專利名稱：一種西瓜霜的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥的質(zhì)量控制方法，特別涉及一種西瓜霜的質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
西瓜霜為《中國藥典》2005年版一部已收載的品種，為葫蘆科植物西瓜的成熟新鮮 果實(shí)與皮硝經(jīng)加工制成，成熟西瓜的水溶性成分，主要由碳水化合物和氨基酸類成分組成， 前者約占干重的80 90%，后者約占干重的10%。其主含硫酸鈉(Na2S04)。為類白色至 黃白色的結(jié)晶性粉末，無臭、味咸。味咸、性寒。入心、胃、大腸經(jīng)。具有清熱瀉火，消腫止痛 之功效，用于咽喉腫痛，喉痹，口瘡等疾病。該藥材在清代乾隆年間的《瘍醫(yī)大全》已被收載， 臨床應(yīng)用已達(dá)200余年，一直被歷代醫(yī)家所推崇。但是，一直以來，西瓜霜沒有一套正式的 質(zhì)量控制方法，不利于保證西瓜霜應(yīng)用的有效性和安全性。本申請人已經(jīng)申請了專利號為200610097190.X，名稱為“一種西瓜霜的質(zhì)量控制 方法”的發(fā)明，授權(quán)公告日為2008年5月7號，公開號為CN1614387A，該發(fā)明公開了一種西 瓜霜的質(zhì)量控制方法，該方法主要包括鑒別、檢查、氨基酸及微量元素檢測和/或含量測定 方法。為了進(jìn)一步增強(qiáng)西瓜霜的質(zhì)量控制，增強(qiáng)其專屬性和重現(xiàn)性，防止假藥或劣藥流入市 場，申請人在上述質(zhì)量控制方法的基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究探索，提出一種新的原理科學(xué)、操作性 強(qiáng)、重現(xiàn)性好、能夠有效控制西瓜霜質(zhì)量的控制方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的的目的在于提供一種西瓜霜的質(zhì)量控制方法。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案一種西瓜霜的質(zhì)量控制方法，該方法包括西瓜霜的含量測定方法和/或鑒別方 法，所述的含量測定方法為含氮量的測定取西瓜霜20 25g，精密稱定，連同稱取的濾紙置干燥的500ml 凱氏燒瓶中；然后依次加入無水硫酸鈉IOg和硫酸銅粉末0. 5g，再沿瓶壁緩緩加硫酸 20-40ml ；在凱氏燒瓶口放一小漏斗并使凱氏燒瓶成45°斜置，用直火緩緩加熱，使溶 液的溫度保持在沸點(diǎn)以下，等泡沸停止，強(qiáng)熱至沸騰，待溶液成澄明的綠色后，繼續(xù)加熱 25-45分鐘，放冷，沿瓶壁緩緩加水220-280ml，振搖使混合，放冷后，加40%氫氧化鈉溶液 100-120ml，沿瓶壁流至瓶底，自成一液層，照2005年版《中國藥典》附錄IX L第一法氮測 定法測定，即得；西瓜霜按干燥品計(jì)算，含總氮量不得少于0. 10% ；所述的鑒別方法為氨基酸的鑒別取西瓜霜l_3g，加入6mol/L鹽酸溶液10_30ml，于沸水浴中加熱回 流1-4小時(shí)，放冷，濾過，濾液蒸干，用50-80%乙醇20ml分次洗滌殘?jiān)拔龀龅慕Y(jié)晶，攪拌， 濾過，合并濾液，蒸干，殘?jiān)盟?5_40ml溶解，上強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂柱，用50-300ml水 洗脫，棄去水液，再用氨溶液50-200ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)?0%乙醇Iml使溶 解，作為供試品溶液，另取谷氨酸對照品和苯丙氨酸對照品適量，分別用70%乙醇溶解制成每Iml各含0. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照2005年版《中國藥典》附錄VI B薄層色譜 法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5 μ 1、兩種對照品溶液各1 μ 1，以0. 5cm寬條帶狀分別點(diǎn)于同 一硅膠G板上，以正丁醇冰醋酸水為展開劑，展開，取出，晾干，顯色；供試品色譜中，在與對 照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。所述的含量測定方法還包括硫酸鈉的含量測定取西瓜霜適量，置102°C -120°c干燥至恒重后，取0. 1-2. Og, 精密稱定，加水30-750ml，振搖5_30分鐘，濾過，沉淀用水50ml分3次洗滌，濾過，合并濾 液，加鹽酸1ml，煮沸，不斷攪拌，并緩緩加入熱氯化鋇試液，至不再生成沉淀，置水浴上加熱 20-60分鐘，靜置1小時(shí)，用無灰濾紙或稱定重量的古氏坩堝濾過，沉淀用水分次洗滌，至洗 液不再顯氯化物的反應(yīng)，干燥，并熾灼至恒重，精密稱定，與0. 6086相乘，即得供試樣中含 有硫酸鈉的重量；西瓜霜按干燥品計(jì)算，含硫酸鈉不得少于90. 0%。所述的鑒別方法還包括以下方法中的一種或多種a、鈉鹽的鑒別取鉬絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，火焰即顯 鮮黃色；b、硫酸鹽的鑒別取供試品溶液，加氯化鋇試液，即生成白色沉淀分離，沉淀在 鹽酸或硝酸中均不溶解。所述的質(zhì)量控制方法還包括西瓜霜的檢查方法，所述的檢查方法為以下方法中的 一種或多種a、重金屬檢查取本品l.Og，依2005年版《中國藥典》附錄IX E第二法檢查，含重 金屬不得過百萬分之十。b、砷鹽檢查取本品0. 20g,加水23ml溶解，加鹽酸5ml，依2005年版《中國藥典》附 錄IX F第一法檢查，含砷量不得過百萬分之十。所述的含氮量的測定方法為取西瓜霜22g，精密稱定，連同稱取的濾紙置干燥的500ml凱氏燒瓶中；然后依次 加入無水硫酸鈉IOg和硫酸銅粉末0. 5g，再沿瓶壁緩緩加硫酸30ml ；在凱氏燒瓶口放一小 漏斗并使凱氏燒瓶成45°斜置，用直火緩緩加熱，使溶液的溫度保持在沸點(diǎn)以下，等泡沸停 止，強(qiáng)熱至沸騰，俟溶液成澄明的綠色后，繼續(xù)加熱30分鐘，放冷；沿瓶壁緩緩加水250ml， 振搖使混合，放冷后，加40%氫氧化鈉溶液lUml，沿瓶壁流至瓶底，自成一液層，照2005年 版《中國藥典》附錄IX L第一法氮測定法測定，即得；西瓜霜按干燥品計(jì)算，含總氮量不得 少于0. 10%。所述的硫酸鈉的含量測定方法為取西瓜霜適量，置105°C干燥至恒重后，取0. 4g，精密稱定，加水150ml，振搖10分 鐘，濾過，沉淀用水50ml分3次洗滌，濾過，合并濾液，加鹽酸Iml，煮沸，不斷攪拌，并緩緩加 入熱氯化鋇試液，至不再生成沉淀，置水浴上加熱30分鐘，靜置1小時(shí)，用無灰濾紙或稱定 重量的古氏坩堝濾過，沉淀用水分次洗滌，至洗液不再顯氯化物的反應(yīng)，干燥，并熾灼至恒 重，精密稱定，與0. 6086相乘，即得供試樣中含有硫酸鈉的重量；西瓜霜按干燥品計(jì)算，含 硫酸鈉不得少于90.0%。所述的檢查方法為砷鹽檢查取西瓜霜0. 20g，加水23ml溶解，加鹽酸5ml，依2005年版《中國藥典》附錄IX F第一法檢查，含砷量不得過百萬分之十。所述的氨基酸的鑒別方法為取西瓜霜2g，加入6mol/L鹽酸溶液15ml，于沸水浴 中加熱回流2小時(shí)，放冷，濾過，濾液蒸干，用70%乙醇20ml分次洗滌殘?jiān)拔龀龅慕Y(jié)晶，攪 拌，濾過，合并濾液，蒸干，殘?jiān)盟?0ml溶解，上732強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂柱，用水200ml 洗脫，棄去水液，再用氨溶液IOOml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)?0%乙醇Iml使溶解， 作為供試品溶液，另取谷氨酸對照品和苯丙氨酸對照品適量，分別用70%乙醇溶解制成每 Iml各含0. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照2005年版《中國藥典》附錄VI B薄層色譜法 試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5 μ 1、兩種對照品溶液各1 μ 1，以0. 5cm寬條帶狀分別點(diǎn)于同 一硅膠G板上，以正丁醇冰醋酸水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%茚三酮乙醇溶液，在 105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的 斑點(diǎn)。所述的氨基酸的鑒別方法中，薄層色譜法展開溫度t為5°C -30°C，相對濕度RH為 -80%，展開劑正丁醇-冰醋酸-水的體積比為2 1 1-4 1 1。所述的氨基酸的鑒別方法中，薄層色譜法展開溫度t為27°C，相對濕度RH為 72%，展開劑正丁醇-冰醋酸-水的體積比為3 1 1。本發(fā)明質(zhì)量控制方法含有如下鑒別、檢查、含量測定方法中的一種或幾種，本發(fā)明 質(zhì)量控制方法中的鑒別、檢查、含量測定方法為鑒別方法自如下方法中的一種或幾種西瓜霜的水溶液顯鈉鹽(2005年版《中國藥典》第一部附錄IV)與硫酸鹽(2005年 版《中國藥典》第一部附錄IV)的鑒別反應(yīng)。鈉鹽取鉬絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，火焰即顯鮮黃色。硫酸鹽取供試品溶液，加氯化鋇試液，即生成白色沉淀分離，沉淀在鹽酸或硝 酸中均不溶解。氨基酸取西瓜霜l_3g，加入6mol/L鹽酸溶液10_30ml，于沸水浴中加熱回流1-4 小時(shí)，放冷，濾過，濾液蒸干，用50-80%乙醇20ml分次洗滌殘?jiān)拔龀龅慕Y(jié)晶，攪拌，濾過， 合并濾液，蒸干，殘?jiān)盟?5_40ml溶解，上強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂柱，用50-300ml水洗脫， 棄去水液，再用氨溶液50-200ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)?0%乙醇Iml使溶解，作為 供試品溶液，另取谷氨酸對照品和苯丙氨酸對照品適量，分別用70%乙醇溶解制成每Iml 各含0. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照2005年版《中國藥典》附錄？ B薄層色譜法試驗(yàn)， 吸取上述供試品溶液5 μ 1、兩種對照品溶液各1 μ 1，以0. 5cm寬條帶狀分別點(diǎn)于同一硅膠 G板上，以正丁醇-冰醋酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，顯色；供試品色譜中，在與對照 品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。檢查方法自如下方法中的一種或幾種重金屬取西瓜霜1. Og,依法檢查(附錄IX E第二法)，含重金屬不得過百萬分之砷鹽取西瓜霜0. 20g，加水15-30ml溶解，加鹽酸3_10ml，依法檢查(附錄IX F第 一法)，含砷量不得過百萬分之十。含量測定方法自如下方法中的一種或幾種硫酸鈉
取西瓜霜適量，置102 °C _120°C干燥至恒重后，取0. 1_2. 0g，精密稱定，加水 30-750ml，振搖5_30分鐘，濾過，沉淀用水50ml分3次洗滌，濾過，合并濾液，加鹽酸1ml，煮 沸，不斷攪拌，并緩緩加入熱氯化鋇試液，至不再生成沉淀，置水浴上加熱20-60分鐘，靜置 1小時(shí)，用無灰濾紙或稱定重量的古氏坩堝濾過，沉淀用水分次洗滌，至洗液不再顯氯化物 的反應(yīng)，干燥，并熾灼至恒重，精密稱定，與0. 6086相乘，即得供試樣中含有硫酸鈉(Na2SO4) 的重量；西瓜霜按干燥品計(jì)算，含硫酸鈉(Na2SO4)不得少于90.0%。含氮量取西瓜霜20 25g，精密稱定，連同稱取的濾紙置干燥的500ml凱氏燒瓶中；然后 依次加入無水硫酸鈉IOg和硫酸銅粉末0. 5g，再沿瓶壁緩緩加硫酸20-40ml ；在凱氏燒瓶口 放一小漏斗并使凱氏燒瓶成45°斜置，用直火緩緩加熱，使溶液的溫度保持在沸點(diǎn)以下，等 泡沸停止，強(qiáng)熱至沸騰，俟溶液成澄明的綠色后，繼續(xù)加熱25-45分鐘，放冷，沿瓶壁緩緩加 水220480ml，振搖使混合，放冷后，加40%氫氧化鈉溶液100_120ml，沿瓶壁流至瓶底，自 成一液層，照氮測定法(附錄IX L第一法)測定，即得；西瓜霜按干燥品計(jì)算，含總氮(N) 量不得少于0. 10% ；發(fā)明人對氨基酸的鑒別方法進(jìn)行了大量研究，內(nèi)容如下氨基酸的鑒別A氨基酸的提取研究(1)直接提取用甲醇對西瓜霜進(jìn)行回流提取、或超聲處理，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?稀乙醇Iml使溶解，作為供試品溶液。結(jié)果兩種供試品溶液均未見有明顯的TLC斑點(diǎn)。(2)水解取西瓜霜2g，置具塞試管中，加6mol/L鹽酸溶液15ml，密塞，搖勻，置 105°C烘箱中加熱6小時(shí)，蒸干，殘?jiān)蛹状?0ml溶解，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)酉∫掖糏ml 使溶解，作為供試品溶液。結(jié)果供試品有較好的色譜，但各斑點(diǎn)分離度欠理想。(3)結(jié)論西瓜霜中的氨基酸成分多以肽或蛋白質(zhì)形式存在，需要酸水解才能游離 出來。由于硫酸鈉含量高，水解后應(yīng)進(jìn)行精制處理。B氨基酸的精制通過對多種樹脂進(jìn)行比較研究，發(fā)現(xiàn)中國藥典2005年版一部421頁“四味珍層冰 硼滴眼液”鑒別(4)項(xiàng)下采用的精制方法最好，最后擬定的精制條件為西瓜霜水解液蒸干，殘?jiān)铀?0ml溶解，過SA_2型氫型陽離子交換樹脂柱(內(nèi)徑 1. 5cm，長IOcm)，用水200ml洗脫，棄去水液，再加10%氨溶液IOOml洗脫，收集洗脫液，蒸 干，殘?jiān)酉∫掖糏ml使溶解，作為供試品溶液。結(jié)果供試品色譜中呈現(xiàn)分離度良好的色譜 斑點(diǎn)。C不同展開系統(tǒng)的選擇將各供試品溶液、西瓜對照溶液、對照品溶液，分別點(diǎn)于同 一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，分別選擇兩種展開劑進(jìn)行展開展開劑一液化苯酚-0.1%硼砂水溶液G 1)10°C以下放置的下層溶液展開劑二正丁醇-冰醋酸-水G 1 1)結(jié)果展開劑一在薄層色譜中的斑點(diǎn)清晰，展開劑二在薄層色譜中班點(diǎn)拖尾明顯。 故選擇展開劑一作為西瓜霜的展開劑。D顯色條件選擇氨基酸的經(jīng)典顯色方法噴以茚三酮試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清 晰
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E對照品的選擇(1)對照藥材或?qū)φ掌芬酝瑯拥姆椒ㄖ苽湮鞴系膶φ账幉娜芤海m然與供試品色譜有較好的對應(yīng)關(guān)系， 但是，考慮到如下因素①、氨基酸種類繁多。②、同一氨基酸多分D型和L型。③、供試品 中的氨基酸多通過水解獲得，難免共存一定量由2 3個(gè)氨基酸組成的短鏈肽，使不同成分 有相同或非常相近化學(xué)位移的可能性大增。④、不同品種、季節(jié)及產(chǎn)地的西瓜，氨基酸含量 變化較大這4種因素，都會使供試品的色譜有一定的變化，如果采用對照藥材，在重現(xiàn)性方 面的風(fēng)險(xiǎn)較大。因此，選擇化學(xué)對照品較為理想。(2)化學(xué)對照品的選擇①初選取絲氨酸、甘氨酸、組氨酸、脯氨酸、色氨酸、胱氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、天門 冬氨酸、亮氨酸、異亮氨酸苯丙氨酸、谷氨酸、纈氨酸、丙氨酸、精氨酸、賴氨酸等18種氨基 酸的化學(xué)對照品，加70%乙醇分別制成每Iml含0. 5mg的溶液，作為對照品溶液。薄層鑒別色譜圖見

圖1。其中1、11、17 西瓜對照2、絲氨酸，3、甘氨酸，4、組氨酸，7、脯氨酸、8、色氨酸，9、胱氨酸，10、蘇氨酸，13、酪 氨酸，14、天門冬氨酸，15、亮氨酸，16、異亮氨酸6、080801 批樣品12、080803 批樣品18、080805 批樣品19、六種氨基酸對照品溶液從上至下依次為苯丙氨酸、谷氨酸、纈氨酸、丙氨酸、 精氨酸、賴氨酸展距8cm 展開溫度t :25°C，相對濕度RH 70-80 %。②精選選取跟供試品色譜斑點(diǎn)化學(xué)位移接近的色氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、組氨酸， 進(jìn)行再研究。薄層鑒別色譜圖見圖2。其中1、四種氨基酸對照品溶液(從上至下依次為色氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、組氨酸)2、080801 批樣品3、080803 批樣品4、080805 批樣品圖二表明，與供試品色譜對應(yīng)最好的是谷氨酸，其次是色氨酸，但色氨酸的對應(yīng)的 斑點(diǎn)在供試品色譜中比較模糊，位置和顏色也有一定的不確定性。組氨酸雖然與供試品中 最顯著的斑點(diǎn)接近，但顏色和化學(xué)位移均有差距。蛋氨酸與供試品色譜中對應(yīng)的斑點(diǎn)在顏 色和化學(xué)位移上均有差距。③確定通過上述研究，在氨基酸的化學(xué)對照品中，最理想的是谷氨酸。薄層鑒別色譜圖見圖3。其中1、谷氨基酸對照品2、080803 批樣品3、070701 批樣品
4、070601 批樣品5、西瓜的陰性對照樣品展距8cm 展開溫度t :25°C相對濕度RH -80%綜上所述，初步擬定的TLC鑒別為取西瓜霜2g，置具塞試管中，加6mol/L鹽酸溶液15ml，密塞，置105°C烘箱中加熱 6小時(shí)，放冷，加水10ml，搖勻，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，加至SA-2型氫型陽 離子交換樹脂柱(內(nèi)徑1.5cm，長IOcm)上，用水200ml洗脫，棄去水液，再加10%氨溶液 IOOml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)酉∫掖糏ml使溶解，作為供試品溶液。另取谷氨酸對 照品，加70%乙醇制成每Iml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液5 10 μ 1、對照品溶液2 μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為 黏合劑的硅膠G薄層板上，以液化苯酚-0.1%硼砂水溶液G 1)10°C以下放置的下層溶 液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在 與谷氨酸對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的班點(diǎn)。發(fā)明者對本鑒別進(jìn)行進(jìn)一步研究，內(nèi)容如下西瓜霜系由西瓜的成熟新鮮果實(shí)與皮硝經(jīng)加工制成，成熟西瓜的水溶性成分，主 要由碳水化合物和氨基酸類成分組成，因此，要建立西瓜霜的薄層鑒別，主要針對氨基酸類 成分。西瓜霜中的氨基酸類成分多以肽或蛋白質(zhì)形式存在，需要經(jīng)過酸水解才能游離出來， 由于西瓜霜是西瓜與皮硝經(jīng)加工制成，所以，提取液中含有大量的硫酸鈉，供試品溶液的制 備主要是去除硫酸鈉的干擾。經(jīng)試驗(yàn)，西瓜霜的酸水解液蒸干后，殘留物中析出大量的結(jié) 晶，用70%乙醇分次洗滌殘留物，水解物溶于70%乙醇，可除去大部分的無機(jī)鹽，但70%乙 醇的極性較大，仍能溶出部分硫酸鈉，使供試品色譜圖中斑點(diǎn)拖尾(圖4)。其中樣品1.賴氨酸(廣州藥檢所提供的留樣0905JSY0337)；2.精氨酸(AJIN0M0T0 CO. 701cc65)；3.脯氨酸(廣州藥檢所提供的留樣1003JSY0200)；4.天門冬氨酸(AJIN0M0T0 CO. K900145)；5.谷氨酸(廣州藥檢所提供的留樣1112JSY0216)；6.纈氨酸(AJIN0M0T0 CO. 706KL08)；7.苯丙氨酸(AJIN0M0T0 CO. 702NE93)；8.供試品(070601桂林三金藥業(yè)股份有限公司)。薄層板以0. 3%羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑制備的硅膠G板(500 μ m)。展開劑正丁醇-冰醋酸-水(3 1 1)。顯色與檢視噴以5%茚三酮乙醇溶液，于105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下觀察。展開溫度t :25°C相對濕度RH :70%將供試液通過強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂柱凈化處理，用氨溶液洗脫，可要進(jìn)一步去 除無機(jī)鹽的干擾，所得的薄層色譜圖斑點(diǎn)集中清晰，分離度較好，同法制備的西瓜霜陰性對 照無干擾(圖幻。其中樣品
1.賴氨酸(廣州藥檢所提供留樣0905JSY0337)；2.精氨酸(AJIN0M0T0 CO. 701cc65)；3.脯氨酸(廣州藥檢所留樣1003JSY0200)；4.天門冬氨酸(AJIN0M0T0 CO. K900145)；5.谷氨酸(廣州藥檢所提供留樣1112JSY0216)；6.纈氨酸(AJIN0M0T0 CO. 706KL08)；7.苯丙氨酸(AJIN0M0T0 CO. 702NE93)；8 11.供試品(070601、070701、070801、070803桂林三金藥業(yè)股份有限公司)12.西瓜霜陰性對照(桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)。薄層板以0. 3%羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑制備的硅膠G板(500 μ m)。展開劑正丁醇-冰醋酸-水(3 1 1)顯色與檢視噴以5%茚三酮乙醇溶液，于105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下觀察。展開溫度t :25°C相對濕度RH :70%在方法建立的過程中，曾參考《中國藥典》2005年版一部“西瓜霜”項(xiàng)下硫酸鈉含 量測定方法，于鹽酸水解液中加入氯化鋇試液，產(chǎn)生硫酸鋇沉淀，以去除硫酸鈉的干擾，因 為樣品中所含硫酸鈉的量較大，需要加入大量的氯化鋇試液，而且產(chǎn)生的氯化鈉仍會干擾 鑒別，因此方法不可行。為簡化操作，曾試用不上柱，于水解液中直接加入強(qiáng)酸性陽離子交 換樹脂，攪拌使氨基酸吸附，先用水分次洗滌除去無機(jī)鹽，再用氨溶液將氨基酸洗出，但是 用此法硫酸鈉不能完全除去，色譜圖中斑點(diǎn)仍有少許拖尾，此方法也未采用。方法中對西瓜 霜蛋白水解的時(shí)間也分別作了水解2小時(shí)和6小時(shí)比較，所得的色譜圖基本一致，因此，水 解時(shí)間定為2小時(shí)。不同品種、季節(jié)及產(chǎn)地的西瓜，氨基酸的種類和含量有所不同，方法建立中在選擇 氨基酸對照品時(shí)，根據(jù)桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供的廣西壯族自治區(qū)分析測試研究 中心關(guān)于西瓜霜中氨基酸的檢驗(yàn)報(bào)告，主要以含量較高的天門冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸、纈 氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸和精氨酸進(jìn)行甄別篩選，同時(shí)也采用了絲氨酸、異亮氨酸、組氨酸、 色氨酸、蛋氨酸、甘氨酸、蘇氨酸、丙氨酸和亮氨酸進(jìn)行篩選，從企業(yè)提供的4批樣品測定 結(jié)果(圖2)可以看出，4批樣品中均能檢出谷氨酸、苯丙氨酸與纈氨酸(量較少)，批號 為070701、070801和070803的樣品中均能檢出賴氨酸和精氨酸，其中批號為070803的樣 品含量較高，薄層色譜中斑點(diǎn)清晰，批號為070601的樣品未能檢出此兩種氨基酸。在采用 MerckeO預(yù)制板，適當(dāng)增加展開劑的極性后，供試品薄層色譜中，可檢出與天門冬氨酸薄層 Rf值一致的斑點(diǎn)(圖 -2~)，但采用手工鋪制的硅膠G薄層板時(shí)，在與天門冬氨酸Rf值相同 位置上，有一紅色斑點(diǎn)干擾，未達(dá)到完全分離，因此，為保證薄層色譜的重現(xiàn)性，選取樣品中 含量較高、薄層分離度好的谷氨酸和苯丙氨酸作為對照品。其它氨基酸如絲氨酸、異亮氨 酸、組氨酸、色氨酸、蛋氨酸、甘氨酸、蘇氨酸、丙氨酸和亮氨酸與供試品色譜中斑點(diǎn)的Rf值 有差異(圖6)。其中樣品1.賴氨酸(廣州藥檢所留樣0905JSY0337)；2.精氨酸(AJIN0M0T0 CO. 701CC65)；
3.天門冬氨酸(AJIN0M0T0 CO. K900145)；4.谷氨酸(廣州藥檢所留樣1112JSY0216)；5.纈氨酸(AJIN0M0T0 CO. 706KL08)；6.苯丙氨酸(AJIN0M0T0 CO. 702NE93)；7.脯氨酸(廣州藥檢所留樣1003JSY0200)；8.供試品(070803桂林三金藥業(yè)股份有限公司)；9.絲氨酸(廣州藥檢所留樣1005JSY0203)；10.異亮氨酸(AJIN0M0T0 CO. K900599)；11.組氨酸(廣州藥檢所留樣0803FSY0024)；12.色氨酸；13.蛋氨酸(廣州藥檢所留樣1052JSY0193)；14.甘氨酸(廣州藥檢所留樣1005JSY0203)；15.蘇氨酸(AJIN0M0T0 CO. K900760)；16.丙氨酸；17.亮氨酸；18.供試品(070801桂林三金藥業(yè)股份有限公司)。薄層板硅膠60F254 板(Merck)。展開劑正丁醇-冰醋酸-水(3 1.5 1.5)顯色與檢視噴以5%茚三酮乙醇溶液，于105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下觀察。展開溫度t :25°C相對濕度RH 60%在相同溫度、相對濕度條件下，比較不同薄層板的層析效果，結(jié)果硅膠60預(yù)制板 (Merck)較手工鋪制的硅膠G薄層板斑點(diǎn)更為集中，但Rf值稍低，因此把展開劑調(diào)整為正丁 醇-冰醋酸-水(3 1.5 1.5)，使色譜圖中待檢測成分的薄層Rf值適中，分離度提高 (見圖7-1、7-幻。青島海洋化工廠生產(chǎn)的硅膠G預(yù)制板較手工鋪制的硅膠G薄層板斑點(diǎn)集 中，但分離度比硅膠60預(yù)制板(Merck)稍差(圖7-3)?？紤]到方法的通用性，標(biāo)準(zhǔn)正文采 用以0.3%羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G板。薄層鑒別色譜圖見圖7-1、7-2、7-3，其中樣品1.賴氨酸(廣州藥檢所留樣0905JSY0337)；2.精氨酸(AJIN0M0T0 CO. 701cc65)；3.天門冬氨酸(AJIN0M0T0 CO. K900145)；4.谷氨酸(廣州藥檢所留樣1112JSY0216)；5.纈氨酸(AJIN0M0T0 CO. 706KL08)；6.苯丙氨酸(AJIN0M0T0 CO. 702NE93)；7 10.供試品(批號070601、070701、070801、070803桂林三金藥業(yè)股份有限公
司)；11.西瓜霜陰性對照(桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)。薄層板圖7-1 以0. 3%羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑制備的硅膠G板；圖7-2 硅膠 60 預(yù)制板(Merck)。
圖7-3 硅膠G預(yù)制板(青島海洋化工廠)。展開劑圖7-1 正丁醇-冰醋酸-水(3 1 1)；圖7-2 ;7_3 正丁醇-冰醋酸-水(3 1.5 1.5)顯色與檢視噴以5%茚三酮乙醇溶液，于105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下觀察。展開溫度t :25°C相對濕度RH :70%固定薄層板和相對濕度，比較在不同溫度(25°C和27°C )條件下展開的薄層效果， 結(jié)果表明在此兩種溫度條件下展開對薄層色譜效果影響不大(見圖7-2和圖8)。圖8:樣品1.賴氨酸(廣州藥檢所留樣0905JSY0337)；2.精氨酸(AJIN0M0T0 CO. 701cc65)；3.天門冬氨酸(AJIN0M0T0 CO. K900145)；4.谷氨酸(廣州藥檢所留樣1112JSY0216)；5.纈氨酸(AJIN0M0T0 CO. 706KL08)；6.苯丙氨酸(AJIN0M0T0 CO. 702NE93)；7.供試品(批號070803桂林三金藥業(yè)股份有限公司)。薄層板硅膠60預(yù)制板(Merck)。展開劑正丁醇-冰醋酸-水(3 1.5 1. 5)。顯色與檢視噴以5%茚三酮乙醇溶液，于105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下觀察。展開溫度t :27°C相對濕度RH :70%固定薄層板和溫度，比較在不同相對濕度(70%和40% )條件下展開的薄層效果， 結(jié)果表明在此兩種相對濕度條件下展開對薄層色譜效果無顯著影響，低相對濕度時(shí)，斑點(diǎn) 的Rf值稍低，但分離度稍有提高(見圖7-2和圖9)。圖9:樣品1.賴氨酸(廣州藥檢所留樣0905JSY0337)；2.精氨酸(AJIN0M0T0 CO. 701cc65)；3.天門冬氨酸(AJIN0M0T0 CO. K900145)；4.谷氨酸(廣州藥檢所留樣1112JSY0216)；5.纈氨酸(AJIN0M0T0 CO. 706KL08)；6.苯丙氨酸(AJIN0M0T0 CO. 702NE93)；7.供試品(批號070803桂林三金藥業(yè)股份有限公司)。薄層板硅膠60預(yù)制板(Merck)。展開劑正丁醇-冰醋酸-水(3 1.5 1.5)。顯色與檢視噴以5%茚三酮乙醇溶液，于105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下觀察。展開溫度t :25°C相對濕度RH 40%對該鑒別方法進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證，供試品、對照品溶液的制備同擬定標(biāo)準(zhǔn)正文，陰性 對照溶液是分別按處方比例稱取除西瓜外其余輔料，按制法制成陰性樣品，再按正文供試
12品溶液的方法依法制得。展開及檢視條件同正文。結(jié)果表明，供試品色譜中，在與對照品色 譜相應(yīng)位置上均顯相同顏色的斑點(diǎn)。經(jīng)方法驗(yàn)證，結(jié)果薄層色譜分離效果好，斑點(diǎn)清晰明 顯，重現(xiàn)性、專屬性好，陰性對照無干擾，3批樣品按此方法進(jìn)行檢驗(yàn)，均符合規(guī)定。故收入正 文。見圖10。其中樣品1.西瓜霜陰性對照(桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)2.西瓜霜(批號080501，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)3.西瓜霜(批號080503，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)4. L-谷氨酸對照品(中檢所提供，鑒別用，批號:111576-200201)(位置=B)苯丙氨酸對照品(中檢所提供，鑒別用，批號111615-200301)(位置A)5.西瓜霜(批號080805，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)薄層板以0. 3%羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑制備的硅膠G板(500 μ m)展開劑正丁醇-冰醋酸-水(3 1 1)顯色與檢視噴以5%茚三酮乙醇溶液，于105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下觀
察展開溫度t :30°C相對濕度RH :72%為簡化操作，實(shí)驗(yàn)中比較有無“在殘?jiān)拔龀龅慕Y(jié)晶中加入70%乙醇20ml (分4 次，每次約5ml)，攪拌，使殘?jiān)芙?，靜置，傾出上清液，合并，蒸干”的步驟，減少此步驟硫酸 鈉不能完全除去，色譜圖中斑點(diǎn)仍有少許拖尾，此方法也未采用(見圖11)。其中1.西瓜霜陰性對照(桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)2.西瓜霜(批號080501，未經(jīng)過70%乙醇攪拌洗滌)3.苯丙氨酸對照品(中檢所提供，鑒別用，批號111615-200301)4. L-谷氨酸對照品(中檢所提供，鑒別用，批號111576-200201)5.西瓜霜(批號080503，經(jīng)過70%乙醇攪拌洗滌)薄層板以0. 3%羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑制備的硅膠G板(500μπι)展開劑正丁醇-冰醋酸-水(3 1 1)顯色與檢視噴以5%茚三酮乙醇溶液，于105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下觀
察展開溫度t :30°C相對濕度RH :72%同時(shí)還對該薄層進(jìn)行耐用性試驗(yàn)，分別考察手工制版和普通預(yù)制版(見圖12 13)、不同溫度、相對濕度(見圖14)、條狀點(diǎn)樣(見圖15)對薄層色譜的影響，結(jié)果表明本法 重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)。圖12氨基酸薄層鑒別色譜圖(手工制版)1.西瓜霜陰性對照(桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)2.西瓜霜(批號080501，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)3. L-谷氨酸對照品(中檢所提供，鑒別用，批號111576-200201)(位置B)苯丙氨酸對照品(中檢所提供，鑒別用，批號111615-200301)(位置A)4.西瓜霜(批號080503，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)5.西瓜霜(批號080805，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)薄層板以0. 3%羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑制備的硅膠G板(500μπι)
展開劑正丁醇-冰醋酸-水(3 1 1)顯色與檢視噴以5%茚三酮乙醇溶液，于105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下觀
察展開溫度t :30°C相對濕度RH :72%圖13氨基酸薄層鑒別色譜圖(普通預(yù)制版)1.西瓜霜(批號080501，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)2.西瓜霜(批號080503，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)3.苯丙氨酸對照品(中檢所提供，鑒別用，批號111615-200301)4. L-谷氨酸對照品(中檢所提供，鑒別用，批號111576-200201)5.西瓜霜(批號080805，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)薄層板硅膠G預(yù)制板(青島海洋化工廠生產(chǎn)，批號20081211)展開劑正丁醇-冰醋酸-水(3 1 1)顯色與檢視噴以5%茚三酮乙醇溶液，于105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下觀
察展開溫度t :30°C相對濕度RH :72%圖14氨基酸薄層鑒別色譜圖(相對濕度)1.西瓜霜陰性對照(桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)2.西瓜霜(批號080501，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)3.西瓜霜(批號080503，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)4. L-谷氨酸對照品(中檢所提供，鑒別用，批號:111576-200201)(位置=B)苯丙氨酸對照品(中檢所提供，鑒別用，批號111615-200301)(位置A)5.西瓜霜(批號080805，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)薄層板以0. 3%羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑制備的硅膠G板(500μπι)展開劑正丁醇-冰醋酸-水(3 1 1)顯色與檢視噴以5%茚三酮乙醇溶液，于105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下觀
察展開溫度t :25°C相對濕度RH :72%圖15氨基酸薄層鑒別色譜圖(條狀點(diǎn)樣)1.西瓜霜(批號080501，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)2.西瓜霜(批號080503，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)
3. L-谷氨酸對照品(中檢所提供，鑒別用，批號:111576-200201)(位置=B)苯丙氨酸對照品(中檢所提供，鑒別用，批號111615-200301)(位置A)4.西瓜霜(批號080805，桂林三金藥業(yè)股份有限公司提供)薄層板以0. 3%羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑制備的硅膠G板(500μπι)展開劑正丁醇-冰醋酸-水(3 1 1)顯色與檢視噴以5%茚三酮乙醇溶液，于105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下觀
察展開溫度t :30°C相對濕度RH :72%此外，發(fā)明人對西瓜霜中的含氮量進(jìn)行了大量研究，內(nèi)容如下
西瓜霜為葫蘆科植物西瓜的成熟新鮮果實(shí)與皮硝經(jīng)加工制成，為更全面地反映西 瓜霜的質(zhì)量，我們擬增加一個(gè)有機(jī)成分的質(zhì)量指標(biāo)。成熟西瓜的水溶性成分，主要由碳水化 合物和氨基酸類成分組成，前者約占干重的80 90%，后者約占干重的10%。相對而言， 氨基酸類成分更能反映西瓜霜的質(zhì)量，因?yàn)樗菢?gòu)建細(xì)胞、修復(fù)組織的基礎(chǔ)材料，能促進(jìn)傷 口、潰瘍的愈合，與西瓜霜的功用一致。但氨基酸種類多，單一氨基酸的含量較低且波動較 大，如以其為指標(biāo)，分析費(fèi)用高，且因不穩(wěn)定而難于應(yīng)用。因此，選擇“含氮量”代表氨基酸 類成分，希望作為新增含量測定內(nèi)容用于西瓜霜的質(zhì)量控制。按照中國藥典2005年版一部附錄IXL氮測定法的第一法(常量法)擬定，經(jīng)方法 學(xué)考察及多批樣品測定，本含量測定方法簡便易行，準(zhǔn)確可靠，具體方法學(xué)研究情況如下1、樣品取樣量的確定經(jīng)過初步試驗(yàn)，西瓜霜含氮量約為0. 以上，根據(jù)氮測定法第一法(常量法)取 樣要求，取樣量約相當(dāng)于含氮量25 30mg，經(jīng)過折算，西瓜霜取樣量應(yīng)為20 25g。2、硫酸用量的確定由于西瓜霜的取樣量相對較大，因此為了使消解作用完全，在試驗(yàn)中適當(dāng)增加了 硫酸的用量，同時(shí)按比例相應(yīng)地增加40%氫氧化鈉溶液的用量，其余的試驗(yàn)條件和參數(shù)不 變。選用080805批樣品進(jìn)行考察，具體試驗(yàn)情況如下表1硫酸用量對比結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種西瓜霜的質(zhì)量控制方法，該方法包括西瓜霜的含量測定方法和/或鑒別方法， 其特征在于所述的含量測定方法為含氮量的測定取西瓜霜20 25g，精密稱定，連同稱取的濾紙置干燥的500ml凱氏燒 瓶中；然后依次加入無水硫酸鈉IOg和硫酸銅粉末0. 5g，再沿瓶壁緩緩加硫酸20-40ml ；在 凱氏燒瓶口放一小漏斗并使凱氏燒瓶成45°斜置，用直火緩緩加熱，使溶液的溫度保持在 沸點(diǎn)以下，等泡沸停止，強(qiáng)熱至沸騰，待溶液成澄明的綠色后，繼續(xù)加熱25-45分鐘，放冷， 沿瓶壁緩緩加水220480ml，振搖使混合，放冷后，加40%氫氧化鈉溶液100_120ml，沿瓶壁 流至瓶底，自成一液層，照2005年版《中國藥典》附錄IX L第一法氮測定法測定，即得；西 瓜霜按干燥品計(jì)算，含總氮量不得少于0. 10% ；所述的鑒別方法為氨基酸的鑒別取西瓜霜l_3g，加入6mol/L鹽酸溶液10_30ml，于沸水浴中加熱回流 1-4小時(shí)，放冷，濾過，濾液蒸干，用50-80%乙醇20ml分次洗滌殘?jiān)拔龀龅慕Y(jié)晶，攪拌，濾 過，合并濾液，蒸干，殘?jiān)盟?5_40ml溶解，上強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂柱，用50-300ml水洗 脫，棄去水液，再用氨溶液50-200ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)?0%乙醇Iml使溶解， 作為供試品溶液，另取谷氨酸對照品和苯丙氨酸對照品適量，分別用70%乙醇溶解制成每 Iml各含0. 5mg的溶液，作為對照品溶液；照2005年版《中國藥典》附錄VIB薄層色譜法試 驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5 μ 1、兩種對照品溶液各1 μ 1，以0. 5cm寬條帶狀分別點(diǎn)于同一硅 膠G板上，以正丁醇冰醋酸水為展開劑，展開，取出，晾干，顯色；供試品色譜中，在與對照品 色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述的含量測定方法還包括硫酸鈉的含量測定取西瓜霜適量，置102°C -120°C干燥至恒重后，取0. 1-2. 0g，精密稱定，加水30-750ml，振搖5_30分鐘，濾過，沉淀用水50ml分3次洗滌，濾過，合并濾液， 加鹽酸1ml，煮沸，不斷攪拌，并緩緩加入熱氯化鋇試液，至不再生成沉淀，置水浴上加熱 20-60分鐘，靜置1小時(shí)，用無灰濾紙或稱定重量的古氏坩堝濾過，沉淀用水分次洗滌，至洗 液不再顯氯化物的反應(yīng)，干燥，并熾灼至恒重，精密稱定，與0. 6086相乘，即得供試樣中含 有硫酸鈉的重量；西瓜霜按干燥品計(jì)算，含硫酸鈉不得少于90. 0%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述的鑒別方法還包 括以下鑒別方法中的一種或多種a、鈉鹽的鑒別取鉬絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，火焰即顯鮮黃色；b、硫酸鹽的鑒別取供試品溶液，加氯化鋇試液，即生成白色沉淀分離，沉淀在鹽酸 或硝酸中均不溶解。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述的質(zhì)量控制方法 還包括西瓜霜的檢查方法，所述的檢查方法為以下檢查方法中的一種或多種a、重金屬檢查取本品l.Og，依2005年版《中國藥典》附錄IXE第二法檢查，含重金屬 不得過百萬分之十；b、砷鹽檢查取本品0.20g，加水23ml溶解，加鹽酸5ml，依2005年版《中國藥典》附錄 IX F第一法檢查，含砷量不得過百萬分之十。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述的含氮量的測定方法為取西瓜霜22g，精密稱定，連同稱取的濾紙置干燥的500ml凱氏燒瓶中；然后依次加入 無水硫酸鈉IOg和硫酸銅粉末0. 5g，再沿瓶壁緩緩加硫酸30ml ；在凱氏燒瓶口放一小漏斗 并使凱氏燒瓶成45°斜置，用直火緩緩加熱，使溶液的溫度保持在沸點(diǎn)以下，等泡沸停止， 強(qiáng)熱至沸騰，俟溶液成澄明的綠色后，繼續(xù)加熱30分鐘，放冷；沿瓶壁緩緩加水250ml，振搖 使混合，放冷后，加40%氫氧化鈉溶液lUml，沿瓶壁流至瓶底，自成一液層，照2005年版 《中國藥典》附錄IX L第一法氮測定法測定，即得；西瓜霜按干燥品計(jì)算，含總氮量不得少于 0. 10%。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述的硫酸鈉的含量測定方法為取西瓜霜適量，置105°C干燥至恒重后，取0. 4g，精密稱定，加水150ml，振搖10分鐘，濾 過，沉淀用水50ml分3次洗滌，濾過，合并濾液，加鹽酸1ml，煮沸，不斷攪拌，并緩緩加入熱 氯化鋇試液，至不再生成沉淀，置水浴上加熱30分鐘，靜置1小時(shí)，用無灰濾紙或稱定重量 的古氏坩堝濾過，沉淀用水分次洗滌，至洗液不再顯氯化物的反應(yīng)，干燥，并熾灼至恒重，精 密稱定，與0. 6086相乘，即得供試樣中含有硫酸鈉的重量；西瓜霜按干燥品計(jì)算，含硫酸鈉 不得少于90. 0%o
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述的檢查方法為砷鹽檢查取西瓜霜0. 20g，加水23ml溶解，加鹽酸5ml，依2005年版《中國藥典》附錄 IX F第一法檢查，含砷量不得過百萬分之十。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述的氨基酸的鑒別方法為取 西瓜霜2g，加入6mol/L鹽酸溶液15ml，于沸水浴中加熱回流2小時(shí)，放冷，濾過，濾液蒸干， 用70%乙醇20ml分次洗滌殘?jiān)拔龀龅慕Y(jié)晶，攪拌，濾過，合并濾液，蒸干，殘?jiān)盟?0ml 溶解，上732強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂柱，用水200ml洗脫，棄去水液，再用氨溶液IOOml洗 脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)?0%乙醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取谷氨酸對照品和 苯丙氨酸對照品適量，分別用70%乙醇溶解制成每Iml各含0. 5mg的溶液，作為對照品溶 液；照2005年版《中國藥典》附錄VI B薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液5 μ 1、兩種 對照品溶液各1 μ 1，以0. 5cm寬條帶狀分別點(diǎn)于同一硅膠G板上，以正丁醇冰醋酸水為展開 劑，展開，取出，晾干，噴以5%茚三酮乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜 中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述的氨基酸的鑒別方法中， 薄層色譜法展開溫度t為5°C -30°C，相對濕度RH為35% -80%，展開劑正丁醇冰醋酸-水 的體積比為2 1 1-4 1 1。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述的氨基酸的鑒別方法中， 薄層色譜法展開溫度t為27V，相對濕度RH為72 %，展開劑正丁醇-冰醋酸水的體積比為 3:1:1。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種西瓜霜的質(zhì)量控制方法，該方法可選包括西瓜霜的鑒別方法、檢查方法及含量測定方法，所述的鑒別方法為氨基酸、鈉鹽及硫酸鹽鑒別中的一種或多種；所述的檢查為重金屬檢查、砷鹽檢查中的一種或多種；所述的含量測定包括含氮總量和硫酸鈉的含量。該方法是一種原理科學(xué)、操作性強(qiáng)、重現(xiàn)性高、能夠有效控制西瓜霜的質(zhì)量的質(zhì)量控制方法。
文檔編號G01N31/00GK102125598SQ20101030022
公開日2011年7月20日 申請日期2010年1月12日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月12日
發(fā)明者鄒節(jié)明 申請人:桂林三金藥業(yè)股份有限公司