專利名稱：：一種中藥制品的質(zhì)量評價(jià)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種中藥制品的質(zhì)量評價(jià)方法，屬于中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：中藥質(zhì)量的鑒定方法是中藥發(fā)展水平以及中藥質(zhì)量控制水準(zhǔn)的一種充分體現(xiàn)，相應(yīng)的方法與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)則是評價(jià)中藥質(zhì)量好壞、穩(wěn)定與否的主要依據(jù)。最早中藥主要以傳統(tǒng)的經(jīng)驗(yàn)鑒別為主，根據(jù)藥材的性狀來判別中藥的真?zhèn)魏蛢?yōu)劣，經(jīng)過發(fā)展逐漸形成了目前較為成熟的四大中藥質(zhì)量鑒定方法，即傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)性狀鑒定法、形態(tài)學(xué)基源鑒定法、組織學(xué)顯微鑒定法和中藥化學(xué)成分理化性質(zhì)鑒定法，這些方法各有其特點(diǎn)和主要適應(yīng)對象，在實(shí)際中可獨(dú)立使用也可相互配合。其中，傳統(tǒng)經(jīng)驗(yàn)性狀鑒定法也叫直觀鑒定法，特點(diǎn)是以老藥工一代傳一代的經(jīng)驗(yàn)鑒別為主，即用眼看、手摸、鼻嗅、口嘗、水試、火試等十分簡便的方法來鑒別中藥的真?zhèn)蝺?yōu)劣，適用于各類中藥的鑒定，必要時(shí)可配合其他鑒定方法加以確證?；磋b定法又稱來源鑒定法，是應(yīng)用植物、動物分類學(xué)等方面的知識把各種植(動)物藥的來源鑒定清楚，確定其正確的學(xué)名，以保證在應(yīng)用中品種準(zhǔn)確的一種方法，但品種鑒定的要求是必須要有原植(動)物，才能作出準(zhǔn)確無誤的結(jié)果。顯微鑒定法是利用顯微鏡觀察植(動)物中藥內(nèi)部的組織構(gòu)造和表面的微觀特征以鑒定中藥的方法，通常應(yīng)用于單憑性狀不易識別的中藥、性狀相似不易區(qū)分的多來源中藥、破碎中藥、粉末中藥以及用粉末中藥制成的中藥成方制劑的鑒定。理化鑒定法是利用中藥中存在某些化學(xué)成分的化學(xué)性質(zhì)和物理性質(zhì)，通過化學(xué)的、物理的或儀器分析手段鑒定中藥真?zhèn)?、純度、?nèi)在質(zhì)量以及有害物質(zhì)的有無或含量多少，該法是利用各類成分的化學(xué)類別試驗(yàn)去了解中藥所含化學(xué)成分和含量等相關(guān)信息，其對進(jìn)一步認(rèn)識中藥有重要意義。近年來，隨著現(xiàn)代分析技術(shù)的快速發(fā)展以及中藥系統(tǒng)研究的不斷深入，中藥質(zhì)量鑒別的方法開始推崇以儀器分析為主的現(xiàn)代儀器鑒別方法。如目前薄層色譜、高效液相色譜、氣相色譜和紫外吸收光譜等現(xiàn)代儀器的應(yīng)用已極為普遍，通過比較這些圖譜間的差異即可鑒別中藥化學(xué)組成成分、結(jié)構(gòu)和含量等信息。但由于一直以來在西藥質(zhì)控和鑒定為主導(dǎo)的4思想影響下，我國起初引入的這些先進(jìn)分析技術(shù)主要W重在中藥藥用自-發(fā)現(xiàn)、分離及物質(zhì)的測定上，比如表現(xiàn)在測定方面從開始的模糊總量測定向精確成分測定發(fā)展，且從單個(gè)化合物測定向多個(gè)化合物多指標(biāo)多組分的測定方向發(fā)展。而實(shí)際上，中藥是組成成分多且協(xié)同作用較為復(fù)雜的體系，藥物藥效主要通過其內(nèi)在多種成分相輔相成發(fā)揮作用，若簡單的把中藥中某種或某些成分提取出來并進(jìn)行質(zhì)量檢測，并不能達(dá)到評價(jià)中藥整體藥效的目的，而若對中藥這個(gè)龐大的物質(zhì)體系進(jìn)行一一的定性、定量、提取、藥效分析等則又是一項(xiàng)非常巨大的工程，一則并不科學(xué)，再則很難實(shí)現(xiàn)。所幸隨著現(xiàn)代分析技術(shù)和理論研究的逐漸發(fā)展以及人類思維的逐漸轉(zhuǎn)變，人們提出了中藥特色的質(zhì)量控制理論，即應(yīng)用中藥內(nèi)在的綜合信息來反映中藥整體質(zhì)量情況，而中藥指紋圖譜由于其能體現(xiàn)中藥整體綜合的特點(diǎn)從而在中藥組成成分整體以及中藥藥材、中間體到中藥成品的全程進(jìn)行質(zhì)量控制等方面得到了大力應(yīng)用。至此，我國現(xiàn)代中藥的鑒別方法有了新的不同于西藥的質(zhì)控理論，也為中藥的進(jìn)一步發(fā)展開辟了另一片新的發(fā)展空間。中藥指紋圖譜是某種(或某產(chǎn)地)中藥材或中成藥經(jīng)適當(dāng)處理后，借助于波譜或色譜技術(shù)獲得的中藥(主要是植物藥)次生代謝化學(xué)成分的光譜圖或色譜圖?，F(xiàn)代分析技術(shù)即包括光譜、波譜、色譜、核磁共振、x射線衍射及各種技術(shù)的聯(lián)用等。中藥指紋圖譜的研究是一項(xiàng)繁雜、系統(tǒng)的研究工程，其整個(gè)過程涉及的內(nèi)容很多也很廣，簡單地可概括為①獲取中藥指紋圖譜方法與條件的摸索即對不同中藥材、炮制品、飲片、中成藥等中藥樣本，根據(jù)其有效組分和本身理化性質(zhì)等不同來摸索和建立相應(yīng)各樣本的提取制備方法和分離設(shè)備及條件。包括方法的建立、條件的優(yōu)化、技術(shù)的聯(lián)用、操作的規(guī)范化以及成分分析及活性成分的鑒定等研究內(nèi)容。②標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的建立是在如上研究的基礎(chǔ)上，對獲得的原始中藥指紋圖譜的一種綜合分析。其實(shí)質(zhì)上也包括如上中藥成分及活性成分的確認(rèn)，定量，與鑒定等內(nèi)容，綜合分析以建立能表征研究樣品化學(xué)組成及含量信息的特征指紋圖譜為目的。③中藥指紋圖譜間的比較分析是實(shí)現(xiàn)中藥指紋圖譜研究應(yīng)用的一個(gè)過程，通過圖譜間的相似性比較分析，來實(shí)現(xiàn)中藥材、中成藥以及終產(chǎn)品等樣品間真?zhèn)舞b別和質(zhì)量評價(jià)。這里涉及到圖譜信息的提取方法研究、圖譜間相似性計(jì)算及比較分析以及最終應(yīng)用時(shí)評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的制定與評價(jià)等。中藥指紋圖譜的相似性計(jì)算，在實(shí)際應(yīng)用中，是相對標(biāo)準(zhǔn)特征指紋圖譜計(jì)算而言的。即圖譜相似度計(jì)算前提，須事先建立一個(gè)能表征中藥產(chǎn)品化學(xué)組成特征的主觀的特征指紋圖譜作為標(biāo)準(zhǔn)參照指紋圖譜。然后通過計(jì)算和比較待測樣品指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜間的相似度來評價(jià)待測樣品相對標(biāo)準(zhǔn)而言的真?zhèn)?、品質(zhì)好壞或質(zhì)量穩(wěn)定等情況。對于兩圖譜間相似度的計(jì)算，通常是先將圖譜矢量化為空間模式向量，然后以空間模式向量間的運(yùn)算來實(shí)現(xiàn)。即先將一張色譜指紋圖看成是由圖譜組成色譜峰指標(biāo)值^，12,...^構(gòu)成的一個(gè)"維空間向量1[;^^2,...^]。其中，若將標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜以矢量Zs=[^1,、2,...,^,...,^]表示，、,為標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的第/峰峰指標(biāo)值，待測指紋圖譜以矢量;^=[&,^2,...，^，...,;^]表示，則待測指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜間的相似性計(jì)算便轉(zhuǎn)化為向量J^與X,間的相似性計(jì)算，通過計(jì)算兩向量間的相似度便可獲得兩圖譜間的相似度。目前，中藥指紋圖譜的相似性比較的方法主要有Nei系數(shù)法(參見洪筱坤，王智華，中藥數(shù)字化色譜指紋譜，上海上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2003，65104，110113)，改進(jìn)Nei系數(shù)法(參見孟慶華，劉永鎖，王健松等，色譜指紋圖譜相似度的新算法及其應(yīng)用，中成藥，2003，25(1):48)，相關(guān)系數(shù)法(參見謝培山，中藥色譜指紋圖譜，北京人民衛(wèi)生出版社，2005)，夾角余弦法(謝培山，中藥色譜指紋圖譜，北京人民衛(wèi)生出版社，2005)，歐氏距離法(參見王璽，王文字，張克榮等，中藥HPLC指紋圖譜相似性研究的探討，沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，20(5):360362，366)，改良程度相似度法(參見劉永鎖，孟慶華，蔣淑敏等，相似系統(tǒng)理論用于中藥色譜指紋圖譜的相似度評價(jià)，色譜，2005，23(2):158163)，程度相似度法(參見劉永鎖，曹敏，王義明等，相似系統(tǒng)理論定量評價(jià)中藥材色譜指紋圖譜的相似度，分析化學(xué)，2006，34(3):333337)，指數(shù)相似系數(shù)法(參見蔡寶昌，劉訓(xùn)紅，常用中藥材HPLC指紋圖譜測定技術(shù)，北京化學(xué)工業(yè)出版社，2005，2829)和相似性比測度法(參見蔡寶昌，劉訓(xùn)紅，常用中藥材HPLC指紋圖譜測定技術(shù)，北京化學(xué)工業(yè)出版社，2005，2829)等。各相似度計(jì)算方法之間的差別主要在于相似度計(jì)算時(shí)選擇了不同的圖譜相似性測度指標(biāo)。其中，如相關(guān)系數(shù)法、向量夾角余弦法、指數(shù)相似系數(shù)法、相似性比測度法，以及歐氏距離法這五種方法即都是源于聚類分析中用于計(jì)算指標(biāo)或樣品間相似性測度常用的幾個(gè)數(shù)量化測度指標(biāo)。其它方法則是理論結(jié)合實(shí)際而產(chǎn)生的分析思路。即以圖譜色譜峰出現(xiàn)位置、次序、個(gè)數(shù)及兩圖譜譜峰相互匹配吻合，體外貌特征來判導(dǎo)J"中藥屬性，再比較相互匹配峰強(qiáng)度或大小、比例等量化信息來判定中藥產(chǎn)品各成分及整體含量的穩(wěn)定性和一致性。對于中藥色譜指紋圖譜，由于色譜分析本身具有定性與定量功能，所以依據(jù)色譜分離原理，不同的色譜峰一般情況下即可代表中藥組成的多個(gè)不同化合物，則圖譜色譜峰出現(xiàn)位置、次序和個(gè)數(shù)便具有了中藥定性性質(zhì)；又色譜檢測器信號，在不超過檢測物質(zhì)定量線性范圍條件時(shí)，與檢測物質(zhì)的含量成正比，則對于純色譜峰便可考慮直接以色譜峰指標(biāo)值(比如峰值)的大小來對物質(zhì)進(jìn)行定量檢測。對如上各相似性計(jì)算法，Nei系數(shù)法和改進(jìn)Nei系數(shù)法是將圖譜上色譜峰分為共有峰和非共有峰來分別計(jì)算；其它則是將圖譜作為整體，沒有共有峰與非共有峰區(qū)別，直接將不存在峰用0表示，最后組成相互對應(yīng)向量組來計(jì)算。實(shí)際上，不論以共有峰與非共有峰分類計(jì)算還是以圖譜整體計(jì)算，二者并沒有本質(zhì)性區(qū)別。結(jié)合中藥實(shí)際分析，發(fā)明人認(rèn)為，中藥指紋圖譜相似度計(jì)算及評價(jià)的實(shí)質(zhì)都在考察要比較的兩個(gè)指紋圖譜的組成峰數(shù)、峰匹配以及相應(yīng)峰指標(biāo)值的量化關(guān)系。其中，以兩圖譜組成峰個(gè)數(shù)與峰匹配的一致性來說明產(chǎn)品屬性的一致性；以相應(yīng)峰指標(biāo)值的量化關(guān)系的一致性來說明產(chǎn)品各成分含量與比例的一致性；前者目的在定性，后者目的在定量；前者為后者的基礎(chǔ)，二者最后的一致與統(tǒng)一才能說明以中藥產(chǎn)品質(zhì)量的均一與穩(wěn)定。中藥指紋圖譜相等是中藥指紋圖譜相似的一種統(tǒng)一、特殊和極致狀態(tài)。中藥指紋圖譜的等同度才真正反映中藥產(chǎn)品質(zhì)量的合格性、均一性、與穩(wěn)定性?；旧蠌哪Ｐ捅碛^上看，除Nei系數(shù)法的計(jì)算式由其提出較早考慮因素不夠全面外，其它模型表觀上均結(jié)合有圖譜色譜峰定性與定量信息的綜合比較。若單從數(shù)學(xué)角度模型理論分析時(shí)，各相似度計(jì)算法彼此各有特點(diǎn)并沒有可比性。但針對中藥實(shí)體，即在模型賦予一定實(shí)際意義時(shí)，則需就模型相對中藥質(zhì)量控制實(shí)際應(yīng)用的適用性、可行性和合理性等進(jìn)行綜合比較分析，以評價(jià)各相似性測度針對實(shí)際應(yīng)用的優(yōu)劣性情況。目前，對于各相似度計(jì)算法的優(yōu)劣性比較，已有最基本的評價(jià)指標(biāo)為測度的峰數(shù)彈性、峰比例及峰指標(biāo)值(比如峰面積)同態(tài)性三個(gè)評價(jià)指標(biāo)。其中，圖譜峰個(gè)數(shù)穩(wěn)定以說明中藥組成相同；峰間比例穩(wěn)定以說明中藥組成的基本配伍一致；峰指標(biāo)值(包括個(gè)值和總值)的穩(wěn)定則說明中藥各成分含量接近。然而，上述方法存在下述缺陷1)相關(guān)系數(shù)、夾角余弦、相似性比并不能很好的實(shí)現(xiàn)對中藥不同批次間產(chǎn)品質(zhì)量含量的檢測，且三者均較側(cè)重于圖譜中較大峰對整體相似度計(jì)算的比重，這不能合理解釋目前中藥各成分藥效等均不清楚的前提條件。2)對于改進(jìn)Nei系數(shù)、歐氏距離、改良程度及程度相似度，若從相似性測度評價(jià)三個(gè)指標(biāo)來分析，其均有一定的綜合性檢測性能。但這三個(gè)評價(jià)指標(biāo)并沒能指出相應(yīng)相似性測度在評價(jià)結(jié)果上存在評價(jià)誤差。實(shí)際上，結(jié)合模擬圖譜特例數(shù)據(jù)直觀比較，可知這四個(gè)相應(yīng)的相似性測度在中藥實(shí)際應(yīng)用中均存在有一定的評價(jià)偏向性或誤差局限性問題。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，提出一種中藥制品的質(zhì)量評價(jià)方法。本發(fā)明方法采用一個(gè)量化指標(biāo)參數(shù)來綜合評價(jià)峰數(shù)彈性、峰比例及峰指標(biāo)值同態(tài)性三個(gè)參數(shù)值，以度量中藥指紋圖譜和標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜之間的相似性，或者說兩者之間的趨同性，從而實(shí)現(xiàn)對中藥制品質(zhì)量合格性的評價(jià)。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案一種中藥制品的質(zhì)量評價(jià)方法，包括下列步驟a)獲得目標(biāo)中藥制品的指紋圖譜；b)根據(jù)所獲得的指紋圖譜和所述中藥制品的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜按照式I計(jì)算等同度C)比較所述等同度￡和設(shè)定的閾值，若所述等同度五不小于所述閾值，則所述中藥制品合格，否則不合格；五=〇&式I，其中-￡表示等同度，其值在(O，l]范圍內(nèi)；e表示自然常數(shù)；&，&分別表示所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜和所述目標(biāo)中藥制品的指紋圖譜中對應(yīng)的第A個(gè)相似峰的峰指標(biāo)值(本發(fā)明所稱的峰指標(biāo)值可以是峰面積，峰高，或半峰寬等等可以較好地表征樣品化學(xué)組成及含量信息的指標(biāo)值)，A=l,2，...，w;W表示枏似峰的個(gè)數(shù)；e^表示所述第A個(gè)峰的權(quán)重，其值在范圍內(nèi)，一般情況下可選取為l;在本發(fā)明所述中藥制品中對藥效影響大的化學(xué)成分對應(yīng)的相似峰的n^大于對藥效影響小的化學(xué)成分對應(yīng)的相似峰的s^。S表示敏感要求指數(shù)，其值在[l，oo]范圍內(nèi)，優(yōu)選在[l，5]范圍內(nèi)，進(jìn)一步優(yōu)選在[l，3]范圍內(nèi)，最優(yōu)選為1;本發(fā)明所述中藥制品的敏感要求指數(shù)5和所述中藥制品的質(zhì)量控制水平，毒性和安全性要求均成正相關(guān)，即質(zhì)量控制水平越高，毒性越強(qiáng)，安全性要求越高，則5的取值越大。當(dāng)上述C^和5均取1時(shí)，式I演化為五=g=1&另外，^表示系統(tǒng)誤差權(quán)重系數(shù)，其值在[O，oo]范圍內(nèi)，。進(jìn)一步，上述步驟a)所述標(biāo)準(zhǔn)圖譜可通過下述方法獲得取臨床安全有效的m個(gè)生物批的中藥制品，分別獲得其指紋圖譜；以所述指紋圖譜上的特征峰分量均值得到標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜；在這種情況下，所述系統(tǒng)誤差權(quán)重系數(shù)"卜歸^，*;f(1-婦婦*)其中iSA表示第A:個(gè)峰的批間精密度，M￡>t={[丄^;(;^-3^)2]1/2}/^;附表示獲得所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜時(shí)使用的所述中藥制品的生物批數(shù)，為自然數(shù)；/=1,2，…,附；X汰表示第/生物批圖譜中第A峰的色譜峰指標(biāo)值；表示各生物批的第)t峰的色譜峰指標(biāo)值的均值。當(dāng)然所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜也可來自于已備案的標(biāo)準(zhǔn)，那么所述系統(tǒng)誤差權(quán)重系數(shù)^4=1。更進(jìn)一步，上述步驟c)所述閾值優(yōu)選在0.8000到1.0000的范圍內(nèi)，更優(yōu)選在0.8500到1.0000的范圍內(nèi)；對于復(fù)方丹參滴丸而言，該閾值優(yōu)選為0.9100。閾值的確立應(yīng)當(dāng)和試驗(yàn)條件良好控制的動物試驗(yàn)和臨床實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果、企業(yè)自身能力、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、以及各國和各級藥政法規(guī)規(guī)定相綜合考慮后確立。如對丹參，町考慮選擇臨床已證^其-安全、有效的50批藥物，然后用bootstrapping法和樣品重復(fù)抽取法分析HPLC圖譜色譜峰，將50批數(shù)據(jù)放大到重復(fù)抽取1000組。然后，依據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)假設(shè)檢驗(yàn)中的統(tǒng)計(jì)指標(biāo)，選取1000批次組數(shù)據(jù)的95%的統(tǒng)計(jì)學(xué)置信區(qū)間的數(shù)據(jù)，即指定1000批次組數(shù)據(jù)中5%為不能接受批(不合格批)，復(fù)抽取計(jì)算來決定閾值。另外，本發(fā)明所述中藥制品包括但不限于復(fù)方丹參滴丸、養(yǎng)血清腦顆粒、荊花胃康膠丸、藿香正氣滴丸、柴胡滴丸、芪參益氣滴丸、銀杏葉膠囊、穿心蓮內(nèi)酯滴丸、板藍(lán)根泡騰片、養(yǎng)血清腦丸、金蓮花泡騰片、注射用益氣復(fù)脈凍干粉和/或消渴清顆粒。作為本發(fā)明的核心內(nèi)容，本發(fā)明用于評價(jià)中藥制品的指紋圖譜和標(biāo)準(zhǔn)圖譜之間的等同度的計(jì)算式I是一個(gè)負(fù)指數(shù)函數(shù)模型，其具有如下特點(diǎn)①負(fù)指數(shù)函數(shù)模型的值閾在(O,l]區(qū)間，不存在負(fù)值等同度。當(dāng)待測樣品指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜完全等同時(shí)，兩圖譜的相對平均差異為0%，此時(shí)圖譜等同度計(jì)算公式的計(jì)算值等于l，為模型值閾中的最大值。即可表示等同度計(jì)算值為1時(shí)，代表兩個(gè)待比較的中藥色譜指紋圖譜完全一致，也即樣品質(zhì)量與標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量等同。當(dāng)兩個(gè)待比較的中藥色譜指紋圖譜存在差異時(shí)，隨著兩圖譜相對平均差異的逐漸增大，負(fù)指數(shù)函數(shù)模型的計(jì)算值隨著相應(yīng)地減小，且是逐漸減小并趨向于值閾中的最小值0，相似度減小的同時(shí)，即可表示兩個(gè)相比較的中藥色譜指紋圖譜的差異越來越大，即相比較樣品質(zhì)量差異越來越大。②負(fù)指數(shù)函數(shù)等同度計(jì)算公式使得隨相比較中藥色譜指紋圖譜相應(yīng)色譜峰量化信息相對平均差異丄t(l^-;g/^的增大而等同度值減小，且呈負(fù)指數(shù)函數(shù)形式的下凸曲線走勢。即隨著圖譜相對平均差異的增大，等同度計(jì)算值具有在開始時(shí)降低迅速，以后降低速度越來越慢的變化特點(diǎn)。這一特點(diǎn)正好符合中藥質(zhì)量判定時(shí)，發(fā)明人存在的一種正常心理現(xiàn)象。即當(dāng)相比較中藥質(zhì)量差異不太大時(shí)，一旦彼此差異增大，就有較明顯的圖譜感性體現(xiàn)或等同度值的體現(xiàn)；而若相比較中藥質(zhì)量己經(jīng)有很大的差異時(shí)，這時(shí)再增大差異便已失去進(jìn)一步量化計(jì)算判別的意義。因?yàn)閷?shí)際上中藥作為藥品存在，其上市產(chǎn)品質(zhì)量與標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量差異理應(yīng)保持在一定水平波動區(qū)間，這一水平即為中藥以藥品存在從其安全有效等綜合因素考慮后制定的質(zhì)量所能容忍的波動限度。而若差異已超出這一已確立的限度指標(biāo)，如假定超出30%或50%限度為不合格，則不論其差異再增到到多大如60%，...,100%，...等，均可直接判定其為劣質(zhì)或不合格產(chǎn)品，近似等同度值為0，而無需再計(jì)算具體的等同度值大小進(jìn)行比較。③等同度計(jì)算公式區(qū)別于歐氏距離的色譜峰面積絕對大小差異的計(jì)算法，選擇以圖譜色譜峰面積的相對差異大小來反映指紋圖譜色譜峰的波動幅度。如此定義正好反映，對中藥色譜指紋圖譜色譜峰幅度變化而言，衡量圖譜的相似性程度，不能單從色譜峰的絕對偏移程度來分析，而應(yīng)同時(shí)結(jié)合以各色譜峰本身大小區(qū)別為參考信息。因?yàn)閷τ诖笮”旧聿煌纳V峰，它們在改變相等絕對變化后對圖譜整體的影響效果并不相同。如假設(shè)有兩個(gè)色譜峰峰面積分別為(20,1)的圖譜，將其均發(fā)生絕對大小為1的減小變化，則變化后圖譜(19，0)變?yōu)閮H有一個(gè)色譜峰存在的圖譜，對二者中較大譜峰的影響甚小，僅存在|20-19|/(20+19)=2.56%的變化，而對其中較小的譜峰卻影響很大，其實(shí)質(zhì)上已發(fā)生了100%質(zhì)的變化。從而可見以絕對距離來分析色譜峰波動情況，并不能很好的反映出由于色譜峰本身大小不同而對圖譜整體相似性程度判定的影響。而結(jié)合以色譜峰本身大小區(qū)別為參考信息，采用相對差異值作為圖譜等同性比較參數(shù)值計(jì)算卻能很好的反映出來，更符合中藥質(zhì)量控制的實(shí)際應(yīng)用和一般情況下發(fā)明人分析的認(rèn)知心理。式中，5稱其為中藥色譜指紋圖譜等同度對圖譜整體差異變化反映敏感性要求指數(shù)。5值越大，表示等同度計(jì)算公式等同度相對圖譜整體差異反映敏感性要求度越高；S值越小，則表示模型相對圖譜整體差異的敏感性要求度越低。如圖1所示，示意了等同度計(jì)算公式敏感度要求系數(shù)分別為1和5，而其它情況均相同的等同度計(jì)算公式計(jì)算的中藥色譜指紋圖譜等同度度量值曲線圖。圖中縱坐標(biāo)為圖譜整體等同度計(jì)算值，橫坐標(biāo)為兩圖譜峰面積差與兩圖譜峰面積和的比值即兩圖的相對差異值。顯而易見，等同度計(jì)算公式相似度其敏感度要求系數(shù)取值為5時(shí)比取值為1時(shí)對兩圖譜間整體相對差異敏感性要求更高。即同樣的相對差異量，敏感度要求系數(shù)取值越大時(shí)，評定的等同度值要越小一些。⑤對于等同度計(jì)算公式相對圖譜整體差異敏感性要求系數(shù)確定的考慮。一般情況下，可以固定以5=1來計(jì)算。具體在中藥質(zhì)量控制的實(shí)際應(yīng)用中，可由企業(yè)自主制定作為企業(yè)指標(biāo)，由國家審評機(jī)構(gòu)在進(jìn)行利益風(fēng)險(xiǎn)評估、綜合因素分析后做出決定，也可由行業(yè)協(xié)會制定作為行業(yè)要求指標(biāo)。如對于實(shí)際中某一確定的中藥產(chǎn)品，當(dāng)其實(shí)際質(zhì)量控制水平高、毒性較大、且安全性要求較高時(shí)，則可確立3稍大一些以提高模型對該藥物較小的質(zhì)量波動的敏感性要求系數(shù)，從而能嚴(yán)格監(jiān)控藥物質(zhì)量波動情況；反之，對于實(shí)際中藥質(zhì)量控制水平要求低、毒性小、安全范圍較寬的藥物則可適當(dāng)調(diào)節(jié)3較小些，平緩等同度曲線，以適當(dāng)放松模型對該類藥物產(chǎn)品質(zhì)量保證的敏感性要求系數(shù)，從而使其合理上市以充分利用其藥物療效作用。當(dāng)然，整體上^的確立主要根難中藥實(shí)際情咒進(jìn)^繚合考慮后來制定。⑥對于等同度計(jì)算公式中各個(gè)色譜峰成分權(quán)重系數(shù)e^的確定。在實(shí)際應(yīng)用時(shí)，當(dāng)具體某一中藥，其所含成分及各成分藥效、構(gòu)效、量效等關(guān)系均不能確定時(shí)，即當(dāng)發(fā)明人不能確定到底哪些成分指紋峰影響藥效，哪些成分對藥效影響不大或沒有影響時(shí)，發(fā)明人便可以認(rèn)為所有已確立的標(biāo)準(zhǔn)特征指紋峰的量度大小對藥品質(zhì)量的判定具有等同作用，從而將圖譜作為整體進(jìn)行等權(quán)計(jì)算。當(dāng)然，隨著中藥組成及其作用機(jī)理研究的逐漸深入，當(dāng)臨床實(shí)驗(yàn)等研究已能明確確定中藥組成成分相對的藥效作用時(shí)，則需進(jìn)行各成分的加權(quán)運(yùn)算。此時(shí)，權(quán)重值的大小應(yīng)由各成分相對中藥整體安全、有效作用影響來決定，對其影響大的給予較大權(quán)重，對其影響小的給予較小權(quán)重。實(shí)際操作時(shí)，權(quán)重值大小的確定可采取專家評分形式，應(yīng)用模糊數(shù)學(xué)的多指標(biāo)決策理論或方法來實(shí)現(xiàn)。⑦最后針對中藥產(chǎn)品質(zhì)量控制的實(shí)際應(yīng)用，判定中藥制品質(zhì)量合格性，需要確立一個(gè)科學(xué)合理的等同度評價(jià)閾值。任何相似性或等同性計(jì)算方法，這一臨界值的確立必須得充分結(jié)合中藥產(chǎn)品及其生產(chǎn)工藝等實(shí)際情況來制定，且不同的評價(jià)計(jì)算原理應(yīng)有其相應(yīng)模型本身特點(diǎn)不同的評價(jià)閾值制定理論依據(jù)。如此二者的充分結(jié)合，方可實(shí)現(xiàn)制定的評價(jià)閾值在中藥質(zhì)量控制中的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值，提高判定閾值在實(shí)際應(yīng)用中的應(yīng)用性和具有針對性。而傳統(tǒng)思維選擇的相似性閾值多習(xí)慣在0.9或0.8并不具其相應(yīng)的合理性。為此，本發(fā)明等同度計(jì)算公式等同度閾值的確立，考慮結(jié)合具體中藥質(zhì)量實(shí)際控制水平來制定針對特定的中藥產(chǎn)品的適宜的閾值指標(biāo)，即考慮以已被證明安全、有效的中藥制品質(zhì)量合格、均一、與穩(wěn)定的圖譜間相對差異實(shí)際波動區(qū)間為閾值制定依據(jù)，指定圖譜平均相對差異時(shí)的等同度計(jì)算值為0.9或其它，計(jì)算95%置信區(qū)間等同度值，以95%置信區(qū)間下限為等同度判定臨界值指標(biāo)。經(jīng)過以上對本發(fā)明研究提出的中藥色譜指紋圖譜等同度計(jì)算，包括其理論、公式、及方法的全面分析，本發(fā)明在綜合已有相似度評價(jià)方法本質(zhì)、特點(diǎn)及針對實(shí)際應(yīng)用主要不足的基礎(chǔ)上提出來的指紋圖譜等同度計(jì)算具有如下優(yōu)點(diǎn)1、等同度計(jì)算公式負(fù)指數(shù)函數(shù)模型特點(diǎn)具有既定相似系數(shù)值閾(O，l]區(qū)間，且等同度值閾滿足有相應(yīng)合理的現(xiàn)實(shí)表示意義，符合有相似度習(xí)慣定義、取值及合理表示意義，彌補(bǔ)了已有計(jì)算相關(guān)系數(shù)和改良程度相似度計(jì)算法存在負(fù)值相似度特殊值局限性；2、等同度計(jì)算公式考慮了中藥指紋圖譜整體等同度與圖譜色譜峰本身離散程度有關(guān)因素；彌補(bǔ)了歐氏距離法只強(qiáng)調(diào)兩變量間絕對距離差異的不足；3、等同度計(jì)算公式母體本身沒有大小峰不同考慮，而是從理論上考慮了各色譜峰相對圖譜整體相似性不同計(jì)算影響，給予合理的各色譜峰加權(quán)計(jì)算分析，這樣彌補(bǔ)了相關(guān)系數(shù)、夾角余弦系數(shù)、相似性比測度等計(jì)算法本身以模型來決定圖譜大小峰相對相似性計(jì)算影響的不切合中藥實(shí)際的局限性；4、基于等同度計(jì)算公式的等同度計(jì)算指定了標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜為參照標(biāo)準(zhǔn)，不存在系統(tǒng)相似理論程度相似度沒有參照標(biāo)準(zhǔn)問題，從而彌補(bǔ)了程度相似度的只強(qiáng)調(diào)小數(shù)與大數(shù)之比計(jì)算后存在的評價(jià)誤差；5、基于等同度計(jì)算公式的等同度計(jì)算充分結(jié)合了中藥實(shí)際眾多因素的綜合考慮，有可調(diào)節(jié)的指紋圖譜等同度量度敏感度要求系數(shù)，其可調(diào)控的敏感性區(qū)間，更增強(qiáng)了模型相對中藥實(shí)際復(fù)雜情況質(zhì)量控制評價(jià)應(yīng)用的可實(shí)用性和針對性；6、同時(shí)，等同度計(jì)算公式以其特有的負(fù)指數(shù)函數(shù)等同度特點(diǎn)對中藥作為藥品所允許一定范圍內(nèi)的質(zhì)量波動給出了合理解釋?？傊?，本發(fā)明等同度計(jì)算公式和方法(包括其理論、公式、及應(yīng)用)是現(xiàn)有各相似性計(jì)算方法的一種綜合改進(jìn)，彌補(bǔ)了現(xiàn)有相似性方法針對中藥實(shí)際應(yīng)用中存在的眾多局限性，具有上述眾多優(yōu)點(diǎn)，適用于中藥實(shí)際現(xiàn)狀存在的眾多復(fù)雜情況，具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。另外，本發(fā)明描述的等同度計(jì)算公式和方法(包括其理論、公式、及應(yīng)用)同樣也能夠用于由多組份純品或半純品化學(xué)藥、組份中藥，或復(fù)合生物醫(yī)藥藥品的綜合質(zhì)量控制評價(jià)，只需將各指紋圖譜峰改為各成分化學(xué)檢測值即可。對由已知化合物組成的復(fù)方化學(xué)藥品，僅建議該方法作為質(zhì)量控制的一種體外檢測評價(jià)時(shí)的參考。對由已知和未知成分組成的生物藥品和中藥產(chǎn)品，其產(chǎn)品整體的安全性和有效性已被證實(shí)，但其每一成分的具體貢獻(xiàn)不知時(shí)，正如中藥的實(shí)際現(xiàn)狀，該方法即可作為用于藥品質(zhì)量合格性、均一性、或穩(wěn)定性質(zhì)量控制的綜合評價(jià)方法。圖1表示兩個(gè)敏感度要求系數(shù)不同的圖譜等同度曲線示意圖(a)表示敏感度要求系數(shù)為5時(shí)的情況；(b)表示敏感度要求系數(shù)為1時(shí)的情況圖2表示各相似性測度的變化波動比較圖圖3表示各相似性測度隨樣品相對標(biāo)準(zhǔn)平均差異依次增大的變化趁勢圖圖4表示各圖譜量度值計(jì)算法敏感性差異示意5表示各相似性測度彼此間波動比較示意圖具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例和附圖對本發(fā)明作進(jìn)一步描述。下述實(shí)施例按照式I計(jì)算指紋圖譜的等同度，其中^,5，t^均取l。由于下述實(shí)施例采用的標(biāo)準(zhǔn)圖譜未經(jīng)實(shí)驗(yàn)測量，而采用現(xiàn)有的標(biāo)準(zhǔn)圖譜，因此^^取1;而^針對具體中藥以適當(dāng)調(diào)控等同度測度在一定質(zhì)量波動范圍內(nèi)的敏感性，取1時(shí)不影響質(zhì)量水平次序評價(jià)結(jié)果；對于crp以等權(quán)重計(jì)算是由目前中藥實(shí)際研究現(xiàn)狀水平?jīng)Q定的，現(xiàn)有研究的各相似性計(jì)算法均與等同度計(jì)算公式相同，都只是強(qiáng)調(diào)的圖譜在數(shù)字上的相似度。實(shí)施例l本實(shí)施例通過應(yīng)用現(xiàn)有的中藥材指紋圖譜實(shí)例分析進(jìn)行考察，比較本發(fā)明方法和己有各相似性評價(jià)方法之間的結(jié)果是否一致，從而檢驗(yàn)其合理性和可行性。本實(shí)施例采用已論證過的10批梔子提取物樣品指紋圖譜(參見劉永鎖，曹敏，王義明等，相似系統(tǒng)理論定量評價(jià)中藥材色譜指紋圖譜的相似度，分析化學(xué)，2006，34(3):333337)，原始數(shù)據(jù)見表1。文獻(xiàn)計(jì)算得IO批梔子提取物樣品指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)圖譜間的各相似度評價(jià)結(jié)果見表2。表lIO批梔子提取物樣品指紋圖譜原始數(shù)據(jù)表示峰面積值(單位mAu)1234567148832175487229171652058174827259652962923923315950732483034228583616191132821941840169683525665844765103233196642590942694211038631416633654712216919372379892847914070741603304496514268822969443526269701439柳137030371901294221760938648740475150333723823641510827272781927186831856136438719658131331715851367115831<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>如表2所示，2、3號樣品與參照最相似，7號次之，IO號樣品與參照的差異最大。下面，采用本發(fā)明方法對這10批梔子提取物樣品指紋圖譜進(jìn)行等同度評價(jià)，看其評價(jià)結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果是否無沖突。同上，選擇以夾角余弦法與改進(jìn)Nei系數(shù)法為代表進(jìn)行直觀的比較分析。這里具體計(jì)算時(shí)，由文獻(xiàn)研究選擇以獲得的10批梔子提取物樣品指紋圖譜中位數(shù)為標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，為此本文研究為了使各相似性測度具有的可比性，同樣選擇以中位數(shù)指紋圖譜為標(biāo)準(zhǔn)參照指紋圖譜。使用Matlab5.3軟件編程，計(jì)算10批梔子提取物樣品指紋圖譜與中位數(shù)標(biāo)準(zhǔn)參照指紋圖譜間的各個(gè)相似性測度，計(jì)算結(jié)果見表3。表3夾角余弦、改進(jìn)Nei系數(shù)和等同度計(jì)算公式等同度計(jì)算結(jié)果批次相對平均差異(％)改進(jìn)Nei系數(shù)失角余弦等同度計(jì)算公式123.080細(xì)10.99970.793927.570.95930.99970.927137.820.96100.99980.9248423.340.87040.99870.791822.660.88880.99830.7972622.570.87630.99750.798010.610.94690.99970.8993827.380.83590.99940.7605926.590.8858l細(xì)00.76651075.020.77100.99730.4723如表3所示，分析等同度計(jì)算公式等同度計(jì)算評價(jià)結(jié)果，發(fā)明人可得到2、3批次樣品與參照最相似，7號次之，IO號樣品差異最大的結(jié)論。而這一評價(jià)結(jié)果與如上文獻(xiàn)評價(jià)結(jié)論完全相符。如此即說明本發(fā)明研究所構(gòu)建的等同度計(jì)算公式與目前研究報(bào)道的相似度計(jì)算法無沖突，其可用于中藥色譜指紋圖譜間的相似性評價(jià)。再由表3計(jì)算結(jié)果，發(fā)明人還可知，2、3、7、10號樣品與中位數(shù)參照標(biāo)準(zhǔn)的平均差異依次為7.57%<7.82%<10.61%<75.02%,這正好與等同度計(jì)算公式等同性評價(jià)結(jié)果的順序0.9271>0.9248>0.8993>0.4723有很好的相互對應(yīng)關(guān)系。如此即表明本研究構(gòu)建的圖譜等同度計(jì)算公式具有定量反映樣品相對差異大小的檢測能力。接著，發(fā)明人選擇以夾角余弦和改進(jìn)Nei系數(shù)為現(xiàn)有方法中的代表，與等同度計(jì)算公式等同性評價(jià)作更詳細(xì)的比較分析。如圖2所示，為依據(jù)表2和表3結(jié)果而作的夾角余弦、改進(jìn)Nei系數(shù)和本實(shí)施例等同度計(jì)算公式評價(jià)測度彼此間的變化趨勢圖。由圖2可知，夾角余弦對10批樣品的差異反應(yīng)很不敏感，這一點(diǎn)從表2夾角余弦計(jì)算結(jié)果即可看出。如表2夾角余弦計(jì)算得10批樣品計(jì)算得相似度值均在0.99以上，其根本不能很好的區(qū)分各批次間梔子藥材提取物的差異或質(zhì)量波動情況。而等同度計(jì)算公式等同度，如圖所示其能較好的區(qū)分開各批次間梔子藥材提取物彼此間的差異或質(zhì)量波動。如圖3為發(fā)明人依據(jù)表3計(jì)算結(jié)果作的改進(jìn)Nei系數(shù)法、夾角余弦法和本實(shí)施例等同度計(jì)算公式各相似性測度隨10批樣品相對標(biāo)準(zhǔn)相對差異按從小到大順序排列的相應(yīng)計(jì)算值變化趁勢圖。由圖3所示可見，等同度計(jì)算公式等同度值隨著待測圖譜相對標(biāo)準(zhǔn)圖譜的相對平均差異的逐漸增大而相應(yīng)減小，如此說明等同度計(jì)算公式等同度與圖譜間相對平均差異具有很好的對應(yīng)關(guān)系；而改進(jìn)Nei系數(shù)法和夾角余弦法卻不存在等同度計(jì)算公式這一特點(diǎn)。同時(shí)由圖3所示，再結(jié)合如上表3數(shù)據(jù)分析，發(fā)明人還可以發(fā)現(xiàn)，在相似性相對圖譜間平均差異變化的敏感性反應(yīng)上，等同度計(jì)算公式相對圖譜整體差異的敏感性較改進(jìn)Nei系數(shù)法敏感。為此，表明本發(fā)明研究構(gòu)建的等同度計(jì)算公式提高了相似性對圖譜間相對差異的敏感性，從而更能靈敏的監(jiān)控中藥質(zhì)量的波動變化情況。同樣由圖3所示可知，在待測圖譜與標(biāo)準(zhǔn)圖譜的相對平均差異已達(dá)75.02%很大時(shí)，夾角余弦和改進(jìn)Nei系數(shù)的相似度計(jì)算值仍很高。尤其是夾角余弦相似度計(jì)算值仍高達(dá)0.99以上。如此即表明即使夾角余弦有很大的相似度值，但這一計(jì)算值并不能說明中藥產(chǎn)品的質(zhì)量是穩(wěn)定或均一的。這一現(xiàn)象實(shí)際上更進(jìn)一步確實(shí)發(fā)明人前面所得的結(jié)論，夾角余弦類似如此的相似度計(jì)算方法只能是較適合于中藥的定性鑒定，而根本不能很好的反應(yīng)中藥產(chǎn)品質(zhì)量的波動變化情況。同理，改進(jìn)Nei系數(shù)法也存在類似情況，只是相較夾角余弦稍好一些。而等同度計(jì)算公式等同度則不同，等同度計(jì)算公式等同度充分體現(xiàn)了其在一定范圍內(nèi)的靈敏性，當(dāng)兩圖譜間相對差異很大，高達(dá)一定高度差異時(shí)，其等同度計(jì)算值便會統(tǒng)一出現(xiàn)很小結(jié)果，如圖3所示當(dāng)兩圖譜間相對差異為75.02%時(shí)，等同度計(jì)算公式的等同度計(jì)算值及0.4左右，與其它樣品有明顯的差異，從而可很好的判定其相對標(biāo)準(zhǔn)的差異最大。如上，等同度計(jì)算公式的這一特點(diǎn)推廣來結(jié)合實(shí)際藥物分析時(shí)，即可理解為等同度計(jì)算公式具有與中藥作為藥品實(shí)際相結(jié)合的特點(diǎn)。如假設(shè)在科學(xué)研究充分證明或根據(jù)中藥實(shí)際質(zhì)量控制水平認(rèn)為某一中藥產(chǎn)品在超出30%平均相對差異變化時(shí)便可視其為不合格產(chǎn)品。則發(fā)明人此時(shí)所關(guān)心或期望的是在30%前后質(zhì)量波動內(nèi)等同度的一定的反應(yīng)靈敏性。理想上<30%時(shí)等同度為0.90.8，>30%時(shí)為0.40，發(fā)明人便可很好給出中藥產(chǎn)品質(zhì)量是否合格的判定結(jié)果。結(jié)合等同度計(jì)算公式特點(diǎn)分析，可知，實(shí)際上本研究構(gòu)建圖譜等同度計(jì)算公式即為如此特點(diǎn)，從而發(fā)明人認(rèn)為其更符合中藥產(chǎn)品質(zhì)量定性定量控制的實(shí)際應(yīng)用和理論解釋。繼而分析，如上發(fā)明人只是對中藥材提取物指紋圖譜的研究?？梢韵胍姡魧τ谥兴幹苿┗蛑兴幾⑸鋭┑荣|(zhì)量要求較為嚴(yán)格的中藥產(chǎn)品進(jìn)行色譜指紋圖譜分析時(shí)，由于其質(zhì)量波動范圍更小，從而夾角余弦系數(shù)和改進(jìn)Nei系數(shù)的相似度計(jì)^:值將更集中，便更不能很好的區(qū)分類似如此中藥產(chǎn)品的質(zhì)量波動情況，如此也實(shí)現(xiàn)不了中藥產(chǎn)品質(zhì)量的真正可控性。從而進(jìn)一步表明在如今中藥走產(chǎn)業(yè)化發(fā)展道路之際，為實(shí)現(xiàn)中藥產(chǎn)品質(zhì)量的真正可控性，圖譜相似性測度在中藥產(chǎn)品實(shí)際質(zhì)量波動范圍內(nèi)的敏感性的關(guān)鍵性。其為相似性評價(jià)的關(guān)鍵所在，這一敏感性提高則相似性評價(jià)在中藥質(zhì)量控制中實(shí)際應(yīng)用即可得以更好的實(shí)現(xiàn)。否則只是理論并不能得以價(jià)值的真正實(shí)現(xiàn)。相應(yīng)的也即表明發(fā)明人在圖譜等同性計(jì)算等同度計(jì)算公式構(gòu)建時(shí)考慮的基本出發(fā)點(diǎn)的正確性?？傊?jīng)過如上中藥材提取物色譜指紋圖譜實(shí)例研究及理論分析，發(fā)明人認(rèn)為等同度計(jì)算公式對圖譜整體差異的敏感性很好，其對中藥產(chǎn)品質(zhì)量合格性、均一性、與穩(wěn)定性的關(guān)鍵質(zhì)控區(qū)內(nèi)的質(zhì)量評價(jià)更具有優(yōu)越性。實(shí)施例2本實(shí)施例采用己上市的復(fù)方丹參滴丸的指紋圖譜作為實(shí)例進(jìn)行研究。釆用由天津天士力制藥股份有限公司生產(chǎn)的10批不同批次的產(chǎn)品樣品，用高效液相色譜測取其相應(yīng)的色譜指紋圖譜。實(shí)驗(yàn)儀器與試劑Agilent1100型高效液相色譜儀，配自動進(jìn)樣器、二極管陳列檢測器、柱溫箱(安捷倫科技公司)；乙腈(色譜純、美國Fisher公司)，磷酸(分析純)，超純水(自制)。色譜條件色譜柱AgilentSB-C18(250mmx4.6mm，5nm);流動相A.水+0.02。/。磷酸；B.80%乙腈+0.02%磷酸。流速1.0ml/min;檢測波長280nrn;柱溫30。C;進(jìn)樣量10pl。樣品制備各批次產(chǎn)品樣品等量取樣置于10mL容量瓶中，加入適量蒸餾水，超聲15min，定容，離心，用0.45pm微孔濾膜過濾，濾液作為供試品溶液。具體獲得的這10批中藥產(chǎn)品色譜指紋圖譜的8個(gè)特征峰其相應(yīng)的峰面積值列表為表4。表4IO批中藥產(chǎn)品色譜指紋圖譜各特征峰的面積值數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>312275822764313368395.4369239.1538554523605.4600671.31592817414054943254560425084.6430732563519612938.1655639.8195728613015902972166403018.7412255.2507352.1584874.8633664.71742614612998072678515360671.3367589.7451061.6587045.7840330.61911146715122763545994439575.4439164.3578823.7711873.7847422.31986981814171573161376374037.1375646.9501352.1628365.3833733.41957794914476183442261389324.7393649.6533802.6673542.8877974.419097221013897183162815390041386586.5591826.6652020.2899902.11702336均值13779293135227398713.8400660.2543762.5623005770880.51852929然后，同上發(fā)明人同樣選擇以夾角余弦和改進(jìn)Nei系數(shù)法為現(xiàn)有相似度計(jì)算法代表與本文新構(gòu)建的圖譜等同度計(jì)算模型進(jìn)行比較論證。其中，選擇以10批指紋圖譜上的特征色譜峰分量均值作為標(biāo)準(zhǔn)參照圖譜。以Matlab5.3軟件編程，計(jì)算這10批中藥產(chǎn)品樣品指紋圖譜相對標(biāo)準(zhǔn)參照指紋圖譜間的相似度和等同度。同時(shí)計(jì)算各樣品圖譜相對標(biāo)準(zhǔn)圖譜的平均相對差異以進(jìn)行比較，具體計(jì)算結(jié)果見表5所示。表510批中藥樣品指紋圖譜相對標(biāo)準(zhǔn)圖譜的平均差異及相應(yīng)的量度值批次相對平均差異(％)改進(jìn)Nei系數(shù)夾角余弦等同度計(jì)算公式13.49980.98230.99980.965626.37600.96921.00000.9382311.40230.93850.99950.892245.71960.97110.99930.94446.41060.96630.99960.937969.12540.952210.99630.9128710.07330.952180.99980.904284.82320.97580.999695.73200.97250.99950.9443105.72300.97220.99870.9444由表5計(jì)算結(jié)果顯示，發(fā)明人首先可發(fā)現(xiàn)該中藥產(chǎn)品批次間的樣品質(zhì)量具有很好的穩(wěn)定性。因其中除第3批次樣品指紋圖譜相對標(biāo)準(zhǔn)參照指紋圖譜相對差異波動超出10%以外，其它批次樣品相對標(biāo)準(zhǔn)圖譜的波動程度均在10%范圍內(nèi)左右。而如前面中藥材提取物指紋圖譜表3計(jì)算結(jié)果顯示，中藥材提取物指紋圖譜相對標(biāo)準(zhǔn)參照指紋圖譜的差異波動范圍則很大，有7.57%75.02%較大范圍的波動。其次，由表5各相似性測度計(jì)算結(jié)果顯示，發(fā)明人又可發(fā)現(xiàn)夾角余弦相似度對兩圖譜間的相對差異反應(yīng)敏感性最差。因其各批次間產(chǎn)品相對標(biāo)準(zhǔn)的相似度值均達(dá)0.99多以上，各批次間相似度的差異只在0.999三位小數(shù)點(diǎn)之后有一點(diǎn)點(diǎn)區(qū)別。如此則根本不可能很好的實(shí)現(xiàn)各批次間產(chǎn)品質(zhì)量的區(qū)分和監(jiān)控。而改進(jìn)Nei系數(shù)和等同度計(jì)算公式量度值則有一定的敏感性，二者的各批次間產(chǎn)品相對標(biāo)準(zhǔn)的量度值值有一定差異的反應(yīng)。這一點(diǎn)由圖4即可直觀的反應(yīng)出，圖4為如上三個(gè)相似性測度不同敏感性差異示意圖。如圖4所示，發(fā)明人可明顯看到等同度計(jì)算公式對10批產(chǎn)品批次間質(zhì)量差異的敏感性最好，改進(jìn)Nei系數(shù)次之，夾角余弦最差。由此表明等同度計(jì)算公式圖譜等同度計(jì)算法能更好的區(qū)分不同批次樣品與標(biāo)準(zhǔn)的差異情況，對于同一中藥產(chǎn)品質(zhì)量均一性、合格性在質(zhì)量較小范圍內(nèi)的波動監(jiān)控與評價(jià)更具優(yōu)越性。再如圖5所示，發(fā)明人依據(jù)表3各量度值計(jì)算評價(jià)結(jié)果，作各量度值隨兩圖譜相對差異由小到大變化時(shí)的相應(yīng)變化曲線示意圖。由圖5所示，發(fā)明人同樣可明顯的看到，夾角余弦相似度對中藥產(chǎn)品批次間彼此的質(zhì)量波動由3.4998%11.4023%并不敏感，而新構(gòu)建的圖譜等同度計(jì)算模型則相對標(biāo)準(zhǔn)參照圖譜差異具有較好的敏感性，這一敏感性較改進(jìn)Nei系數(shù)法更為敏感，且等同度計(jì)算公式等同性測度值隨待測批次樣品與參照標(biāo)準(zhǔn)間相對差異的增大而減小，彼此間具有很好的相關(guān)性，夾角余弦和改進(jìn)Nei系數(shù)則并沒有如此特點(diǎn)。再經(jīng)過如上實(shí)例分析，發(fā)明人己知該同一中藥產(chǎn)品10批間樣品質(zhì)量，實(shí)際上只在一定的如3.4998%11.4023%范圍內(nèi)波動，而不是如前面相似度計(jì)算時(shí)討論的，...，[1,100%]的一一對應(yīng)關(guān)系。這近一步證明等同度計(jì)算公式在實(shí)際應(yīng)用中具有更好的針對性和實(shí)用性的優(yōu)勢。通過上述兩個(gè)實(shí)施例可知，本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)存在優(yōu)勢包括1、本發(fā)明等同度計(jì)算公式對中藥產(chǎn)品質(zhì)量的均一性，以及更進(jìn)一步地，合格性與穩(wěn)定性，有很好的靈敏度，相對于現(xiàn)有技術(shù)中的改進(jìn)Nei系數(shù)法和夾角余弦法更為靈敏，能很好的反應(yīng)產(chǎn)品質(zhì)量合格性、均一性、與穩(wěn)定性，從而實(shí)現(xiàn)對中藥產(chǎn)品是否合格或其質(zhì)量之均一性、穩(wěn)定性進(jìn)行評價(jià)的實(shí)際應(yīng)用。2、本發(fā)明等同度計(jì)算公式等同性測度與待測樣品指紋圖譜相對于標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜間的相對差異存在相互對應(yīng)關(guān)系，等同度系數(shù)隨著圖譜間彼此相對差異的增大而減小。3、本發(fā)明等同度計(jì)算公式在全面考慮現(xiàn)有文獻(xiàn)方法綜合性檢測功能的基礎(chǔ)上，更強(qiáng)調(diào)了模型等同性測度針對質(zhì)量波動關(guān)鍵范圍內(nèi)的敏感性，切合中藥制品臨床應(yīng)用的實(shí)際情況，使等同度計(jì)算公式等同性測度在實(shí)際應(yīng)用中更具有針對性和實(shí)用性，提高了以等同性評價(jià)中藥產(chǎn)品是否合格或其質(zhì)量均一與穩(wěn)定的切實(shí)可行性。權(quán)利要求1.一種中藥制品的質(zhì)量評價(jià)方法，包括下列步驟a)獲得目標(biāo)中藥制品的指紋圖譜；b)根據(jù)所獲得的指紋圖譜和所述中藥制品的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜按照式I計(jì)算等同度E；c)比較所述等同度E和設(shè)定的閾值，若所述等同度E不小于所述閾值，則所述中藥制品合格，否則不合格；式I，其中E表示等同度，其值在(0，1]范圍內(nèi)；e表示自然常數(shù)；xsk，xtk分別表示所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜和所述目標(biāo)中藥制品的指紋圖譜中對應(yīng)的第k個(gè)相似峰的峰指標(biāo)值，k＝1，2，...，n；n表示相似峰的個(gè)數(shù)；id="icf0002"file="A2008101514840002C2.tif"wi="4"he="3"top="141"left="29"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>表示所述第k個(gè)峰的權(quán)重，其值在范圍內(nèi)；δ表示敏感要求指數(shù)，其值在[1，∞]范圍內(nèi)；ψk表示系統(tǒng)誤差權(quán)重系數(shù)，其值在范圍內(nèi)。2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜通過下述方法獲得取臨床安全有效的m個(gè)生物批的中藥制品，分別獲得其指紋圖譜；以所述各個(gè)指紋圖譜上的特征峰的峰指標(biāo)值的均值作為標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的相應(yīng)特征峰的峰指標(biāo)值；并根據(jù)這些峰指標(biāo)值構(gòu)建所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜；且所述系統(tǒng)誤差權(quán)重系數(shù)=<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>其中iSAt表示第A個(gè)峰的批間精密度<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>附表示獲得所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜時(shí)使用的所述中藥制品的生物批數(shù)，為自然數(shù)；/=1，2，…，W;x&表示第/生物批圖譜中第A:峰的峰指標(biāo)值；&表示各生物批的第A峰的峰指標(biāo)值的均值。3.如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于，所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜來自于已備案的標(biāo)準(zhǔn)，所述系統(tǒng)誤差權(quán)重系數(shù)^^=1。4.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述峰指標(biāo)值為峰面積或峰高或半峰寬。5.如權(quán)利要求1或2或3所述的方法，其特征在于，所述第A:個(gè)峰的權(quán)重^-1。6.如權(quán)利要求1或2或3所述的方法，其特征在于，所述敏感要求指數(shù)3=1。7.如權(quán)利要求1或2或3所述的方法，其特征在于，所述第*個(gè)峰的權(quán)重^74=1，且所述敏感要求指數(shù)5=1。8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在所述中藥制品中對藥效影響大的化學(xué)成分對應(yīng)的相似峰的權(quán)重系數(shù)c^大于對藥效影響小的化學(xué)成分對應(yīng)的相似峰的權(quán)重系數(shù)。9.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述中藥制品的敏感要求指數(shù)6和所述中藥制品的質(zhì)量控制水平，生物活性要求均成正相關(guān)。10.如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于，所述閾值在0.8000到1.0000的范圍內(nèi)。11.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述中藥制品為復(fù)方丹參滴丸，所述閾值為0.9100。12.如權(quán)利要求l所述的方法，其特征在于，所述中藥制品為復(fù)方丹參滴丸、養(yǎng)血清腦顆粒、荊花胃康膠丸、藿香正氣滴丸、柴胡滴丸、芪參益氣滴丸、銀杏葉膠囊、穿心蓮內(nèi)酯滴丸、板藍(lán)根泡騰片、養(yǎng)血清腦丸、金蓮花泡騰片、注射用益氣復(fù)脈凍干粉和/或消渴清顆粒。全文摘要本發(fā)明公開了一種中藥制品的質(zhì)量評價(jià)方法，屬于中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
。本發(fā)明方法包括下列步驟獲得目標(biāo)中藥制品的指紋圖譜；根據(jù)所獲得的指紋圖譜和所述中藥制品的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜按照式I計(jì)算等同度E；比較所述等同度E和設(shè)定的閾值，若所述等同度E不小于所述閾值，則所述中藥制品合格，否則不合格；本發(fā)明方法提出的等同度計(jì)算公式是現(xiàn)有各相似性計(jì)算方法的一種綜合改進(jìn)，彌補(bǔ)了現(xiàn)有相似性方法針對中藥實(shí)際應(yīng)用中存在的眾多局限性，具有眾多優(yōu)點(diǎn)，適用于中藥實(shí)際現(xiàn)狀存在的眾多復(fù)雜情況，具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。文檔編號G01N30/86GK101676717SQ20081015148公開日2010年3月24日申請日期2008年9月19日優(yōu)先權(quán)日2008年9月19日發(fā)明者鶴孫,谷瑞敏,郭治昕申請人:天津天士力制藥股份有限公司