專利名稱：一種魚體受鎘污染的檢測方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及化學領域，是一種魚體在水體中對重金屬鎘的吸收及累積產(chǎn)生的綜合 作用結(jié)果的評價技術(shù)。進一步說就是一種魚體受鎘污染新的評價技術(shù)。具體說就是魚體在 超標水體中或在鎘含量處在高限環(huán)境中長時間生存，有可能在魚體內(nèi)產(chǎn)生有毒有害物質(zhì)， 針對這種情況發(fā)明的一種檢測與評價方法。
背景技術(shù)：
通過食物鏈傳遞到人體的Cd主要來自土壤及水體污染。目前我國河流、湖泊等淡 水流域重金屬污染嚴重，例如長江、湘江、北江等河流，山東南四湖、貴州紅楓湖等湖泊，沈 陽張士污染灌區(qū)等水域。許多水域Cd含量超過我國漁業(yè)水質(zhì)標準規(guī)定的限量值5yg廠1。 由于Cd亦被生物體吸收，且在生物體內(nèi)不易轉(zhuǎn)化而積累在生物體內(nèi)，因而水環(huán)境中的Cd可 經(jīng)食物鏈富集可達相當高的濃度，嚴重影響了淡水養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。污染淡水環(huán)境中 養(yǎng)殖的水產(chǎn)品可通過人體膳食攝入對人體產(chǎn)生危害。水產(chǎn)品中Cd的超標現(xiàn)象屢有發(fā)生，不 但威脅到人體健康，更成為制約我國水產(chǎn)品出口創(chuàng)匯等經(jīng)濟效益。水體中的Cd可以在各類 魚體中中富集，且存在一定規(guī)律。食品Cd污染是環(huán)境保護和公共衛(wèi)生中的一大問題，對普通人群來說，食物鏈是Cd 進入體內(nèi)并在組織器官中積累的主要途徑，食物鏈中的Cd主要來自土壤及水體污染。目前 水體重金屬污染時有發(fā)生，因此魚類等水產(chǎn)品中Cd超標現(xiàn)象嚴重，有必要對魚體中Cd的超 標風險加以評價，為無公害水產(chǎn)養(yǎng)殖提供理論依據(jù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種魚體受鎘污染的檢測方法，通過檢測魚體中磷脂的總量 和各種磷脂成分的變化量，應用建立的統(tǒng)計模型，檢測與評價魚體受鎘污染的情況，對食品 安全起到指示作用。包括如下步驟⑴魚體樣品的采集；⑵魚體樣品的處理；⑶樣品的 分析；(4)結(jié)果的處理；(5)結(jié)果的評價。具體步驟為所述(1)魚體樣品的采集樣品采集后應迅速處理，清除內(nèi)臟，-30 -20°C冷凍保 存；所述⑵魚體樣品的處理稱取80_150mg魚肉樣品，加入200-600 μ L甲醇/氯仿 (2 1, ν/ν)，渦旋1 3分鐘，放置溫度-30 -20°C，離心5 8分鐘。重復提取2 3 次，將提取所得上清液合并；在上清液中首先加入氯仿+水=1 1 (ν/ν)，200-300 μ L，從 而形成兩相體系；離心后，將磷脂所在的氯仿相與水相分離；氯仿相采用真空離心蒸發(fā)濃 縮器(Speed-Vac)干燥，溫度設定于45°C，干燥后樣品于_30°C保存?zhèn)溆茫凰?3)樣品的分析取出步驟(2)干燥后的磷脂粗提物，用1 l(v/v)甲醇/ 氯仿復溶；分別取5 μ L磷脂溶液與5 μ L基質(zhì)溶液混合后，從中取1 μ L滴于樣品探頭靶心， 待溶劑揮發(fā)產(chǎn)生結(jié)晶后，將靶送入基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜儀(MALDI-T0F)離 子源，采用氮激光器，波長200-400nm，延時引出(delayed extraction)和直線型(linear)的工作方式，采集質(zhì)譜數(shù)據(jù)；所述(4)結(jié)果的處理在磷脂質(zhì)譜中提取如下27個質(zhì)核比(m/z)譜峰的峰面積 732、734、740、742、756、758、760、762、764、766、780、782、784、786、796、798、804、806、808、 820、822、824、828、830、832、844、846，其中譜峰數(shù)(a)在20-27之間，將每一譜圖中的所有 譜峰的峰面積值除以同一譜圖中內(nèi)標物譜峰的面積而獲得相對峰面積，將其做為自變量 (Xi)，利用如下的模型，即可計算得到魚體Cd的含量
權(quán)利要求
1.一種魚體受鎘污染的檢測方法，其特征在于通過檢測魚體中磷脂的總量和各種磷 脂成分的變化量，應用建立的統(tǒng)計模型，評價魚體受鎘污染的情況，具體包括如下步驟(1) 魚體樣品的采集；⑵魚體樣品的處理；⑶樣品的分析；⑷結(jié)果的處理；(5)結(jié)果的評價。
2.根據(jù)權(quán)利1所述的檢測方法，其特征在于所述(1)魚體樣品的采集樣品采集后應迅速處理，清除內(nèi)臟，"30 -20°C冷凍保存；所述⑵魚體樣品的處理稱取80-150mg魚肉樣品，加入200-600 μ L甲醇/氯仿 (2 1，ν/ν)，渦旋1 3分鐘，放置溫度-30 -20°C，離心5 &ι η。重復提取2 3次， 將提取所得上清液合并；在上清液中首先加入氯仿+水=1 1 (ν/ν)，200-300 μ L，從而形 成兩相體系；離心后，將磷脂所在的氯仿相與水相分離；氯仿相采用真空離心蒸發(fā)濃縮器 (Speed-Vac)干燥，溫度設定于45°C，干燥后樣品于_30°C保存?zhèn)溆?；所述C3)樣品的分析取出步驟( 干燥后的磷脂粗提物，用1 l(v/v)甲醇/氯仿 復溶；分別取5 μ L磷脂溶液與5 μ L基質(zhì)溶液混合后，從中取1 μ L滴于樣品探頭靶心，待 溶劑揮發(fā)產(chǎn)生結(jié)晶后，將靶送入基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜儀(MALDI-T0F)離子 源，采用氮激光器，波長200-400nm，延時引出(delayed extraction)和直線型(linear)的 工作方式，采集質(zhì)譜數(shù)據(jù)；所述(4)結(jié)果的處理在磷脂質(zhì)譜中提取如下27個質(zhì)核比(m/z)譜峰的峰面積732、 734、740、742、756、758、760、762、764、766、780、782、784、786、796、798、804、806、808、820、 822、824、828、830、832、844、846，其中譜峰數(shù)(a)在20-27之間，將每一譜圖中的所有譜峰 的峰面積值除以同一譜圖中內(nèi)標物譜峰的面積而獲得相對峰面積，將其做為自變量(Xi)， 利用如下的模型，即可計算得到魚體Cd的含量Y= ^(CixXi) (a 值為 20 27)/=I其中模型公式中的Ci為回歸系數(shù)，其變化范圍為1 士5%，Y值即樣本中魚體鎘暴露量 或魚體中Cd含量的估計值。
3.根據(jù)權(quán)利2所述的檢測方法，其特征在于所述基質(zhì)溶液為2，5_二羥基苯甲酸 +0. 三氟乙酸的甲醇溶液。
4.根據(jù)權(quán)利2所述的檢測方法，其特征在于所述標的物為1，2_十四?；字Ｄ憠A DMPC0
5.根據(jù)權(quán)利1所述的檢測方法，其特征在于所述(1)魚體樣品的采集為采集兩批平 行樣。
全文摘要
本發(fā)明公開一種魚體受鎘污染的檢測方法，通過檢測魚體中磷脂的總量和各種磷脂成分的變化量，應用建立的統(tǒng)計模型，檢測與評價魚體受鎘污染的情況，對食品安全起到指示作用。包括如下步驟(1)魚體樣品的采集；(2)魚體樣品的處理；(3)樣品的分析；(4)結(jié)果的處理；(5)結(jié)果的評價。本發(fā)明提供了一種關(guān)于魚體受鎘污染情況的新的檢測與評價方法。
文檔編號G01N27/64GK102043012SQ20091018785
公開日2011年5月4日 申請日期2009年10月13日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月13日
發(fā)明者李國琛, 王世成, 王姍姍, 王顏紅 申請人:中國科學院沈陽應用生態(tài)研究所