專利名稱：評(píng)估肝毒性的工具和方法
評(píng)估肝毒性的工具和方法本發(fā)明涉及化合物風(fēng)險(xiǎn)分級(jí)的毒理學(xué)評(píng)估領(lǐng)域。具體來(lái)說(shuō)，本發(fā)明涉及診斷肝毒 性的方法。其還涉及測(cè)定化合物能否在受試者中誘導(dǎo)這種肝毒性的方法和鑒別用于治療 肝毒性的藥物的方法。而且，本發(fā)明涉及包含至少5種代謝產(chǎn)物的特征值的數(shù)據(jù)集(data collection)、包含所述數(shù)據(jù)集的數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)以及診斷肝毒性的系統(tǒng)和設(shè)備(device)。最 后，本發(fā)明還涉及代謝產(chǎn)物組或用于其測(cè)定的工具(means)在制備用于診斷受試者肝毒性 的診斷設(shè)備或組合物中的用途。肝毒性，也稱為肝臟毒性，指的是化學(xué)誘導(dǎo)的或化學(xué)驅(qū)動(dòng)的肝細(xì)胞損害。肝臟在體 內(nèi)各種內(nèi)源或外源化學(xué)品的代謝中起核心作用。由于肝臟為核心代謝器官，所以肝臟對(duì)來(lái) 源于毒性物質(zhì)或它們的代謝產(chǎn)物的毒性尤其敏感。在肝臟暴露于其下的化合物中，存在主動(dòng)施用的化合物例如藥物或食物中含有的 營(yíng)養(yǎng)化合物以及從環(huán)境中不可避免地?cái)z入的化合物。毒性化合物也被稱為肝毒素。許多肝毒素可以由肝臟以兩步過(guò)程進(jìn)行化學(xué)修飾。第一步通常包括化合物的功 能化。在第二步中，將功能化的化合物結(jié)合以便允許例如經(jīng)由膽汁排泄。一些肝毒素僅可 能被結(jié)合。在功能化(主要是氧化)過(guò)程中，涉及特殊的氧化酶，即細(xì)胞色素P450(CYP) 酶。一些肝毒素直接或間接影響CYP酶，并因此干擾它們自身或其它肝毒素的生理解 毒。(Jaeschke 2002，毒理科學(xué)(Toxicol Sci. )65(2) :166-76 ;Sturgill 1997，臨床化學(xué) (Clin. Chem. )43(8) :1512-1526)。由于各種病癥、疾病或醫(yī)學(xué)狀態(tài)包括肝細(xì)胞壞死、肝炎、脂肪變性、肝硬化、磷脂質(zhì) 病(phospholipoidosis)、膽汁淤積、膽管炎、肝靜脈血栓形成、肝腫瘤，肝毒性在受試者中 可能變得明顯(參見(jiàn)例如，Grunhagen 2003，Z. Gastroenterol. 41 (6) :565-578)。作為肝 毒素施用的結(jié)果觀察到的最常見(jiàn)的病癥為誘導(dǎo)的肝細(xì)胞壞死或纖維化。其可能伴隨丙氨 酸轉(zhuǎn)氨酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶和Y-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶的水平增加以及晚期急性肝功能衰竭。誘 導(dǎo)所述壞死的典型肝毒素為四氯化碳。肝炎為伴有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)肝臟的炎性疾病。它可 能是例如由病毒例如甲型、乙型和丙型肝炎病毒(HPV)引起的，或者由暴露于化合物或藥 物(例如Halothan、雙氯芬酸或阿司匹林)引起的，或者為受損的膽汁產(chǎn)生或流動(dòng)的結(jié)果。 膽汁淤積的特征在于受損的膽汁流動(dòng)。它可能是例如由避孕丸、蛋白同化留類或或別嘌呤 醇類引起的。脂肪變性伴隨導(dǎo)致微泡性或大泡性脂肪肝的甘油三酯積聚。脂肪變性的一種 特殊類型為磷脂質(zhì)病。引起脂肪變性的化合物為例如阿司匹林、酮洛芬或四環(huán)素。還已報(bào) 告血管性損害為肝毒素暴露的結(jié)果。這些損害包括例如肝靜脈血栓形成。而且，肝毒素可 能致使出現(xiàn)肝腫瘤例如肉芽腫或贅生性(neoplastic)腫瘤(包括肝細(xì)胞癌、血管肉瘤和 肝臟腺瘤)。贅生性腫瘤可能例如是由氯乙烯誘導(dǎo)產(chǎn)生的(參見(jiàn)例如，Weber 2003，Crit. Rev.Toxicol. 33(2) :105-36 ；Chitturi 2002, Semin Liver Dis. 22(2) :169-83 ；Scheen 2001, Diabetes Metab. 27(3) :305-313 ；Rikans 2000, J Biochem Mol Toxicol. 14(2) 110-117 ；Fromenty 1995，Pharmacol. Ther. 67(1) 101-154 ；Kaplowitzl986, Ann Intern. Med. 104(6) :826-839)。由于肝毒素可能的作用的多樣性，肝毒性的評(píng)估是相當(dāng)復(fù)雜的過(guò)程?，F(xiàn)行方法通常包括臨床檢查(例如超生檢查)、病理學(xué)檢查和組織病理學(xué)檢查以及生物化學(xué)分析。當(dāng) 前分析的主要生化標(biāo)記物為丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶和膽紅素。然而， 這些生物標(biāo)記物的調(diào)節(jié)是相當(dāng)復(fù)雜的，變化有時(shí)甚至可以在進(jìn)展相當(dāng)良好的階段發(fā)生。組 織病理學(xué)評(píng)估的主要缺點(diǎn)為它們是侵襲性的，即使是當(dāng)與臨床病理學(xué)測(cè)量結(jié)合時(shí)，它們的 可靠性也較差，因?yàn)樗鼈儾糠稚鲜腔趯?shí)施檢查的毒理學(xué)家的個(gè)人解釋。而且，根據(jù)現(xiàn)行 臨床測(cè)量方法很難將作為肝毒素-誘導(dǎo)的肝毒性(例如藥物誘導(dǎo)的肝毒性)的結(jié)果出現(xiàn)的 前述疾病和病癥與其它疾病或病癥的原因區(qū)分開(Gunawan 2004, Drug Metab. Rev. 36 (2) 301-312)。藥物誘導(dǎo)的肝毒性的技術(shù)評(píng)價(jià)的闡述在⑶ER/CBER工業(yè)指南草案(⑶ER/CBER Draft Guidance for Industry):藥物誘導(dǎo)的肝損傷上市前的臨床評(píng)價(jià)，2007年10月以 及在EMEA(CHMP)指南草案對(duì)藥物誘導(dǎo)的肝毒性的非臨床指南，2008年1月M日(Doc RefEMEA/CHMP/SWP/1150115/2006)中進(jìn)行描述。如果考慮到到目前為止肝毒性為藥物退出市場(chǎng)的最常見(jiàn)的原因，則肝毒性的重 要性可能變得明顯。而且，在歐洲共同體中任何產(chǎn)業(yè)中使用的化合物例如現(xiàn)在將需要符 合 REACH(化學(xué)品注冊(cè)、評(píng)價(jià)和授權(quán)(Registration，Evaluation and Authorisation of Chemicals))。應(yīng)理解，應(yīng)將化合物誘導(dǎo)肝毒性的潛在性認(rèn)為是化合物的高危險(xiǎn)性，并且因 此，僅當(dāng)遵守高安全標(biāo)準(zhǔn)時(shí)所述化合物才可用于有限的應(yīng)用。目前尚無(wú)以有效和可靠的方式評(píng)估化合物的毒理學(xué)性質(zhì)(特別是肝毒性)的靈敏 和特異的方法，然而，這樣的方法將是非常受歡迎的。因此，可以將本發(fā)明隱含的技術(shù)問(wèn)題視為提供符合前述需要的工具和方法。所述 技術(shù)問(wèn)題被在權(quán)利要求書中表征且在下文進(jìn)行描述的實(shí)施方案解決。因此，本發(fā)明涉及診斷肝毒性的方法，該方法包括(a)在疑似患有肝毒性的雄性受試者的測(cè)試樣品中測(cè)定至少一種(優(yōu)選5種) 下列分析物的量4-羥苯基丙酮酸、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:順式[9，12]2)、花生 四烯酸(C20:順式_[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22:順式[4，7，10，13，16，19]6)、 α-生育酚、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、二十三烷酸 (C23:0)、肌醇(my0-h0Sit0l)-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、4_羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神 經(jīng)酸(C24:l)、二十碳三烯酸(C20:3)、3_磷酸甘油(Glycerol-3-Phosphate)、磷脂酰膽 堿(C18:2，C20:4)、神經(jīng)酰胺(dl8:l，CM: 1)、神經(jīng)酰胺(dl8:2，以4:0)、鞘磷脂(dl8:l， C16 0)、1，2- 二油酰基-sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、磷脂酰膽堿(C18 0/C22 6)、 亞油酸(C18:順式[9，12]2)、溶血甘油磷酰膽堿(Iysoglyceroophosphorylcholines) (18:1 Lyso PC)或磷脂酰膽堿，或者在疑似患有肝毒性的雌性受試者的測(cè)試樣品中測(cè)定 至少一種并優(yōu)選至少5種下列分析物的量3-磷酸甘油、輔酶Q9、葡萄糖、甘油、棕櫚酸 (C16:0)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20:順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22: 順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、花 生酸(C20:0)、二十三烷酸(C23:0)、磷酸酯(phosphate)、山崳酸(C22 0)、4_羥基二氫神 經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(CM:1)、14-甲基十六烷酸、二十碳三烯酸(C20:3)、ID28x493,5-甲氧 基鞘氨醇、赤式-鞘氨醇、蘇氨酸、葡萄糖、神經(jīng)酰胺(dl8:l，CM: 1)、二?；视王?DAG) (C18:l, C18:2)、三?；视王?TAG)、1，2-二油酰基-sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、亞油酸(C18:順式[9,12] 或磷脂酰膽堿，和(b)將在步驟(a)中測(cè)定的量與參比值進(jìn)行比較，據(jù)此診斷肝毒性。ID28x493指的是由GCMS單離子監(jiān)測(cè)在色譜保留時(shí)間為17. 39分鐘處測(cè)定表觀m/ ζ為91Da的一種脂質(zhì)分子，該脂質(zhì)分子可從大鼠脂質(zhì)血漿部分中得到。更優(yōu)選地，所述脂質(zhì) 分子的GCMS譜可在附圖
中找到。上述分析物中的一些為分子類別。這些分析物包括例如指所有類型的磷脂酰膽 堿類化合物(phosphateidylcholines)的“磷脂酰膽堿”，指所有類型的TAG的“三?；?油酯”。然而，某些類型的磷脂酰膽堿為特別優(yōu)選的，并因此就它們的脂肪酸基團(tuán)進(jìn)一步說(shuō) 明，例如“磷脂酰膽堿(C18 0/C22 6) ”。更具體地說(shuō)，這些術(shù)語(yǔ)優(yōu)選具有下列意思。本文中所用意義的術(shù)語(yǔ)“18:1 Lyso PC”指的是分子種類，優(yōu)選地，其特征在 于含有C18:l脂肪酸單元的溶血甘油磷酰膽堿的和參數(shù)(sumparameter)。離子化種類 (spezies)的質(zhì)荷比(m/z)為522. 4Da(+/"0. 3Da)。優(yōu)選的裂解圖在下文圖3中顯示。本文中所用意義的術(shù)語(yǔ)“磷脂酰膽堿(C18:2，C20:4)”指的是分子種類，優(yōu)選 地，其特征在于含有C16:0脂肪酸單元和C22:6脂肪酸單元的組合或C18:2脂肪酸單元 和C20:4脂肪酸單元的組合的甘油磷酰膽堿的和參數(shù)。離子化種類的質(zhì)荷比(m/z)為 806. 6Da(+/"0. 3Da)。優(yōu)選的裂解圖在下文圖4中顯示。本文中所用的術(shù)語(yǔ)“神經(jīng)酰胺(dl8:l，C24:l)”指的是分子種類，優(yōu)選地，其特征 在于含有dl8:1長(zhǎng)鏈堿單元和C24:1脂肪酸單元的組合或dl8:2長(zhǎng)鏈堿單元和C24:0脂肪 酸單元的組合的神經(jīng)酰胺類的和參數(shù)。離子化種類的質(zhì)荷比(m/z)為648. 6Da(+/"0. 3Da)。 優(yōu)選的裂解圖在下文圖5中顯示。本文中所用的術(shù)語(yǔ)“DAG(C18:1，C18 2) ”指的是分子種類，優(yōu)選地，其特征在于含 有C18:1脂肪酸單元和C18:2脂肪酸單元的組合的二?；视偷暮蛥?shù)。離子化種類的質(zhì) 荷比(m/z)為 641. 6Da(+/-0. 3Da)。本文中所用的術(shù)語(yǔ)“神經(jīng)酰胺(dl8:l，C24:0)”指的是分子種類，優(yōu)選地，其特征 在于含有dl8:1長(zhǎng)鏈堿單元和C24:0脂肪酸單元的組合的神經(jīng)酰胺類的和參數(shù)。離子化種 類的質(zhì)荷比(m/z)為650. SDa(+/-0. 3Da)。優(yōu)選的裂解圖在下文圖6中顯示。本文中所用的術(shù)語(yǔ)“TAG”指的是分子種類，優(yōu)選地，其特征在于三?；视偷暮蛥?數(shù)。離子化種類的質(zhì)荷比(m/z) ^ 547. 6Da(+/"0. 3Da) 0本文中所用的術(shù)語(yǔ)“鞘磷脂(dl8:l，C16:0)”指的是分子種類，優(yōu)選地，其特征在 于含有dl8:1長(zhǎng)鏈堿單元和C16:0脂肪酸單元的組合的鞘磷脂類的和參數(shù)。離子化種類的 質(zhì)荷比(m/z)為703. 6Da(+/"0. 3Da)。優(yōu)選的裂解圖在下文圖7中顯示。本文中所用的術(shù)語(yǔ)“磷脂酰膽堿”指的是分子種類，優(yōu)選地，其特征在于甘油磷酰 膽堿的和參數(shù)。離子化種類的質(zhì)荷比(m/z)為780. SDa(+/-0. 3Da)。本文中所用的術(shù)語(yǔ)“ 1，2- 二油?；?sn-甘油基_3_磷脂?；?L-絲氨酸”指的是 分子種類，優(yōu)選地，其特征在于含有總碳數(shù)為36和總雙鍵數(shù)為1的脂肪酸單元的甘油磷酰 膽堿的和參數(shù)。離子化種類的質(zhì)荷比(m/z)為788.6Da(+/-0.3Da)。本文中所用的術(shù)語(yǔ)“磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6) ”指的是分子種類，優(yōu)選地，其特征 在于含有C18:0脂肪酸單元和C22:6脂肪酸單元的組合的甘油磷酰膽堿的和參數(shù)。離子化種類的質(zhì)荷比(m/z)為834. 6Da(+/"0. 3Da)。優(yōu)選的裂解圖在下文圖8中顯示。根據(jù)本發(fā)明提到的表述“用于診斷的方法”意指該方法基本上由前述步驟組成或 可能還包括其他步驟。然而，應(yīng)理解，在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述方法為在活體外進(jìn)行的方 法，即不是在人體或動(dòng)物體上實(shí)施的方法。本文所用的診斷指的是評(píng)估受試者患有疾病的 可能性。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的，這種評(píng)估，盡管優(yōu)選對(duì)100%的待診斷受試者是正確 的，但通常不可能是100%正確的。然而，該術(shù)語(yǔ)要求統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著份額的受試者能夠被鑒 定為患有疾病或具有患病預(yù)兆。份額是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著性能夠由本領(lǐng)域技術(shù)人員使用 各種熟知的統(tǒng)計(jì)評(píng)價(jià)工具(例如置信區(qū)間的測(cè)定、P-值測(cè)定、魏爾希檢驗(yàn)(WELCH-test)、 曼-懷二氏檢驗(yàn)(Mann-Whitney test)等)立即測(cè)定。具體內(nèi)容可見(jiàn)于Dowdy和Wearden， 研究統(tǒng)計(jì)學(xué)(Statisticsfor Research)，John Wiley & Sons，紐約 1983 中。優(yōu)選的置信區(qū) 間為至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%。ρ-值優(yōu)選為0. 2、 0. 1、0· 05。根據(jù)本發(fā)明的診斷包括相關(guān)疾病或其癥狀的監(jiān)控、確認(rèn)和分類。監(jiān)控涉及記錄已 診斷的疾病例如用來(lái)分析疾病的進(jìn)展、特定治療對(duì)疾病進(jìn)展的影響或者在疾病期間或在成 功治療疾病后出現(xiàn)的并發(fā)癥。確認(rèn)涉及加強(qiáng)或證實(shí)對(duì)已使用其它指示物或標(biāo)記物進(jìn)行的診 斷。分類涉及根據(jù)癥狀的強(qiáng)度或類型將診斷分到不同的種類中。與肝毒性有關(guān)的一些 疾病或狀況可能伴隨著其它代謝變化。優(yōu)選地，對(duì)于膽汁淤積，根據(jù)本發(fā)明已發(fā)現(xiàn)除了前述 分析物外，在下表中敘述的血清中的膽汁酸的量也增加了。表在肝毒性誘導(dǎo)的膽汁淤積期間增加的膽汁酸
權(quán)利要求
1.診斷肝毒性的方法，該方法包括(a)在疑似患有肝毒性的雄性受試者的測(cè)試樣品中測(cè)定至少5種下列分析物的量 4-羥苯基丙酮酸、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:順式[9，12]2)、花生四烯酸(C20:順 式-[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22:順式 W，7，10，13，16，19] 6)、α-生育酚、膽固 醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、二十三烷酸(C23:0)、肌醇-2-單磷 酸酯、山崳酸(C22:0)、4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(C24:l)、二十碳三烯酸(C20:3)、 3-磷酸甘油、磷脂酰膽堿(C18:2, C20:4)、神經(jīng)酰胺(dl8:l, CM: 1)、神經(jīng)酰胺(dl8:2, C24:0)、鞘磷脂(dl8:l, C16:0)、l，2-二油酰基-sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、 磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)、亞油酸(C18:順式[9,12] 2) ,18 ILyso PC或磷脂酰膽堿， 或者在疑似患有肝毒性的雌性受試者的測(cè)試樣品中測(cè)定至少下列分析物的量3-磷酸甘 油、輔酶Q9、葡萄糖、甘油、棕櫚酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20:順式-[5， 8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22:順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、 二十四烷酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、二十三烷酸(C23:0)、磷酸酯、山崳 酸(C22:0)、4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(CM:1)、14-甲基十六烷酸、二十碳三烯酸 (C20:3), ID28x493,5-甲氧基鞘氨醇、赤式-鞘氨醇、蘇氨酸、葡萄糖、神經(jīng)酰胺(dl8:l, C24:l)、二酰基甘油酯(DAG) (C18:l，C18 2)、三酰基甘油酯(TAG)、1，2-二油?；?sn-甘 油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、亞油酸(C18:順式[9,12] 或磷脂酰膽堿，和(b)將在步驟(a)中測(cè)定的量與參考值進(jìn)行比較，據(jù)此診斷肝毒性。
2.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述的受試者已經(jīng)與疑似能夠誘導(dǎo)肝毒性的化合物接觸。
3.測(cè)定化合物能否在受試者中誘導(dǎo)肝毒性的方法，該方法包括(a)在已經(jīng)與疑似能夠誘導(dǎo)肝毒性的化合物接觸的雄性受試者的樣品中測(cè)定至少 5種下列分析物的量4-羥苯基丙酮酸、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:順式[9，12]2)、 花生四烯酸(C20:順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22:順式W，7，10，13，16， 19] 6), α-生育酚、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、二十三烷 酸(C23:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(C24:l), 二十碳三烯酸(C20:3)、3-磷酸甘油、磷脂酰膽堿(C18:2，C20:4)、神經(jīng)酰胺(dl8:l， C24:l)、神經(jīng)酰胺(dl8:2，以4:0)、鞘磷脂(dl8:l，C16 0)、1，2-二 油?；?sn-甘油 基-3-磷脂酰基-L-絲氨酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)、亞油酸(C18:順式[9，12]2)、 18:lLyso PC或磷脂酰膽堿，或者在已經(jīng)與疑似能夠誘導(dǎo)肝毒性的化合物接觸的雌性的 測(cè)試樣品中測(cè)定至少5種下列分析物的量3-磷酸甘油、輔酶Q9、葡萄糖、甘油、棕櫚酸 (C16:0)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20:順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22: 順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、 花生酸(C20:0)、二十三烷酸(C23:0)、磷酸酯、山崳酸(C22:0)、4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、 神經(jīng)酸(C24:1),14-甲基十六烷酸、二十碳三烯酸(C20:3)、ID28x493,5-甲氧基鞘氨醇、 赤式-鞘氨醇、蘇氨酸、葡萄糖、神經(jīng)酰胺(dl8:l,以4:1)、二?；视王?DAG) (C18:l, C18 2)、三酰基甘油酯(TAG) ,1,2- 二油?；?sn-甘油基_3_磷脂酰基-L-絲氨酸、亞油酸 (C18:順式[9,12] 或磷脂酰膽堿；和(b)將在步驟(a)中測(cè)定的量與參考值進(jìn)行比較，據(jù)此測(cè)定化合物誘導(dǎo)肝毒性的能力。
4.權(quán)利要求2或權(quán)利要求3所述的方法，其中所述的化合物為至少一種選自下列的化 合物棉隆、二甲基甲酰胺、四氫呋喃、醋酸環(huán)丙孕酮、四氫呋喃、醋酸環(huán)丙孕酮、毒殺芬或?qū)?乙酰氨基酚。
5.權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述的參考值來(lái)源于(i)患有肝毒性的 受試者或(ii)已經(jīng)與至少一種選自下列的化合物接觸的受試者棉隆、二甲基甲酰胺、四 氫呋喃、醋酸環(huán)丙孕酮、四氫呋喃、醋酸環(huán)丙孕酮、毒殺芬或?qū)σ阴０被印?br> 6.權(quán)利要求5所述的方法，其中測(cè)試樣品中與參考值基本上相同的分析物的量指示肝毒性。
7.權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述的參考值來(lái)源于(i)已知未患有 肝毒性的受試者或(ii)未與至少一種選自下列的化合物接觸的受試者棉隆、二甲基甲酰 胺、四氫呋喃、醋酸環(huán)丙孕酮、四氫呋喃、醋酸環(huán)丙孕酮、毒殺芬或?qū)σ阴０被印?br> 8.權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述的參考值為對(duì)一群受試者的分析物 的計(jì)算參考值。
9.權(quán)利要求7或權(quán)利要求8所述的方法，其中測(cè)試樣品中與參考值相比有差異的分析 物的量指示肝毒性。
10.權(quán)利要求7-9中任意一項(xiàng)所述的方法，其中肝毒性的指示為與參考值相比分析 物的量具有如下所示差異(i)在雄性樣品中4-羥苯基丙酮酸、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸 (C18:順式[9，12]2)、花生四烯酸(C20:順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22:順 式W，7，10，13，16，19]6)、α -生育酚、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七酸 (C17:0)、二十三烷酸(C23:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨 醇、神經(jīng)酸(C24:l)、二十碳三烯酸(C20:3)、3-磷酸甘油、磷脂酰膽堿(C18:2, C20:4)、神 經(jīng)酰胺(dl8:l，CM: 1)、神經(jīng)酰胺(dl8:2，以4:0)、鞘磷脂(dl8:l，C16:0)、1，2-二油酰 基-sn-甘油基-3-磷脂酰基-L-絲氨酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)、亞油酸(C18:順 式[9，12]2)、18:lLySO PC或磷脂酰膽堿，所有這些化合物的量均增加和(ii)在雌性受試 者的樣品中3-磷酸甘油、輔酶Q9、葡萄糖、甘油、棕櫚酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)、花生 四烯酸(C20:順式_[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22:順式 W，7，10，13，16，19]6)、 膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、二十三烷酸 (C23:0)、磷酸酯、山崳酸(C22:0)、4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(C24:1),14-甲基十六 烷酸、二十碳三烯酸(C20:3)、I擬8x493、5-甲氧基鞘氨醇、赤式-鞘氨醇、蘇氨酸、葡萄糖、 神經(jīng)酰胺(dl8:l，C24:l)、二?；视王?八6)((18:1，(18:2)、三酰基甘油酯(TAG No 1)、 1，2-二油酰基-sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、亞油酸(C18:順式[9，12]2)或磷脂 酰膽堿，所有這些化合物的量均增加。
11.鑒別用于治療肝毒性的物質(zhì)的方法，該方法包括下列步驟(a)在已經(jīng)與疑似能夠治療肝毒性的候選物質(zhì)接觸的患有肝毒性的雄性受試者的樣 品中測(cè)定至少5種下列分析物的量4-羥苯基丙酮酸、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:順 式[9，12]2)、花生四烯酸(C20:順式_[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22:順式[4，7， 10，13，16，19]6)、α-生育酚、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、 二十三烷酸(C23:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng) 酸(C24:l)、二十碳三烯酸(C20:3)、3-磷酸甘油、磷脂酰膽堿(C18:2, C20:4)、神經(jīng)酰胺(dl8:l，CM: 1)、神經(jīng)酰胺(dl8:2，以4:0)、鞘磷脂(dl8:l，C160)、1，2-二油?；?sn-甘 油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)、亞油酸(C18:順式[9，12]2)、 18:1 Lyso PC或磷脂酰膽堿，或者在已經(jīng)與疑似能夠治療肝毒性的候選物質(zhì)接觸的患有肝 毒性的雌性受試者的樣品中測(cè)定至少5種下列分析物的量3-磷酸甘油、輔酶Q9、葡萄糖、 甘油、棕櫚酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20:順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳 六烯酸(C22:順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七 酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、二十三烷酸(C23:0)、磷酸酯、山崳酸(C22 0)、4_羥基二氫神 經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(CM:1)、14-甲基十六烷酸、二十碳三烯酸(C20:3)、I擬8x493、5-甲氧 基鞘氨醇、赤式-鞘氨醇、蘇氨酸、葡萄糖、神經(jīng)酰胺(dl8:l，CM: 1)、二?；视王?DAG) (C18:1，C18:2)、三?；视王?TAG No 1)、1，2-二油?；?sn-甘油基-3-磷脂酰基-L-絲 氨酸、亞油酸(C18:順式[9,12] 或磷脂酰膽堿；和(b)將在步驟(a)中測(cè)定的量與參考值進(jìn)行比較，據(jù)此鑒別能夠治療肝毒性的物質(zhì)。
12.權(quán)利要求11所述的方法，其中所述的參考值來(lái)源于(i)患有肝毒性的受試者或 ( )已經(jīng)與至少一種選自下列的化合物接觸的受試者棉隆、二甲基甲酰胺、四氫呋喃、醋 酸環(huán)丙孕酮、四氫呋喃、醋酸環(huán)丙孕酮、毒殺芬或?qū)σ阴０被印?br> 13.權(quán)利要求12所述的方法，其中測(cè)試樣品中與參考值相比有差異的分析物的量指示 物質(zhì)能夠治療肝毒性。
14.權(quán)利要求11-13中任意一項(xiàng)所述的方法，其中能夠治療肝毒性的物質(zhì)的指示為與 參考值相比分析物的量具有如下所示差異(i)在雄性樣品中4-羥苯基丙酮酸、棕櫚酸 (C16:0)、亞油酸(C18:順式[9，12]2)、花生四烯酸(C20:順式-[5，8，11，14]4)、二十二 碳六烯酸(C22:順式W，7，10，13，16，19]6)、α -生育酚、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷 酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、二十三烷酸(C23:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、 4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(CM: 1)、二十碳三烯酸(C20:3)、3-磷酸甘油、磷脂酰膽 堿(C18:2，C20:4)、神經(jīng)酰胺(dl8:l，CM: 1)、神經(jīng)酰胺(dl8:2，以4:0)、鞘磷脂(dl8:l， C16 0)、1，2- 二油?；?sn-甘油基-3-磷脂酰基-L-絲氨酸、磷脂酰膽堿(C18 0/C22 6)、 亞油酸(C18:順式[9，12]2)、18:1 Lyso PC或磷脂酰膽堿，所有這些化合物的量均降低和 ( )在雌性受試者的樣品中3-磷酸甘油、輔酶Q9、葡萄糖、甘油、棕櫚酸(C16:0)、硬脂酸 (C18:0)、花生四烯酸(C20:順式_[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22:順式W，7，10， 13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、 二十三烷酸(C23:0)、磷酸酯、山崳酸(C22:0)、4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(C24:l), 14-甲基十六烷酸、二十碳三烯酸(C20:;3)、ID28X493、5-甲氧基鞘氨醇、赤式-鞘氨醇、蘇氨 酸、葡萄糖、神經(jīng)酰胺(dl8:l, CM: 1)、二?；视王?DAG) (C18:l, C182)、三?；视王?(TAG No 1)、1，2-二油?；?sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、亞油酸(C18:順式[9， 12] 2)或磷脂酰膽堿，所有這些化合物的量均降低。
15.權(quán)利要求11所述的方法，其中所述的參考值來(lái)源于(i)已知未患有肝毒性的受試 者或(ii)未與至少一種選自下列的化合物接觸的受試者棉隆、二甲基甲酰胺、四氫呋喃、 醋酸環(huán)丙孕酮、四氫呋喃、醋酸環(huán)丙孕酮、毒殺芬或?qū)σ阴０被印?br> 16.權(quán)利要求11所述的方法，其中所述的參考值為對(duì)一群受試者中的分析物的計(jì)算的 參考值。
17.權(quán)利要求15或權(quán)利要求16所述的方法，其中測(cè)試樣品中與參考值基本上相同的分 析物的量指示物質(zhì)能夠治療肝毒性。
18.權(quán)利要求1-21中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述的肝毒性包括至少一種選自下列 的病癥或疾病肝細(xì)胞壞死、肝炎、脂肪變性、肝硬化、磷脂質(zhì)病、膽汁淤積、膽管炎、肝靜脈 血栓形成、肝腫瘤。
19.權(quán)利要求1-18中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述的測(cè)定分析物組包括質(zhì)譜法 (MS)。
20.權(quán)利要求19所述的方法，其中所述的質(zhì)譜法為液相色譜(LC)-MS或氣相色譜 (GC)-MS0
21.權(quán)利要求1-20中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述的樣品為所述受試者的體液樣
22.權(quán)利要求21所述的方法，其中所述的體液為血液。
23.權(quán)利要求1-22中任意一項(xiàng)所述的方法，其中所述的受試者為哺乳動(dòng)物。
24.一種數(shù)據(jù)集，該數(shù)據(jù)集包含至少5種下列分析物4-羥苯基丙酮酸、棕櫚酸 (C16:0)、亞油酸(C18:順式[9，12]2)、花生四烯酸(C20:順式-[5，8，11，14]4)、二十二 碳六烯酸(C22:順式W，7，10，13，16，19]6)、α -生育酚、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷 酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、二十三烷酸(C23:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、 4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(CM: 1)、二十碳三烯酸(C20:3)、3-磷酸甘油、磷脂酰膽 堿(C18:2，C20:4)、神經(jīng)酰胺(dl8:l，CM: 1)、神經(jīng)酰胺(dl8:2，以4:0)、鞘磷脂(dl8:l， C16 0)、1，2- 二油?；?sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、磷脂酰膽堿(C18 0/C22 6)、 亞油酸(C18:順式[9,12]2)U8:lLyso PC或磷脂酰膽堿的特征值和/或至少下列分析物 3-磷酸甘油、輔酶Q9、葡萄糖、甘油、棕櫚酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20: 順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22:順式W，7，10，13，16，19] 6)、膽固醇、磷酸 甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、二十三烷酸(C23:0)、磷 酸酯、山崳酸(C22:0)、4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(CM:1)、14-甲基十六烷酸、二十 碳三烯酸(C20:3)、I擬8x493、5-甲氧基鞘氨醇、赤式-鞘氨醇、蘇氨酸、葡萄糖、神經(jīng)酰胺 (dl8:l，C24:l)、二酰基甘油酯 0八6)((18:1，(18:2)、三?；视王?TAG No 1)、1，2_ 二油 ?；?sn-甘油基-3-磷脂酰基-L-絲氨酸、亞油酸(C18:順式[9，12]2)或磷脂酰膽堿的 特征值。
25.包含權(quán)利要求23所述的數(shù)據(jù)集的數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)。
26.—種系統(tǒng)，其包含(a)與(b)工作上連接的用于比較樣品的代謝產(chǎn)物的特征值的工具(b)權(quán)利要求25所述的數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)。
27.權(quán)利要求沈所述的系統(tǒng)，該系統(tǒng)進(jìn)一步包含用于測(cè)定樣品中分析物的特征值的工具。
28.—種診斷組合物，其包含至少5種下列分析物4-羥苯基丙酮酸、棕櫚酸(C16:0)、 亞油酸(C18:順式[9，12]2)、花生四烯酸(C20:順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸 (C22:順式W，7，10，13，16，19]6)、α -生育酚、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、 十七酸(C17:0)、二十三烷酸(C23:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(C24:l)、二十碳三烯酸(C20:3)、3-磷酸甘油、磷脂酰膽堿(C18:2, C20:4)、神經(jīng)酰胺(dl8:l，CM: 1)、神經(jīng)酰胺(dl8:2，以4:0)、鞘磷脂(dl8:l，C16:0)、l， 2-二油酰基-sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)、亞油酸 (C18:順式[9,12]2)U8:lLyso PC或磷脂酰膽堿和/或至少5種下列分析物3_磷酸甘 油、輔酶Q9、葡萄糖、甘油、棕櫚酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20:順式-[5， 8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22:順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、 二十四烷酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、二十三烷酸(C23:0)、磷酸酯、山崳 酸(C22:0)、4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(CM:1)、14-甲基十六烷酸、二十碳三烯酸 (C20:3), ID28x493,5-甲氧基鞘氨醇、赤式-鞘氨醇、蘇氨酸、葡萄糖、神經(jīng)酰胺(dl8:l, C24:l)、二?；视王?DAG) (C18:l，C18:2)、三酰基甘油酯(TAG No 1)、1，2_ 二油酰 基-sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、亞油酸(C18:順式[9,12] 或磷脂酰膽堿或用 于其測(cè)定的工具。
29.—種診斷設(shè)備，其包含(a)工具，該工具用于測(cè)定至少5種下列分析物4-羥苯基丙酮酸、棕櫚酸(C16:0)、 亞油酸(C18:順式[9，12]2)、花生四烯酸(C20:順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸 (C22:順式W，7，10，13，16，19]6)、α -生育酚、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、 十七酸(C17:0)、二十三烷酸(C23:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、4-羥基二氫 神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(C24:l)、二十碳三烯酸(C20:3)、3-磷酸甘油、磷脂酰膽堿(C18:2, C20:4)、神經(jīng)酰胺(dl8:l，CM: 1)、神經(jīng)酰胺(dl8:2，以4:0)、鞘磷脂(dl8:l，C16:0)、l，2-二油?；?sn-甘油基-3-磷脂酰基-L-絲氨酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)、亞油酸 (C18:順式[9，12] 2)、18: ILyso PC或磷脂酰膽堿的特征值和/或至少5種下列分析物3-磷酸甘油、輔酶Q9、葡萄糖、甘油、棕櫚酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20: 順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22:順式W，7，10，13，16，19] 6)、膽固醇、磷酸 甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、二十三烷酸(C23:0)、磷 酸酯、山崳酸(C22:0)、4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(CM:1)、14-甲基十六烷酸、二十 碳三烯酸(C20:3)、I擬8x493、5-甲氧基鞘氨醇、赤式-鞘氨醇、蘇氨酸、葡萄糖、神經(jīng)酰胺 (dl8:l，C24:l)、二?；视王?0八6)((18:1，(18:2)、三?；视王?TAG No 1)、1，2_ 二油 酰基-sn-甘油基-3-磷脂酰基-L-絲氨酸、亞油酸(C18:順式[9，12]2)或磷脂酰膽堿的 特征值；和(b)基于由(a)中的工具測(cè)定的特征值用來(lái)診斷肝毒性的工具。
30.至少5種下列分析物4-羥苯基丙酮酸、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:順式[9， 12]2)、花生四烯酸(C20:順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22:順式W，7，10， 13，16，19]6)、α-生育酚、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、 二十三烷酸(C23:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng) 酸(C24:l)、二十碳三烯酸(C20:3)、3-磷酸甘油、磷脂酰膽堿(C18:2, C20:4)、神經(jīng)酰胺 (dl8:l，CM: 1)、神經(jīng)酰胺(dl8:2，以4:0)、鞘磷脂(dl8:l，C160)、1，2-二油?；?sn-甘 油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)、亞油酸(C18:順式[9，12] 2)、 18:1 Lyso PC或磷脂酰膽堿和/或至少5種下列分析物3-磷酸甘油、輔酶Q9、葡萄糖、 甘油、棕櫚酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20:順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22:順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七 酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、二十三烷酸(C23:0)、磷酸酯、山崳酸(C22 0)、4_羥基二氫神 經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(C24:1),14-甲基十六烷酸、二十碳三烯酸(C20:3), ID28x493,5-甲氧 基鞘氨醇、赤式-鞘氨醇、蘇氨酸、葡萄糖、神經(jīng)酰胺(dl8:l，CM: 1)、二?；视王?DAG) (C18:1，C18:2)、三酰基甘油酯(TAG No 1)、1，2-二油?；?sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲 氨酸、亞油酸(C18:順式[9,12] 或磷脂酰膽堿在制備用來(lái)診斷肝毒性的診斷設(shè)備或組合 物中的用途。
31.用來(lái)測(cè)定至少5種下列分析物4-羥苯基丙酮酸、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:順 式[9，12]2)、花生四烯酸(C20:順式_[5，8，11，14]4)、二十二碳六烯酸(C22:順式[4，7， 10，13，16，19]6)、α-生育酚、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七酸(C17:0)、 二十三烷酸(C23:0)、肌醇-2-單磷酸酯、山崳酸(C22:0)、4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng) 酸(C24:l)、二十碳三烯酸(C20:3)、3-磷酸甘油、磷脂酰膽堿(C18:2, C20:4)、神經(jīng)酰胺 (dl8:l，CM: 1)、神經(jīng)酰胺(dl8:2，以4:0)、鞘磷脂(dl8:l，C160)、1，2-二油?；?sn-甘 油基-3-磷脂酰基-L-絲氨酸、磷脂酰膽堿(C18:0/C22:6)、亞油酸(C18:順式[9，12]2)、 18:1 Lyso PC或磷脂酰膽堿和/或至少5種下列分析物3-磷酸甘油、輔酶Q9、葡萄糖、 甘油、棕櫚酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)、花生四烯酸(C20:順式-[5，8，11，14]4)、二十二碳 六烯酸(C22:順式W，7，10，13，16，19]6)、膽固醇、磷酸甘油酯、二十四烷酸(以4:0)、十七 酸(C17:0)、花生酸(C20:0)、二十三烷酸(C23:0)、磷酸酯、山崳酸(C22 0)、4_羥基二氫神 經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酸(C24:1),14-甲基十六烷酸、二十碳三烯酸(C20:3), ID28x493,5-甲氧 基鞘氨醇、赤式-鞘氨醇、蘇氨酸、葡萄糖、神經(jīng)酰胺(dl8:l，CM: 1)、二?；视王?DAG) (C18:1，C18:2)、三?；视王?TAG No 1)、1，2-二油?；?sn-甘油基-3-磷脂酰基-L-絲 氨酸、亞油酸(C18:順式[9,12] 或磷脂酰膽堿的工具在制備用來(lái)診斷肝毒性的診斷設(shè)備 或組合物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及化合物風(fēng)險(xiǎn)分級(jí)的毒理學(xué)評(píng)估領(lǐng)域。具體來(lái)說(shuō)，本發(fā)明涉及診斷肝毒性的方法。其還涉及測(cè)定化合物能否在受試者中誘導(dǎo)所述肝毒性的方法和鑒別用來(lái)治療肝毒性的藥物的方法。而且，本發(fā)明涉及包含至少5種代謝產(chǎn)物的特征值的數(shù)據(jù)集、包含所述數(shù)據(jù)集的數(shù)據(jù)存儲(chǔ)介質(zhì)以及用于診斷肝毒性的系統(tǒng)和設(shè)備。最后，本發(fā)明還涉及代謝產(chǎn)物組或用于其測(cè)定的工具在制備用來(lái)診斷受試者肝毒性的診斷設(shè)備或組合物中的用途。對(duì)于每種性別，公開了不同的代謝組模式，即不同組別的分析物。肝毒性標(biāo)記物主要選自游離脂肪酸，但還包括各種磷脂酰膽堿、羥苯基丙酮酸、α-生育酚、膽固醇、肌醇-2-單磷酸酯、4-羥基二氫神經(jīng)鞘氨醇、神經(jīng)酰胺(d18:1，C24:1)、神經(jīng)酰胺(d18:2，C24:0)、鞘磷脂(d18:1，C16:0)、1，2-二油?；?sn-甘油基-3-磷脂?；?L-絲氨酸、18:1Lyso磷脂酰膽堿、輔酶Q9、葡萄糖、甘油、磷酸甘油酯、磷酸酯、5-甲氧基鞘氨醇、赤式-鞘氨醇、蘇氨酸、二酰基甘油酯和三?；视王?。
文檔編號(hào)G01N33/82GK102105792SQ200980129314
公開日2011年6月22日 申請(qǐng)日期2009年5月26日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月28日
發(fā)明者A·普奧考汀, 拉文茲韋 B·范, E·法比安, E·萊博爾德, 巴勒莫 庫(kù)尼亞 G·科埃略, H·坎普, J·C·威爾莫, M·M·赫羅爾德, R·洛塞, T·B·沃克, V·施特勞斯, W·梅勒特 申請(qǐng)人:巴斯夫歐洲公司