專利名稱：利用毛細(xì)管電泳法的分析裝置及分析方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通過毛細(xì)管電泳法來分析血液中所含的蛋白質(zhì)的分析裝置及分析方法。
背景技術(shù)：
血液中含有白蛋白、球蛋白(α 、α 2, β、Y球蛋白)、纖維蛋白原、血紅蛋白等 蛋白質(zhì)。分析這些蛋白質(zhì)的比率、變化等，并利用于疾病的診斷中。這些蛋白質(zhì)中，白蛋白、 球蛋白(α 、α 2、β、Y球蛋白)及纖維蛋白原是血液中大量含有的蛋白質(zhì)。并且，這些 蛋白質(zhì)比率是例如肝硬化、腎病綜合征、膠原病等的診斷中的重要指標(biāo)，使用醋酸纖維素膜 電泳法等來進(jìn)行分析。另外，血紅蛋白(Hb)包括血紅蛋白A(HbA)、血紅蛋白F(HbF)、血紅 蛋白S(HW)、糖化血紅蛋白等。這些血紅蛋白中，HbA及HbF是人的正常血紅蛋白。并且， HbS是β鏈的第6位的谷氨酸被纈氨酸置換而成的異常血紅蛋白，是鐮刀形紅細(xì)胞貧血癥 的診斷指標(biāo)。進(jìn)而，糖化血紅蛋白是與血液中的葡萄糖反應(yīng)而成的血紅蛋白，由于反映了生 物體內(nèi)血糖值的過去的歷程，因此是糖尿病的診斷、治療等中的指標(biāo)。糖化血紅蛋白中，β 鏈N末端的纈氨酸經(jīng)糖化而成的血紅蛋白Alc(HbAlc)是尤其重要的指標(biāo)，是定期健康診斷 的檢查項(xiàng)目。這樣，包括血紅蛋白在內(nèi)的血液中的蛋白質(zhì)是各種疾病的重要指標(biāo)，因此，要 求開發(fā)一種在臨床檢查等中也能夠利用的、運(yùn)行成本低、小型化的分析裝置。血液中的血紅蛋白的測定方法中，血紅蛋白的測定方法包括例如免疫法、酶法、親 和色譜法、HPLC法、毛細(xì)管電泳法等。免疫法及酶法由于能夠應(yīng)用于自動(dòng)分析裝置，因此具 有能夠處理大量待測物的優(yōu)點(diǎn)，但缺乏測定精度，分析需要約10分鐘。并且，親和色譜法在 分離原理上HbAlc的測定精度低，分析需要2分鐘。另外，HPLC法作為血紅蛋白的測定方 法而被廣泛使用(例如專利文獻(xiàn)1等)，但需要大型且昂貴的專用裝置，難以實(shí)現(xiàn)裝置的小 型化及低成本化，分析需要約1分鐘。并且，毛細(xì)管電泳法能夠通過利用微芯片而實(shí)現(xiàn)裝置 的小型化，能夠以約90秒進(jìn)行分析(例如專利文獻(xiàn)2等)，但從在臨床檢查中的利用的觀點(diǎn) 出發(fā)，要求進(jìn)一步縮短分析時(shí)間?，F(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)1 日本專利第3似9709號(hào)公報(bào)專利文獻(xiàn)2 國際公開第2008/047703號(hào)小冊子

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明要解決的問題因此，本發(fā)明的目的在于提供一種通過毛細(xì)管電泳法來進(jìn)行分析的分析裝置及分 析方法，該裝置整體小型化，操作簡便，運(yùn)行成本低，能夠以短時(shí)間且高精度來分析血液中 所含的蛋白質(zhì)。用于解決問題的方案
為了達(dá)到前述目的，本發(fā)明的分析裝置的特征在于，該毛細(xì)管電泳分析裝置通過毛細(xì)管電泳法來分析血蛋白(blood protein),其具有電泳芯片、電壓施加單元、送液單元及吸光度測定單元，前述電泳芯片包括基板、多個(gè)液槽及毛細(xì)管流路，前述電壓施加單元包括電極，前述基板上形成有前述多個(gè)液槽，前述多個(gè)液槽通過前述毛細(xì)管流路而連通，前述毛細(xì)管流路包括試樣分析用的毛細(xì)管流路，使用前述送液單元，向前述試樣分析用毛細(xì)管流路中填充電泳液，向填充有前述電泳液的前述試樣分析用毛細(xì)管流路中導(dǎo)入含有作為分析對(duì)象的 前述血蛋白的試樣，
對(duì)前述電極施加電壓，使前述試樣進(jìn)行電泳，通過前述吸光度測定單元來測定電泳動(dòng)的前述試樣中的前述血蛋白的吸光度，前述血蛋白的分析時(shí)間為35秒以下。本發(fā)明的分析方法的特征在于，該分析方法通過毛細(xì)管電泳法來分析血蛋白，使用形成有毛細(xì)管流路的電泳芯片，前述毛細(xì)管流路包括試樣分析用的毛細(xì)管流路，該方法包括電泳工序，該工序向填充有電泳液的前述試樣分析用毛細(xì)管流路中 導(dǎo)入含有前述血蛋白的試樣，對(duì)電極施加電壓，使前述試樣進(jìn)行電泳，測定工序，該工序測定前述電泳動(dòng)的試樣中的前述血蛋白的吸光度，前述血蛋白的分析時(shí)間為35秒以下。另外，本發(fā)明的分析方法中，前述電泳芯片 優(yōu)選為前述的本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置中的前述電泳芯片，另外，優(yōu)選使用前述毛細(xì) 管電泳分析裝置。發(fā)明的效果本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置能夠?qū)⒀b置整體小型化，操作簡便，運(yùn)行成本低， 能夠以35秒以下的短時(shí)間且高精度分析血蛋白。另外，本發(fā)明的分析方法能夠使用操作 簡便、運(yùn)行成本低、能夠小型化的分析裝置，能夠以35秒以下的短時(shí)間且高精度分析血蛋 白。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置及使用該裝置的分析方法特別適合于微型全分析系統(tǒng) (μ TAS)。


圖1的(A)是表示本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置中所含的電泳芯片的一個(gè)例子的 平面圖。圖1的(B)是從圖1的(A)所示的電泳芯片的I-I方向觀察的截面圖。圖2是表示本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置的一個(gè)例子的示意圖。圖3的㈧是表示本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置中所含的電泳芯片的其他例子的 平面圖。圖3的(B)是從圖3的(A)所示的電泳芯片的I-I方向觀察的截面圖。圖3的 (C)是從圖3的(A)所示的電泳芯片的II-II方向觀察的截面圖。圖4的(A)是表示本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置中所含的電泳芯片的另一其他例 子的平面圖。圖4的(B)是圖4的(A)所示的電泳芯片的立體圖。
圖5是表示本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置的其他例子的示意圖。圖6是表示本發(fā)明的分析方法的一個(gè)例子中的血紅蛋白的分析結(jié)果的圖表。圖7是表示本發(fā)明的分析方法的其他例子中的血紅蛋白的分析結(jié)果的圖表。圖8是表示本發(fā)明的分析方法的另一其他例子中的血紅蛋白的分析結(jié)果的圖表。圖9是表示本發(fā)明的分析方法的另一其他例子中的血紅蛋白的分析結(jié)果的圖表。圖10是表示本發(fā)明的另一其他例子中的血紅蛋白的分析結(jié)果的圖表。圖11是表示比較例的分析方法中的血紅蛋白的分析結(jié)果的圖表。圖12是表示其他比較例的分析方法中的血紅蛋白的分析結(jié)果的圖表。附圖標(biāo)記說明UlOO毛細(xì)管電泳分析裝置2,200電泳芯片3a上基板3b下基板4a、4b、4c、4d、4e 液槽5x試樣分析用毛細(xì)管流路5y試樣導(dǎo)入用毛細(xì)管流路6a、6b、6c、6d 電極7a、7b、7c、7d、7e、7f、7g 電線8狹縫9控制部11光源12濾光器13聚光透鏡14檢測器20電泳芯片移動(dòng)機(jī)構(gòu)21驅(qū)動(dòng)部22載物臺(tái)30定量分注器31稀釋液32電泳液41試樣導(dǎo)入口42試樣導(dǎo)入流路43、53a、53b 分支部44,54溢流流路45、55、57、59、63 排出口46試樣計(jì)量流路47節(jié)流孔51試劑槽52a>52b試劑導(dǎo)入流路
565861627080
90試劑計(jì)量流路 稀釋槽電極配置部 流量測量流路 連接器泳動(dòng)起始點(diǎn) 檢測點(diǎn)
具體實(shí)施例方式本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置優(yōu)選的是，前述試樣分析用毛細(xì)管流路中，與流路方向垂直的方向的截面形狀為圓形或矩形，為圓形時(shí)，其直徑在25μπι ΙΟΟμπι的范圍，為矩形時(shí)，其寬度在25μπι ΙΟΟμπι的范圍，其深度在25μπι ΙΟΟμπι的范圍，前述試樣的電泳從泳動(dòng)起始點(diǎn)開始，前述電泳動(dòng)的試樣中的前述血蛋白的吸光度在檢測點(diǎn)被測定，從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距離為5cm以下。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置中，前述試樣分析用毛細(xì)管流路的內(nèi)壁表面具有離 子性官能團(tuán)，前述電泳液的pH在pH4. 0 6. 0的范圍，前述施加電壓時(shí)產(chǎn)生的電滲流為3cm/分鐘以上。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置中，前述電泳液優(yōu)選含有硫酸化多糖類。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置中，前述硫酸化多糖類優(yōu)選為硫酸軟骨素。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置優(yōu)選的是，在前述試樣分析用毛細(xì)管流路中，在前 述截面形狀是寬度及深度分別為30μπι的矩形時(shí)，在從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距 離為0. 25cm以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為300V/cm以下，在前述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為300 600V/cm，在前述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為400 650V/cm，在前述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為450 700V/cm。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置優(yōu)選的是，在前述試樣分析用毛細(xì)管流路中，在前 述截面形狀是寬度及深度分別為40μπι的矩形時(shí)，在從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距 離為0. 25cm以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為250V/cm以下，在前述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為250 500V/cm，在前述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為375 550V/cm，在前述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為400 600V/cm。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置優(yōu)選的是，在前述試樣分析用毛細(xì)管流路中，在前 述截面形狀是寬度及深度分別為50 μ m的矩形時(shí)，在從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距 離為0. 25cm以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為200V/cm以下，在前述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為200 450V/cm，
在前述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為300 500V/cm，在前述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為350 550V/cm。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置優(yōu)選的是，在前述試樣分析用毛細(xì)管流路中，在前 述截面形狀是寬度及深度分別為60μπι的矩形時(shí)，在從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距 離為0. 25cm以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為150V/cm以下，在前述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為150 400V/cm，在前述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為250 450V/cm，在前述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為300 500V/cm。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置中，優(yōu)選的是，以前述血蛋白作為分析項(xiàng)目，前述分 析項(xiàng)目為血紅蛋白。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置中，前述血紅蛋白優(yōu)選為血紅蛋白Alc(HbAlc)及 血紅蛋白F(HbF)中的至少一種。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置中，優(yōu)選的是，以前述血紅蛋白Alc(HbAlc)作為分 析項(xiàng)目，作為前述血紅蛋白Alc(HbAlc)的分析，計(jì)算出血紅蛋白Alc濃度(HbAlc濃度)。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置中，優(yōu)選的是，前述試樣為將前述血液進(jìn)行了溶血 處理而得到的試樣，并分析將前述血液進(jìn)行溶血處理而得到的試樣中的前述血紅蛋白。本發(fā)明的分析方法優(yōu)選的是，在前述試樣分析用毛細(xì)管流路中，與流路方向垂直的方向的截面形狀為圓形或矩形，為圓形時(shí)，其直徑在25μπι ΙΟΟμπι的范圍，為矩形時(shí)，其寬度在25μπι ΙΟΟμπι 的范圍，其深度在25μπι IOOym的范圍，前述試樣的電泳從泳動(dòng)起始點(diǎn)開始，前述電泳動(dòng)的試樣中的前述血蛋白的吸光度在檢測點(diǎn)被測定，從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距離為5cm以下。本發(fā)明的分析方法中，較佳的是，前述試樣分析用毛細(xì)管流路的內(nèi)壁表面具有離 子性官能團(tuán)，前述電泳液的pH在pH4. 0 6. 0的范圍，前述施加電壓時(shí)產(chǎn)生的電滲流為3cm/分鐘以上。本發(fā)明的分析方法中，前述電泳液優(yōu)選含有硫酸化多糖類。本發(fā)明的分析方法中，前述硫酸化多糖類優(yōu)選為硫酸軟骨素。本發(fā)明的分析方法中，優(yōu)選的是，前述試樣分析用毛細(xì)管流路中，在前述截面形狀 是寬度及深度分別為30 μ m的矩形時(shí)，在從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距離為0. 25cm 以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為300V/cm以下，在前述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為300 600V/cm，在前述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為400 650V/cm，在前述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為450 700V/cm。本發(fā)明的分析方法中，優(yōu)選的是，在前述試樣分析用毛細(xì)管流路中，在前述截面 形狀是寬度及深度分別為40μπι的矩形時(shí)，在從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距離為 0. 25cm以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為250V/cm以下，在前述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為250 500V/cm，
在前述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為375 550V/cm，在前述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為400 600V/cm。本發(fā)明的分析方法中，優(yōu)選的是，在前述試樣分析用毛細(xì)管流路中，在前述截面 形狀是寬度及深度分別為50μπι的矩形時(shí)，在從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距離為 0. 25cm以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為200V/cm以下，在前述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為200 450V/cm，在前述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為300 500V/cm，在前述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為350 550V/cm。本發(fā)明的分析方法中，優(yōu)選的是，在前述試樣分析用毛細(xì)管流路中，在前述截面 形狀是寬度及深度分別為60μπι的矩形時(shí)，在從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距離為 0. 25cm以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為150V/cm以下，在前述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為150 400V/cm，在前述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為250 450V/cm，在前述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為300 500V/cm。本發(fā)明的分析方法中，優(yōu)選的是，以前述血蛋白作為分析項(xiàng)目，前述分析項(xiàng)目為血 紅蛋白。本發(fā)明的分析方法中，前述血紅蛋白優(yōu)選為血紅蛋白Alc(HbAlc)及血紅蛋白 F (HbF)中的至少一種。本發(fā)明的分析方法中，優(yōu)選的是，以前述血紅蛋白Alc(HbAlc)作為分析項(xiàng)目，作 為前述血紅蛋白Alc(HbAlc)的分析，計(jì)算出血紅蛋白Alc濃度(HbAlc濃度)。本發(fā)明的分析方法中，優(yōu)選的是，前述試樣為將前述血液進(jìn)行溶血處理而得到的 試樣，并分析將前述血液進(jìn)行溶血處理而得到的試樣中的前述血紅蛋白。以下，對(duì)本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置進(jìn)行詳細(xì)說明。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置只要如前所述具有以下所示的電泳芯片、電壓施加 單元、送液單元及吸光度測定單元即可，其他構(gòu)成沒有特別限制。另外，本發(fā)明的毛細(xì)管電 泳分析裝置例如也可以不具有前述送液單元。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置中，前述電泳芯片如前所述包括基板、多個(gè)液槽及 毛細(xì)管流路。前述電泳芯片的大小沒有特別限制，例如其最大長度在IOmm IOOmm的范圍，其 最大寬度在IOmm 60mm的范圍，其最大厚度在0. 3mm 5mm的范圍，優(yōu)選的是其最大長度 在30mm 70mm的范圍。另外，前述電泳芯片的最大長度是指前述電泳芯片的長度方向的 最長部的長度，前述電泳芯片的最大寬度是指前述電泳芯片的短邊方向的最長部的長度， 前述電泳芯片的最大厚度是指與前述電泳芯片的前述長度方向及前述短邊方向這兩個(gè)方 向垂直的方向(厚度方向)的最長部的長度。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置中，前述電泳芯片只要包括基板、多個(gè)液槽和毛細(xì) 管流路即可，其他構(gòu)成沒有特別限制。前述基板沒有特別限定，例如可列舉出由一塊基板構(gòu)成的形態(tài)、將上基板和下基 板合在一起的形態(tài)等。作為前述基板的材質(zhì)，沒有特別限制，例如可列舉出玻璃、聚合物 材料等。作為前述玻璃材料，沒有特別限制，例如可列舉出合成石英玻璃、硼硅酸鹽玻璃、熔融二氧化硅等。作為前述聚合物材料，沒有特別限制，例如可列舉出聚甲基丙烯酸甲酯 (PMMA)、環(huán)烯烴聚合物(COP)、聚碳酸酯(PC)、聚二甲基硅氧烷(PDMS)、聚苯乙烯(PS)、聚乳 酸(PLA)等。前述液槽沒有特別限制，例如可列舉出形成于前述上基板的貫通孔的底部被前述 下基板密封而形成的凹部等。前述液槽的形狀沒有特別限定，例如可列舉出圓柱狀、四棱柱 狀、四棱錐狀、圓錐狀等。另外，前述各液槽的容積沒有特別限定，例如分別在1 IOOOmm3 的范圍，優(yōu)選在10 IOOmm3的范圍。前述各液槽的容積可全部相同，也可不同，沒有特別 限制。前述毛細(xì)管流路例如可以形成于前述基板上，也可以是埋設(shè)于前述基板中的毛細(xì)管。前述毛細(xì)管流路中，與流路方向垂直的方向的截面形狀沒有特別限定，例如可列 舉出圓形、矩形、橢圓形等。前述毛細(xì)管流路的前述截面形狀為圓形時(shí)，其直徑?jīng)]有特別限 定，例如在Ιμπι IOOOym的范圍，優(yōu)選在10 μ m 200 μ m的范圍。前述毛細(xì)管流路的前 述截面形狀為矩形時(shí)，其寬度及深度沒有特別限定，例如寬度在10 μ m 200 μ m的范圍，深 度在10 μ m 200 μ m的范圍。前述毛細(xì)管流路中，其長度沒有特別限定，例如在0. 5cm 15cm的范圍，優(yōu)選在Icm 5cm的范圍。如前所述，前述毛細(xì)管流路中包括前述試樣分析用毛細(xì)管流路。前述試樣分析用 毛細(xì)管流路中，與流路方向垂直的方向的截面形狀為圓形時(shí)，其直徑?jīng)]有特別限定，例如在 10 μ m 200 μ m的范圍，優(yōu)選在25 μ m 100 μ m的范圍。前述試樣分析用毛細(xì)管流路中，前 述截面形狀為矩形時(shí)，例如其寬度在25 μ m 100 μ m的范圍，其深度在25 μ m 100 μ m的 范圍。另外，本發(fā)明中，前述試樣分析用毛細(xì)管流路的長度沒有特別限定，例如在0.5cm 15cm的范圍，優(yōu)選在Icm 5cm的范圍。前述毛細(xì)管流路如前所述例如可通過前述基板而形成，也可通過埋入毛細(xì)管而形 成于前述基板內(nèi)。為前者時(shí)，前述毛細(xì)管流路的材質(zhì)例如為前述基板的材質(zhì)，為后者時(shí)，前 述毛細(xì)管流路的材質(zhì)例如為所埋入的前述毛細(xì)管的材質(zhì)。作為前述毛細(xì)管流路的材質(zhì)，沒 有特別限定，例如與前述同樣地可列舉出合成石英玻璃、硼硅酸鹽玻璃、熔融二氧化硅等玻 璃材料、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、環(huán)烯烴聚合物(COP)、聚碳酸酯(PC)、聚二甲基硅氧烷 (PDMS)、聚苯乙烯(PS)、聚乳酸(PLA)、聚乙烯(PE)、聚四氟乙烯(PTFE)、聚醚醚酮(PEEK) 等聚合物材料等。前述毛細(xì)管例如可以使用市售品。前述玻璃制的毛細(xì)管流路的內(nèi)壁通常為具有陰極性的電荷的狀態(tài)。這種玻璃制的 毛細(xì)管流路例如通過導(dǎo)入陽極性基團(tuán)而能夠使其內(nèi)壁表面成為具有陽極性的電荷的狀態(tài)。 前述聚合物制的毛細(xì)管流路的內(nèi)壁通常根據(jù)前述聚合物內(nèi)的極性基團(tuán)的有無、種類而為具 有陽極性或陰極性的電荷的狀態(tài)，或者為無電荷(無極性)的狀態(tài)。前述無電荷的前述聚 合物制的毛細(xì)管流路例如通過導(dǎo)入極性基團(tuán)而能夠使其內(nèi)壁表面成為具有電荷的狀態(tài)。本發(fā)明中，前述試樣分析用毛細(xì)管流路的內(nèi)壁如前所述優(yōu)選其表面具有離子性官 能團(tuán)。作為前述離子性官能團(tuán)，例如可列舉出陽極性基團(tuán)、陰極性基團(tuán)。本發(fā)明中，內(nèi)壁表面具有前述陽極性基團(tuán)的試樣分析用毛細(xì)管流路例如可以利用 含陽極性基團(tuán)化合物包覆前述試樣分析用毛細(xì)管流路的內(nèi)壁而形成。另外，以下有時(shí)也將 利用含陽極性基團(tuán)化合物的包覆稱為陽極性層。通過前述含陽極性基團(tuán)化合物的包覆(陽極性層)，例如能夠防止試樣中的帶正電荷的蛋白質(zhì)等吸附于前述試樣分析用毛細(xì)管流路 的內(nèi)壁。另外，與未處理相比，例如通過前述含陽極性基團(tuán)化合物的包覆時(shí)，有電滲流變快 的傾向。作為前述含陽極性基團(tuán)化合物，沒有特別限定，例如可列舉出含有前述陽極性基團(tuán) 及反應(yīng)基團(tuán)的化合物等。例如，前述試樣分析用毛細(xì)管流路為玻璃制或熔融二氧化硅制時(shí)， 作為含有前述陽極性基團(tuán)及反應(yīng)基團(tuán)的化合物，可使用具有陽極性基團(tuán)及硅的化合物(甲 硅烷基化劑)等。作為前述陽極性基團(tuán)，沒有特別限定，優(yōu)選為氨基、銨基。作為前述含陽 極性基團(tuán)化合物，沒有特別限定，優(yōu)選為具有氨基及銨基中的至少一種陽極性基團(tuán)的甲硅 烷基化劑。前述氨基可以是伯氨、仲氨、叔氨中的任一種。作為前述甲硅烷基化劑，例如可列舉出N-(2- 二氨基乙基)-3-丙基三甲氧基硅 烷、氨基苯氧基二甲基乙烯基硅烷、3-氨基丙基二異丙基乙氧基硅烷、3-氨基丙基甲基雙 (三甲基甲硅氧基)硅烷、3-氨基丙基五甲基二硅氧烷、3-氨基丙基硅烷三醇、雙(對(duì)氨基 苯氧基)二甲基硅烷、1，3_雙(3-氨基丙基)四甲基二硅氧烷、雙(二甲基氨基)二甲基硅 烷、雙(二甲基氨基)乙烯基甲基硅烷、雙(2-羥基乙基)-3-氨基丙基三乙氧基硅烷、3-氰 基丙基(二異丙基)二甲基氨基硅烷、(氨基乙基氨基甲基)苯乙基三甲氧基硅烷、N-甲基 氨基丙基三乙氧基硅烷、四(二乙基氨基)硅烷、三(二甲基氨基)氯硅烷、三(二甲基氨 基)硅烷等。作為前述含陽極性基團(tuán)化合物，除此之外，也可使用將前述甲硅烷基化劑中的硅 原子用鈦或鋯置換而成的化合物。前述含陽極性基團(tuán)化合物可單獨(dú)使用一種，也可并用二 種以上。使用了前述甲硅烷基化劑的、前述試樣分析用毛細(xì)管流路內(nèi)壁的包覆例如如下所 述實(shí)施。首先，將前述甲硅烷基化劑溶解或分散于有機(jī)溶劑中而調(diào)制處理液。作為用于調(diào) 制前述處理液的前述有機(jī)溶劑，例如可使用二氯甲烷、甲苯、甲醇、丙酮等。前述處理液中的 甲硅烷基化劑的濃度沒有特別限定。將該處理液例如通入到玻璃制或熔融二氧化硅制的毛 細(xì)管流路內(nèi)并加熱。通過該加熱，前述甲硅烷基化劑與前述毛細(xì)管流路內(nèi)壁通過共價(jià)鍵而 結(jié)合，其結(jié)果是，陽極性基團(tuán)配置于前述毛細(xì)管流路內(nèi)壁。其后，作為后處理，將前述有機(jī)溶 劑用磷酸等酸性溶液、堿性溶液及表面活性劑溶液中的至少一者沖洗，洗滌前述毛細(xì)管流 路內(nèi)。另外，該洗滌是任意的，但優(yōu)選實(shí)施。內(nèi)壁被前述甲硅烷基化劑包覆而成的毛細(xì)管流 路可使用市售品。內(nèi)壁表面具有前述陰極性基團(tuán)的試樣分析用毛細(xì)管流路，例如可以利用含陰極性 基團(tuán)化合物包覆前述試樣分析用毛細(xì)管流路的內(nèi)壁而形成。另外，以下有時(shí)也將利用含陰 極性基團(tuán)化合物的包覆稱為陰極性層。通過前述含陰極性基團(tuán)化合物的包覆(陰極性層)， 例如能夠防止試樣中的帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)等吸附于前述試樣分析用毛細(xì)管流路的內(nèi)壁。并 且，與未處理相比，例如通過前述陰極性基團(tuán)的包覆時(shí)，有電滲流變快的傾向。另外，包覆前 述含陰極性基團(tuán)化合物時(shí)，前述電滲流的方向與包覆前述陽極性基時(shí)相反。另外，由于前述 試樣與電泳液中存在的前述含陰極性基團(tuán)化合物形成復(fù)合體，且使該復(fù)合體進(jìn)行電泳，因 此與試樣單獨(dú)進(jìn)行電泳相比分離效率提高。其結(jié)果是，能夠以更短時(shí)間、更高精度進(jìn)行分 析。作為與前述試樣形成復(fù)合體的前述含陰極性基團(tuán)化合物，例如優(yōu)選為含陰極性基團(tuán)多 糖類。作為前述含陰極性基團(tuán)多糖類，例如可列舉出硫酸化多糖類、羧酸化多糖類、磺酸化多糖類及磷酸化多糖類等，其中，優(yōu)選硫酸化多糖類及羧酸化多糖類。作為前述硫酸化多 糖類，優(yōu)選硫酸軟骨素、肝素等，更優(yōu)選為硫酸軟骨素。作為前述羧酸化多糖類，優(yōu)選海藻酸 或其鹽(例如海藻酸鈉)。前述硫酸軟骨素有A、B、C、D、E、H、K這七種，均可使用，但優(yōu)選 硫酸軟骨素C。前述陰極性層例如可隔著夾層而層疊于前述試樣分析用毛細(xì)管流路內(nèi)壁。前述夾 層沒有特別限定，例如可利用前述含陽極性基團(tuán)化合物來形成。隔著前述夾層而層疊的前 述陰極性層例如可通過使含有前述含陰極性基團(tuán)化合物的溶液與被前述含陽極性基團(tuán)化 合物包覆的前述試樣分析用毛細(xì)管流路的內(nèi)壁接觸而形成。這種情況下，用于形成前述陰 極性基團(tuán)的溶液可另行調(diào)制，但從操作效率的方面出發(fā)，優(yōu)選使添加前述含陰極性基團(tuán)化 合物調(diào)制而成的電泳液通入內(nèi)壁形成有前述夾層的前述毛細(xì)管流路。本發(fā)明中，如前所述，并不限于前述試樣分析用毛細(xì)管流路，例如，可以是形成于 前述基板上的其他毛細(xì)管流路的內(nèi)壁具有前述離子性官能團(tuán)，也可以是全部毛細(xì)管流路的 內(nèi)壁具有前述離子性官能團(tuán)。內(nèi)壁具有前述離子性官能團(tuán)的其他毛細(xì)管流路可與前述的試 樣分析用毛細(xì)管流路同樣地形成。本發(fā)明中，向前述試樣分析用毛細(xì)管流路中導(dǎo)入含有作為分析對(duì)象的血蛋白的試 樣和電泳液。本發(fā)明中，作為前述電泳液，沒有特別限定，優(yōu)選含有有機(jī)酸的電泳液。前述有機(jī) 酸沒有特別限定，例如可列舉出馬來酸、酒石酸、琥珀酸、富馬酸、苯二甲酸、丙二酸、蘋果酸 等。另外，前述電泳液沒有特別限定，例如優(yōu)選含有弱堿。作為前述弱堿，沒有特別限定，例 如可列舉出精氨酸、賴氨酸、組氨酸、三羥甲基氨基甲烷(Tris)等。前述電泳液沒有特別限 定，例如可列舉出ADA緩沖液、MES緩沖液、Bis-Tris緩沖液、PIPES緩沖液、ACES緩沖液、 MOPSO緩沖液、BES緩沖液、HEPES緩沖液、TES緩沖液、磷酸緩沖液等。前述電泳液的pH沒 有特別限定，例如在前述的范圍，優(yōu)選在PH4. 5 6. 0的范圍。本發(fā)明中，優(yōu)選在前述電泳液中如前所述添加前述含陰極性基團(tuán)化合物。作為前 述含陰極性基團(tuán)化合物，沒有特別限定，例如可列舉出前述的含陰極性基團(tuán)化合物等。前述 電泳液中所含的前述含陰極性基團(tuán)化合物的濃度沒有特別限定，例如在0.001 10重量％ 的范圍，優(yōu)選在0. 1 5重量％的范圍。本發(fā)明中，前述電泳液中可添加例如表面活性劑。作為前述表面活性劑，沒有特 別限定，例如可列舉出甜菜堿型兩性表面活性劑、非離子性表面活性劑等。作為前述甜菜 堿型兩性表面活性劑，沒有特別限定，例如可列舉出羧基甜菜堿型表面活性劑、磺基甜菜堿 型表面活性劑等。作為前述羧基甜菜堿型表面活性劑，例如可列舉出N，N-二甲基-N-烷 基-N-羧基亞烷基銨甜菜堿等。另外，作為前述磺基甜菜堿型表面活性劑，例如可列舉出N， N，N-三烷基-N-磺基亞烷基銨甜菜堿等。作為前述磺基甜菜堿型表面活性劑的具體例子， 例如可列舉出棕櫚基磺基甜菜堿等。本發(fā)明中，前述電泳液中可添加例如陰離子性的離液序列高的離子。本發(fā)明中，前 述陰離子性的離液序列高的離子中也包括含有陰離子性的離液序列高的離子的鹽、電離而 產(chǎn)生陰離子性的離液序列高的離子的物質(zhì)等。作為前述鹽，例如可列舉出酸性鹽、中性鹽、 堿性鹽。本發(fā)明中，作為前述陰離子性的離液序列高的離子，沒有特別限定，例如可列舉出 高氯酸、硫氰酸、碘化鉀、溴化鉀、三氯醋酸、三氟醋酸等。前述電泳液中所含的前述陰離子性的離液序列高的離子的濃度沒有特別限定，例如在1 3000mmol/L的范圍，優(yōu)選在5 IOOmmol/L的范圍，更優(yōu)選在10 50mmol/L的范圍。本發(fā)明中，作為含有分析對(duì)象的前述血蛋白的試樣，例如可列舉出全血、將血液進(jìn) 行溶血處理而得到的試樣等。其中，本發(fā)明中優(yōu)選分析將前述血液進(jìn)行溶血處理而得到的 試樣中的蛋白質(zhì)。作為前述溶血處理，例如可列舉出表面活性劑處理、滲透壓變化處理、超 聲波處理、冷凍解凍處理、加壓處理等，優(yōu)選為表面活性劑處理、滲透壓變化處理、超聲波處理。前述表面活性劑處理沒有特別限制，例如可通過添加了表面活性劑的稀釋液將全 血溶血。作為前述表面活性劑，例如可列舉出前述的表面活性劑、皂苷等。另外，前述滲透壓 變化處理沒有特別限制，例如可使用調(diào)整至低滲透壓的溶液而將全血溶血。作為前述溶液， 沒有特別限定，例如可列舉出蒸餾水、調(diào)整至低滲透壓的稀釋液等，優(yōu)選為蒸餾水。并且，作 為前述超聲波處理，沒有特別限制，例如可使用超聲波處理裝置。本發(fā)明中，作為前述稀釋 液，沒有特別限定，例如可列舉出蒸餾水、前述電泳液等。另外，本發(fā)明中，前述血蛋白是指血液中所含的蛋白質(zhì)。作為前述血蛋白，沒有特 別限定，例如可列舉出血紅蛋白(Hb)、白蛋白(Alb)、球蛋白(α 、α 2, β, γ球蛋白)、纖 維蛋白原等。作為前述血紅蛋白，沒有特別限定，例如可列舉出正常血紅蛋白(HbAO)、糖化血紅 蛋白、修飾血紅蛋白、胎兒血紅蛋白(HbF)等。作為前述糖化血紅蛋白，例如可列舉出血紅 蛋白Ala(HbAla)、血紅蛋白Alb (HbAlb)、血紅蛋白Alc (HbAlc)、GHbLys等。作為前述血紅 蛋白Alc，例如可列舉出穩(wěn)定型HbAlc、不穩(wěn)定型HbAlc等。作為前述修飾血紅蛋白，例如可 列舉出氨基甲?；疕b、乙酰化Hb等。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置以前述血蛋白作為分析項(xiàng)目。作為前述分析項(xiàng)目， 沒有特別限定，例如前述的血蛋白中優(yōu)選血紅蛋白。本發(fā)明中，作為分析項(xiàng)目，沒有特別限定，例如可列舉出前述各種血紅蛋白的比 率、血紅蛋白Alc濃度、白蛋白濃度、球蛋白濃度、白蛋白/球蛋白比率等。本發(fā)明中，利用通過對(duì)前述電極施加電壓而產(chǎn)生的電滲流使前述試樣從泳動(dòng)起始 點(diǎn)向著檢測點(diǎn)進(jìn)行電泳。并且，在前述試樣分析用毛細(xì)管流路上的檢測點(diǎn)，測定電泳動(dòng)的前 述試樣中的血蛋白的吸光度。本發(fā)明中，前述泳動(dòng)起始點(diǎn)是指導(dǎo)入到前述試樣分析用毛細(xì)管流路中的前述試樣 通過電壓施加而開始電泳的、前述試樣分析用毛細(xì)管流路上的點(diǎn)。前述泳動(dòng)起始點(diǎn)例如可 列舉出導(dǎo)入前述試樣的液槽與前述試樣分析用毛細(xì)管流路的邊界等，沒有特別限定。另外， 本發(fā)明中，前述檢測點(diǎn)如前所述是指測定在前述試樣分析用毛細(xì)管流路內(nèi)進(jìn)行了前述電泳 的前述試樣中的血蛋白的吸光度的點(diǎn)。前述檢測點(diǎn)位于前述試樣分析用毛細(xì)管流路上，距 離前述泳動(dòng)起始點(diǎn)的距離沒有特別限制，例如優(yōu)選位于后述的范圍內(nèi)的位置。本發(fā)明中，從 前述泳動(dòng)起始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距離(分離長度)沒有特別限定，例如在0. 5cm 15cm的 范圍，優(yōu)選在Icm 5cm的范圍。本發(fā)明中，前述電壓沒有特別限制，例如在0. 075kV 20kV的范圍，優(yōu)選在 0. 3kV 5kV的范圍。另外，本發(fā)明中，前述電滲流沒有特別限定，例如在3cm/分鐘 15cm/ 分鐘的范圍，優(yōu)選在8cm/分鐘 12cm/分鐘的范圍。
本發(fā)明中，作為前述吸光度的測定波長，例如在^Onm 300nm或380nm 450nm 的范圍，優(yōu)選在400nm 430nm的范圍。本發(fā)明中，前述血蛋白的分析時(shí)間是指例如分離作為分析對(duì)象的前述試樣中所含 的前述血蛋白、并完成其檢測的時(shí)間。前述血蛋白的分析時(shí)間具體而言為例如從開始對(duì)前 述電極施加電壓時(shí)到完成作為分析對(duì)象的前述血蛋白的全部檢測為止的時(shí)間。本發(fā)明中， 前述血蛋白的分析時(shí)間超過0秒且在35秒以下，優(yōu)選超過0秒且在30秒以下，更優(yōu)選超過 0秒且在25秒以下，進(jìn)一步優(yōu)選超過0秒且在20秒以下。本發(fā)明中，從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距離及前述分離電場例如優(yōu)選根據(jù) 前述毛細(xì)管流路的寬度及深度而設(shè)定在前述的規(guī)定范圍。本發(fā)明中，前述分離電場是指施 加于每Icm電極間距離的電壓。本發(fā)明中，通過根據(jù)前述毛細(xì)管流路的寬度及深度而將從 前述泳動(dòng)起始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距離及前述分離電場設(shè)定在前述的規(guī)定范圍內(nèi)，能夠以35 秒以下的短時(shí)間分析前述血蛋白。本發(fā)明中，前述規(guī)定范圍可根據(jù)電泳液(泳動(dòng)緩沖液) 的種類、前述離子性官能團(tuán)在毛細(xì)管流路的涂敷方法等而適當(dāng)設(shè)定，并不限于前述的范圍。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置沒有特別限制，例如還可具有定量分注單元、攪拌 單元、雜散光除去單元、位置調(diào)整單元等。接著，舉出例子對(duì)本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置和使用其的分析方法進(jìn)行說明。 但是，本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置和使用其的分析方法并不限定于下述的例子。(實(shí)施方式1)圖1示出了本例的毛細(xì)管電泳分析裝置中所用的電泳芯片。圖1的㈧是該例的 電泳芯片的平面圖，圖1的⑶是從圖1的㈧的I-I方向觀察的截面圖。該圖中，為了便 于理解，各構(gòu)成要素的大小、比率等與實(shí)際不同。如圖所示，該例的電泳芯片2由上基板3a 層疊于下基板北上而構(gòu)成。前述上基板3a形成有三個(gè)貫通孔。通過形成于前述上基板3a 的三個(gè)貫通孔的底部被前述下基板北密封，從而形成三個(gè)液槽^、4b及如。前述下基板 3b上形成有I字狀的槽。形成于前述下基板北上的I字狀的槽的上部被前述上基板3a密 封，從而形成試樣分析用毛細(xì)管流路切。前述液槽如及前述液槽4b通過前述試樣分析用 毛細(xì)管流路切而連通。另一方面，前述液槽如不與前述試樣分析用毛細(xì)管流路切連通， 作為單獨(dú)的液槽而配置。前述毛細(xì)管流路切的前述液槽如側(cè)的端部成為泳動(dòng)起始點(diǎn)80。 另外，前述毛細(xì)管流路切上的前述液槽如與前述液槽4b之間的一點(diǎn)成為檢測點(diǎn)90。另 外，該例的電泳芯片2為長方體狀。但是，本發(fā)明并不限定于本例。本發(fā)明中，電泳芯片只 要不給后述試樣的分析帶來障礙，則可以是任意形狀。另外，該例的電泳芯片2包括二塊基 板(上基板3a及下基板北)。但是，本發(fā)明并不限定于此。本發(fā)明中，電泳芯片例如可由一 塊基板構(gòu)成。該例的電泳芯片2中，前述上基板3a的長度及寬度成為前述電泳芯片整體的最大 長度及最大寬度。因此，前述上基板3a的長度及寬度與前述電泳芯片整體的最大長度及最 大寬度相同即可。本例的電泳芯片2中的前述上基板3a的厚度可根據(jù)前述多個(gè)液槽^、4b 及4e的容積而適當(dāng)設(shè)定，例如在0. Imm 3mm的范圍，優(yōu)選在Imm 2mm的范圍。該例的電泳芯片2中，前述下基板北的長度及寬度與前述上基板3a的長度及寬 度相同。前述下基板北的厚度沒有特別限定，例如在0. Imm 3mm的范圍，優(yōu)選在0. Imm Imm的范圍。
前述上基板3a及前述下基板北的材質(zhì)只要不阻礙前述吸光度的測定，則沒有特 別限制。作為前述上基板3a及前述下基板北的材質(zhì)，例如可使用由前述的材料等形成的 材質(zhì)。關(guān)于前述試樣分析用毛細(xì)管流路切的寬度及深度，例如其寬度在25 μ m 100 μ m 的范圍，其深度在25μπι IOOym的范圍。另外，從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)80至前述檢測點(diǎn)90 的距離例如在0. 5cm 15cm的范圍，優(yōu)選在Icm 5cm的范圍。前述液槽如、前述液槽4b及前述液槽如的容積與前述相同。圖1中，前述液槽 如、仙及如的形狀為圓柱狀。但是，本發(fā)明并不限定于此。本發(fā)明中，前述液槽^、4b及 4e的形狀如前所述可為任意的形狀。該例的電泳芯片2中，前述芯片的最大厚度為前述上基板3a及前述下基板北的 厚度的總計(jì)。前述芯片整體的厚度如前所述。圖2示出了本例的毛細(xì)管電泳分析裝置。如圖所示，該毛細(xì)管電泳分析裝置1具 有前述的電泳芯片2、電極6a及6b、電線7a f、狹縫8、控制部9、光源11、濾光器12、聚光 透鏡13、檢測器14、電泳芯片移動(dòng)機(jī)構(gòu)20、定量分注器30、稀釋液31和電泳液32作為主要 的構(gòu)成構(gòu)件。前述電泳芯片移動(dòng)機(jī)構(gòu)20包括驅(qū)動(dòng)部21及載物臺(tái)22。前述電泳芯片2配 置于前述載物臺(tái)22上。前述電極6a及6b分別配置于前述電泳芯片2的液槽如及4b內(nèi)。 前述檢測器14、前述定量分注器30、前述電極6a及6b、前述電泳芯片移動(dòng)機(jī)構(gòu)20、前述光 源11分別通過前述電線7a f與前述控制部9連接。前述控制部9控制對(duì)通過前述電線 7a f而連接的前述各構(gòu)成構(gòu)件的電力供給等。本例的毛細(xì)管電泳分析裝置1中，前述載物臺(tái)22能夠通過與其一端連接的前述驅(qū) 動(dòng)部21在水平的雙軸方向(X-Y方向)移動(dòng)。另外，前述X方向和前述Y方向在前述水平面 上彼此垂直地交叉。由此，能夠調(diào)整前述電泳芯片2的位置。通過調(diào)整前述電泳芯片2的 位置，能夠?qū)η笆鰴z測點(diǎn)90準(zhǔn)確入射特定波長光的光束。另外，前述定量分注器30能夠分 別定量前述稀釋液31及前述電泳液32，并分注到前述電泳芯片2的液槽如或液槽如中。 通過在前述電極6a及6b間施加電壓，能夠使導(dǎo)入到前述試樣分析用毛細(xì)管流路切中的試 樣進(jìn)行電泳。并且，從前述光源11照射的光通過濾光器12而分光成特定波長光，并通過聚 光透鏡13而會(huì)聚，且光量增加，通過前述狹縫8除去雜散光，從而照射到前述電泳芯片2的 試樣分析用毛細(xì)管流路切上的檢測點(diǎn)90的試樣。前述檢測器14檢測照射到前述檢測點(diǎn) 90的光的透射光，并測定吸光度，從而能夠分析前述試樣中所含的分析對(duì)象的血蛋白。本例的毛細(xì)管電泳分析裝置1的電泳芯片2的制造方法沒有特別限定，例如只要 適當(dāng)使用以往公知的方法即可。接著，對(duì)使用了本例的毛細(xì)管電泳分析裝置1的、前述血蛋白的分析方法進(jìn)行說 明。首先，準(zhǔn)備前述電泳液32。作為前述電泳液32，只要為前述的電泳液，則沒有特別 限定，例如可列舉出在lOOmmol/L的富馬酸和精氨酸水溶液中以0. 8重量％的比例添加硫 酸軟骨素C并將pH調(diào)節(jié)至4. 8而得到的水溶液等。接著，將前述電泳芯片2安裝于載物臺(tái) 22，并配置于本例的毛細(xì)管電泳分析裝置1中。然后，使用前述定量分注器30，向前述液槽 如中注入前述電泳液32。進(jìn)而，將減壓泵(未圖示)與前述液槽4b連接而進(jìn)行減壓，向前 述試樣分析用毛細(xì)管流路切中填充前述電泳液32。16
接著，使用前述定量分注器30，向前述液槽如中注入前述稀釋液31后，進(jìn)而，注 入人的全血作為試樣，通過吸移(pipetting)進(jìn)行攪拌，調(diào)制前述試樣及前述稀釋液31的 混合液。另外，作為前述稀釋液31，例如使用蒸餾水等。接著，將前述混合液注入到前述液 槽如中。然后，對(duì)分別配置于前述液槽如及4b內(nèi)的前述電極6a及6b施加電壓，使前述 試樣分析用毛細(xì)管流路切的兩端產(chǎn)生電位差。由此，使前述試樣從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)80移 動(dòng)到前述液槽4b側(cè)。前述電壓沒有特別限定，例如在0.5kV 20kV的范圍。利用前述電 壓施加而產(chǎn)生的前述試樣分析用毛細(xì)管流路切的分離電場如前所述可根據(jù)從前述泳動(dòng)起 始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距離及前述毛細(xì)管流路的寬度及深度而適當(dāng)設(shè)定，例如在150V/cm 700V/cm的范圍，優(yōu)選在300V/cm 600V/cm的范圍。接著，將與前述同樣地被分光及聚光、進(jìn)而除去了雜散光的光(波長415nm)照射 到前述檢測點(diǎn)90。進(jìn)而，使用前述檢測器14檢測前述檢測點(diǎn)90的透射光，并測定前述試樣 中的前述蛋白質(zhì)產(chǎn)生的吸光度，制作表示所得前述吸光度的大小及分析時(shí)間(從泳動(dòng)開始 至檢測為止的時(shí)間)的對(duì)應(yīng)的泳動(dòng)圖譜(pherogram)。(實(shí)施方式2)圖3示出了本例的毛細(xì)管電泳分析裝置中使用的電泳芯片。該圖中，與圖1相同 的部分附上相同的標(biāo)記。圖3的(A)是該例的電泳芯片的平面圖，圖3的(B)是從圖3的 (A)的I-I方向觀察的截面圖，圖3的(C)是從圖3的㈧的II-II方向觀察的截面圖。如 圖所示，該例的電泳芯片2由上基板3a層疊于下基板北上而構(gòu)成。前述上基板3a形成有 多個(gè)(本例中為四個(gè))貫通孔。形成于前述上基板3a的四個(gè)貫通孔的底部被前述下基板 北密封，從而形成四個(gè)液槽^ 4d。前述下基板北上形成有十字狀的槽。形成于前述下 基板北上的十字狀的槽的上部被前述上基板3a密封，從而形成試樣分析用毛細(xì)管流路切 及試樣導(dǎo)入用的毛細(xì)管流路5y。前述液槽如與前述液槽4b通過前述試樣分析用毛細(xì)管流 路切而連通。前述液槽4c與前述液槽4d通過前述試樣導(dǎo)入用毛細(xì)管流路5y而連通。前 述試樣分析用毛細(xì)管流路切與前述試樣導(dǎo)入用毛細(xì)管流路5y交叉。前述試樣分析用毛細(xì) 管流路切與前述試樣導(dǎo)入用毛細(xì)管流路5y通過前述交叉部分而連通。前述交叉部分成為 泳動(dòng)起始點(diǎn)80。另外，前述毛細(xì)管流路切上的前述液槽如與前述液槽4b之間的一點(diǎn)成為 檢測點(diǎn)90。該例的電泳芯片2中，前述試樣分析用毛細(xì)管流路切和前述試樣導(dǎo)入用毛細(xì)管 流路5y的最大長度不同。但是，本發(fā)明并不限定于此。本發(fā)明中，前述電泳芯片2的前述 試樣分析用毛細(xì)管流路切和前述試樣導(dǎo)入用毛細(xì)管流路5y的最大長度也可相同。該例的電泳芯片2形成有前述液槽如及前述液槽4d、和前述試樣導(dǎo)入用毛細(xì)管 流路5y，沒有形成前述液槽如，除這一點(diǎn)以外，為與圖1所示的電泳芯片同樣的構(gòu)成。前述 試樣導(dǎo)入用毛細(xì)管流路5y的寬度及深度與前述試樣分析用毛細(xì)管流路切的寬度及深度相 同。并且，從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)80至前述檢測點(diǎn)90的距離與圖1所示的電泳芯片相同。另 外，前述液槽4c及前述液槽4d的容積及形狀與圖1所示的電泳芯片的液槽相同。本例的毛細(xì)管電泳分析裝置中，電泳芯片2為圖3所示的電泳芯片，從而代替圖1 所示的電泳芯片，電極6c及電極6d(未圖示)配置于前述電泳芯片2的液槽如及4d內(nèi)， 除此之外，與圖2所示的毛細(xì)管電泳分析裝置相同。接著，對(duì)使用了本例的毛細(xì)管電泳分析裝置1的、前述血蛋白的分析方法進(jìn)行說 明。
首先，將前述電泳芯片2安裝于載物臺(tái)22，并配置于本例的毛細(xì)管電泳分析裝置1 中。接著，與實(shí)施方式1同樣地使用前述定量分注器30，并向前述液槽如中注入前述電泳 液32。接著，與實(shí)施方式1同樣地將減壓泵(未圖示)與前述液槽4b連接進(jìn)行減壓，向前 述試樣分析用毛細(xì)管流路切中填充前述電泳液32。然后，使用前述定量分注器30，向前述 液槽4c中注入前述電泳液32。進(jìn)而，將減壓泵(未圖示)與前述液槽4d連接進(jìn)行減壓，向 前述試樣導(dǎo)入用毛細(xì)管流路5y中填充前述電泳液32。接著，使用前述定量分注器30，向前述液槽如中注入前述稀釋液31后，進(jìn)而注入 人的全血作為試樣，通過吸移進(jìn)行攪拌。接著，對(duì)前述電極6c及6d施加電壓，使前述試樣 導(dǎo)入用毛細(xì)管流路5y的兩端產(chǎn)生電位差。由此，使前述試樣移動(dòng)至前述試樣分析用毛細(xì)管 流路切與前述試樣導(dǎo)入用毛細(xì)管流路5y的交叉部分。在前述電極6c與前述電極6d間施 加的電壓沒有特別限定，例如在0. 5kV 20kV的范圍。接著，對(duì)前述電極6a及6b施加電壓，使前述試樣分析用毛細(xì)管流路切的兩端產(chǎn) 生電位差。由此，使前述試樣從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)80移動(dòng)至前述液槽4b側(cè)。前述電壓沒有 特別限定，例如在0. 5kV 20kV的范圍。利用前述電壓施加而產(chǎn)生的前述試樣分析用毛細(xì) 管流路切的分離電場如前所述可根據(jù)從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距離及前述毛細(xì) 管流路的寬度及深度而適當(dāng)設(shè)定，例如在與實(shí)施方式1相同的范圍內(nèi)。接著，將與實(shí)施方式1同樣地被分光及聚光、進(jìn)而除去了雜散光的光(波長415nm) 照射到檢測點(diǎn)90。進(jìn)而，使用前述檢測器14檢測前述檢測點(diǎn)90的透射光，測定前述試樣中 的蛋白質(zhì)產(chǎn)生的吸光度，制作表示所得前述吸光度的大小及分析時(shí)間(泳動(dòng)時(shí)間)的對(duì)應(yīng) 的泳動(dòng)圖譜。(實(shí)施方式3)圖4示出了本例的毛細(xì)管電泳分析裝置中使用的電泳芯片。該圖中，與圖1及圖3 相同的部分附上相同的標(biāo)記。圖4的㈧是該例的電泳芯片的平面圖，圖4的⑶是該例 的電泳芯片的立體圖。如圖所示，該例的電泳芯片200包括上基板3a層疊于下基板北上 而成的層疊體、和連接器70。前述連接器70配置于前述層疊體的一個(gè)側(cè)面。前述下基板 北形成有布線圖案(未圖示)。前述上基板3a形成有六個(gè)貫通孔。前述六個(gè)貫通孔的底 部被前述下基板北密封，從而形成六個(gè)液槽。前述六個(gè)液槽分別為試樣導(dǎo)入口 41、排出口 45、排出口 55、排出口 57、排出口 59及排出口 63。另外，前述上基板3a的底面形成有大小 三個(gè)凹部。前述三個(gè)凹部中的、兩個(gè)凹部的開口面被前述下基板北密封，從而形成兩個(gè)液 槽。前述兩個(gè)液槽分別為試劑槽51及稀釋槽58。前述試劑槽51封入有電泳液。前述稀釋 槽58配置有與前述布線圖案中的布線連接的電極6a，并封入有攪拌子(未圖示)。前述三 個(gè)凹部中剩余的一個(gè)凹部的開口面被前述下基板北密封而形成的電極配置部61中配置有 與前述布線圖案中的布線連接的電極6b。進(jìn)而，前述上基板3a的底面形成有多個(gè)槽。前述 多個(gè)槽的開口面被前述下基板北密封，從而形成將前述六個(gè)液槽及前述三個(gè)凹部連通的 流路。將前述稀釋槽58及前述電極配置部61連通的毛細(xì)管流路為試樣分析用毛細(xì)管流路 切。前述試樣分析用毛細(xì)管流路切的前述稀釋槽58側(cè)的端部成為泳動(dòng)起始點(diǎn)80。另外， 前述試樣分析用毛細(xì)管流路切上的一點(diǎn)成為檢測點(diǎn)90。前述試樣分析用毛細(xì)管流路切以 外的流路的詳細(xì)情況在下面進(jìn)行敘述。前述試樣導(dǎo)入口 41依次經(jīng)由試樣導(dǎo)入流路42、分支部43、溢流流路44而連通至前述排出口 45。另外，前述試樣導(dǎo)入口 41從前述分支部43經(jīng)由試樣計(jì)量流路46還連通至 前述稀釋槽58。前述試樣導(dǎo)入口 41為用于將含有作為分析對(duì)象的血蛋白的試樣導(dǎo)入到電 泳芯片中的導(dǎo)入口。并且，前述試樣計(jì)量流路46的前述稀釋槽58側(cè)的端部形成有流路截 面積窄的節(jié)流孔47。該例的電泳芯片200中，如下所述計(jì)量前述試樣并導(dǎo)入到電泳芯片內(nèi)。首先，將試 樣導(dǎo)入前述試樣導(dǎo)入口 41后，使用減壓泵等(未圖示)從前述排出口 45抽吸空氣。通過 前述抽吸，從而超過前述分支部43及前述節(jié)流孔47間的前述試樣計(jì)量流路46的容積的前 述試樣流出到溢流流路44中。進(jìn)而，關(guān)閉前述排出口 45，使用加壓泵等(未圖示)從前述 試樣導(dǎo)入口 41排出空氣，從而計(jì)量積存在前述試樣計(jì)量流路46內(nèi)的前述容積量的試樣，并 導(dǎo)入到前述稀釋槽58中。前述試劑槽51依次經(jīng)由試劑導(dǎo)入流路52a、分支部53a、溢流流路M而連通至前 述排出口 55。另外，前述試劑槽51從前述分支部53a經(jīng)由試劑計(jì)量流路56、分支部53b、試 樣導(dǎo)入流路52b還連通至前述稀釋槽58。在前述分支部5 分支的流路的末端形成有前述 排出口 57。并且，在前述試樣分析用毛細(xì)管流路切的前述稀釋槽58側(cè)端部分支的流路的 末端形成有排出口 59。進(jìn)而，在前述電極配置部61與前述排出口 63之間形成有流量測量 流路62。該例的電泳芯片200中，如下所述向前述試樣分析用毛細(xì)管流路切中填充前述電 泳液，進(jìn)而計(jì)量前述電泳液并導(dǎo)入到前述稀釋槽58中。首先，使前述試樣導(dǎo)入口 41、排出口 45、55、57及59為關(guān)閉狀態(tài)，使用與前述排出口 63連接的減壓泵等(未圖示)抽吸空氣，從 而向前述試劑導(dǎo)入流路5 及52b、前述試劑計(jì)量流路56、前述稀釋槽58、前述試樣分析用 毛細(xì)管流路切、前述電極配置部61、前述流量測量流路62中填充被封入到前述試劑槽51 中的電泳液。接著，將前述試劑槽51關(guān)閉，打開前述排出口 59，使用與前述排出口 57連接 的減壓泵等(未圖示)抽吸空氣，從而將前述試樣導(dǎo)入流路52b及前述稀釋槽58內(nèi)的電泳 液除去。進(jìn)而，關(guān)閉前述排出口 57，打開前述排出口 55，使用與前述排出口 59連接的減壓泵 等(未圖示)抽吸空氣，從而能夠計(jì)量前述試劑計(jì)量流路56容積量的電泳液并導(dǎo)入到前述 稀釋槽58中。然后，如前所述，將前述試樣導(dǎo)入到前述稀釋槽58中，使用磁力攪拌器(未 圖示)使攪拌子(未圖示)旋轉(zhuǎn)，從而能夠?qū)⑶笆鲈嚇优c前述電泳液混合。該例的電泳芯片200中，作為前述上基板3a的材質(zhì)，只要不阻礙前述吸光度的測 定，則沒有特別限制。作為前述上基板3a，例如，可使用由前述的材料等形成的基板。該例的電泳芯片200中的前述上基板3a的長度及寬度例如在IOmm 200mm的范 圍，優(yōu)選在20mm IOOmm的范圍。另外，前述上基板3a的厚度例如在0. Imm IOmm的范 圍，優(yōu)選在Imm 5mm的范圍。該例的電泳芯片200中，作為前述下基板北，例如可使用由丙烯酸系樹脂、與前述 上基板3a同樣的材質(zhì)等形成的基板。前述下基板北通過層疊由前述材質(zhì)形成的多個(gè)基板 而構(gòu)成，前述多個(gè)基板間形成有由銅箔等構(gòu)成的布線圖案。前述下基板!Bb的長度及寬度與前述上基板3a的長度及寬度相同。前述下基板!Bb 的厚度例如在0. Imm IOmm的范圍。該例的電泳芯片200中，關(guān)于前述試樣導(dǎo)入口 41的直徑及深度，例如直徑在 0. Imm IOmm的范圍，深度在0. Imm IOmm的范圍，優(yōu)選的是，直徑在Imm 5mm的范圍，19深度在Imm 5mm的范圍。該例的電泳芯片200中，關(guān)于前述試劑槽51的直徑及深度，例如直徑在0. 5mm 50mm的范圍，深度在0. Imm IOmm的范圍，優(yōu)選的是，直徑在Imm 20mm的范圍，深度在 Imm 5mm的范圍。并且，該例的電泳芯片200中，關(guān)于前述稀釋槽58的直徑及深度，例如 直徑在0. 5mm 50mm的范圍，深度在0. Imm IOmm的范圍，優(yōu)選的是，直徑在Imm IOmm 的范圍，深度在Imm 5mm的范圍。該例的電泳芯片200中，關(guān)于前述排出口 45、55、57、59、63的直徑及深度，直徑在 0. Imm IOmm的范圍，深度在0. Imm IOmm的范圍，優(yōu)選的是，直徑在Imm 5mm的范圍， 深度在Imm 5mm的范圍。該例的電泳芯片200中，前述試樣導(dǎo)入口 41、前述試劑槽51、前述稀釋槽58及前 述排出口 45、55、57、59、63的形狀為圓柱狀。但是，本發(fā)明并不限定于此。前述試樣導(dǎo)入口 41、前述試劑槽51、前述稀釋槽58及前述排出口 45、55、57、59、63的形狀例如除前述圓柱狀 以外，還可以是四棱柱狀、四棱錐狀、圓錐狀、它們組合而成的形狀等任意的形狀。另外，前 述試樣導(dǎo)入口 41、前述試劑槽51、前述稀釋槽58及前述排出口 45、55、57、59、63的形狀可 全部相同，也可分別不同。該例的電泳芯片200中，前述試樣分析用毛細(xì)管流路切的寬度及深度與圖1所示 的電泳芯片2相同。并且，從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)80至前述檢測點(diǎn)90的距離與圖1所示的電 泳芯片2相同。該例的電泳芯片200中，關(guān)于前述試劑計(jì)量流路56的流路的寬度及深度，在截面 積的最大部分中，例如寬度在0. Imm IOmm的范圍，深度在0. Imm IOmm的范圍。該例的電泳芯片200中，關(guān)于前述節(jié)流孔47的寬度及深度，例如寬度在1 μ m 200μπι的范圍，深度在Ιμ 200μπι的范圍，優(yōu)選的是，寬度為10 μ m 100 μ m，深度為 10 μ m 100 μ m。該例的電泳芯片200中，關(guān)于除前述試樣分析用毛細(xì)管流路5x、前述試劑計(jì)量流 路56、前述節(jié)流孔47以外的毛細(xì)管流路的寬度及深度，例如寬度在ΙΟμπι IOOOym的范 圍，深度在ΙΟμπι 1000 μ m的范圍，優(yōu)選的是，寬度為50μπι 500μπι，深度為50μπι 500 μ m0該例的電泳芯片200中，前述電泳芯片整體的最大厚度為前述上基板3a及前述下 基板北的厚度的總計(jì)。前述芯片整體的厚度如前所述。該例的電泳芯片200的制造方法沒有特別限定，例如只要適當(dāng)使用以往公知的方 法即可。圖5示出了本例的毛細(xì)管電泳分析裝置。該圖中，與圖2相同的部分附上相同的 標(biāo)記。如圖所示，本例的毛細(xì)管電泳分析裝置100中，電泳芯片為圖4所示的電泳芯片，從 而代替圖1所示的電泳芯片，不具有定量分注器30、稀釋液31、電線7b d，而在前述電泳 芯片200內(nèi)具有前述電泳液，具有前述連接器70的連接部(未圖示)及電線7g，除此之外， 與圖2所示的電泳分析裝置1相同。該圖中未表示出，前述電泳芯片200介由前述連接器 70安裝于前述載物臺(tái)22，并搭載于前述毛細(xì)管電泳分析裝置100。前述連接器70通過前述 電線7g與前述控制部9連接。前述控制部9控制對(duì)前述連接器70的電力供給等。接著，對(duì)使用了本例的毛細(xì)管電泳分析裝置100的、血蛋白的分析方法進(jìn)行說明。
首先，將前述電泳芯片200介由前述連接器70安裝于前述毛細(xì)管電泳分析裝置 100。接著，與前述同樣地向前述試樣分析用毛細(xì)管流路切中填充前述電泳液，進(jìn)而，計(jì)量 前述電泳液，并導(dǎo)入到前述稀釋槽58中。然后，與前述同樣地從前述試樣導(dǎo)入口 41導(dǎo)入人 全血作為前述試樣，計(jì)量前述試樣計(jì)量流路46的容量的量，并導(dǎo)入到前述稀釋槽58中。將 所導(dǎo)入的前述試樣及前述電泳液在前述稀釋槽58中混合，通過前述磁力攪拌器(未圖示) 使前述攪拌子(未圖示)旋轉(zhuǎn)以進(jìn)行攪拌。接著，對(duì)前述電極6a及前述電極6b施加電壓，使前述試樣分析用毛細(xì)管流路切 的兩端產(chǎn)生電位差。由此，使前述試樣從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)80移動(dòng)至前述電極6b側(cè)。前述 電壓的施加通過利用前述布線圖案中的前述電線7g由前述連接器70向前述電極6a及前 述電極6b供給電力來實(shí)施。前述電壓沒有特別限定，例如在0.5kV 20kV的范圍。禾Ij用 前述電壓施加而產(chǎn)生的前述試樣分析用毛細(xì)管流路切的分離電場如前所述可根據(jù)從前述 泳動(dòng)起始點(diǎn)至前述檢測點(diǎn)的距離及前述毛細(xì)管流路的寬度及深度而適當(dāng)設(shè)定，例如在與實(shí) 施方式1同樣的范圍。接著，將與實(shí)施方式1同樣地被分光及聚光、進(jìn)而除去了雜散光的光(波長415nm) 照射到前述檢測點(diǎn)90。進(jìn)而，使用前述檢測器14檢測前述檢測點(diǎn)90中的透射光，測定電泳 動(dòng)的前述試樣中的蛋白質(zhì)產(chǎn)生的吸光度，制作表示所得前述吸光度的大小及分析時(shí)間的對(duì) 應(yīng)的泳動(dòng)圖譜。實(shí)施例接著，對(duì)使用了圖2所示的本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置的、糖化血紅蛋白 (HbAlc)的分析例進(jìn)行說明。(實(shí)施例1)首先，制作圖1所示的電泳芯片。本例的電泳芯片2為PMMA制，芯片的長度(沿 著前述試樣分析用毛細(xì)管流路切的方向的尺寸)為70mm，寬度為30mm。本例的電泳芯片2 中，前述試樣分析用毛細(xì)管流路切的寬度為40 μ m，其深度為40 μ m。另外，從前述泳動(dòng)起 始點(diǎn)80至前述檢測點(diǎn)90的距離為1. 5cm。接著，將本例的電泳芯片2搭載于載物臺(tái)22，構(gòu)成圖2所示的毛細(xì)管電泳分析裝置 1。另外，向在50mmol/L富馬酸中添加30mmol/L硫氰酸鈉而得到的溶液中添加精氨酸并將 pH調(diào)節(jié)至4. 8，進(jìn)而向所得溶液中添加0. 8重量％硫酸軟骨素C，調(diào)制電泳液32。然后，使 用前述電泳液32將血紅蛋白(BML公司制)稀釋至10g/L的濃度，調(diào)制試樣。另外，前述試 樣中血紅蛋白Alc濃度為約5重量％，其血紅蛋白濃度與將人血液稀釋至15倍的血紅蛋白 濃度相當(dāng)。接著，向前述電泳芯片2的液槽如中注入前述電泳液32。然后，通過與液槽4b連 接的減壓泵抽吸空氣，向試樣分析用毛細(xì)管流路切中填充前述電泳液32。接著，向前述液 槽如中導(dǎo)入前述試樣。然后，對(duì)前述電極6a及電極6b施加450V/cm的分離電場，使前述 試樣分析用毛細(xì)管流路切的兩端產(chǎn)生電位差。由此，使前述試樣從前述液槽如移動(dòng)至前 述液槽4b側(cè)。此時(shí)，通過前述檢測器14測定前述試樣分析用毛細(xì)管流路切的前述檢測點(diǎn) 90中的吸光度(測定波長415nm)。然后，制作表示從前述電壓施加開始所經(jīng)過的時(shí)間、即 分析時(shí)間(秒)與前述吸光度的關(guān)系的泳動(dòng)圖譜。進(jìn)而，在前述泳動(dòng)圖譜中，以檢測血紅蛋 白前出現(xiàn)的吸光度的降低點(diǎn)為t (秒)，以從泳動(dòng)起始點(diǎn)至檢測點(diǎn)的距離為d(cm)，使用下面示出的式(1)，計(jì)算出電滲流。電滲流(cm/分鐘)=d/(t/60)…(1)(實(shí)施例2)本例中，與實(shí)施例1同樣地制作電泳芯片2，構(gòu)成毛細(xì)管電泳分析裝置1。然后，使 用前述毛細(xì)管電泳分析裝置1，進(jìn)行穩(wěn)定型血紅蛋白Alc及不穩(wěn)定型血紅蛋白Alc的分析。 本例中，作為前述試樣，代替前述的10g/L血紅蛋白，而使用將添加有500mg/dL葡萄糖的 100g/L血紅蛋白在37°C下孵育3小時(shí)后稀釋10倍而得到的試樣，除此之外，與實(shí)施例1同 樣地進(jìn)行分析。(實(shí)施例3)本例中，與實(shí)施例1同樣地制作電泳芯片2，構(gòu)成毛細(xì)管電泳分析裝置1。然后，使 用前述毛細(xì)管電泳分析裝置1，分析血紅蛋白Ale。本例中，從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)80至前述檢 測點(diǎn)90的長度為1. Ocm來代替前述的1. 5cm,除此之外，與實(shí)施例1同樣地進(jìn)行分析。(實(shí)施例4)本例中，與實(shí)施例1同樣地制作電泳芯片2，構(gòu)成毛細(xì)管電泳分析裝置1。然后，使 用前述毛細(xì)管電泳分析裝置1進(jìn)行血紅蛋白Alc的分析。本例中，從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)80至 前述檢測點(diǎn)90的長度為2. Ocm來代替前述的1. 5cm,除此之外，與實(shí)施例1同樣地進(jìn)行分 析。(實(shí)施例5)本例中，與實(shí)施例1同樣地制作電泳芯片2，構(gòu)成毛細(xì)管電泳分析裝置1。然后，使 用前述毛細(xì)管電泳分析裝置1進(jìn)行血紅蛋白Alc的分析。本例中，從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)80至 前述檢測點(diǎn)90的長度為0. 5cm來代替前述的1.5cm，進(jìn)而對(duì)前述電極6a及電極6b所施加 的分離電場為250V/cm來代替前述的450V/cm，除此之外，與實(shí)施例1同樣地進(jìn)行分析。(比較例1)本例中，與實(shí)施例1同樣地制作電泳芯片2，構(gòu)成毛細(xì)管電泳分析裝置1。然后，使 用前述毛細(xì)管電泳分析裝置1進(jìn)行血紅蛋白Alc的分析。本例中，作為試樣，血紅蛋白濃度 為5g/L (血紅蛋白Alc濃度約11% )來代替10g/L，從前述泳動(dòng)起始點(diǎn)80至前述檢測點(diǎn)90 的長度為2. Ocm來代替1. 5cm，對(duì)前述電極6a及電極6b所施加的分離電場為250V/cm來代 替450V/cm，除此之外，與實(shí)施例1同樣地進(jìn)行測定。另外，前述試樣的血紅蛋白濃度5g/L 與將人血液稀釋至30倍的血紅蛋白濃度相當(dāng)。(比較例2)本例中，作為前述試樣分析用毛細(xì)管流路切，使用埋設(shè)在形成于前述下基板北的 槽中的不同構(gòu)件的毛細(xì)管(內(nèi)徑40 μ m)，除此之外，與前述實(shí)施例1同樣地制作電泳芯片 2，構(gòu)成毛細(xì)管電泳分析裝置1。另外，前述毛細(xì)管的材質(zhì)為熔融二氧化硅制。然后，使用前 述毛細(xì)管電泳分析裝置1進(jìn)行血紅蛋白Alc的分析。本例中，除使用前述電泳芯片2以外， 與比較例1同樣地進(jìn)行分析。實(shí)施例1 5、比較例1及比較例2的分析結(jié)果示于圖6 12的圖表中。圖6為 實(shí)施例1的結(jié)果，圖7為實(shí)施例2的結(jié)果，圖8為實(shí)施例3的結(jié)果，圖9為實(shí)施例4的結(jié)果， 圖10為實(shí)施例5的結(jié)果，圖11為比較例1的結(jié)果，圖12為比較例2的結(jié)果。另夕卜，圖6 12的圖表中，橫軸為從前述電壓施加開始時(shí)所經(jīng)過的時(shí)間(秒)，縱軸為415nm的測定波長下的吸光度。 實(shí)施例1 5、比較例1及比較例2中，計(jì)算電滲流得到的結(jié)果示于下述表1中。 如該表所示，關(guān)于電滲流，實(shí)施例1及2為IOcm/分鐘，實(shí)施例3為8. 6cm/分鐘，實(shí)施例4為 7. 5cm/分鐘，實(shí)施例5為3. Ocm/丨分鐘，比較例1為4. Ocm/分鐘，比較例2為2. 4cm/分鐘。(表1)t(秒)電滲流(cm/分鐘)
權(quán)利要求
1.一種毛細(xì)管電泳分析裝置，其特征在于，該毛細(xì)管電泳分析裝置通過毛細(xì)管電泳法 來分析血蛋白，其具有電泳芯片、電壓施加單元、送液單元及吸光度測定單元， 所述電泳芯片包括基板、多個(gè)液槽及毛細(xì)管流路， 所述電壓施加單元包括電極， 所述基板上形成有所述多個(gè)液槽， 所述多個(gè)液槽通過所述毛細(xì)管流路而連通， 所述毛細(xì)管流路包括試樣分析用的毛細(xì)管流路， 使用所述送液單元向所述試樣分析用毛細(xì)管流路中填充電泳液， 向填充有所述電泳液的所述試樣分析用毛細(xì)管流路中導(dǎo)入含有作為分析對(duì)象的所述 血蛋白的試樣，對(duì)所述電極施加電壓，使所述試樣進(jìn)行電泳，通過所述吸光度測定單元測定所述電泳動(dòng)的試樣中的所述血蛋白的吸光度， 所述血蛋白的分析時(shí)間為35秒以下。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛細(xì)管電泳分析裝置，在所述試樣分析用毛細(xì)管流路中， 與流路方向垂直的方向的截面形狀為圓形或矩形，為圓形時(shí)，其直徑在25μπι IOOym的范圍，為矩形時(shí)，其寬度在25μπι IOOym的范圍，其深度在25 μ m 100 μ m的范圍， 所述試樣的電泳從泳動(dòng)起始點(diǎn)開始，所述電泳動(dòng)的試樣中的所述血蛋白的吸光度在檢測點(diǎn)被測定， 從所述泳動(dòng)起始點(diǎn)至所述檢測點(diǎn)的距離為5cm以下。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛細(xì)管電泳分析裝置，所述試樣分析用毛細(xì)管流路的內(nèi)壁表 面具有離子性官能團(tuán)，所述電泳液的PH在pH4. 0 6. 0的范圍， 所述施加電壓時(shí)產(chǎn)生的電滲流為3cm/分鐘以上。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛細(xì)管電泳分析裝置，其特征在于，所述電泳液含有硫酸化多糖類。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的毛細(xì)管電泳分析裝置，其特征在于，所述硫酸化多糖類為硫 酸軟骨素。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的毛細(xì)管電泳分析裝置，其特征在于，在所述試樣分析用毛細(xì) 管流路中，在所述截面形狀是寬度及深度分別為30μπι的矩形時(shí)，在從所述泳動(dòng)起始點(diǎn)至 所述檢測點(diǎn)的距離為0. 25cm以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為300V/cm以下，在所述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為300 600V/cm， 在所述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為400 650V/cm， 在所述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為450 700V/cm。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的毛細(xì)管電泳分析裝置，其特征在于，在所述試樣分析用毛細(xì) 管流路中，在所述截面形狀是寬度及深度分別為40 μ m的矩形時(shí)，在從所述泳動(dòng)起始點(diǎn)至 所述檢測點(diǎn)的距離為0. 25cm以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為250V/cm以下，在所述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為250 500V/cm， 在所述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為375 550V/cm，在所述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為400 600V/cm。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的毛細(xì)管電泳分析裝置，其特征在于，在所述試樣分析用毛細(xì) 管流路中，在所述截面形狀是寬度及深度分別為50μπι的矩形時(shí)，在從所述泳動(dòng)起始點(diǎn)至 所述檢測點(diǎn)的距離為0. 25cm以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為200V/cm以下，在所述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為200 450V/cm， 在所述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為300 500V/cm， 在所述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為350 550V/cm。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的毛細(xì)管電泳分析裝置，其特征在于，在所述試樣分析用毛細(xì) 管流路中，在所述截面形狀是寬度及深度分別為60 μ m的矩形時(shí)，在從所述泳動(dòng)起始點(diǎn)至 所述檢測點(diǎn)的距離為0. 25cm以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為150V/cm以下，在所述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為150 400V/cm， 在所述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為250 450V/cm， 在所述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為300 500V/cm。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛細(xì)管電泳分析裝置，以所述血蛋白作為分析項(xiàng)目， 所述分析項(xiàng)目為血紅蛋白。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的毛細(xì)管電泳分析裝置，所述血紅蛋白為血紅蛋白 Alc(HbAlc)及血紅蛋白F(HbF)中的至少一種。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的毛細(xì)管電泳分析裝置，以所述血紅蛋白Alc(HbAlc)作為分 析項(xiàng)目，作為所述血紅蛋白Alc(HbAlc)的分析，計(jì)算出血紅蛋白Alc濃度(HbAlc濃度)。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛細(xì)管電泳分析裝置，所述試樣為將所述血液進(jìn)行溶血處 理而得到的試樣，分析將所述血液進(jìn)行溶血處理而得到的試樣中的所述血紅蛋白。
14.一種分析方法，其特征在于，該分析方法通過毛細(xì)管電泳法來分析血蛋白， 使用形成有毛細(xì)管流路的電泳芯片，所述毛細(xì)管流路包括試樣分析用的毛細(xì)管流路，所述方法包括電泳工序，該工序向填充有電泳液的所述試樣分析用毛細(xì)管流路中導(dǎo) 入含有所述血蛋白的試樣，對(duì)電極施加電壓，使所述試樣進(jìn)行電泳，測定工序，該工序測定所述電泳動(dòng)的試樣中的所述血蛋白的吸光度， 所述血蛋白的分析時(shí)間為35秒以下。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的分析方法，在所述試樣分析用毛細(xì)管流路中， 與流路方向垂直的方向的截面形狀為圓形或矩形，為圓形時(shí)，其直徑在25μπι IOOym的范圍，為矩形時(shí)，其寬度在25 μ m 100 μ m的 范圍，其深度在25μπι IOOym的范圍， 所述試樣的電泳從泳動(dòng)起始點(diǎn)開始，所述電泳動(dòng)的試樣中的所述血蛋白的吸光度在檢測點(diǎn)被測定， 從所述泳動(dòng)起始點(diǎn)至所述檢測點(diǎn)的距離為5cm以下。
16.根據(jù)權(quán)利要求14所述的分析方法，所述試樣分析用毛細(xì)管流路的內(nèi)壁表面具有離 子性官能團(tuán)，所述電泳液的PH在pH4. 0 6. 0的范圍， 所述施加電壓時(shí)產(chǎn)生的電滲流為3cm/分鐘以上。
17.根據(jù)權(quán)利要求14所述的分析方法，其特征在于，所述電泳液含有硫酸化多糖類。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的分析方法，其特征在于，所述硫酸化多糖類為硫酸軟骨素。
19.根據(jù)權(quán)利要求15所述的分析方法，其特征在于，在所述試樣分析用毛細(xì)管流路中， 在所述截面形狀是寬度及深度分別為30 μ m的矩形時(shí)，在從所述泳動(dòng)起始點(diǎn)至所述檢測點(diǎn) 的距離為0. 25cm以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為300V/cm以下，在所述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為300 600V/cm， 在所述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為400 650V/cm， 在所述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為450 700V/cm。
20.根據(jù)權(quán)利要求15所述的分析方法，其特征在于，在所述試樣分析用毛細(xì)管流路中， 在所述截面形狀是寬度及深度分別為40 μ m的矩形時(shí)，在從所述泳動(dòng)起始點(diǎn)至所述檢測點(diǎn) 的距離為0. 25cm以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為250V/cm以下，在所述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為250 500V/cm， 在所述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為375 550V/cm， 在所述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為400 600V/cm。
21.根據(jù)權(quán)利要求15所述的分析方法，其特征在于，在所述試樣分析用毛細(xì)管流路中， 在所述截面形狀是寬度及深度分別為50 μ m的矩形時(shí)，在從所述泳動(dòng)起始點(diǎn)至所述檢測點(diǎn) 的距離為0. 25cm以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為200V/cm以下，在所述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為200 450V/cm， 在所述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為300 500V/cm， 在所述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為350 550V/cm。
22.根據(jù)權(quán)利要求15所述的分析方法，其特征在于，在所述試樣分析用毛細(xì)管流路中， 在所述截面形狀是寬度及深度分別為60 μ m的矩形時(shí)，在從所述泳動(dòng)起始點(diǎn)至所述檢測點(diǎn) 的距離為0. 25cm以上且小于0. 75cm時(shí)，分離電場為150V/cm以下，在所述距離為0. 75cm以上且小于1. 25cm時(shí)，分離電場為150 400V/cm， 在所述距離為1. 25cm以上且小于1. 75cm時(shí)，分離電場為250 450V/cm， 在所述距離為1. 75cm以上且小于2. 25cm時(shí)，分離電場為300 500V/cm。
23.根據(jù)權(quán)利要求14所述的分析方法，以所述血蛋白作為分析項(xiàng)目， 所述分析項(xiàng)目為血紅蛋白。
24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的分析方法，所述血紅蛋白為血紅蛋白Alc(HbAlc)及血紅蛋 白F(HbF)中的至少一種。
25.根據(jù)權(quán)利要求M所述的分析方法，以所述血紅蛋白Alc(HbAlc)作為分析項(xiàng)目， 作為所述血紅蛋白Alc(HbAlc)的分析，計(jì)算出血紅蛋白Alc濃度(HbAlc濃度)。
26.根據(jù)權(quán)利要求14所述的分析方法，所述試樣為將所述血液進(jìn)行溶血處理而得到的 試樣，分析將所述血液進(jìn)行溶血處理而得到的試樣中的所述血紅蛋白。
全文摘要
本發(fā)明提供一種能夠以短時(shí)間且高精度分析血液中所含蛋白質(zhì)的分析裝置，其裝置整體小型化，操作簡便，運(yùn)行成本低。本發(fā)明的毛細(xì)管電泳分析裝置是通過毛細(xì)管電泳法來分析血蛋白的分析裝置，其具有電泳芯片、電壓施加單元、送液單元及吸光度測定單元，前述電泳芯片包括基板、多個(gè)液槽和毛細(xì)管流路，前述基板上形成有前述多個(gè)液槽和前述毛細(xì)管流路，前述多個(gè)液槽通過前述毛細(xì)管流路而連通，前述毛細(xì)管流路包括試樣分析用毛細(xì)管流路，前述血蛋白的分析時(shí)間為35秒以下。
文檔編號(hào)G01N27/447GK102047104SQ20098012053
公開日2011年5月4日 申請(qǐng)日期2009年7月17日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月22日
發(fā)明者東五十川行雄, 中山雄介, 杉山幸司, 田中喜秀 申請(qǐng)人:愛科來株式會(huì)社, 獨(dú)立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所