專利名稱：一種治療小兒呼吸道反復(fù)感染的藥物及其制備和質(zhì)檢方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療小兒呼吸道反復(fù)感染的藥物及其制備方法和質(zhì)量檢測方法， 屬于中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
小兒呼吸道反復(fù)感染是兒科常見病、多發(fā)病。其發(fā)病機制是多種因素綜合作用的 結(jié)果，免疫功能低下被認為是其主要原因之一。近年來發(fā)病率有上升趨勢。目前治療小兒 呼吸道反復(fù)感染主要針對癥狀，感染期以抗感冒藥為主，重者給予支持療法，遷延期針對個 體免疫狀況應(yīng)用免疫制劑，如靜點丙種球蛋白、口服轉(zhuǎn)移因子口服液等方法取得一定療效， 但遠期療效欠佳。近年來，國內(nèi)運用中醫(yī)中藥治療本病取得較好的臨床療效，中醫(yī)藥在防治 小兒呼吸道反復(fù)感染上療效確切，臨床副反應(yīng)少見，且遠期療效尤佳，在扶正祛邪的同時對 小兒呼吸道反復(fù)感染患兒的癥狀也起到治療作用，極大的改善了患兒的體質(zhì)及生活質(zhì)量。小兒臟腑嬌嫩，體質(zhì)稚弱，邪氣易犯。明代醫(yī)家萬全認為小兒“三有余，四不足“ 的生理病理特點。即陽常有余、陰常不足，肝常有余、脾常不足，心常有余、肺常不足、腎常 不足。肺常不足，易于感觸外邪肺氣充沛調(diào)暢皆需依賴于脾腎之氣的顧護；然小兒脾腎常 虛，則肺更易虛，三者相互影響，使得正氣愈虛，不耐外邪侵襲。因此，小兒呼吸道反復(fù)感染 發(fā)病與肺脾腎虛弱密切相關(guān)。本院自制“麥芪益肺合劑”是在傳統(tǒng)“玉屏風(fēng)散”、“生脈飲” “四君子湯”方基礎(chǔ) 上綜合而成，由黃芪、麥冬、白術(shù)、茯苓、五味子、烏梅、陳皮、甘草等八味藥組成。黃芪、麥冬 為方中君藥，黃芪大補肺脾元氣，固表實衛(wèi)；麥冬養(yǎng)陰生津，氣陰二補；肺雖主氣，其氣卻來 源于后天水谷之氣，欲補肺氣，當先補脾，故配白術(shù)、甘草、五味子；茯苓，甘、淡、平和，為利 水滲濕之要藥，又有健脾之功；陳皮，性溫，味辛、苦，歸肺脾經(jīng)，功用為理氣健脾，燥濕化痰； 烏梅用于肺虛久咳，有抗蛋白過敏作用。諸藥合用，健脾益肺，虛實并治，標本兼顧，具有實 衛(wèi)固表.補氣健脾、斂肺生津，防御外邪侵襲等功能，用于小兒呼吸道反復(fù)感染。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種中藥組合物及其制備方法和質(zhì)量檢測方法。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的 本發(fā)明中藥組合物的原料組成如下
黃芪3-18份、麥冬2-12份、白術(shù)3-18份、茯苓3_18份、
五味子2-10份、烏梅2-10份、陳皮2-10份、甘草2-8份
上述原料的優(yōu)選重量配比如下
黃芪6份、麥冬4份、白術(shù)6份、茯苓6份、
五味子4份、烏梅4份、陳皮4份、甘草3份
上述原料的優(yōu)選重量配比如下
黃芪9份、麥冬6份、白術(shù)6份、茯苓6份、五味子5份、烏梅5份、陳皮5份、甘草4份
上述原料的優(yōu)選重量配比如下
黃芪18份、麥冬9份、白術(shù)15份、茯苓15份、
五味子8份、烏梅8份、陳皮10份、甘草8份
本發(fā)明藥物原料，按照常規(guī)工藝，制成臨床可接受的口服溶液。本發(fā)明中藥組合物的具體制備工藝如下
取處方中重量配比的八味中藥稱量后加入多功能提取罐，用水充分浸泡后，加水過藥 面2-3厘米煎煮兩次，第一次1. 5小時，第二次1小時，煎液濾過，合并，浸置12小時以上取 上清液濃縮至約950ml，趁熱加入蔗糖100g，苯甲酸鈉2 g，攪勻。本發(fā)明的質(zhì)量檢測方法包括如下鑒別方法 鑒別方法包括如下鑒別中的一種和/或幾種
A 取中藥組合物20ml，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml合并提取液，用氨 試液洗滌2次，每次30 ml，再用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次30 ml，正丁醇蒸干。殘渣加 甲醇試液Iml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1 ml含0.5mg 的溶液，作為對照品溶液。吸取上述供試品5ul、對照品溶液2ul，分別點于同一硅膠G薄層 板上，以氯仿-甲醇-水(13 :7 :2) 10°C以下放置分層的下層溶液為展開劑，展開，取出，涼 干，噴以10%硫酸乙醇(V/V)溶液，在105°C加熱至斑點色清晰。供試品色譜中，在與對照品 色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的顏色的斑點。B:取中藥組合物20 ml，用醋酸乙酯振搖提取2次，每次20 ml，合并醋酸乙酯液， 蒸干，殘渣加甲醇1 ml使溶解，作為供試品溶液。另取橙皮苷對照品，加甲醇制成飽和溶 液，作為對照品溶液。吸取上述兩種供試液各lul，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以氯仿-丙 酮-甲醇(5 1 :1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以洲三氯化鋁乙醇溶液，放置30分鐘以 上，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在于對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色 的熒光斑點。C 取中藥組合物10ml，緩緩滴加50%硫酸溶液1 ml，靜置使沉淀，離心、棄去上清 液，沉淀用水洗滌2次，每次10 ml，取沉淀加乙醇5 ml使溶解，離心，取上清液作為供試品 溶液。另取甘草酸銨對照品，加乙醇制成每1 ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上 述供試品溶液15ul、對照品溶液2ul，分別點于同一硅膠GF2M薄層板上，以醋酸乙酯-甲 酸-冰醋酸-水(15 1 1 :2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(2Mnm)下檢視。供試 品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
具體實施例方式下述實驗和實例用于進一步說明但不限于本發(fā)明。實施例1 中藥組合物的制備 黃芪6份、麥冬4份、白術(shù)6份、茯苓6份、 五味子4份、烏梅4份、陳皮4份、甘草3份
取處方中重量配比的八味中藥稱量后加入多功能提取罐，用水充分浸泡后，加水過藥 面2-3厘米煎煮兩次，第一次1. 5小時，第二次1小時，煎液濾過，合并，浸置12小時以上取 上清液濃縮至約950ml，趁熱加入蔗糖100g，苯甲酸鈉2 g，攪勻。
實施例2:中藥組合物的制備 黃芪9份、麥冬6份、白術(shù)6份、茯苓6份、 五味子5份、烏梅5份、陳皮5份、甘草4份
取處方中重量配比的八味中藥稱量后加入多功能提取罐，用水充分浸泡后，加水過藥 面2-3厘米煎煮兩次，第一次1. 5小時，第二次1小時，煎液濾過，合并，浸置12小時以上取 上清液濃縮至約950ml，趁熱加入蔗糖100g，苯甲酸鈉2 g，攪勻。實施例3:中藥組合物的制備 黃芪18份、麥冬9份、白術(shù)15份、茯苓15份、 五味子8份、烏梅8份、陳皮10份、甘草8份
取處方中重量配比的八味中藥稱量后加入多功能提取罐，用水充分浸泡后，加水過藥 面2-3厘米煎煮兩次，第一次1. 5小時，第二次1小時，煎液濾過，合并，浸置12小時以上取 上清液濃縮至約950ml，趁熱加入蔗糖100g，苯甲酸鈉2 g，攪勻。實施例4 質(zhì)量檢測中的鑒別方法
A 取實施例3藥物20ml，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml合并提取液，用 氨試液洗滌2次，每次30 ml，再用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次30 ml，正丁醇蒸干。殘 渣加甲醇試液1 ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1 ml含 0. 5mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述供試品5ul、對照品溶液2ul，分別點于同一硅膠 G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(13 :7 :2) 10°C以下放置分層的下層溶液為展開劑，展開，取 出，涼干，噴以10%硫酸乙醇(V/V)溶液，在105°C加熱至斑點色清晰。供試品色譜中，在與 對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的顏色的斑點。B:取實施例3藥物20 ml，用醋酸乙酯振搖提取2次，每次20 ml，合并醋酸乙酯 液，蒸干，殘渣加甲醇1 ml使溶解，作為供試品溶液。另取橙皮苷對照品，加甲醇制成飽和溶 液，作為對照品溶液。吸取上述兩種供試液各lul，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以氯仿-丙 酮-甲醇(5 1 :1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鋁乙醇溶液，放置30分鐘以 上，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在于對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色 的熒光斑點。C 取實施例3藥物10ml，緩緩滴加50%硫酸溶液1 ml，靜置使沉淀，離心、棄去上 清液，沉淀用水洗滌2次，每次10 ml，取沉淀加乙醇5 ml使溶解，離心，取上清液作為供 試品溶液。另取甘草酸銨對照品，加乙醇制成每1 ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。 吸取上述供試品溶液15ul、對照品溶液2ul，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以醋酸乙 酯-甲酸-冰醋酸-水(15 1 1 :2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(254nm)下檢視。 供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。實施例5 藥物對哮喘小鼠Thl/Th2平衡的影響 1.資料和方法
1. 1動物藥物毒性試驗40只小鼠隨機分為試驗組和對照組，禁食不禁水12小時后，試 驗組小鼠一次性灌胃給藥麥芪益肺合劑0. 8ml/20g體重，(含2. 08g生藥/ml，332. 8g生藥 /kg，對照組給予等量生理鹽水。給藥后觀察30min，lh, 14天后處死小鼠行病理檢查。1. 2實驗動物及分組健康8周齡Balb/c小鼠24只，雌雄各半，體重 21. 02士 1. 46g，普通飼料喂養(yǎng)，實驗室溫度為22 240C，濕度為55% 65%。隨機分為正常對照組(Α組)6只；哮喘組(B組)6只；哮喘+麥芪益肺合劑治療組(C組)6只。1. 3 系統(tǒng)性呼吸道變態(tài)反應(yīng)性哮喘鼠模型的建立(B組)腹腔注射免疫原液，霧 化吸入激發(fā)。小鼠致敏方法參照McCusker等文獻，即實驗第0、7、14天分別腹腔注射1%卵 蛋白(0VA，上海伯澳生物科技公司，)抗原混懸液0. 2ml，第28天起用1%0VA超聲霧化吸入， 每天20min，連續(xù)7天。A組按上述方法使用0. 9%生理鹽水，C組致敏前開始灌胃麥芪益 肺合劑0. 8ml,-H 一次，連續(xù)21天。1. 4流式細胞術(shù)檢測方法用流式細胞儀(BDFACSCalibur)檢測小鼠外周血(摘除 眼球取血)細胞中IL-4及IFN-g，應(yīng)用雙管標記檢測法，即采用⑶4、⑶8和IFN-gFITC三色 標記一管，用于檢測THl細胞，⑶4、⑶8和IL-4PE三色標記一管，用于檢測TH2細胞。1. 5 統(tǒng)計學(xué)分析應(yīng)用SPSS13. 0軟件，實驗數(shù)據(jù)均以均數(shù)士標準差(X士 s)表 示，顯著性檢驗用t檢驗。2.結(jié)果
2. 1小鼠藥物毒性試驗觀察7、14天治療組與對照組均無死亡，體重比較見表1，P >0. 05，無差異。僅1只小鼠服藥后第1天出現(xiàn)稀便，2天后消失。2. 2小鼠體征變化正常組無變化；哮喘組致敏后小鼠表現(xiàn)為煩躁不安，呼吸急 促，腹肌抽搐，弓背，毛發(fā)豎起。2. 3病理學(xué)觀察正常組小鼠氣管、肺泡及間隔形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，未見充血。未見細 胞增生；哮喘組小鼠小血管和細支氣管管壁增厚，細胞浸潤，組織水腫；治療組小鼠小血管 和細支氣管管壁輕度增厚，少量細胞浸潤。2. 4各組IFN-g/ IL-4細胞因子的變化 見表2
表1試驗小鼠體重記錄
權(quán)利要求
1.一種治療小兒呼吸道反復(fù)感染的藥物，其特征在于該藥物由下列重量份的原料制 成黃芪3-18份、麥冬2-12份、白術(shù)3-18份、茯苓3_18份、五味子2_10份、烏梅2_10份、 陳皮2-10份、甘草2-8份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物，其特征在于上述原料的優(yōu)選重量配比如下黃芪6份、 麥冬4份、白術(shù)6份、茯苓6份、五味子4份、烏梅4份、陳皮4份、甘草3份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物，其特征在于上述原料的優(yōu)選重量配比如下黃芪9份、 麥冬6份、白術(shù)6份、茯苓6份、五味子5份、烏梅5份、陳皮5份、甘草4份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物，其特征在于上述原料的優(yōu)選重量配比如下黃芪18 份、麥冬9份、白術(shù)15份、茯苓15份、五味子8份、烏梅8份、陳皮10份、甘草8份。
5.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3、4所述藥物的制備方法，包括以下步驟取處方中重量配比的 八味中藥稱量后加入多功能提取罐，用水充分浸泡后，加水過藥面2-3厘米煎煮兩次，第一 次1. 5小時，第二次1小時，煎液濾過，合并，浸置12小時以上取上清液濃縮至約950ml，趁 熱加入蔗糖100g，苯甲酸鈉2 g，攪勻。
6.如權(quán)利要求1、2、3、4所述藥物的質(zhì)量檢測方法，其特征在于該方法包括如下鑒別A 取藥物20ml，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml合并提取液，用氨試液洗滌2次，每次30 ml，再用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次30 ml，正丁醇蒸干；殘渣加甲醇試 液1 ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1 ml含0.5mg的溶 液，作為對照品溶液；吸取上述供試品5ul、對照品溶液2ul，分別點于同一硅膠G薄層板上， 以氯仿-甲醇-水(13 7 2) 10°C以下放置分層的下層溶液為展開劑，展開，取出，涼干，噴 以10%硫酸乙醇(V/V)溶液，在105°C加熱至斑點色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相 應(yīng)的位置上，顯相同的顏色的斑點；B:取藥物20 ml，用醋酸乙酯振搖提取2次，每次20 ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘渣 加甲醇1 ml使溶解，作為供試品溶液；另取橙皮苷對照品，加甲醇制成飽和溶液，作為對照 品溶液；吸取上述兩種供試液各lul，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以氯仿-丙酮-甲醇(5 1 :1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以洲三氯化鋁乙醇溶液，放置30分鐘以上，置紫外燈 (365nm)下檢視；供試品色譜中，在于對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；C 取藥物10ml，緩緩滴加50%硫酸溶液1 ml，靜置使沉淀，離心、棄去上清液，沉淀用水 洗滌2次，每次10 ml，取沉淀加乙醇5 ml使溶解，離心，取上清液作為供試品溶液；另取甘 草酸銨對照品，加乙醇制成每1 ml含0. 5mg的溶液，作為對照品溶液；吸取上述供試品溶液 15ul、對照品溶液2ul，分別點于同一硅膠GF2M薄層板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水 (15 1 1 2)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(2Mnm)下檢視；供試品色譜中，在與對 照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
全文摘要
本發(fā)明屬中藥領(lǐng)域，公開了一種治療小兒呼吸道反復(fù)感染的藥物及其制備方法和質(zhì)量檢測方法。本發(fā)明依據(jù)中醫(yī)理論，采用黃芪、麥冬、白術(shù)、茯苓、五味子、烏梅、陳皮、甘草等八味藥制成復(fù)方制劑。具有實衛(wèi)固表、補氣健脾、斂肺生津，防御外邪侵襲等功能，用于小兒呼吸道反復(fù)感染。
文檔編號G01N30/90GK102078508SQ20111000411
公開日2011年6月1日 申請日期2011年1月11日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月11日
發(fā)明者李嬪, 李江奇, 畢銘陽, 沈陽, 王申東, 胡斯, 陳培麗 申請人:上海市兒童醫(yī)院