專利名稱：治療濕熱黃疸的茵陳五疸丸的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中成藥的技術(shù)領(lǐng)域，涉及以中藥材為原料制成的一種治療濕熱黃疸的 茵陳五疸丸的質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
茵陳五疸丸是衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)WS3-B-2930-98記載處方及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)處方茵陳160g 茯苓 80g 黃芩80g蒼術(shù)8Og 澤瀉 8Og 厚樸(姜制)8Og白術(shù)(麩炒)8Og 豬苓 8Og 山楂8Og甘草60g 陳皮 40g 六神曲(麩炒)40g枳犋子 40g制法以上十三味，除茵陳外，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻，備用。茵陳加水煎煮二次， 合并煎液，濾過，濾液濃縮成膏。將茯苓等粉末加入膏內(nèi)，攪勻，干燥，粉碎成細(xì)粉，過篩，用 水泛丸，干燥，即得。鑒別取本品，置顯微鏡下觀察不規(guī)則分枝團(tuán)塊無色，遇水合氯醛液溶化；菌絲 無色或淡棕色，直徑4 6μπι。纖維淡黃色，梭形，壁厚，孔溝細(xì)。薄壁細(xì)胞類圓形，有橢圓 形紋孔，集成紋孔群。石細(xì)胞分枝狀，壁厚，層紋明顯。果皮石細(xì)胞淡紫紅色、紅色或黃棕色， 類圓形或多角形，直徑約至125μπι。纖維束周圍薄壁細(xì)胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維。草酸 鈣方晶，形成晶纖維。草酸鈣方晶成片存在于薄壁組織中。檢查應(yīng)符合丸劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(附錄I Α)。功能與主治清熱利濕，通利小便。用于濕熱黃疸，周身浮腫，遍身發(fā)黃，小便赤黃、 小水不利。目前有關(guān)與上述公開的衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)WS3-B-2930-98記載處方相似或不同功效相 似茵陳五疸丸的文獻(xiàn)有很多，但是尚未見與上述公開的茵陳五疸丸處方相似或相同，配比 相同，功效相似的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的文獻(xiàn)，但是現(xiàn)有技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)中還存在鑒別項(xiàng)目、鑒別手段、含 量測(cè)定方法不完善等缺點(diǎn)，為提高中藥的產(chǎn)品質(zhì)量，需要完善產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的茵陳五疸丸標(biāo)準(zhǔn)不足之處，提 供一種能夠定性、定量檢測(cè)藥物成分的茵陳五疸丸的質(zhì)量控制方法。為了達(dá)到本發(fā)明的目的采用的技術(shù)方案是一種治療濕熱黃疸的茵陳五疸丸的質(zhì) 量控制方法，其中所述的藥物配方由中藥材茵陳160g 茯苓 80g蒼術(shù)80g 澤瀉 80g白術(shù)(麩炒)80g 豬苓 80g甘草60g 陳皮 40g
黃芩80g
厚樸(姜制)80g 山楂80g
六神曲(麩炒)40g
枳犋子40g組成，制法以上十三味，除茵陳外，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻，備 用；茵陳加水煎煮二次，合并煎液，濾過，濾液濃縮成膏；將茯苓等粉末加入膏內(nèi)，攪勻，干 燥，粉碎成細(xì)粉，過篩，用水制丸，干燥，即得，其特征在于其方法的步驟是(1)以厚樸酚與和厚樸酚、陳皮為對(duì)照品，薄層色譜法鑒別茵陳五疸丸處方中是否 含有厚樸、陳皮成分；(2)以黃芩苷為對(duì)照品，高效液相色譜法檢測(cè)茵陳五疸丸處方中黃芩苷的含量。所述的治療濕熱黃疸的茵陳五疸丸的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述的薄層色 譜法鑒別茵陳五疸丸處方中否含有厚樸的方法為取本品0. 5g，加甲醇20ml超聲處理1小 時(shí)，濾過，濾液作為供試品溶液；另取厚樸酚對(duì)照品與和厚樸酚對(duì)照品，加甲醇制成每Iml 各含0. 5mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1， 分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以苯-甲醇為展開劑，苯甲醇=27 1，展開，取出，晾 干，置紫外光燈254nm下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色 的熒光斑點(diǎn)；所述的薄層色譜法鑒別茵陳五疸丸處方中是否含有陳皮成分的方法為取本品 2g，加水30ml超聲提取15分鐘，加乙醚20ml提取，取水層再加20ml正丁醇提取，取正 丁醇層，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取陳皮對(duì)照藥材0. 5g，同法制 成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一高效硅膠 G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水為展開劑，乙酸乙酯甲酸冰乙酸水= 100 11 11 26，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色 清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。所述的治療濕熱黃疸的茵陳五疸丸的質(zhì)量控制方法，其特征在于以黃芩苷為對(duì) 照品，液相色譜法檢測(cè)茵陳五疸丸處方中黃芩苷的含量的方法為(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇 水磷酸=50 50 0.2為流動(dòng)相；檢測(cè)波長為^Onm;理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低 于2000，黃芩苷峰與相鄰峰的分離度應(yīng)符合規(guī)定要求；(2)對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含 50 μ g的溶液，即得；(3)供試品溶液的制備取本品3g，研細(xì)，取粉末0. 5g，精密稱定，置具塞錐形瓶 中，精密量取70%乙醇25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足 減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；(4)測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μ 1，注入液相色譜儀，測(cè) 定，即得；本品每克含黃芩苷不得少于2. 62mg。發(fā)明有益效果質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中設(shè)置以厚樸酚與和厚樸酚、陳皮為對(duì)照品，薄層色譜法 鑒別茵陳五疸丸處方中是否含有厚樸、陳皮成分；高效液相色譜法檢測(cè)茵陳五疸丸處方中 黃芩苷的含量，本品每克含黃芩苷不得少于2. 62mg的定量指標(biāo)及檢驗(yàn)方法，使質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)較 為完善，修訂后的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，提高了藥品的質(zhì)量控制。


圖1厚樸的薄層鑒別色譜圖。
圖2陳皮的定性鑒別色譜圖。圖3對(duì)照品溶液的HPLC圖譜。圖4供試品溶液的HPLC圖譜。圖5空白對(duì)照品溶液的HPLC圖譜。圖6線性回歸曲線圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說明，實(shí)施例1改進(jìn)后的茵陳五疸丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)處方茵陳160g 茯苓 80g 黃芩80g蒼術(shù)SOg 澤瀉 SOg 厚樸(姜制)SOg白術(shù)(麩炒)8Og 豬苓 8Og 山楂8Og甘草60g 陳皮 40g 六神曲(麩炒)40g枳犋子 40g制法以上十三味，除茵陳外，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻，備用。茵陳加水煎煮二次， 合并煎液，濾過，濾液濃縮成膏。將茯苓等粉末加入膏內(nèi)，攪勻，干燥，粉碎成細(xì)粉，過篩，用 水制丸，干燥，即得。性狀本品為棕色至棕褐色的濃縮水丸；氣微，味微苦。鑒別(1)取本品，置顯微鏡下觀察不規(guī)則分枝團(tuán)塊無色，遇水合氯醛液溶化；菌 絲無色或淡棕色，直徑4 6μπι。纖維淡黃色，梭形，壁厚，孔溝細(xì)。薄壁細(xì)胞類圓形，有橢 圓形紋孔，集成紋孔群。石細(xì)胞分枝狀，壁厚，層紋明顯。果皮石細(xì)胞淡紫紅色、紅色或黃棕 色，類圓形或多角形，直徑約至125μπι。纖維束周圍薄壁細(xì)胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維。 草酸鈣方晶，形成晶纖維。草酸鈣方晶成片存在于薄壁組織中。(2)厚樸鑒別取本品0. 5g，加甲醇20ml超聲處理1小時(shí)，濾過，濾液作為供試品 溶液。另取厚樸酚對(duì)照品與和厚樸酚對(duì)照品，加甲醇制成每Iml各含0. 5mg的混合溶液，作 為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶 液各5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以苯-甲醇比例為27 1為展開劑，展開，取 出，晾干，置紫外光燈OMnm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相 同顏色的熒光斑點(diǎn)。(3)陳皮鑒別取本品2g，加水30ml超聲提取15分鐘，加乙醚20ml提取，取水層 再加20ml正丁醇提取，取正丁醇層，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液。另取 陳皮對(duì)照藥材0. 5g，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄 VIB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一高效硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲 酸-冰乙酸-水比例為100 11 11 沈?yàn)檎归_劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙 醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯 相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VI D)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-磷 酸比例為50 50 0. 2為流動(dòng)相；檢測(cè)波長為280nm。理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低 于2000，黃芩苷峰與相鄰峰的分離度應(yīng)符合規(guī)定要求。
對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含50μ g 的溶液，即得。供試品溶液的制備取本品3g，研細(xì)，取粉末0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中， 精密量取70%乙醇25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減 失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定， 即得。本品每克含黃芩苷不得少于2. 62mg。檢查應(yīng)符合丸劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(附錄I A)。功能與主治清熱利濕，通利小便。用于濕熱黃疸，周身浮腫，遍身發(fā)黃，小便赤黃、 小水不利。用法與用量口服，一次6g，一日1 2次。規(guī)格每瓶裝6g ；C藏密閉，防潮。實(shí)施例2茵陳五疸丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草說明茵陳五疸丸原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中無薄層鑒別和含量測(cè)定，經(jīng)試驗(yàn)研究，增加厚樸、陳皮的 薄層鑒別和黃芩中黃芩苷的含量測(cè)定。一.薄層鑒別1.厚樸的鑒別1. 1材料與試劑甲醇、苯分析純；厚樸酚對(duì)照品中國藥品生物制品檢定所，批 號(hào)110729-200309 ；和厚樸酚對(duì)照品中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)0730-2002061. 2供試品溶液的制備取本品0. 5g，加甲醇20ml超聲處理1小時(shí)，過濾，濾液作 為供試品溶液。1.3對(duì)照品溶液的制備取厚樸酚對(duì)照品與和厚樸酚對(duì)照品，加甲醇制成每Iml各 含0. 5mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液。1.4空白對(duì)照品溶液的制備按處方、工藝，除厚樸外制備空白對(duì)照品，再將空白 對(duì)照品粉碎成細(xì)粉，按照供試品溶液制備方法制備空白對(duì)照品溶液。1. 5實(shí)驗(yàn)方法照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上述 三種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以苯-甲醇07 1)為展開劑，展開， 取出，晾干，置紫外光燈OMnm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯 相同顏色的熒光斑點(diǎn)，空白對(duì)照品無干擾。結(jié)果見圖1。圖1中1 對(duì)照品2:供試品3: 空白對(duì)照品。2.陳皮的鑒別2. 1材料與試劑乙醚、正丁醇、乙酸乙酯、甲酸、冰乙酸分析純陳皮對(duì)照藥材中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)120969-2005072. 2供試品溶液的制備取本品2g，加水30ml超聲提取15分鐘，加乙醚20ml提 取，取水層再加20ml正丁醇提取，取正丁醇層，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液。2. 3對(duì)照藥材溶液的制備取陳皮對(duì)照藥材0. 5g，按照供試品溶液制備方法制備 對(duì)照藥材溶液。2. 4空白對(duì)照品溶液的制備按處方、工藝，除陳皮外制備空白對(duì)照品，再將空白 對(duì)照品粉碎成細(xì)粉，按照供試品溶液制備方法制備空白對(duì)照品溶液。
2. 5實(shí)驗(yàn)方法照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取上 述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一高效硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水 (100 11 11 26)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱 至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，空 白對(duì)照品色譜無干擾。結(jié)果見圖2。圖2中1 供試品2 對(duì)照品3 空白對(duì)照品二.黃芩苷的含量測(cè)定1.儀器與材料儀器Waters 2695高效液相色譜儀；檢測(cè)器WatersM87 ；C18色譜柱Sartorius CP224S.電子天平.材料黃芩苷對(duì)照品批號(hào)110715-200514由中國藥品生物制品檢驗(yàn)所生產(chǎn)甲醇色譜純，冰乙酸、磷酸分析純；2.實(shí)驗(yàn)方法2. 1對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含 50 μ g的溶液，即得。見圖3色譜峰結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種治療濕熱黃疸的茵陳五疸丸的質(zhì)量控制方法，其中所述的藥物配方由中藥材茵陳160g 茯苓80g 黃芩80g蒼術(shù)80g 澤瀉80g 厚樸(姜制)80g白術(shù)(麩炒)80g 豬苓80g 山楂80g甘草60g 陳皮40g 六神曲(麩炒)40g枳犋子 40g組成，制法以上十三味，除茵陳外，粉碎成細(xì)粉，過篩，混勻，備用；茵 陳加水煎煮二次，合并煎液，濾過，濾液濃縮成膏；將茯苓等粉末加入膏內(nèi)，攪勻，干燥，粉碎 成細(xì)粉，過篩，用水制丸，干燥，即得，其特征在于其方法的步驟是(1)以厚樸酚與和厚樸酚、陳皮為對(duì)照品，薄層色譜法鑒別茵陳五疸丸處方中是否含有 厚樸、陳皮成分；(2)以黃芩苷為對(duì)照品，高效液相色譜法檢測(cè)茵陳五疸丸處方中黃芩苷的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療濕熱黃疸的茵陳五疸丸的質(zhì)量控制方法，其特征在于 所述的薄層色譜法鑒別茵陳五疸丸處方中否含有厚樸的方法為取本品0. 5g，加甲醇20ml 超聲處理1小時(shí)，濾過，濾液作為供試品溶液；另取厚樸酚對(duì)照品與和厚樸酚對(duì)照品，加甲 醇制成每Iml各含0. 5mg的混合溶液，作為對(duì)照品溶液，照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種 溶液各5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠GF2M薄層板上，以苯-甲醇為展開劑，苯甲醇=27 1， 展開，取出，晾干，置紫外光燈254nm下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置 上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；所述的薄層色譜法鑒別茵陳五疸丸處方中是否含有陳皮成分的方法為取本品2g， 加水30ml超聲提取15分鐘，加乙醚20ml提取，取水層再加20ml正丁醇提取，取正丁醇 層，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取陳皮對(duì)照藥材0. 5g，同法制成 對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點(diǎn)于同一高效硅膠G 薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰乙酸-水為展開劑，乙酸乙酯甲酸冰乙酸水= 100 11 11 26，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色 清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療濕熱黃疸的茵陳五疸丸的質(zhì)量控制方法，其特征在于 以黃芩苷為對(duì)照品，液相色譜法檢測(cè)茵陳五疸丸處方中黃芩苷的含量的方法為(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇水 磷酸=50 50 0.2為流動(dòng)相；檢測(cè)波長為280nm;理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于 2000，黃芩苷峰與相鄰峰的分離度應(yīng)符合規(guī)定要求；(2)對(duì)照品溶液的制備取黃芩苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含50μg 的溶液，即得；(3)供試品溶液的制備取本品3g，研細(xì)，取粉末0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精 密量取70%乙醇25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失 的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；(4)測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5μ1，注入液相色譜儀，測(cè)定， 即得；本品每克含黃芩苷不得少于2. 62mg。
全文摘要
本發(fā)明屬于中成藥的技術(shù)領(lǐng)域，涉及以中藥材為原料制成的一種治療濕熱黃疸的茵陳五疸丸的質(zhì)量控制方法，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中設(shè)置以厚樸酚與和厚樸酚、陳皮為對(duì)照品，薄層色譜法鑒別茵陳五疸丸處方中是否含有厚樸、陳皮成分的鑒別項(xiàng)目；高效液相色譜法檢測(cè)茵陳五疸丸處方中黃芩苷的含量定量指標(biāo)及檢驗(yàn)方法，使質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)較為完善，修訂后的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，提高了藥品的質(zhì)量控制。
文檔編號(hào)G01N30/36GK102068566SQ20091022836
公開日2011年5月25日 申請(qǐng)日期2009年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月19日
發(fā)明者劉志宏, 律兆榮, 楊瑾, 王磊, 陳堅(jiān) 申請(qǐng)人:天津中新藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司樂仁堂制藥廠