專利名稱：萊克多巴胺免疫原、包被原及其在膠體金試紙中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種萊克多巴胺免疫原、包被原，屬于免疫學技術領域。
背景技術：
鹽酸萊克多巴胺是一種醫(yī)藥原料，一種可用于治療沖血性心力衰竭癥的強心藥。 還可以用于治療肌肉萎縮癥，增長肌肉，減少脂肪蓄積。可以同時提高動物的日增重，提高 飼料利用率，提高動物的蛋白質含量。萊克多巴胺屬于beta興奮劑，加在豬飼料中能提高 瘦肉組織生長速度和效率，且皮光肉滑，看相很好。人在食用萊克多巴胺中毒現象與“瘦肉 精”中毒現象類似，可能出現心跳加快、震顫、心悸等癥狀，更嚴重的會導致人體致畸致癌。 因此農業(yè)部197號文件明令禁止其用于肉源性食品的生產。萊克多巴胺是小分子化合物，常用的檢測方法有高效液相色譜分析法(HPLC)，氣 相色譜/質譜聯(lián)用分析法(GC/MS)或液相色譜/質譜聯(lián)用分析法(LC/MS)。這些方法普遍 存在著儀器昂貴，方法復雜，操作煩瑣，試劑消耗量大的局限性。20世紀80年代興起的膠體 金免疫層析檢測，基于免疫學檢測原理，操作簡單快捷、結果清晰易于判斷、無需復雜的實 驗技能和設備，特別適于現場檢測。能夠在第一時間檢測水產品中萊克多巴胺殘留，對遏制 萊克多巴胺的非法使用具有重要意義。但是目前市面上的萊克多巴胺膠體金速測產品存在 檢測限無法滿足國家限量要求的現狀。解決此問題在于以下兩個途徑(一)改善抗體質 量和競爭物。而抗體質量的改善還在于優(yōu)化免疫原結構；(二)改善包被原結構，從而從競 爭物的角度優(yōu)化抗原抗體識別。

發(fā)明內容
針對上訴問題，本發(fā)明提供了一種萊克多巴胺免疫原、包被原，該免疫原、包被原 能極大提高萊克多巴胺膠體金速測的靈敏度。本發(fā)明的另一個目的是提供該免疫原、包被原在膠體金試紙生產中的應用。上述萊克多巴胺免疫原的制備包括以下步驟(1)萊克多巴胺半抗原的合成；(2)萊克多巴胺半抗原活潑酯的合成；(3)萊克多巴胺半抗原活潑酯于血藍蛋白進行偶聯(lián)；(4)免疫原的純化；(5)免疫原蛋白濃度的確定，分裝。所述的半抗原具有式(I)所示結構
權利要求
1.萊克多巴胺免疫原、包被原，其特征在于其制備方法為萊克多巴胺半抗原和蛋白進 行交聯(lián)。
2.根據權利要求1所述的半抗原，其特征在于所述的半抗原具有式(I)所示結構。
3.根據權利要求1所述的免疫原，其特征在于所述的免疫原為萊克多巴胺半抗原和血 藍蛋白偶聯(lián)的產物，具有式(II)所示結構。
4.根據權利要就1所述的免疫原，其特征在于其用于免疫實驗動物產生特異性識別萊 克多巴胺的抗體，抗體標記膠體金后，吸附玻璃纖維膜上，置于樣品墊附近，特異性識別萊 克多巴胺分子。
5.根據權利要求1所述的包被原，其特征在于所述的包被原為萊克多巴胺半抗原和人 血清蛋白偶聯(lián)后的產物，具有式(III)所示結構。
6.根據權利要求1所述的包被原，其特征在于其用于包被于檢測帶附近，識別過量的 膠體金標記萊克多巴胺抗體。
全文摘要
本發(fā)明涉及萊克多巴胺免疫原、包被原及其在膠體金試紙中的應用，屬于免疫學技術領域。該免疫原、包被原為萊克多巴胺遠離氮原子的羥基端連接手臂的半抗原偶聯(lián)載體蛋白的產物。此半抗原在分子結構，立體化學和電子分布上與萊克多巴胺對應體相似。半抗原分子具有便于與蛋白載體偶聯(lián)的活性基團，且活性基團的存在對待測物分子的電子分布沒有影響。此半抗原偶連學藍蛋白后能使機體產生效價高，特異性好的針對萊克多巴胺的抗體，吸附于玻璃纖維素膜上；偶連人血清蛋白后構建的包被原可被吸附于硝酸纖維素膜上，用于構建萊克多巴胺膠體金試紙。
文檔編號G01N33/558GK101993488SQ20091018976
公開日2011年3月30日 申請日期2009年8月27日 優(yōu)先權日2009年8月27日
發(fā)明者張世偉, 李細清, 譚攀, 鐘松清 申請人:深圳市三方圓生物科技有限公司