專(zhuān)利名稱(chēng)：液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食品安全檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法。
背景技術(shù)：
近20年來(lái)，農(nóng)藥在農(nóng)作物種植和生產(chǎn)中應(yīng)用日益廣泛，其在降低病蟲(chóng)害發(fā)生、促進(jìn)生長(zhǎng)、提高產(chǎn)量和改善產(chǎn)品品質(zhì)方面的作用是十分顯著的，已成為現(xiàn)代農(nóng)業(yè)不可或缺的物質(zhì)基礎(chǔ)。但是，農(nóng)藥的使用無(wú)疑會(huì)導(dǎo)致作物體內(nèi)藥物的滯留或蓄積，并以殘留的方式進(jìn)入人體及生態(tài)系統(tǒng)。濫用或非法使用農(nóng)藥的現(xiàn)象仍然存在，其對(duì)人類(lèi)及環(huán)境的危害主要是慢性、遠(yuǎn)期和累積性的，農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留已成為公認(rèn)的農(nóng)業(yè)和環(huán)境問(wèn)題，對(duì)殘留的監(jiān)測(cè)與控制已經(jīng)是目前國(guó)內(nèi)外農(nóng)藥研究、開(kāi)發(fā)、使用和管理的重要內(nèi)容。現(xiàn)在，蔬菜中農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)主要有氣相色譜法、液相色譜法、氣相色譜_質(zhì)譜法和液相色譜_串聯(lián)質(zhì)譜法。氣相色譜法和液相色譜法主要是依賴(lài)色譜分離，針對(duì)復(fù)雜基質(zhì)如韭菜、大蒜等樣品時(shí)，在農(nóng)藥的定性上存在一定難度；氣相色譜-質(zhì)譜法和液相色譜_串聯(lián)質(zhì)譜法主要是利用低分辨質(zhì)譜檢測(cè)器，通過(guò)化合物結(jié)構(gòu)斷裂或重排產(chǎn)生的碎片進(jìn)行樣品檢測(cè)，但是，在同時(shí)分析多個(gè)化合物時(shí)，由于受到掃描速度等的影響，靈敏度會(huì)受到較大影響，對(duì)色譜分離要求較高。然而，根據(jù)高分辨質(zhì)譜檢測(cè)器分析農(nóng)藥單同位素和重同位素的精確質(zhì)量數(shù)及豐度，進(jìn)而較易推測(cè)可靠的元素組成，提高了農(nóng)藥在定性與定量上的準(zhǔn)確性和可靠性，避免了色譜法和四極桿低分辨質(zhì)譜對(duì)色譜分離要求高的難題。由于農(nóng)藥殘留在蔬菜中含量極低，上述幾種方法在檢測(cè)時(shí)提高信噪比的方法一般有兩種途徑，一是從樣品制備環(huán)節(jié)著手，利用各種方法盡可能的去除雜質(zhì)和非目標(biāo)化合物， 最大倍數(shù)的濃縮樣品，減少干擾，以達(dá)到研究的目的，這種方法在實(shí)際操作中難度非常大； 另一種途徑是根據(jù)目標(biāo)化合物的特性，選用特異性檢測(cè)器，盡可能減少背景干擾。而實(shí)際樣品由于地域條件、蔬菜本身基質(zhì)的差異，在測(cè)定時(shí)，受到非目標(biāo)化合物干擾，給定性和定量帶來(lái)很大的影響。目前國(guó)內(nèi)對(duì)通過(guò)提取農(nóng)藥的精確質(zhì)量數(shù)來(lái)避開(kāi)干擾影響的研究較少，已經(jīng)制定的農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥多殘留量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)大多集中在氣相色譜和液相色譜_串聯(lián)質(zhì)譜上，對(duì)使用高分辨質(zhì)譜提取農(nóng)藥的精確質(zhì)量數(shù)來(lái)檢測(cè)農(nóng)藥殘留、在降低對(duì)定性和定量干擾難題方面還沒(méi)有在檢測(cè)行業(yè)引起關(guān)注，僅在石化行業(yè)有專(zhuān)利采用氣相色譜_高分辨飛行時(shí)間質(zhì)譜檢測(cè)原油中咔唑類(lèi)化合物。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于設(shè)計(jì)提供一種快速、簡(jiǎn)便、靈敏度高，且有效減少或消除來(lái)自蔬菜的復(fù)雜基質(zhì)干擾農(nóng)藥多殘留量的液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)方法的技術(shù)方案。所述的液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法，其特征在于包括以下步驟
1)樣品中農(nóng)藥殘留的乙腈提取
稱(chēng)取25 50g蔬菜樣品，加入25 50ml乙腈，進(jìn)行高速分散處理，得到由蔬菜基質(zhì)、 水和乙腈組成的混合勻漿溶液，在上述勻漿溶液中加入15 25g復(fù)合鹽鹽析試劑，再進(jìn)行高速分散處理，然后進(jìn)行離心操作，靜置分層；
2)樣品提取溶液的分散固相萃取凈化
取2 6ml上層乙腈，分別加入0. 6 1. 8g無(wú)水硫酸鎂、0. 05 0. 2g N-丙基-乙二胺(PSA)和0. 05 0. 2gC18，再進(jìn)行振蕩離心取上清液，上清液過(guò)0. 22 μ m有機(jī)濾膜，即得到樣品溶液；
3)使用液相色譜_高分辨質(zhì)譜儀檢測(cè)
a)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備分別準(zhǔn)確稱(chēng)取標(biāo)準(zhǔn)品農(nóng)藥，用體積比為3:7的丙酮-甲苯溶液溶解，分別配成1. Omg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，使用時(shí)根據(jù)各農(nóng)藥的響應(yīng)，用乙腈稀釋成標(biāo)準(zhǔn)工作液；
b)使用液相色譜_高分辨質(zhì)譜儀器檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)工作液和經(jīng)凈化后的樣品溶液由自動(dòng)進(jìn)樣器分別吸取標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品溶液，注入液相色譜_高分辨質(zhì)譜儀器中，樣品溶液中農(nóng)藥殘留經(jīng)液相色譜柱分離，高分辨質(zhì)譜全掃描檢測(cè)；
4)結(jié)果分析
數(shù)據(jù)庫(kù)的構(gòu)建用ToxID軟件建立步驟3)中標(biāo)準(zhǔn)品農(nóng)藥的化合物分子式數(shù)據(jù)庫(kù)信息
表；
定性和定量以化合物的準(zhǔn)分子離子峰的精確質(zhì)量數(shù)為定性離子和定量離子；以標(biāo)準(zhǔn)工作液的質(zhì)量濃度X為橫坐標(biāo)，定量離子的峰面積Y為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)，用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)對(duì)樣品進(jìn)行外標(biāo)法定量；用樣品溶液中出現(xiàn)的色譜峰保留時(shí)間和定性離子(精確質(zhì)量數(shù))進(jìn)行定性。所述的液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法，其特征在于所述的步驟1)中復(fù)合鹽鹽析試劑為無(wú)水硫酸鎂和氯化鈉混合試劑，無(wú)水硫酸鎂和氯化鈉混合試劑中無(wú)水硫酸鎂和氯化鈉質(zhì)量比10:1。所述的液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法，其特征在于所述的步驟1)中蔬菜樣品中加入乙腈后在分散機(jī)中轉(zhuǎn)速8000 12000 r/min下勻漿1 3min，加入復(fù)合鹽鹽析試劑后在轉(zhuǎn)速8000 12000 r/min下勻漿0. 5 2min，最后在離心機(jī)中3000 5000 rpm下離心4 6min。所述的液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法，其特征在于所述的步驟2)中上層乙腈加入無(wú)水硫酸鎂、N-丙基-乙二胺(PSA)和C18，在渦旋振蕩器上振蕩0. 5 2min，然后在離心機(jī)8 000 12 000 r/min下離心2 4min。所述的液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法，其特征在于所述的步驟3)中標(biāo)準(zhǔn)品農(nóng)藥為甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂(lè)果、涕滅威亞砜、久效磷、多菌靈、涕滅威砜、噻菌靈、3-羥基克百威、吡蟲(chóng)啉、樂(lè)果、三環(huán)唑、抗蚜威、克百威、甲萘威、多效唑、嘧霉胺、三唑酮、三唑磷、丙環(huán)唑、甲草胺、乙草胺、苯醚甲環(huán)唑、精喹禾靈、丁草胺、噠螨靈和阿維菌素。所述的液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法，其特征在于 所述的步驟3)中液相色譜條件色譜柱XDB-C18，1.8μ m,4. 6X50mm ；流動(dòng)相A為5mM乙酸銨+0. 1%甲酸水溶液，B為乙腈；梯度洗脫0 10min，20% 90% B ；10 18min，90%B ； 18 18. Imin, 90% 20% B ； 18. 1 25min，20% B ；進(jìn)樣量5μ L ；流速0. 3mL/min ；柱溫 30 0C ；
質(zhì)譜條件質(zhì)量分析器能提供精確質(zhì)量數(shù)的質(zhì)量分析器；掃描模式正離子_全掃描模式；質(zhì)量范圍100 1000 ；分辨率60000 ；離子源電噴霧離子源(ESI)；噴霧電壓 4. 5kV ；鞘氣壓力45arb ；輔助氣壓力5arb。所述的液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法，其特征在于所述的步驟4)中定性定量離子為農(nóng)藥的H+和NH4+加合物，且為精確質(zhì)量數(shù)。本發(fā)明用乙腈試劑提取蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留后，用分散固相萃取技術(shù)凈化；在樣品提取后，加入硫酸鎂和氯化鈉的復(fù)合鹽鹽析，確保如甲胺磷等極性農(nóng)藥向有機(jī)相分配； 用硫酸鎂、PSA、C18混合材料分散固相萃取凈化，在進(jìn)一步去除有機(jī)相中殘留的水的同時(shí)， PSA和C18吸附樣品中如糖、脂等干擾物；用全自動(dòng)篩選應(yīng)用軟件ToxID，構(gòu)建數(shù)據(jù)庫(kù)非常方便，只需在Excel錄入農(nóng)藥名稱(chēng)和分子式，自動(dòng)計(jì)算H+、NH4+或Na+加合物的精確質(zhì)量數(shù)， 可以用于復(fù)雜基體，簡(jiǎn)化樣品凈化，可以進(jìn)行快速分析，提高了數(shù)據(jù)處理速度和分析效率， 同時(shí)也極大的降低了對(duì)農(nóng)藥誤判、漏判的概率；用液相色譜_高分辨質(zhì)譜進(jìn)行樣品檢測(cè)并提取農(nóng)藥的精確質(zhì)量數(shù)進(jìn)行定性和定量，可以消除未知化合物干擾、具有定性準(zhǔn)確、定量可靠，具有數(shù)據(jù)積分處理和應(yīng)用方便等特點(diǎn)。本發(fā)明中27種農(nóng)藥的質(zhì)量準(zhǔn)確度小于lppm，檢測(cè)限為0. 01 0. 05mg/kg，添加回收率為80% 100%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于15%。


圖1為檢測(cè)的27種農(nóng)藥多殘留的質(zhì)量準(zhǔn)確度；
圖2-5為27種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液(0. 5mg/L)所對(duì)應(yīng)精確質(zhì)量數(shù)的提取離子圖； 圖6為實(shí)施例1 (西紅柿基質(zhì))的檢出農(nóng)藥所對(duì)應(yīng)精確質(zhì)量數(shù)的提取離子圖； 圖7為實(shí)施例2 (青菜基質(zhì))的檢出農(nóng)藥所對(duì)應(yīng)精確質(zhì)量數(shù)的提取離子圖； 圖8為實(shí)施例3 (大白菜基質(zhì))的檢出農(nóng)藥所對(duì)應(yīng)精確質(zhì)量數(shù)的提取離子圖。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。實(shí)施例1 1、儀器與試劑
儀器Thermo Scientifc LTQ-Orbitrap XL組合式高分辨質(zhì)譜儀(美國(guó)熱電公司)和 SURVEY0R-HPLC液相色譜儀(美國(guó)熱電公司)，高速分散機(jī)(德國(guó)IKA公司)。試劑乙腈(色譜純，德國(guó)Merck公司)；丙酮、甲苯、甲酸(色譜純，美國(guó)Tedia公司)；PSA和C18填料(粒徑40 μ m,瓦里安公司)；無(wú)水硫酸鎂(分析純，Sigma- Aldrich公司)；氯化鈉(分析純，上海試四赫維化工有限公司)，乙酸銨(分析純，美國(guó)Fluka公司)；水為Milli- Q高純水；含0.1 %甲酸的5mmol/L乙酸銨取0. 385g乙酸銨用水溶解，再加入ImL甲酸并用水稀釋至1000mL。80種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品(純度不低于95 %，Dr Ehrenstorfer 公司)，用丙酮-甲苯(3:7)分別配成Img /mL的單標(biāo)，并于-40°C下封存，使用前用乙腈逐級(jí)稀釋配制為所需濃度的混標(biāo)。 2、樣品處理
(1)樣品提取稱(chēng)取均勻試樣(西紅柿基質(zhì))25g置于200mL塑料離心管中，加入25mL乙腈，置于高速分散機(jī)中10000 r/min下勻漿2min，然后，向離心管中加入15g復(fù)合鹽(無(wú)水硫酸鎂和氯化鈉質(zhì)量比10:1)，在8000 r/min下勻漿lmin，最后，將離心管放置于離心機(jī)中， 4000 r/min Τι^^ 5min。(2)樣品凈化取4mL上層乙腈相于20mL離心管中，分別加入1. 2g無(wú)水硫酸鎂、 0. IgPSAjno. lgC18，在渦旋振蕩器上振蕩Imin后，將離心管放置于離心機(jī)中，10000 r/ min下離心2min。取上清液過(guò)0. 22 μ m有機(jī)濾膜，待測(cè)。3、標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的準(zhǔn)備
分別準(zhǔn)確稱(chēng)取標(biāo)準(zhǔn)品甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂(lè)果、涕滅威亞砜、久效磷、多菌靈、涕滅威砜、噻菌靈、3-羥基克百威、吡蟲(chóng)啉、樂(lè)果、三環(huán)唑、抗蚜威、克百威、甲萘威、多效唑、嘧霉胺、三唑酮、三唑磷、丙環(huán)唑、甲草胺、乙草胺、苯醚甲環(huán)唑、精喹禾靈、丁草胺、噠螨靈、阿維菌素，用丙酮_甲苯(3 7)溶解，分別配成1. Omg/mL的單一農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。使用時(shí)根據(jù)各農(nóng)藥的響應(yīng)，用乙腈稀釋成混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作液。4、樣品測(cè)定方法
標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品待測(cè)液在液相色譜_高分辨質(zhì)譜儀上分別進(jìn)樣。液相色譜條件色譜柱流動(dòng)相A為5mM乙酸銨+0. 1%甲酸水溶液，B為乙腈； 梯度洗脫0_10min，10%-90% B ;10-18min，90%B ;18-18. lmin，90%-10% B ；
18. l-25min, 10% B ；進(jìn)樣量:5 μ L ；流速0. 3mL/min ；柱溫30°C。質(zhì)譜條件質(zhì)量分析器FT Orbitrap ；掃描模式正離子-全掃描模式；質(zhì)量范圍100-1000 ；分辨率60000 ；離子源電噴霧離子源(ESI)；噴霧電壓4. 5kV ；鞘氣壓力 45arb5、結(jié)果分析
數(shù)據(jù)庫(kù)的構(gòu)建用ToxID軟件建立各農(nóng)藥的化合物分子式數(shù)據(jù)庫(kù)信息表，包括農(nóng)藥英文名稱(chēng)、分子式、加合物類(lèi)型(見(jiàn)表1)。定性和定量以化合物的準(zhǔn)分子離子峰(以H+或NH4+加合物形式)的精確質(zhì)量數(shù)為定性離子和定量離子。以標(biāo)準(zhǔn)工作液的質(zhì)量濃度X為橫坐標(biāo)，定量離子的峰面積Y為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)對(duì)樣品進(jìn)行定量；并以保留時(shí)間和定性離子(精確質(zhì)量數(shù))定性。對(duì)提取后的樣品待測(cè)液進(jìn)行測(cè)定，以測(cè)得農(nóng)藥的峰面積為定量離子的峰面積， 代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，求得樣品中的多菌靈和嘧霉胺分別為0. 081mg/kg和0. 0032mg/kg。為判斷方法的準(zhǔn)確性，在此樣品中加入0. 10mg/kg的多菌靈和0. 005mg/kg嘧霉胺添標(biāo)水平，重復(fù)以上的樣品前處理和儀器測(cè)定過(guò)程，測(cè)得此時(shí)樣品中的多菌靈和嘧霉胺含量分別為0. 176mg/kg和0. 0075mg/kg,即多菌靈和嘧霉胺的添標(biāo)回收率分別為95. 0%和 86. 0%，說(shuō)明此方法是準(zhǔn)確的。
表1農(nóng)藥數(shù)據(jù)庫(kù)的信息表
權(quán)利要求
1.液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法，其特征在于包括以下步驟1)樣品中農(nóng)藥殘留的乙腈提取稱(chēng)取25 50g蔬菜樣品，加入25 50ml乙腈，進(jìn)行高速分散處理，得到由蔬菜基質(zhì)、 水和乙腈組成的混合勻漿溶液，在上述勻漿溶液中加入15 25g復(fù)合鹽鹽析試劑，再進(jìn)行高速分散處理，然后進(jìn)行離心操作，靜置分層；2)樣品提取溶液的分散固相萃取凈化取2 6ml上層乙腈，分別加入0. 6 1. 8g無(wú)水硫酸鎂、0. 05 0. 2g N-丙基-乙二胺(PSA)和0. 05 0. 2gC18，再進(jìn)行振蕩離心取上清液，上清液過(guò)0. 22 μ m有機(jī)濾膜，即得到樣品溶液；3)使用液相色譜_高分辨質(zhì)譜儀檢測(cè)a)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備分別準(zhǔn)確稱(chēng)取標(biāo)準(zhǔn)品農(nóng)藥，用體積比為3:7的丙酮-甲苯溶液溶解，分別配成1. Omg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，使用時(shí)根據(jù)各農(nóng)藥的響應(yīng)，用乙腈稀釋成標(biāo)準(zhǔn)工作液；b)使用液相色譜_高分辨質(zhì)譜儀器檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)工作液和經(jīng)凈化后的樣品溶液由自動(dòng)進(jìn)樣器分別吸取標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品溶液，注入液相色譜_高分辨質(zhì)譜儀器中，樣品溶液中農(nóng)藥組分經(jīng)液相色譜柱分離，高分辨質(zhì)譜全掃描檢測(cè)；4)結(jié)果分析數(shù)據(jù)庫(kù)的構(gòu)建用ToxID軟件建立步驟3)中標(biāo)準(zhǔn)品農(nóng)藥的化合物分子式數(shù)據(jù)庫(kù)信息表；定量和定性以化合物的準(zhǔn)分子離子峰的精確質(zhì)量數(shù)為定性離子和定量離子；以標(biāo)準(zhǔn)工作液的質(zhì)量濃度X為橫坐標(biāo)，定性定量離子的峰面積Y為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)，用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)對(duì)樣品進(jìn)行單離子外標(biāo)法定量；用樣品溶液中出現(xiàn)的色譜峰保留時(shí)間和定性離子的精確質(zhì)量數(shù)進(jìn)行定性。
2.如權(quán)利要求1所述的液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法，其特征在于所述的步驟1)中復(fù)合鹽鹽析試劑為無(wú)水硫酸鎂和氯化鈉混合試劑，無(wú)水硫酸鎂和氯化鈉混合試劑中無(wú)水硫酸鎂和氯化鈉質(zhì)量比10:1。
3.3.如權(quán)利要求1所述的液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法，其特征在于所述的步驟1)中蔬菜樣品中加入乙腈后在分散機(jī)中轉(zhuǎn)速8000 12000 r/ min下勻漿1 3min，加入復(fù)合鹽鹽析試劑后在轉(zhuǎn)速8000 12000 r/min下勻漿0. 5 2min，最后在離心機(jī)中3 000 5 000 rpm下離心4 6min。
4.如權(quán)利要求1所述的液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法，其特征在于所述的步驟2)中上層乙腈加入無(wú)水硫酸鎂、N-丙基-乙二胺和C18，在渦旋振蕩器上振蕩0. 5 2min，然后在離心機(jī)8 000 12 000 r/min下離心2 4min。
5.如權(quán)利要求1所述的液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法，其特征在于所述的步驟3)中標(biāo)準(zhǔn)品農(nóng)藥為甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂(lè)果、涕滅威亞砜、久效磷、 多菌靈、涕滅威砜、噻菌靈、3-羥基克百威、吡蟲(chóng)啉、樂(lè)果、三環(huán)唑、抗蚜威、克百威、甲萘威、 多效唑、嘧霉胺、三唑酮、三唑磷、丙環(huán)唑、甲草胺、乙草胺、苯醚甲環(huán)唑、精喹禾靈、丁草胺、 噠螨靈和阿維菌素。
6.如權(quán)利要求1所述的液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法，其特征在于所述的步驟3)中液相色譜條件色譜柱XDB-C18，1. 8 μ m, 4. 6X 50mm ；流動(dòng)相A 為5mM乙酸銨+0. 1%甲酸水溶液，B為乙腈；梯度洗脫0 10min，20% 90% B ；10 18min， 90%B ；18 18. lmin，90% 20% B ； 18. 1 25min，20% B ；進(jìn)樣量5μ L ；流速0. 3mL/min ； 柱溫:30°C ；質(zhì)譜條件質(zhì)量分析器能提供精確質(zhì)量數(shù)的質(zhì)量分析器；掃描模式正離子_全掃描模式；質(zhì)量范圍100 1000 ；分辨率60000 ；離子源電噴霧離子源；噴霧電壓4. 5kV ；鞘氣壓力45arb ；輔助氣壓力5arb。
7.如權(quán)利要求1所述的液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法，其特征在于所述的步驟4)中定性離子和定量離子均為農(nóng)藥的H+和NH4+加合物，且為精確質(zhì)量數(shù)。
全文摘要
液相色譜高分辨質(zhì)譜檢測(cè)蔬菜樣品中農(nóng)藥多殘留量的方法，屬于食品安全檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。其包括以下步驟1)樣品中農(nóng)藥殘留的乙腈提取；2)樣品提取溶液的分散固相萃取凈化；3)使用液相色譜-高分辨質(zhì)譜儀檢測(cè)；4)結(jié)果分析。本發(fā)明中27種農(nóng)藥的質(zhì)量準(zhǔn)確度小于1ppm,檢測(cè)限為0.01～0.05mg/kg，添加回收率為80%～100%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于15%。
文檔編號(hào)G01N30/72GK102221589SQ20111007539
公開(kāi)日2011年10月19日 申請(qǐng)日期2011年3月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月28日
發(fā)明者曹趙云, 朱智偉, 牟仁祥, 陳銘學(xué) 申請(qǐng)人:中國(guó)水稻研究所