專利名稱：一種鑒別長(zhǎng)鰭籃子魚精子活力的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖魚類精子活力的檢測(cè)。
背景技術(shù)：
在生產(chǎn)實(shí)踐中，魚類精子活力的好壞是反應(yīng)受精率高低的重要指標(biāo)之一，因此，客觀準(zhǔn)確評(píng)價(jià)魚類精子的活力具有非常重要的理論意義與應(yīng)用價(jià)值。在評(píng)價(jià)魚類精子活力時(shí)，目前主要有以下幾種方法一、利用普通顯微鏡觀察記錄精子的活動(dòng)狀況和運(yùn)動(dòng)時(shí)間，這種方法受人為因素的影響較大，不能客觀反應(yīng)精子的活動(dòng)狀況；二、利用魚類精子直接開展受精試驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)受精率、孵化率、出膜率等，這種方法受外界環(huán)境因子較多，且隨著不同魚類的早期發(fā)育時(shí)間的長(zhǎng)短試驗(yàn)周期會(huì)有較大變化；三、用計(jì)算機(jī)輔助分析系統(tǒng)(CASA)分析
精子的運(yùn)動(dòng)速率和運(yùn)動(dòng)距離等，這種方法能客觀反應(yīng)精子的活動(dòng)情況，但儀器設(shè)備較為昂
蟲貝°

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題是提供一種鑒別長(zhǎng)鰭籃子魚精子活力的方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案配備試劑盒和紫外分光光度計(jì)，在長(zhǎng)鰭籃子魚的繁殖季節(jié)，分批采集一定量的精子，其特征是用試劑盒在紫外分光光度計(jì)下分別測(cè)定不同批次精子中總ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脫氫酶(SDH)和乳酸脫氫酶(LDH)的活性，精子中ATP酶的活性高于9. 20±0. 28U/ml， CK的活性高于25. 59±0. 13U/ml， SDH的活性高于18. 33±2. 52U/ml， LDH的活性高于14828. 66±866. 56U/L，為精子活力較好；精子中ATP酶的活性介于4. 18±0. 81U/ml和9. 20±0. 28U/ml之間，CK的活性介于17. 87±0. 56U/ml和25. 59±0. 13U/ml之間，SDH的活性介于9. 33±1. 53U/ml和18. 33±2. 52U/ml之間，LDH的活性介于11324. 33±689. 58U/L和14828. 66±866. 56U/L之間，為精子活力一般；精子中ATP酶的活性低于4. 18±0. 81U/ml， CK的活性低于17. 87±0. 56U/ml， SDH的活性低于9. 33±1. 53U/ml， LDH的活性低于11324. 33±689. 58U/L，則為精子活力差。
本發(fā)明的突出特點(diǎn)是研究了不同活力的長(zhǎng)鰭籃子魚精子相關(guān)能量代謝酶的活性有較大差別，提供了鑒別長(zhǎng)鰭籃子魚精子中總ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脫氫酶(SDH)和乳酸脫氫酶(LDH)活性的相應(yīng)數(shù)據(jù)，并通過精子相關(guān)能量代謝酶活性檢測(cè)，根據(jù)酶活性的高低，并運(yùn)用本方法提供的相應(yīng)數(shù)據(jù)來鑒別大黃魚精子的活力，具有準(zhǔn)確客觀的顯著效果，鑒別準(zhǔn)確率達(dá)到98%以上。
具體實(shí)施例方式
在長(zhǎng)鰭籃子魚的繁殖季節(jié)，分批采集長(zhǎng)鰭籃子魚的精子，每批次取5尾魚精子，用試劑盒(按照南京建成生物工程研究所公開的該產(chǎn)品操作指導(dǎo)書進(jìn)行)在紫外分光光度計(jì)下分別測(cè)定不同批次精子中總ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脫氫酶(SDH)和乳酸脫氫酶(LDH)的活性，每個(gè)樣重復(fù)三次，結(jié)果取平均值，運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析處理，
3如果精子中ATP酶的平均活性高于9. 20±0. 28U/ml， CK的平均活性高于25. 59±0. 13U/ml， SDH的平均活性高于18. 33±2. 52U/ml， LDH的平均活性高于14828. 66±866. 56U/L,為精子活力較好；如果精子中ATP酶的平均活性介于4. 18±0. 81U/ml和9. 20±0. 28U/ml之間，CK的平均活性介于17. 87±0. 56U/ml和25. 59±0. 13U/ml之間，SDH的平均活性介于9. 33±1. 53U/ml和18. 33±2. 52U/ml之間，LDH的平均活性介于11324. 33±689. 58U/L和14828. 66±866. 56U/L之間，則為精子活力一般；如果精子中ATP酶的平均活性低于4. 18±0. 81U/ml，CK的平均活性低于17. 87±0. 56U/ml， SDH的平均活性低于9. 33±1. 53U/ml， LDH的平均活性低于11324. 33±689. 58U/L，則為精子活力差。 運(yùn)用這種方法鑒別長(zhǎng)鰭籃子魚精子活力較為準(zhǔn)確和客觀，鑒別準(zhǔn)確率可達(dá)到98%以上。
權(quán)利要求
一種鑒別長(zhǎng)鰭籃子魚精子活力的方法，配備試劑盒和紫外分光光度計(jì)，在長(zhǎng)鰭籃子魚的繁殖季節(jié)，分批采集一定量的精子，其特征是用試劑盒在紫外分光光度計(jì)下測(cè)定不同批次精子中總ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脫氫酶(SDH)和乳酸脫氫酶(LDH)的活性，精子中ATP酶的活性高于9.20±0.28U/ml，CK的活性高于25.59±0.13U/ml，SDH的活性高于18.33±2.52U/ml，LDH的活性高于14828.66±866.56U/L，為精子活力較好；精子中ATP酶的活性介于4.18±0.81U/ml和9.20±0.28U/ml之間，CK的活性介于17.87±0.56U/ml和25.59±0.13U/ml之間，SDH的活性介于9.33±1.53U/ml和18.33±2.52U/ml之間，LDH的活性介于11324.33±689.58U/L和14828.66±866.56U/L之間，為精子活力一般；精子中ATP酶的活性低于4.18±0.81U/ml，CK的活性低于17.87±0.56U/ml，SDH的活性低于9.33±1.53U/ml，LDH的活性低于11324.33±689.58U/L，則為精子活力差。
全文摘要
一種鑒別長(zhǎng)鰭籃子魚精子活力的方法，涉及魚類精子檢測(cè)，本發(fā)明采集長(zhǎng)鰭籃子魚精子，其特征是用試劑盒測(cè)定精子中總ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脫氫酶(SDH)和乳酸脫氫酶(LDH)的活性，精子中ATP酶的活性高于9.20±0.28U/ml，CK的活性高于25.59±0.13U/ml，SDH的活性高于18.33±2.52U/ml，LDH的活性高于14828.66±866.56U/L，為活力較好；精子中ATP酶的活性低于4.18±0.81U/ml，CK的活性低于17.87±0.56U/ml，SDH的活性低于9.33±1.53U/ml，LDH的活性低于11324.33±689.58U/L，為活力差。
文檔編號(hào)G01N21/33GK101776587SQ20091004518
公開日2010年7月14日 申請(qǐng)日期2009年1月12日 優(yōu)先權(quán)日2009年1月12日
發(fā)明者馮廣朋, 劉鑒毅, 姚志峰, 莊平, 張濤, 江琪, 章龍珍, 趙峰, 閆文罡, 黃曉榮 申請(qǐng)人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所