專利名稱：蘇丹紅的比色測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及食品中有毒有害物質(zhì)殘留的測定方法，具體涉及用于測定食品中蘇丹 紅的比色測定方法。
背景技術(shù)：
蘇丹紅主要包括I、II、III和IV四種類型，是一類偶氮苯基萘酚化合物，都是工業(yè) 染料。研究發(fā)現(xiàn)，蘇丹紅會導(dǎo)致動物患癌，在人類肝細(xì)胞研究中也顯現(xiàn)出可能致癌的特性。 世界各國都禁止將蘇丹紅作為食品添加劑。國內(nèi)企業(yè)在飼用色素使用方面出于商業(yè)利益， 濫用色素等現(xiàn)象較為普遍。一些養(yǎng)殖戶對蘇丹紅的潛在危害認(rèn)識不深，比如在家禽飼料中 添加蘇丹紅以達(dá)到禽蛋紅心效果，其安全隱患不容忽視。目前，測定蘇丹紅的方法主要有高效液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法、高效液相色 譜串聯(lián)質(zhì)譜法、薄層色譜法等，這些方法檢測儀器要求高，檢測程序復(fù)雜，檢測費(fèi)用昂貴，很 難在基層檢測站普及和推廣。為了能更方便的測定雞蛋中蘇丹紅殘留，我們認(rèn)為建立一種 快速、準(zhǔn)確、靈敏、低成本，并能夠適應(yīng)現(xiàn)場快速檢測的方法很有必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對上述缺陷，目的在于提供一種靈敏度高，特異性強(qiáng)，操作簡單，檢測費(fèi) 用低，檢測周期短，適用于食品中蘇丹紅的快速測定方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是本發(fā)明先確定蘇丹紅I IV標(biāo)準(zhǔn)溶液的最大吸收波長，接 著將各標(biāo)準(zhǔn)溶液配置成不同濃度的溶液，然后往其內(nèi)滴加濃硫酸，各溶液在對應(yīng)的最大吸 收波長下測定其吸光度，建立蘇丹紅標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度和溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)方程；同時(shí)將待測 樣品溶液內(nèi)滴加濃硫酸，確定其內(nèi)含有何種類型蘇丹紅，然后在對應(yīng)的最大吸收波長下測 定出樣品溶液的吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方程計(jì)算出樣品溶液中的蘇丹紅濃度，進(jìn)而通過蘇丹紅 濃度和樣品質(zhì)量的關(guān)系測算出蘇丹紅殘留量。進(jìn)一步的，本發(fā)明包括以下步驟1)配置標(biāo)準(zhǔn)溶液稱取等量的蘇丹紅I IV分 別放入1、2、3、4燒杯內(nèi)，加入等量的乙腈超聲溶解后，移入容量瓶1、2、3、4中，定容，配置成 標(biāo)準(zhǔn)溶液；2)確定最大吸收波長用紫外線掃描測定蘇丹紅I IV標(biāo)準(zhǔn)溶液，確定各標(biāo)準(zhǔn) 溶液的最大吸收波長，即每瓶標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度最大時(shí)波長；幻建立標(biāo)準(zhǔn)方程拿取容量瓶 1，從容量瓶中移取不同量的標(biāo)準(zhǔn)溶液至1、2、……、111試管中，各試管中加入乙腈定容，配 置成蘇丹紅I濃度不同的溶液，然后分別往各試管中等量加入濃硫酸，接著在根據(jù)步驟2) 中對應(yīng)確定的最大吸收波長的環(huán)境下對1、2、……、m試管進(jìn)行檢測，確定各試管蘇丹紅I 溶液的吸光度，根據(jù)各檢測數(shù)據(jù)，以蘇丹紅I溶液濃度和吸光度為變量，建立兩者的標(biāo)準(zhǔn)方 程；4)依次對容量瓶2、3、4按照幻步驟進(jìn)行測定，建立各自的標(biāo)準(zhǔn)方程力)樣品測定稱 取和步驟1)蘇丹紅等量的樣品，經(jīng)過乙腈超聲溶解，經(jīng)過振蕩、離心、濾膜過濾后將蘇丹紅 溶液放入試管中，用乙腈定容到和步驟1)的標(biāo)準(zhǔn)溶液等容，然后加入和步驟幻等量的濃硫 酸，確定樣品中所含蘇丹紅的種類，然后在對應(yīng)的最大吸收波長下測定樣品的吸光度，將吸光度代入對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)方程，計(jì)算出樣品溶液的蘇丹紅濃度，最后代入方程Y = 2. h/m計(jì)算 出樣品中的蘇丹紅含量，其中Y 樣品中蘇丹紅含量，χ 樣品溶液蘇丹紅濃度，m 樣品質(zhì)量。本發(fā)明采用比色法測定食品中蘇丹紅的殘留量，比色法是以生成有色化合物的顯 色反應(yīng)為基礎(chǔ)，通過比較或測量有色物質(zhì)溶液顏色深度來確定待測組分含量的方法。比色 分析對顯色反應(yīng)的基本要求是反應(yīng)具有較高的靈敏度和選擇性，反應(yīng)生成的有色化合物 的組成恒定且較穩(wěn)定，它和顯色劑的顏色差別較大。選擇適當(dāng)?shù)娘@色反應(yīng)和控制好適宜的 反應(yīng)條件，是比色分析的關(guān)鍵。在蘇丹紅標(biāo)準(zhǔn)溶液中添加適量的濃硫酸可以和蘇丹紅發(fā)生 磺化反應(yīng)，磺酸基團(tuán)可以取代羥基鄰位的氫，苯環(huán)上偶氮基鄰位或?qū)ξ坏臍洌埠苋菀着c酚 羥基發(fā)生反應(yīng)，這都可以使蘇丹紅的顏色發(fā)生變化，因此，可以利用這一性質(zhì)，使蘇丹紅在 測定時(shí)的吸光度發(fā)生變化，從而使檢測的靈敏度增大，增加檢測的準(zhǔn)確度。本發(fā)明建立了雞蛋中蘇丹紅殘留的比色測定方法。本方法建立了雞蛋樣品的前處 理?xiàng)l件，通過全波長掃描確定了蘇丹紅I IV的最大吸收波長及標(biāo)準(zhǔn)溶液的線性范圍和標(biāo) 準(zhǔn)方程。本方法基于蘇丹紅能夠與濃硫酸發(fā)生磺化反應(yīng)，加深或改變蘇丹紅溶液顏色的特 性，建立的雞蛋中蘇丹紅殘留的測定方法，靈敏度高，特異性強(qiáng)，操作簡單，檢測費(fèi)用低，檢 測周期短，適用于雞蛋等中蘇丹紅的快速測定。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明按照下列步驟進(jìn)行一、按以下方法配置標(biāo)準(zhǔn)溶液、制定標(biāo)準(zhǔn)方程(1)按以下方法配置標(biāo)準(zhǔn)溶液用分析天平分別準(zhǔn)確稱取0. Olg蘇丹紅I IV放入小燒杯中，每個(gè)燒杯中加入約 80mL乙腈超聲溶解lOmin，移入IOOmL容量瓶中，定容，配制成100 μ g/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。(2)按以下方法確定最大吸收波長以乙腈為參比溶液，用分光光度計(jì)分別設(shè)定波長范圍為300 500nm，掃描測定蘇 丹紅I IV標(biāo)準(zhǔn)溶液的最大吸收波長，吸光度最大時(shí)的波長即為蘇丹紅的最大吸收波長。表1蘇丹紅I IV最大吸收波長
權(quán)利要求
1.蘇丹紅的比色測定方法，其特征在于，確定蘇丹紅I IV標(biāo)準(zhǔn)溶液的最大吸收波長， 接著將各標(biāo)準(zhǔn)溶液配置成不同濃度的溶液，然后往其內(nèi)滴加濃硫酸，各溶液在對應(yīng)的最大 吸收波長下測定其吸光度，建立蘇丹紅標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度和溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)方程；同時(shí)將待 測樣品溶液內(nèi)滴加濃硫酸，確定其內(nèi)含有何種類型蘇丹紅，然后在對應(yīng)的最大吸收波長下 測定出樣品溶液的吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方程計(jì)算出樣品溶液中的蘇丹紅濃度，進(jìn)而通過蘇丹 紅濃度和樣品質(zhì)量的關(guān)系測算出蘇丹紅殘留量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘇丹紅的比色測定方法，其特征在于，包括以下步驟1)配置 標(biāo)準(zhǔn)溶液稱取等量的蘇丹紅I IV分別放入1、2、3、4燒杯內(nèi)，加入等量的乙腈超聲溶解 后，移入容量瓶1、2、3、4中，定容，配置成標(biāo)準(zhǔn)溶液；2)確定最大吸收波長用紫外線掃描測 定蘇丹紅I IV標(biāo)準(zhǔn)溶液，確定各標(biāo)準(zhǔn)溶液的最大吸收波長，即每瓶標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度最大 時(shí)波長；幻建立標(biāo)準(zhǔn)方程拿取容量瓶1，從容量瓶中移取不同量的標(biāo)準(zhǔn)溶液至1、2、……、 m試管中，各試管中加入乙腈定容，配置成蘇丹紅I濃度不同的溶液，然后分別往各試管中 等量加入濃硫酸，接著在根據(jù)步驟幻中對應(yīng)確定的最大吸收波長的環(huán)境下對1、2、……、 m試管進(jìn)行檢測，確定各試管蘇丹紅I溶液的吸光度，根據(jù)各檢測數(shù)據(jù)，以蘇丹紅I溶液濃 度和吸光度為變量，建立兩者的標(biāo)準(zhǔn)方程；4)依次對容量瓶2、3、4按照幻步驟進(jìn)行測定， 建立各自的標(biāo)準(zhǔn)方程力)樣品測定稱取和步驟1)蘇丹紅等量的樣品，經(jīng)過乙腈超聲溶解， 經(jīng)過振蕩、離心、濾膜過濾后將蘇丹紅溶液放入試管中，用乙腈定容到和步驟1)的標(biāo)準(zhǔn)溶 液等容，然后加入和步驟幻等量的濃硫酸，確定樣品中所含蘇丹紅的種類，然后在對應(yīng)的 最大吸收波長下測定樣品的吸光度，將吸光度代入對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)方程，計(jì)算出樣品溶液的蘇 丹紅濃度，最后代入方程Y = 2.切/m計(jì)算出樣品中的蘇丹紅含量，其中Y 樣品中蘇丹紅含 量，χ 樣品溶液蘇丹紅濃度，m 樣品質(zhì)量。
全文摘要
蘇丹紅的比色測定方法。本發(fā)明先確定蘇丹紅I～I(xiàn)V標(biāo)準(zhǔn)溶液的最大吸收波長，接著將各標(biāo)準(zhǔn)溶液配置成不同濃度的溶液，然后往其內(nèi)滴加濃硫酸，各溶液在對應(yīng)的最大吸收波長下測定其吸光度，建立蘇丹紅標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度和溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)方程；同時(shí)將待測樣品溶液內(nèi)滴加濃硫酸，確定其內(nèi)含有何種類型蘇丹紅，然后在對應(yīng)的最大吸收波長下測定出樣品溶液的吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方程計(jì)算出樣品溶液中的蘇丹紅濃度，進(jìn)而通過蘇丹紅濃度和樣品質(zhì)量的關(guān)系測算出蘇丹紅殘留量。本發(fā)明提供的方法靈敏度高，特異性強(qiáng)，操作簡單，檢測費(fèi)用低，檢測周期短，適用于雞蛋等中蘇丹紅的快速測定。
文檔編號G01N21/78GK102121904SQ20101001729
公開日2011年7月13日 申請日期2010年1月8日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月8日
發(fā)明者吳敏, 唐修君, 唐夢君, 張小燕, 施祖灝, 朱云芬, 章雙杰, 葛慶聯(lián), 蒲俊華, 陳寬維, 高玉時(shí) 申請人:江蘇省家禽科學(xué)研究所, 葛慶聯(lián), 高玉時(shí)