專利名稱：光學上檢測溶解的微米級物體的方法
技術領域：
本發(fā)明領域在于，用于生物診斷和分析的接觸成像裝置和檢測方法。
背景技術：
在用于生物診斷的光學成像領域，如果關注除接觸成像以外的特定檢測，則通常使用兩種方法。這些方法是流式細胞測量術和熒光分子成像。流式細胞測量術是對攔截激光光束的各種細胞進行計數(shù)、特征化并且分類的有效技術。通過分析所產生的衍射圖，可以確定細胞的尺寸。熒光測量還允許區(qū)分細菌的各種族。該技術的缺點在于，需要昂貴且復雜的設備。另一個缺點在于，被掃描的立體角相對較小，從而限制了可研究區(qū)域。熒光分子成像因其非常有效，因此是廣泛用于生物診斷的方法。熒光測量對以下單事件敏感即使用熒光標記利用顯微鏡可以檢測各個分子。為了獲得較好的結果，必須將用于激發(fā)熒光分子的能量(稱為“激發(fā)”能量)與由熒光分子發(fā)出的能量(稱為“發(fā)射”能量)完全分開。盡管目前存在極好的濾光器，但這些濾光器對光束有限制，具體而言要求濾光器具有較小的光束孔徑。從而，本方法使用的光學系統(tǒng)較復雜且龐大。熒光成像還需要預先為待分析介質添加熒光團，從而該方法是入侵的。從而，希望用具有廣泛觀察區(qū)域的非入侵接觸成像裝置來代替這些復雜且昂貴的技術。這些技術不斷發(fā)展，因為它們允許在不需要上述先進光學系統(tǒng)的情形下對細胞、 細菌或更一般地講微米級粒子進行檢測。圖1示出了接觸成像裝置的示意圖。該裝置包括光源1，其可以是小型光源，例如發(fā)光二級管；光闌2，其限制光源的孔徑；以及成像器或傳感器3，其可以是CCD(電荷耦合器件)或CMOS(互補型金屬氧化物半導體)像點的矩陣。 該成像器主要包括與每一個像點相關的微型透鏡。光闌2不是必要的，但其存在是有益的。 在該矩陣3與光源1之間插有承載待研究的對象5的透明顯微鏡載片4。該對象是包含微米級粒子的溶液，這些粒子可以是生物粒子，諸如細胞或細菌，或者諸如微球體的其它粒子。被分析液滴放在透明載片4上，并且液滴的彎月面與周圍氣體接觸，該氣體可以是空氣。矩陣3連接至圖像顯示器和/或處理系統(tǒng)，圖1中未示出。二極管1與物體載片4相距的距離優(yōu)選大于1cm，并且可以為例如幾cm，典型地在2cm與5cm之間。對象與傳感器表面之間的距離在0.1mm與2mm之間。盡管這被稱為接觸成像，但待研究物體沒有放置成與傳感器直接接觸，而是相隔上述距離。載片由諸如二氧化硅或石英的透明材料制成，并且載片的厚度在幾十微米與Imm之間變化。在一些情形中，該沒有放大光學系統(tǒng)的極簡單裝置可以是諸如流式細胞測量術、高分辨率光學顯微鏡或熒光分子成像的常規(guī)光學計數(shù)方法的替代。過去幾年，幾個團隊已使用接觸成像取得了驚人的成果。如此，設在美國大學 UCLA(加州大學洛杉磯分校)的團隊使用接觸成像來檢測并且識別細菌。該方法在下述公幵物中進行了描述Sungkyu Seo 等人的"Lensfree holographic imaging for on-chipcytometry and diagnostics (用于片上細胞計數(shù)和診斷的無透鏡全息成像)”，The Royal Society of Chemistry, Dec. 5，2008-2009，9，777-787。在該公開物所描述的裝置中，細菌置于兩個板之間的液體中，該組件放置在像點矩陣上。用直徑為IOOym的光闌過濾單色光源，以獲得較好的空間相干性。如此，在像點矩陣中獲取每一個被沉浸細胞的衍射圖。根據作者所述，所獲得的衍射圖足于對菌種進行很好的分辨進而彼此區(qū)分開來，從而能夠對各個細菌進行具體計算。UCLA團隊提出的方法非常好。然而，存在以下缺點需要使用高靈敏度CCD傳感器，從而成本必然很高。如此，所使用的傳感器為Kodak Kai-10002高靈敏度CXD傳感器。如果使用諸如低成本的CMOS或CCD傳感器的標準傳感器，仍可以觀察直徑為1 μ m 的各種微米級粒子(諸如硅醇微球體、乳液微球體或大腸桿菌)的衍射圖。然而，檢測效率非常低，最好約1%。如此，圖2示出了沿傳感器軸線X獲取的且經過粒子P的中心的信號 S。在此，信號S表示由各個像素測得的沿縱坐標軸的灰度級，像素構成橫坐標軸，即圖2示出了曲線圖?？梢钥闯?，信噪比非常低，剛好允許檢測粒子。 根據本發(fā)明的方法不具有這些缺點。實際上，其允許利用接觸成像裝置而不需要高靈敏度傳感器來檢測微米級粒子。根據本發(fā)明的方法的主要特征在于，在具有待被檢測的微米級粒子(細菌、細胞、微球體等)的液滴蒸發(fā)時或所述液滴蒸發(fā)之后進行測量。如此，與現(xiàn)有技術中的測量不一樣，液滴沒有位于兩個板之間。另外，液滴必須與氣體(例如， 空氣)接觸，以使液滴能夠蒸發(fā)。這是因為，已經發(fā)現(xiàn)在蒸發(fā)期間或蒸發(fā)后進行檢測將很有效。

發(fā)明內容
更具體而言，本發(fā)明主題是通過接觸成像裝置檢測微米級或亞微米級粒子或生物的光學檢測方法，所述粒子或生物沉浸在液滴中，并且通過光敏單元或像點的矩陣來執(zhí)行檢測，其特征在于所述方法包括至少一個在液滴蒸發(fā)的同時所執(zhí)行的第一檢測步驟。液滴可以放在載片上或直接放在成像器上，所述載片與成像器接觸或與成像器相距一小段距
1 O有利地，所述方法包括至少一個在液滴蒸發(fā)之后所執(zhí)行的第二檢測步驟。有利地，在液滴外圍，液滴與其被蒸發(fā)部分分離的界面處執(zhí)行檢測。有利地，所述方法包括在液滴蒸發(fā)時和/或液滴蒸發(fā)之后以一定時間間隔執(zhí)行的一系列檢測步驟，每一個檢測步驟允許測量在預定平面中發(fā)現(xiàn)的粒子或生物的分布，所述平面根據蒸發(fā)時間而與像點矩陣相隔一定距離，將所獲得的所述粒子或生物的分布組合在一起允許重構在初始未蒸發(fā)液滴中粒子或生物的三維分布。有利地，液體為水或當待被檢測粒子為細菌時為生物緩沖液，例如“Tris”，即三 (羥甲基)氨基甲烷的縮寫。根據優(yōu)選實施例，液體包括潤濕劑，例如Tween 20(8卩，聚氧乙烯00)山梨糖醇酐單月桂酸酯)。最后，可以對液滴保持件，即透明載片或傳感器表面進行功能化?？梢允贡３旨橛H水性。也可以將保持件冷卻至周圍溫度以下。


在閱讀由非限制性實例給出的以下說明的基礎上，通過附圖來更好地理解本發(fā)明，并且其它優(yōu)點將變得清楚，其中-圖1示出了接觸成像裝置；-圖2示出了利用低靈敏度像點矩陣所獲得的檢測信號；-圖3示出了根據本發(fā)明的檢測方法的原理；-圖4示出了使用根據本發(fā)明的方法利用低靈敏度像點矩陣獲得的檢測信號；-圖5示出了實現(xiàn)根據本發(fā)明的方法的連續(xù)檢測步驟；-圖6示出了表示在生理鹽水緩沖液滴中并且在由液滴蒸發(fā)所形成的膜中的細菌的觀測結果的示意圖。曲線圖(圖6a和圖6d)示出了作為沿水平軸χ的位置的函數(shù)的被檢測強度；-圖7示出了表示在蒸發(fā)之前和之后生理鹽水緩沖液滴中的細菌的觀測結果的示圖，所述液滴堆放在親水或疏水載片上。曲線圖7a和7c示出了作為與液滴重合的點處的時間的函數(shù)的被檢測強度；以及-圖8示出了直徑為500nm的聚苯乙烯粒子的圖像和該圖像沿軸χ的水平剖面。
具體實施例方式從以上可以看出，使用低靈敏度傳感器不能夠獲得較高的信噪比。根據本發(fā)明的方法能夠使信噪比明顯增加，從而使檢測效率明顯增加。根據現(xiàn)有技術的檢測系統(tǒng)檢測液滴中的微?；蛭⑸?。然而，當粒子被沉浸時，很難對粒子進行檢測，除非使用高靈敏度傳感器。如此，圖3的左方示圖示出了，在時間T處包含粒子P的液滴G的局部圖像。上述接觸成像裝置的傳感器用于采集該圖像。如果傳感器的靈敏度太低，則不能辨認粒子。然而，當液滴蒸發(fā)時，在空氣-液體界面上，更具體而言粒子位于液滴的彎月面中時，粒子、細菌或微球體非常清晰地顯現(xiàn)。如此，圖3右方的示圖示出了在時間T+Δ T處上述液滴G在部分蒸發(fā)之后的局部圖像。粒子P在液滴已經蒸發(fā)的區(qū)域Z中清晰地顯現(xiàn)。字母L所標示的位于右上角的部分與載片中初始沒有溶液覆蓋的部分對應。如此，圖4示出了沿傳感器的軸線χ所獲得的且經過粒子P的中心的信號S的剖面圖?？梢钥闯?，此時信噪比足夠高，以允許粒子被檢測。信噪比足夠高，以便可以設想大部分(大約百分之幾十)被沉浸細胞的檢測。該方法可重現(xiàn)。因此，根據本發(fā)明的方法非常易于實現(xiàn)。其特征在于，在液滴蒸發(fā)的同時進行測量。一個測量或檢測步驟的特征在于， 記錄接觸成像裝置的成像器的像點所檢測的信號并且分析信號的振幅。蒸發(fā)期間被照射粒子之間的對比度增加在物理上解釋很復雜。如實驗實例的以下描述所示，該增加可以歸因于覆蓋粒子的殘留薄膜結構，該膜在液滴蒸發(fā)之后保留一段時間。根據形成液滴的液體在支撐液滴的載片上的潤濕性，該膜或較短暫，在幾秒甚至更少時間內消失，或者該薄膜持續(xù)保留若干秒，甚至幾十秒或分鐘。覆蓋粒子的殘留膜似乎起到微型透鏡的作用，從而允許在信噪比異常高的情形下檢測細菌。實際上，當粒子處于蒸發(fā)線上時信號強度最大化，并且當粒子處于液滴的彎月面中時信號強度增強三倍。在一些情況下可能出現(xiàn)，當液滴蒸發(fā)時，減小的實質上是液滴的高度，蒸發(fā)從液滴的頂部向底部進行，而非從液滴的邊緣向中心進行。這在例如當載片傾斜幾度時出現(xiàn)。該效應可以用于重構在初始未蒸發(fā)的液滴中粒子或生物的三維分布。為達到該目的，只需在液滴蒸發(fā)的同時以固定的時間間隔執(zhí)行一系列檢測步驟。每一個檢測步驟允許測量預定平面中粒子或生物的分布，所述平面根據蒸發(fā)時間而與像點矩陣保持一定距離，將所獲得的粒子或生物的所述分布組合起來，允許重構在初始未蒸發(fā)液滴中粒子或生物的三維分布。 圖5示出了該原理。在該圖中示出了包含粒子的液滴的蒸發(fā)期間的三個不同時間點，一側示出了一部分液滴的三維示圖，另一側示出了由接觸成像裝置的矩陣檢測器采集的相應圖像。應當注意，三維示圖不表示液滴的實際尺寸或者液滴的分布。在時間TO處，僅有兩個粒子從液滴中露出，并且能夠在檢測圖像中辨認。它們由白色圓圈表示。在時間Tl處，在蒸發(fā)30秒之后，更多粒子從液滴中露出，并且能夠在檢測圖像中辨認。最后，在時間T2處，在蒸發(fā)45秒之后，蒸發(fā)實際上已結束，所有粒子都露出，并且能夠在檢測圖像中辨認。如此， 根據在時刻TO、Tl、T2等采集的各個連續(xù)圖像，可以知道粒子在液滴中的三維分布。如果希望完全控制該方法，則蒸發(fā)可以通過紅外二極管或電熱器來調節(jié)或通過將氣體吹過液滴的彎月面進行調節(jié)。加熱裝置也可以集成在襯底內。襯底可以是例如沉積有 ITO薄膜(銦錫氧化物)的石英載片，而該膜能夠形成電阻。為了給出數(shù)量級，根據液滴的大小、所使用液體和實驗條件，液滴蒸發(fā)所花費的時間從幾秒至幾十秒不等，液滴的體積在 1μ 1禾口 20 μ 1之間，甚至更大?？梢允褂酶鞣N液體，如Tris(三(羥甲基)氨基甲烷)或凈化水。Tris具有以下優(yōu)點其是使細菌能夠保存數(shù)天的鹽溶液。因此Tris廣泛用作生物緩沖液。優(yōu)選地，如后文所述，承載液滴的載片不能太疏水，甚至可親水。該方法用于各種粒子。通過實例來說明直徑為1 μ m的硅醇微球體、直徑為1 μ m的乳液微球體和細菌。最后，對大腸桿菌或枯草桿菌(Bacillus subtilus)執(zhí)行確證測試。該方法用于廣泛地濃度范圍，從每個液滴包含一個粒子至每個液滴包含十萬個粒子。當然，優(yōu)選地來自光源的照明盡可能均勻。換句話說，以每一個點的強度大致相等的方式照射彎月面的表面。優(yōu)選地，照明具有一定的空間相干性，就是說位于光源前方的光闌具有較小的尺寸。例如，可以使用直徑為ΙΟΟμπι的光闌。在網絡攝像機、發(fā)光二極管、光闌和玻璃載片的情形下，圖像捕捉裝置因其僅僅包括用于從低成本CCD傳感器或CMOS傳感器的像點上捕捉數(shù)字圖像的電子卡而比較簡單且便宜。傳感器的像素或像點的平均大小可以為約兩微米至十微米。這些傳感器比像素大小不超過兩微米的高靈敏度傳感器花費更少。傳感器為低成本CMOS或CCD傳感器?？梢岳霉δ芑Ａлd片通過將特定細菌與細菌媒介隔離的抗體來改善檢測。然后，可以檢測并識別被檢測細菌，識別依靠載片的功能化。使用諸如圖1所示的裝置來執(zhí)行檢測測試。光源1是所發(fā)出波長集中在555nm的 1.7W的發(fā)光二極管(Luxeon KlLuxeon III)。光源放置在襯底4上方IOcm處。襯底4是 70mmX25mmX0. 15mm的玻璃顯微鏡載片。傳感器3是具有8比特動態(tài)范圍的800X600像素的CMOS圖像傳感器。每一個像素的大小為3 μ mX 3 μ m。該傳感器從網絡攝像機(V-Gear TalkCam 2000)上獲取。為了將襯底4放置成盡可能接近光檢測器3，將覆蓋檢測器的塑料薄膜移除。將體積大約為1 μ 1的液體樣品堆放在與傳感器3對置的襯底4上。然后，使液滴能夠在幾分鐘的時間段內蒸發(fā)。在實驗中，所使用溶液是PH值為8的IOmM Tris-HCl鹽溶液。優(yōu)選地，可以添加0. (體積)且商標名為Tween 20的聚山梨醇酯20(聚氧乙烯(20)山梨糖醇酐單月桂酸酯)。圖6a、圖6b和圖6c分別示出了通過在光源和液體樣品之間放置直徑為100 μ m的光闌而產生空間相干性的光束來照射樣品時所獲得的水平剖面PI、圖像和所述圖像的三維表示。希望，通過這種方式來觀察存在于液滴中的細菌所生成的衍射圖。液滴的體積為約 1 μ 1。然后，如 S. Su Seo 的"Lensfree holographic imaging for on-chip cytometry and diagnostics(用于片上細胞計數(shù)和診斷的無透鏡全息成像)”，Lab Chip 9(6)， 777-87(2009)所述，觀察全息衍射圖。圖6d、圖6e和圖6f分別示出了在未使用光闌的情形下用同一光源照射樣品時所獲得的水平剖面PI、圖像和所述圖像的三維表示。液滴在生成這些圖像之前蒸發(fā)。襯底足夠親水，以便在液滴蒸發(fā)的同時保持潤濕膜覆蓋襯底和堆放在襯底上的細菌。由于襯底親水并且樣品溶液是潤濕的且具有低表面張力，因此該膜保持得更長，因此被稱為超潤濕膜結構。因使用親水載片，從而測試期間所實施的構造是有利的，在該情形中，玻璃在乙醇中進行超聲清潔和漂洗，并且上述生物緩沖液通過添加潤濕劑(0. 的Tween)進行潤濕。 觀察到，在諸如圖7所示的構造中，所形成的超潤濕膜隨著液滴的蒸發(fā)，在適當位置保持很長一段時間，即幾分鐘，甚至幾小時。將圖6d、圖6e和圖6f分別與圖6^1、圖乩和圖6c比較?？梢钥闯?，從由潤濕膜覆蓋的細菌的接觸圖像所獲得的信噪比相對于沉浸在液滴中的細菌的接觸圖像增加了 20 倍，從而能夠準確地檢測這些細菌。由溶液蒸發(fā)而產生的膜結構，是根據本發(fā)明的方法的關鍵點之一。該膜用作形成在細菌上方的一個或多個微型透鏡。這解釋了為什么可以用如此高(約45)的信噪比來檢測細菌的原因。在這些實例中，信噪比(SNR)定義如下^ =
σ其中I =由圖像的每一個像素測得的振幅；μ =被視為代表噪聲的區(qū)域中的像素的平均振幅；以及σ =被視為代表噪聲的區(qū)域中的像素的振幅的標準偏差。當液滴蒸發(fā)時，在細菌表面上觀察到該膜結構。根據所使用的溶液，特別是溶液的潤濕性和表面張力性質，膜保持更長或更短的時長。為了確定該膜的厚度，在直徑不同的聚合物微球體上執(zhí)行測試。然后，觀察到，當微球體的直徑大于5μπι時，膜經常破裂。從而， 斷定該膜的厚度小于幾微米，甚至5 μ m。利用示意在圖1中的上述裝置生成圖像可容易地檢測形成在襯底表面上的膜的破裂。利用上述緩沖液執(zhí)行兩個測試，一個在疏水襯底上而另一個在親水襯底上(對于所使用的緩沖溶液)。措辭“疏水”和“親水”理解為，表示液滴與襯底接觸時的接觸角度分別大于90°和小于90°，這是普遍接受的定義。圖7a和圖7b示出了襯底疏水時所得到的結果。圖7a示出了圖7b中所示的細菌圖像的水平剖面的時間進程，剖面經過細菌圖像的中心。在t < 48s (圖7b-l)時，液滴蒸發(fā)并且沒有檢測到明顯的信號。在t = 48s與t = 49s之間(圖7b-2)，液滴的蒸發(fā)產生覆蓋細菌的短暫膜結構。實際上，對應于該形成在細菌上的膜的影響，觀察到信號增加。由于襯底疏水，因此膜迅速消失，這解釋了被觀察信號的強度在t > 48. 5s(圖7b-!3)時迅速減小的原因。圖7c和圖7d示出了當支撐液滴的襯底親水時所得到的結果。圖7c示出了圖7d 中所示細菌圖像的水平剖面P的時間進程，剖面經過細菌圖像的中心。在t < 7s時，液滴蒸發(fā)并且沒有檢測到明顯的信號(圖7d-l)。在時間t = 7s時，細菌僅覆蓋有薄膜(圖 7d-2)。由于襯底親水，因此膜在襯底表面上和細菌表面上保持很長一段時間(圖7d-3)。 從而，在比上述情形更長的時間段內觀察到高強度信號，此處時間段為幾十秒。在液滴完全蒸發(fā)以后，膜消失，并且檢測不到細菌。這些圖證實，根據本發(fā)明的方法允許在包含細菌的液滴蒸發(fā)的時刻，特別在液滴/ 外部媒介界面到達細菌時即細菌僅僅覆蓋有薄膜的時刻，檢測溶液中的細菌。根據溶液的潤濕性，膜結構或短暫(保持Is或2s)或持久。認為，襯底上溶液的潤濕性越好，膜結構就越持久。措辭“持久”理解為，表示膜持續(xù)幾十秒或甚至幾分鐘或數(shù)小時。從而，當希望獲取持久膜時，優(yōu)選地向溶液中添加潤濕劑。該添加劑例如為以上限定濃度為0. (體積)的Tween 20。測試中所選用的溶液為，用蒸餾水稀釋至10mM、pH值為8的緩沖液Tris HC1，采用該緩沖液將獲得尤其令人滿意的結果。Tris是三(羥甲基)氨基甲烷或2-氨-2羥基-1， 3-丙二醇的縮寫?？梢允褂闷渌彌_液。當希望識別細菌時，優(yōu)選使用使細菌存活的生物緩沖液。普遍證明，添加諸如Tween的潤濕劑非常有用并且允許形成更持久的微型膜。該添加劑的體積濃度例如從約萬分之幾至百分之幾，優(yōu)選地從萬分之幾至千分之幾?？梢允褂玫钠渌彌_液可能涉及PBS (磷酸鹽緩沖鹽水)，或者用于非生物的蒸餾水。以上實例描述了對細菌的觀察，但本發(fā)明可應用于觀察比細菌更小的粒子或生物體。圖8示出了對覆蓋有超潤濕膜的聚苯乙烯微球體進行觀察所得到的圖像(圖8a)和剖面PI (圖8b)，所述超潤濕膜在如以上實例所述的同一生理鹽水緩沖液的液滴蒸發(fā)之后形成。該微球體的直徑為500nm。所檢測到的信噪比仍然較高(約20)。此外，通過將液滴保持件冷卻到周圍溫度以下，則液滴的蒸發(fā)將減慢并且殘留膜更持久。例如，當周圍溫度為20°C時，保持件可以冷卻至5°C至10°C之間的溫度。如此，還可以使用允許被檢測信號的信噪比增加的被冷卻成像器。作為非限制性實例，與根據本發(fā)明的方法相關的工業(yè)應用涉及-在醫(yī)院、制藥或食品加工環(huán)境中根據細菌和真菌含量來監(jiān)測空氣質量；-用于涉及微生物、細胞生物學和病理學的臨床前研究的診斷測量和診斷工具； 以及-測量體液中生物粒子的濃度。還可能涉及，例如細菌尿路感染。對細菌進行尿檢，當發(fā)現(xiàn)單株細菌(單種細菌) 菌尿癥(bacteriurie monomicrobienne (une seule espece de bacterie))具有大于 100 個細菌/μ ι的大量細菌菌落并且伴隨有大于 ο個白細胞/μ ι的白細胞尿(尿液中出現(xiàn)白血球)或膿尿時能夠確診尿路感染。 該測量可以利用根據本發(fā)明的方法來容易地執(zhí)行。
權利要求
1.一種光學檢測方法，其通過接觸成像裝置來檢測微米級或亞微米級粒子或生物，所述粒子(P)或生物沉浸在液滴(G)中，并且該檢測通過光敏單元或像點的矩陣( 來執(zhí)行， 其特征在于，所述方法包括至少一個在液滴蒸發(fā)的同時所執(zhí)行的第一檢測步驟。
2.根據權利要求1所述的光學檢測方法，其特征在于，所述方法包括至少一個在液滴蒸發(fā)之后所執(zhí)行的第二檢測步驟。
3.根據權利要求1所述的光學檢測方法，其特征在于，在液滴外圍，液滴與其被蒸發(fā)部分分離的界面(Z)處執(zhí)行檢測。
4.根據以上權利要求中的任一項所述的光學檢測方法，其特征在于，所述方法包括在液滴蒸發(fā)的同時以一定時間間隔所執(zhí)行的一系列檢測步驟。
5.根據權利要求4所述的光學檢測方法，其特征在于，每一個檢測步驟允許測量在預定平面中發(fā)現(xiàn)的粒子或生物的分布，所述平面根據蒸發(fā)時間而與像點矩陣相隔一定距離， 將所獲得的所述粒子或生物的分布組合在一起允許重構在初始未蒸發(fā)液滴中粒子或生物的三維分布。
6.根據以上權利要求中任一項所述的光學檢測方法，其特征在于，液體為水或生物緩沖液。
7.根據以上權利要求中任一項所述的光學檢測方法，其特征在于，生物緩沖液為 “Tris”，即三(羥甲基)氨基甲烷的縮寫。
8.根據以上權利要求中任一項所述的光學檢測方法，其特征在于，液體通過添加潤濕劑來潤濕。
9.根據權利要求8所述的光學檢測方法，其特征在于，液體中潤濕劑的體積濃度在萬分之幾與百分之幾之間。
10.根據以上權利要求中任一項所述的光學檢測方法，液滴放置在透明載片上或傳感器的表面上。
11.根據以上權利要求中任一項所述的光學檢測方法，其特征在于，承載液滴的載片是功能化的。
12.根據權利要求10或11所述的光學檢測方法，液滴放置在相對于周圍環(huán)境冷卻的保持件上。
全文摘要
本發(fā)明的主要領域為接觸成像裝置。該方法涉及通過該接觸成像裝置對微米級或亞微米級粒子或生物進行的光學檢測，所述粒子或生物沉浸在液滴(G)中，并且該檢測通過光敏單元或像點的矩陣來執(zhí)行。該方法包括在液滴蒸發(fā)期間所執(zhí)行的一個檢測步驟或一系列檢測步驟。其還可以包括在液滴蒸發(fā)之后所執(zhí)行的檢測步驟。在一些條件下，該方法允許重構蒸發(fā)前的初始液滴中粒子或生物的三維分布。
文檔編號G01N15/14GK102575977SQ201080046308
公開日2012年7月11日 申請日期2010年10月14日 優(yōu)先權日2009年10月16日
發(fā)明者C·阿利耶 申請人:原子能和能源替代品委員會