專利名稱：獸藥殘留定量檢測芯片試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物芯片技術(shù)定量檢測獸藥殘留的裝置及方法。
背景技術(shù)：
獸藥是用于預(yù)防、治療、診斷動物疾病和調(diào)劑動物生長性能的一類物質(zhì)，種類 繁多。獸藥殘留是指動物產(chǎn)品的可食用部分含有獸藥的母體、代謝產(chǎn)物以及與獸藥有關(guān) 的雜質(zhì)殘留。從20世紀50年代開始使用獸藥以來，獸藥使用量快速增長，到1979年全 世界獸藥飼料添加劑的使用總量達56億美元，1996年動物保健品的銷售總額達148.5億 美元，抗生素添加劑占飼料添加劑總量的45.8%。全球至少一半的抗生素用于畜牧業(yè)和 水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。新品種快速大量地涌現(xiàn)，1987 1998年，新增獸藥品種247種，平均每年 有22.5個品種上市。藥物使用品種和數(shù)量的增加，導(dǎo)致耐藥性大量產(chǎn)生，獸藥殘留大量 存在。獸藥殘留可能對消費者產(chǎn)生遺傳毒性、免疫毒性、致癌毒性或者內(nèi)分泌毒性等不 良影響。并且抗菌藥物出現(xiàn)在食品中還會促進致病菌耐藥性的發(fā)生，增加人類過敏的可 能性。事實上，動物性食品中獸藥殘留已經(jīng)成為一個非常重要的公共衛(wèi)生安全問題，動 物性食品中的獸藥殘留監(jiān)控勢在必行但傳統(tǒng)檢測方法存在種種不足，如微生物法試劑盒貯藏期短、假陽性高、特異 性不強、實驗時間長；HPTLC、HPLC法實驗儀器昂貴、操作復(fù)雜、需要專業(yè)人員等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供獸藥殘留定量檢測芯片試劑盒。本發(fā)明的技術(shù)方案如下獸藥殘留定量檢測芯片試劑盒檢測樣品中獸藥殘留量 的方法，其包括以下步驟(1)本發(fā)明的檢測芯片試劑盒由獸藥提取試劑、芯片、分子雜交試劑組成。(2)制備目標獸藥的特異性單克隆抗體，所述目標獸藥為鹽酸克倫特羅、萊 克多巴胺、鏈霉素、氯霉素、環(huán)丙沙星、呋喃西林、磺胺對甲氧嘧啶和四環(huán)素。(3)將上述特異性單克隆抗體點制到芯片上備用。(4)制備分別針對鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、鏈霉素、氯霉素、環(huán)丙沙星、呋 喃西林、磺胺對甲氧嘧啶和四環(huán)素的二抗。(5)以上轉(zhuǎn)換磷光顆粒進行標記上述二抗備用。(6)本發(fā)明的獸藥殘留定量檢測芯片試劑盒與UPT生物傳感器和獸藥殘留定量 檢測芯片試劑盒系統(tǒng)配套使用；進行檢測時，將提取的獸藥殘留與芯片進行反應(yīng)、洗去 未結(jié)合的獸藥后芯片和上轉(zhuǎn)磷光標記的二抗反應(yīng)、清洗離心后以UPT生物傳感器進行檢 測、結(jié)果由獸藥殘留定量檢測芯片試劑盒系統(tǒng)自動判讀。本發(fā)明與已有技術(shù)比較，具有如下優(yōu)點和效果首先，本發(fā)明針對獸藥殘留的微陣列芯片可以同時檢測8種獸藥殘留，達到對 樣品進行快速、準確檢測的目的。
其次，本發(fā)明可以同時檢測4個樣品，達到快速檢測多個樣品的目標。再者，本發(fā)明結(jié)合免疫學(xué)技術(shù)和生物芯片及分子雜交技術(shù)，可以高通量、高靈 敏度的快速進行獸藥殘留的定量檢測。


附圖為獸藥殘留定量檢測芯片原理示意圖；上述附圖序號為1、基片，2、單克隆抗體，3、獸藥，4、上轉(zhuǎn)磷光顆粒，5、二抗。
具體實施例方式以下結(jié)合附圖實施例對本發(fā)明作進一步詳細描述1、樣品中殘留獸藥的提取將組織樣品切碎、加入獸藥殘留提取試劑，勻漿， 離心后取上清，濃縮。2、雜交將提取物加到芯片上，競爭性免疫反應(yīng)1小時使獸藥和特異性單克隆 抗體結(jié)合；以蒸餾水清洗5分鐘，甩干；加入上轉(zhuǎn)磷光標記的二抗，反應(yīng)1小時。
3、清洗雜交完的芯片以42°C預(yù)熱的洗液清洗4分鐘，再以42°C預(yù)熱的蒸餾水 清洗一次，1500rpm離心。4、芯片掃描及結(jié)果判讀洗凈的芯片使用UPT生物傳感器在獸藥殘留定量檢 測芯片分析系統(tǒng)下進行掃描分析，該系統(tǒng)自動對結(jié)果進行判讀，給出檢測結(jié)果。
權(quán)利要求
1.獸藥殘留定量檢測芯片試劑盒，包括獸藥提取試劑、芯片和分子雜交試劑，其特 征在于所述的芯片上固定了分別針對鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、鏈霉素、氯霉素、環(huán) 丙沙星、呋喃西林、磺胺對甲氧嘧啶和四環(huán)素的特異性抗體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的獸藥殘留定量檢測芯片試劑盒，其特征在于其示蹤標記物為 上轉(zhuǎn)磷光顆粒。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的獸藥殘留定量檢測芯片試劑盒，其特征在于結(jié)果由獸藥芯片 分析系統(tǒng)自動判讀。
全文摘要
本發(fā)明涉及獸藥殘留定量檢測芯片試劑盒，包括獸藥提取試劑、芯片和分子雜交試劑；其特征在于芯片上固定了分別針對鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺、鏈霉素、氯霉素、環(huán)丙沙星、呋喃西林、磺胺對甲氧嘧啶和四環(huán)素的特異性抗體；其優(yōu)點在于可以同時定量檢測4個樣品中的8種獸藥殘留，檢測過程只需4小時，結(jié)果由系統(tǒng)自動判讀；為肉類、禽類和乳制品中獸藥殘留的快速定量檢測提供了理想手段，有良好的應(yīng)用前景。
文檔編號G01N33/577GK102012424SQ20091017364
公開日2011年4月13日 申請日期2009年9月8日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月8日
發(fā)明者宋超霞, 張亮, 楊瑞馥, 游玉容, 范建忠, 鄭巖, 黃寶福, 黃惠杰 申請人:寧波博奧生物工程有限公司