專利名稱：一種奈拉濱的檢測分析方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種奈拉濱的檢測分析方法。
背景技術(shù)：
急性T細(xì)胞型淋巴母細(xì)胞白血病(T-ALL)和T細(xì)胞型淋巴母細(xì)胞性淋巴瘤 (T-LBL)是兩種惡化速度非?？斓募膊?，其中T-ALL在我國急性淋巴細(xì)胞白血病的發(fā)病率僅次于普通型急性淋巴細(xì)胞白血病，占發(fā)病率的第二位。奈拉濱是9-β -arabinofuranosy lguanine (ara-G)的水溶性前藥，在血漿中可產(chǎn)生ara_G，而ara_G對(duì)T細(xì)胞具有選擇性的細(xì)胞毒作用，因此，奈拉濱對(duì)T細(xì)胞淋巴瘤具有特異性，對(duì)T-ALL和T-LBL具有較好的療效。 2005年10月觀日由FDA批準(zhǔn)奈拉濱靜脈注射液Q50mg/50ml)用于至少2種化療方案治療無效或治療后復(fù)發(fā)的T-ALL和T-LBL的治療。有關(guān)物質(zhì)與藥品質(zhì)量、安全性及療效密切相關(guān)，有關(guān)物質(zhì)的存在會(huì)降低藥物的療效，甚至引起毒副作用，因此，必須通過適當(dāng)?shù)臋z測分析方法控制藥物中有關(guān)物質(zhì)的種類和含量，確保藥品質(zhì)量。經(jīng)檢索，目前尚無針對(duì)奈拉濱的檢測分析方法的相關(guān)專利或公開文獻(xiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于構(gòu)建一種奈拉濱的檢測分析方法，該方法專屬性好，能將可能的降解雜質(zhì)和可能的殘留中間體與主成分有效分開，且靈敏度高，此方法應(yīng)用于奈拉濱和奈拉濱注射液的質(zhì)量控制，控制產(chǎn)品中的6-甲氧基鳥苷(光學(xué)異構(gòu)體)、同分異構(gòu)體、2-氨基-6-甲氧嘌呤(降解產(chǎn)物)及其它雜質(zhì)。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)—種奈拉濱的檢測分析方法，其特征在于所采用檢測分析方法為照中國藥典2005年版二部附錄VD高效液相色譜法測定，以十八烷基鍵合硅膠為填充劑，ODS預(yù)柱，柱溫25°C，檢測波長為210-247nm，流速為0. 7-1. lml/min,以磷酸溶液為流動(dòng)相 A，以體積比為1 2-2 1的乙腈-磷酸溶液為流動(dòng)相B，按0-60分鐘，流動(dòng)相A比例為 92 %，流動(dòng)相B比例為8 %，60-80分鐘，流動(dòng)相A比例為70 %，流動(dòng)相B比例為30 %，80-90 分鐘，流動(dòng)相A比例為92%，流動(dòng)相B比例為8%進(jìn)行梯度洗脫；供試品溶液的制備精密稱取樣品，加水稀釋，搖勻，作為供試品溶液；
精密吸取供試品溶液注入液相色譜儀中，記錄色譜圖。其中磷酸可以用醋酸、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀代替。其中乙腈可以用甲醇代替。色譜方法的方法學(xué)驗(yàn)證1、專屬性試驗(yàn)取樣品進(jìn)行高溫、高濕、強(qiáng)光、酸、堿、氧化破壞試驗(yàn)，采用本發(fā)明進(jìn)行檢測，以考察該系統(tǒng)的專屬性、靈敏性。(1)樣品對(duì)照試驗(yàn)取樣品溶液、空白溶劑分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)論空白溶劑不干擾樣品有關(guān)物質(zhì)的測定。有梯度洗脫系統(tǒng)峰出現(xiàn)，樣品色譜圖中主峰與各雜質(zhì)峰能有效分離。(2)高溫試驗(yàn)取經(jīng)高溫105°C加熱考察他的樣品，加水溶解，搖勻?yàn)V過，取續(xù)濾液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)論無新雜質(zhì)產(chǎn)生，總雜質(zhì)基本無變化。取經(jīng)60°C加熱10天的樣品，加水溶解，搖勻?yàn)V過，取續(xù)濾液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)論樣品在高溫60°C加熱10天后雜質(zhì)含量發(fā)生變化，總雜質(zhì)有由0. 20%增至 0. 25%。(3)強(qiáng)光試驗(yàn)取經(jīng)4500士500Lx照射10天的樣品，加水溶解，搖勻?yàn)V過，取續(xù)濾液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)論樣品在4500士500Lx照射10天雜質(zhì)含量發(fā)生變化，總雜質(zhì)有由0. 20%增至 0. 41%。(4)高濕試驗(yàn)(RH9O士)取經(jīng)90士5%的濕度條件下放置10天的樣品，加水溶解，搖勻?yàn)V過，取續(xù)濾液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)論無新雜質(zhì)產(chǎn)生，總雜質(zhì)基本無變化。(5)酸降解試驗(yàn)酸空白試驗(yàn)取0. lmol/L鹽酸溶液，加水稀釋，搖勻，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。取樣品，加0. lmol/L鹽酸溶液，放置4h后，加水溶解，搖勻?yàn)V過，取續(xù)濾液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)論有新雜質(zhì)產(chǎn)生，且雜質(zhì)較大，總雜質(zhì)有由0.20%增至0.85%。(6)堿降解試驗(yàn)堿空白試驗(yàn)取0. lmol/L氫氧化鈉溶液，加水稀釋，搖勻，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。取樣品，加0. lmol/L氫氧化鈉溶液，放置4h后，加水溶解，搖勻?yàn)V過，取續(xù)濾液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)論有新雜質(zhì)產(chǎn)生，約占0.01%，總雜質(zhì)有由0.20%增至1. 14%。(7)氧化分解試驗(yàn)氧化空白試驗(yàn)取30 %的過氧化氫溶液，加水稀釋，搖勻，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。 取樣品，加30 %的過氧化氫溶液，放置4h后，加水溶解，搖勻?yàn)V過，取續(xù)濾液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。
結(jié)論有新雜質(zhì)產(chǎn)生，總雜質(zhì)有由0. 20%增至1. 04%。(8)溶液熱破壞(80°C )試驗(yàn)取樣品，加水溶解，搖勻，濾過，作為供試品溶液，置80°C水浴中恒溫加熱8小時(shí)后，取溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)論有新雜質(zhì)產(chǎn)生，總雜質(zhì)有由0. 20%增至0. 23%。(9)峰純度試驗(yàn)取樣品，加水溶解，搖勻，注入液相色譜儀，采用二極管陣列檢測器進(jìn)行檢測，記錄色譜圖。結(jié)論奈拉濱主峰峰純度良好。(10)專屬性試驗(yàn)各破壞實(shí)驗(yàn)雜質(zhì)變化總結(jié)(各雜質(zhì)的量均按峰面積歸一化法)
其他雜質(zhì)
權(quán)利要求
1.一種奈拉濱的檢測分析方法，其特征在于所采用檢測分析方法為照中國藥典2005年版二部附錄VD高效液相色譜法測定，以十八烷基鍵合硅膠為填充劑，ODS預(yù)柱；柱溫25°C，檢測波長為210-247nm，流速為0. 7-1. lml/min,以磷酸溶液為流動(dòng)相A，以體積比為1 2-2 1的乙腈-磷酸溶液為流動(dòng)相B，按0-60分鐘，流動(dòng)相A比例為92%， 流動(dòng)相B比例為8 %，60-80分鐘，流動(dòng)相A比例為70 %，流動(dòng)相B比例為30 %，80-90分鐘， 流動(dòng)相A比例為92%，流動(dòng)相B比例為8%進(jìn)行梯度洗脫；供試品溶液的制備精密稱取樣品，加水稀釋，搖勻，作為供試品溶液； 精密吸取供試品溶液注入液相色譜儀中，記錄色譜圖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種奈拉濱的檢測分析方法，其中磷酸用醋酸、磷酸二氫鈉、 磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀代替。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種奈拉濱的檢測分析方法，其中乙腈用甲醇代替。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種奈拉濱的檢測分析方法，包括奈拉濱、奈拉濱注射液的高效液相色譜法檢測分析，其特征在于使用水、磷酸和乙腈為流動(dòng)相，采用梯度洗脫的方法檢測分析奈拉濱、奈拉濱注射液中的2-氨基-6-甲氧嘌呤、奈拉濱光學(xué)異構(gòu)體和奈拉濱同分異構(gòu)體等有關(guān)物質(zhì)，保證奈拉濱、奈拉濱注射液中有關(guān)物質(zhì)的可控性。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102313780SQ20101021936
公開日2012年1月11日 申請日期2010年7月7日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月7日
發(fā)明者姜威, 孫學(xué)偉, 孫德杰, 米長江, 顧群 申請人:北京本草天源藥物研究院