專利名稱：自動(dòng)蛋白印跡分析儀的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種蛋白印跡實(shí)驗(yàn)裝置，特別是涉及一種自動(dòng)蛋白印跡(Western Blot)分析儀。
背景技術(shù)：
蛋白免疫印跡法是一種借助特異性抗體鑒定抗原的有效方法，該方法是在凝膠電 泳和固相免疫測(cè)定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。蛋白免疫印跡法是把電 泳分離的蛋白質(zhì)組分從凝膠轉(zhuǎn)移至一種固相支持體，通過抗體與附著于固相支持物的靶蛋 白所呈現(xiàn)的抗原表位發(fā)生特異性免疫反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)，整個(gè)過程包括蛋白質(zhì)電泳分離，電轉(zhuǎn) 移，免疫學(xué)檢測(cè)和信號(hào)檢測(cè)四部分。目前，現(xiàn)有的蛋白印跡實(shí)驗(yàn)中免疫檢測(cè)部分包括如下過 程封閉，第一抗體結(jié)合，清洗，第二抗體結(jié)合，清洗。在該部分實(shí)驗(yàn)流程中需要處理的試劑 為封閉液，第一抗體稀釋液，清洗緩沖液，第二抗體稀釋液，清洗緩沖液。目前采用的是手工 操作的方法來更換不同的試劑，頻繁的換液操作增加了實(shí)驗(yàn)者的工作強(qiáng)度并且浪費(fèi)時(shí)間。同時(shí)，蛋白印跡檢測(cè)傳統(tǒng)方法是采用手工將各個(gè)操作步驟連續(xù)成完整檢測(cè)，缺點(diǎn) 是繁瑣而復(fù)雜，人與具潛在性感染血物品的接觸多，人為操作差異和環(huán)境變化而造成的試 驗(yàn)結(jié)果差異，工作強(qiáng)度高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是為了克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種自動(dòng)蛋白印跡分 析儀，該分析儀能自動(dòng)地完成配液、吸液、孵育、沖洗和加底物液等一系列操作，批量處理各 個(gè)蛋白印跡檢測(cè)分析，可以減少操作者工作強(qiáng)度和節(jié)省時(shí)間。本發(fā)明是通過下述技術(shù)方案來解決上述技術(shù)問題的一種自動(dòng)蛋白印跡分析儀， 其特征在于，其包括孵育搖床、加液臂部件、移位電機(jī)、吸液臂部件、吸液電機(jī)、帶報(bào)警負(fù)壓 吸液泵和復(fù)數(shù)個(gè)加液數(shù)字泵，孵育搖床具有復(fù)數(shù)個(gè)孵育槽，加液臂部件和吸液臂部件安裝 于一滑動(dòng)機(jī)械裝置上并分別對(duì)孵育搖床中的孵育槽進(jìn)行加試液和吸廢液，加液臂部件和移 位電機(jī)、加液數(shù)字泵連接，吸液臂部件和吸液電機(jī)、帶報(bào)警負(fù)壓吸液泵連接。優(yōu)選地，所述自動(dòng)蛋白印跡分析儀還包括一隔離罩，該隔離罩完全罩住搖床部件、 加液臂部件、吸液臂部件和滑動(dòng)機(jī)械裝置。優(yōu)選地，所述加液數(shù)字泵與一洗液瓶或一試劑瓶連接。優(yōu)選地，所述加液臂部件包括加液咀和加液膠管，加液咀連接加液膠管的一端，加 液膠管的另一端與數(shù)字加液泵連接。本發(fā)明的積極進(jìn)步效果在于本發(fā)明自動(dòng)蛋白印跡分析儀是在計(jì)算機(jī)控制下自動(dòng) 將各個(gè)操作步驟連續(xù)成完整檢測(cè)分析，操作簡(jiǎn)單，自動(dòng)報(bào)警，自動(dòng)化程度高，可無人值守，蛋 白印跡分析標(biāo)準(zhǔn)化。而且，本發(fā)明把人與具潛在性感染血物品的接觸減少到最低程度，使免 疫印跡分析標(biāo)準(zhǔn)化，有效地減少了因?qū)嶒?yàn)室環(huán)境變化而造成的分析結(jié)果差異，其精確的配 液和吸液系統(tǒng)確保分析結(jié)果的一致性，并防止樣品槽間的交叉污染。


圖1為本發(fā)明自動(dòng)蛋白印跡分析儀的模塊框圖。圖2為本發(fā)明自動(dòng)蛋白印跡分析儀的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3為本發(fā)明中的孵育搖床的結(jié)構(gòu)示意圖。圖4為本發(fā)明中的加液臂部件和吸液臂部件的結(jié)構(gòu)示意圖。圖5為本發(fā)明中的滑動(dòng)機(jī)械裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。圖6為本發(fā)明中的加液數(shù)字泵的結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖給出本發(fā)明較佳實(shí)施例，以詳細(xì)說明本發(fā)明的技術(shù)方案。如圖1所示，本發(fā)明自動(dòng)蛋白印跡分析儀主要包括孵育搖床1、加液臂部件4、移位 電機(jī)5、吸液臂部件6、吸液電機(jī)7、帶報(bào)警負(fù)壓吸液泵8和復(fù)數(shù)個(gè)加液數(shù)字泵9(本發(fā)明中 采用六個(gè))，孵育搖床1為具有三十六個(gè)孵育槽的搖床，其包括相互連接的搖床電機(jī)2和搖 床部件3，孵育搖床1的功能是在軟件控制下，對(duì)敷在搖床表面一次性孵育槽內(nèi)加試液的試 膜條均勻搖擺，以便槽內(nèi)試液均勻覆蓋試膜條，搖床平面具有加溫功能。加液臂部件4為六 通道加液臂部件，其具有對(duì)孵育搖床1中三十六孵育槽(一次性)分槽加試液的功能，加液 臂部件4和六個(gè)加液數(shù)字泵9連接并組合，在軟件控制下，最多有達(dá)六種不同試液選擇和 50-3000uL之內(nèi)數(shù)字定量加液選擇。加液臂部件4包括加液支臂、加液咀和加液膠管，加液 膠管可與加液數(shù)字泵9連接，加液臂部件4與移位電機(jī)5連接，并由移位電機(jī)5給加液臂部 件4提供動(dòng)力。吸液臂部件6的功能是對(duì)搖床中三十六孵育槽內(nèi)試膜條加的試液反應(yīng)后， 在軟件控制下，吸液臂部件6和帶報(bào)警負(fù)壓吸液泵8組成的負(fù)壓吸液裝置對(duì)槽內(nèi)反應(yīng)后的 廢液迅速吸去，吸液電機(jī)7與吸液臂部件6連接并提供動(dòng)力。加液臂部件4和吸液臂部件6 是安裝在一滑動(dòng)機(jī)械裝置上，在軟件控制下，可精確對(duì)準(zhǔn)孵育盤三十六槽，以便加試液和吸 廢液。如圖2所示，本發(fā)明還包括加液數(shù)字泵電機(jī)10、洗液瓶11、試劑瓶12、廢液瓶13和 零位傳感器14，每個(gè)加液數(shù)字泵電機(jī)10對(duì)應(yīng)一個(gè)加液數(shù)字泵9并給加液數(shù)字泵9提供動(dòng) 力，一個(gè)加液數(shù)字泵9與洗液瓶11連接，其余五個(gè)加液數(shù)字泵9分別與試劑瓶12連接來抽 取試劑，廢液通過吸液臂部件6由帶報(bào)警負(fù)壓吸液泵8吸入廢液瓶13內(nèi)，零位傳感器14用 于檢測(cè)吸液電機(jī)7的轉(zhuǎn)動(dòng)角度。當(dāng)然，本發(fā)明還可以包括一隔離罩，該隔離罩可以完全罩住 搖床部件、加液臂部件、吸液臂部件和滑動(dòng)機(jī)械裝置，起到工作面與外部安全隔離，隔離罩 可開合。如圖3所示，搖床部件3包括搖床平臺(tái)31、加熱模塊32、傳感器33、偏心機(jī)構(gòu)34、 平臺(tái)托座和偏心支架構(gòu)成，搖床平臺(tái)31固定于平臺(tái)托座上，搖床平臺(tái)31和平臺(tái)托座的中間 夾住加熱模塊32，加熱模塊32可為搖床平臺(tái)31提供三種恒溫溫度，平臺(tái)托座兩端分別安 裝于兩搖床支架上，搖床支架固定于大平臺(tái)上，搖床平臺(tái)31可沿?fù)u床支架左右擺動(dòng)，偏心 支架固定于平臺(tái)托座下部一端，偏心支架下端Y 口插入大平臺(tái)背面的偏心機(jī)構(gòu)34，偏心機(jī) 構(gòu)34由搖床電機(jī)2提供動(dòng)能，搖床電機(jī)2轉(zhuǎn)動(dòng)帶動(dòng)偏心機(jī)構(gòu)34轉(zhuǎn)動(dòng)，偏心機(jī)構(gòu)34轉(zhuǎn)動(dòng)帶 動(dòng)偏心支架Y 口作上下曲軸運(yùn)動(dòng)，使搖床平臺(tái)31作左右擺動(dòng)，實(shí)現(xiàn)搖床功能。在搖床平臺(tái)
43上1覆蓋一次性孵育三十六槽(塑制)，所有蛋白印跡檢測(cè)，加液、孵育、結(jié)合、加樣、清洗 等都在槽內(nèi)進(jìn)行，可同時(shí)進(jìn)行三十六樣品檢測(cè)。如圖4和圖5所示，加液臂部件4和吸液臂部件6安裝在一滑動(dòng)機(jī)械裝置上，滑動(dòng) 機(jī)械裝置包括滑動(dòng)長(zhǎng)軸81、長(zhǎng)軸支架、移動(dòng)電機(jī)82、同步輪、移動(dòng)托架部件、同步帶83、移動(dòng) 電機(jī)82側(cè)位于第一傳感器84和位于吸液臂部件6側(cè)的第二傳感器85。移動(dòng)托架部件中具 有軸套，軸套在滑動(dòng)長(zhǎng)軸內(nèi)，移動(dòng)托架部件可在滑動(dòng)長(zhǎng)軸內(nèi)滑動(dòng)，加液臂部件4和吸液臂部 件6是固定在移動(dòng)托架部件上，長(zhǎng)軸支架將長(zhǎng)軸支撐在臺(tái)面上，在長(zhǎng)軸兩端同步輪套入移 動(dòng)電機(jī)82出軸，裝上同步帶83，同步帶83 —邊與移動(dòng)托架部件固定，當(dāng)控制移動(dòng)電機(jī)82轉(zhuǎn) 動(dòng)，即帶動(dòng)同步輪和同步帶83移動(dòng)，使托架部件直線來回移動(dòng)，也就是加液臂部件4和吸液 臂部件6來回移動(dòng)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)孵育盤一至三十六槽加液和吸液分槽定位功能，第一傳感 器84和第二傳感器85反饋定位狀態(tài)。加液臂部件4包括加液支臂41、加液膠管和六個(gè)成 一線排列的加液咀42，加液臂部件4固定于滑動(dòng)機(jī)械裝置的移動(dòng)托架部件上，加液咀42的 上部可連接加液膠管一端，加液膠管另一端與數(shù)字加液泵9連接，由數(shù)字加液泵9向加液咀 42提供設(shè)定試液，加液咀42的下部為出液口，六個(gè)加液咀42組成六通道加試液通道。吸液 臂部件6包括相互配合的吸液支臂61和滑槽支臂62以及吸液咀和吸液膠管，吸液支臂61 的中軸滑套于滑動(dòng)機(jī)械裝置的滑動(dòng)長(zhǎng)軸81內(nèi)，可上下沿軸芯移動(dòng)，作為伸入孵育槽吸液工 作要求。吸液咀固定于吸液支臂61的一端，吸液咀上部可連接吸液膠管一端，吸液膠管另 一端與負(fù)壓廢液瓶相通。吸液臂部件的滑槽支臂62通過中心軸孔固定于吸液電機(jī)7的出 軸上，吸液電機(jī)7轉(zhuǎn)動(dòng)一定角度，帶動(dòng)滑槽支臂62轉(zhuǎn)動(dòng)，使得在滑槽支臂62上滑槽，帶動(dòng)與 之相配合的吸液支臂61中軸沿著滑套于滑動(dòng)機(jī)械裝置的滑動(dòng)長(zhǎng)軸81作上下運(yùn)動(dòng)，控制吸 液電機(jī)7轉(zhuǎn)動(dòng)角度，這樣就控制吸液臂部件6的運(yùn)動(dòng)軌跡。零位傳感器14固定于滑槽支臂 62 一端，用于檢測(cè)吸液電機(jī)7的轉(zhuǎn)動(dòng)角度。如圖6所示，加液數(shù)字泵9包括泵輪、壓臂91、彈性扣92、泵管93、進(jìn)液管94、出液 管、安裝板和泵電機(jī)，泵輪套入泵電機(jī)出軸中，泵電機(jī)固定于安裝板上，壓臂91 一端用連軸 連接于安裝板右下端，使壓臂91可沿連軸作轉(zhuǎn)動(dòng)，在安裝板左端，將彈性扣92 —端另件固 定在安裝板上，彈性扣92另一端可左右沿上端移動(dòng)，以便壓臂91 一端的開口切入定位。當(dāng) 泵管93放入泵輪上，將壓臂91 一端開口切入彈性扣92內(nèi)鎖緊，則使泵管93在壓臂91作用 下被壓扁于泵輪上，泵管93右端套上進(jìn)液管94 一端，進(jìn)液管94另一端伸入試劑瓶12，泵管 93左端套上出液管一端，另一端與加液臂的加液咀連接，當(dāng)控制泵電機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)，帶動(dòng)泵輪對(duì)泵 管93的擠壓，在產(chǎn)生負(fù)壓，從試劑瓶12通過管路吸上試液，從出液B 口將試液輸送到加液 臂的加液咀上，泵電機(jī)是數(shù)字化步進(jìn)電機(jī)，控制泵電機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)，使泵的出液量，由軟件控制，加 液數(shù)字泵理論上可從1-3000UL任意設(shè)定，其精確度可每泵分別標(biāo)定。加液數(shù)字泵不但可以 順時(shí)轉(zhuǎn)，作為正常工作，也可逆時(shí)轉(zhuǎn)，作為回收管路內(nèi)試液。本發(fā)明具有自動(dòng)配液、吸液、孵育、沖洗、加底物液、加結(jié)合物和自動(dòng)清洗功能，本 發(fā)明進(jìn)行免疫蛋白印跡檢測(cè)(Western Blotting)方法檢測(cè)時(shí)，本發(fā)明可對(duì)蛋白印跡檢測(cè) 的配液、吸液、孵育、沖洗、加底物液、加結(jié)合物、循環(huán)次數(shù)和自動(dòng)清洗等功能，通過本發(fā)明配 置應(yīng)用軟件，由操作者根據(jù)各種蛋白印跡(Western Blotting)試劑盒的標(biāo)明參數(shù)，輸入本 發(fā)明配置應(yīng)用軟件中，編制各種測(cè)試項(xiàng)目，各種測(cè)試項(xiàng)目可以長(zhǎng)期儲(chǔ)存，也可修改。測(cè)試項(xiàng) 目最多包含二十個(gè)獨(dú)立步驟，可對(duì)各獨(dú)立步驟內(nèi)孵育時(shí)間、加試液量、吸不吸液、工步報(bào)警
5及循環(huán)次數(shù)和步驟名稱進(jìn)行設(shè)定。本發(fā)明配有加液臂部件，通過編程控制，根據(jù)蛋白印跡 (Western Blotting)試驗(yàn)要求，在同一測(cè)試中，可最多單獨(dú)分別加入六種不同試液。在每 次蛋白印跡試膜條和某種試液反應(yīng)后，其廢試液需收集于本發(fā)明特配廢液裝置中，本發(fā)明 配有專門吸液和廢液收集裝置。本發(fā)明的操作平臺(tái)是一搖床部件，搖床部件具有三種搖擺 速率選擇，由本發(fā)明的軟件控制。本發(fā)明在搖床上覆一塑制一次性三十六孵育槽，試液和 蛋白印跡膜條都加入或放入孵育槽內(nèi)孵育和反應(yīng)，搖床部件具有三種不同加溫功能。本發(fā) 明的加液臂部件和吸液臂部件安裝于同一滑動(dòng)機(jī)械裝置上，控制滑動(dòng)機(jī)械裝置上的移位電 機(jī)，就能使加液臂和吸液臂對(duì)準(zhǔn)搖床表面覆蓋一次性孵育盤一至三十六槽中的任意槽位， 并且加液臂和吸液臂前后安裝位置只差一個(gè)槽位，吸液臂在前，加液臂在后，當(dāng)吸液臂的吸 咀對(duì)準(zhǔn)后一槽位，則加液臂的加液咀對(duì)準(zhǔn)前一個(gè)槽位，當(dāng)吸液臂吸咀吸后一槽位內(nèi)Pl反應(yīng) 后廢棄試液時(shí)，加液臂同時(shí)對(duì)前一個(gè)槽位加入程序來設(shè)定P2試液。綜上所述，本發(fā)明是由 搖床部件、加液臂部件、吸液和廢液收集部件裝置、移位機(jī)械部件裝置和電子軟件系統(tǒng)等構(gòu) 成。加液臂部件和吸液臂部件安裝于滑動(dòng)機(jī)械裝置上，只需數(shù)字化控制步進(jìn)電機(jī)，就能精確 控制加液臂組件和吸液臂組件定位，適宜個(gè)別、批量任意選擇，吸液和加液前后同時(shí)進(jìn)行， 縮短操作過程。加液臂部件是由六個(gè)單獨(dú)加液數(shù)字泵和加液臂及膠管組成，加液數(shù)字泵是 機(jī)電一體化設(shè)計(jì)部件，抽取數(shù)字化，易清洗。吸液和廢液收集是在全封閉狀態(tài)下，無污染。本發(fā)明進(jìn)入洗液步驟后，軟件控制滑動(dòng)機(jī)械上的移位電機(jī)，使之滑動(dòng)機(jī)械上的加 液臂移動(dòng)對(duì)準(zhǔn)搖床上三十六孵育槽設(shè)定槽上，軟件控制其中一個(gè)設(shè)定加液數(shù)字泵轉(zhuǎn)動(dòng)，加 液數(shù)字泵從設(shè)定的Pl試劑瓶?jī)?nèi)，定量泵出設(shè)定試液，通過連接管路輸送到加液臂上六個(gè)通 道中設(shè)定加液咀，加入搖床上設(shè)定孵育槽內(nèi)，加完試液，加液數(shù)字泵停止轉(zhuǎn)動(dòng)。軟件繼續(xù)控 制滑動(dòng)機(jī)械上移位電機(jī)，使之滑動(dòng)機(jī)械上的加液臂移動(dòng)至孵育盤下一槽位置上，軟件再控 制加液數(shù)字泵轉(zhuǎn)動(dòng)，加液數(shù)字泵從設(shè)定的Pl試劑瓶?jī)?nèi)，定量泵出設(shè)定試液，加入搖床孵育 盤下一槽內(nèi)。如此加試液，直至加之設(shè)定N槽為止。如果本步驟中工步設(shè)定需要在步驟運(yùn) 行結(jié)束排液，則在搖床搖擺孵育后，軟件控制滑動(dòng)機(jī)械上的移位電機(jī)，使之滑動(dòng)機(jī)械上的吸 液臂移動(dòng)對(duì)準(zhǔn)搖床上三十六孵育槽設(shè)定槽內(nèi)，同時(shí)啟動(dòng)帶報(bào)警負(fù)壓吸液泵，使與之連接廢 液瓶?jī)?nèi)建立負(fù)壓，使吸液臂上吸咀口處于負(fù)壓狀態(tài)，將孵育槽內(nèi)的反應(yīng)后廢液吸入廢液瓶 內(nèi)。本發(fā)明特點(diǎn)是在吸液過程中，同時(shí)執(zhí)行下一步驟的加液工步，這是因?yàn)槲罕酆图右罕?安裝在同一軸滑動(dòng)機(jī)械上，并只差一個(gè)槽位，所以吸液臂吸去本步驟廢液后，緊隨其后加液 臂同時(shí)執(zhí)行下一步驟加液工步。這二個(gè)工步同時(shí)進(jìn)行，本步驟循環(huán)次數(shù)可以設(shè)定。本發(fā)明進(jìn)入樣品步驟后，軟件控制蜂鳴報(bào)警，提示“加入樣品”，揭開搖床上隔離 罩，加入血樣。按“YES”鍵，提示“關(guān)閉隔離罩”，再按“YES”鍵，搖床帶動(dòng)孵育盤，在設(shè)定的 搖擺速率下，進(jìn)入孵育時(shí)間，搖床平面由軟件控制溫度。在孵育時(shí)間結(jié)束時(shí)，軟件控制滑動(dòng) 機(jī)械上的移位電機(jī)，6使之滑動(dòng)機(jī)械上的吸液臂移動(dòng)對(duì)準(zhǔn)搖床上三十六孵育槽設(shè)定槽內(nèi)，同 時(shí)啟動(dòng)負(fù)壓泵，使與之連接廢液瓶?jī)?nèi)建立負(fù)壓，使吸液臂上吸咀口處于負(fù)壓狀態(tài)，將孵育槽 內(nèi)的反應(yīng)后廢液吸入廢液瓶?jī)?nèi)。在吸液同時(shí)，加液裝置啟動(dòng)執(zhí)行下一步驟加液工步。本發(fā)明進(jìn)入結(jié)合物步驟后，軟件控制滑動(dòng)機(jī)械上的移位電機(jī)，使之滑動(dòng)機(jī)械上的 加液臂移動(dòng)對(duì)準(zhǔn)搖床上三十六孵育槽設(shè)定槽上，軟件控制設(shè)定加液數(shù)字泵轉(zhuǎn)動(dòng)，加液數(shù)字 泵從設(shè)定的P5試劑瓶?jī)?nèi)，定量泵出設(shè)定試液，通過連接管路輸送到加液臂上六個(gè)通道中設(shè) 定加液咀，加入搖床上設(shè)定孵育槽內(nèi)，加完試液，加液數(shù)字泵停止轉(zhuǎn)動(dòng)。軟件繼續(xù)控制滑動(dòng)
6機(jī)械上移位電機(jī)，使之滑動(dòng)機(jī)械上的加液臂移動(dòng)至孵育盤下一槽位置上，軟件再控制加液 數(shù)字泵轉(zhuǎn)動(dòng)，加液數(shù)字泵從設(shè)定的P5試劑瓶?jī)?nèi)，定量泵出設(shè)定試液，加入搖床孵育盤下一 槽內(nèi)。如此加試液，直至加之設(shè)定N槽為止。在搖床搖擺孵育后，軟件控制滑動(dòng)機(jī)械上的移 位電機(jī)，使之滑動(dòng)機(jī)械上的吸液臂移動(dòng)對(duì)準(zhǔn)搖床上三十六孵育槽設(shè)定槽內(nèi)，同時(shí)啟動(dòng)負(fù)壓 泵，使與之連接廢液瓶?jī)?nèi)建立負(fù)壓，使吸液臂上吸咀口處于負(fù)壓狀態(tài)，將孵育槽內(nèi)的反應(yīng)后 廢液吸入廢液瓶?jī)?nèi)。在吸液同時(shí)，加液裝置啟動(dòng)執(zhí)行下一步驟加液工步。本發(fā)明進(jìn)入底物步驟后，軟件控制滑動(dòng)機(jī)械上的移位電機(jī)，使之滑動(dòng)機(jī)械上的加 液臂移動(dòng)對(duì)準(zhǔn)搖床上三十六孵育槽設(shè)定槽上，軟件控制設(shè)定加液數(shù)字泵轉(zhuǎn)動(dòng)，加液數(shù)字泵 從設(shè)定的P3試劑瓶?jī)?nèi)，定量泵出設(shè)定試液，通過連接管路輸送到加液臂上個(gè)六通道中設(shè)定 加液咀，加入搖床上設(shè)定孵育槽內(nèi)，加完試液，加液數(shù)字泵停止轉(zhuǎn)動(dòng)。軟件繼續(xù)控制滑動(dòng)機(jī) 械上移位電機(jī)，使之滑動(dòng)機(jī)械上的加液臂移動(dòng)至孵育盤下一槽位置上，軟件再控制加液數(shù) 字泵轉(zhuǎn)動(dòng)，加液數(shù)字泵從設(shè)定的P3試劑瓶?jī)?nèi)，定量泵出設(shè)定試液，加入搖床孵育盤下一槽 內(nèi)。如此加試液，直至加之設(shè)定N槽為止。在搖床搖擺孵育后，軟件控制滑動(dòng)機(jī)械上的移位 電機(jī)，使之滑動(dòng)機(jī)械上的吸液臂移動(dòng)對(duì)準(zhǔn)搖床上三十六孵育槽設(shè)定槽內(nèi)，同時(shí)啟動(dòng)負(fù)壓泵， 使與之連接廢液瓶?jī)?nèi)建立負(fù)壓，使吸液臂上吸咀口處于負(fù)壓狀態(tài)，將孵育槽內(nèi)的反應(yīng)后廢 液吸入廢液瓶?jī)?nèi)。在吸液同時(shí)，加液裝置啟動(dòng)執(zhí)行下一步驟加液工步。本發(fā)明進(jìn)入H20(水)步驟后，軟件控制滑動(dòng)機(jī)械上的移位電機(jī)，使之滑動(dòng)機(jī)械上 的加液臂移動(dòng)對(duì)準(zhǔn)搖床上三十六孵育槽設(shè)定槽上，軟件控制設(shè)定加液數(shù)字泵轉(zhuǎn)動(dòng)，加液數(shù) 字泵從設(shè)定的P2試劑瓶?jī)?nèi)，定量泵出設(shè)定試液，通過連接管路輸送到加液臂上六個(gè)通道中 設(shè)定加液咀，加入搖床上設(shè)定孵育槽內(nèi)，加完試液，加液數(shù)字泵停止轉(zhuǎn)動(dòng)。軟件繼續(xù)控制滑 動(dòng)機(jī)械上移位電機(jī)，使之滑動(dòng)機(jī)械上的加液臂移動(dòng)至孵育盤下一槽位置上，軟件再控制加 液數(shù)字泵轉(zhuǎn)動(dòng)，加液數(shù)字泵從設(shè)定的P2試劑瓶?jī)?nèi)，定量泵出設(shè)定試液，加入搖床孵育盤下 一槽內(nèi)。如此加試液，直至加之設(shè)定N槽為止。在搖床搖擺孵育后，軟件控制滑動(dòng)機(jī)械上的 移位電機(jī)，使之滑動(dòng)機(jī)械上的吸液臂移動(dòng)對(duì)準(zhǔn)搖床上三十六孵育槽設(shè)定槽內(nèi)，同時(shí)啟動(dòng)負(fù) 壓泵，使與之連接廢液瓶?jī)?nèi)建立負(fù)壓，使吸液臂上吸咀口處于負(fù)壓狀態(tài)，將孵育槽內(nèi)的反應(yīng) 后廢液吸入廢液瓶?jī)?nèi)。根據(jù)設(shè)定的H20步驟內(nèi)工步，可以設(shè)定循環(huán)次數(shù)和結(jié)束提示報(bào)警。本發(fā)明是在一孵育搖床上覆一次性孵育槽板，按Western Blotting蛋白印跡分析 的步驟，在分析儀上編輯蛋白印跡分析參數(shù)要求，由加液臂部件對(duì)孵育搖床上一次性孵育 槽板內(nèi)蛋白印跡膜條自動(dòng)加入各種不同試劑，定量分液試劑由復(fù)數(shù)個(gè)加液數(shù)字泵控制，按 編輯參數(shù)要求，分別由從試劑瓶通過復(fù)數(shù)個(gè)加液數(shù)字泵按程序加入定量WASH(洗滌)試劑、 CONJl (酶結(jié)合物lconjugation)試劑、C0NJ2 (酶結(jié)合物2)試劑、SUBST (底物液Substrate) 試劑和DIH20 (蒸餾水)，通過對(duì)蛋白印跡膜條的浸泡_洗滌_加樣品_樣本孵育_酶結(jié) 合_加底物_洗滌等生化反應(yīng)后，對(duì)蛋白分子的定性分析。本發(fā)明最多一次可進(jìn)行三十六 樣本同時(shí)檢測(cè)分析，最小間隔3S的加試劑和吸廢液。孵育搖床可選擇高中低三種不同搖床 擺動(dòng)速度，保整蛋白印跡膜條在整個(gè)Western Blotting蛋白印跡分析過程中保持浸濕，不 產(chǎn)生干膜現(xiàn)象，使蛋白印跡膜的背景清晰。本發(fā)明的孵育搖床提供四種孵育溫度(室溫、 25°C、30°C、37°C)選擇。本發(fā)明的加液臂部件最多可設(shè)置六個(gè)試劑通道口。本發(fā)明的復(fù)數(shù) 個(gè)加液數(shù)字泵由六個(gè)數(shù)字泵組成，具有50-3000uL之內(nèi)數(shù)字定量加液選擇功能。本發(fā)明在 蛋白印跡分析中產(chǎn)生反應(yīng)后廢液由吸液臂部件和帶報(bào)警負(fù)壓吸液泵處理，廢液通過吸液臂部件由吸液泵部件產(chǎn)生負(fù)壓吸入Pl全封閉廢液瓶?jī)?nèi)，在Pl廢液瓶?jī)?nèi)有廢液溢流報(bào)警裝置。 本發(fā)明編制專用軟件，軟件功能具有項(xiàng)目編輯、自動(dòng)運(yùn)行、自動(dòng)管路清洗、校準(zhǔn)、設(shè)置功能。 本發(fā)明可同時(shí)進(jìn)行三十六樣本檢測(cè)分析，適宜批量標(biāo)準(zhǔn)化蛋白印跡分析。綜上所述，本發(fā)明的主要特點(diǎn)包括如下(1)本發(fā)明采用數(shù)字管道泵技術(shù)，使試液加液技術(shù)易控、精確，加液從50uL 3000uL數(shù)字無級(jí)，可正反抽吸控制管道泵，遠(yuǎn)優(yōu)于現(xiàn)有的應(yīng)用正壓壓力控制試液加液技術(shù)， 正壓壓力控制試液加液技術(shù)易受壓力波動(dòng)干擾，特別是穩(wěn)定正壓的建立在儲(chǔ)氣容器形狀大 小、密封程度和時(shí)間及傳感元件的制約，這些因數(shù)將影響試液加液的精度，而且現(xiàn)有技術(shù)的 控制還需電磁閥。 (2)本發(fā)明采用數(shù)字管道泵試液加液技術(shù)，其管道系統(tǒng)易清洗，易更換，無死角，便 于自動(dòng)化清洗。而現(xiàn)有的正壓壓力控制加液技術(shù)裝置由于有壓力容器存在和其控制還需電 磁閥，不易清洗，更不便于自動(dòng)化清洗，存有清洗死角。(3)本發(fā)明的加液臂和吸液臂安裝在滑動(dòng)機(jī)械裝置上，在軟件控制下，可對(duì)搖床上 的1 三十六孵育槽的任意槽位加液和吸液，適宜自動(dòng)批量同時(shí)處置標(biāo)本。而現(xiàn)有技術(shù)的 加液臂和吸液臂安裝于固定位置，只適于單個(gè)標(biāo)本處理。(4)本發(fā)明的搖床技術(shù)采用偏心輪和可控電機(jī)結(jié)構(gòu)，可提供3種搖擺速率選擇，搖 床溫控技術(shù)采用低壓安全薄膜加熱，并提供3種溫控溫度，來適應(yīng)工作需要。現(xiàn)有技術(shù)通常 采用電阻絲和濕熱等技術(shù)加熱，體積大，溫控不易。搖擺速率一般只提供單速率，適應(yīng)性不 足。(5)本發(fā)明采用新型吸液咀結(jié)構(gòu)，該新型吸液咀結(jié)構(gòu)在吸液過程中，對(duì)處于同槽的 試驗(yàn)?zāi)l永不吸附，只吸試液，在整個(gè)試驗(yàn)中，各標(biāo)本間交叉污染接近為0，安全可靠?，F(xiàn)有 技術(shù)在吸液上，對(duì)于質(zhì)輕的試驗(yàn)?zāi)l，其被吸附的可能性在1-10 %左右。將使個(gè)別標(biāo)本試驗(yàn) 失敗，引起標(biāo)本間交叉污染。(6)本發(fā)明在搖床上新設(shè)計(jì)放一成三十六條槽型的一次性使用孵育盤，以供蛋白 印跡樣本的孵育、洗液、結(jié)合、底物等步驟的工作平臺(tái)，一次性使用，避免標(biāo)本間交叉污染和 蛋白印跡樣本的可靠性。這不同于現(xiàn)有技術(shù)重復(fù)使用帶來的標(biāo)本間交叉污染和檢測(cè)的可靠 性。雖然以上描述了本發(fā)明的具體實(shí)施方式
，但是本領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，這些 僅是舉例說明，在不背離本發(fā)明的原理和實(shí)質(zhì)的前提下，可以對(duì)這些實(shí)施方式做出多種變 更或修改。因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍由所附權(quán)利要求書限定。
權(quán)利要求
一種自動(dòng)蛋白印跡分析儀，其特征在于，其包括孵育搖床、加液臂部件、移位電機(jī)、吸液臂部件、吸液電機(jī)、帶報(bào)警負(fù)壓吸液泵和復(fù)數(shù)個(gè)加液數(shù)字泵，孵育搖床具有復(fù)數(shù)個(gè)孵育槽，加液臂部件和吸液臂部件安裝于一滑動(dòng)機(jī)械裝置上并分別對(duì)孵育搖床中的孵育槽進(jìn)行加試液和吸廢液，加液臂部件和移位電機(jī)、加液數(shù)字泵連接，吸液臂部件和吸液電機(jī)、帶報(bào)警負(fù)壓吸液泵連接。
2.如權(quán)利要求1所述的自動(dòng)蛋白印跡分析儀，其特征在于，所述自動(dòng)蛋白印跡分析儀 還包括一隔離罩，該隔離罩完全罩住搖床部件、加液臂部件、吸液臂部件和滑動(dòng)機(jī)械裝置。
3.如權(quán)利要求1所述的自動(dòng)蛋白印跡分析儀，其特征在于，所述加液數(shù)字泵與一洗液 瓶或一試劑瓶連接。
4.如權(quán)利要求1所述的自動(dòng)蛋白印跡分析儀，其特征在于，所述加液臂部件包括加液 咀和加液膠管，加液咀連接加液膠管的一端，加液膠管的另一端與數(shù)字加液泵連接。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種自動(dòng)蛋白印跡分析儀，其包括孵育搖床、加液臂部件、移位電機(jī)、吸液臂部件、吸液電機(jī)、帶報(bào)警負(fù)壓吸液泵和復(fù)數(shù)個(gè)加液數(shù)字泵，孵育搖床具有復(fù)數(shù)個(gè)孵育槽，加液臂部件和吸液臂部件安裝于一滑動(dòng)機(jī)械裝置上并分別對(duì)孵育搖床中的孵育槽進(jìn)行加試液和吸廢液，加液臂部件和移位電機(jī)、加液數(shù)字泵連接，吸液臂部件和吸液電機(jī)、帶報(bào)警負(fù)壓吸液泵連接。本發(fā)明的分析儀能自動(dòng)地完成配液、吸液、孵育、沖洗和加底物液等一系列操作，批量處理各個(gè)蛋白印跡檢測(cè)分析，可以減少操作者工作強(qiáng)度和節(jié)省時(shí)間。
文檔編號(hào)G01N35/00GK101923096SQ20091005297
公開日2010年12月22日 申請(qǐng)日期2009年6月12日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月12日
發(fā)明者周洵榮, 章衛(wèi)華 申請(qǐng)人:上海迅達(dá)醫(yī)療儀器有限公司