專利名稱：一種口蹄疫固相競(jìng)爭(zhēng)elisa檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于口蹄疫固相競(jìng)爭(zhēng)ELISA的檢測(cè)方法，屬于動(dòng)物疫病血清學(xué)診斷技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
口蹄疫是國(guó)際獸醫(yī)局認(rèn)定I類病，對(duì)疫區(qū)經(jīng)濟(jì)有嚴(yán)重影響，口蹄疫抗體水平的檢測(cè)對(duì)疫苗免疫、疫病控制有重要意義，ELISA 是 enzyme linked immuno-sorbent assay 的縮寫(xiě)，艮flgl連免疫吸附實(shí)驗(yàn)， 是當(dāng)今口蹄疫抗體檢測(cè)的一個(gè)重要方法，該方法分為液相阻斷ELISA，即LPB-ELISA(liquid phase block，LPB)，和固相競(jìng)爭(zhēng) ELISA，即 SPC-ELISA(soil phase competition，SPC)。其中SPC-ELISA以其高敏感性和高相關(guān)性，正逐漸成為主流的口蹄疫抗體檢測(cè)方法。但是 SPC-ELISA的弱點(diǎn)是操作比較復(fù)雜，即使是有經(jīng)驗(yàn)的操作人員也得需要4-5小時(shí)才能完成。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)以上情況，本發(fā)明的目的，就是要解決口蹄疫固相競(jìng)爭(zhēng)ELISA中操作復(fù)雜的問(wèn)題。本發(fā)明的技術(shù)方案是把口蹄疫標(biāo)準(zhǔn)SPC-ELISA操作中必做的抗體包被和抗原結(jié)合提前完成。也就是說(shuō)在進(jìn)行口蹄疫抗體檢測(cè)的SPC-ELISA之前，將包被口蹄疫抗體和連結(jié)口蹄疫抗原在ELISA板上提前完成，然后加入穩(wěn)定劑作用一段時(shí)間后控干，干燥后形成保護(hù)膜， 再該ELISA板真空包裝，然后低溫保存。此板便稱為口蹄疫抗原固定板，即口蹄疫 ASP(antigen-soild-plate, ASP)。當(dāng)需要進(jìn)行口蹄疫抗體檢測(cè)時(shí)，將口蹄疫抗原固定板取出直接進(jìn)行實(shí)驗(yàn)就行，此方法也就叫口蹄疫ASP SPC-ELISA。和口蹄疫標(biāo)準(zhǔn)SPC-ELISA相比，本發(fā)明省去了 4個(gè)步驟，S卩，口蹄疫抗體的包被與洗脫，口蹄疫抗原的結(jié)合與洗脫。這就使得整個(gè)口蹄疫ASP SPC-ELISA的實(shí)驗(yàn)時(shí)間縮短到 1-2小時(shí)，還可以減少試劑盒內(nèi)緩沖體系的數(shù)量。用口蹄疫ASP SPC-ELISA檢測(cè)口蹄疫抗體，與LPB-ELISA和標(biāo)準(zhǔn)中和抗體檢測(cè) (virus neutralizing test, VNT)方法相比較，結(jié)果見(jiàn)表一。在口蹄疫中和抗體陽(yáng)性血清樣品中，用ASP SPC-ELISA與SPC-ELISA、LPB-ELISA檢測(cè)口蹄疫抗體相比較，結(jié)果見(jiàn)表二。表一口蹄疫 ASP SPC-ELISA 與 LPB-ELISA、VNT 比較
權(quán)利要求
1.一種口蹄疫固相競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)方法，其特征在于a、口蹄疫抗原通過(guò)與口蹄疫抗體結(jié)合后固定在ELISA板孔內(nèi)。b、固定在ELISA板孔內(nèi)的口蹄疫抗原覆蓋有穩(wěn)定劑保護(hù)膜。c、口蹄疫抗原固定板可以長(zhǎng)期保存。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，被檢樣品可直接加入口蹄疫抗原固定板孔內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種口蹄疫固相競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)方法，屬于動(dòng)物疫病血清學(xué)診斷技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明將口蹄疫抗體通過(guò)包被技術(shù)結(jié)合在ELISA板上，然后通過(guò)抗原-抗體結(jié)合反應(yīng)將口蹄疫抗原牢固結(jié)合ELISA板孔內(nèi)，經(jīng)穩(wěn)定劑處理和干燥后進(jìn)行真空包裝，最后置低溫長(zhǎng)期保存。當(dāng)需要檢測(cè)口蹄疫抗體時(shí)，可以將該ELISA板直接用于實(shí)驗(yàn)，它可以讓實(shí)驗(yàn)過(guò)程變得既簡(jiǎn)單又省時(shí)。
文檔編號(hào)G01N33/543GK102175852SQ201110001730
公開(kāi)日2011年9月7日 申請(qǐng)日期2011年1月6日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月6日
發(fā)明者信愛(ài)國(guó), 廖德芳, 李樂(lè), 李華春, 胡騎, 苗海生, 高林 申請(qǐng)人:云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院