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一種兒童個(gè)性化教育基因檢測(cè)芯片及其檢測(cè)方法

文檔序號(hào):5876167閱讀:320來(lái)源:國(guó)知局
專(zhuān)利名稱(chēng):一種兒童個(gè)性化教育基因檢測(cè)芯片及其檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種基因芯片,尤其涉及一種兒童個(gè)性化教育基因檢測(cè)芯片及其檢測(cè)方法。
背景技術(shù)
通過(guò)比較同卵雙生和異卵雙生孿生子的研究表明,人體的生長(zhǎng)發(fā)育以及大腦各部分功能的發(fā)展與完善受到遺傳因素和環(huán)境因素的影響和制約,其中大約30-60%受遺傳因
素的影響。常言道十年樹(shù)木、百年樹(shù)人。如何科學(xué)的培養(yǎng)孩子,在真正意義上實(shí)現(xiàn)因材施教, 不但是每個(gè)家長(zhǎng)的責(zé)任,也是整個(gè)社會(huì)的責(zé)任。教育孩子是一個(gè)長(zhǎng)期的過(guò)程,而培養(yǎng)孩子的最佳時(shí)期是0 18歲,而0 6歲時(shí)是養(yǎng)孩子最關(guān)鍵的時(shí)期。所以,成功培養(yǎng)一個(gè)孩子成才的四大關(guān)鍵因素一是起點(diǎn),二是方向,三是環(huán)境,四是希望。這里面的每一個(gè)因素,家長(zhǎng)與老師要想做到有完全的把握,其實(shí)都離不開(kāi)對(duì)遺傳優(yōu)勢(shì)基因的測(cè)量,這就是對(duì)兒童天賦基因(即兒童個(gè)性化教育基因)檢測(cè)現(xiàn)實(shí)意義的理解。因此,需要利用基因芯片技術(shù)開(kāi)發(fā)一種檢測(cè)兒童個(gè)性化教育基因的基因芯片,以深入了解兒童的潛在能力問(wèn)題,提早預(yù)測(cè)兒童在成長(zhǎng)過(guò)中可能遇到的問(wèn)題包括心理上的問(wèn)題,避免盲目地培養(yǎng)孩子,有針對(duì)性地對(duì)孩子進(jìn)行人生職業(yè)規(guī)劃。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種兒童個(gè)性化教育基因檢測(cè)芯片,能夠深入了解兒童的潛在能力問(wèn)題,提早預(yù)測(cè)兒童在成長(zhǎng)過(guò)中可能遇到的問(wèn)題包括心理上的問(wèn)題,避免盲目地培養(yǎng)孩子,有針對(duì)性地對(duì)孩子進(jìn)行人生職業(yè)規(guī)劃。為此,本發(fā)明還要提供應(yīng)用該芯片檢測(cè)兒童個(gè)性化教育基因的方法。為了解決上述技術(shù)問(wèn)題,本發(fā)明通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)在本發(fā)明的一個(gè)方面,提供了一種兒童個(gè)性化教育基因檢測(cè)芯片,包括固相載體和探針,所述探針與待測(cè)兒童個(gè)性化教育相關(guān)基因的核苷酸序列和/或其互補(bǔ)序列進(jìn)行雜交,所述待測(cè)兒童個(gè)性化教育相關(guān)基因包括CHRM2,COMT, TPH2,ABCGl, MAOA, GSTP, MYOC, BDNF, ACTN3, ALDH2, L印tin,EAAT2, apoE, HTR2A, SNAP-25,D4DR, ADRB2, SLC6A2, mstn 基因。本發(fā)明中所述固相載體可選用領(lǐng)域周知的載體,只要所述載體與所述反應(yīng)物相容,不會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果就可以。優(yōu)選的,本發(fā)明所述固相載體選材為玻片、硅片、硝酸纖維素膜、尼龍膜和高分子材料中的一種或它們的任意組合。所述探針可以是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合體、PNA或其衍生物。所述探針的長(zhǎng)度沒(méi)有限制,只要能完成與目的核苷酸序列特異性結(jié)合。由于不同的探針長(zhǎng)度對(duì)雜交效率、信號(hào)特異性有不同的影響,所述探針的長(zhǎng)度通常至少是14個(gè)堿基對(duì),最長(zhǎng)一般不超過(guò)30個(gè)堿基對(duì),與目的核苷酸序列互補(bǔ)的長(zhǎng)度以15-25個(gè)堿基對(duì)之間的為最佳。所述探針的自身互補(bǔ)序列最好少于6個(gè)堿基對(duì),以免影響雜交效率。本發(fā)明基因芯片的探針為DNA,包括(1)與待測(cè) CHRM2 基因雜交的(a) SEQ ID NO :1 SEQ ID NO 8 所示序列,(b) SEQ ID NO :1 SEQ ID NO 8所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與SEQ ID NO :1 SEQ ID NO 8所示序列有至少70%同源性的序列;(2)與待測(cè) COMT 基因雜交的(a) SEQ ID NO 9 SEQ ID NO 10 所示序列,(b) SEQ ID NO 9 SEQ ID NO 10所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與SEQ ID NO 9 SEQ ID NO 10所示序列有至少70%同源性的序列;(3)與待測(cè) TPH2 基因雜交的(a) SEQ ID NO :11 SEQ ID N0:14 所示序列,(b) SEQ IDN0:11 SEQ ID NO :14所示序列所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與SEQ ID N0:11 SEQ ID NO 14所示序列所示序列有至少70%同源性的序列;(4)與待測(cè) ABCGl 基因雜交的(a) SEQ ID NO :15 SEQ ID NO 18 所示序列,(b) SEQ IDNO 15 SEQ ID NO 18 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 15 SEQ ID NO 18 所示序列有至少70%同源性的序列;(5)與待測(cè) MAOA 基因雜交的(a) SEQ ID NO :19 SEQ ID NO :20 所示序列,(b) SEQ IDNO 19 SEQ ID NO 20 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 19 SEQ ID NO 20 所示序列有至少70%同源性的序列;(6)與待測(cè) GSTP 基因雜交的(a) SEQ ID NO :21 SEQ ID N0:22 所示序列,(b) SEQ IDNO 21 SEQ ID NO 22 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 21 SEQ ID NO 22 所示序列有至少70%同源性的序列;(7)與待測(cè) MYOC 基因雜交的(a) SEQ ID NO :23 SEQ ID N0:26 所示序列,(b) SEQ IDNO 23 SEQ ID NO 26 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 23 SEQ ID NO 26 所示序列有至少70%同源性的序列;(8)與待測(cè) BDNF 基因雜交的(a) SEQ ID NO :27 SEQ ID NO :28 所示序列,(b) SEQ IDNO 27 SEQ ID NO 28 所示序列 8 的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 27 SEQ ID NO 28所示序列有至少70%同源性的序列;(9)與待測(cè) ACTN3 基因雜交的(a) SEQ ID NO :29 SEQ ID NO 30 所示序列,(b) SEQ IDNO 29 SEQ ID NO 30 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 29 SEQ ID NO 30 所示序列有至少70%同源性的序列;(10)與待測(cè) ALDH2 基因雜交的(a) SEQ ID NO :31 SEQ ID NO 32 所示序列,(b) SEQ IDNO 31 SEQ ID NO 32 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 31 SEQ ID NO 32 所示序列有至少70%同源性的序列;(11)與待測(cè)L印tin基因雜交的(a) SEQ ID NO :33 SEQ ID NO :34所示序列,(b) SEQ IDNO 33 SEQ ID NO 34 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 33 SEQ ID NO 34 所示序列有至少70%同源性的序列;(12)與待測(cè) EAAT2 基因雜交的(a) SEQ ID NO :35 SEQ ID NO 36 所示序列,(b) SEQ IDNO 35 SEQ ID NO 36 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 35 SEQ ID NO 36 所示序列有至少70%同源性的序列;(13)與待測(cè) apoE 基因雜交的(a) SEQ ID NO :37 SEQ ID NO 38 所示序列,(b)SEQ IDNO 37 SEQ ID NO 38 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 37 SEQ ID NO 38 所示序列有至少70%同源性的序列;(14)與待測(cè) HTR2A 基因雜交的(a) SEQ ID NO :39 所示序列,(b) SEQ ID NO 39 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與SEQ ID NO :39所示序列有至少70%同源性的序列;(15)與待測(cè) SNAP-25 基因雜交的(a) SEQ ID NO :40 SEQ ID NO 41 所示序列, (b) SEQID NO 40 SEQ ID NO 41 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 40 SEQ ID NO 41所示序列有至少70%同源性的序列;(16)與待測(cè) D4DR 基因雜交的(a) SEQ ID NO :42 SEQ ID NO 43 所示序列,(b) SEQ IDNO 42 SEQ ID NO 43 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 42 SEQ ID NO 43 所示序列有至少70%同源性的序列;(17)與待測(cè) ADRB2 基因雜交的(a) SEQ ID NO :44 SEQ ID NO 45 所示序列,(b) SEQ IDNO 44 SEQ ID NO 45 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 44 SEQ ID NO 45 所示序列有至少70%同源性的序列;(18)與待測(cè) SLC6A2基因雜交的(a) SEQ ID NO :46 SEQ ID NO :47所示序列,(b) SEQ IDNO 46 SEQ ID NO 47 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 46 SEQ ID NO 47 所示序列有至少70%同源性的序列;(19)與待測(cè) mstn 基因雜交的(a) SEQ ID NO :48 SEQ ID NO 49 所示序列,(b) SEQ IDNO 48 SEQ ID NO 49 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 48 SEQ ID NO 49 所示序列有至少70%同源性的序列。優(yōu)選的,本發(fā)明基因芯片的探針選自SEQ ID NO :1 SEQ ID NO 49所示序列。所述探針可通過(guò)連接臂固定于固相載體上。連接臂可以為探針形成雙鏈的部分提供一個(gè)自由的空間以減少空間位阻,有助于雜交反應(yīng)的進(jìn)行[Afanassiev V,HanemannV, Wolfl S. Preparation of DNA and protein micro arrays on glass slides coated with an agarose film. Nucleic Acids Res. 2000,28 :e66 ;USA Patent No. 5556752]。連接臂越長(zhǎng),雜交效率越高。典型的連接臂包括15 30個(gè)功能基團(tuán)長(zhǎng)度。連接臂可以選用適當(dāng)形式的功能基團(tuán),如Poly T(A、C或G)、C原子或聚乙烯乙二醇與Poly T(A、C或G)的嵌合體、聚乙醇、聚酷、聚氨、聚硫酸酷和其組合物。所述探針或連接臂通過(guò)連接分子固定于固相載體上。探針固定到載體上可以通過(guò) C-C鍵實(shí)現(xiàn),例如,聚三氟氯乙烯表面;或更好的用硅氧烷鍵(玻璃或二氧化硅作支持物時(shí)使用)。硅氧烷鍵鍵合可以通過(guò)支持物和連接分子的三氯甲硅烷基或三烷氧基甲硅烷基等基團(tuán)反應(yīng)完成。氨基烷基硅烷、輕基烷基硅烷、2—輕乙基一氨丙基三乙氧基硅烷、輕乙基一氨丙基三乙氧基硅烷或輕丙基三乙氧基硅烷都是很有用的表面吸附基團(tuán)。所述探針可以被修飾,修飾方法可以是5’ -NH2修飾、5’ -SH修飾、5’ -Poly T(A、C 或G)修飾、5’-生物素修飾、3’-NH2修飾、3’-SH修飾、3’-Poly T(A、C或G)修飾和3’-生物素修飾等。所述探針可以有一條或幾條,甚至全部都是經(jīng)過(guò)標(biāo)記的,所述標(biāo)記包括熒光素標(biāo)記、生物素標(biāo)記、放射性元素標(biāo)記、酶標(biāo)記和熒光共振能量轉(zhuǎn)移標(biāo)記。在本發(fā)明的另一方面,提供了一種兒童個(gè)性化教育基因檢測(cè)芯片的檢測(cè)方法,包括如下步驟
1)提取受檢者樣本DNA ;2)設(shè)計(jì)多重PCR引物及SNP特異性探針,PCR引物具有SEQ ID NO :50_SEQ ID NO: 99所示序列,SNP特異性探針具有SEQ ID NO I-SEQ ID NO 49所示序列;3)對(duì)樣本DNA進(jìn)行目的基因的PCR擴(kuò)增、純化、片段化及熒光素標(biāo)記,所述目的基因包括 CHRM2, COMT, TPH2, ABCGl, MAOA, GSTP, MYOC, BDNF, ACTN3, ALDH2, Leptin, EAAT2, apoE, HTR2A, SNAP-25, D4DR, ADRB2, SLC6A2, mstn 基因;該 PCR 擴(kuò)增所用的引物具有 SEQID NO :50-SEQ ID NO :99所示序列的核苷酸鏈或其互補(bǔ)鏈;4)熒光素標(biāo)記的PCR產(chǎn)物進(jìn)行基因芯片雜交,檢測(cè)目的基因的SNP位點(diǎn)。所述步驟3)中的CHRM2基因的引物是SEQ ID NO 50 57所示序列的引物,COMT 基因的引物是SEQ ID NO :58 59所示序列的引物,TPH2基因的引物是SEQ ID NO :60 63所示序列的引物,ABCGl基因的引物是SEQ ID NO 64 67所示序列的引物,MAOA基因的引物是SEQ IDNO 68 69所示序列的引物,GSTP基因的引物是SEQ ID NO 70 71所示序列的引物,MYOC基因的引物是SEQ ID NO -J2 75所示序列的引物,BDNF基因的引物是SEQ ID NO 76 77所示序列的引物,ACTN3基因的引物是SEQ ID NO 78 79所示序列的引物,ALDH2基因的引物是SEQ ID NO 80 81所示序列的引物,Leptin基因的引物是SEQ ID NO 82 83所示序列的引物,EAAT2基因的引物是SEQ ID NO 84 85所示序列的引物,apoE基因的引物是SEQ ID NO 86 87所示序列的引物,HTR2A基因的引物是 SEQ ID NO 88 89所示序列的引物,SNAP-25基因的引物是SEQ ID NO 90 91所示序列的引物,D4DR基因的引物是SEQ ID NO 92 93所示序列的引物,ADRB2基因的引物是 SEQ ID NO 94 95所示序列的引物,SLC6A2基因的引物是SEQID NO 96 97所示序列的引物,mstn基因的引物是SEQ ID NO :98 99所示序列的引物。所述步驟3)中的片段化是將純化的PCR產(chǎn)物經(jīng)測(cè)定濃度后,用DNase I進(jìn)行片段化;所述熒光素標(biāo)記是將片段化PCR產(chǎn)物利用脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶在3’末端進(jìn)行熒光素標(biāo)記。所述步驟4)基因芯片的制備是將預(yù)先設(shè)計(jì)并合成好的探針通過(guò)接觸式點(diǎn)樣或噴墨式點(diǎn)樣點(diǎn)載到玻片或硅片材質(zhì)的固相載體片基上,其中,探針是SEQ ID NO :1 SEQ ID NO 49所示序列的DNA探針。所述步驟3)目的基因的SNP位點(diǎn)包括CHRM2基因的rs3M650_T、rs324650_A、 rs2350780-G、rs2350780_A、rs2061174_G、rs2061174_A、rs8191992_T、rs8191992-A 位點(diǎn),COMT 基因的 rs4680-G、rs4680_A 位點(diǎn),TPH2 基因的 rs4570625_G、rs4570625_T、 rs4341581-G、rs4341581-T 位點(diǎn),ABCGl 基因的 rs225374_C、rs225374_G、rs914189_C、 rs914189-G 位點(diǎn),MAOA 基因的 rs6323_G、rs6323_T 位點(diǎn),GSTP 基因的 rsl695_A、rsl695_G 位點(diǎn),MYOC 基因的 rs2421853-G、rs2421853_A、rs235858_G、rs235858-A 位點(diǎn),BDNF 基因的 rs6^5-C、rs6265-T 位點(diǎn),ACTN3 基因的 rsl815739_C、rsl815739-T 位點(diǎn),ALDH2 基因的rs671-G、rs671-A位點(diǎn),L印tin基因的L印tinAl、LeptinGl位點(diǎn),EAAT2基因的-180A、-180C 位點(diǎn),apoE 基因的 112Cys、112Arg 位點(diǎn),HTR2A 基因的 rs927544 位點(diǎn), SNAP-25基因的rs363039位點(diǎn),D4DR基因的rsl800955位點(diǎn),ADRB2基因的Argl6Gly位點(diǎn), SLC6A2基因的rs2MM46位點(diǎn),mstn基因的rs3791786位點(diǎn)。本發(fā)明中的易感基因和SNP位點(diǎn)的理論依據(jù)
人的性格可劃分為獵奇性(Novelty4eeking,NS)、躲避傷害性(Harm-Avoidance, HA)和獎(jiǎng)賞依賴(lài)性(Reward-D印endence,RD),分別與多巴胺(DA)神經(jīng)遞質(zhì)、5-羥色胺 (5-HT)神經(jīng)遞質(zhì)和去甲腎上腺素(NA)神經(jīng)遞質(zhì)有關(guān)。多巴胺主要與大腦的情欲和感覺(jué)有關(guān),傳遞興奮及快樂(lè)的信息,也與上癮有關(guān)。腦部多巴胺含量多,人會(huì)變得極富好奇心,愛(ài)冒險(xiǎn),積極進(jìn)取。愛(ài)情其實(shí)就是腦里產(chǎn)生大量多巴胺作用的結(jié)果。所以,吸煙和吸毒都可以增加多巴胺的分泌,使上癮者感到開(kāi)心及興奮。若多巴胺較少時(shí),便會(huì)導(dǎo)致優(yōu)柔寡斷而冷漠的個(gè)性,缺乏啟動(dòng)力和積極性。5-羥色胺可以直接影響人的心理功能和生理功能,比如人的喜怒哀樂(lè)、睡眠、食欲等。血液中5-羥色胺水平低,兒茶酚胺濃度較高的人脾氣容易急躁,性格比常人剛強(qiáng)、倔犟,遇事好沖動(dòng)。反之,血液中5-羥色胺濃度較高,兒茶酚胺濃度偏低的人性情比常人溫和,遇事較冷靜,不易產(chǎn)生急躁情緒。與這些神經(jīng)遞質(zhì)相關(guān)基因的遺傳變異在不同程度上影響了個(gè)體的人格。大腦是一切心理活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ),大腦結(jié)構(gòu)發(fā)育差異不僅影響個(gè)體的智商,同時(shí)也影響個(gè)體的人格。如BDNF基因參與與大腦海馬發(fā)育,低BDNF活性的個(gè)體比正常人的大腦海馬的體積要小11%,從而影響部分記憶功能,并與焦慮、抑郁等相關(guān)。MYOC是一種細(xì)胞骨架蛋白,參與纖毛樣神經(jīng)上皮(如光感受器)的形態(tài)發(fā)生,分布于眼部組織和眼外的肌肉組織。MYOC基因突變與青光眼近視相關(guān)。ALDH2是酒精代謝中間產(chǎn)物乙醛的關(guān)鍵酶。ALDH2功能缺乏者,由于不能有效代謝乙醛,致使乙醛在體內(nèi)堆積,使個(gè)體產(chǎn)生心跳加速、臉紅和嘔吐等不適癥狀,而ALDH2功能正常者,沒(méi)有這種現(xiàn)象,而且比較善飲。人體對(duì)這些毒素的解毒代謝能力存在很大的差異, 造成一些致癌物在不同個(gè)體的活性差異達(dá)數(shù)十倍,因此對(duì)致癌物引起的腫瘤存在著遺傳易感性。代謝酶基因缺陷者,由于體內(nèi)沒(méi)有解毒酶,不能有效地對(duì)致癌物質(zhì)進(jìn)行解毒,因此對(duì)香煙的致癌物質(zhì)最為敏感,是吸煙的高風(fēng)險(xiǎn)人群。ACTN3基因編碼α輔肌動(dòng)蛋白(ACTN3),ACTN3表明機(jī)體產(chǎn)生快速力量的能力。在對(duì)澳大利亞體育學(xué)院國(guó)際級(jí)運(yùn)動(dòng)員的調(diào)查研究中發(fā)現(xiàn),18%正常人缺乏ACTN3,M%長(zhǎng)跑等耐力項(xiàng)目的運(yùn)動(dòng)員缺乏ACTN3,而在短跑和舉重等爆發(fā)力項(xiàng)目的運(yùn)動(dòng)員中,只有6 %的運(yùn)動(dòng)員缺乏ACTN3,特別是爆發(fā)力項(xiàng)目的女運(yùn)動(dòng)員中,均含有ACTN3。在爆發(fā)力項(xiàng)目中,如果運(yùn)動(dòng)員缺乏ACTN3,在接受的訓(xùn)練質(zhì)量相同的情況下,他們可以接近最好的運(yùn)動(dòng)成績(jī),但始終不能達(dá)到最好。因此,根據(jù)運(yùn)動(dòng)員的遺傳因素,制定更為合理的訓(xùn)練項(xiàng)目,有利于提高運(yùn)動(dòng)成績(jī)。D4DR基因(多巴胺受體D4,dopamine receptor D4)位于第11號(hào)染色體上。它所制造的產(chǎn)物是大腦中重要的神經(jīng)遞質(zhì)——多巴胺的受體的D4亞基。該亞基是一些治療神經(jīng)疾病(如帕金森癥)藥物的作用靶點(diǎn)。同時(shí),該基因中一段重復(fù)序列的長(zhǎng)短與人的行為表現(xiàn)息息相關(guān)。攜帶有該基因長(zhǎng)重復(fù)序列的人相較于普通人而言,表現(xiàn)出好奇心強(qiáng),過(guò)度活躍,多動(dòng),注意力不夠集中等等。故DRD4基因說(shuō)明的是人對(duì)外界事物好奇程度的特征。單胺氧化酶A基因(monoamine oxidase Α,ΜΑ0Α),位于人的性染色體X上。這個(gè)基因的主要作用是編碼合成單胺氧化酶A——1種能降解神經(jīng)遞質(zhì)的酶。比如它能降解大腦中的多巴胺、去甲腎上腺素和5-羥色胺等物質(zhì)。一旦這個(gè)基因發(fā)生了突變,則制造單胺氧化酶A的能力就會(huì)下降,一些多余的神經(jīng)遞質(zhì)得不到降解,會(huì)逐漸堆積起來(lái),影響到了人的思維、性格乃至行為表現(xiàn)。因此,MAOA是與人格相關(guān)密切的基因之一。
血清素是人體中一種非常重要的激素和神經(jīng)遞質(zhì)。而TPH2這個(gè)基因(色氨酸羥化酶2,tryptophan hydroxylase 2)編碼制造的蛋白正是血清素的催化合成酶之一,并且主要在大腦中表達(dá)。該基因位于第12號(hào)染色體上,其突變可導(dǎo)致產(chǎn)物色氨酸羥化酶2的缺陷,進(jìn)而導(dǎo)致血清素的制造能力下降,使得人偏向表現(xiàn)出悲觀(guān)、抑郁等情緒。神經(jīng)遞質(zhì)之一的乙酰膽堿(acetylcholine)影響著中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)細(xì)胞。會(huì)對(duì)乙酰膽堿作出反應(yīng)的神經(jīng)細(xì)胞叫做膽堿能神經(jīng)細(xì)胞(cholinergic neuron),這類(lèi)細(xì)胞在調(diào)控大腦生理活動(dòng)的眾多方面都起著重要作用。CHRM2(毒蕈堿樣膽堿能受體2, cholinergicreceptor,muscarinic 2)基因位于第7號(hào)染色體上,表達(dá)一種乙酰膽堿受體, 參與到了突觸信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、神經(jīng)元興奮性等過(guò)程。CHRM2受體的激活還會(huì)改變大腦中的慢β 波和δ波,這些腦電波與認(rèn)知功能(如決策和注意力)有關(guān)。CHRM2基因中某些位點(diǎn)的單堿基多態(tài)性影響到了大腦較高級(jí)的認(rèn)知過(guò)程。因此,該基因是與人智商相關(guān)密切的基因之
οCOMT基因位于第22號(hào)染色體上,編碼合成的酶的作用是降解兒茶酚胺。兒茶酚胺是一種含有兒茶酚和胺基的神經(jīng)類(lèi)物質(zhì),包括去甲腎上腺素(NAd)、腎上腺素(Ad)和多巴胺(DA)。在人的神經(jīng)系統(tǒng)中,它們都是很重要的神經(jīng)遞質(zhì),是神經(jīng)細(xì)胞之間交換信息的紐帶與橋梁。當(dāng)然,一些兒茶酚胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)在完成了自己的使命后就失去了作用,這就需要 COMT基因的產(chǎn)物——兒茶酚胺氧位甲基轉(zhuǎn)移酶來(lái)加以降解,避免在體內(nèi)堆積形成大量無(wú)用的垃圾,維持體內(nèi)物質(zhì)代謝的平衡。由于基因突變的存在,使得不同人之間兒茶酚胺氧位甲基轉(zhuǎn)移酶的活性不同,對(duì)神經(jīng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)控就存在著差異,進(jìn)而影響到了大腦的思考能力。所以,在分子水平上檢測(cè)人的智商時(shí)不能不考慮COMT基因的因素。本發(fā)明的有益效果在于1、從生物學(xué)角度解決了孩子的遺傳學(xué)特性問(wèn)題,是從基因?qū)用媪私庖粋€(gè)人潛在能力問(wèn)題,而不是停留在觀(guān)察層面或表象層面,是非常具有前瞻性與指導(dǎo)性作用的,是在規(guī)劃人生過(guò)程中運(yùn)用普通方法目前無(wú)可替代的,這對(duì)于教師是一種難得的量才工具,對(duì)于家長(zhǎng), 是一個(gè)盞如何培養(yǎng)孩子未來(lái)通向成功之路的指路明燈。2、從生物學(xué)角度充分理解孩子的各種行為與表現(xiàn),尤其是在大人看來(lái)非常擔(dān)心的問(wèn)題,可能反而是孩子未來(lái)成才的一種必要特質(zhì)。比如孩子有點(diǎn)野性,敢于冒險(xiǎn),經(jīng)常做些普通孩子不敢做的事情。如何正確發(fā)現(xiàn)并培養(yǎng)這樣的孩子呢?只需要對(duì)孩子的遺傳基因進(jìn)行全面分析,尤其是組合分析,就可以發(fā)現(xiàn)孩子這種行為屬于未來(lái)哪種職業(yè)特征所需要的, 就可以朝著這個(gè)方向進(jìn)行培養(yǎng)教育,把原本看來(lái)是缺點(diǎn)的問(wèn)題一下就可以轉(zhuǎn)化成優(yōu)點(diǎn)。3、從生物學(xué)角度能夠提早預(yù)測(cè)孩子在成長(zhǎng)過(guò)中種可能遇到的問(wèn)題包括心里上的問(wèn)題,有些問(wèn)題哪怕是在您孩子身上出現(xiàn)一次就有可能造成孩子的終身遺憾或無(wú)可挽回的悲劇發(fā)生,通過(guò)兒童天賦基因檢測(cè)就可以盡量避免這樣的遺憾或悲劇發(fā)生。比如孩子有早戀加多情加抑郁遺傳基因,家長(zhǎng)與老師就需要在孩子快十二歲時(shí)作好準(zhǔn)備,采取必要的方式進(jìn)行干預(yù),包括營(yíng)養(yǎng)、藥物以及教育等方式,就可以避免孩子在身體發(fā)育期受到身體性激素的影響造成學(xué)習(xí)、家庭以及人際關(guān)系乃至社會(huì)問(wèn)題。4、從生物學(xué)角度避免盲目地培養(yǎng)孩子,盲目地培養(yǎng)孩子只會(huì)給孩子造成身心方面的很大壓力。檢測(cè)孩子天賦后,就可以采樣培養(yǎng)林木的方法對(duì)樹(shù)枝進(jìn)行修剪,盡最大努力來(lái)減輕孩子的各種學(xué)習(xí)負(fù)擔(dān)與身心壓力。因?yàn)槿说木κ怯邢薜模鴮W(xué)業(yè)是無(wú)止境的,一個(gè)人只要在他最優(yōu)勢(shì)的方面得到最大發(fā)揮,那他就有可能有與眾不同的作為。如孩子發(fā)現(xiàn)有耐力加技巧遺傳優(yōu)勢(shì)基因,他就可以選擇如體操、長(zhǎng)跑、球類(lèi)等運(yùn)動(dòng)項(xiàng)目從小進(jìn)行嚴(yán)格訓(xùn)練并經(jīng)常鼓勵(lì)孩子參加運(yùn)動(dòng)競(jìng)賽,不必要強(qiáng)迫孩子參加其它各種各樣的培訓(xùn)班等。只有這樣,孩子一定會(huì)在體育競(jìng)技方面有所成就。5、從生物學(xué)角度對(duì)孩子進(jìn)行人生職業(yè)規(guī)劃,為孩子將來(lái)有一天走出社會(huì)選擇職業(yè)作好了充分的準(zhǔn)備,包括知識(shí)、技能、思想、能力等方面的準(zhǔn)備。比如,如果孩子具有生物學(xué)從政優(yōu)勢(shì),那就必須在大學(xué)為入黨、參加公務(wù)員考試、接觸我國(guó)政治思想體制與人事制度等方面的人與事做許多方面的必要準(zhǔn)備,提前為孩子有一天從政打下基礎(chǔ)。


圖1是實(shí)施例5中多重PCR擴(kuò)增后的電泳檢測(cè)結(jié)果圖;圖2是實(shí)施例5中PCR產(chǎn)物片段化后的電泳檢測(cè)結(jié)果圖;圖3是實(shí)施例5中檢測(cè)芯片雜交結(jié)果圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明。應(yīng)理解,這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法,通常按常規(guī)條件,例如Sambrook等人,分子克隆實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)(New York =Cold Spring Harbor LaboratoryPress,1989)中所述條件,或按制造廠(chǎng)商所建議的條件。實(shí)施例1.樣本DNA的提取(1)從受檢者樣本(健康兒童)抗凝外周血中利用Qiagen FlexiGene DNA Kit (基因組DNA純化試劑盒)(51206)(該試劑盒購(gòu)自Qiagen公司)抽提基因組DNA(19個(gè)目的基因?yàn)?CHRM2, COMT, TPH2, ABCGl,MAOA, GSTP, MYOC, BDNF, ACTN3, ALDH2, Leptin, EAAT2, apoE,HTR2A,SNAP-25,D4DR,ADRB2,SLC6A2,mstn 基因)。具體方法為向 300 μ 1 血液樣本中加入750 μ 1 Buffer !7Gl,上下顛倒5次使其混勻。接著在12,OOOrpm轉(zhuǎn)速下離心lmin。 離心后倒掉上層清液,再加入150 μ 1 Buffer TO2及1. 5μ 1蛋白酶溶液,立即振蕩,直至沉淀完全溶解。接下來(lái)離心3 5s,然后65°C水浴5min。當(dāng)溶液從紅色變?yōu)殚蠙炀G色后,加入150 μ 1 100%異丙醇,上下充分顛倒離心管,使其混合,直至DNA析出,呈肉眼可見(jiàn)的線(xiàn)狀或塊狀。然后在12,OOOrpm轉(zhuǎn)速下離心;3min。離心后倒掉上層清液,再加入150 μ 1 70% 乙醇,并振蕩k。接著重新在12,OOOrpm轉(zhuǎn)速下離心;3min,離心后倒掉上層清液,自然風(fēng)干沉淀,直至所有的液體都蒸發(fā)掉。最后向離心管中加入200 μ 1 Buffer TO3,振蕩5s,然后 65°C水浴lOmin,使DNA溶解。(2)使用ND-1000核酸濃度分析儀對(duì)所抽提的DNA定量。DNA工作液濃度校正至 IOng/ μ 1,置于-20°C冰箱保存。實(shí)施例2.設(shè)計(jì)PCR (聚合酶鏈反應(yīng))所用引物及探針序列針對(duì)SNP位點(diǎn)利用www. autoprimer. com設(shè)計(jì)多重PCR(聚合酶鏈反應(yīng))引物與 SNP特異性探針(見(jiàn)表1)。表 1基因 SNP探針
CHRM2 rs324650-TATTTCCACAATATTACAC
(SEQ ID N0:1) ?!獳TTTCCACTATATTACAC
…24650—A(SEQ ID N0:2)
CHRM2 rs2350780-GCTGCTGGACGTACAAGA
(SEQ ID NO:3)。。「……ΛCTGCTGGATGTACAAGA
rs2350780—A(SEQ ID N0:4)
CHRM2 rs2061174-GCTGATGCACGAGAATAG
(SEQ ID NO:5)
ΛCTGATGCATGAGAATAG
rs2061174—A(SEQ ID N0:6)
CHRM2 rs8l9l992-TATTGTAGAATCAGAAGC
(SEQ ID NO:7)
引物
TACATGTCTTCTCTGTCACTGG
(SEQ ID NO:50) CTCACAATAGCCCTGAAAAGAATGAC
(SEQ ID N0:5l) TGGAGATGTCATGAAAGATTTGC
(SEQ ID NO:52) AATGCTAAAGTATTGAGGTGGTATT
(SEQ ID NO:53) AGCCTAGGTTCTTAAGTTCTGCAT
(SEQ ID NO:54) ACCCAAATAGACATCTTGCTCTGAGT
(SEQ ID NO:55) ACAAAACGTGCAATTCAGGAG (SEQ ID NO:56)
COMT
TPH2
TPH2
ABCGl
ABCGl
MAOA
GSTF
MYOC
MYOC
BDNF
ACTN3
ALDH2
rs8191992-A
rs4680-G
rs4680-A
rs4570625-G
rs4570625-T
rs4341581-G
rs4341581-T
rs225374-C
rs225374-G
rs914189-C
rs914189-G
rs6323-G
rs6323-T
rsl695-A
rsl695-G
rs2421853-G
rs2421853-A
rs235858-G
rs235858-A
rs6265-C
rs6265-T
rsl815739-C
rsl815739-T
rs671-G
rs671-A
Leptin LeptinAl
ATTGTAGATTCAGAAGC
(SEQ TD NO:8) GTCCTTCACGCCAGCGA
(SEQ ID N0:9) GTCCTTCATGCCAGCGA
(SEQ ID NO:10) GACATATTCTMTTTTG
(SEQ ID NO:11) GACATATTATAATTTTG
(SEQ ID NO:12) AACGCCTGCAATATCAT
(SEQ ID NO:13) AACGCCTGAAATATCAT
(SEQ ID NO:14) GTCCTGCCCGCTCATCG
(SEQ ID NO:15) GTCCTGCCCGCTCATCG
(SEQ ID NO:16) CTGAGTCTGCCTCTTCT
(SEQ ID NO:17) CTGAGTCTCCCTCTTCT
(SEQ ID NO:18) CATTGGAAGCCGCTGAA
(SEQ 丄U N0:19) CATTGGAAGACGCTGAA
(SEQ ID N0:20) GAGGGAGATGTATTTGC
(SEQ ID N0:21) GAGGGAGACGTATTTGC
(SEQ ID N0:22) CCCCAGGGCTCAGTTTA
(SEQ ID N0:23) CCCCAGGGTTCAGTTTA
(SEQ TD NO:24) GCAGCAGACGMATAAAG
(SEQ ID NO:25) GCAGCAGATGMATAAAG
(SEQ ID N0:26) TCGAACACGTGATAGAAG
(SEQ ID N0:27) TCGAACACATGATAGAAG
(SEQ ID N0:28) TCGCTCTCGGTCAGCCT
(SEQ ID N0:29) TCGCTCTCAGTCAGCCT
(SEQ ID NO:30) TTTCACTTCAGTGTATGC
(SEQ ID N0:31) TTTCACTTTAGTGTATGC
(SEQ ID NO:32) TGGACTTTTTGGATGGGC (SEQ ID NO:33)
CAGAGACTGATAAAATTGTAG
(SEQ TD NO:57) TCACCATCGAGATCAACCCC
(SEQ ID NO:58) ACAACGGGTCAGGCATGCA
(SEQ ID NO:59) TCCATATAACTCTGCATAGAGGCA
(SEQ ID N0:60) GATATCCATTGCCTCAAGCA
(SEQ ID N0:61) Aggattcaacgaggctaagag
(SEQ ID N0:62) Gtgaagttgccgtgtcactc
(SEQ ID N0:63) ATGCTTCACAGTCCTGATCTCATT
(SEQ ID N0:64) CTTCCAGACACGTTTCCCATT
(SEQ ID N0:6o) AGCCCCCCAACTCTACTACTTAAGC
(SEQ ID NO:66) TTTTGCTAGCCTGAAAAACGCCAC
(SEQ ID NO:67) TTTTTCACGCCTGCCACAAAGACT
(SEQ ID N0:68) ACATGAATAATAGCAGCCTACCCTT
(SEQ ID N0:69) AGTCTCTCATCCTTCCACGCACAT
(SEQ ID NO:70) CATGACCCGTTACTTGGCTGGTT
(SEQ ID N0:71) ACCTGCTAGTTTGACATGCCTAAT
(SEQ ID NO:72) CAGTTTCAACCGATTCTCCTGCCT
(SEQ TD NO:7, AGTGTAGAGTGGTTCTGTTGTGGAG
(SEQ ID NO:74) AAGCTTTGACTCCTTTCTCATAGG
(SEQ ID NO:75) GAGGCTTGACATCATTGGCT
(SEQ ID NO:76) CGTGTACAAGTCTC,CGTCCT
(SEQ ID NO:77) CTGTTGCCTGTGGTAAGTGGG
(SEQ ID NO:78) TGGTCACAGTATGCAGGAGGG
(SEQ ID NO:79) GTCAACTGCTATGATGTGTTTGG
(SEQ ID N0:80) CCACCAGCAGACCCTCAAG
(SEQ ID N0:81) TCTTTTCTATGTCCAAGCTGTGCCCCTGCA (SEQ ID NO:82)
權(quán)利要求
1.一種兒童個(gè)性化教育基因檢測(cè)芯片,包括固相載體和探針,其特征在于,所述探針與待測(cè)兒童個(gè)性化教育相關(guān)基因的核苷酸序列和/或其互補(bǔ)序列進(jìn)行雜交,所述待測(cè)兒童個(gè)性化教育相關(guān)基因包括 CHRM2,COMT, TPH2, ABCGl,MAOA, GSTP, MYOC, BDNF, ACTN3, ALDH2, L印tin,EAAT2, apoE, HTR2A, SNAP-25,D4DR, ADRB2, SLC6A2, mstn 基因。
2.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)芯片,其特征在于,所述探針為DNA、RNA、DNA-RNA嵌合體、 PNA或其衍生物。
3.如權(quán)利要求2所述的檢測(cè)芯片,其特征在于,所述探針為DNA,包括(1)與待測(cè)CHRM2基因雜交的(a)SEQ ID NO 1 SEQ ID NO 8所示序列,(b) SEQ ID NO :1 SEQ ID NO 8所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與SEQ ID NO :1 SEQ ID NO 8所示序列有至少70%同源性的序列;(2)與待測(cè)COMT基因雜交的(a)SEQ ID NO :9 SEQ ID N0:10所示序列,(b) SEQ ID NO 9 SEQ ID NO 10所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與SEQ ID NO 9 SEQ ID NO 10所示序列有至少70%同源性的序列;(3)與待測(cè)TPH2基因雜交的(a)SEQ ID NO :11 SEQ ID N0:14所示序列,(b) SEQ IDN0:11 SEQ ID NO 14所示序列所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與SEQ ID N0:11 SEQ ID NO: 14所示序列所示序列有至少70%同源性的序列;(4)與待測(cè)ABCGl基因雜交的(a)SEQ ID NO :15 SEQ ID N0:18所示序列,(b) SEQ IDNO 15 SEQ ID NO 18 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 15 SEQ ID NO 18 所示序列有至少70%同源性的序列;(5)與待測(cè)MAOA基因雜交的(a)SEQID NO :19 SEQ ID NO :20所示序列,(b) SEQ IDNO 19 SEQ ID NO 20 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 19 SEQ ID NO 20 所示序列有至少70%同源性的序列;(6)與待測(cè)GSTP基因雜交的(a)SEQ ID NO :21 SEQ ID N0:22所示序列,(b) SEQ IDNO 21 SEQ ID NO 22 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 21 SEQ ID NO 22 所示序列有至少70%同源性的序列;(7)與待測(cè)MYOC基因雜交的(a)SEQ ID NO :23 SEQ ID NO J6所示序列,(b) SEQ IDNO 23 SEQ ID NO 26 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 23 SEQ ID NO 26 所示序列有至少70%同源性的序列;(8)與待測(cè)BDNF基因雜交的(a)SEQ ID NO :27 SEQ ID NO 所示序列,(b) SEQ IDNO 27 SEQ ID NO 28 所示序列 8 的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 27 SEQ ID NO 28 所示序列有至少70%同源性的序列;(9)與待測(cè)ACTN3基因雜交的(a)SEQ ID NO : SEQ ID N0:30所示序列,(b) SEQ IDNO 29 SEQ ID NO 30 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 29 SEQ ID NO 30 所示序列有至少70%同源性的序列;(10)與待測(cè)ALDH2基因雜交的(a)SEQ ID NO :31 SEQ ID N0:32所示序列,(b) SEQ IDNO 31 SEQ ID NO 32 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 31 SEQ ID NO 32 所示序列有至少70%同源性的序列;(11)與待測(cè)L印tin基因雜交的(a)SEQ ID NO :33 SEQ ID NO 34所示序列,(b) SEQ IDNO 33 SEQ ID NO 34 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 33 SEQ ID NO 34 所示序列有至少70%同源性的序列;(12)與待測(cè)EAAT2基因雜交的(a)SEQ ID NO :35 SEQ ID N0:36所示序列,(b) SEQ IDNO 35 SEQ ID NO 36 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 35 SEQ ID NO 36 所示序列有至少70%同源性的序列;(13)與待測(cè)apoE基因雜交的(a)SEQ ID NO :37 SEQ ID N0:38所示序列,(b) SEQ IDNO 37 SEQ ID NO 38 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 37 SEQ ID NO 38 所示序列有至少70%同源性的序列;(14)與待測(cè)HTR2A基因雜交的(a)SEQ ID NO :39所示序列,(b) SEQ ID NO :39所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與SEQ ID NO :39所示序列有至少70%同源性的序列;(15)與待測(cè)SNAP-25基因雜交的(a)SEQID NO :40 SEQ ID NO :41所示序列,(b) SEQID NO 40 SEQ ID NO 41 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 40 SEQ ID NO 41 所示序列有至少70%同源性的序列;(16)與待測(cè)D4DR基因雜交的(a)SEQ ID NO :42 SEQ ID NO :43所示序列,(b) SEQ IDNO 42 SEQ ID NO 43 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 42 SEQ ID NO 43 所示序列有至少70%同源性的序列;(17)與待測(cè)ADRB2基因雜交的(a)SEQ ID NO :44 SEQ ID NO 45所示序列,(b) SEQ IDNO 44 SEQ ID NO 45 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 44 SEQ ID NO 45 所示序列有至少70%同源性的序列;(18)與待測(cè)SLC6A2 基因雜交的(a) SEQ ID NO :46 SEQ ID NO :47 所示序列,(b) SEQ IDNO 46 SEQ ID NO 47 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 46 SEQ ID NO 47 所示序列有至少70%同源性的序列;(19)與待測(cè)mstn基因雜交的(a)SEQ ID NO :48 SEQ ID NO :49所示序列,(b) SEQ IDNO 48 SEQ ID NO 49 所示序列的互補(bǔ)鏈,(c)與 SEQ ID NO 48 SEQ ID NO 49 所示序列有至少70 %同源性的序列。
4.如權(quán)利要求3所述的檢測(cè)芯片,其特征在于,所述探針選自SEQID NO :1 SEQ ID NO 49所示序列。
5.一種如權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的兒童個(gè)性化教育基因檢測(cè)芯片的檢測(cè)方法,其特征在于,包括如下步驟1)提取受檢者樣本DNA;2)設(shè)計(jì)多重PCR引物及SNP特異性探針,PCR引物具有SEQID NO :50_SEQ ID NO :99 所示序列,SNP特異性探針具有SEQ ID NO I-SEQ ID NO 49所示序列;3)對(duì)樣本DNA進(jìn)行目的基因的PCR擴(kuò)增、純化、片段化及熒光素標(biāo)記,所述目的基因包括 CHRM2,COMT, TPH2, ABCGl,MAOA, GSTP, MYOC, BDNF, ACTN3, ALDH2, L印tin,EAAT2, apoE, HTR2A, SNAP-25, D4DR, ADRB2, SLC6A2, mstn 基因;該 PCR 擴(kuò)增所用的引物具有 SEQID NO 50-SEQ ID NO 99所示序列的核苷酸鏈或其互補(bǔ)鏈;4)熒光素標(biāo)記的PCR產(chǎn)物進(jìn)行基因芯片雜交,檢測(cè)目的基因的SNP位點(diǎn)。
6.如權(quán)利要求5所述的兒童個(gè)性化教育基因檢測(cè)芯片的檢測(cè)方法,其特征在于,所述步驟3)中的CHRM2基因的引物是SEQ ID NO 50 57所示序列的引物,COMT基因的引物是SEQID NO 58 59所示序列的引物,TPH2基因的引物是SEQ ID NO 60 63所示序列的引物,ABCGl基因的引物是SEQ ID NO :64 67所示序列的引物,MAOA基因的引物是SEQ ID NO :68 69所示序列的引物,GSTP基因的引物是SEQ ID NO :70 71所示序列的引物, MYOC基因的引物是SEQ ID NO :72 75所示序列的引物,BDNF基因的引物是SEQ ID NO: 76 77所示序列的引物,ACTN3基因的引物是SEQ ID NO 78 79所示序列的引物,ALDH2 基因的引物是SEQ IDNO :80 81所示序列的引物,L印tin基因的引物是SEQ ID NO :82 83所示序列的引物,EAAT2基因的引物是SEQ ID NO 84 85所示序列的引物,apoE基因的引物是SEQ ID NO :86 87所示序列的引物,HTR2A基因的引物是SEQ ID NO :88 89 所示序列的引物,SNAP-25基因的引物是SEQ ID NO 90 91所示序列的引物,D4DR基因的引物是SEQ ID N0:92 93所示序列的引物,ADRB2基因的引物是SEQ ID NO :94 95 所示序列的引物,SLC6A2基因的引物是SEQ IDNO 96 97所示序列的引物,mstn基因的引物是SEQ ID NO 98 99所示序列的引物。
7.如權(quán)利要求5所述的兒童個(gè)性化教育基因檢測(cè)芯片的檢測(cè)方法,其特征在于所述步驟幻中的片段化是將純化的PCR產(chǎn)物經(jīng)測(cè)定濃度后,用DNase I進(jìn)行片段化;所述熒光素標(biāo)記是將片段化PCR產(chǎn)物利用脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶在3’末端進(jìn)行熒光素標(biāo)記。
8.如權(quán)利要求5所述的兒童個(gè)性化教育基因檢測(cè)芯片的檢測(cè)方法,其特征在于所述步驟4)基因芯片的制備是將預(yù)先設(shè)計(jì)并合成好的探針通過(guò)接觸式點(diǎn)樣或噴墨式點(diǎn)樣點(diǎn)載到玻片或硅片材質(zhì)的固相載體片基上,其中,探針是SEQ ID NO :1 SEQ ID NO 49所示序列的DNA探針。
9.如權(quán)利要求5所述的兒童個(gè)性化教育基因檢測(cè)芯片的檢測(cè)方法,其特征在于所述步驟 3)目的基因的 SNP 位點(diǎn)包括CHRM2 基因的 rs3M650_T、rs324650-A, rs2350780-G, rs2350780-A、rs2061174_G、rs2061174_A、rs8191992_T、rs8191992-A 位點(diǎn),COMT 基因的 rs4680-G、rs4680-A 位點(diǎn),TPH2 基因的 rs4570625_G、rs4570625_T、rs4341581_G、 rs4341581-T 位點(diǎn),ABCGl 基因的 rs225374_C、rs225374_G、rs914189_C、rs914189-G 位點(diǎn),MAOA 基因的 rs6323-G、rs6323-T 位點(diǎn),GSTP 基因的 rsl695_A、rsl695_G 位點(diǎn),MYOC 基因的 rs2421853-G、rs2421853_A、rs235858-G, rs2;35858-A 位點(diǎn),BDNF 基因的 rs6^5_C、 rs6265-T 位點(diǎn),ACTN3 基因的 rsl815739_C、rsl815739-T 位點(diǎn),ALDH2 基因的 rs671_G、 rs671-A 位點(diǎn),L印tin 基因的 I^ptinALkptinGl 位點(diǎn),EAAT2 基因的-180A、-180C 位點(diǎn), apoE 基因的 112Cys、112Arg 位點(diǎn),HTR2A 基因的 rs927544 位點(diǎn),SNAP-25 基因的 rs363039 位點(diǎn),D4DR基因的rsl800955位點(diǎn),ADRB2基因的Argl6Gly位點(diǎn),SLC6A2基因的rs2MM46 位點(diǎn),mstn基因的rs3791786位點(diǎn)。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種兒童個(gè)性化教育基因檢測(cè)芯片,包括固相載體和探針,所述探針與待測(cè)兒童個(gè)性化教育相關(guān)基因的核苷酸序列和/或其互補(bǔ)序列進(jìn)行雜交,所述待測(cè)兒童個(gè)性化教育相關(guān)基因包括CHRM2,COMT,TPH2,ABCG1,MAOA,GSTP,MYOC,BDNF,ACTN3,ALDH2,Leptin,EAAT2,apoE,HTR2A,SNAP-25,D4DR,ADRB2,SLC6A2,mstn基因。本發(fā)明還公開(kāi)了應(yīng)用所述芯片對(duì)兒童個(gè)性化教育基因進(jìn)行檢測(cè)的方法。本發(fā)明的基因芯片能深入了解兒童的潛在能力問(wèn)題,提早預(yù)測(cè)兒童在成長(zhǎng)過(guò)中可能遇到的問(wèn)題,避免盲目地培養(yǎng)孩子,有針對(duì)性地對(duì)孩子進(jìn)行人生職業(yè)規(guī)劃。
文檔編號(hào)G01N21/64GK102373266SQ20101024821
公開(kāi)日2012年3月14日 申請(qǐng)日期2010年8月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月9日
發(fā)明者李小靜, 李建霆, 郭真 申請(qǐng)人:上海奇芯基因科技發(fā)展有限公司
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