專利名稱：：碳青霉烯類化合物側(cè)鏈的含量測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種碳青霉烯類化合物側(cè)鏈的含量測定方法。
背景技術(shù)：
：隨著近年來抗生素耐藥問題日趨明顯，多藥耐藥性菌株屢見報道，除了需要對抗生素的使用進(jìn)行更為合理的控制外，臨床上亟需開發(fā)新一代擁有高效抗菌活性的新型抗感染治療藥物，碳青霉烯類化合物的出現(xiàn)，滿足了這種需要。碳青霉烯(carbapenem)類化合物是20世紀(jì)70年代發(fā)展起來的新型結(jié)構(gòu)的(3-內(nèi)酰胺類抗生素。先后上市的有亞胺培南(imipenem)、帕尼培南(panipenem)、美羅培南(meropenem)、比阿培南(biapenem)、厄他培南(ertapenem)和多尼培南(doripenem)等。由于該類藥對革蘭氏陽性、革蘭氏陰性菌、需氧菌和厭氧菌等均具有超廣譜強(qiáng)效抗菌作用，并有良好的組織滲透性，對各種細(xì)菌感染療效優(yōu)異，毒副作用少。近幾年來-直受到人們的關(guān)注。碳青霉烯類化合物的結(jié)構(gòu)都是由母核和側(cè)鏈兩部分構(gòu)成，母核部分基本相同，而且已經(jīng)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)；側(cè)鏈部分則不盡相同，但都有一個共同的特點，就是側(cè)鏈都含有巰基。側(cè)鏈通過該巰基與母核對接，經(jīng)過一系列反應(yīng)，得到產(chǎn)品。由于該類藥大多都是注射劑，產(chǎn)品質(zhì)量至關(guān)重要。側(cè)鏈中間體的純度，直接影響對接反應(yīng)的結(jié)果。如果測定側(cè)鏈的純度不準(zhǔn)確，就無法確定母核與側(cè)鏈的投料比，造成原料的浪費，而且給后處理造成很大的困難，使生產(chǎn)成本大幅上升；更嚴(yán)重的是可能造成最終產(chǎn)品質(zhì)量不合格。側(cè)鏈的合成過程中有可能產(chǎn)生大量的無機(jī)鹽(如氯化鈉、碳酸鈉、氯化銨)和有機(jī)鹽，(如乙酸鈉、甲酸鈉)。某些側(cè)鏈在水中溶解度較大，而反應(yīng)液中又有大量的有機(jī)鹽和無機(jī)鹽與之共存，這些與產(chǎn)品共存的鹽很難通過常規(guī)的方法除去。為了獲得高純度的側(cè)鏈需要反復(fù)精制，即使經(jīng)過反復(fù)精制，是否能達(dá)到合理的純度，也無法證明，所以真正意義上的分離十分困難。現(xiàn)有技術(shù)中碳青霉烯類化合物側(cè)鏈的含量測定一般都采用HPLC法。但這種含量測定方法的缺點是顯而易見的反應(yīng)過程中產(chǎn)生的無機(jī)鹽和有機(jī)鹽在HPLC中沒有吸收峰，所以如果采用HPLC面積歸一化法不能準(zhǔn)確反映側(cè)鏈的含量，而且受到對照品的限制，無法準(zhǔn)確、快速的進(jìn)行測定。基于碳青霉烯類化合物巨大的應(yīng)用前景，人們一直迫切希望找到一種簡單、快速，而且能準(zhǔn)確反映碳青霉烯類化合物側(cè)鏈真實含量的通用的測定方法。
發(fā)明內(nèi)容為了解決上述問題，本發(fā)明提供了一種碳青霉烯類化合物側(cè)鏈的含量測定方法。本發(fā)明的測定方法包括如下步驟-(1)將碳青霉烯類化合物側(cè)鏈溶于溶劑中；(2)用碘滴定液標(biāo)定；(3)將滴定結(jié)果用空白試驗校正；(4)按下式計算側(cè)鏈的含量y(l/2/2)x(F母Mx腿其中，C(丄12):碘滴定液摩爾濃度；2V:為滴定碳青霉烯類化合物側(cè)鏈時消耗碘滴定液的體積，ml;V(l:為滴定空白時消耗的碘滴定液的體積，ml;M:為碳青霉烯類化合物側(cè)鏈的摩爾分子量；W:為樣品稱樣量，mg;X:為所測樣品的含量，mg。其中，歩驟(1)中所述的碳青霉烯類化合物側(cè)鏈優(yōu)選自如下化合物化合物l:比阿培南側(cè)鏈6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[l，2-a][l，2，4]三氮唑內(nèi)錄氯化物；化合物2:關(guān)羅培南側(cè)鏈(2S,4S)-4-巰基-1-(對硝基芐氧羰基)-1-吡咯垸-2-(N，N-二甲基)甲酰胺；化合物3:帕尼培南側(cè)鏈(3S)-1-(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷；化合物4:厄他培南側(cè)鏈(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基芐氧?；?苯氨甲酰基]-4-巰基吡咯烷；化合物5:亞胺培南側(cè)鏈N-[(N-對硝基芐氧羰基)亞胺甲撐基]胺基乙基硫醇；化合物6:多尼培南側(cè)鏈(2S,4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-(N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯院；化合物7:多尼培南側(cè)鏈(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-對硝基芐氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷；化合物8:多尼培南側(cè)鏈(28，48)-1-叔丁氧羰基-2-(^叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷。進(jìn)步優(yōu)選自6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[1,2-a][1，2，4]三氮唑內(nèi)鑰氯化物；(2S，4S)-4-巰基-1-(對硝基芐氧羰基)-1-吡咯垸-2-(N，N-二甲基)甲酰胺；(3S)-1-(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷；(2S，4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基芐氧?；?苯氨甲?；鵠-4-巰基吡咯烷；N-[(N-對硝基節(jié)氧羰基)亞胺甲撐基]胺基乙基硫醇；(:2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-對硝基芐氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷。最優(yōu)選為6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[l，2-a][1，2，4]三氮唑內(nèi)鐵氯化物。歩驟(1)中所述的溶劑選自(a)水，(b)緩沖液，(c)水和有機(jī)溶劑的混合溶劑，(d)緩沖液和有機(jī)溶劑的混合溶劑；所述的水優(yōu)選為新沸過放冷的水；所述的緩沖液優(yōu)選pH4--8，進(jìn)-一歩優(yōu)選S氨-氯化銨緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液、枸櫞酸-磷酸氫二鈉、醋酸-醋酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液；所述的有機(jī)溶劑優(yōu)選自甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、四氫呋喃、乙腈、二氧六環(huán)和二甲基甲酰胺，最優(yōu)選四氫呋喃。所述步驟(2)中，碘滴定液的濃度優(yōu)選為0.05-0.1mol/L。所述步驟(2)中，在用碘滴定液滴定前，還包括加入指示劑的歩驟，所述的指示劑優(yōu)選為淀粉或亞甲藍(lán)指示液。所述歩驟(2)中，在用碘滴定液滴定時，還包括接近終點時加入指示劑的歩驟，所述的指示劑優(yōu)選為淀粉或亞甲藍(lán)指示液。碳青霉烯類化合物側(cè)鏈用量優(yōu)選為O.]-lg;淀粉指示液用量優(yōu)選為l-5ml;亞甲藍(lán)指示液用量優(yōu)選為0.05-0.3ml。在用碘滴定液進(jìn)行標(biāo)定吋，終點的判斷為(1)加入淀粉指示液，滴定至溶液呈淺藍(lán)色不褪；(2)加入亞甲藍(lán)指示液，滴定至溶液呈綠色不褪；(3)不加指示液，滴定至溶液呈淺黃色不褪。對有機(jī)化合物進(jìn)行HPLC測定，一般采用歸一化法，這具有簡單、快速的特點，適十反應(yīng)的監(jiān)測；進(jìn)行精確的含量測定，則需要內(nèi)標(biāo)法或外標(biāo)法。通常情況下，HPLC測定方法具有化學(xué)測定方法無法比擬的優(yōu)勢。但內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法需要符合要求的對照品，這對于某些碳青霉烯類化合物側(cè)鏈來說，如6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[1，2-a][1，2，4]三氮唑內(nèi)総氯化物，是非常困難的；而且由于某些側(cè)鏈中含有大量在HPLC中無吸收的鹽類物質(zhì)，利用歸一化法不能真實反應(yīng)側(cè)鏈的純度。所以，利用HPLC法無法建立碳青霉烯類化合物側(cè)鏈的通用測定方法。考慮到側(cè)鏈產(chǎn)品中的雜質(zhì)只含有無機(jī)鹽和有機(jī)鹽，不含有巰基，本發(fā)明人嘗試用檢測側(cè)鏈巰基的方法測定含量，即化學(xué)測定法。根據(jù)巰基易氧化的特性，嘗試用高錳酸鉀、重鉻酸鉀和溴酸鉀等氧化劑進(jìn)行氧化，由于碳青霉烯類化合物側(cè)鏈結(jié)構(gòu)復(fù)雜，除含有巰基外還含有氧、氮、雙鍵和季銨鹽，均因氧化劑氧化性過強(qiáng)或其它原因得不到滿意結(jié)果。分析原因可能是這三種氧化劑除對巰基氧化外，側(cè)鏈上的氮原子也被氧化形成氮氧化物，或側(cè)鏈被氧化破壞?；谝陨显?，考慮用相對弱的氧化劑碘來氧化巰基成二硫化合物的特性來對其進(jìn)行測定，而其結(jié)構(gòu)上的氧、氮、雙鍵和季銨鹽不受影響，結(jié)果獲得滿意結(jié)果，該方法不但可以用于含量測定，還可用于指導(dǎo)反應(yīng)進(jìn)程。本發(fā)明的有益效果在于(1)測定方法操作簡單，易于掌握，不需要任何設(shè)備，不需要標(biāo)準(zhǔn)樣品，無需繁瑣的操作。(2)測定方法快速，測試一個樣品一般只需要幾分鐘即可以完成，適用于實驗室或者工業(yè)生產(chǎn)過程中中間體含量的準(zhǔn)確測定；不僅適用于含量測定，還可用于指導(dǎo)反應(yīng)進(jìn)程。(3)由于側(cè)鏈產(chǎn)品中雜質(zhì)只含有無機(jī)鹽和有機(jī)鹽，不含有巰基，不會對測定造成千擾。所以本發(fā)明測定方法能準(zhǔn)確反映側(cè)鏈的真實含量，進(jìn)而能準(zhǔn)確地計算投料比，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。具體實施例方式下面將結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但不作為對本發(fā)明的限定。試劑碘、碘化鉀、三氧化二砷、氫氧化鈉、酚酞、淀粉、鹽酸、氫氧化鈉、甲基橙、硫酸、碳酸氫鈉均為分析純。碘滴定液(0.05mol/L)的配制取碘13.0g，加碘化鉀36g與水50ml溶解后，加鹽酸3滴與水適量使成1000ml，搖勻，用垂熔玻璃濾器濾過，保存于棕色具塞瓶中。碘滴定液的標(biāo)定取在105。C干燥至恒重的基準(zhǔn)三氧化二砷約0.15g，精密稱定，加氫氧化鈉滴定液(lmol/L)10ml，微熱使溶解，加水20ml與甲基橙指示液1滴，加硫酸滴定液(0.5mol/L)適量使黃色轉(zhuǎn)變?yōu)榉奂t色，再加碳酸氫鈉2g、水50ml與淀粉指示液2ml,用本液滴定至溶液顯淺藍(lán)紫色。每lml碘滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于4.946mg的三氧化二砷。根據(jù)本液的消耗量與三氧化二砷的取用量，算出本液的濃度。即得。0.1mol/L的碘滴定液配制和標(biāo)定按照與0.05mol/L碘滴定液相似的方法進(jìn)行。實施例1淀粉指示液的配制取可溶性淀粉0.5g。加水5ml攪勻后，緩緩傾入100ml沸水，隨加隨攪拌，繼續(xù)煮沸2分鐘，放冷，傾取上層清液，即得。取化合物l:6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[，2-a][1，2，4]三氮唑內(nèi)鎗氯化物約0.5g，精密稱定，置錐形瓶中，加新沸過放冷的水20ml使溶解，加2ml淀粉指示液，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺藍(lán)色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表1所示。表6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[1，2-a][1，2，4]三氮唑內(nèi)鎗氯化物含量測定結(jié)果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)198.2198.2698.3598.270.07298.8898.7698.6998.78().K)398.9298.8599.0398.930.09實施例2氨-氯化銨緩沖液的配制(pH8.0):取氯化銨1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1—30)調(diào)節(jié)pH值至8.0，即得。取化合物l:6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[1，2-a][1，2，4]三氮唑內(nèi)鎿氯化物約0.3g，精密稱定，置錐形瓶中，加氨-氯化銨緩沖液20ml使溶解，加3ml淀粉指示液，搖勻，用碘滴定液(O.lmol/L)滴定至溶液顯淺藍(lán)色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表2所示。表26，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑卩，2-a][1，2，4]三氮唑內(nèi)鎗氯化物含量測定結(jié)果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)199.0699.1299.1999.120.07299.2399.1799.1199.170.06398.7998.7498.8398.790.05實施例3亞甲藍(lán)指示液的配制取亞甲藍(lán)0.5g，加水使溶解成100ml。取化合物l:6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[l，2-a][1，2，4]三氮唑內(nèi)鐺氯化物約0.3g，精密稱定，置錐形瓶中，加新沸過放冷的水30ml使溶解，加3-5滴亞甲藍(lán)指示液，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯綠色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正,計算樣品含量。結(jié)果如表3所示。表36，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[1，2-a][1,2，4]三氮唑內(nèi)総氯化物含量測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>實施例4取化合物2:(2S,4S)-4-巰基-卜(對硝基芐氧羰基)-1-吡咯垸-2-(N，N-二甲基)甲酰胺約O.lg，精密稱定，置錐形瓶中，用四氫呋喃10ml使其溶解，再加新沸過放冷的水10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用仝白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表4所示。表4(2S.4S)-4-巰基-l-(對硝基芐氧羰萄-l-吡咯垸-2-(N，N-二甲基)甲酰胺含量測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>實施例5枸櫞酸鹽緩沖液的配制(pH6.2):取2.1%枸櫞酸水溶液，用50。/。氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至6.2，即得。取化合物2:(2S,4S)-4-巰基-1-(對硝基芐氧羰基)-1-吡咯垸-2-(凡N-二甲基)甲酰胺約0.5g,精密稱定，置錐形瓶中，用乙醇30ml使其溶解，再加枸櫞酸鹽緩沖液20ml，搖勻，用碘滴定液(O.lmol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用^白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表5所示。表5(2S,4S)-4-巰基-l-(對硝基芐氧羰基)-l-吡咯烷-2-(N，N-二甲基)甲酰胺含量測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>實施例6醋酸-醋酸鹽緩沖液的配制(pH4.6):取醋酸鈉54.6g，加水50ml使溶解，用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至4.6，再加水稀釋至100ml，即得。取化合物2:(2S,4S)-4-巰基-l-(對硝基芐氧羰基)-l-吡咯垸-2-(N，N-二甲基)甲酰胺約O.lg，精密稱定，置錐形瓶中，用丙酮10ml使其溶解，再加醋酸-醋酸鹽緩沖液10ml，搖勻，用碘滴定液(O.lmol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表6所示。表6(2S，4S)-4-巰基-l-(對硝基芐氧羰基)-l-吡咯烷-2-(N，N-二甲基)甲酰胺含量測定結(jié)果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)199.5399.6199.4899.540.07299.1599.2299.2999.220.07399.2799.3599.4299.350.08實施例7取化合物3:(3S)-1-(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷約0.1g，精密稱定，覽錐形瓶中，用乙腈10ml使其溶解，再加水10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表7所示。表7(3S)-1-(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷含量測定結(jié)果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)198.3998.3198.4398.380.06298.8398.7798.6898.760.08398.6498.798.5898.640.06實施例8枸櫞酸-磷酸氫二鈉緩沖液的配制(pH4.0):甲液取枸櫞酸21g或無水枸櫞酸19.2g，加水使溶解成1000ml，置冰箱內(nèi)保存。乙液取磷酸氫二鈉71.63g，加水使溶解成l()O()ml。取上述甲液61.45ml與乙液38.55ml混合，搖勻，即得。取化合物3:(3S)-1-(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷約0.3g，精密稱定，置錐形瓶中，用二甲基甲酰胺20ml使其溶解，再加枸櫞酸-磷酸氫二鈉20ml，搖勻，用碘滴定液(O.lmol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表8所示。表8(3S)-1-(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷含量測定結(jié)果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實施例9取化合物3:(3S)-1-(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯垸約0.18，精密稱定，置錐形瓶中，用二氧六環(huán)10ml使其溶解，再加水10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表9所示。表9(3S)-卜(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷含量測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實施例0取化合物4:(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基節(jié)氧酰基傳氨甲?；鵋-巰基吡咯烷約0.6g，精密稱定，置錐形瓶中，用四氫呋喃30ml使其溶解，再加水30ml，搖勻，用碘滴定液(O.lniol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表10所示。表10(2S，4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基芐氧?；?苯氨甲酰基]-4-巰基吡咯烷含量測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實施例11氨-氯化銨緩沖液的配制(pH8.0):取氯化銨1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1—30)調(diào)節(jié)pH值至8.0，即得。取化合物4:(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基芐氧酰基)苯氨甲?；鵠-4-巰基吡咯垸約0.4g，精密稱定，置錐形瓶中，用甲醇30ml使其溶解，再加氨-氯化鈸緩沖液30ml，搖勻，用碘滴定液(0.mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表ll所示。表11(2S，4S)-1-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基芐氧?；?苯氨甲?；鵠-4-巰基吡咯烷<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>取化合物4:(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基芐氧酰基)苯氨甲?；鵠-4-巰基吡咯烷約0.1g，精密稱定，置錐形瓶中，用乙腈10ml使其溶解，再加枸櫞酸鹽緩沖液10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表12所示。表12(2S,'1S)-1-對硝基節(jié)氧羰基-2-[(3-對硝基節(jié)氧?；?苯氨甲?；鵠-l-巰基吡咯垸含量測定結(jié)果樣<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>實施例13取化合物5:N-f(N-對硝基芐氧羰萄亞胺甲撐基]胺基乙基硫醇約O.lg，精密稱定，置錐形瓶屮，用乙腈10ml使其溶解，再加枸櫞酸鹽緩沖液10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表3所示。表13N-[(N-對硝基芐氧羰基)亞胺甲撐基]胺基乙基硫醇含量測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>實施例14取化合物5:N-[(N-對硝基芐氧羰基)亞胺甲撐基]胺基乙基硫醇約O.lg，精密稱定，置錐形瓶中，用乙腈10ml使其溶解，再加枸櫞酸鹽緩沖液10ml，搖勻，用碘滴定液(().lmol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空O試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表14所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>實施例15磷酸鹽緩沖液的配制(pH7.0):取磷酸氫二鈉0.68g，加0.1mol/L氫氧化鈉29.1ml,用水稀釋至100ml,即得。取化合物5:N-[(N-對硝基芐氧羰基)亞胺甲撐基]胺基乙基硫醇約O.lg，精密稱定，置錐形瓶中，用四氫呋喃10ml使其溶解，再加磷酸鹽緩沖液10ml，搖勻，用碘滴定液(0.1niol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表15所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>實施例16取化合物6:(2S,4S)-l-對硝基芐氧幾基-2-(N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷約0.1g，精密稱定，置錐形瓶中，用異丙醇10ml使其溶解，再加磷酸鹽緩沖液10ml，搖勻，用碘滴定液ro.lmol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表16所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>實施例17取化合物6:(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-氨磺酰氨萄甲基-4-巰基吡咯烷約O.lg，精密稱定，置錐形瓶中，用乙醇10ml使其溶解，再加水10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表n所示。表17(2S,4S)-l-對硝基節(jié)氧羰基-2-(N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷含量測定結(jié)果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)199.3399.5199.499.410.09299.1499.2199.0999.150.06398.2698.3598.4298.340.08實施例18取化合物7:(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-對硝基芐氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷約0.1g，精密稱定，置錐形瓶中，用四氫呋喃10ml使其溶解，再加水10ml，搖勻，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表18所示。表18(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-對硝基芐氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷含量測定結(jié)果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)199.3799.5199.4299.430.07298.9398.8798.7898.860.08398.7498.6798.5798.660.09實施例19取化合物7:(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-對硝基芐氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷約0.1g，精密稱定，置錐形瓶中，用甲醇10ml使其溶解，再加水10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表19所示。表19(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-對硝基芐氧撥基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷含量測定結(jié)果樣品測定值(％)平均值(％)RSD(%)199.4699.5199.3699.440.08298.6998.7798.5598.670.11398.7398.6598.5898.650.08實施例20取化合物8:(2S,4S)-1-叔丁氧羰基-2-(^叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷約O.lg，精密稱定，置錐形瓶中，用異內(nèi)醇10ml使其溶解，冉加水10ml，搖勻，用碘滴定液14(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校正，計算樣品含量。結(jié)果如表20所示。表20(2S,4S)-l-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯垸含量測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>實施例21取化合物8:(2S,4S)-l-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯垸約O.lg，精密稱定，置錐形瓶中，用異丙醇10ml使其溶解，再加水10ml，搖勻，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯淺黃色，即為滴定的終點。并將滴定結(jié)果用空白試驗校:lH，計算樣品含量。結(jié)果如表21所示。表21(2S,4S)-l-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯垸含量測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>權(quán)利要求1.一種碳青霉烯類化合物側(cè)鏈的含量測定方法，其特征在于包括如下步驟(1)將碳青霉烯類化合物側(cè)鏈溶于溶劑中；(2)用碘滴定液滴定；(3)將滴定結(jié)果用空白試驗校正；(4)按下式計算側(cè)鏈的含量<mathsid="math0001"num="0001"><math><![CDATA[<mrow><mi>X</mi><mo>=</mo><mfrac><mrow><mi>C</mi><mrow><mo>(</mo><mn>1</mn><mo>/</mo><mn>2</mn><msub><mi>I</mi><mn>2</mn></msub><mo>)</mo></mrow><mo>&times;</mo><mrow><mo>(</mo><mi>V</mi><mo>-</mo><msub><mi>V</mi><mn>0</mn></msub><mo>)</mo></mrow><mo>&times;</mo><mi>M</mi></mrow><mi>W</mi></mfrac><mo>&times;</mo><mn>100</mn><mo>%</mo></mrow>]]></math>id="icf0001"file="A2008100532890002C1.tif"wi="62"he="9"top="60"left="90"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/></maths>式中，id="icf0002"file="A2008100532890002C2.tif"wi="15"he="9"top="71"left="40"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>為碘滴定液的摩爾濃度；V為滴定碳青霉烯類化合物側(cè)鏈時消耗碘滴定液的體積；V0為滴定空白時消耗的碘滴定液的體積；M為碳青霉烯類化合物側(cè)鏈的摩爾分子量；W為樣品稱樣量；X為所測樣品的含量。2.權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述的碳青霉烯類化合物側(cè)鏈選自如下化合物:6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[1，2-a][l，2，4]三氮唑內(nèi)総氯化物；(2S,4S)-4-巰基-l-(對-硝基芐氧羰基)-l-吡咯烷-2-(N，N-二甲基)甲酰胺；(3S)-卜(對硝基芐氧羰酰乙酰亞胺)-3-巰基吡咯烷;(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-[(3-對硝基芐氧酰基)苯氨甲?；鵠-4-巰基吡咯烷；N—[(N-對硝基芐氧羰基)亞胺甲撐基]胺基乙基硫醇；(2S，4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷；(2S,4S)-l-對硝基芐氧羰基-2-(N-對硝基芐氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷；(2S,4S)-l-叔丁氧羰基-2-(N-叔丁氧羰基-4-氨磺酰氨基)甲基-4-巰基吡咯烷。3.權(quán)利要求2所述的測定方法，其特征在于，所述的碳青霉烯類化合物側(cè)鏈為6，7-二氫-6-巰基-5H-吡唑[1，2-a]卩，2，4]三氮唑內(nèi)鎿氯化物。4.權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，歩驟(1)中所述的溶劑選自(a)水，(b)緩沖液，(c)水和有機(jī)溶劑的混合溶劑，(d)緩沖液和有機(jī)溶劑的混合溶劑。5.權(quán)利要求4所述的測定方法，其特征在于，所述的水為新沸過放冷的水；所述的緩沖液pH48;所述的有機(jī)溶劑選自甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、四氫呋喃、乙腈、二氧六環(huán)和二甲基甲酰胺。6.權(quán)利要求5所述的測定方法，其特征在于，所述的緩沖液選自氨-氯化鉸緩沖液、枸櫞酸鹽緩沖液、枸櫞酸-磷酸氫二鈉、醋酸-醋酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液；所述的有機(jī)溶劑為四氫呋喃。7.權(quán)利要求l所述的測定方法,其特征在于，所述步驟(2)中，碘滴定液的濃度為0.05-0.1mo/L。8.權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述步驟(2)中，在用碘滴定液滴定前，還包括加入指示劑的步驟。9.權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述步驟(2)中，在用碘滴定液滴定時，還包括接近終點時加入指示劑的步驟。10.權(quán)利要求8或9所述的測定方法，其特征在于，所述的指示劑為淀粉或亞甲藍(lán)指示液。全文摘要本發(fā)明涉及一種碳青霉烯類化合物側(cè)鏈的含量測定方法，包括如下步驟(1)將碳青霉烯類化合物側(cè)鏈溶于溶劑中；(2)用碘滴定液滴定；(3)將滴定結(jié)果用空白試驗校正；(4)按下式計算側(cè)鏈的含量X＝(C(1/2I₂)×(V-V₀)×M)/W×100％。本發(fā)明的測定方法操作簡單、快速，能準(zhǔn)確反映側(cè)鏈的真實含量，不僅適用于含量測定，還可用于指導(dǎo)反應(yīng)進(jìn)程。文檔編號G01N21/77GK101592615SQ200810053289公開日2009年12月2日申請日期2008年5月29日優(yōu)先權(quán)日2008年5月29日發(fā)明者劉文崢,王國成,王雅瓊,鄭秋瑩,陳詠梅申請人:天津天士力集團(tuán)有限公司