專利名稱：更年期用藥指導(dǎo)遺傳檢測的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及分子生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，更具體的，本發(fā)明涉及一種更年期用藥指導(dǎo) 遺傳檢測的方法。
背景技術(shù)：
進(jìn)入圍絕經(jīng)期是女性的一個(gè)特殊階段，受到生物、心理和社會因素的影響，現(xiàn)代醫(yī) 學(xué)研究認(rèn)為，卵巢功能衰退、性激素分泌減少、促性腺激素升高以及不適應(yīng)機(jī)體內(nèi)分泌的重 新調(diào)整而引起植物神經(jīng)功能紊亂是導(dǎo)致絕經(jīng)期綜合征發(fā)病的主要原因?？茖W(xué)研究發(fā)現(xiàn)，雌 激素受體廣泛分布在女性全身組織和器官的細(xì)胞膜上，當(dāng)雌激素減少時(shí)，這些組織和器官 就會發(fā)生退行性變或代謝上的變化，進(jìn)而出現(xiàn)一系列神經(jīng)、內(nèi)分泌、代謝和心理的失衡，引 起各系統(tǒng)改變的綜合征候群。目前認(rèn)為卵巢功能衰退、雌激素分泌減少、促性腺激素升高及 內(nèi)分泌平衡狀況改變是引起絕經(jīng)期綜合征的主要原因，并發(fā)現(xiàn)雌激素降低的水平與絕經(jīng)期 綜合征的嚴(yán)重度基本呈正相關(guān)。近十幾年，國外相繼成功研制了不同于傳統(tǒng)雌激素的新型藥物組織選擇性雌 激素活性調(diào)節(jié)劑(Selective Tissue Estrongenic Activity Regulations, STEARs)和 SERMs0 STEARs具有組織特異性留體激素活性的化合物，具有弱雌、孕、雄激素樣活性，利維 愛是STEARs家族的第一個(gè)成員，其代謝產(chǎn)物強(qiáng)烈抑制雌酮轉(zhuǎn)化，故無乳腺癌及子宮內(nèi)膜癌 發(fā)生的危險(xiǎn)，且用藥期間陰道出血率相對較小，出血量較少。在有效治療絕經(jīng)相關(guān)癥狀的同 時(shí)降低部分不良反應(yīng)的發(fā)生，被認(rèn)為是當(dāng)今較接近于理想的絕經(jīng)后HT藥物。SERMs是指一 類結(jié)構(gòu)多樣的化合物，可與雌激素受體ER結(jié)合，在不同的靶組織依據(jù)細(xì)胞種類和激素環(huán)境 的不同，可以表現(xiàn)為雌激素激動劑或拮抗劑的作用。雷洛昔芬是其中的重要成員，它對骨組 織和血清中的脂蛋白有雌激素樣作用，已用于治療絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥，能保護(hù)心血管 系統(tǒng)，改善認(rèn)知功能，但SERMs不能解除絕經(jīng)期潮熱、汗出等癥狀，甚至可能誘發(fā)或加重這 些癥狀。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種更年期用藥指導(dǎo)遺傳檢測的方法。通過采集受檢者的口腔粘膜細(xì)胞，提取其基因組DNA，對其基因組DNA的CYPlAl基 因上rs4646903位點(diǎn)、CYPlBl基因上Leu432Val位點(diǎn)、COMT基因上Val 158Met位點(diǎn)和GSTTl 基因上I^esent/Null位點(diǎn)多態(tài)性進(jìn)行檢測，從基因?qū)用嬖u估更年期用藥代謝能力，并作為 用藥指導(dǎo)。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn) 方法，通常按照常規(guī)條件，或按照廠商所建議的條件。實(shí)施例
步驟1 :DNA模板的抽取用硅膠吸附法抽提口腔上皮細(xì)胞的基因組DNA。步驟2 熒光定量PGR反應(yīng)使用檢測試劑盒中的熒光定量PCR套裝，進(jìn)行熒光定量PCR反應(yīng)，反應(yīng)的體系為總 體積10 μ 1，包含濃度為20ng/ μ 1的DNA模板2 μ 1、1 μ 1 IOX熒光定量PCR反應(yīng)緩沖液、 0. 1 μ 1 25mM dNTP 混合液、0. 6 μ 1 25mMMgCl2 溶液、0. 025 μ 1 (5units/ μ 1) Taq DNA 聚合 酶、20 μ M的有義引物和反義引物各0. 225 μ 1、10 μ M的帶VIC熒光探針和帶FAM熒光探針 各0. 25μ 1，去離子水5. 325 μ 1。在PCR擴(kuò)增儀上進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)條件為50°C、2分鐘，95°C、10分鐘，進(jìn)行60個(gè)循環(huán) 的95°C、30秒，60°C、1分鐘。反應(yīng)結(jié)束后在熒光定量PCR儀上讀取樣品熒光量。步驟4:基因型分析根據(jù)試劑盒使用說明書標(biāo)示的基因分型圖示對SNP位點(diǎn)進(jìn)行基因型分析。熟悉熒光定量PCR技術(shù)的本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠通過辨識熒光定量PCR儀上顯示 的最終樣品熒光量，根據(jù)不同序列探針熒光信號的強(qiáng)弱即可確定所檢測的SNP位點(diǎn)的基因 型。
權(quán)利要求
1. 一種更年期用藥指導(dǎo)遺傳檢測的方法，其特征在于采集受檢者的口腔粘膜細(xì)胞， 提取其基因組DNA，對其基因組DNA的CYPlAl基因上rs4646903位點(diǎn)、CYPlBl基因上 Leu432Val位點(diǎn)、COMT基因上Vall58Met位點(diǎn)和GSTTl基因上Present/Null位點(diǎn)進(jìn)行檢 測，確定其是否發(fā)生基因突變而導(dǎo)致雌激素代謝異常。
全文摘要
本發(fā)明公開了更年期用藥指導(dǎo)遺傳檢測的方法，通過采集受檢者的口腔粘膜細(xì)胞，提取其基因組DNA，對其基因組DNA的CYP1A1基因上rs4646903位點(diǎn)、CYP1B1基因上Leu432Val位點(diǎn)、COMT基因上Val158Met位點(diǎn)和GSTT1基因上Present/Null位點(diǎn)多態(tài)性進(jìn)行檢測，從基因?qū)用嬖u估更年期用藥代謝能力，并作為用藥指導(dǎo)。
文檔編號G01N21/64GK102108381SQ20091020048
公開日2011年6月29日 申請日期2009年12月23日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月23日
發(fā)明者馮哲民, 賀憲民, 鄒祖燁 申請人:上海主健生物工程有限公司