物液轉(zhuǎn)移至離心分離裝置；在離心室裝置中沉降后，離心裝置繞軸 旋轉(zhuǎn)，以分離生物液成分；并在旋轉(zhuǎn)時擠出分離成分，分離成分通過流路裝置在 盛裝已分離樣品的容器中分配；目標成分開始出現(xiàn)時，開啟支路，收集微量樣品 進行檢測。
本發(fā)明方法的一種典型的處理程序如下樣品袋中的生物液注入離心分離裝 置，樣品袋中的生物液可通過離心分離室中的活動構(gòu)件的運動而被吸入離心分離 裝置，一個優(yōu)選的技術(shù)方案是以光學(xué)管路監(jiān)測器監(jiān)測樣品袋被抽空或離心分離裝 置已滿的時間。沉降過程開始時，離心分離室開始沿著其軸旋轉(zhuǎn)。離心分離持續(xù) 幾分鐘并使生物液成分得到最佳分離。在抽取和收集階段，分離出的生物液成分 被分送到相應(yīng)的收集袋中。在此階段開始或進行中時，啟動所使用的分離檢測裝 置的支路裝置，從而獲得微量樣品，以檢測器進行檢測，得出檢測報告。 一個優(yōu) 選的技術(shù)方案是以光學(xué)管路監(jiān)測器樣品分離程序。
本發(fā)明方法中所使用的細胞檢測裝置可以例如是貝克曼公司的Vi-CELL系 列產(chǎn)品，支路末端與該檢測儀器的進樣裝置相適應(yīng)。通過該儀器，可在線對分離 得到的樣品進行檢測，包括細胞存活率、細胞總數(shù)/濃度、存活細胞數(shù)、細胞直 徑及分布、細胞平均直徑、細胞圓度及分布、細胞平均圓度、實時細胞圖像等所 需要的指標。
如本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的，細胞檢測裝置并不限于上述的舉例，只要能夠 對目標分離產(chǎn)物進行檢測并作出質(zhì)量評價的儀器設(shè)備，均滿足于本發(fā)明方法的需 要。
本發(fā)明處理生物液成分的方法，相對于現(xiàn)有技術(shù)，取得如下進步
(1) 簡化了生物樣品的分離和檢測工作；
(2) 避免人工操作帶來的不穩(wěn)定性；
(3) 避免人工取樣檢測帶來的污染的可能性；
(4) 提高生物液樣品分離檢測效率。臍血造血干細胞的分離是近十年來發(fā)展的一個新的技術(shù)領(lǐng)域，常規(guī)的血漿、 紅細胞、白細胞、血小板等生物液成分分離的方法和器材，已經(jīng)不能滿足造血干 細胞分離的需要。本發(fā)明方法尤其適用于這種臍血造血干細胞的分離和檢測的用 途。
本發(fā)明所述生物液包括而不限于外周血、骨髓、細胞培養(yǎng)液、胎盤和臍帶血 等生物樣品。
以下以附圖和具體實施例的方式對本發(fā)明作進一步詳細說明，附圖和具體實 施例以舉例的目的給出，并不構(gòu)成對本發(fā)明的限制。


圖1為本發(fā)明系統(tǒng)的構(gòu)件組成示意圖。 圖2為本發(fā)明系統(tǒng)的流路支路的示意圖。 其中-
圖l中有盛裝待分離生物液的樣品容器l;離心分離裝置2;盛裝已分離 樣品的成分容器3;流路裝置4;流路裝置的支路5;細胞檢測裝置6;離心分離
裝置的進口和出口21，離心分離裝置內(nèi)部空腔22，空腔內(nèi)的軸向活動構(gòu)件23， 分離艙24。
圖2中有流路裝置的支路入口41和與細胞檢測裝置6相連的出口42,定 量室43，調(diào)節(jié)定量室容積的活動構(gòu)件44，支路的壓力調(diào)節(jié)系統(tǒng)45，閥門46。
具體實施例方式
本發(fā)明的處理生物液成分的方法，對生物液中成分的分離與檢測在一體化的
設(shè)備中完成。本發(fā)明處理生物液成分的方法包括如下基本步驟將盛裝待分離生 物液的樣品容器中的生物液轉(zhuǎn)移至離心分離裝置；在離心室裝置中沉降后，離心 裝置繞軸旋轉(zhuǎn)，以分離生物液成分；并在旋轉(zhuǎn)時擠出分離成分，分離成分通過流 路裝置在盛裝已分離樣品的容器中分配；目標成分丌始出現(xiàn)時，開啟支路，收集微量樣品進行檢測。
本發(fā)明方法所使用的裝置的基本組成如附圖1所示，包括盛裝待分離生物液 的樣品容器l;離心分離裝置2;盛裝已分離樣品的成分容器3;流路裝置4;流 路裝置的支路5;細胞檢測裝置6，離心分離裝置的進口和出口 21，離心分離裝 置內(nèi)部空腔22，空腔內(nèi)的軸向活動構(gòu)件23，分離艙24。上述流路裝置位于離 心區(qū)外，分為兩個部分，第一部分將所述盛裝待分離生物液容器與所述離心分離 裝置相連，第二部分將所述離心分離裝置與所述盛裝已分離成分容器相連；上述
流路裝置的支路一端與流路裝置的第二部分相連，另一端與所述細胞檢測裝置相
連；上述構(gòu)件所構(gòu)成的系統(tǒng)在使用時構(gòu)成密閉系統(tǒng)。
使用時，將待分離分離生物液樣品置于容器3，開動離心裝置，收集分離 樣品，在分離樣品收集程序中，使少量樣品進行流路裝置的支路，進入細胞檢測 裝置進行檢測。
權(quán)利要求
1.一種處理生物液成分的方法，其特征在于，對生物液中成分的分離與檢測在一體化的設(shè)備中完成。
2. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述生物液包括外周血、骨髓、細 胞培養(yǎng)液、胎盤和臍帶血。
3. 如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的一體化設(shè)備包括盛裝待分離 生物液的樣品容器；離心分離裝置；盛裝己分離樣品的成分容器；以及，位 于離心區(qū)外，將所述盛裝待分離生物液容器與所述離心分離裝置相連，將所 述離心分離裝置與所述盛裝已分離成分容器相連的流路裝置，其特征在于，該系統(tǒng)還包括與流路相連的支路，該支路的另一端與細胞檢測裝置相連，該 系統(tǒng)在使用時構(gòu)成密閉系統(tǒng)。
4. 如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述離心分離裝置可繞軸旋轉(zhuǎn)，并 具有軸向的用于要分離的生物液和分離后的生物液的進口和出口，所述離心 分離裝置內(nèi)部構(gòu)成空腔，在空腔內(nèi)具有一軸向活動構(gòu)件，所述構(gòu)件限定接收 的生物液的可變體積的分離艙，該構(gòu)件可軸向運動，以通過所述進口將生物 液吸入分離艙。
5. 如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述流路裝置包括管道和閥門裝置， 所述閥門裝置可將樣品容器和離心裝置，離心裝置和成分容器之間建立聯(lián)通， 或?qū)⒍叩穆?lián)系切斷。
6. 如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，該系統(tǒng)包括多于一個的成分容器， 以及與之相應(yīng)的多于一個的閥門裝置。
7. 如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述支路包括一個與分離裝置相連 的入口和一個與細胞檢測裝置而非分離裝置相連的出口、定量室、閥門裝置、 壓力調(diào)節(jié)系統(tǒng)，所述定量室包括一個可調(diào)節(jié)定量室容積的活動構(gòu)件，定量室 的容積與細胞檢測裝置相適應(yīng)。
8. 如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，對生物液成分的處理步驟包括將盛裝待分離生物液的樣品容器中的生物液轉(zhuǎn)移至離心分離裝置；在離心室裝 置中沉降后，離心裝置繞軸旋轉(zhuǎn)，以分離生物液成分；并在旋轉(zhuǎn)時擠出分離 成分，分離成分通過流路裝置在盛裝已分離樣品的容器中分配；目標成分開 始出現(xiàn)時，開啟支路，收集微量樣品進行檢測。
9. 如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于，所述生物液為臍帶血。
10. 如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于，所述生物液為骨髓。
全文摘要
本發(fā)明所提供的處理生物液成分的方法，基本步驟包括將盛裝待分離生物液的樣品容器中的生物液轉(zhuǎn)移至離心分離裝置；在離心室裝置中沉降后，離心裝置繞軸旋轉(zhuǎn)，以分離生物液成分；并在旋轉(zhuǎn)時擠出分離成分，分離成分通過流路裝置在盛裝已分離樣品的容器中分配；目標成分開始出現(xiàn)時，開啟支路，收集微量樣品進行檢測。上述操作過程在一體化的設(shè)備中完成。本發(fā)明所提供的方法適用于生物液包括外周血、骨髓、細胞培養(yǎng)液、胎盤和臍帶血中成分的分離與檢測。
文檔編號G01N33/48GK101620218SQ20081004358
公開日2010年1月6日 申請日期2008年7月2日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月2日
發(fā)明者嚴整輝 申請人:上海奇康生物科技有限公司