專(zhuān)利名稱(chēng)：用于蛋白、肽和其他分子的f-18標(biāo)記的改進(jìn)方法和組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用18F標(biāo)記肽或其他分子的簡(jiǎn)單方法，18F用于體內(nèi) 成像。優(yōu)選地，18F與鋁或另一種金屬通過(guò)螯合部分連接為結(jié)合物[復(fù)合物]，所述螯合部分 可共價(jià)連接至蛋白質(zhì)、肽或其他分子。在施用至患者時(shí)，18F-標(biāo)記的肽/分子的優(yōu)選比活度 為約500至1，000、更優(yōu)選1，000至2，000、更優(yōu)選1，000至5，OOOCi/mmoL·也可以使用100 至數(shù)萬(wàn)Ci/mmol范圍內(nèi)的比活度。盡管較高比活度對(duì)于某些成像應(yīng)用是優(yōu)選的，但在其他 替代實(shí)施方案中，可以使用具有而1々(1，4，7-三氮雜環(huán)壬烷-1，4，7-三乙酸)或另一種螯 合劑的金屬-18F復(fù)合物的較低比活度，例如作為腎血流成像劑或心腦成像劑來(lái)成像血流。 優(yōu)選地，18F標(biāo)記的完成不需要純化步驟來(lái)分離未標(biāo)記的肽/分子與標(biāo)記的肽/分子。更優(yōu) 選地，18F-標(biāo)記的肽或其他分子在體內(nèi)條件下、例如在人血清中穩(wěn)定至少數(shù)小時(shí)。在最優(yōu)選 的實(shí)施方案中，18F-標(biāo)記分子可以適合成像研究的形式在一小時(shí)或更短時(shí)間內(nèi)制備。使用 所公開(kāi)的方法，分子標(biāo)記可以在短至5分鐘內(nèi)完成。18F-標(biāo)記分子用于例如PET成像技術(shù)。 在替代實(shí)施方案中，標(biāo)記方法可用于其他氟同位素，例如19F,例如用于NMR成像技術(shù)。
背景技術(shù)：
正電子發(fā)射斷層攝影(PET)已經(jīng)成為診斷醫(yī)學(xué)中最重要的功能成像模式之一，具 有極高的靈敏度(fmol)、高分辨率G-IOmm)和可被適當(dāng)定量的組織增積(Volkow等，1988， Am. J. Physiol. Imaging 3 :142)。盡管[18F] 2-脫氧-2-氟-D-葡萄糖([18FjFDG)是腫瘤 學(xué)中最廣泛使用的功能成像劑(Fletcher等，2008，J. Nucl. Med. 49 :480)，但在開(kāi)發(fā)功能成 像的其他標(biāo)記化合物以補(bǔ)充或增進(jìn)解剖成像方法中存在濃厚興趣(Torigian等，2007，CA Cancer J. Clin. 57 :206)，特別是目前使用的組合型PET/計(jì)算機(jī)斷層攝影系統(tǒng)。因此，需要 具有使放射正電子的放射性核素與各種生物學(xué)和藥學(xué)目標(biāo)分子結(jié)合的簡(jiǎn)易方法。肽或其他小分子可以用正電子發(fā)射體例如18F^4CIU11CJ6GLf58GaJ6BiN94U6Y和 124I來(lái)標(biāo)記。同位素核發(fā)射的正電子使用不同的能量射出，取決于使用的同位素。當(dāng)正電子 與電子反應(yīng)時(shí)，以相反方向發(fā)射兩個(gè)511keVY射線(xiàn)。射出正電子的能量決定正電子在撞擊 電子而被消滅之前的移行距離。發(fā)射能量越高，正電子在與電子碰撞之前移行越長(zhǎng)。PET同 位素的較低發(fā)射能量是希望的，以使正電子在產(chǎn)生被PET相機(jī)成像的兩個(gè)511keV γ射線(xiàn)之 前從靶位點(diǎn)移行的距離最短。許多發(fā)射正電子的同位素在其衰變鏈中還具有其他發(fā)射，例如Y射線(xiàn)、α粒子或β粒子。還希望具有是純正電子發(fā)射體的PET同位素，以使任何劑 量問(wèn)題最小化。同位素的半衰期也是重要的，因?yàn)榘胨テ诒仨氉銐蜷L(zhǎng)以使同位素連接至靶向分 子，分析產(chǎn)物，將其注入患者，并允許產(chǎn)物定位、從非靶組織清除并然后成像。如果半衰期太 長(zhǎng)，則比活度不足夠高以獲得足以清晰圖像所需的足夠光子，而如果半衰期太短，則生產(chǎn)、 商業(yè)分銷(xiāo)和生物分布所需的時(shí)間可能不足。因?yàn)榫哂械偷恼娮影l(fā)射能量、沒(méi)有旁發(fā)射和 適合的半衰期，18F(iT635keV 97%,t1/2 IlOmin)是最廣泛使用的PET發(fā)射同位素之一。產(chǎn)生具有高比活度的WF。當(dāng)同位素連接至靶向分子時(shí)，通常伴隨一些未反應(yīng)的靶 向劑，與放射性標(biāo)記產(chǎn)物相比，其經(jīng)常以大摩爾過(guò)量存在。通常，標(biāo)記產(chǎn)物和未標(biāo)記產(chǎn)物可 以體內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)相同的靶，因此，冷靶向劑的存在降低了靶向劑的有效比活度。如果18F與具有 很高吸收的分子(例如2-氟-2-脫氧葡萄糖(FDG))連接，則有效比活度不是那么重要。然 而，如果使用標(biāo)記肽來(lái)靶向受體或者使用有限數(shù)目的可用結(jié)合部位來(lái)進(jìn)行免疫PET預(yù)靶向 研究，如果冷靶向劑過(guò)量存在，則冷靶向劑可潛在阻礙放射性標(biāo)記的靶向劑的吸收。常規(guī)地，18F通過(guò)結(jié)合至碳原子而連接至化合物(Miller等，2008，Angew ChemInt Ed 47 :8998-9033)，但是也已經(jīng)報(bào)道了連接至硅(Shirrmacher 等，2007，BioconjChem 18: 2085-89 ；Hohne 等，2008，Bioconj Chem 19 :1871-79)和 boron (Ting 等，2008，F(xiàn)luorine Chem 129 :349-58)。結(jié)合至碳通常涉及多步合成，包括多個(gè)純化步驟，這對(duì)具有110-min半 衰期的同位素而言是有問(wèn)題的。目前用于肽的18F標(biāo)記方法通常包括低比活度試劑的標(biāo)記， 試劑的HPLC純化，然后結(jié)合至目標(biāo)肽。結(jié)合物通常在結(jié)合后被再次純化以獲得希望的標(biāo)記 肽比活度。一個(gè)實(shí)例是 Poethko 等(J. Nucl. Med. 2004 ；45 :892-902)的標(biāo)記方 法，其中4-[18F]氟苯甲醛被首先合成并純化(Wilson等，J. Labeled Compounds andRadiopharm. 1990 ；XXVIII :1189-1199)，然后結(jié)合至肽。然后通過(guò)HPLC純化肽結(jié)合物以 去除用來(lái)促進(jìn)結(jié)合完全的過(guò)量肽。其他實(shí)例包括用以下物質(zhì)標(biāo)記琥珀酰[18F]氟代苯甲酸 酯(SFB)(例如，Vaidyanathan 等，1992，Int. J. Rad. App 1. Instrum. B 19 :275)，其他?；?合物(Tada 等，1989，Labeled Compd. Radiopharm. XXVII :1317 ；Wester 等，1996，Nucl. Med. Biol. 23 365 ；Guhlke 等，1994，Nucl. MEd. Biol 21 :819)，或點(diǎn)擊化學(xué)加合物(Li 等，2007， Bioconjugate Chem. 18 :1987)。這些方法的總合成和配制時(shí)間范圍為1_3小時(shí)，大部分時(shí) 間用于標(biāo)記肽的HPLC純化以獲得體內(nèi)靶向所需的比活度。如果18F具有長(zhǎng)半衰期，則多次 反應(yīng)和純化將不是問(wèn)題。然而，如果是2小時(shí)半衰期，則使18F與肽連接所需的所有操作是 很大的負(fù)擔(dān)。這些方法操作冗長(zhǎng)并且需要使用專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)來(lái)產(chǎn)生標(biāo)記產(chǎn)物的設(shè)備和/或需要 專(zhuān)門(mén)專(zhuān)業(yè)化學(xué)人員的努力。它們也不利于可常規(guī)用于臨床環(huán)境的試劑盒配制。用于遞送標(biāo)記加合物至腫瘤或其他靶組織的一個(gè)替代方法包括預(yù)靶向方法(例 如，美國(guó)專(zhuān)利號(hào)7, 052，872 ；7, 074，405 ；7, 138，103，每一個(gè)在此通過(guò)引用并入)。使用雙 特異性抗體(bsMAb)預(yù)靶向程序的在先研究(例如，McBride等，2006，J. Nucl. Med. 10 1678-88)集中于124I的使用，在動(dòng)物模型中獲得了比直接放射性標(biāo)記片段或18F-FDG更好的 對(duì)結(jié)腸癌異種移植物的靶向。雖然該技術(shù)具有令人印象深刻的結(jié)果，但是124I不是該成像 程序可行的候選物，主要是因?yàn)槠涓叱杀?每劑量超過(guò)$2000)和與其他可選物相比相對(duì)差 的成像性質(zhì)。因?yàn)樵S多原因，其他基于抗體的靶向方法必須依賴(lài)于放射性碘標(biāo)記的產(chǎn)物，主要是因?yàn)槟[瘤/背景比在達(dá)到可接受水平之前需要> 他。然而，預(yù)靶向方法可以在1小時(shí) 內(nèi)實(shí)現(xiàn)可接受的成像條件(Hamacher 等，1986，J. Nucl. Med. 27 :235 ；Iwata 等，2000，Appl. Radiat. Isot. 52 87)。需要快速簡(jiǎn)單的18F標(biāo)記靶向部分(例如蛋白或肽)的方法，產(chǎn)生具有適合檢測(cè) 和/或成像的比活度的靶向構(gòu)建體，同時(shí)最大限度減少對(duì)專(zhuān)門(mén)設(shè)備或高度培訓(xùn)人員的需求 并減少操作人員暴露于高水平放射。更優(yōu)選地，需要制備用于預(yù)靶向技術(shù)的18F標(biāo)記的靶向 肽。還需要可提供進(jìn)行這種新方法所需的組合物的預(yù)包裝試劑盒。

發(fā)明內(nèi)容
氟化物實(shí)際上與所有其他元素結(jié)合，并且那些鍵中的一些是相對(duì)穩(wěn)定的。已知帶 有金屬結(jié)合配體的肽以穩(wěn)定結(jié)合放射性金屬并具有非常高的比活度。本發(fā)明使用的方法 是首先使18F與金屬結(jié)合，然后使18F金屬?gòu)?fù)合物與肽上的配體螯合。最初的問(wèn)題是選擇哪 種金屬。IIIA族金屬(鋁、鎵、銦和鉈)是首選。也可以使用镥。使用金屬結(jié)合配體連接 18F-金屬?gòu)?fù)合物與蛋白、肽或其他分子也是重要的，因?yàn)椴煌慕饘僖圆煌挠H和力結(jié)合各 種螯合劑，例如ΝΟΤΑ、NETA, DOTA, DTPA和在下文更詳細(xì)討論的其他螯合基團(tuán)?；蛘撸梢?首先使金屬或其他原子與肽連接，然后添加WF。據(jù)報(bào)道，氟化鋁復(fù)合物在體外是穩(wěn)定的(Martinez等，horg. Chem. 1999 ；38 4765-4660 ；Antonny 等 J. Biol. Chem. 1992 ；267 :6710-6718)。氟化鋁結(jié)合入骨和牙釉質(zhì)， 因此該復(fù)合物在體外也可以是穩(wěn)定的(Li, Crit. Rev. Oral Biol. Med. 2003 ；14 :100-114)。熟練技術(shù)人員將發(fā)現(xiàn)，實(shí)際上任何遞送分子可用于連接成像目的的WF，只要其含 有可以被修飾而不影響遞送分子與細(xì)胞或組織靶受體之間配體-受體結(jié)合相互作用的可 衍生化基團(tuán)。盡管下文實(shí)施例關(guān)注18F-標(biāo)記的肽部分，但是許多其他類(lèi)型的遞送分子，例如 寡核苷酸、激素、生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子、趨化因子、血管生成因子、抗血管生成因子、免疫調(diào)節(jié) 劑、蛋白、核酸、抗體、抗體片段、藥物、白介素、干擾素、寡糖、多糖、脂質(zhì)等可以被18F-標(biāo)記 并用于成像目的。類(lèi)似地，可以被成像的疾病或病癥的類(lèi)型僅受用于靶向與疾病或病癥相關(guān)的細(xì)胞 或組織的適合遞送分子的可用性限制。許多此類(lèi)遞送分子是已知的，例如在下文實(shí)施例中 示例的。例如，與患病組織或靶(例如癌癥)結(jié)合的任何蛋白或肽可以通過(guò)所公開(kāi)的方法 用18F標(biāo)記并用于檢測(cè)和/或成像。在某些實(shí)施方案中，此類(lèi)蛋白或肽可以包括但不限于結(jié) 合腫瘤相關(guān)抗原(TAA)的抗體或抗體片段。任何已知的TAA結(jié)合抗體或片段可以通過(guò)所描 述的方法用18F標(biāo)記并用于腫瘤的成像和/或檢測(cè)，例如通過(guò)PET掃描或其他已知技術(shù)。在下文的某些實(shí)施例中，示例性的18F-標(biāo)記的肽可在使用雙特異性或多特異性抗 體或抗體片段的預(yù)靶向方法中作為可靶向構(gòu)建體而用于成像目的。在這種情況下，抗體或 片段將包括疾病或病癥相關(guān)靶的一個(gè)或多個(gè)結(jié)合部位，所述靶例如腫瘤相關(guān)抗原或自身免 疫疾病相關(guān)抗原或病原生物產(chǎn)生或展示的抗原，所述病原生物例如病毒、細(xì)菌、真菌或其他 微生物。第二結(jié)合部位將特異性結(jié)合至可靶向構(gòu)建體。使用雙特異性或多特異性抗體進(jìn)行 預(yù)靶向的方法是本領(lǐng)域公知的(參見(jiàn)例如，美國(guó)專(zhuān)利號(hào)6，962，702，其實(shí)施例部分在此通過(guò) 引用并入)。類(lèi)似地，結(jié)合可靶向構(gòu)建體的抗體或其片段也是本領(lǐng)域公知的(同上)，例如 與HSG(組胺琥珀酰甘氨酸)結(jié)合的679單克隆抗體。一般在預(yù)靶向方法中，雙特異性或多特異性抗體首先被施用并被允許結(jié)合至細(xì)胞或組織靶抗原。在未結(jié)合抗體從循環(huán)中清除適 量時(shí)間之后，例如18F-標(biāo)記的可靶向構(gòu)建體被施用至患者并結(jié)合至集中于靶細(xì)胞或組織的 抗體，然后例如通過(guò)PET掃描進(jìn)行成像。在替代的示例性實(shí)施方案中，非肽受體靶向劑(例如葉酸)可以結(jié)合至NOTA或另 一種螯合部分，然后用例如與NOTA結(jié)合的18F-金屬?gòu)?fù)合物標(biāo)記。這種非肽受體靶向劑可以 包括例如TA138，一種整聯(lián)蛋白α νβ3受體的非肽拮抗劑(Liu等，2003，Bioconj. Chem. 14 1052-56)?？梢耘cDOTA、NOTA或18F-金屬?gòu)?fù)合物的另一種螯合劑結(jié)合的本領(lǐng)域已知的類(lèi) 似的非肽靶向劑可用于要求保護(hù)的方法中。其他受體靶向劑是本領(lǐng)域已知的，例如促生長(zhǎng) 素抑制素受體靶向劑h-DTPA奧曲肽(TYCO )。如下文討論的，18F-金屬?gòu)?fù)合物可能使用 DTPA被螯合并用于成像目的。N0DAGAT0C肽可用Al18F標(biāo)記用于促生長(zhǎng)素抑制素受體靶 向(Eisenwiener等Bioconj. Chem. 2002，13 (3) :530-41)。使用金屬螯合劑受體靶向成像 的其他方法是本領(lǐng)域已知的并且可用于實(shí)施要求保護(hù)的方法(參見(jiàn)例如，Andre等，2002， J. Inorg. Biochem. 88 :1_6 ；Pearson 等，1996，J. Med.，Chem. 39 :1361-71)。通過(guò)PET掃描用于18F成像的成像技術(shù)和設(shè)備也是本領(lǐng)域公知的(參見(jiàn)例如，美 國(guó)專(zhuān)利號(hào) 6，358，489 ;6，953，567 ；Page 等，Nuclear Medicine And Biology, 21 :911-919, 1994 ；Choi 等，Cancer Research 55 :5323-5329,1995 ；Zalutsky 等，J. Nuclear Med. ,33 575-582，1992)，并且可以使用任何此類(lèi)已知的PET成像技術(shù)活設(shè)備。盡管下文實(shí)施例說(shuō)明使用18F-金屬?gòu)?fù)合物用于PET成像，但熟練技術(shù)人員將發(fā)現(xiàn)， 穩(wěn)定的金屬-氟化物復(fù)合物，例如非放射性27Al和19F復(fù)合物也可以結(jié)合至NOTA或其他螯 合劑并連接至用作MRI造影劑的肽或其他靶向劑。[AlF]-螯合劑復(fù)合物也可連接至聚合物 用于MRI成像。AlF-螯合劑衍生物可用作PARACESTMRI成像劑(Woessner等Magn. Reson. Med. 2005,53 :790-99)。


附圖被包括以示例說(shuō)明本發(fā)明的特定實(shí)施方案并且不意味著限制要求保護(hù)的主 題的范圍。圖1. 111In和18F標(biāo)記的IMP 449在小鼠中生物分布的對(duì)比，有或沒(méi)有TF2雙特異 性抗體。圖2. wF-標(biāo)記的物質(zhì)在腫瘤攜帶裸小鼠中的生物分布，通過(guò)顯微PET成像。在每 個(gè)左肋攜帶小的皮下LS174T腫瘤的3只裸小鼠在注射以下任一個(gè)之后的冠狀切片(A) [18FjFDG, (B)用抗-CEA χ 抗-HSG bsMAb 預(yù)靶向的 Al [18F] ΙΜΡ449、(C)單獨(dú)的 Al [18F] IMP 449(未用bsMAb預(yù)靶向)。在成像期結(jié)束時(shí)給出從動(dòng)物取出的組織的生物分布數(shù)據(jù)，表示 為每克百分比注射劑量(% ID/g)?？s寫(xiě):B，骨髓；H，心臟；K，腎；T，腫瘤。圖3.給至在上肋攜帶35-mg LS174T人結(jié)腸直腸癌異種移植物的裸小鼠的預(yù)靶向 Alt18F] IMP 449的動(dòng)態(tài)成像研究。上方三個(gè)圖板分別顯示冠狀、徑向和橫向截面，經(jīng)120分 鐘的成像期在6個(gè)不同的5分鐘間隔取自集中于腫瘤外周位置的身體區(qū)域。每個(gè)剖視圖中 左側(cè)第一個(gè)圖像顯示十字線(xiàn)交叉處腫瘤的定位，由箭頭突出顯示。動(dòng)物在成像期間向其右 側(cè)部分傾斜。下方2個(gè)圖板顯示其他冠狀和徑向截面，定位于冠狀截面更前方的平面以突 出顯示在肝和腸中的分布，而徑向視圖在身體中更中心地交叉?？s寫(xiě)Cor，冠狀；FA，前臂；H，心臟；K，腎；Lv Jf ；Mg，徑向；Tr，橫向；UB，膀胱。圖4.四叔丁基C-NETA-琥珀酰的合成。圖5.四叔丁基C-NETA-琥珀酰的合成細(xì)節(jié)。圖6. 二叔丁基NOTA的合成。圖7.四叔丁基L-NETA的合成。圖8. C-NETA和L-NETA之間的結(jié)構(gòu)差異。圖9. S-NETA的合成方案。圖10. 18F-標(biāo)記的IMP 468鈴蟾肽類(lèi)似物的體內(nèi)組織分布。 圖11. NOTA衍生物。(A) IMP 467的NOTA配體，⑶NOTA的亞氨基二乙酸衍生物。圖12.示例性的NOTA亞氨基二乙酸衍生物(A) —個(gè)亞氨基二乙酸從環(huán)氮引出。 (B) 一個(gè)亞氨基二乙酸從氮引出，一個(gè)亞氨基二乙酸連接至碳。(C)兩個(gè)亞氨基二乙酸從碳 引出。圖 13.在 p. i. 2h，AR42J 腫瘤攜帶小鼠(n = 5)中 18F-IMP 466 和 68Ga-IMP 466 的 生物分布對(duì)比。作為對(duì)照，單獨(dú)組的小鼠(n = 5)接收過(guò)量未標(biāo)記的奧曲肽以證明受體特 異性。圖 14.在 p. i. 2h，頸部具有 a s. c. AR42J 腫瘤的小鼠中 18F-IMP 466 和 68Ga-IMP 466的PET/CT掃描的冠狀截面。清晰可見(jiàn)腫瘤和腎中的累積。圖15.在用遞增劑量的TF2預(yù)靶向之后，0. Olnmol 111In-IMP 288的生物分布。值 被給出為平均值士標(biāo)準(zhǔn)偏差(n = 5)。圖16.在i. v.注射68Ga-IMP 288后1小時(shí)，具有皮下LS174T和SK-RC52腫瘤的 BALB/c 裸小鼠中 6. 0nmol125I-TF2(0. 37MBq)和 0. 25nmol 68Ga-IMP 288 (5MBq)的生物分布。 值被給出為平均值士標(biāo)準(zhǔn)偏差(n = 5)。圖 17.在用 6. Onmol TF2 預(yù)靴向之后 i.v.注射后 1 小時(shí)，5MBq FDG禾口 5MBq68Ga_IMP 288(0. 25nmol)的生物分布。值被給出為平均值士標(biāo)準(zhǔn)偏差(n = 5)。圖18.在右后腿具有皮下LS174T腫瘤(0. Ig)(亮箭頭)并且在左大腿肌肉具有 炎癥(暗箭頭)的BALB/c裸小鼠的PET/CT圖像，所述小鼠接收了 5MBq18F_FDG并且在一天 后以 16 小時(shí)的間隔接收了 6. Onmol TF2 和 5MBq 68Ga_IMP288 (0. 25nmol)。動(dòng)物在 18F-FDG 和68^i-IMP 288注射后一小時(shí)被成像。圖板顯示FDG-PET掃描的3D體積透視㈧、腫瘤區(qū) 域的橫截面(B)，以及預(yù)靶向免疫PET掃描的3D體積透視(C)、腫瘤區(qū)域的橫截面(D)。圖 19.在之前 16 小時(shí) 6. Onmol TF2, i. v.注射后 1 小時(shí)，0. 25nmol Al18F-IMP449(5MBq)的生物分布，沒(méi)有預(yù)靶向的Al18F-IMP 449的生物分布，或Al [18F]的生 物分布。值被給出為平均值士標(biāo)準(zhǔn)偏差。圖20.以16小時(shí)的間隔靜脈內(nèi)接收6. Onmol TF2禾口 0. 25nmol Al18F-IMP 449(5MBq)的、在右側(cè)具有皮下LS174T腫瘤(0. Ig)(箭頭)的BALB/c裸小鼠的靜態(tài)PET/ CT成像研究。動(dòng)物在注射Al18F-IMP 449之后被成像。圖板顯示3D體積透視(A)后視圖， 以及在腫瘤區(qū)域的橫截面⑶冠狀、(C)徑向。
具體實(shí)施例方式提供下述定義以幫助理解本文公開(kāi)內(nèi)容。未明確定義的術(shù)語(yǔ)根據(jù)其明顯且普通的含義使用。本文使用的術(shù)語(yǔ)“一”或“一個(gè)”可以表示一個(gè)或超過(guò)一個(gè)的項(xiàng)目。本文使用的術(shù)語(yǔ)“和”和“或”可以用來(lái)表示合取或析取。即，除非另有說(shuō)明，否則 兩個(gè)術(shù)語(yǔ)都應(yīng)該被理解為等價(jià)于“和/或”。本文使用的“約”表示在數(shù)字的或-10%之內(nèi)。例如，“約100”指90和110之
間的任何數(shù)字。本文使用的“肽”指長(zhǎng)度為2至100氨基酸殘基、更優(yōu)選長(zhǎng)度為2至10、更優(yōu)選在
2至6氨基酸的天然存在或非天然存在氨基酸的任何序列?！鞍被帷笨梢允荓-氨基酸、 D-氨基酸、氨基酸類(lèi)似物、氨基酸衍生物或氨基酸模擬物。如本文使用，當(dāng)標(biāo)記分子與未標(biāo)記分子部分或完全分離時(shí)，標(biāo)記分子是“純化的”， 使得標(biāo)記分子級(jí)分與起始混合物相比是富集的。“純化的”標(biāo)記分子可以包括幾乎任何比例 的標(biāo)記分子和未標(biāo)記分子，包括但不限于約5 95 ；10 90 ；15 85 ；20 80 ；25 75; 30 70 ；40 60 ；50 50 ；60 40 ；70 30 ；75 25 ；80 20 ；85 15 ；90 10 ；95 5 ； 97 3 ；98 2 ；99 1 禾口 100 0。本文使用的術(shù)語(yǔ)“病原體”包括但不限于真菌、病毒、寄生蟲(chóng)和細(xì)菌，包括但不 限于人類(lèi)免疫缺陷病毒(HIV)、皰疹病毒、巨細(xì)胞病毒、狂犬病毒、流感病毒、乙型肝炎 病毒、仙臺(tái)病毒、貓白血病病毒、呼腸病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、人血清細(xì)小樣病毒、猿猴病 毒40、呼吸道合胞病毒、小鼠乳房腫瘤病毒、水痘-帶狀皰疹病毒、登革病毒、風(fēng)疹病毒、 麻疹病毒、腺病毒、人類(lèi)T細(xì)胞白血病病毒、EB病毒、鼠白血病病毒、腮腺炎病毒、水皰 性口炎病毒、辛德畢斯病毒、淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒、疣病毒和藍(lán)舌病毒、無(wú)乳鏈 求菌(Streptococcusagalactiae)、口耆月市軍團(tuán)菌(Legionella pneumophilia)、酉良月農(nóng)鏈 球菌(Streptococcuspyogenes)、大腸桿菌(Escherichia coli)、淋球菌(Neisseria gonorrhoeae)、腦膜炎球菌(Neisseria meningitidis)、肺炎球菌(Pneumococcus)、乙型
胃口f iff (Hemophilis influenzae B) > ^ S WilM# (Treponema pallidum) 姆病螺方寵體(Lyme disease spirochetes)、綠月農(nóng)假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、 麻風(fēng)分枝桿菌(Mycobacterium 1印rae)、流產(chǎn)桿菌(Brucella abortus)、結(jié)核絲桿菌 (Mycobacterium tuberculosis)禾口破傷風(fēng)桿菌(Chlostridium tetani)。本文使用的“輻射分解保護(hù)劑”指北添加至18F-標(biāo)記的復(fù)合物或分子以增加18F-標(biāo) 記的復(fù)合物或分子被輻射分解的分解速率?？梢允褂萌魏我阎妮椛浞纸獗Ｗo(hù)劑，包括但 不限于抗壞血酸。18F標(biāo)記技術(shù)的對(duì)比用18F標(biāo)記分子的許多技術(shù)是已知的。表1列出了幾種較普遍報(bào)道的氟化程序的 性質(zhì)。通過(guò)碳的肽標(biāo)記經(jīng)常包括通過(guò)親核取代18F-結(jié)合至輔基，通常以2或3個(gè)步驟，其中 所述輔基被標(biāo)記并純化，連接至化合物，然后再次純化。該通用方法已經(jīng)用于經(jīng)酰胺鍵、醛 和“點(diǎn)擊化學(xué)，，連接輔基(Marik 等，2006，BioconjugChem 17 :1017-21 ；Poethko 等，2004，J Nucl Med 45 =892-902 ；Li 等，2007，BioconjugChem 18 :989-93)。最常見(jiàn)的酰胺鍵形成試 劑是4-18F-氟代苯甲酸N-琥珀酰亞氨酯(18F-SFB),但是已經(jīng)測(cè)試了許多其他基團(tuán)(Marik 等，2006)。在一些情況下，例如當(dāng)使用18F-標(biāo)記的活性酯酰胺形成基團(tuán)時(shí)，可能有必要在偶 聯(lián)反應(yīng)期間保護(hù)肽上的某些基團(tuán)，之后切除它們。該18F-SFB試劑的合成以及隨后與肽的結(jié)合需要許多合成步驟并耗費(fèi)約2-3小時(shí)。Poethko等Q004)開(kāi)發(fā)了一種更簡(jiǎn)單、更有效的wF-肽標(biāo)記技術(shù)，其中4_18F_氟 代苯甲醛試劑通過(guò)肟鍵合在約75-90min內(nèi)結(jié)合至肽，包括離心干燥(dry-down)步驟。更 新的“點(diǎn)擊化學(xué)”方法在銅催化劑存在下用乙炔或疊氮化物將18F-標(biāo)記分子連接至肽(Li 等，2007 ；Glaser 和 Arstad，2007，Bioconjug Cheml8 :989-93)。疊氮化物與乙炔基團(tuán)之間 的反應(yīng)形成三唑連接，該連接是非常穩(wěn)定的并且在肽上非常有效地形成而無(wú)需保護(hù)基。使 用離心干燥步驟，點(diǎn)擊化學(xué)在約75-90min內(nèi)以良好收率( 50% )產(chǎn)生18F-標(biāo)記的肽。表1.選擇的wF-肽標(biāo)記方法的概述
權(quán)利要求
1.一種用18F標(biāo)記分子的方法，該方法包括a)使18F與金屬反應(yīng)以形成金屬-18F復(fù)合物；和b)使所述金屬-18F復(fù)合物連接至分子以形成一個(gè)或多個(gè)待施用至受試者的18F-標(biāo)記 分子。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述金屬-18F復(fù)合物連接至所述分子的螯合部分。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述分子是蛋白或肽。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述金屬選自由鋁、鎵、銦、镥和鉈組成的組。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述wF-標(biāo)記分子在血清中穩(wěn)定至少4小時(shí)。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述螯合部分選自由D0TA、ΤΕΤΑ、ΝΟΤΑ、ΝΕΤΑ、 C-NETA, L-NETA, S-NETA 或 NOTA 衍生物組成的組。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述肽選自由以下組成的組IMP449(N0TA-ITC 芐基-D-Ala-D-Lys(HSG)-D-Tyr-D-Lys(HSG)-NH2) ； IMP 460(NODA-Ga-D-Ala-D-Lys(HSG) -D-Tyr-D-Lys(HSG)-NH2 ； IMP 461 (NOTA-D-Ala-D-Lys(HSG)-D-Tyr-D-Lys(HSG)-NH2) ； IMP 462(NOTA-D-Asp-D-Lys(HSG)-D-Tyr-D-Lys(HSG)-NH2) ；IMP 465(NOTA-D-Ala-D-Lys(HSG )-D-Tyr-D-Lys(HSG)-NH2) ； IMP 466 (NOTA-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Throl)； IMP 467 (C-NETA-琥珀酰-D-Lys (HSG) -D-Tyr-D-Lys (HSG) -NH2) ； IMP 468 (NOTA-NH- (CH2) 7 CO-Gln-Trp-Val-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2 ；SEQ IDNO 20) ； IMP 469 (S-NETA-D-Lys (HSG) -D-Tyr-D-Lys (HSG) -NH2)和 IMP 470 (L-NETA-琥珀酰-D-Lys (HSG) -D-Tyr-D-Lys (HSG) -NH2)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，進(jìn)一步包括在不使所述18F-標(biāo)記分子與未標(biāo)記分子分 離的情況下將所述wF-標(biāo)記分子施用至受試者。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，進(jìn)一步包括c)使所述18F-標(biāo)記分子與未標(biāo)記分子分離以產(chǎn)生純化的18F-標(biāo)記分子；和d)將所述純化的18F-標(biāo)記分子施用至受試者。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中所述純化的18F-標(biāo)記分子在所述方法開(kāi)始后不 到一小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生。
11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，進(jìn)一步包括使用PET掃描以成像所述純化的wF-標(biāo) 記分子在所述受試者中的分布。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述金屬是鋁。
13.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述金屬-18F復(fù)合物通過(guò)在95°C至110°C之間 的溫度的水性介質(zhì)中加熱而連接至所述螯合部分。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中向所述水性介質(zhì)添加有機(jī)溶劑。
15.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述金屬-18F復(fù)合物通過(guò)微波輻射而連接至所 述螯合部分。
16.一種用18F標(biāo)記分子的方法，該方法包括a)使18F與硼反應(yīng)以形成硼-18F復(fù)合物；和b)使所述硼-18F復(fù)合物與分子連接以形成一個(gè)或多個(gè)待施用至受試者的18F標(biāo)記分子。
17.一種用18F標(biāo)記分子的方法，該方法包括a)將18F添加至金屬?gòu)?fù)合分子；和b)使所述18F結(jié)合至所述金屬。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中所述金屬被連接至與所述分子結(jié)合的螯合部分。
19.一種18F-標(biāo)記的蛋白或肽，其包含與所述蛋白或肽連接的金屬-18F復(fù)合物。
20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的18F-標(biāo)記的蛋白或肽，其中所述金屬選自由鋁、鎵、銦、镥 和鉈組成的組。
21.根據(jù)權(quán)利要求19所述的18F-標(biāo)記的蛋白或肽，其中所述金屬是鋁。
22.一種通過(guò)正電子發(fā)射斷層攝影(PET)進(jìn)行18F成像的方法，該方法包括a)使18F與選自由鋁、鎵、銦、镥或鉈組成的組的金屬反應(yīng)以形成金屬-18F復(fù)合物；b)使所述金屬-18F復(fù)合物與分子連接以形成一個(gè)或多個(gè)18F-標(biāo)記分子；c)將所述18F-標(biāo)記分子施用至受試者；和d)通過(guò)PET掃描成像所述18F-標(biāo)記分子的分布。
23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的方法，其中所述18F-標(biāo)記分子在不使所述18F-標(biāo)記分子與 未標(biāo)記分子分離的情況下被施用至所述受試者。
24.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，進(jìn)一步包括e)在所述18F-標(biāo)記分子被施用至所述受試者之前使所述18F-標(biāo)記分子與未標(biāo)記分子 分離以產(chǎn)生純化的wF-標(biāo)記分子。
25.根據(jù)權(quán)利要求22所述的方法，其中被成像的wF-標(biāo)記分子分布指示疾病的存在或 不存在。
26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中所述疾病選自由以下組成的組實(shí)體癌癥(癌、 肉瘤、黑素瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、卵巢癌、結(jié)腸直腸癌、前列腺癌)、造血系 統(tǒng)癌癥(白血病、淋巴瘤、骨髓瘤)、自身免疫疾病、神經(jīng)變性疾病、阿爾茨海默病、心臟病、 心肌梗死、充血性心力衰竭、心肌壞死、血栓形成、中風(fēng)、炎癥、粥樣硬化、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、 紅斑狼瘡、AIDS和病原體感染。
27.根據(jù)權(quán)利要求22所述的方法，其中所述wF-標(biāo)記分子用于成像受體。
28.根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，其中所述受體是血管發(fā)生受體，并且所述18F-標(biāo)記 分子是[Al18F]結(jié)合的RGD-NOTA。
29.根據(jù)權(quán)利要求22所述的方法，其中所述wF-標(biāo)記分子用于成像腫瘤。
30.根據(jù)權(quán)利要求四所述的方法，其中所述18F-標(biāo)記分子是18F-標(biāo)記的鈴蟾肽或奧曲肽。
31.根據(jù)權(quán)利要求四所述的方法，其中所述18F-標(biāo)記分子是選自由hLLl、hLL2、 hImmu31、hPAM4、hRS7、hA19、hA20、hMN-14、hMu-9、hMN-3、hMN-15 和 hL243 組成的組的抗體 或其片段。
32.根據(jù)權(quán)利要求22所述的方法，其中所述wF-標(biāo)記分子是18F-標(biāo)記的ΝΟΤΑ、C-NETA 或賴(lài)氨酸-ΝΕΤΑ，并且所述18F-標(biāo)記分子用于成像腎血流。
33.根據(jù)權(quán)利要求22所述的方法，其中所述18F-標(biāo)記分子使用抗體、抗體片段或抗體 構(gòu)建體被靶向目標(biāo)部位。
34.根據(jù)權(quán)利要求22所述的方法，其中所述18F-標(biāo)記分子是使用雙特異性抗體被靶向目標(biāo)部位的可靶向構(gòu)建體。
35.根據(jù)權(quán)利要求34所述的方法，進(jìn)一步包括i)將雙特異性抗體施用至受試者，所述雙特異性抗體具有至少一個(gè)可靶向構(gòu)建體結(jié)合 部位和至少一個(gè)靶向抗原結(jié)合部位，其中所述靶向抗原的存在指示疾病或病癥；和 )在施用所述可靶向構(gòu)建體之前允許足量的時(shí)間以使未與靶向抗原結(jié)合的雙特異性 抗體從循環(huán)中清除。
36.根據(jù)權(quán)利要求35所述的方法，其中所述靶向抗原是腫瘤相關(guān)抗原。
37.根據(jù)權(quán)利要求35所述的方法，其中所述靶向抗原存在于病原生物上。
38.根據(jù)權(quán)利要求37所述的方法，其中所述病原體是病毒、細(xì)菌、真菌、酵母或微生物。
39.根據(jù)權(quán)利要求38所述的方法，其中所述病毒選自由以下組成的組人類(lèi)免疫缺陷 病毒(HIV)、皰疹病毒、巨細(xì)胞病毒、狂犬病毒、流感病毒、乙型肝炎病毒、仙臺(tái)病毒、貓白血 病病毒、呼腸病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、人血清細(xì)小樣病毒、猿猴病毒40、呼吸道合胞病毒、小 鼠乳房腫瘤病毒、水痘-帶狀皰疹病毒、登革病毒、風(fēng)疹病毒、麻疹病毒、腺病毒、人類(lèi)T細(xì)胞 白血病病毒、EB病毒、鼠白血病病毒、腮腺炎病毒、水皰性口炎病毒、辛德畢斯病毒、淋巴細(xì) 胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒、疣病毒和藍(lán)舌病毒；或者所述細(xì)菌選自由以下組成的組無(wú)乳鏈 球菌、嗜肺軍團(tuán)菌、釀膿鏈球菌、大腸桿菌、淋球菌、腦膜炎球菌、肺炎球菌、乙型流感嗜血桿 菌、蒼白密螺旋體、萊姆病螺旋體、綠膿假單胞菌、麻風(fēng)分枝桿菌、流產(chǎn)桿菌、結(jié)核絲桿菌和 破傷風(fēng)桿菌。
40.根據(jù)權(quán)利要求36所述的方法，其中所述靶向抗原選自由以下組成的組碳酸酐酶 IX、CCCL19、CCCL21、CSAp, CDl、CDla, CD2、CD3、CD4、CD5、CD8、CDl 1A、CD14、CD15、CD16、 CD18、CD19、CD20、IGF-1R、CD21、CD22、CD23、CD25、CD29、CD30、CD32b、CD33、CD37、CD38、 CD40、CD40L、CD45、CD46、CD52、CD54、CD55、CD59、CD64、CD66a_e、CD67、CD70、CD74、CD79a、 CD80、CD83、CD95、CD126、CD133、CD138、CD147、CD154、CEACAM5、CEACAM6、B7、ED-B 纖連蛋 白、H因子、FHL-1、Flt-3、葉酸受體、GROB, HMGB-1、缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)、HMl. 24、胰島素 樣生長(zhǎng)因子-I(ILGF-I)、IFN-Y、IFN-α、IFN-β、IL-2、IL-4R、IL-6R、IL-13R、IL-15R、 IL-17R、IL-18R、IL-6、IL-8、IL-12、IL-15、IL-17、IL-18、IL-25、IP-10、MAGE、mCRP、MCP_l、 MIP-1A、MIP-1B、MIF、MUCK MUC2、MUC3、MUC4、MUC5、PAM4 抗原、NCA-95、NCA-90、PSMA, EGP-U EGP-2、AFP、la、HMl. 24、HLA-DR、生腱蛋白、Le (y)、RANTES, TlOU TAC, Tn 抗原、 Thomson-Friedenreich 抗原、腫瘤壞死抗原、TNF- α、TRAIL 受體(Rl 和 R2)、VEGFR、EGFR、 P1GF、補(bǔ)體因子C3、C3a、C3b、C5a、C5、和癌基因產(chǎn)物。
41.根據(jù)權(quán)利要求40所述的方法，其中所述雙特異性抗體包括選自由hLLl、hLL2、 hImmu31、hPAM4、hRS7、hA19、hA20、hMN-14、hMu-9、hMN-3、hMN-15 和 hL243 組成的組的抗體 或其片段。
42.一種用于18F標(biāo)記的試劑盒，該試劑盒包括a)與18F形成復(fù)合物的金屬；b)任選地，包含一個(gè)或多個(gè)螯合部分以結(jié)合金屬-18F復(fù)合物的靶向肽。
43.根據(jù)權(quán)利要求42所述的試劑盒，進(jìn)一步包括一種或多種緩沖液。
44.根據(jù)權(quán)利要求42所述的試劑盒，進(jìn)一步包括輻射分解保護(hù)劑。
45.根據(jù)權(quán)利要求44所述的試劑盒，其中所述輻射分解保護(hù)劑是抗壞血酸。
46.根據(jù)權(quán)利要求42所述的試劑盒，其中所述肽是IMP449、IMP 460、IMP461、IMP 462、IMP 465、IMP 466、IMP 467、IMP 468、IMP 469 或 IMP 470。
47.根據(jù)權(quán)利要求42所述的試劑盒，其中所述金屬是鋁、鎵、銦、镥或鉈。
48.根據(jù)權(quán)利要求42所述的試劑盒，進(jìn)一步包括雙特異性抗體，所述抗體具有一種針 對(duì)靶向肽的結(jié)合特異性和另一種針對(duì)靶抗原的結(jié)合特異性。
49.根據(jù)權(quán)利要求48所述的試劑盒，其中所述靶抗原是腫瘤相關(guān)抗原。
50.根據(jù)權(quán)利要求49所述的試劑盒，其中所述靶抗原選自由以下組成的組碳酸酐酶 IX、CCCL19、CCCL21、CSAp, CDU CDla, CD2、CD3、CD4、CD5、CD8、CD11A、CD14、CD15、CD16、 CD18、CD19、CD20、IGF-1R、CD21、CD22、CD23、CD25、CD29、CD30、CD32b、CD33、CD37、CD38、 CD40、CD40L、CD45、CD46、CD52、CD54、CD55、CD59、CD64、CD66a_e、CD67、CD70、CD74、CD79a、 CD80、CD83、CD95、CD126、CD133、CD138、CD147、CD154、CEACAM5、CEACAM6、B7、ED-B 纖連蛋 白、H因子、FHL-1、Flt-3、葉酸受體、GROB, HMGB-1、缺氧誘導(dǎo)因子(HIF)、HMl. 24、胰島素 樣生長(zhǎng)因子-I(ILGF-I)、IFN-Y、IFN-α、IFN-β、IL-2、IL-4R、IL-6R、IL-13R、IL-15R、 IL-17R、IL-18R、IL-6、IL-8、IL-12、IL-15、IL-17、IL-18、IL-25、IP-10、MAGE、mCRP、MCP_l、 MIP-1A、MIP-1B、MIF、MUCK MUC2、MUC3、MUC4、MUC5、PAM4 抗原、NCA-95、NCA-90、PSMA, EGP-U EGP-2、AFP、la、HMl. 24、HLA-DR、生腱蛋白、Le (y)、RANTES, TlOU TAC, Tn 抗原、 Thomson-Friedenreich 抗原、腫瘤壞死抗原、TNF- α、TRAIL 受體(Rl 和 R2)、VEGFR、EGFR、 P1GF、補(bǔ)體因子C3、C3a、C3b、C5a、C5、和癌基因產(chǎn)物。
51.根據(jù)權(quán)利要求48所述的試劑盒，進(jìn)一步包括從循環(huán)中清除未與所述靶抗原結(jié)合的 雙特異性抗體的清除劑。
52.一種用19F標(biāo)記分子的方法，該方法包括a)使19F與金屬反應(yīng)以形成金屬-19F復(fù)合物；和b)使所述金屬-19F復(fù)合物連接至分子以形成一個(gè)或多個(gè)待施用至受試者的19F-標(biāo)記 分子。
53.根據(jù)權(quán)利要求52所述的方法，其中所述復(fù)合物連接至所述分子的螯合部分。
54.根據(jù)權(quán)利要求52所述的方法，其中所述分子是蛋白或肽。
55.根據(jù)權(quán)利要求52所述的方法，其中所述金屬選自由鋁、鎵、銦、镥和鉈組成的組。
56.根據(jù)權(quán)利要求52所述的方法，其中所述19F-標(biāo)記分子在血清中穩(wěn)定至少4小時(shí)。
57.根據(jù)權(quán)利要求53所述的方法，其中所述螯合部分選自由D0TA、ΤΕΤΑ、ΝΟΤΑ、ΝΕΤΑ、 C-NETA, L-NETA, S-NETA 或 NOTA 衍生物組成的組。
58.根據(jù)權(quán)利要求M所述的方法，其中所述肽選自由以下組成的組IMP449(N0TA-ITC 芐基-D-Ala-D-Lys(HSG)-D-Tyr-D-Lys(HSG)-NH2) ； IMP 460(NODA-Ga-D-Ala-D-Lys(HSG) -D-Tyr-D-Lys(HSG)-NH2 ； IMP 461 (NOTA-D-Ala-D-Lys(HSG)-D-Tyr-D-Lys(HSG)-NH2) ； IMP 462(NOTA-D-Asp-D-Lys(HSG)-D-Tyr-D-Lys(HSG)-NH2) ；IMP 465(NOTA-D-Ala-D-Lys(HSG )-D-Tyr-D-Lys(HSG)-NH2) ； IMP 466 (NOTA-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Throl)； IMP 467 (C-NETA-琥珀酰-D-Lys (HSG) -D-Tyr-D-Lys (HSG) -NH2) ； IMP 468 (NOTA-NH- (CH2) 7 CO-Gln-Trp-Val-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2 ；SEQ IDNO 20) ； IMP 469 (S-NETA-D-Lys (HSG) -D-Tyr-D-Lys (HSG) -NH2)和 IMP 470 (L-NETA-琥珀酰-D-Lys (HSG) -D-Tyr-D-Lys (HSG) -NH2)。
59.根據(jù)權(quán)利要求52所述的方法，進(jìn)一步包括在不使所述19F-標(biāo)記分子與未標(biāo)記分子 分離的情況下將所述19F-標(biāo)記分子施用至受試者。
60.根據(jù)權(quán)利要求52所述的方法，進(jìn)一步包括c)使所述19F-標(biāo)記分子與未標(biāo)記分子分離以產(chǎn)生純化的19F-標(biāo)記分子；和d)將所述純化的19F-標(biāo)記分子施用至受試者。
61.根據(jù)權(quán)利要求60所述的方法，其中所述純化的19F-標(biāo)記分子在所述方法開(kāi)始后不 到一小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生。
62.根據(jù)權(quán)利要求60所述的方法，進(jìn)一步包括使用MRI成像以成像所述純化的19F-標(biāo) 記分子在所述受試者中的分布。
63.根據(jù)權(quán)利要求52所述的方法，其中所述金屬是鋁。
64.一種通過(guò)核磁共振成像(MRI)對(duì)19F進(jìn)行成像的方法，該方法包括a)使19F與選自由鋁、鎵、銦、镥或鉈組成的組的金屬反應(yīng)以形成金屬-19F復(fù)合物；b)使所述金屬-19F復(fù)合物與分子連接以形成一個(gè)或多個(gè)19F-標(biāo)記分子；c)將所述19F-標(biāo)記分子施用至受試者；和d)通過(guò)MRI成像所述19F-標(biāo)記分子的分布。
65.根據(jù)權(quán)利要求61所述的方法，其中被成像的19F-標(biāo)記分子分布指示疾病的存在或 不存在。
66.根據(jù)權(quán)利要求65所述的方法，其中所述疾病選自由以下組成的組實(shí)體癌癥(癌、 肉瘤、黑素瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、卵巢癌、結(jié)腸直腸癌、前列腺癌)、造血系 統(tǒng)癌癥(白血病、淋巴瘤、骨髓瘤)、自身免疫疾病、神經(jīng)變性疾病、阿爾茨海默病、心臟病、 心肌梗死、充血性心力衰竭、心肌壞死、血栓形成、中風(fēng)、炎癥、粥樣硬化、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、 紅斑狼瘡、AIDS和病原體感染。
67.根據(jù)權(quán)利要求64所述的方法，其中所述19F-標(biāo)記分子用于成像腫瘤。
68.根據(jù)權(quán)利要求67所述的方法，其中所述19F-標(biāo)記分子是19F-標(biāo)記的鈴蟾肽或奧曲肽。
69.根據(jù)權(quán)利要求67所述的方法，其中所述19F-標(biāo)記分子是選自由hLLl、hLL2、 hImmu31、hPAM4、hRS7、hA19、hA20、hMN-14、hMu-9、hMN-3 hMN-15 和 hL243 組成的組的抗體 或其片段。
70.根據(jù)權(quán)利要求67所述的方法，其中所述靶向抗原是腫瘤相關(guān)抗原。
71.根據(jù)權(quán)利要求70所述的方法，其中所述靶向抗原選自由以下組成的組結(jié)腸特異 性抗原-P(CSAp)、癌胚抗原(CEA)、CD4、CD5、CD8、CD14、CD15、CD19、CD20、CD21、CD22、CD23、 CD25、CD30、CD45、CD66a_d、CD67、CD74、CD79a、CD80、CD138、HLA-DR、la、Ii、MUC1、MUC2、 MUC3、MUC4、NCA、EGFR、HER 2/neu 受體、TAG-72、EGP-1、EGP-2、A3、KS-1、Le (y)、S100、PSMA、 PSA、生腱蛋白、葉酸受體、VEGFR、EGFR、PDGFR、FGFR、P1GF、ILGF-1、壞死抗原、IL-2、IL-6、 TlOl 禾口 MAGE。
72.—種合成ΝΟΤΑ衍生物的方法，該方法包括a)生成NOTA二 -叔丁基酯；和b)使用所述NOTA二 -叔丁基酯制備N(xiāo)OTA衍生物。
73.一種合成NOTA衍生物的方法，該方法包括a)生成琥珀酰四-叔丁基酯C-NETA；和b)使用所述琥珀酰四-叔丁基酯C-NETA制備N(xiāo)OTA衍生物。
74.—種組合物，包括與螯合部分復(fù)合的27Al19F,其中所述復(fù)合物在室溫下水性介質(zhì)中穩(wěn)定。
75.根據(jù)權(quán)利要求74所述的組合物，其中所述螯合部分選自由D0TA、TETA、N0TA、NETA、 C-NETA, L-NETA, S-NETA 或 NOTA 衍生物組成的組。
76.根據(jù)權(quán)利要求75所述的組合物，其中所述螯合部分是ΝΟΤΑ。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種用于PET或MRI成像的18F或19F標(biāo)記分子的組合物以及所述標(biāo)記分子的合成和使用方法。所述標(biāo)記分子可以是肽或蛋白，盡管其他類(lèi)型的分子可以被標(biāo)記。優(yōu)選地，通過(guò)形成金屬?gòu)?fù)合物以及18F-或19F-金屬?gòu)?fù)合物與螯合部分結(jié)合，18F或19F結(jié)合至靶向分子?；蛘撸饘倏梢允紫扰c螯合基團(tuán)結(jié)合，然后18F或19F與所述金屬結(jié)合。在其他實(shí)施方案中，18F或19F標(biāo)記部分可以包括與靶向疾病相關(guān)抗原的雙特異性抗體組合使用的可靶向構(gòu)建體。18F或19F標(biāo)記的可靶向構(gòu)建體肽在37℃血清中穩(wěn)定足以進(jìn)行PET或MRI成像的時(shí)間。
文檔編號(hào)G01T1/16GK102066974SQ200980123437
公開(kāi)日2011年5月18日 申請(qǐng)日期2009年4月30日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月30日
發(fā)明者D·M·戈登伯格, 克里斯托弗·A·德索扎, 威廉·J·麥布賴(lài)德 申請(qǐng)人:免疫醫(yī)療公司