專利名稱:全自動(dòng)五分群血液分析儀光學(xué)系統(tǒng)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明屬于體外診斷設(shè)備的光學(xué)系統(tǒng),涉及全自動(dòng)五分群血液分析儀。
背景技術(shù):
當(dāng)前,五分群血液分析儀將白細(xì)胞分成五分群的主要原理有以下幾種 1、主要采用VCS技術(shù)這種技術(shù)集合三種測(cè)定方法于一體,同時(shí)對(duì)一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行多參數(shù)分析的方法。其 中V代表體積測(cè)量,即傳統(tǒng)的電阻法原理,可將體積大小差異顯著的淋巴細(xì)胞和粒細(xì)胞分 開(kāi);C代表高頻電導(dǎo)性,該技術(shù)可直接測(cè)量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)間的差異,了解細(xì)胞內(nèi)部核漿比例 和細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成分,可辨別細(xì)胞體積相同而內(nèi)部性質(zhì)不同的細(xì)胞,可將體積相近的淋巴細(xì) 胞和嗜堿性細(xì)胞區(qū)分開(kāi),因?yàn)樗麄兊暮速|(zhì)比例明顯不同。S代表激光散射,它可穿透細(xì)胞,探 測(cè)細(xì)胞內(nèi)核分葉狀況和顆粒情況,通過(guò)分析光散射信息對(duì)細(xì)胞內(nèi)顆粒性進(jìn)行分析,細(xì)胞內(nèi) 顆粒粗的光反射強(qiáng),因此可以用于單核細(xì)胞和三種粒細(xì)胞的區(qū)分。通過(guò)綜合處理三個(gè)參數(shù) 的特性,可全面對(duì)白細(xì)胞的各種特征進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)分析,得到五項(xiàng)白細(xì)胞分類結(jié)果。2、采用阻抗、激光散射和熒光染色技術(shù)其中直流電阻抗法(DC)用于測(cè)量細(xì)胞體積大小;激光散射產(chǎn)生的前向散射光、側(cè) 向散射光可用于探測(cè)白細(xì)胞體積大小、細(xì)胞內(nèi)含物的情況(細(xì)胞核以及顆粒情況);側(cè)向熒 光則可以反應(yīng)細(xì)胞內(nèi)脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的含量。特有的嗜酸性粒細(xì)胞 檢測(cè)特殊溶血?jiǎng)┛蓪⒊耸人峒?xì)胞以外的所有細(xì)胞溶解或萎縮,含有完整嗜酸細(xì)胞的液體 通過(guò)小孔可以按照電阻法計(jì)數(shù)技術(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)。在嗜堿細(xì)胞通道中,使用特殊溶血?jiǎng)┛蓪⒊?了嗜堿細(xì)胞以外的所有細(xì)胞溶解或萎縮,含有完整嗜堿細(xì)胞的液體通過(guò)小孔可以按照阻抗 法計(jì)數(shù)技術(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù),幼稚細(xì)胞檢查通道(IMI)可以根據(jù)幼稚細(xì)胞膜比成熟細(xì)胞膜表面含 有脂質(zhì)較少的現(xiàn)象,在細(xì)胞稀釋懸液中加入硫化氨基酸,由于占位不同,結(jié)合在幼稚細(xì)胞表 現(xiàn)氨基酸較多,對(duì)溶血?jiǎng)┯械挚棺饔?,?dāng)加人溶血?jiǎng)┖蟪墒旒?xì)胞易被溶解,而幼稚細(xì)胞不易 被破壞,可通過(guò)電阻法檢測(cè)出來(lái)。綜合各個(gè)測(cè)量方法,得到白細(xì)胞五分群的圖形和數(shù)據(jù)。3、激光散射和細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)儀器在白細(xì)胞分類上采用了白細(xì)胞過(guò)氧化酶測(cè)定通道和嗜堿粒細(xì)胞測(cè)定通道。根 據(jù)細(xì)胞化學(xué)染色的特征進(jìn)行白細(xì)胞分類。各類白細(xì)胞對(duì)過(guò)氧化物酶的反應(yīng)是這樣的早期 的原始粒細(xì)胞為陰性,原始粒細(xì)胞以下各階段都含有過(guò)氧化物酶,并隨著細(xì)胞的成熟而增 強(qiáng)。不同的粒細(xì)胞過(guò)氧化物酶含量不同,嗜酸性粒細(xì)胞具有最強(qiáng)的過(guò)氧化物酶,中性粒細(xì)胞 含有較強(qiáng)的過(guò)氧化物酶,嗜堿粒細(xì)胞不含此酶。單核細(xì)胞除早期原始階段外,均含有較弱的 過(guò)氧化物酶。淋巴細(xì)胞不含過(guò)氧化物酶。根據(jù)激光法散射光強(qiáng)度進(jìn)行的細(xì)胞體積測(cè)量同時(shí) 也獲得了細(xì)胞大小的信息,在白細(xì)胞過(guò)氧化物酶散點(diǎn)圖上,X軸表示過(guò)氧化物酶強(qiáng)度,過(guò)氧 化物酶強(qiáng)陽(yáng)性細(xì)胞位于右端;Y軸表示散射光強(qiáng)度信號(hào),位于上方的表示散射光信號(hào)強(qiáng),細(xì) 胞體積大。除了嗜堿細(xì)胞外每個(gè)類型的細(xì)胞根據(jù)它們的特點(diǎn)被記錄于特定的位置,在設(shè)定 的門的范圍內(nèi)形成分類。嗜堿細(xì)胞則是通過(guò)嗜堿細(xì)胞和分葉通道測(cè)定的,因淋巴與嗜堿細(xì)胞都無(wú)過(guò)氧化物酶,因此需要通過(guò)嗜堿細(xì)胞通道,特殊嗜堿細(xì)胞試劑可將除嗜堿細(xì)胞以外 的其他白細(xì)胞膜破壞,胞漿溢出,僅剩裸核。被激光照射后仍然保持正常體積的嗜堿細(xì)胞位 于Y軸上方,體積小的其他裸核白細(xì)胞分布在下方。4、多角度偏振光散射法(MAPSS)技術(shù)該技術(shù)的基本原理是標(biāo)本在水動(dòng)力聚焦系統(tǒng)的作用下進(jìn)入檢測(cè)部,在激光束的照 射下,細(xì)胞在多個(gè)角度部產(chǎn)生散射光。儀器特別設(shè)置了四個(gè)角度來(lái)收集散射光的信號(hào)。0度 為前角散射,用于粗略判斷細(xì)胞體積大小;10度為狹角散射,用于檢測(cè)細(xì)胞結(jié)構(gòu)及其內(nèi)部 復(fù)雜性的指標(biāo);90度為垂直光散射,用于對(duì)細(xì)胞內(nèi)部顆粒及細(xì)胞核分葉情況的分析;90度 偏振光散射基于顆粒可以將垂直角度的激光消偏振的特性,將嗜酸性細(xì)胞從中性粒細(xì)胞和 其他細(xì)胞中分離出來(lái),根據(jù)散射光的角度和位置,儀器內(nèi)部的四個(gè)檢測(cè)器可以接收到相應(yīng) 的信號(hào),由儀器內(nèi)部的微處理器進(jìn)行分析處理。目前,市場(chǎng)上幾乎所有的全自動(dòng)五分群血液分析儀均是采用了上述四種技術(shù)。由 于這四種技術(shù)存在結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜或采用了熒光染色或采用了雙鞘流技術(shù)或是綜合了這幾 種方法,造成了目前國(guó)內(nèi)五分群血液分析儀市場(chǎng)上仍由國(guó)外儀器占主導(dǎo)的現(xiàn)象
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種適用于全自動(dòng)五分群血液分析儀的光學(xué)系統(tǒng),提出了將DC信號(hào)、 激光前向散射信號(hào)和激光后向散射信號(hào)相結(jié)合的方式作為判別白細(xì)胞類別的一種方法,以 克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題。本發(fā)明由紅光激光器[R]、反射透鏡[C]、[D]、[E]、接收鏡筒[Ml]、[M2]、準(zhǔn)直鏡 筒[Li]、[L2]、流式盒[P]、光電探測(cè)器[Ql]、[Q2]組成。接收鏡筒[Ml]、[M2]中間放置流 式盒[P],三者光軸同軸,反射透鏡[C]呈45°角置于接收鏡筒[Ml]的外側(cè),其入射光軸與 接收鏡筒[Ml]同軸;反射透鏡[D]、[E]呈45°角依次置于接收鏡筒[M2]外側(cè),兩者的反 射光軸與[M2]同軸;準(zhǔn)直鏡筒[Li]置于反射透鏡[C]的反射光軸線上,其后為光電探測(cè)器 [Q1];準(zhǔn)直鏡筒[L2]置于反射鏡[D]的反射光軸線上,其后為光電探測(cè)器[Q2];紅光激光 器[R]置于準(zhǔn)直鏡筒[L2]外側(cè),其光軸線與反射透鏡[E]的入射光軸同軸,所有的組件安 裝在底板[F]上。本發(fā)明的工作原理是調(diào)節(jié)紅光激光器的調(diào)整架,把紅光圓形光斑中心對(duì)齊整個(gè) 微孔中心,并能均勻的照射整個(gè)庫(kù)爾特微孔。當(dāng)一個(gè)白細(xì)胞通過(guò)庫(kù)爾特微孔時(shí),根據(jù)庫(kù)爾特 原理,會(huì)產(chǎn)生一個(gè)DC脈沖信號(hào)。幾乎與此同時(shí),前向照射的激光光強(qiáng)與沒(méi)有白細(xì)胞通過(guò)時(shí) 相比會(huì)發(fā)生一個(gè)微弱的變化,即前向照射激光強(qiáng)度會(huì)相對(duì)變?nèi)?,這個(gè)變?nèi)醯墓馍⑸湫盘?hào)經(jīng) 過(guò)接收鏡筒[Ml]后,由反射鏡[C]將散射信號(hào)射入準(zhǔn)直鏡筒[Li]后,最終照射在光電探測(cè) 器[Q1]上,而光電探測(cè)器則產(chǎn)生一個(gè)微弱的電流變化,這個(gè)微弱電流變化通過(guò)放大電路后 最終轉(zhuǎn)化成為一個(gè)脈沖,稱為前向光散射脈沖信號(hào)。同時(shí),在白細(xì)胞通過(guò)庫(kù)爾特微孔時(shí),反 射的激光光強(qiáng)與沒(méi)有白細(xì)胞通過(guò)時(shí)相比會(huì)發(fā)生一個(gè)微弱的變化,即反射的激光強(qiáng)度會(huì)相對(duì) 變強(qiáng),這個(gè)變強(qiáng)的光散射信號(hào)經(jīng)過(guò)接收鏡筒[M2]后,由反射鏡[D]將散射信號(hào)射入準(zhǔn)直鏡 筒[L2]后,最終照射在光電探測(cè)器[Q2]上,而光電探測(cè)器則產(chǎn)生一個(gè)微弱的電流變化,這 個(gè)微弱電流變化通過(guò)放大電路后最終轉(zhuǎn)化成為一個(gè)脈沖,稱為后向光散射脈沖信號(hào)。因此, 結(jié)合DC脈沖、前向光散射脈沖信號(hào)和后向光散射脈沖信號(hào)對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行五分群。
其調(diào)校過(guò)程是首先光學(xué)系統(tǒng)通過(guò)氦氖激光器和機(jī)械小孔將光學(xué)系統(tǒng)的光路準(zhǔn)直 在一條直線上。然后將流式盒中的庫(kù)爾特微孔、準(zhǔn)直鏡筒和接收鏡筒裝入到調(diào)好光路的光 學(xué)系統(tǒng)上。通過(guò)調(diào)整五維調(diào)整架來(lái)調(diào)整庫(kù)爾特微孔,使其通過(guò)接收鏡筒成放大7倍的像(前 向后向都是一樣的),像的最清晰點(diǎn)是經(jīng)過(guò)反射后反射到準(zhǔn)直鏡筒的機(jī)械小孔中的,即機(jī)械 小孔的位置是經(jīng)接收鏡筒系統(tǒng)后光線的焦點(diǎn)位置。因此在CCD上看到的只能是與機(jī)械小孔 等大的庫(kù)爾特微孔像,而庫(kù)爾特微孔外的像則被機(jī)械小孔給擋住。此清晰的像經(jīng)過(guò)準(zhǔn)直鏡 筒系統(tǒng)后成平行信號(hào)到CXD的透鏡面,透鏡面在將信號(hào)匯聚成焦點(diǎn)到CXD感光面上在電腦 顯不。光學(xué)系統(tǒng)的光源由激光器發(fā)出光源,經(jīng)過(guò)反射鏡進(jìn)入接收鏡筒將激光匯聚成一個(gè) 小光斑照射到流式盒的庫(kù)爾特微孔中,通過(guò)微孔的激光進(jìn)入接收鏡筒,通過(guò)接收鏡筒的激 光再由反射鏡反射,照射到準(zhǔn)直鏡筒,然后照射到光電探測(cè)器。本發(fā)明的有益效果是流式盒工藝結(jié)構(gòu)相對(duì)簡(jiǎn)單、無(wú)鞘流液、無(wú)熒光染色、無(wú)其它特 殊試劑。
圖1為本發(fā)明的光路示意圖。其中R為激光器;C、D、E為反射透鏡;M1、M2為接收 鏡筒組件;L1、L2為準(zhǔn)直鏡筒組件;P為流式盒調(diào)整組件;Q1、Q2為光電探測(cè)器。圖2為本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的結(jié)構(gòu)圖。其中R為紅光激光器;C、D、E為反射透鏡; Ml、M2為接收鏡筒組件;Li、L2為準(zhǔn)直鏡筒組件;P為流式盒調(diào)整組件;Ql、Q2為光電探測(cè) 器;F為底板。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明將結(jié)合附圖,通過(guò)以下實(shí)施例作進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例。本發(fā)明由紅光激光器R、反射透鏡C、D、E、接收鏡筒Ml、M2、準(zhǔn)直鏡筒Li、L2、流式 盒P、光電探測(cè)器Ql、Q2組成。接收鏡筒Ml、M2中間放置流式盒P,三者光軸同軸,反射透 鏡C呈45°角置于接收鏡筒Ml的外側(cè),其入射光軸與接收鏡筒Ml同軸;反射透鏡D、E呈 45°角依次置于接收鏡筒M2外側(cè),兩者的反射光軸與M2同軸;準(zhǔn)直鏡筒Ll置于反射透鏡 C的反射光軸線上,其后為光電探測(cè)器Ql ;準(zhǔn)直鏡筒L2置于反射鏡D的反射光軸線上,其后 為光電探測(cè)器Q2 ;紅光激光器R置于準(zhǔn)直鏡筒L2外側(cè),其光軸線與反射透鏡E的入射光軸 一同軸,所有的組件安裝在底板F上。流式盒中為一個(gè)直徑為0. 08mm的紅寶石孔(庫(kù)爾特微孔)。本發(fā)明的工作原理是調(diào)節(jié)紅光激光器的調(diào)整架,把紅光圓形光斑中心對(duì)齊整個(gè) 微孔中心,并能均勻的照射整個(gè)庫(kù)爾特微孔。當(dāng)一個(gè)白細(xì)胞通過(guò)庫(kù)爾特微孔時(shí),根據(jù)庫(kù)爾特 原理,會(huì)產(chǎn)生一個(gè)DC脈沖信號(hào)。幾乎與此同時(shí),前向照射的激光光強(qiáng)與沒(méi)有白細(xì)胞通過(guò)時(shí) 相比會(huì)發(fā)生一個(gè)微弱的變化,即前向照射激光強(qiáng)度會(huì)相對(duì)變?nèi)?,這個(gè)變?nèi)醯墓馍⑸湫盘?hào)經(jīng) 過(guò)接收鏡筒Ml后,由反射鏡C將散射信號(hào)射入準(zhǔn)直鏡筒Ll后,最終照射在光電探測(cè)器Ql 上,而光電探測(cè)器則產(chǎn)生一個(gè)微弱的電流變化,這個(gè)微弱電流變化通過(guò)放大電路后最終轉(zhuǎn) 化成為一個(gè)脈沖,稱為前向光散射脈沖信號(hào)。同時(shí),在白細(xì)胞通過(guò)庫(kù)爾特微孔時(shí),反射的激光光強(qiáng)與沒(méi)有白細(xì)胞通過(guò)時(shí)相比會(huì)發(fā)生一個(gè)微弱的變化,即反射的激光強(qiáng)度會(huì)相對(duì)變強(qiáng), 這個(gè)變強(qiáng)的光散射信號(hào)經(jīng)過(guò)接收鏡筒M2后,由反射鏡D將散射信號(hào)射入準(zhǔn)直鏡筒L2后,最 終照射在光電探測(cè)器Q2上,而光電探測(cè)器則產(chǎn)生一個(gè)微弱的電流變化,這個(gè)微弱電流變化 通過(guò)放大電路后最終轉(zhuǎn)化成為一個(gè)脈沖,稱為后向光散射脈沖信號(hào)。因此,結(jié)合DC脈沖、前 向光散射脈沖信號(hào)和后向光散射脈沖信號(hào)對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行五分群。 以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例,并非因此限制本發(fā)明的專利,凡是利用本發(fā)明說(shuō)明書(shū)及附圖內(nèi)容所作的等效結(jié)構(gòu)或等效流程變換,或直接或間接運(yùn)用在其他相關(guān)領(lǐng) 域,均同理包括在本發(fā)明的專利保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
一種全自動(dòng)五分群血液分析儀光學(xué)系統(tǒng),其特征是由紅光激光器[R]、反射透鏡[C]、[D]、[E]、接收鏡筒[M1]、[M2]、準(zhǔn)直鏡筒[L1]、[L2]、流式盒[P]、光電探測(cè)器[Q1]、[Q2]組成;接收鏡筒[M1]、[M2]中間放置流式盒[P],三者光軸同軸,反射透鏡[C]呈45°角置于接收鏡筒[M1]的外側(cè),其入射光軸與接收鏡筒[M1]同軸;反射透鏡[D]、[E]呈45°角依次置于接收鏡筒[M2]外側(cè),兩者的反射光軸與[M2]同軸;準(zhǔn)直鏡筒[L1]置于反射透鏡[C]的反射光軸線上,其后為光電探測(cè)器[Q1];準(zhǔn)直鏡筒[L2]置于反射鏡[D]的反射光軸線上,其后為光電探測(cè)器[Q2];紅光激光器[R]置于準(zhǔn)直鏡筒[L2]外側(cè),其光軸線與反射透鏡[E]的入射光軸同軸,所有的組件安裝在底板[F]上。
全文摘要
一種全自動(dòng)五分群血液分析儀光學(xué)系統(tǒng),其特征是由紅光激光器、反射透鏡、接收鏡筒、準(zhǔn)直鏡筒、流式盒、光電探測(cè)器組成;接收鏡筒[M1]、[M2]中間放置流式盒[P],三者光軸同軸,反射透鏡[C]呈45°角置于接收鏡筒[M1]的外側(cè),其入射光軸與接收鏡筒[M1]同軸;反射透鏡[D]、[E]呈45°角依次置于接收鏡筒[M2]外側(cè),兩者的反射光軸與[M2]同軸;準(zhǔn)直鏡筒[L1]置于反射透鏡[C]的反射光軸線上,其后為光電探測(cè)器[Q1];準(zhǔn)直鏡筒[L2]置于反射鏡[D]的反射光軸線上,其后為光電探測(cè)器[Q2];紅光激光器[R]置于準(zhǔn)直鏡筒[L2]外側(cè),其光軸線與反射透鏡[E]的入射光軸同軸,所有的組件安裝在底板[F]上。本發(fā)明結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、無(wú)鞘流液、無(wú)熒光染色、無(wú)其它特殊試劑。
文檔編號(hào)G01N21/49GK101819145SQ20101015647
公開(kāi)日2010年9月1日 申請(qǐng)日期2010年4月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月26日
發(fā)明者周良, 廖東升, 王士信, 程文, 聶子坤, 袁俊, 趙雄鋒, 陳濤, 黃凱, 龍偉 申請(qǐng)人:南昌百特生物高新技術(shù)股份有限公司