專利名稱：液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜desi-ms電離方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離方法。
背景技術(shù)：
大氣壓質(zhì)譜電離技術(shù)是近幾年發(fā)展起來的一類新的電離技術(shù)，它允許在大氣壓條件下電離樣品且樣品預(yù)處理簡單，包括解析電噴霧電離DESI、直接實(shí)時(shí)電離DART、解析大氣壓化學(xué)電離DAPCI等，解析電噴霧電離DESI是其中一種有代表性的電離方法，通常解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS用于分析固體樣品，可用于極性化合物樣品和生物樣品包括生物大分子的檢測和結(jié)構(gòu)分析。文獻(xiàn)Direct Analysis of Liquid Samples by Desorption Electrospray Ioniz ation-MassSpectrometry(DESI-MS)(Zhixin Miao and Hao Chen, Journal of the America Society for MassSpectrometry. 2009,20,10-19)首次報(bào)道了解析電噴霧質(zhì)譜 DESI-MS 直接用于分析液體樣品，這種液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS較傳統(tǒng)的固體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS分析的質(zhì)量范圍更寬，不需要色譜預(yù)分離和處理，減少了樣品干燥的步驟， 而且有較好的鹽容忍度；和傳統(tǒng)的電噴霧質(zhì)譜ESI-MS比較，背景氧化/還原更弱。但這種液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS分析極性化合物樣品和生物樣品溶液時(shí)的接口仍然需要將液體樣品從毛細(xì)管流出到一面板上，然后采用高速電噴霧電離ESSI探針吹掃，分析組分被吹掃反彈、然后被解析或電離并導(dǎo)入質(zhì)譜分析，存在位置難以調(diào)節(jié)、電離效率較低的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是現(xiàn)有液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜電離方法需要將液體樣品置于一面板，樣品被高速電噴霧電離ESSI探針吹掃反彈的方式解析或電離，存在位置難以調(diào)節(jié)、電離效率較低的問題，提供一種新的液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離方法。該方法具有裝置簡單、操作方便、電離效率高、抗鹽抑制效應(yīng)好的優(yōu)點(diǎn)。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下一種液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離方法，由高速電噴霧電離ESSI探針(1)產(chǎn)生的高速攜帶電荷的噴霧溶劑將輸送液體樣品的毛細(xì)管(10)樣品出口流出的液體樣品直接解析或電離后進(jìn)入質(zhì)譜檢測器(11)檢測。上述技術(shù)方案中，高速電噴霧電離ESSI探針的高壓電源(4)電壓為士(3000 5000)伏，高速噴霧氣體為氮?dú)?，壓力?10 200Psi。探針棒(7)的溶劑出口和輸送液體樣品的毛細(xì)管(10)樣品出口以及質(zhì)譜檢測器(11)的進(jìn)樣口(12)位于同一直線上。本發(fā)明的液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離方法分析極性化合物樣品和生物樣品溶液時(shí)，由高速電噴霧電離ESSI探針(1)的高速攜帶電荷的噴霧溶劑直接解析或電離從輸送液體樣品的毛細(xì)管(10)流出的液體樣品，從而將液體樣品中需要分析的組分如蛋白質(zhì)等解析或者電離產(chǎn)生離子，將其轉(zhuǎn)移到氣相形成氣相干離子，并導(dǎo)入質(zhì)譜檢測器(11)進(jìn)行分析，無須現(xiàn)有液體樣品解析電噴霧DESI電離裝置所用的反射面板，提高了電離效率，而且位置容易調(diào)節(jié)。由于高速電噴霧電離ESSI探針⑴和液體樣品輸送泵(9)輸送的液體樣品分離，可以采用不同的溶劑體系，高速電噴霧電離ESSI探針(1)的溶劑可以對液體樣品組分具有萃取和選擇的作用，因而具有更高的鹽容忍度。液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離裝置可以方便地和其它樣品分離或前處理裝置如高效液相色譜HPLC、毛細(xì)管電泳CE、電化學(xué)電池EC等聯(lián)用。采用本發(fā)明液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離方法分析20 μ M的蛋白質(zhì) β-Iactoglobulin Α(分子量MW 18. 4kDa)樣品，能夠得到+11 +18價(jià)的系列準(zhǔn)分子離子峰，+18價(jià)離子峰的信號(hào)強(qiáng)度達(dá)到8. OX IO4Cps ；分析1. OmM的多巴胺Dopamine (分子量麗153Da)含有IOmM氯化鈉鹽的水溶液樣品，高速電噴霧電離ESSI探針的溶劑采用含有
的乙酸的水/甲醇(體積比1 1)，依然能獲得良好的Dopamine質(zhì)子化的準(zhǔn)分子離子峰[M+H] + (m/zl54)和脫掉[NH3]的碎片峰[M_NH3+H]+，準(zhǔn)分子離子峰[M+H] + (m/zl54)質(zhì)譜信號(hào)強(qiáng)度達(dá)到 9. 0X104cps ；分析 3，4-dihydrophenylacetic acid (分子量 MW 168Da)， 在負(fù)離子模式下得到失去質(zhì)子的準(zhǔn)分子離子峰[Μ-ΗΓΟιι/ζ 167)和脫掉[C00H]的碎片峰 [M-C00H]-(m/z 123)，準(zhǔn)分子離子峰[M-H]-(m/z 167)的信號(hào)強(qiáng)度達(dá)到2. 5X 104cps，本發(fā)明的電離方法不僅適用于生物大分子的分析，具有良好的鹽容忍度，而且能夠自由選擇正負(fù)離子模式。在相同的質(zhì)譜條件下，采用本發(fā)明液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離方法得到的谷胱甘肽Glutathione (GSH，分子量麗307Da)準(zhǔn)分子離子峰[GSH+H]+強(qiáng)度為 1. lX107cps，而采用現(xiàn)有的液體樣品解析電噴霧電離方法DESI-MS(文獻(xiàn)方法)得到的谷胱甘肽Glutathione準(zhǔn)分子離子峰強(qiáng)度1.2X 105cps，質(zhì)譜信號(hào)強(qiáng)度比本發(fā)明方法得到的信號(hào)強(qiáng)度低2個(gè)數(shù)量級。采用本發(fā)明方法設(shè)備簡單、操作方便、電離效率高、抗鹽抑制效應(yīng)好， 取得了較好的技術(shù)效果。


圖1為本發(fā)明液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離裝置的流程示意圖。圖2為采用本發(fā)明液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離方法分析蛋白質(zhì) β-Iactoglobulin A得到的質(zhì)譜圖。圖3為采用本發(fā)明液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜(DESI-MS)電離方法分析多巴胺 Dopamine得到的質(zhì)譜圖。圖4為采用本發(fā)明液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離方法分析3， 4-dihydrophenylacetic acid采用負(fù)離子模式得到的質(zhì)譜圖。圖5為采用本發(fā)明液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離方法分析谷胱甘肽Glutathione得到的質(zhì)譜圖，圖6為相同條件下，采用現(xiàn)有液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜 DESI-MS電離方法分析谷胱甘肽Glutathione得到的質(zhì)譜圖。圖1中1為高速電噴霧電離ESSI探針、2為高速電噴霧電離ESSI探針的溶劑入口，3為高速電噴霧電離ESSI探針輸送溶劑的毛細(xì)管，4為高速電噴霧電離ESSI探針的高壓電源，5為高電壓接地，6為高速噴霧氣體(氮?dú)?，7為輸送溶劑的探針棒，8為輸送高壓氣體的夾套，9為液體樣品輸送泵，10為輸送液體樣品的毛細(xì)管，11為質(zhì)譜檢測器，12為質(zhì)譜檢測器的入口。
本發(fā)明的工作流程為采用輸液泵從高速電噴霧電離ESSI探針1的溶劑入口 4輸入溶劑，從探針棒7的電噴霧出口流出，高壓電源4施加高電壓，高速噴霧氣體6輸入高壓氣體，輸送溶劑的探針棒7的出口產(chǎn)生高速攜帶電荷的霧狀液滴；待分析的液體樣品由輸送液體樣品的毛細(xì)管出口 10流出，進(jìn)入高速電噴霧電離ESSI探針1的電噴霧出口 10的下方，被高速電噴霧電離ESSI探針1的高速攜帶電荷的霧狀液滴解析或電離形成離子，并被其轉(zhuǎn)移到氣相形成氣相干離子，然后進(jìn)入質(zhì)譜檢測器11的入口 12進(jìn)行檢測。下面通過實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1采用本發(fā)明液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離方法分析蛋白質(zhì) β-Iactoglobulin Α(分子量MW 18. 4kDa)，儀器條件見下表1，質(zhì)譜圖見圖2。表1分析β -Iactoglobulin A的質(zhì)譜儀器條件
權(quán)利要求
1.一種液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離方法，由高速電噴霧電離ESSI探針(1) 產(chǎn)生的高速攜帶電荷的噴霧溶劑將輸送液體樣品的毛細(xì)管(10)樣品出口流出的液體樣品直接解析或電離后進(jìn)入質(zhì)譜檢測器(11)檢測。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離方法，其特征在于高速電噴霧電離ESSI探針的高壓電源(4)電壓為士(3000 5000)伏，高速噴霧氣體為氮?dú)猓?壓力為110 200Psio
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離方法，其特征在于探針棒⑵的溶劑出口和輸送液體樣品的毛細(xì)管(10)樣品出口以及質(zhì)譜檢測器(11)的進(jìn)樣口(12)位于同一直線上。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離方法，主要解決現(xiàn)有液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜電離方法需要將液體樣品置于一面板，樣品被高速電噴霧電離ESSI探針吹掃反彈的方式解析或電離，存在位置難以調(diào)節(jié)、電離效率較低的問題。本發(fā)明通過采用液體樣品解析電噴霧質(zhì)譜DESI-MS電離方法，由高速電噴霧電離ESSI探針(1)產(chǎn)生的高速攜帶電荷的噴霧溶劑將輸送液體樣品的毛細(xì)管(10)樣品出口流出的液體樣品直接解析或電離后進(jìn)入質(zhì)譜檢測器(11)檢測的技術(shù)方案較好地解決了該問題，可用于質(zhì)譜分析的工業(yè)生產(chǎn)中。
文檔編號(hào)G01N27/68GK102262127SQ201010183180
公開日2011年11月30日 申請日期2010年5月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月26日
發(fā)明者李繼文 申請人:中國石油化工股份有限公司, 中國石油化工股份有限公司上海石油化工研究院