專利名稱：樣品分離吸附器具的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及將混合多個(gè)成分的生物學(xué)或化學(xué)的樣品分離為各成分，并使其吸附于 吸附構(gòu)件的樣品分離吸附器具。
背景技術(shù)：
目前，開發(fā)將蛋白質(zhì)或核酸等試料根據(jù)其性質(zhì)的不同進(jìn)行分離檢測的各種方法手 法，并開發(fā)用于此的裝置。作為分離方法，具有凝膠(Υ+)電泳、毛細(xì)管電泳、液體色譜法 等，從其簡單度及分離能的高度出發(fā)，廣泛利用凝膠電泳。凝膠電泳具有只向1方向分離試料的電泳、及向兩個(gè)方向分離試料的二維電泳。 二維電泳通常在分析蛋白質(zhì)的情況下進(jìn)行。在通過二維電泳分離蛋白質(zhì)的情況下，對向第一維方向的分離利用使用具有一定 的PH梯度的凝膠帶(卜u、y 7")的等電聚焦電泳(等電點(diǎn)電気泳動(dòng))。等電聚焦電 泳為在凝膠帶的兩端施加電壓，通過具有蛋白質(zhì)的固有的等電點(diǎn)的不同進(jìn)行分離的方法。 另外，對向第二維方向的分離廣泛利用使用陰離子界面活性劑即十二烷基硫酸鈉(SDS)的 SDS-聚丙烯酸酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)。二維電泳因?yàn)榭梢砸淮畏蛛x較多的蛋白質(zhì)，包羅 地進(jìn)行解析，所以，在蛋白質(zhì)組(^nf才一Λ)解析中廣泛利用。蛋白質(zhì)組指在特定的細(xì) 胞、器官、臟器等中進(jìn)行翻譯生產(chǎn)的蛋白質(zhì)(protein)的整體，作為其研究可以列舉蛋白質(zhì) 的輪廓、功能解析等。另外，可知，在生物體內(nèi)合成的蛋白質(zhì)通過接受稱為磷酸化等翻譯后修飾的化學(xué) 性修飾，調(diào)節(jié)其功能。上述的電泳只能將蛋白質(zhì)分離為各成分，只分離解析難以得到關(guān)于各 成分的翻譯后修飾的信息。在蛋白質(zhì)組解析中，作為檢測通過電泳分離的蛋白質(zhì)的試料的方法，具有稱為使 轉(zhuǎn)印膜吸附凝膠中的分離的試料進(jìn)行固定化的轉(zhuǎn)印(免疫印跡)的方法。轉(zhuǎn)印膜使用易于 結(jié)合試料、且疏水性高的硝化纖維素膜或PVDF (Polyvinylidenedifluoride)膜等。轉(zhuǎn)印到膜的試料使用進(jìn)行了熒光標(biāo)識(shí)的抗體或探頭等進(jìn)行檢測。使用抗體檢測蛋 白質(zhì)的方法已知蛋白免疫印跡法(々- ^夕X 口？〒4 > 7 )。若在轉(zhuǎn)印了蛋白質(zhì)的膜 上覆蓋特定的抗體，則基于抗原抗體反應(yīng)可以一定程度指定蛋白質(zhì)。在生物學(xué)上，對于重要 的翻譯后修飾的磷酸化，可以通過在蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印后的膜上覆蓋抗磷酸化抗體，而檢測磷酸 化蛋白質(zhì)的有無、磷酸化部位的差異等。這樣，電泳和蛋白免疫印跡法的組合為在蛋白質(zhì)組解析非常有效的方法(例如， 參照非專利文獻(xiàn)1)。目前，電泳法及蛋白免疫印跡法使用分別獨(dú)立的裝置通過研究者的手工作業(yè)進(jìn) 行。即，通常為，在電泳裝置進(jìn)行SDS-PAGE后，將凝膠從裝置取出移至轉(zhuǎn)印(免疫印跡)裝 置，放置轉(zhuǎn)印膜進(jìn)行轉(zhuǎn)印(免疫印跡)。該操作因?yàn)槟z為非常軟的材料難以處理，所以，為 操作繁雜且需要熟練的工作，但是存在使這些工作自動(dòng)化的技術(shù)(專利文獻(xiàn)1)。專利文獻(xiàn) 1公開有使從電泳到蛋白免疫印跡的一連串的操作自動(dòng)化的技術(shù)。
專利文獻(xiàn)1 日本國公開專利公報(bào)“特開2007-292616號公報(bào)(
公開日平成19年 11月8日)”非專利文獻(xiàn)1 修訂第三版蛋白質(zhì)試驗(yàn)筆記(下)從分離同定到功能解析(羊土 社、2005年、第38 47頁)使用于蛋白質(zhì)組解析的蛋白質(zhì)、以及使用于免疫反應(yīng)的抗體等的、用于解析的樣 品，通常較多情況下從細(xì)胞或組織分離或抽出較為麻煩。因此，即使在用于連續(xù)進(jìn)行從電泳 到蛋白免疫印跡的一連串的操作的樣品分離吸附器具，也需求使樣品更有價(jià)值更高效地轉(zhuǎn) 印的技術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明鑒于上述課題，其主要目的為提供一種可以使樣品效率地轉(zhuǎn)印的樣品分離 吸附器具。本發(fā)明者們銳意探討的結(jié)果為，發(fā)現(xiàn)在專利文獻(xiàn)1的技術(shù)中，(a)在緩沖溶液內(nèi) 進(jìn)行樣品的轉(zhuǎn)印(免疫印跡)，在樣品轉(zhuǎn)印中緩沖液容易流入樣品分離部和樣品吸附構(gòu)件 的縫隙，因?yàn)樵诹魅氲木彌_溶液中樣品通過自擴(kuò)散流出，所以，降低樣品的轉(zhuǎn)印效率、及(b) 在進(jìn)行電泳及轉(zhuǎn)印(免疫印跡)時(shí)，若由于電化學(xué)反應(yīng)從電極產(chǎn)生的氣泡在樣品轉(zhuǎn)印中與 樣品吸附構(gòu)件接觸，則在該部分不流過電流，因此產(chǎn)生不進(jìn)行轉(zhuǎn)印的部分，在轉(zhuǎn)印圖案產(chǎn)生 斑點(diǎn)狀的不均，在通過進(jìn)一步反復(fù)探討，完成本發(fā)明。即，為解決上述課題，本發(fā)明提供一種樣品分離吸附器具，其特征在于，具備，第一 緩沖液槽，其具備第一電極，用于加入第一緩沖液；第二緩沖液槽，其具備第二電極，用于加 入第二緩沖液；樣品分離部，其收納分離樣品的樣品分離介質(zhì)；導(dǎo)電部，其收納導(dǎo)電介質(zhì)， 在通過該樣品分離介質(zhì)和該導(dǎo)電介質(zhì)夾持的位置搭載吸附該樣品的樣品吸附構(gòu)件，在該位 置搭載該樣品吸附構(gòu)件時(shí)，該樣品分離介質(zhì)及該導(dǎo)電介質(zhì)分別與該樣品吸附構(gòu)件相接，與 該樣品吸附構(gòu)件相接的一側(cè)的相反側(cè)的該樣品分離介質(zhì)連接于第一緩沖液槽內(nèi)，與該樣品 吸附構(gòu)件相接的一側(cè)的相反側(cè)的該導(dǎo)電介質(zhì)連接于第二緩沖液槽內(nèi)。根據(jù)所述的構(gòu)成，通通過向第一緩沖液槽加入第一緩沖液、向第二緩沖液槽加入 第二緩沖液，通過第一緩沖液、所述樣品分離介質(zhì)、所述樣品吸附構(gòu)件、所述導(dǎo)電介質(zhì)、第二 緩沖液電連接第一電極和第二電極之間。由此，可以通過電泳分離所述樣品分離介質(zhì)中的 樣品，并且可以使分離的該樣品通過電泳從該樣品分離介質(zhì)向與該樣品分離介質(zhì)相接的所 述樣品吸附構(gòu)件移動(dòng)，使該所述樣品吸附構(gòu)件吸附。在此，樣品從所述樣品分離介質(zhì)向所述樣品吸附構(gòu)件的移動(dòng)和現(xiàn)有技術(shù)不同，其 在第二緩沖液槽外進(jìn)行。因此，可以防止樣品的向緩沖溶液中的自擴(kuò)散(流出)，同時(shí)可以 防止由電極產(chǎn)生的氣泡經(jīng)由緩沖液到達(dá)所述樣品吸附構(gòu)件。因此，可以進(jìn)行高效的樣品的 轉(zhuǎn)印。其結(jié)果為，防止樣品的吸附不均，圖案更鮮明，可以進(jìn)行正確且高靈敏度的樣品的檢 測。本發(fā)明的樣品分離吸附器具在與上述樣品吸附構(gòu)件相接的一側(cè)優(yōu)選在所述樣品 分離介質(zhì)的上表面或下表面的至少一方設(shè)置切口，更優(yōu)選在雙面設(shè)置。另外，所述切口為了 細(xì)地設(shè)置前端部而設(shè)置，只要為向前端變細(xì)的形狀就不特別地進(jìn)行限定該切口的形狀。另 外，上述切口的長度相對于高度的比優(yōu)選為1/2倍以上4倍以下的范圍。
根據(jù)所述的構(gòu)成，所述樣品分離介質(zhì)在與所述樣品吸附構(gòu)件相接的一側(cè)形成從某 地點(diǎn)開始變細(xì)的形狀。根據(jù)后述的本發(fā)明者們的個(gè)人見解，通過所述樣品分離介質(zhì)選取這 樣的形狀，可以抑制固定有所述樣品分離介質(zhì)的容器(所述樣品分離部)的壁面的影響。另外，通過在上表面和下表面兩面設(shè)置切口，所述樣品分離介質(zhì)成為中央尖銳的 形狀。根據(jù)后述本發(fā)明者們的個(gè)人見解，若為這樣的形狀，可以進(jìn)一步抑制所述壁面的影 響。而且，若相對所述切口的長度相對于高度的比為m倍以上4倍以下的范圍，則如 后述，可以進(jìn)一步抑制所述壁面的影響。本發(fā)明的樣品分離吸附器具中，優(yōu)選在與所述樣品吸附構(gòu)件相接的一側(cè)，在所述 樣品分離部的上表面或下表面的至少一方設(shè)置切口。根據(jù)所述構(gòu)成，可以抑制在所述樣品分離部和所述樣品吸附構(gòu)件之間由于毛細(xì)管 現(xiàn)象而流出樣品。本發(fā)明的樣品分離吸附器具中，優(yōu)選在所述樣品分離部的與所述樣品吸附構(gòu)件相 接的一面設(shè)置含有所述樣品分離介質(zhì)的膜。根據(jù)所述構(gòu)成，在所述樣品分離部的前端具備的所述膜包含所述樣品分離介質(zhì)， 包含于該膜的該樣品分離介質(zhì)與所述樣品吸附構(gòu)件相接。由此，可以使所述樣品吸附構(gòu)件 和所述樣品分離介質(zhì)無縫隙緊貼，可以防止從縫隙的樣品的流出，同時(shí)可以確保穩(wěn)定的通 電狀態(tài)。本發(fā)明的樣品分離吸附器具中，在所述導(dǎo)電部的與所述樣品吸附構(gòu)件相接的一面 設(shè)置有包含所述導(dǎo)電介質(zhì)的膜。根據(jù)所述構(gòu)成，在所述導(dǎo)電部的前端具備的所述膜包含所述導(dǎo)電介質(zhì)，包含于該 膜的該導(dǎo)電介質(zhì)與所述樣品吸附構(gòu)件相接。由此，可以使所述樣品吸附構(gòu)件和所述導(dǎo)電介 質(zhì)無縫隙緊貼，可以確保穩(wěn)定的通電狀態(tài)。本發(fā)明的樣品分離吸附器具中，優(yōu)選在與所述樣品吸附構(gòu)件相接的一側(cè)，在所述 導(dǎo)電介質(zhì)的上表面或下表面的至少一方設(shè)置切口。夾持所述樣品吸附構(gòu)件的電力線形成于所述樣品分離介質(zhì)和所述導(dǎo)電介質(zhì)之間。 因此，根據(jù)所述的構(gòu)成，因?yàn)樗鰧?dǎo)電介質(zhì)形成為尖細(xì)，所以可以緊密地設(shè)置所述電線。因 此，也可以電氣地防止在樣品的轉(zhuǎn)印時(shí)的擴(kuò)散，可以進(jìn)行高分辨率下的樣品吸附。本發(fā)明的樣品分離吸附器具中，優(yōu)選在與所述樣品吸附構(gòu)件相接的一側(cè)，在所述 導(dǎo)電部的上表面或下表面的至少一方設(shè)置切口。根據(jù)所述的構(gòu)成，可以防止在所述導(dǎo)電部和所述樣品吸附構(gòu)件之間由于毛細(xì)管現(xiàn) 象而流出樣品。本發(fā)明的樣品分離吸附器具中，優(yōu)選還具備對所述樣品吸附構(gòu)件按壓所述樣品分 離介質(zhì)及所述導(dǎo)電介質(zhì)的至少一方的按壓機(jī)構(gòu)。根據(jù)所述的構(gòu)成，可以使所述樣品分離介質(zhì)、所述樣品吸附構(gòu)件、及所述導(dǎo)電介質(zhì) 緊貼。由此，可以防止樣品從縫隙間的流出，同時(shí)可以確保穩(wěn)定的通電狀態(tài)。本發(fā)明的樣品分離吸附器具中，優(yōu)選還具備用于加入浸漬所述樣品吸附構(gòu)件的第 三緩沖液的第三緩沖液槽。根據(jù)所述構(gòu)成，由于用緩沖液浸漬所述樣品吸附構(gòu)件，所以可以確保更穩(wěn)定的通
6電狀態(tài)。本發(fā)明的樣品分離吸附器具中，優(yōu)選第三緩沖液的pH為6.0以上8.5以下的范 圍，所述樣品分離介質(zhì)、所述導(dǎo)電介質(zhì)、第一緩沖液及第二緩沖液的PH也同樣地優(yōu)選為6. 0 以上8. 5以下的范圍。若第三緩沖液的pH為酸性或堿性，則在所述樣品吸附構(gòu)件上，可能產(chǎn)生電浸透 流。若上述電浸透流產(chǎn)生，則緩沖液對樣品吸附構(gòu)件132較強(qiáng)地產(chǎn)生涌流，阻礙所述樣品向 樣品吸附構(gòu)件132的高分辨率的吸附。另外，若減少緩沖液，則不能產(chǎn)生穩(wěn)定的電泳。根據(jù) 所述的構(gòu)成，因?yàn)楸ＷC樣品吸附構(gòu)件的PH為中性，所以可以抑制電浸透流，可以確保樣品 的高分辨率的吸附、穩(wěn)定的電泳。另外，電浸透流也可能在所述樣品分離部及所述導(dǎo)電部的尖細(xì)的部分引起。通過 將所述樣品分離介質(zhì)、所述導(dǎo)電介質(zhì)、第一緩沖液及第二緩沖液的PH設(shè)為中性，可以抑制 在該部分的電浸透流。本發(fā)明的樣品分離吸附器具中，優(yōu)選還具備使所述樣品吸附構(gòu)件沿與從所述樣品 分離介質(zhì)向所述導(dǎo)電介質(zhì)的方向相垂直的方向移動(dòng)的樣品吸附構(gòu)件移動(dòng)機(jī)構(gòu)。根據(jù)所述的構(gòu)成，通過所述樣品吸附構(gòu)件移動(dòng)，該樣品吸附構(gòu)件的與所述樣品分 離介質(zhì)相接的部分移動(dòng)。因此，所述樣品連續(xù)地吸附于所述樣品吸附構(gòu)件，根據(jù)在所述樣品 分離介質(zhì)的各樣品的移動(dòng)速度，在該樣品吸附構(gòu)件上進(jìn)行吸附的位置發(fā)生變化。因此，可以 合適地進(jìn)行解析。本發(fā)明的樣品分離吸附器具中，優(yōu)選具備，電壓檢測機(jī)構(gòu)，其測定第一電極及第二 電極間的電壓；樣品位置檢測機(jī)構(gòu)，其基于所述電壓檢測機(jī)構(gòu)測定的電壓檢測所述樣品在 所述樣品分離介質(zhì)的與所述樣品吸附構(gòu)件相接的位置移動(dòng)，所述樣品吸附構(gòu)件移動(dòng)機(jī)構(gòu)在 樣品位置檢測機(jī)構(gòu)檢測到該樣品向該位置的移動(dòng)時(shí)，開始該樣品吸附構(gòu)件向所述方向的移動(dòng)。即使在所述樣品分離介質(zhì)開始電泳，特別是在移動(dòng)速度大的樣品到達(dá)所述樣品分 離部的前端(與所述樣品吸附構(gòu)件相接的位置)前，所述樣品不吸附于該樣品吸附構(gòu)件。因 此，到開始所述吸附，使所述樣品吸附構(gòu)件移動(dòng)是無意義的。根據(jù)所述構(gòu)成，通過監(jiān)視電極間的電壓值而檢測通過所述樣品分離部的所述樣 品，該樣品向所述樣品吸附構(gòu)件的吸附開始后，開始該樣品吸附構(gòu)件的移動(dòng)。即，若所述樣 品遷移到所述樣品分離部的前端的尖細(xì)部的位置，則因?yàn)樵撉岸瞬康膶?dǎo)電率降低，所以電 阻值變大。因此，可發(fā)現(xiàn)在恒電流條件下電壓值上升(恒電壓條件下電流值降低)現(xiàn)象。若 監(jiān)視該電壓上升，則可以容易地檢測所述樣品向所述樣品吸附構(gòu)件的吸附的開始?；诖?， 通過開始所述樣品吸附構(gòu)件的移動(dòng)，可以高效地進(jìn)行所述樣品向該樣品吸附構(gòu)件的吸附。本發(fā)明的樣品分離吸附器具因?yàn)闃悠贩蛛x部和樣品吸附構(gòu)件的接觸位置位于具 備電極的緩沖液槽之外，所以，可以高效地轉(zhuǎn)印樣品。本發(fā)明的其它目的、特征、及優(yōu)異點(diǎn)根據(jù)以下所示記載充分明白。另外，本發(fā)明的 優(yōu)點(diǎn)根據(jù)參照附圖的接下來的說明可以明白。


圖1是表示本發(fā)明一實(shí)施方式(第一實(shí)施方式)的樣品分離吸附器具的概略構(gòu)造的立體圖。圖2是表示本發(fā)明一實(shí)施方式(第一實(shí)施方式)的樣品分離吸附器具的概略構(gòu)造 的剖面圖。圖3是表示在使樣品分離介質(zhì)的形狀變化的情況下的帶電粒子的移動(dòng)的模擬結(jié) 果的圖。圖4是說明樣品分離介質(zhì)和樣品吸附構(gòu)件的連接部分的模式圖。圖5是表示本發(fā)明一實(shí)施方式(第二實(shí)施方式)的樣品分離吸附器具的概略構(gòu)造 的剖面圖。圖6是表示從電泳開始時(shí)的電極間的電壓變化的坐標(biāo)圖。圖7是說明在本發(fā)明的樣品分離器具的樣品分離部前端具備膜的構(gòu)成的剖面圖。圖8是說明在本發(fā)明的樣品分離器具的導(dǎo)電部前端具備膜的構(gòu)成的剖面圖。
具體實(shí)施例方式〔第一實(shí)施方式〕圖1是表示本發(fā)明一實(shí)施方式(第一實(shí)施方式)的樣品分離吸附器具100的概略 構(gòu)成的立體圖，圖2是表示樣品分離吸附器具100的概略構(gòu)成的剖面圖。如圖1所示，樣品分離吸附器具100具備陰極(第一電極)101，且具備用于加入第 一緩沖液的第一緩沖液槽103、陽極(第二電極)102，還具備用于加入第二緩沖液的第二緩 沖液槽104、對分離樣品的樣品分離介質(zhì)131進(jìn)行收納的樣品分離部110、及收納導(dǎo)電介質(zhì) 133的導(dǎo)電部120。樣品分離介質(zhì)131和導(dǎo)電介質(zhì)133夾著吸附樣品的樣品吸附構(gòu)件132并分別與樣 品吸附構(gòu)件132相接。樣品分離介質(zhì)131在樣品分離部110的前端部112與樣品吸附構(gòu)件 132相接。導(dǎo)電介質(zhì)133在導(dǎo)電部120的前端部122與樣品吸附構(gòu)件132相接。在樣品分離部110的連接部111，樣品分離介質(zhì)131的、與樣品吸附構(gòu)件132相接 一側(cè)的相反側(cè)，與第一緩沖液槽103內(nèi)相連。在導(dǎo)電部120的連接部121，導(dǎo)電介質(zhì)133的、 與樣品吸附構(gòu)件132相接的一側(cè)的相反側(cè)，與第二緩沖液槽104內(nèi)相連。在向第一緩沖液槽103及第二緩沖液槽104加入緩沖液時(shí)，經(jīng)由第一緩沖液槽103 內(nèi)的陰極101、第二緩沖液槽104內(nèi)的陽極102、緩沖液電連接樣品分離介質(zhì)131、樣品吸附 構(gòu)件132、及導(dǎo)電介質(zhì)133。另外，本實(shí)施方式的樣品分離吸附器具100具備存儲(chǔ)樣品吸附 構(gòu)件132且用于加入第三緩沖液的第三緩沖液槽105。通過向第三緩沖液槽加入緩沖液，可 以防止樣品吸附構(gòu)件132干燥，可以更適宜地進(jìn)行陰極101和陽極102的電連接。通過電連接陰極101和陽極102，將樣品分離介質(zhì)131內(nèi)的樣品進(jìn)行電泳分離，通 過電泳使分離的該樣品再轉(zhuǎn)印到樣品吸附構(gòu)件132。在此，從樣品分離介質(zhì)131向樣品吸附 構(gòu)件132的樣品的轉(zhuǎn)印和現(xiàn)有技術(shù)不同而在第二緩沖液槽外進(jìn)行，因此，可以防止向樣品 的緩沖液中的自擴(kuò)散(流出)，并且可以防止在電極產(chǎn)生的氣泡經(jīng)由緩沖液到達(dá)樣品吸附 構(gòu)件132。由此，可以形成抑制了由向樣品的緩沖液流出引起的浪費(fèi)、及由氣泡引起的樣品 的轉(zhuǎn)印圖案的不均后的、效率良好的樣品的轉(zhuǎn)印。另外，即使為樣品吸附構(gòu)件132與樣品分 離介質(zhì)131及導(dǎo)電介質(zhì)133在第三緩沖液槽105的緩沖溶液中相接的構(gòu)成也可以進(jìn)行電泳 及轉(zhuǎn)印。即使在該情況下，由于存在樣品分離介質(zhì)131及導(dǎo)電介質(zhì)133，從而也可以防止在電極產(chǎn)生的氣泡經(jīng)由緩沖液到達(dá)樣品吸附構(gòu)件132。樣品分離部110為用于收納樣品分離介質(zhì)131的構(gòu)件，如圖1及2所示，被固定于 載物臺(tái)140。樣品分離部110可以由例如丙烯、玻璃等絕緣體制作。如圖2所示，在樣品分 離部110的內(nèi)部填充樣品分離介質(zhì)131，但是，也可以以以預(yù)先填充了樣品分離介質(zhì)131的 狀態(tài)提供樣品分離吸附器具100，也可以為使用者以后向樣品分離部110內(nèi)填充樣品分離 介質(zhì)131的構(gòu)成。樣品分離介質(zhì)131為用于通過電泳分離樣品的介質(zhì)，除可使用通常用于電泳法的 介質(zhì)、例如聚丙烯酸酰胺凝膠、瓊脂糖凝膠等以外，也可以為在樣品分離部110內(nèi)部建立所 謂的被稱為納米柱的超微細(xì)柱的構(gòu)成。導(dǎo)電部120為用于收納導(dǎo)電介質(zhì)133的構(gòu)件，如圖1及2所示，其可以以在載物臺(tái) 140上沿水平方向移動(dòng)的方式設(shè)置。導(dǎo)電部120可以由例如丙烯、玻璃等絕緣體制作。在導(dǎo) 電部120的內(nèi)部填充導(dǎo)電介質(zhì)133，但是，也可以以預(yù)填充了導(dǎo)電介質(zhì)133的狀態(tài)提供樣品 分離吸附器具100，也可以是使用者以后向?qū)щ姴?20內(nèi)填充導(dǎo)電介質(zhì)133的構(gòu)成。導(dǎo)電介質(zhì)133只要可以不使緩沖溶液流出而只使電解質(zhì)通過，并可確保導(dǎo)電性即 可，不特別地限定，但例如也可以填充聚丙烯酸酰胺凝膠、瓊脂糖(Τ" if 口一 7 )凝膠、形成 納米柱的構(gòu)造體等。樣品吸附構(gòu)件132為用于吸附樣品的構(gòu)件。如圖2所示，樣品吸附構(gòu)件132在本 實(shí)施方式中處于浸于緩沖液的狀態(tài)，上部通過移動(dòng)臂(樣品吸附構(gòu)件移動(dòng)機(jī)構(gòu))143而被固定。樣品分離吸附器具可以以含有樣品吸附構(gòu)件132的狀態(tài)提供，也可以是使用者以 后補(bǔ)充樣品吸附構(gòu)件132的構(gòu)成。樣品吸附構(gòu)件132優(yōu)選由可以確保強(qiáng)度的材料形成，例 如，在樣品為蛋白質(zhì)的情況下，可以使用PVDF(Polyvinylidenedifluoride)膜等。另外， PVDF膜優(yōu)選預(yù)先使用甲醇等進(jìn)行吸水化處理。另外，除此之外也可以使用尼龍、硝化纖維素 等的、目前使用的核酸或蛋白質(zhì)易于結(jié)合的膜。向第一緩沖液槽103、第二緩沖液槽104及第三緩沖液槽105加入的緩沖液只要可 以確保導(dǎo)電性即可，但是，特別優(yōu)選PH為中性。若pH為中性，則可以抑制引起緩沖液的移 動(dòng)的電浸透流的產(chǎn)生。特別是，若向第三緩沖液槽105加入的緩沖液的pH為酸性或堿性， 則在樣品吸附構(gòu)件132中可能產(chǎn)生電浸透流。若上述電浸透流產(chǎn)生，則緩沖液對樣品吸附 構(gòu)件132較強(qiáng)地產(chǎn)生涌流，阻礙向樣品的樣品吸附構(gòu)件132的高分辨率的吸附。另外，若減 少緩沖液，則不能產(chǎn)生穩(wěn)定的電泳。通過將向第三緩沖液槽105加入的緩沖液的pH設(shè)為中 性，可以抑制電浸透流，可以進(jìn)行樣品的高分辨率的吸附，并實(shí)施穩(wěn)定的電泳。另外，電浸透流也有在樣品分離介質(zhì)131及導(dǎo)電介質(zhì)133的尖細(xì)的部分引起的可 能性。通過將向樣品分離介質(zhì)131、導(dǎo)電介質(zhì)133、第一緩沖液槽103及第二緩沖液槽104 加入的緩沖液的PH設(shè)為中性，可以抑制在這些部分的電浸透流。另外，陰極101及陽極102只要由具有導(dǎo)電性的原料形成即可，但是，為了防止電 極的離子化，原料優(yōu)選鉬(白金)。優(yōu)選為，樣品分離介質(zhì)131在和樣品吸附構(gòu)件132相接的一側(cè)(樣品分離部110 的前端部112附近)，在上表面或下表面的至少一方設(shè)置切口。另外，將與從樣品分離介質(zhì) 131向樣品吸附構(gòu)件132的方向垂直的方向設(shè)為上方。通過設(shè)置這樣的切口，樣品分離介質(zhì)131在和樣品吸附構(gòu)件132相接的一側(cè)形成從一點(diǎn)急劇變細(xì)(厚度變薄)的形狀。另外，切 口為了縮細(xì)前端部而設(shè)置，且只要為朝向前端變細(xì)的形狀就不特別地進(jìn)行限定形狀。即，樣品分離介質(zhì)131只有和樣品吸附構(gòu)件132接觸的端部變尖細(xì)。樣品在樣品分 離介質(zhì)131內(nèi)通過電泳進(jìn)行分離后，通過樣品分離介質(zhì)131的端面排出并吸附(轉(zhuǎn)印)到 樣品吸附構(gòu)件132。因此，樣品分離介質(zhì)131和樣品吸附構(gòu)件132接觸的部分越小，轉(zhuǎn)印的 樣品的構(gòu)圖越鮮明，因此，本裝置的樣品檢查的分辨率越高。但是，另一方面，如圖3(a)所 示，若樣品分離介質(zhì)131均勻地將厚度變薄，則在通過電泳分離樣品時(shí)，樣品在樣品分離部 110的內(nèi)壁面產(chǎn)生碰撞，基于電泳的分離變得不均勻。如圖3(b)所示，本實(shí)施方式的樣品分離吸附器具100中，由上表面及下表面平行 的板狀部分、形成尖細(xì)的部分構(gòu)成樣品分離介質(zhì)131，使樣品在板狀部分分離后，使其從尖 細(xì)部分排出并被吸附到樣品吸附構(gòu)件132。這樣，通過只將排出口設(shè)為尖細(xì)，可以將樣品以 高分辨率在樣品分離介質(zhì)131中分離，可以使其高精度吸附到樣品吸附構(gòu)件132。使用圖3說明更詳細(xì)的樣品分離介質(zhì)131的前端形狀。圖3是表示對樣品分離介 質(zhì)131的形狀進(jìn)行了模擬的結(jié)果的圖。圖3(a) (h)表示在各種形狀的樣品分離介質(zhì)131 使帶電粒子通過的情況下的電力線150。例如，圖3(a)表示從連接部111向前端部112通 過樣品分離部110的內(nèi)部的樣品分離介質(zhì)131中的帶電粒子的電力線150(圖3的(b) (h)也相同)。另外，記載于圖3的(a) (h)的右部的各數(shù)值在模擬中表示“對壁面不產(chǎn) 生碰撞地通過的帶電粒子數(shù)”/ “導(dǎo)入的帶電粒子數(shù)”。例如圖3(a)及專利文獻(xiàn)1所記載，在從連接部111向前端部112以固定比例變細(xì) 的形狀中，10個(gè)帶電粒子中只可以通過1個(gè)。另一方面，如圖3的(b)及本實(shí)施方式，在樣 品分離介質(zhì)131只縮細(xì)前端部112附近的形狀中，10個(gè)帶電粒子中可以通過4個(gè)。如此，在 和樣品吸附構(gòu)件132相接的一側(cè)(樣品分離部110的前端部112附近)，通過在樣品分離介 質(zhì)131的上表面或下表面的至少一方設(shè)置切口，可以合適地進(jìn)行樣品的分離。接下來，表示使上述切口的長度相對于高度的比進(jìn)行各種變化時(shí)的模擬結(jié)果。圖 3(c)中將上述比設(shè)為4倍、圖3(d)中設(shè)為2倍、圖3(e)中設(shè)為1倍、圖3(f)中設(shè)為1/2 倍。換言之，將前端部112附近的、樣品分離介質(zhì)131的、相對長度方向的在厚度方向的減 少率(斜度)的倒數(shù)設(shè)為上述各值。如圖3(c) (f)所示，在設(shè)為4倍或1/2倍時(shí)，20個(gè) 帶電粒子中通過7個(gè)，在設(shè)為2倍或1倍時(shí)，通過8個(gè)。即，相對于樣品分離介質(zhì)131的厚 度幅面的傾斜最適宜為1 2倍，若換算為傾斜角，則優(yōu)選22.6° 45°程度。另外，在傾 斜部由于因所述的內(nèi)壁面的影響降低分離能，所以，傾斜部的長度優(yōu)選為短。因此，更優(yōu)選 例如45°程度。另外，即使在將上述比設(shè)為4倍或1/2倍的情況下，也可以使樣品的分離能 比圖3(a)及專利文獻(xiàn)1記載的形狀向上。另外，比較在圖3(g)所示的樣品分離介質(zhì)131的排出口靠上表面的情況，和圖3 的(h)所示的排出口位于中央的情況。圖3的(g)中，20個(gè)帶電粒子中通過8個(gè)，圖3的(h) 中通過9個(gè)。因此，樣品分離介質(zhì)131的排出口位于中央的情況最適合。因此，如圖3(h)， 通過在樣品分離介質(zhì)131的上表面及下表面的兩面設(shè)置切口，且在樣品排出口附近以傾斜 角45°左右向中央設(shè)為尖細(xì)的形狀，由此，可以進(jìn)行更高分辨率的樣品分離及吸附(轉(zhuǎn)因) 到樣品被吸附構(gòu)件。另外，在前端部112附近，樣品分離部110其形狀也優(yōu)選為尖細(xì)。即，在前端部112，優(yōu)選在樣品分離部110的上表面或下表面的至少一方設(shè)置切口。圖4表示樣品分離部110 和樣品吸附構(gòu)件132的接觸部。如圖4(a)所示，在沒有設(shè)置上述切口的狀態(tài)下，樣品分離 部110及樣品吸附構(gòu)件132的接觸部分的面積變大，在樣品分離部110和樣品吸附構(gòu)件132 的間隙引起毛細(xì)管現(xiàn)象，樣品151從該間隙沿箭頭方向流出。因此，如圖4(b)所示，通過設(shè) 置上述切口，優(yōu)選樣品分離部110的形狀也設(shè)為尖細(xì)。由此，在將樣品151通過樣品分離介 質(zhì)131排出時(shí)，可以防止在樣品分離部110和樣品吸附構(gòu)件132的接觸部流出(擴(kuò)散)。另外，對于導(dǎo)電部120也同樣，優(yōu)選縮小和樣品吸附構(gòu)件132之間的接觸部分抑制 毛細(xì)管現(xiàn)象，在前端部122優(yōu)選在導(dǎo)電部120的上表面或下表面的至少一方設(shè)置切口。另外，在與樣品吸附構(gòu)件132相接的一側(cè)，優(yōu)選在導(dǎo)電介質(zhì)133的上表面或下表面 的至少一方設(shè)置切口。由于樣品吸附構(gòu)件132成為由樣品分離介質(zhì)131及導(dǎo)電介質(zhì)133夾 持的構(gòu)成，因此，若樣品分離介質(zhì)131及導(dǎo)電介質(zhì)133都為尖細(xì)，則夾持樣品分離介質(zhì)131 形成的電力線可以更細(xì)密。由此，也可以電氣性地防止樣品排出時(shí)的擴(kuò)散，可以進(jìn)行高分辨 率下的樣品吸附。另外，如上述，為了縮細(xì)前端部而設(shè)置切口，只要為向前端變細(xì)的形狀就不進(jìn)行特 別的限定形狀。例如，在圖4(c)中，設(shè)于樣品分離介質(zhì)131及樣品分離部110的切口由曲 線構(gòu)成，這樣的形狀也可以得到相同的效果。如圖7所示，一實(shí)施方式中，在與樣品吸附構(gòu)件132相接的一側(cè)，在樣品分離部110 的前端部112安裝膜700，膜700在內(nèi)部含有樣品分離介質(zhì)131。關(guān)于膜700，只要是蛋白質(zhì)吸附性低、具有強(qiáng)度、并具有貫通的細(xì)孔即可，沒 有特別地限定，可以使用例如吸水性PVDF (Polyvinylidenedifluoride)膜、吸水性 PTFE(Polytetrafluoroethylene)膜、PES(Polyethersulphone)膜等。膜 700 向樣品分離 部110的安裝可以使用粘合帶或接合劑、或用夾子等夾著樣品分離部110和膜700固定而 進(jìn)行安裝。為了使樣品分離介質(zhì)131包含到膜700的內(nèi)部，在將膜700安裝于樣品分離部 110的前端部112后，將樣品分離介質(zhì)131填充到樣品分離部110即可。例如，在對樣品分 離介質(zhì)131使用聚丙烯酸酰胺凝膠(f ‘) 7 117 ^ F y ^ )的情況下，可以在從安裝 了膜700的樣品分離部110的連接部111側(cè)注入凝膠聚合(重合)前的丙烯酰胺溶液后進(jìn) 行凝膠聚合。若在樣品分離介質(zhì)131和樣品吸附構(gòu)件132之間存在間隙，則可能從縫隙流 出樣品、或還可能電流不穩(wěn)定而擾亂樣品的轉(zhuǎn)印的問題。通過設(shè)置膜700，使樣品分離介質(zhì) 131包含于膜700的內(nèi)部，可以容易地使樣品分離介質(zhì)131填充到樣品分離部110的前端部 112。由此，由于使樣品吸附構(gòu)件132和樣品分離介質(zhì)131無間隙緊貼，所以，可以防止樣品 從間隙的流出，同時(shí)可以確保穩(wěn)定的通電狀態(tài)。如圖8所示，在進(jìn)一步的實(shí)施方式中，在與樣品吸附構(gòu)件132相接的一側(cè)，在導(dǎo)電 部120的前端部122安裝膜800，膜800在內(nèi)部含有導(dǎo)電介質(zhì)133。膜800只要具有強(qiáng)度、具有貫通的細(xì)孔就不特別地進(jìn)行限定，可以使用例如PVDF 膜、吸水性PVDF膜、PTFE膜、吸水性PTFE膜、PES膜等。膜800向?qū)щ姴?20的安裝可以使 用粘合帶或接合劑、或用夾子等夾著導(dǎo)電部120和膜800固定進(jìn)行安裝。為了使導(dǎo)電介質(zhì) 133包含到膜800的內(nèi)部，在將膜800安裝于導(dǎo)電部120的前端部122后，將導(dǎo)電介質(zhì)133 填充到導(dǎo)電部120即可。例如，在對導(dǎo)電介質(zhì)133使用聚丙烯酸酰胺凝膠的情況下，在從設(shè) 置了膜800的導(dǎo)電部120的連接部121側(cè)注入凝膠聚合前的丙烯酰胺溶液后進(jìn)行凝膠聚
11合即可。若在導(dǎo)電介質(zhì)133和樣品吸附構(gòu)件132之間存在間隙，則存在電流不穩(wěn)定而擾亂 樣品的轉(zhuǎn)印的問題。通過設(shè)置膜800，使導(dǎo)電介質(zhì)133包含于內(nèi)部，可以容易地使導(dǎo)電介質(zhì) 133填充到導(dǎo)電部120的前端部122。由此，由于使樣品吸附構(gòu)件132和導(dǎo)電介質(zhì)133無間 隙緊貼，所以，可以確保穩(wěn)定的通電狀態(tài)。導(dǎo)電部120通過移動(dòng)臂(按壓機(jī)構(gòu))144進(jìn)行移動(dòng)，被按壓于樣品吸附構(gòu)件132。 由此，樣品吸附構(gòu)件132與樣品分離介質(zhì)131及導(dǎo)電介質(zhì)133雙方緊貼，確保通電。樣品分離介質(zhì)131可以在含有應(yīng)該分離的樣品的狀態(tài)下收納于樣品分離部110， 也可以在收納于樣品分離部110后添加樣品。作為樣品沒有特別地限定，可以使用來自生 物體材料(例如，生物體個(gè)體、體液、細(xì)胞株(株)、組織培養(yǎng)物、或組織斷片)的調(diào)制物、
市售的試劑等，更優(yōu)選可以使用縮多氨酸(f ‘”夕千K )或多核甙酸(^」3々 > 才f 卜。。在添加樣品時(shí)，例如在二維電泳的情況下，預(yù)先使進(jìn)行了第一維的等電聚焦電泳 的凝膠帶130在樣品分離部110的連接部111與樣品分離介質(zhì)131連接(接觸)。凝膠帶 130使用市售的凝膠帶即可。在此，通常因?yàn)槟z帶具有薄的柔軟性，所以優(yōu)選使用由丙烯 等制作的支撐板142進(jìn)行固定。通過移動(dòng)臂141使固定的附有支撐板142的凝膠帶130移 動(dòng)，使其與樣品分離部110內(nèi)的樣品分離介質(zhì)131連接。另外，移動(dòng)臂141可以和移動(dòng)臂143 兼用。該情況下，移動(dòng)臂141將凝膠帶130與樣品分離介質(zhì)131連接，并以在樣品進(jìn)入樣品 分離介質(zhì)131后進(jìn)行移動(dòng)從而抓住(摑& )樣品吸附構(gòu)件132的上部的方式進(jìn)行動(dòng)作。也可以將第一維的電泳分離機(jī)構(gòu)裝入本裝置，該情況下，可以使從第一維的等電 聚焦電泳分離到第二維的電泳分離及轉(zhuǎn)印實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。另外，在不進(jìn)行第一維的電泳的情況下，在向樣品分離部110填充樣品分離介質(zhì) 131時(shí)，在制作凹井(凹坑)且導(dǎo)入樣品后，通過瓊脂糖凝膠等在第一緩沖液槽103內(nèi)以樣 品不流出的方式固定樣品(也可以將樣品和瓊脂糖凝膠進(jìn)行混合然后導(dǎo)入，使其在凹井內(nèi) 固化)。上述凹井(凹坑)和通常的SDS-PAGE相同，可以將凝膠單體溶液(進(jìn)行聚合成為 凝膠前的液體)流入樣品分離部110，在凝膠單體聚合前插入梳子(通常具有5mm左右的凹 凸的多個(gè)梳子狀的板)，使其凝膠化后取出梳子，由此進(jìn)行制作。導(dǎo)入樣品后，可以通過在陰極101和陽極102之間流過電流而進(jìn)行電泳分離。作 為上述電流，優(yōu)選使用50mA以下的值，更優(yōu)選為20mA以上30mA以下的范圍。只要在上述 范圍內(nèi)，就可以以充分的速度進(jìn)行電泳，并抑制發(fā)熱。若使用更大的電流，則雖然可以進(jìn)行 快速的電泳，但是，存在高電流引起發(fā)熱，以及對凝膠、樣品、電泳分離的分辨率等產(chǎn)生惡劣 影響。另外，為了防止發(fā)熱，也可以在本裝置設(shè)置使用有珀耳帖(《>★-)元件等的冷卻 機(jī)構(gòu)。在樣品到達(dá)樣品分離部110的前端部112后，通過移動(dòng)臂143使樣品吸附構(gòu)件132 上升，連續(xù)地使樣品吸附(轉(zhuǎn)印)。樣品是否到達(dá)樣品分離部Iio的前端部112可以向樣品 預(yù)先導(dǎo)入染色的標(biāo)記，也可以監(jiān)視電壓值。作為著色的樣品，可以優(yōu)選使用例如，在市售的分子量標(biāo)記、SDS-PAGE試劑盒等中 導(dǎo)入通常作為表示電泳的前沿(先頭)的前端線而使用的BPB(BromphenoIBlue)。電壓值的監(jiān)視使用例如監(jiān)視陰極101和陽極102之間的電壓的公知慣用的電壓監(jiān) 視器(電壓檢測機(jī)構(gòu))。若樣品到達(dá)樣品分離部Iio的前端部112，則在樣品分離介質(zhì)131和樣品吸附構(gòu)件132的連接位置，導(dǎo)電率變小，因此，電極間的電阻值增高，電壓值大幅上 升。通過監(jiān)視電壓，可以檢測樣品的排出。通過在本裝置裝入監(jiān)視電壓值的程序(樣品位置檢測機(jī)構(gòu))，自動(dòng)檢測樣品的排 出，可以控制移動(dòng)臂143而提升樣品吸附構(gòu)件132。如此，樣品吸附構(gòu)件132提升可以通過 電流值或電壓值進(jìn)行控制，同樣地可以控制吸附開始后的提升速度。由此，可以進(jìn)行無浪費(fèi) 的樣品吸附構(gòu)件132的使用(沒有不吸附樣品的部分)，可以使裝置小型化。提升速度只要 為具有充分的分辨率可以吸附樣品的速度就可以，若為本領(lǐng)域技術(shù)人員則可以進(jìn)行適宜設(shè) 定。樣品吸附結(jié)束后，通過移動(dòng)臂143回收樣品吸附構(gòu)件132，進(jìn)行染色或免疫反應(yīng) 等。之后，通過熒光檢測器等檢測樣品的分離轉(zhuǎn)印構(gòu)圖。也可以將該檢測機(jī)構(gòu)也組裝到本 裝置，自動(dòng)化進(jìn)行電泳、轉(zhuǎn)印及檢測的全工序。[第二實(shí)施方式]圖5是表示本發(fā)明的其它實(shí)施方式(第二實(shí)施方式)的樣品分離吸附器具200的 概略構(gòu)成的剖面圖。如圖5所示，在第一實(shí)施方式的樣品分離吸附器具100中，樣品吸附構(gòu) 件132垂直移動(dòng)，與之相對，本實(shí)施方式的樣品分離吸附器具200中，樣品吸附構(gòu)件232水 平移動(dòng)。各部分的詳情和第一實(shí)施方式相同，以下說明不同點(diǎn)。如圖5所示，樣品分離吸附器具200的載物臺(tái)240具有用于存儲(chǔ)樣品吸附構(gòu)件232 且加入緩沖液的第三緩沖液槽205、收納導(dǎo)電介質(zhì)233的導(dǎo)電部220、及連接導(dǎo)電介質(zhì)233 且配置陽極(第二電極)202的第二緩沖液槽204。導(dǎo)電介質(zhì)233及第二緩沖液槽204在導(dǎo) 電部220的連接部222連接。導(dǎo)電部220為垂直豎立的形狀，在連接部222的相反側(cè)的上 部設(shè)置有露出導(dǎo)電介質(zhì)233的前端部221。另外，在移動(dòng)臂(按壓機(jī)構(gòu))244上安裝有用于加入第一緩沖液的第一緩沖液槽 203、及收納樣品分離介質(zhì)231的樣品分離部210，在第一緩沖液槽203配置有陰極(第一 電極)201。樣品分離介質(zhì)231及第一緩沖液槽203在樣品分離部210的連接部212連接。 樣品分離部210為垂直豎立的形狀，在連接部212的相反側(cè)即下部設(shè)有露出樣品分離介質(zhì) 231的前端部211。通過移動(dòng)臂(樣品吸附構(gòu)件移動(dòng)機(jī)構(gòu))243將樣品吸附構(gòu)件232從第三緩沖液槽 205內(nèi)引出，經(jīng)由導(dǎo)輥245成為水平狀態(tài)，與樣品分離介質(zhì)231及導(dǎo)電介質(zhì)233分別以從上 下被夾持的狀態(tài)接觸。另外，移動(dòng)臂244使樣品分離部210向下方移動(dòng)，從而使得樣品吸附 構(gòu)件232與樣品分離介質(zhì)231及導(dǎo)電介質(zhì)233兩方緊貼，確保通電。由此，進(jìn)行導(dǎo)入樣品分 離介質(zhì)231的樣品的分離及該樣品的向樣品吸附構(gòu)件的轉(zhuǎn)印。樣品向樣品分離吸附器具200的導(dǎo)入和第一實(shí)施方式的樣品分離吸附器具100相 同，可以采用各種方法，如圖5所示，可以將進(jìn)行了一次電泳的凝膠帶230通過移動(dòng)臂Ml 及支撐部242與樣品分離介質(zhì)231連接。如上所述，如本實(shí)施方式的樣品分離吸附器具200，即使為使樣品吸附構(gòu)件沿水平 移動(dòng)的構(gòu)成也可以得到本發(fā)明的效果。實(shí)施例制作圖1及2所示的第一實(shí)施方式的樣品分離吸附器具100。樣品分離部110由 玻璃形成，且固定于丙烯制的載物臺(tái)140上。另外，為了防止施加電壓時(shí)的發(fā)熱，將使用了珀耳帖元件的冷卻裝置(未圖示)安裝于動(dòng)作載物臺(tái)140下部的空間。在樣品分離部110(寬70mmX長70mmX厚5mm)內(nèi)部，作為樣品分離介質(zhì)131填充 有使用了 ρΗ6· 8的Tris-HCl緩沖劑(/O 7 7 —)的10%聚丙烯酸酰胺凝膠(寬60mmX 長30mmX厚Imm)。樣品分離部110的尖細(xì)形狀的前端部112為了使分辨率提高而制作為 以45°C的傾斜角形成尖細(xì)的形狀。另外，在前端部112的端面的中央設(shè)置有100 μ m的厚度 的樣品排出口，使樣品分離介質(zhì)131露出到外部。在樣品分離部110的相反側(cè)設(shè)置有第一 緩沖液槽103并充滿有緩沖液。作為緩沖液，使用市售的pH7. 3的MOPS緩沖劑(〃 7 T 一 )(Invitrogen)。在第一緩沖液槽103插入由鉬線制作的陰極101。另外，將樣品吸附構(gòu)件132插入設(shè)于載物臺(tái)140的第三緩沖液槽105。在第三 緩沖液槽105充滿由向市售的pH7. 2的NuPAGE轉(zhuǎn)印緩沖劑(Invitrogen)混合20 %甲 醇而成的緩沖液。即，樣品吸附構(gòu)件132處于浸于上述緩沖液的狀態(tài)。另外，將樣品吸 附構(gòu)件132的上部固定于移動(dòng)臂143。作為樣品吸附構(gòu)件132，使用對市售的PVDF膜的 ImmobironPSQ(Millipore)預(yù)先使用甲醇實(shí)施了吸水化處理的物質(zhì)。導(dǎo)電部120(寬度70mmX長度50mmX厚度5mm)位于載物臺(tái)140上，其按照在水 平方向以夾著樣品吸附構(gòu)件132的方式(朝向樣品分離部131)可以滑行移動(dòng)的方式進(jìn)行 設(shè)置。導(dǎo)電部120由玻璃制作，在內(nèi)部填充有使用pH6. 8的Tris-HCl緩沖劑的10%聚丙 烯酸酰胺凝膠(寬60mmX長15mmX寬Imm)。與導(dǎo)電部120的樣品分離部110相面對的 前端部122形成尖細(xì)形狀，通過使電力線集中使樣品吸附的分離能提高。在導(dǎo)電部120的 相反側(cè)設(shè)置第二緩沖液槽104并充滿有緩沖溶液。作為緩沖溶液，和所述的第三緩沖液槽 105相同地，使用由向市售的ρΗ7· 2的NuPAGE轉(zhuǎn)印緩沖劑(Invitrogen)混合20%甲醇形 成的緩沖液。在第二緩沖液槽104插入由鉬線制作的陽極102。通過移動(dòng)臂144使導(dǎo)電部120移動(dòng)，由此，使樣品吸附構(gòu)件132與樣品分離部110 內(nèi)的樣品分離介質(zhì)131和導(dǎo)電部120內(nèi)的導(dǎo)電介質(zhì)133緊貼。作為樣品，作為分子量標(biāo)記使用市售的keBluePlus2Pre-stainecKtandardanvi trogen)。在樣品分離部110進(jìn)行充填時(shí)，在樣品分離介質(zhì)131預(yù)先制作凹井(4mmX6mmXlmm 的凹坑)。將樣品導(dǎo)入上述凹井后，在第一緩沖液槽103中以不流出該樣品的方式通過瓊脂 糖凝膠進(jìn)行固定化。導(dǎo)入樣品后，在陰極101和陽極102之間施加電壓，在20mA恒電流條件下進(jìn)行1 d、時(shí)的電辦太分離。上述的樣口口口的 SeeBluePlus2Pre-stainedStandard(Invitrogen)為著色 的蛋白質(zhì)，可以通過目視確認(rèn)樣品的電泳分離。圖6是表示從電泳開始的電壓變化的時(shí)間一電壓坐標(biāo)圖。通過目視著色的樣品的 移動(dòng)確認(rèn)，在開始點(diǎn)A開始電泳，在電壓上升點(diǎn)B樣品到達(dá)樣品分離部110的前端部112。 通過和電極連接的電壓測定器檢測電壓。移動(dòng)臂143的動(dòng)作以在電壓上升點(diǎn)B開始上升的 方式預(yù)先進(jìn)行編程，和樣品排出同時(shí)自動(dòng)以12 μ/sec開始上升。之后，將從樣品分離部110排出的樣品連續(xù)地向樣品吸附構(gòu)件132吸附(轉(zhuǎn)印)， 樣品吸附構(gòu)件132通過移動(dòng)臂143回收。本發(fā)明不限定于上述的各實(shí)施方式，在權(quán)利要求書所示的范圍可以進(jìn)行各種變 更，本發(fā)明的技術(shù)范圍也包含適宜組合各不同實(shí)施方式公開的技術(shù)裝置而得到的實(shí)施方 式。
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另外，全部本說明書中所記載的學(xué)術(shù)文獻(xiàn)及專利文獻(xiàn)在本說明書中作為參考而引用。發(fā)明的詳細(xì)的說明的項(xiàng)形成的具體的實(shí)施方式或?qū)嵤├?，?yán)格說，使本發(fā)明的技 術(shù)內(nèi)容清楚，不是只限定于這樣的具體例進(jìn)行狹義地解釋，在本發(fā)明的精神和所述的權(quán)利 要求范圍內(nèi)，可以進(jìn)行各種變更。產(chǎn)業(yè)的可利用性
本發(fā)明可以用于生物體試料、化學(xué)試料等解析及其解析器具的制造領(lǐng)域。
符號說明
100,200樣品分離吸附器具
101,201陰極(第一電極)
102,202陽極(第二電極)
103,203第一緩沖液槽
104,204第二緩沖液槽
105,205第三緩沖液槽
110,210樣品分離部
120,220導(dǎo)電部
130,230凝膠帶(樣品供給介質(zhì))
131,231樣品分離介質(zhì)
132,232樣品吸附構(gòu)件
133,233導(dǎo)電介質(zhì)
140,240載物臺(tái)
141,241移動(dòng)臂
142,242支撐體
143,243移動(dòng)臂(樣品吸附構(gòu)件移動(dòng)機(jī)構(gòu))
144,244移動(dòng)臂(按壓機(jī)構(gòu))
150電力線
151樣品
245導(dǎo)輥
700,800膜
權(quán)利要求
1.一種樣品分離吸附器具，其特征在于， 具備第一緩沖液槽，其具備第一電極，用于加入第一緩沖液； 第二緩沖液槽，其具備第二電極，用于加入第二緩沖液； 樣品分離部，其收納分離樣品的樣品分離介質(zhì)； 導(dǎo)電部，其收納導(dǎo)電介質(zhì)，在由該樣品分離介質(zhì)和該導(dǎo)電介質(zhì)所夾持的位置搭載吸附該樣品的樣品吸附構(gòu)件， 在該位置搭載該樣品吸附構(gòu)件時(shí)，該樣品分離介質(zhì)及該導(dǎo)電介質(zhì)分別與該樣品吸附構(gòu) 件相接，與該樣品吸附構(gòu)件相接的一側(cè)的相反側(cè)的該樣品分離介質(zhì)，連接于第一緩沖液槽內(nèi)， 與該樣品吸附構(gòu)件相接的一側(cè)的相反側(cè)的該導(dǎo)電介質(zhì)，連接于第二緩沖液槽內(nèi)。
2.如權(quán)利要求1所述的樣品分離吸附器具，其特征在于，在與所述樣品吸附構(gòu)件相接的一側(cè)，在所述樣品分離介質(zhì)的上表面或下表面的至少任 一方設(shè)有切口。
3.如權(quán)利要求2所述的樣品分離吸附器具，其特征在于， 所述切口的長度相對于高度的比為1/2倍以上4倍以下的范圍。
4.如權(quán)利要求2或3所述的樣品分離吸附器具，其特征在于， 所述切口設(shè)于所述樣品分離介質(zhì)的上表面及下表面這兩面。
5.如權(quán)利要求1 4中任一項(xiàng)所述的樣品分離吸附器具，其特征在于，在與所述樣品吸附構(gòu)件相接的一側(cè)，在所述樣品分離部的上表面或下表面的至少一方 設(shè)有切口。
6.如權(quán)利要求1 5中任一項(xiàng)所述的樣品分離吸附器具，其特征在于，在與所述樣品吸附構(gòu)件相接的一側(cè)，在所述導(dǎo)電介質(zhì)的上表面或下表面的至少一方設(shè) 有切口。
7.如權(quán)利要求1 6中任一項(xiàng)所述的樣品分離吸附器具，其特征在于，在與所述樣品吸附構(gòu)件相接的一側(cè)，在所述導(dǎo)電部的上表面或下表面的至少一方設(shè)有 切口。
8.如權(quán)利要求1 7中任一項(xiàng)所述的樣品分離吸附器具，其特征在于，在所述樣品分離部的與所述樣品吸附構(gòu)件相接的一面設(shè)置有包含所述樣品分離介質(zhì) 的膜。
9.如權(quán)利要求1 8中任一項(xiàng)所述的樣品分離吸附器具，其特征在于，在所述導(dǎo)電部的與所述樣品吸附構(gòu)件相接的一面，設(shè)置有包含所述導(dǎo)電介質(zhì)的膜。
10.如權(quán)利要求1 9中任一項(xiàng)所述的樣品分離吸附器具，其特征在于，還具備相對于所述樣品吸附構(gòu)件按壓所述樣品分離介質(zhì)及所述導(dǎo)電介質(zhì)的至少一方 的按壓機(jī)構(gòu)。
11.如權(quán)利要求1 10中任一項(xiàng)所述的樣品分離吸附器具，其特征在于， 還具備用于加入浸漬所述樣品吸附構(gòu)件的第三緩沖液的第三緩沖液槽。
12.如權(quán)利要求11所述的樣品分離吸附器具，其特征在于， 第三緩沖液的PH為6.0以上8. 5以下的范圍。
13.如權(quán)利要求1 12中任一項(xiàng)所述的樣品分離吸附器具，其特征在于，所述樣品分離介質(zhì)、所述導(dǎo)電介質(zhì)、第一緩沖液及第二緩沖液的PH均為6. 0以上8. 5 以下的范圍。
14.如權(quán)利要求1 13中任一項(xiàng)所述的樣品分離吸附器具，其特征在于，還具備樣品吸附構(gòu)件移動(dòng)機(jī)構(gòu)，其使上述樣品吸附構(gòu)件沿與從所述樣品分離介質(zhì)向 所述導(dǎo)電介質(zhì)的方向相垂直的方向移動(dòng)。
15.如權(quán)利要求14所述的樣品分離吸附器具，其特征在于， 具備電壓檢測機(jī)構(gòu)，其檢測第一電極及第二電極間的電壓；樣品位置檢測機(jī)構(gòu)，其基于所述電壓檢測機(jī)構(gòu)所測定的電壓，檢測所述樣品在所述樣 品分離介質(zhì)的與所述樣品吸附構(gòu)件相接的位置的移動(dòng)，所述樣品吸附構(gòu)件移動(dòng)機(jī)構(gòu)，在樣品位置檢測機(jī)構(gòu)檢測到了該樣品向所述位置移動(dòng) 時(shí)，開始該樣品吸附構(gòu)件向所述方向的移動(dòng)。
全文摘要
本發(fā)明公開一種樣品分離吸附器具(100)，包括第一緩沖液槽(103)，其具備第一電極(101)，用于加入第一緩沖液；第二緩沖液槽(104)，其具備第二電極(102)，用于加入第二緩沖液；樣品分離部(110)，其收納分離樣品的樣品分離介質(zhì)(131)；導(dǎo)電部(120)，其收納導(dǎo)電介質(zhì)(133)，樣品分離介質(zhì)(131)和導(dǎo)電介質(zhì)(133)夾持吸附樣品的樣品吸附構(gòu)件(132)，并分別與樣品吸附構(gòu)件(132)相接，與樣品吸附構(gòu)件(132)相接的一側(cè)的相反側(cè)的樣品分離介質(zhì)(131)連接于第一緩沖液槽(103)內(nèi)，與樣品吸附構(gòu)件(132)相接的一側(cè)的相反側(cè)的導(dǎo)電介質(zhì)(133)連接于第二緩沖液槽(104)內(nèi)。由此，提供可以使樣品高效地轉(zhuǎn)印的樣品分離吸附器具。
文檔編號G01N27/447GK102077084SQ20098012398
公開日2011年5月25日 申請日期2009年6月1日 優(yōu)先權(quán)日2008年6月30日
發(fā)明者丸尾祐二, 平塚淳典, 木下英樹, 松永貴輝, 橫山憲二, 綠川宇一, 鵜沼豐 申請人:夏普株式會(huì)社