專利名稱：基于照明光與細胞成分之間的不同相互作用分析生物細胞材料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于例如為了區(qū)分癌性肺瘤細胞和良性腫瘤細胞而分 析生物細胞材料的設(shè)備和方法。
背景技術(shù)：
腫瘤的早期檢測是有效地戰(zhàn)勝腫瘤的最重要的前提條件。這也將決 定性地提高治愈胂瘤患者的希望。為了避免多次手術(shù)，希望的是在一次 手術(shù)期間識別肺瘤組織。為了進一步從患者中移除組織，外科醫(yī)生因而 可以考慮有關(guān)腫瘤細胞類型的可靠信息。
目前，腫瘤劃界(border demarcation )是由病理學(xué)家通過分析所謂 的"冷凍切片，，來實現(xiàn)的。這種技術(shù)花費大約一個小時；通常，由于等 待時間長，因而不進行術(shù)中研究，在所述等待時間期間，患者敞開著躺 在手術(shù)臺上。 一種可替換方案是執(zhí)行DNA細胞計量術(shù)以實現(xiàn)腫瘤劃界， 條件是結(jié)果可快速地獲得。然而，病理學(xué)家對可疑細胞和正常細胞的選 擇是費時并且因而昂貴的過程。病理學(xué)家典型地花費半小時來選擇足夠 的細胞以便得到統(tǒng)計上可靠的結(jié)果。此外，用于DNA細胞計量術(shù)的標準 福爾根(Feulgen)染色過程花費五個小時。
US2002/0128557A1公開了一種用于檢測腫瘤組織的器械，其包括至 少 一 個激發(fā)光源，所述第 一 激發(fā)光源發(fā)射波長介于3OOnm與314nm之間 的第 一激發(fā)光并且包括至少 一根用于將第 一激發(fā)光導(dǎo)向待檢查組織的 目標場的光纖。該器械還包括至少 一個用于將由第 一激發(fā)光產(chǎn)生的組織 的自發(fā)熒光信號和/或重發(fā)射信號投射到相機的CCD或ICCD芯片上的透 鏡。此外，該器械包括用于處理由相機傳送的信號的數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。所 述透鏡能夠處理UV光并且被設(shè)計成使得來自熒光目標場的不同光譜區(qū) 域的至少兩幅圖像被產(chǎn)生并且投影到CCD或ICCD芯片上。至少 一 幅圖 像代表所述目標場的自發(fā)熒光信號和/或重發(fā)射信號的UV范圍并且另一 幅代表不同的波長范圍。
US5131398公開了 一種用于使用本體熒光(native fluorescence )將癌 性肺瘤和組織與良性胂瘤和組織或正常組織區(qū)分開來的方法和器械。待檢查的組織利用300nm的單色光束來激發(fā)。從組織發(fā)射的本體熒光的強 度在340nm和440nm處進行測量。然后，計算這兩個強度之比并且將其 用作確定組織是否為與良性或正常相對的癌性的基礎(chǔ)。該方法和器械依 賴于以下發(fā)現(xiàn)當以300nm的單色光激發(fā)組織時，從大約320nm到600nm 的區(qū)域上的本體焚光光譜是癌性的組織，并且與在組織為良性或正常的 情況下得到的本體熒光光譜截然不同。這個技術(shù)對于人類以及動物組織 的活體內(nèi)和活體外測試都是有用的。
可能存在提供允許快速而可靠地分析生物細胞材料的設(shè)備和方法 的需要。

發(fā)明內(nèi)容
這個需要可以通過依照獨立權(quán)利要求的主題來滿足。從屬權(quán)利要求 描述了本發(fā)明的有利實施例。
依照本發(fā)明的第一方面，提供了用于分析生物細胞材料的設(shè)備。所 描述的設(shè)備包括(a)光源裝置，其適于將第一照明光和第二照明光導(dǎo) 向細胞材料，其中第 一照明光包含第 一光譜輻射成分并且第二照明光包 含第二光譜輻射成分；以及(b)檢測器裝置，其適于接收第一測量光 和第二測量光，所述第一測量光基于第一照明光與細胞材料的第一相互 作用，所述第二測量光基于第二照明光與細胞材料的第二相互作用。所 描述的生物細胞材料分析設(shè)備還包括(c)評估單元，其耦合到檢測器
裝置并且其適于評估指示第一測量光的第一信號以及指示第二測量光 的第二信號。
本發(fā)明的這個方面基于以下思想在許多應(yīng)用中，至少修改一些細 胞的結(jié)構(gòu)和/或組成的疾病的不同指示器是彼此獨立的。因此，通過組合 至少兩個指示細胞材料的不同特性的獨立測量結(jié)果，可以顯著地增大診 斷的精度。這尤其對于癌細胞的識別是成立的。
細胞材料的組合分析可以使得由病理學(xué)家選擇可疑細胞和正常細 胞不再是必要的。因此，實際的細胞計量術(shù)測量之前的費時且昂貴的細 胞分類過程可能變得過時了。這可以提供以下優(yōu)點可以快速得多地分 析已經(jīng)從患者中取出的組織，并且也可以快速得多地獲得診斷過程的結(jié) 果。因此，可以顯著地降低其間患者敞開著躺在手術(shù)臺上的時間跨度以 及因而受感染的風(fēng)險。應(yīng)當提及的是，在本申請中，術(shù)語光用于包括紫外、可見和紅外光 語范圍的電磁輻射。因此，第一照明光、第二照明光、第一測量光以及 第二測量光都可以具有該光譜范圍內(nèi)的任何波長。
應(yīng)當提及的是，所描述的細胞分析設(shè)備可以用于活體內(nèi)和活體外應(yīng) 用。在活體內(nèi)應(yīng)用的情況下，可以通過將第一和第二照明光直接定向到 所研究的患者組織上來直接地分析該組織。
依照本發(fā)明的 一個實施例，所述設(shè)備還包括用于支撐細胞材料的承 載元件。該承載元件可以是適合用于將生物細胞材料保持在第 一或第二 測量光的光路上的任何元件。該承載元件可以是例如顯微術(shù)中公知的物 體支持器。然而，該承載元件也可以是管狀物，所述管狀物用于在生物 細胞材料通過第 一或第二測量光的光路時引導(dǎo)該生物細胞材料。這種管
狀物在流量細胞計量術(shù)器械(例如熒光激勵細胞分類(FACS )儀器)中 是公知的。
依照本發(fā)明的另一個實施例，所述第一相互作用是吸收和/或所述第 二相互作用是發(fā)射熒光。這可以提供以下優(yōu)點可以借助于相對簡單的 光學(xué)設(shè)置實現(xiàn)所述設(shè)備。
在這個方面，應(yīng)當提及的是，在本申請中，術(shù)語吸收不僅用于所研 究的生物細胞材料內(nèi)物理地吸收的電磁輻射或光子。相反地，術(shù)語吸收 被假定涵蓋了降低穿過細胞材料的光束強度的所有的物理作用。這種強 度降低作用例如光散射，其使得散射的輻射從主光束中去除。當然，代 替測量透射光束的強度降低的是，也可以通過測量旁邊的散射光的強度 來獲取第 一相互作用的強度。
在這點上，應(yīng)當提及的是，當然由所描述的發(fā)射熒光相互作用產(chǎn)生 的第二測量光被發(fā)射到4rc的立體角內(nèi)。這意味著可以在相對于第二照明 光的方向的任何方向上檢測第二測量光。
依照本發(fā)明的另一個實施例，(a)第一照明光適于借助于第一相互 作用與生物細胞材料的第一細胞成分相互作用，和/或(b)第二照明光 適于借助于第二相互作用與生物細胞材料的第二細胞成分相互作用。這 意味著可以優(yōu)化所描述的生物細胞分析設(shè)備，以便獨立地分析不同的測 量值，所述測量值指示不同的細胞成分的特性。由于諸如癌癥之類的許 多疾病引起對于病原細胞的不同修改，因而所描迷的設(shè)備允許以高的精 度分析生物細胞。因此，可以顯著地增大識別和/或評估病原細胞數(shù)量的可靠性。
依照本發(fā)明的另 一個實施例，所述第 一細胞成分為DNA和/或所述 第二細胞成分為用于細胞新陳代謝的酶。特別地，第二細胞成分為 NAD(P)H。這基于以下觀察用于癌癥的為細胞核中DNA的增量的第一 指示器以及用于癌癥的為NAD(P)H的增加的水平的第二指示器基本上 是獨立的。這意味著可以同時研究兩種不同的細胞成分，這兩者據(jù)發(fā)現(xiàn) 在很大程度上指示惡性癌細胞的識別。
特別地，吸收的程度可以高度地指示細胞材料內(nèi)存在的DNA材料的 數(shù)量。由于惡性細胞典型地包含較高數(shù)量的DNA,因而由生物細胞材料
欲知DNA吸收測量的綜述，請參見"G //amy/b, f Q'raw《A Ae,Y/z 5och'wg, /997五5L^C尸，oW ow Wagwos"c/mage <qytome >7, J"a一/ca/Ce〃w/w尸"f/zo/ogy/7卩/卯S」/砂-2W。該出版物的公開通過引 用合并于此。
為了增大檢測所述笫 一相互作用的靈敏度，可以利用適當?shù)臒晒夥?子對DNA染色。為了對DNA染色，特別是已知的福爾根方法被認為是合 適的。
關(guān)于代表第二細胞成分的NAD(P)H,應(yīng)當提及的是，當?shù)诙彰鞴?包含用于激發(fā)NAD(P)H的適當?shù)墓庾V成分時，相應(yīng)的熒光信號的強度將 在很大程度上指示所研究的細胞內(nèi)的NAD(P)H的含量。由于在癌細胞 中，該含量比在正常細胞中高得多，因而第二測量光的強度也指示將細 胞分類成良性細胞或惡性細胞。欲知有關(guān)不同類型細胞內(nèi)NAD(P)H的不 同含量的細節(jié)，請參見出版物'7. Georgdoz^// " a/., A^4D(P」// co〃age" as vz'vo《w"WtoZz've y/womsrew/ 6/蘭"r々e^ 一,/zW"/ / rec"wcerajM1 c/^"g^， Owcer尺^earc/z 62 f2002」pp. 6S2-6S7"。該出片反物的^>開通過引 用合并于此。
對于識別癌細胞，所研究的細胞內(nèi)DNA的數(shù)量和NAD(P)H的含量二 者的所描述的組合評估比僅僅依賴于NAD(P)H含量的過程可靠得多。情 況之所以如此，是因為可能出現(xiàn)一些正常細胞由于偶然增大的細胞活性 的原因(例如增殖細胞)也可能表現(xiàn)出增大的NAD(P)H含量。因此，所 描述的細胞分析設(shè)備可以提供以下優(yōu)點與已知的器械(例如FACS儀器) 相比，識別癌細胞的可靠性顯著地增大了。
9依照本發(fā)明的另 一個實施例，所述第 一照明光和第二照明光是包括
一定波長的紫外光，所述波長介于150nm與350nm之間，優(yōu)選地介于 200nm與300nm之間，更優(yōu)選地介于230nm與270nm之間。
這可以提供以下優(yōu)點可以檢測細胞內(nèi)第一細胞成分的數(shù)量或DNA 的數(shù)量，而不必執(zhí)行復(fù)雜的染色過程，比如福爾根染色過程。這基于以 下事實DNA對所描述的260nm周圍的光譜范圍的紫外光的吸收比其他 細胞成分強烈得多。因此，通過省略細胞染色，所描述的設(shè)備允許實現(xiàn) 快速且便宜得多的DNA細胞計量。
依照本發(fā)明的另 一個實施例，所述第二照明光是包括一定波長的紫 外光，所述波長介于280nm與400nm之間，優(yōu)選地介于320nm與360nm之 間，更優(yōu)選地介于330nm與350nm之間。此外，所述第二測量光是包括 一定波長的可見光，所述波長介于345nm與545nm之間，優(yōu)選地介于 400nm與490nm之間，更優(yōu)選地介于430nm與460nm之間。
這可以提供以下優(yōu)點可以檢測第二細胞成分的含量或NAD(P)H的 含量，而不必執(zhí)行復(fù)雜的染色過程。這基于以下事實NAD(P)H本身可 以由紫外光激發(fā)。其中，紫外光包含所描述的340nm周圍的光譜范圍內(nèi) 的光譜成分。隨后的去激發(fā)產(chǎn)生445nm周圍的光i普范圍內(nèi)的熒光或第二 測量光。由于無需利用熒光分子對NAD(P)H染色或標記，因而激發(fā)和去 激發(fā)NAD(P)H的物理效應(yīng)都由術(shù)語自發(fā)熒光描述。
依照本發(fā)明的另 一個實施例，所述光源裝置包括寬光譜紫外光源。 光源可以是例如寬光譜UV燈。這種UV燈可以代表所描述的細胞分析設(shè) 備的適當光源。 '
可以使用適當?shù)墓忡捦◣V波器(pass filter),其在光鐠域?qū)碓?于紫外光源的光定形，使得第 一照明光和第二照明光可以從光譜上彼此 區(qū)分。然而，笫一照明光和第二照明光的光譜重疊是可能的。
公共的空間光路可以用于第 一 和第二照明光。這意味著可以是單通 帶濾波器或者至少兩個不同的光譜濾波器的適當組合的光譜通帶濾波 器表現(xiàn)出兩個透射最大值。第一透射最大值可以為所述第一相互作用而 優(yōu)化，并且笫二透射最大值可以為所述第二相互作用而優(yōu)化。
在測量所研究的細胞內(nèi)DNA的數(shù)量以及NAD(P)H的含量二者的情 況下，在光譜域中，第一透射最大值應(yīng)當位于260nm附近(針對DNA的 吸收最大值)并且第二透射最大值應(yīng)當位于340nm附近(針對NAD(P)H自發(fā)熒光的激發(fā)最大值)。
應(yīng)當提及的是，為了使得NAD(P)H的自發(fā)熒光測量更靈敏，來源于 寬光鐠紫外光源的光路內(nèi)的光譜通帶濾波器或者另外的阻擋濾波器應(yīng) 當確保沒有445nm周圍的可見光能夠撞擊所研究的細胞材料。在這種情 況下，保證了可能已經(jīng)被檢測的所有可見光或445nm周圍的光由 NAD(P)H的自發(fā)熒光效應(yīng)產(chǎn)生。
依照本發(fā)明的另一個實施例，所述光源裝置包括(a)產(chǎn)生第一照 明光的第一光源以及(b)產(chǎn)生第二照明光的笫二光源。
在測量所研究的細胞內(nèi)DNA的數(shù)量和NAD(P)H的含量二者的情況 下，發(fā)射包含253nm線的光譜的深UV燈(例如汞燈)適用于執(zhí)行上述 DNAUV吸收測量。為了執(zhí)行NAD(P)H自發(fā)熒光測量，優(yōu)選地可以使用 諸如發(fā)光二極管之類的340nm UV燈。
應(yīng)當提及的是，在使用不同的光源時，同樣可以使用適當?shù)臑V波器 元件。特別地，如上面已經(jīng)描述的，阻擋445nm周圍的可見光的濾波器 可以用于增大NAD(P)H自發(fā)熒光測量的靈敏度。
所述第 一照明光和第二照明光可以以不同的入射角撞擊到所研究 的細胞材料上。這可以提供以下優(yōu)點與第一照明光有關(guān)的第一測量光 以及與第二照明光有關(guān)的第二測量光在空間上分離，從而可以簡單地通 過采用兩個設(shè)置在不同位置的相應(yīng)檢測器來實現(xiàn)第一照明光和第二照 明光的分開的檢測。
然而，第 一 照明光和第二照明光也可以以相同的入射角撞擊到所研 究的細胞材料上。這意味著在撞擊細胞材料之前，第一照明光和第二照 明光沿著公共的入射光束路徑傳播。為了將來源于第一光源的光和來源 于第二光源的光與該公共入射光束路徑耦合，可以采用分束器或者優(yōu)選 地采用二向色鏡。
依照本發(fā)明的另 一個實施例，所述設(shè)備還包括用于將第 一照明光和 /或第二照明光聚焦到生物細胞材料上的光學(xué)裝置。這可以提供以下優(yōu) 點可以以高的空間分辨率照明生物細胞材料，從而甚至可以研究單獨 的細胞。
所述光學(xué)裝置可以包括兩個透鏡或光學(xué)器件，其被設(shè)計和設(shè)置成使 得第 一 照明光和/或第二照明光沿著與顯微鏡光路相應(yīng)的光路傳播。因 此，可以實現(xiàn)用于照明所研究的生物材料的特別高的空間分辨率。
ii在借助于分束器和/或二向色鏡光學(xué)耦合第一照明光和第二照明光 的情況下，單個光學(xué)裝置可以用于這兩個照明光。
依照本發(fā)明的另一個實施例，所述檢測器裝置包括(a)用于接收 第一測量光的第一檢測器以及(b)用于接收第二測量光的第二檢測器。
所述第 一和/或第二檢測器可以是例如包括一定空間分辨率的相機。 這可以提供以下優(yōu)點也可以以一定空間分辨率進行光才全測。因此，可 以采用至少 一個適當?shù)墓鈱W(xué)器件以便提供一定空間分辨率，這允許單獨 地分析所研究的細胞。
在檢測的笫 一測量光和檢測的第二測量光沿著相同的方向來自生 物細胞材料的情況下，第一測量光可以借助于分束器或二向色鏡與第二 測量光在空間上分離。
依照本發(fā)明的另 一個實施例，所述檢測器裝置包括用于接收第 一測 量光和第二測量光的公共才企測器，并且整個細胞分析設(shè)備還包括用于以 交替的方式允許第一測量光和第二測量光通過的斬波器設(shè)備。
其中，所述斬波器設(shè)備可以配備(a)用于允許第一測量光通過并 且阻擋第二測量光的第一光鐠濾波器元件以及(b)用于允許第二測量 光通過并且阻擋第 一測量光的第二光譜濾波器元件。這可以提供以下優(yōu) 點甚至當使用單個公共檢測器時，所描述的細胞分析設(shè)備也適于單獨 地測量第一測量光和第二測量光。
可以提供另外的斬波器設(shè)備，其設(shè)置在笫 一照明光或第二照明光的 光路上。該另外的斬波器設(shè)備可以配備(a)用于允許第一照明光通過 并且阻擋第二照明光的另外的第一光譜濾波器元件以及(b)用于允許 第二照明光通過并且阻擋第 一照明光的另外的第二光語濾波器元件。
應(yīng)當提及的是，也可以借助于空間解析檢測器(例如相機)實現(xiàn)所 述公共檢測器。特別地，與適當?shù)墓鈱W(xué)裝置相結(jié)合，這可以提供以下優(yōu) 點可以以一定空間分辨率實現(xiàn)測量光^r測，這允許單獨地分析所研究 的細月包。
依照本發(fā)明的另一個實施例，(a)第一照明光和第二照明光沿著公 共入射光束路徑撞擊到生物細胞材料上，并且(b)第一測量光和第二 測量光沿著公共出射光束路徑離開生物細胞材料。其中，所述公共入射 光束路徑和公共出射光束路徑相對于彼此是共線的。
這可以提供以下優(yōu)點可以以包括單個主光軸的相對簡單的光學(xué)設(shè)置實現(xiàn)所描述的生物細胞分析設(shè)備。優(yōu)選地，由所述公共入射光束路徑 垂直于生物細胞材料的表面。
依照本發(fā)明的另一個實施例，(a)所述檢測器裝置適于測量指示第 二測量光的第二信號的時間依賴關(guān)系，并且(b)所迷評估單元適于評 估第二信號的時間依賴關(guān)系。這可以提供以下優(yōu)點可以評估健康細胞 和癌細胞之間的另外的區(qū)別性特性。因此，可以進一步提高利用所描述 的設(shè)備進行細胞分析的可靠性。
優(yōu)選地，可以使用NAD(P)H的自發(fā)熒光信號的平均熒光壽命。這種 可能性基于以下觀察在癌細胞中，NAD(P)H的平均自發(fā)熒光壽命比在 健康細胞中短得多。欲知有關(guān)焚光壽命與細胞類型的依賴關(guān)系的更多細 節(jié),"i青參見出片反物57^sw2 a/" T7me-(iom(2z力/7i/omyce"ce./i/^/v'me
P^H)"。該出版物的公開通過引用合并于此。
依照本發(fā)明的另 一個實施例，所描述的生物細胞材料分析設(shè)備還包 括光調(diào)制設(shè)備，其適于調(diào)制作為時間的函數(shù)的第二照明光的強度。
這可以提供以下優(yōu)點可以產(chǎn)生第二照明光的預(yù)定時間依賴關(guān)系， 所述第二照明光產(chǎn)生例如細胞內(nèi)NAD(P)H的熒光激發(fā)。因此，可以僅僅 通過以與第二照明光的調(diào)制同步的方式測量第二測量光的時間依賴關(guān) 系，以精確而容易的方式觀察焚光去激發(fā)的時間依賴關(guān)系。其中，熒光 去激發(fā)可以在時間上與熒光激發(fā)對準。
所述調(diào)制設(shè)備可以以許多不同的方式來實現(xiàn)。例如，該調(diào)制設(shè)備可 以是適當?shù)碾娮与娐?，其控制發(fā)射第二照明光的光源。在光源是可以以 高的重復(fù)率重復(fù)地打開和關(guān)閉的發(fā)光二極管的情況下，這種調(diào)制的控制 是特別有利的。
所述調(diào)制設(shè)備還可以是斬波器設(shè)備，其重復(fù)地阻擋至少第二照明 光。在其中阻擋第二照明光的時間跨度期間，不發(fā)生熒光激發(fā)并且可以 觀察到先前激發(fā)的分子的熒光去激發(fā)。顯然，當以脈沖方式執(zhí)行熒光激 發(fā)時，測量熒光壽命的靈敏度最大。這意味著在兩個熒光激發(fā)時間窗之 間，第二照明光完全被抑制。這當然(a)對于其中控制發(fā)射第二照明 光的光源的實施例以及(b)對于其中斬波器設(shè)備用于調(diào)制第二照明光 的實施例是成立的。應(yīng)當提及的是，利用第 一 照明光執(zhí)行的吸收測量結(jié)果并沒有表現(xiàn)出 任何時間依賴關(guān)系，因為吸收和散射效應(yīng)總是相對于熒光去激發(fā)躍遷的 時間標度迅速地發(fā)生。因此，假如第 一照明光束的時間依賴關(guān)系已知， 那么就可以僅僅通過將第一測量光的強度與第一照明光的強度進行比 較來精確地測量第 一照明光束的吸收。這意味著也對第 一照明光束的調(diào) 制并不使得第 一照明光束的吸收測量結(jié)果較不可靠。
依照本發(fā)明的另 一 個方面，提供了用于分析生物細胞材料的方法。
所描述的方法包括(a)將來自光源裝置的包含第一光鐠輻射成分的第 一照明光導(dǎo)向細胞材料；(b )將來自光源裝置的包含第二光譜輻射成分 的第二照明光導(dǎo)向細胞材料；(c)借助于檢測器裝置接收笫一測量光， 所述第一測量光基于第一照明光與細胞材料的第一相互作用；以及(d) 借助于檢測器裝置接收第二測量光，所述第二測量光基于第二照明光與 細胞材料的第二相互作用。所描述的生物細胞材料分析方法還包括(e) 評估指示第一測量光的第一信號以及(f)評估指示第二測量光的第二信
本發(fā)明的這個方面基于以下思想通過組合指示特定細胞缺陷和/ 或特定疾病的兩個獨立測量參數(shù)，可以顯著地增大識別這些細胞類型的 診斷精度。這尤其對于將細胞識別成良性的或惡性的細胞是成立的，因 為與正常良性細胞相比，惡性癌細胞在不同光譜段中表現(xiàn)出光學(xué)特性的 相對較強的變化。光學(xué)特性的這種變化可能基于癌細胞與正常細胞相比 的結(jié)構(gòu)和/或化學(xué)變化。
所研究的細胞材料的所描述的組合分析可以使得由病理學(xué)家選擇 可疑細胞和正常細胞不再是必要的。因此，實際的細胞計量術(shù)測量之前 的費時且昂貴的細胞分類過程可能變得過時了 。這可以提供以下優(yōu)點 可以快速得多地分析已經(jīng)從患者中取出的組織，并且也可以快速得多地 獲得診斷過程的結(jié)果。因此，可以顯著地降低其間患者敞開著躺在手術(shù) 臺上的時間跨度。
應(yīng)當提及的是，所描述的方法僅可以與生物細胞材料一起使用，所 述生物細胞材料不可逆地從患者身體中取出。因此，當執(zhí)行所描述的方 法時，不存在與患者活體的直接相互作用。此外，所描述的方法不能夠 直接導(dǎo)致患者正經(jīng)受痛苦的診斷。所描述的方法只是能夠幫助醫(yī)生根據(jù) 其醫(yī)學(xué)知識找到某種診斷結(jié)果。其中，醫(yī)生也可以考慮其他的診斷方法，其與所描述的方法相結(jié)合能夠幫助醫(yī)生進行更可靠的診斷。換言之，所描述的方法并不用于提供診斷或者關(guān)乎治療患者。所描 述的方法以及本發(fā)明的所有其他方面和實施例僅4又提供附加的和更詳 細的信息，其可以幫助醫(yī)生達到診斷結(jié)果和/或決定適當?shù)尼t(yī)療過程。應(yīng)當指出的是，已經(jīng)針對不同的主題描述了本發(fā)明的實施例。特別 地，已經(jīng)參照設(shè)備類型權(quán)利要求描述了一些實施例，同時參照方法類型 權(quán)利要求描述了其他的實施例。然而，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)上述和以下 描述應(yīng)當能夠推斷，除非另有申明，除了屬于一種類型的主題的特征的 任意組合之外，與不同主題有關(guān)的特征之間，特別是設(shè)備類型權(quán)利要求 的特征與方法類型權(quán)利要求的特征之間的任意組合也都被認為由本申請公開。本發(fā)明的上面限定的方面以及其他的方面根據(jù)以下將要描述的實 施例實例是清楚明白的，并且參照這些實施例實例進行解釋。在下文中， 將參照實施例實例更詳細地描述本發(fā)明，但是本發(fā)明并不限于這些實施 例實例。


所有附圖都示出了用于執(zhí)行與NAD(P)H的自發(fā)焚光測量相結(jié)合的 UV DNA吸收細胞計量術(shù)測量的細胞分析設(shè)備。圖l示出了包括一個UV寬帶光源和兩個檢測器的細胞分析設(shè)備。圖2示出了包括一個UV寬帶光源和一個檢測器的細胞分析設(shè)備，其 中借助于斬波輪實現(xiàn)了光譜分離。圖3示出了包括兩個UV光源和一個檢測器的細胞分析設(shè)備，其中借 助于斬波輪實現(xiàn)光譜分離。圖4示出了用于評估NAD(P)H的自發(fā)焚光壽命的細胞分析設(shè)備，其 中該細胞分析設(shè)備包括兩個UV光源和兩個檢測器，并且其中調(diào)制設(shè)備 用于調(diào)制自發(fā)熒光激發(fā)光束的強度。
具體實施方式
附圖中的圖示是示意性的。應(yīng)當指出的是，在不同的附圖中，給具 有相同功能的相同元件或相似元件提供了附圖標記，其僅在第 一數(shù)字與 相應(yīng)的附圖標記不同。15圖1示出了細胞分析設(shè)備100,其適于進行與NAD(P)H的自發(fā)熒光 相結(jié)合的UVDNA吸收細胞計量術(shù)。該設(shè)備包括承載元件110，其借助 于例如光學(xué)顯微術(shù)中已知的物體支持器來實現(xiàn)。承載元件110支撐細胞 材料115,所述細胞材料可能包含良性或正常細胞以及惡性或癌細胞。 設(shè)備100適于促進細胞115類型的識別，從而與用于細胞分類的已知設(shè) 備相比，細胞識別的速度和可靠性都可以增大。設(shè)備100包括光源裝置120,其依照圖1所示的實施例為寬光譜紫 外光源121。光源121發(fā)射寬帶UV光束，其被導(dǎo)向承載元件110。在光 源121與承載元件110之間，設(shè)置了光學(xué)裝置140。由圖1可見，光學(xué) 裝置140包括場透鏡141、場光闌142、聚光器光闌147以及聚光透鏡 146。所有這些光學(xué)元件都以關(guān)于UV光束的光束路徑對稱的方式設(shè)置。 在場光闌142與聚光器光闌147之間，提供了光語通帶濾波器145。光譜通帶濾波器145被設(shè)計成使得具有260nm周圍的光譜分布的第 一照明光束131以及具有340nm周圍的光譜分布的第二照明光束132能 夠通過光譜通帶濾波器145。優(yōu)選地，光語通帶濾波器145包括這些波 長附近的兩個透射最大值。然而，同樣具有單個寬光譜透射最大值的光 譜通帶濾波器145，使得具有250nm周圍的波長分布的第一電磁輻射以 及具有340nm周圍的波長分布的笫二電磁輻射能夠通過該濾波器145。依照這里描述的實施例，場透鏡141、場光闌142、聚光透鏡146 以及聚光器光闌147表示所謂的K6hler照明系統(tǒng)。這可以提供以下優(yōu)點 可以實現(xiàn)對所研究的細胞材料115的均勻照明，其中諸如寬光譜紫外光 源121的螺旋纏繞燈絲之類的內(nèi)部結(jié)構(gòu)不投影或成像到所研究的細胞材 料115所在的平面上。在通過濾波器145之后，可以假設(shè)具有大約250nm的波長的第一照 明光131以及具有大約340nm的波長的第二照明光132撞擊到細胞材料 115上。其中，這兩個照明光束131、 132沿著相同的公共入射光束路徑 135傳播。具有大約260nm的波長的第一照明光131將主要由所研究的細胞 115的細胞核內(nèi)的DNA吸收。因此，細胞115內(nèi)DNA的數(shù)量將決定透 過細胞材料115的第一測量光152的強度。具有大約340nm的波長的笫二照明光132將主要激發(fā)NAD(P)H, 使得一旦隨后去激發(fā)NAD(P)H，就可以觀察到具有大約445nm的波的自發(fā)熒光信號。依照這里所描述的實施例，這個自發(fā)熒光信號是沿著與第一照明光束131或第二照明光束132的方向共線的方向觀察的。代 表第二測量光的相應(yīng)自發(fā)熒光光束用附圖標記152表示。第二測量光 152和第一測量光151沿著公共出射光束路徑155離開細胞材料115。細胞分析設(shè)備100還包括光學(xué)裝置160。該光學(xué)裝置160包括物鏡 161以及對于具有大約260nm的波長的輻射基本上反射并且對于具有大 約445nm的波長的輻射基本上透明的二向色鏡164。因此，其強度指示 細胞材料115中DNA的數(shù)量的第一測量光151凈皮反射。相應(yīng)地，其強 度指示細胞材料115中NAD(P)H的含量的第二測量光152被透射。細胞分析設(shè)備IOO還包括檢測器裝置170，該檢測器裝置包括第一 檢測器171和第二檢測器172。笫一檢測器171配備了對于大約260nm 的波長具有透射最大值的光譜通帶濾波器165a。第二檢測器172配備了 對于大約445nm的波長具有透射最大值的通帶濾波器165b。由圖1可 見，第一檢測器171在空間上被設(shè)置用于接收反射的第一測量光151, 而第二檢測器172在空間上被設(shè)置用于接收透射的第二測量光152。第一檢測器171提供信號171a,其指示第一測量光151。第二檢測 器172提供信號172a,其指示第二測量光152。信號171a和172a都被 饋送到評估單元180。評估單元180適于通過以適當?shù)姆绞浇M合這兩個 獨立的信號171a和172a來評估它們。因此，可以產(chǎn)生另外的參數(shù)，其 可以表示包含在細胞材料115內(nèi)的細胞類型的可靠指示器。該另外的參 數(shù)可以向醫(yī)生給出有關(guān)細胞材料115的組成的有價值的信息。依照這里所描迷的實施例，第一檢測器171和第二檢測器172是借 助于相機來實現(xiàn)的。相機171、 172具有一定的空間分辨率，其當然也 與物鏡161的焦距有關(guān)。 一定空間分辨率的提供可以提供以下優(yōu)點可 以單獨地檢測來源于各細胞115的光。結(jié)果，可以單獨地研究所研究的 細胞材料115中包含的細胞。這種單獨的研究可以僅僅通過以逐像素的 方式評估記錄的光強來同時進行。因此，第一相機171的每個像素應(yīng)當 分配給第二相4幾172的確定像素以便為可能的兩個測量光151和152進 行組合的空間分辨分析。應(yīng)當提及的是，自發(fā)熒光152的檢測靈敏度可以通過使用有效地阻 擋445nm周圍的可見光的通帶濾波器145來增大。在這種情況下，可以 保證可能已經(jīng)被第二相機172檢測的所有可見光或445nm周圍的光真正由NAD(P)H的自發(fā)焚光效應(yīng)產(chǎn)生，而不是由例如通過不希望的散射效 應(yīng)到達檢測器172的光產(chǎn)生。圖2示出了細胞分析設(shè)備200,其包括單個寬光譜紫外光源221和 公共檢測器270。公共檢測器270 (a)用于接收指示由細胞材料215內(nèi) 的DNA數(shù)量引起的第一照明光231 (260nm)的吸收的第一測量光251 (260nm)并且(b)用于接收指示借助于第一照明光231 ( 340nm )激 發(fā)NAD(P)H而引起的NAD(P)H的自發(fā)熒光信號的強度的笫二測量光 252 ( 445nm )。細胞分析設(shè)備200包括許多部件，這些部件已經(jīng)參照圖1所示的實 施例進行了詳細的解釋。因此，為了避免不必要的重復(fù)，在下文中將主 要描述某些部件，這些部件不同于設(shè)備100的相應(yīng)部件或者這些部件不 用于細胞分析設(shè)備100中。與其中實現(xiàn)了第一測量光151和第二測量光152之間的空間分離的 細胞分析設(shè)備100形成對照的是，細胞分析設(shè)備200使用時間分離以便 將第一測量光251和第二測量光252分開。該時間分離由兩個斬波輪實 現(xiàn)，所述斬波輪即第 一斬波輪245和第二斬波輪265 。第一斬波輪245包括光譜通帶濾波器245a和245b的交替序列。通 帶濾波器245a對于具有大約260nm的波長的輻射是透明的，而通帶濾 波器245b對于具有大約340nm的波長的輻射是透明的。第二斬波輪265包括光譜通帶濾波器265a和265b的交替序列。通 帶濾波器265a對于具有大約260nm的波長的輻射是透明的，而通帶濾 波器265b對于具有大約445nm的波長的輻射是透明的。這兩個斬波輪245和265以同步方式工作，使得在第一時間段內(nèi)， 通帶濾波器245a設(shè)置在照明光束131、 132內(nèi)并且通帶濾波器265a設(shè) 置在測量光束151、 152內(nèi)。相應(yīng)地，在第二時間段內(nèi)，通帶濾波器245b 設(shè)置在照明光束131、132內(nèi)并且通帶濾波器265b設(shè)置在測量光束151、 152內(nèi)。這意味著以順序的方式進行(a) 260nm波長處的DNA吸收測 量以及(b)對于激發(fā)在340nm處和對于去激發(fā)在445nm處的自發(fā)熒光 測量。應(yīng)當提及的是，圖1和圖2中示出的實施例都具有以下優(yōu)點只有 單個UV光源121、 221是必要的，以^更進行UV細胞計量術(shù)吸收測量以 及NAD(P)H激發(fā)。與使用兩個單獨的UV光源形成對照的是，細胞分析設(shè)備100、 200的光學(xué)設(shè)置更容易并且構(gòu)造細胞分析設(shè)備100、 200的 費用更低。圖3示出了細胞分析設(shè)備300,其與圖2所示的細胞分析設(shè)備200 的不同之處在于提供了兩個UV光源321和322而不是單個寬光譜光源 221。第一光源321為深紫外光源，例如汞燈，其發(fā)射包含強的253nm 線的UV輻射。第二光源322可以是優(yōu)選地在340nm處具有發(fā)射最大值 的發(fā)光二極管。由這兩個UV光源321和322發(fā)射的UV輻射通過使用 二向色鏡334而進行空間組合，所述二向色鏡對于253nm基本上透明并 且對于340nm是反射的。如上面已經(jīng)參照圖2所描述的，第一照明光331和第二照明光332 之間的時間分離是通過第一斬波輪345實現(xiàn)的。第一測量光351和第二 測量光352之間的分離是通過第二斬波輪365實現(xiàn)的，所述第二斬波輪 相對于第一斬波輪345以同步的方式工作。；欲知細胞分析設(shè)備300的其 他部件的細節(jié)，請參見前面對于細胞分析設(shè)備100和200的描述。圖4示出了細胞分析設(shè)備400,其結(jié)合了 UV DNA吸收測量，用于 評估所研究的細胞415內(nèi)存在的NAD(P)H的自發(fā)熒光壽命。該細胞分 析設(shè)備包括兩個UV光源421和422以及兩個相機471和472。UV光源421光學(xué)耦合到第一檢測器471。相應(yīng)的第一照明光束431 在撞擊到細胞材料415上之前透過二向色鏡434并且穿過光學(xué)裝置440。 在主要由細胞415的細胞核內(nèi)的DNA引起的部分吸收之后，剩余的第 一測量光束431進入光學(xué)裝置460。在二向色鏡464處，第一測量光束 431被反射并且在通過通帶濾波器465a之后，第一測量光束431由第一 相機471檢測。為了能夠測量NAD(P)H的自發(fā)熒光壽命，必須在時間上調(diào)制第二 照明光束432的強度。優(yōu)選地，不連續(xù)地打開和關(guān)閉第二照明光束，使 得瞬時強度中心(hub)最大。在圖4所描述的實施例中，這是通過斬 波器設(shè)備490實現(xiàn)的，所述斬波器設(shè)備置于第二光源422和二向色鏡434 之間。斬波器設(shè)備490包括分段快門輪，其在旋轉(zhuǎn)時重復(fù)地阻擋第二照明 光432。因此，產(chǎn)生了 NAD(P)H的脈沖式激發(fā)。每個脈沖式激發(fā)引起相 應(yīng)自發(fā)熒光信號的隨后的時間衰減，所述自發(fā)熒光信號由第二相機472 作為第二測量光束452而接收。由于NAD(P)H的激發(fā)不是以無限短激發(fā)脈沖而是在快門輪490的旋轉(zhuǎn)頻率和空間分段給定的有限時間跨度內(nèi) 完成的，因而更容易觀察到激發(fā)的NAD(P)H的平均熒光壽命。欲知細胞分析設(shè)備400的其他部件的細節(jié)，請參見前面對于細胞分 析設(shè)備100、 200和300的描述，其中描述了相應(yīng)的部件。如上面已經(jīng) 指出的，這些部件利用若干附圖標記來表示，所述附圖標記僅僅在第一 數(shù)字上與相應(yīng)的附圖標記不同。應(yīng)當提及的是，為了觀察平均熒光壽命，必不可少的是，至少第二 相機472能夠觀察到第二測量光452的強度的時間依賴關(guān)系。該時間依 賴關(guān)系可以與相同細胞材料415的DNA引起的UV吸收的值結(jié)合使用， 以便可靠地評估細胞材料415的類型。此外，應(yīng)當提及的是，當然本發(fā)明并不限于DNA吸收和NAD(P)H 的自發(fā)熒光的組合測量。本發(fā)明也可以用人類或動物細胞的其他成分來 實現(xiàn)。取決于這些成分的光譜光學(xué)特性，也可以將其他的波長用于第一 照明光和第二照明光。對于濾波器元件也是如此，所述濾波器元件也可 以適于第 一 測量光和第二測量光的其他光譜范圍。用于分析生物細胞材料115、 215、 315、 415的所有描述的細胞分 析設(shè)備100、 200、 300、 400可以特別地應(yīng)用于醫(yī)院或門診中的手術(shù)期 間，這時外科醫(yī)生在切除腫瘤時需要有關(guān)組織惡性的快速信息。此外， 所描述的細胞分析設(shè)備100、 200、 300、 400可以用于癌癥篩查目的。應(yīng)當指出的是，措詞"包括/包含"并沒有排除其他的元件或步驟， 并且"一"或"一個"并沒有排除復(fù)數(shù)。此外，可以對結(jié)合不同實施例 描述的元件進行組合。還應(yīng)當指出的是，權(quán)利要求中的附圖標記不應(yīng)當 被視為對權(quán)利要求范圍的限制。為了概括上面描述的本發(fā)明的實施例，可以做如下陳述描述了用于分析生物細胞材料115的設(shè)備100。設(shè)備100包括光源 裝置120,其適于將笫一 131和第二照明光132導(dǎo)向細胞材料115,其 中第一 131和第二照明光132分別包含第一和第二光語輻射成分。設(shè)備 IOO還包括檢測器裝置170,其適于接收基于第一照明光131與細胞材 料115的第一相互作用的笫一測量光151以及基于第二照明光152與細 胞材料115的第二相互作用的第二測量光152。此外，設(shè)備100包括評 估單元180，其耦合到檢測器裝置170并且其適于評估分別指示第一 151 和第二測量光151的第一信號171a和第二信號171b。設(shè)備100可以用于實現(xiàn)與NAD(P)H的自發(fā)熒光測量相結(jié)合的紫外DNA圖像細胞計量術(shù)。
附圖標記列表
100 細胞分析設(shè)備
110 承載元件、物體支持器
115 細胞材料
120 光源裝置
121 寬光譜紫外光源
131 第一照明光
132 第二照明光
135 公共入射光束路徑
140 光學(xué)裝置
141 場透鏡
142 場光闌
145 通帶濾波器(260nm和340nm )
146 聚光透鏡
147 聚光器光闌
151 第一測量光、透射光
152 第二測量光、熒光155 公共出射光束^各徑
160 光學(xué)裝置
161 物鏡
164 二向色鏡(對于260nm是反射的，對于445nm是透明的)165a 通帶濾波器(260nm)165b 通帶濾波器(445nm)
170 檢測器裝置
171 第一檢測器、第一相機171a 第一信號
172 第二檢測器、第二相機172a 第二信號
180 評估單元200 細胞分析設(shè)備
210 承載元件、物體支持器
215 細胞材料
220 光源裝置
221 寬光語紫外光源
231 第一照明光
232 第二照明光
235 公共入射光束路徑
240 光學(xué)裝置
241 場透鏡
242 場光闌
245 第一斬波輪
245a 通帶濾波器(260nm)
245b 通帶濾波器(340nm)
246 聚光透鏡
247 聚光器光闌
251 第一測量光、透射光
252 第二測量光、焚光255 公共出射光束路徑
260 光學(xué)裝置
261 物鏡
265 第二斬波輪
265a 通帶濾波器(260nm)
265b 通帶濾波器(445nm)
270 檢測器裝置、公共檢測器、公共相機
271a 第一信號
272a 第二信號
280 評估單元
300 細胞分析設(shè)備
310承載元件、物體支持器
315 細胞材料
320 光源裝置
22321第一光源、深紫外光源；汞燈
322 第二光源、340nmLED
331 第一照明光
332 第二照明光
334 二向色鏡(對于253nm是透明的，對于340nm是反射的)
335 公共入射光束^各徑
340 光學(xué)裝置
341 場透鎮(zhèn)
342 場光闌
345 第一斬波輪
345a 通帶濾波器(260nm)345b 通帶濾波器(340nm)
346 聚光透鏡
347 聚光器光闌
351 第一測量光、透射光
352 第二測量光、熒光355 公共出射光束路徑
360 光學(xué)裝置
361 物鏡
365 第二斬波輪
365a 通帶濾波器(260nm)
365b 通帶濾波器(445nm)
370 檢測器裝置、公共檢測器、公共相機
371a第一信號
372a 第二信號
380 評估單元
400 細胞分析設(shè)備
410承載元件、物體支持器
415 細胞材料
420 光源裝置
421第一光源、深紫外光源；汞燈
422 第二光源、340nmLED431 笫一照明光
432 第二照明光
434 二向色鏡(對于260nm是反射的，對于340nm是透明的)
435 公共入射光束路徑
440 光學(xué)裝置
441 場透鏡
442 場光闌
446 聚光透鏡
447 聚光器光闌
451 第一測量光、透射光
452 第二測量光、熒光455 公共出射光束路徑
460 光學(xué)裝置
461 物鏡
464 二向色鏡(對于260nm是反射的，對于445nm是透明的)465a 通帶濾波器(260nm)465b 通帶濾波器(445nm)
470 檢測器裝置
471 第一檢測器、第一相機471a第一信號
472 第二檢測器、第二相機472a 第二信號
480 評估單元
490 光調(diào)制設(shè)備、斬波器設(shè)備
權(quán)利要求
1.一種用于分析生物細胞材料(115，215，315，415)的設(shè)備，該設(shè)備包括光源裝置(120，220，320，420)，其適于將第一照明光(131，231，331，431)和第二照明光(132，232，332，432)導(dǎo)向生物細胞材料(115，215，315，415)，其中第一照明光(131，231，331，431)包含第一光譜輻射成分并且第二照明光(132，232，332，432)包含第二光譜輻射成分；檢測器裝置(170，270，370，470)，其適于接收-第一測量光(151，251，351，451)，所述第一測量光基于第一照明光(131，231，331，431)與細胞材料(115，215，315，415)的第一相互作用，和-第二測量光(132，232，332，432)，所述第二測量光基于第二照明光(132，232，332，432)與細胞材料(115，215，315，415)的第二相互作用；以及評估單元(180，280，380，480)，其耦合到檢測器裝置(170，270，370，470)并且其適于評估-指示第一測量光(151，251，351，451)的第一信號(171a，271a，371a，471a)，和-指示第二測量光(132，232，332，432)的第二信號(172a，272a，372a，472a)。
2. 依照權(quán)利要求l的設(shè)備，還包括用于支撐細胞材料(115, 215, 315, 415)的承載元件(110， 210， 310， 410)。
3. 依照權(quán)利要求l的設(shè)備，其中所述第一相互作用是吸收和/或所述 第二相互作用是發(fā)射熒光。
4. 依照權(quán)利要求3的設(shè)備，其中第一照明光(131, 231, 331, 431 )適于借助于所述第一相互作用 與生物細胞材料(115, 215， 315， 415)的笫一細胞成分相互作用，和/或第二照明光(132, 232, 332， 432)適于借助于所述第二相互作用 與生物細胞材料(115， 215, 315， 415)的第二細胞成分相互作用。
5. 依照權(quán)利要求4的設(shè)備，其中 所述第一細胞成分為DNA,和/或所述第二細胞成分為用于細胞新陳代謝的酶，尤其是NAD(P)H。
6. 依照權(quán)利要求l的設(shè)備，其中第一照明光(131， 231, 331, 431 )和第二照明光(132, 232, 332， 432 )是包括一定波長的紫外光，所述波長介于150nm與350nm之間，優(yōu) 選地介于200nm與300nm之間，更優(yōu)選地介于230nm與270nm之間。
7. 依照權(quán)利要求l的設(shè)備，其中第二照明光(132, 232， 332, 432 )是包括一定波長的紫外光，所 述波長介于280nm與400nm之間，優(yōu)選地介于320nm與360nm之間，更優(yōu) 選地介于330nm與350nm之間，并且第二測量光(152, 252， 352， 452 )是包括一定波長的可見光，所 述波長介于345nm與545nm之間，優(yōu)選地介于400nm與490nm之間，更優(yōu) 選地介于430nm與460nm之間。
8. 依照權(quán)利要求l的設(shè)備，其中所述光源裝置(120, 220， 320, 420)包括寬光譜紫外光源(121, 221 )。
9. 依照權(quán)利要求l的設(shè)備，其中 所述光源裝置(120， 220, 320, 420)包括產(chǎn)生第一照明光(131, 231, 331， 431 )的第一光源(321, 421 ),以及產(chǎn)生第二照明光(132, 232， 332, 432)的笫二光源(322, 422 )。
10. 依照權(quán)利要求l的設(shè)備，還包括用于將笫一照明光(131, 231, 331, 431 )和/或第二照明光(132, 232, 332, 432 )聚焦到生物細胞材料(115, 215， 315， 415)上的光 學(xué)裝置(140, 240, 340， 440)。
11. 依照權(quán)利要求l的設(shè)備，其中 所述檢測器裝置(170， 270, 370， 470)包括 用于接收第一測量光(151, 251, 351, 451 )的第一檢測器(171,471),以及用于接收第二測量光(132, 232, 332, 432 )的第二檢測器(172, 472 )。
12. 依照權(quán)利要求l的設(shè)備，其中 所述檢測器裝置(170, 270, 370， 470)包括 用于接收第一測量光(151, 251, 351, 451 )和第二測量光(132，232， 332, 432)的公共沖企測器(270, 370),并且其中 該設(shè)備還包括用于以交替的方式允許第一測量光(151， 251, 351， 451)和第二 測量光(132, 232， 332， 432 )通過的斬波器設(shè)備(245， 265, 345, 365 )。
13. 依照權(quán)利要求l的設(shè)備，其中第一照明光(131, 231， 331, 431 )和笫二照明光(132, 232, 332， 432 )沿著公共入射光束路徑(135, 235， 335, 435 )撞擊到生物細胞 材料(115, 215， 315， 415)上，并且第一測量光(151， 251， 351, 451 )和第二測量光(132， 232， 332, 432 )沿著公共出射光束路徑(155， 255, 355, 455 )離開生物細胞材 料(115， 215, 315, 415),其中公共入射光束路徑(135, 235, 335， 435 )和公共出射光束路徑(155, 255, 355， 455 )相對于彼此是共線的。
14. 依照權(quán)利要求3的設(shè)備，其中所述檢測器裝置(470)適于測量指示第二測量光(432)的第二信 號(472a)的時間依賴關(guān)系，并且所述評估單元(480)適于評估第二信號(472a)的時間依賴關(guān)系。
15. 依照權(quán)利要求14的設(shè)備，還包括光調(diào)制設(shè)備(490 ),其適于調(diào)制作為時間的函數(shù)的第二照明光(432 ) 的強度。
16. —種用于分析生物細胞材料(115, 215, 315， 415)的方法， 該方法包括將來自光源裝置(120, 220, 320, 420)的包含第一光譜輻射成分 的第一照明光(131, 231， 331， 431 )導(dǎo)向細胞材料(115， 215, 315, 415);將來自光源裝置(120， 220, 320， 420)的包含第二光鐠輻射成分 的第二照明光(132, 232, 332, 432 )導(dǎo)向細胞材料(115, 215, 315, 415);借助于檢測器裝置(170, 270， 370, 470)接收第一測量光(151, 251， 351, 451 ),所述第一測量光基于第一照明光(131, 231, 331,431 )與細胞材料(115， 215, 315， 415)的第一相互作用； 借助于檢測器裝置(170, 270, 370, 470)接收第二測量光(132,232， 332, 432 ),所述第二測量光基于第二照明光(132， 232， 332，432 )與細胞材料(115， 215, 315， 415)的第二相互作用； 評估指示第一測量光(151， 251, 351, 451 )的第一信號；以及 評估指示第二測量光(132， 232, 332, 432 )的第二信號。
全文摘要
描述了用于分析生物細胞材料(115)的設(shè)備(100)。該設(shè)備(100)包括光源裝置(120)，其適于將第一(131)和第二照明光(132)導(dǎo)向細胞材料(115)，其中第一(131)和第二(132)照明光分別包含第一和第二光譜輻射成分。該設(shè)備(100)還包括檢測器裝置(170)，其適于接收基于第一照明光(131)與細胞材料(115)的第一相互作用的第一測量光(151)以及基于第二照明光(152)與細胞材料(115)的第二相互作用的第二測量光(152)。此外，該設(shè)備(100)包括評估單元(180)，其耦合到檢測器裝置(170)并且其適于評估分別指示第一(151)和第二測量光(151)的第一信號(171a)和第二信號(171b)。該設(shè)備(100)可以用于實現(xiàn)與NAD(P)H的自發(fā)熒光測量相結(jié)合的紫外DNA圖像細胞計量術(shù)。
文檔編號G01N21/31GK101632012SQ200880008207
公開日2010年1月20日 申請日期2008年3月10日 優(yōu)先權(quán)日2007年3月13日
發(fā)明者B·H·W·亨德里克斯, G·胡夫特, R·W·I·德博爾, S·凱珀 申請人:皇家飛利浦電子股份有限公司