專利名稱：膀胱癌blca-4蛋白尿液快速檢測(cè)試紙的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種檢測(cè)試紙，特別涉及一種膀胱癌BLCA-4蛋白尿液快速檢測(cè) 試紙。
背景技術(shù)：
目前膀胱癌術(shù)后復(fù)查的“金標(biāo)準(zhǔn)”是膀胱鏡檢查+尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查。通過(guò)膀胱 鏡取病變組織活檢的方法是診斷膀胱癌最可靠的方法，但是一種創(chuàng)傷性檢查，檢查過(guò)程中 不適感強(qiáng)烈，檢查后普遍會(huì)出現(xiàn)血尿、排尿異常、甚至感染的癥狀，令許多患者不能耐受、堅(jiān) 持，而且膀胱鏡檢查的敏感性和準(zhǔn)確性與檢查人員的經(jīng)驗(yàn)密切相關(guān)，對(duì)于原位癌和病變區(qū) 粘膜未發(fā)生明顯改變的早期病變，膀胱鏡檢查敏感性差、漏診率高；尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查的特 異性可以達(dá)到85-100%，但是敏感性只有13-75%，而且容易受到膀胱內(nèi)炎癥、結(jié)石、灌注等 因素的影響；膀胱超聲可以作為一種復(fù)查和篩查的方法，但對(duì)于早期病變也容易發(fā)生漏診， 同樣，超聲檢查的敏感性和準(zhǔn)確性也與檢查人員的經(jīng)驗(yàn)密切相關(guān)。因此，迫切需要尋找一種 微創(chuàng)甚至是無(wú)創(chuàng)、敏感性和特異性高的膀胱癌檢測(cè)方法。膀胱癌的主體部分浸泡在尿液中，癌細(xì)胞分泌的產(chǎn)物及壞死凋亡細(xì)胞的產(chǎn)物也排 入尿液中，因此通過(guò)尿液檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物應(yīng)該是一種方便、無(wú)創(chuàng)的檢查方法。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn) 多種膀胱癌的腫瘤標(biāo)志蛋白，其中，膀胱腫瘤特異性核基質(zhì)蛋白4 (BLCA-4)越來(lái)越受到重 視。BLCA-4是一種只表達(dá)在膀胱癌細(xì)胞核中的蛋白，在腫瘤細(xì)胞的增殖分裂中起著重要作 用，可以隨著凋亡細(xì)胞核的溶解釋放到尿液中，而這種蛋白在正常膀胱組織不表達(dá)，因此具 有高度的特異度。有研究顯示，采用免疫法測(cè)定膀胱癌患者尿液中的BLCA-4蛋白，敏感度 達(dá)到96%、特異度達(dá)到100%，遠(yuǎn)高于其它的腫瘤標(biāo)志物，而且最大的優(yōu)勢(shì)是對(duì)早期的膀胱癌 也有很好的檢出效果，且不受膀胱內(nèi)炎癥、結(jié)石、灌注等因素的影響。目前尿BLCA-4蛋白的 臨床檢測(cè)主要采用酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(ELISA)方法檢測(cè)，但是這種方法需要特殊儀器和 專業(yè)人員，且操作復(fù)雜、耗時(shí)，費(fèi)用昂貴，不能滿足準(zhǔn)確、靈敏、快速、經(jīng)濟(jì)的檢查要求，病人 無(wú)法在家中對(duì)自己的病情進(jìn)行監(jiān)測(cè)。迄今為止，未見(jiàn)有關(guān)膀胱癌BLCA-4蛋白尿液快速檢測(cè)試紙的研究報(bào)道。 發(fā)明內(nèi)容有鑒于此，本實(shí)用新型的目的在于針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種特異性和靈敏 度高、方便快速的膀胱癌BLCA-4蛋白尿液快速檢測(cè)試紙。為達(dá)到上述目的，本實(shí)用新型采用如下技術(shù)方案本實(shí)用新型的膀胱癌BLCA-4蛋白尿液快速檢測(cè)試紙，包括背襯和設(shè)置在背襯上 且從左至右依次相連的樣品墊、結(jié)合墊和檢測(cè)墊，所述結(jié)合墊上設(shè)置有膠體金與抗BLCA-4 的單克隆抗體結(jié)合的金標(biāo)抗體復(fù)合物層，所述檢測(cè)墊上橫向設(shè)置有抗BLCA-4的多克隆抗 體檢測(cè)線。進(jìn)一步，還包括固定設(shè)置在背襯上的吸液墊，所述檢測(cè)墊一端與結(jié)合墊相連，另一液墊相連；進(jìn)一步，所述檢測(cè)墊上檢測(cè)線與吸液墊之間設(shè)置有與檢測(cè)線平行的抗鼠的二抗質(zhì) 控線；進(jìn)一步，所述檢測(cè)墊貼附于背襯上，結(jié)合墊位于檢測(cè)墊上部與其部分重疊，吸液墊 位于檢測(cè)墊上部與其部分重疊，樣品墊位于結(jié)合墊上部與其部分重疊；進(jìn)一步，所述檢測(cè)墊為硝酸纖維素膜；進(jìn)一步，所述樣品墊和結(jié)合墊為玻璃纖維素膜。本實(shí)用新型的有益效果在于本實(shí)用新型的膀胱癌BLCA-4蛋白尿液快速檢測(cè)試 紙檢測(cè)特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷直觀可靠、易于掌握，為膀胱癌的大規(guī)模人 群篩查、膀胱癌術(shù)后病人的自我檢測(cè)提供方便可靠的方法；本實(shí)用新型將檢測(cè)BLCA-4蛋白 和膠體金免疫層析法結(jié)合起來(lái)，是一項(xiàng)很有前途的膀胱癌快速檢測(cè)、篩查方法，對(duì)于早期發(fā) 現(xiàn)新增病例和復(fù)發(fā)病例、及早采取有效的治療、提高患者生活質(zhì)量、節(jié)約衛(wèi)生資源，具有重 要意義。

為了使本實(shí)用新型的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用 新型作進(jìn)一步的詳細(xì)描述，其中圖1為本實(shí)用新型的結(jié)構(gòu)示意圖；圖2為圖1沿A-A向剖視圖。
具體實(shí)施方式
以下將參照附圖，對(duì)本實(shí)用新型的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。圖1為本實(shí)用新型的結(jié)構(gòu)示意圖，圖2為圖1沿A-A向剖視圖，如圖所示本實(shí)施 例的膀胱癌BLCA-4蛋白尿液快速檢測(cè)試紙，包括背襯7和設(shè)置在背襯7上且從左至右依次 相連的樣品墊1、結(jié)合墊2和檢測(cè)墊3，所述結(jié)合墊2上設(shè)置有膠體金與抗BLCA-4的單克隆 抗體結(jié)合的金標(biāo)抗體復(fù)合物層8，所述檢測(cè)墊3上橫向設(shè)置有抗BLCA-4的多克隆抗體檢測(cè) 線4。本實(shí)施例中，還包括固定設(shè)置在背襯7上的吸液墊6，所述檢測(cè)墊3 —端與結(jié)合墊 2相連，另一端與吸液墊6相連；吸液墊6為吸水濾紙，可以有效的吸收檢測(cè)完成后剩余的 尿液，干凈整潔。本實(shí)施例中，所述檢測(cè)墊3上檢測(cè)線4與吸液墊6之間設(shè)置有與檢測(cè)線4平行的 抗鼠的二抗質(zhì)控線5 ；通過(guò)質(zhì)控線5可以判斷操作是否失誤或檢測(cè)試紙是否失效，是否需要 重新檢測(cè)，以提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。本實(shí)施例中，所述檢測(cè)墊3貼附于背襯7上，結(jié)合墊2位于檢測(cè)墊3上部與其部分 重疊，吸液墊6位于檢測(cè)墊3上部與其部分重疊，樣品墊1位于結(jié)合墊2上部與其部分重疊； 采用此結(jié)構(gòu)，可以使檢測(cè)試紙具有較好的層析效果。本實(shí)施例中，所述檢測(cè)墊3為硝酸纖維素膜。本實(shí)施例中，所述樣品墊1和結(jié)合墊2為玻璃纖維素膜。使用時(shí)，待測(cè)尿液滴在樣品墊1上，尿液被樣品墊1吸收并通過(guò)毛細(xì)作用向檢測(cè)試紙的吸液墊6端層析，當(dāng)流經(jīng)結(jié)合墊2時(shí)，結(jié)合墊2上的金標(biāo)抗體便會(huì)被溶解；如果待測(cè)尿 液中含有BLCA-4蛋白抗原，它就會(huì)與金標(biāo)抗體反應(yīng)后形成“膠體金-抗原-抗體”復(fù)合體， 該復(fù)合體隨毛細(xì)作用移動(dòng)至硝酸纖維素膜上的檢測(cè)線4時(shí)，與檢測(cè)線4內(nèi)多克隆抗體發(fā)生 反應(yīng)而被截留，膠體金在截留處形成肉眼可見(jiàn)的紅色條帶，多余的金標(biāo)抗體移動(dòng)至質(zhì)控線5 時(shí)，與二抗結(jié)合而凝聚顯色，因此，當(dāng)檢測(cè)試紙上的檢測(cè)線4與質(zhì)控線5均顯紅色時(shí)，判為陽(yáng) 性結(jié)果；反之，如果待測(cè)尿液中不含有BLCA-4蛋白抗原，就不會(huì)形成“膠體金-抗原-抗體” 復(fù)合體，僅有金標(biāo)抗體，檢測(cè)線4不顯紅色，而金標(biāo)抗體移動(dòng)至質(zhì)控線5時(shí)，與二抗結(jié)合而凝 聚顯色，因此，當(dāng)檢測(cè)試紙上的檢測(cè)線4不顯紅色而質(zhì)控線5顯紅色時(shí)，判為陰性結(jié)果；當(dāng)檢 測(cè)試紙的質(zhì)控線5不顯紅色時(shí)，不管檢測(cè)線4是否顯紅色，結(jié)果都判為操作失誤或檢測(cè)試紙 失效，需重新檢測(cè)。 最后說(shuō)明的是，以上實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管通過(guò)參 照本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例已經(jīng)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述，但本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可 以在形式上和細(xì)節(jié)上對(duì)其作出各種各樣的改變，而不偏離所附權(quán)利要求書(shū)所限定的本發(fā)明 的精神和范圍。
權(quán)利要求1.一種膀胱癌BLCA-4蛋白尿液快速檢測(cè)試紙，包括背襯(7)和設(shè)置在背襯(7)上且從 左至右依次相連的樣品墊(1)、結(jié)合墊(2)和檢測(cè)墊(3)，其特征在于所述結(jié)合墊(2)上設(shè) 置有膠體金與抗BLCA-4的單克隆抗體結(jié)合的金標(biāo)抗體復(fù)合物層(8)，所述檢測(cè)墊(3)上橫 向設(shè)置有抗BLCA-4的多克隆抗體檢測(cè)線(4)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膀胱癌BLCA-4蛋白尿液快速檢測(cè)試紙，其特征在于還包括 固定設(shè)置在背襯(7)上的吸液墊(6)，所述檢測(cè)墊(3)—端與結(jié)合墊(2)相連，另一端與吸液 墊(6)相連。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的膀胱癌BLCA-4蛋白尿液快速檢測(cè)試紙，其特征在于所述檢 測(cè)墊(3)上檢測(cè)線(4)與吸液墊(6)之間設(shè)置有與檢測(cè)線(4)平行的抗鼠的二抗質(zhì)控線(5)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的膀胱癌BLCA-4蛋白尿液快速檢測(cè)試紙，其特征在于所述檢 測(cè)墊(3)貼附于背襯(7)上，結(jié)合墊(2)位于檢測(cè)墊(3)上部與其部分重疊，吸液墊(6)位 于檢測(cè)墊(3)上部與其部分重疊，樣品墊(1)位于結(jié)合墊(2)上部與其部分重疊。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任意一項(xiàng)所述的膀胱癌BLCA-4蛋白尿液快速檢測(cè)試紙，其特征 在于所述檢測(cè)墊(3)為硝酸纖維素膜。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至4任意一項(xiàng)所述的膀胱癌BLCA-4蛋白尿液快速檢測(cè)試紙，其特 征在于所述樣品墊(1)和結(jié)合墊(2)為玻璃纖維素膜。
專利摘要本實(shí)用新型公開(kāi)了一種膀胱癌BLCA-4蛋白尿液快速檢測(cè)試紙，包括背襯和設(shè)置在背襯上且從左至右依次相連的樣品墊、結(jié)合墊和檢測(cè)墊，所述結(jié)合墊上設(shè)置有膠體金與抗BLCA-4的單克隆抗體結(jié)合的金標(biāo)抗體復(fù)合物層，所述檢測(cè)墊上橫向設(shè)置有抗BLCA-4的多克隆抗體檢測(cè)線；本實(shí)用新型的膀胱癌BLCA-4蛋白尿液快速檢測(cè)試紙檢測(cè)特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷直觀可靠、易于掌握，為膀胱癌的大規(guī)模人群篩查、膀胱癌術(shù)后病人的自我檢測(cè)提供方便可靠的方法。
文檔編號(hào)G01N33/577GK201935922SQ20102069079
公開(kāi)日2011年8月17日 申請(qǐng)日期2010年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月30日
發(fā)明者周占松, 季惠翔, 賈晉偉, 陳志文 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院