專利名稱：含有肟菌酯和戊唑醇殘留樣品測定前的處理方法
技術領域：
本發(fā)明屬于農(nóng)藥殘留量的測定技術領域，涉及蔬菜農(nóng)藥殘留是否超標的測定方法，更具體的說，是一種含有肟菌酯和戊唑醇農(nóng)產(chǎn)品殘留樣測定前的處理方法。
背景技術：
農(nóng)藥殘留指的是在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中施用農(nóng)藥后一部分農(nóng)藥直接或間接殘存于谷物、蔬菜、果品、畜產(chǎn)品、水產(chǎn)品中以及土壤和水體中的現(xiàn)象。農(nóng)藥殘留問題是隨著農(nóng)藥大量生產(chǎn)和廣泛使用而產(chǎn)生的。目前使用的農(nóng)藥，有些在較短時間內可以通過生物降解成為無害物質，而一些有機氯類農(nóng)藥卻難以降解，是殘留性強的農(nóng)藥。蔬菜農(nóng)藥殘留超標，會直接危及人體的神經(jīng)系統(tǒng)和肝、腎等重要器官。同時殘留農(nóng)藥在人體內蓄積，超過一定量度后會導致一些慢性疾病，如肌肉麻木、咳嗽等，甚至會誘發(fā)血管疾病、糖尿病和癌癥等。由于農(nóng)藥殘留對人類和生物危害很大，各國對農(nóng)藥的施用都進行嚴格的管理，并對食品中農(nóng)藥殘留容許量作了規(guī)定。在我國發(fā)生較多的引起農(nóng)藥殘留中毒的農(nóng)藥品種主要是有機磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥，如氧化樂果、樂果、馬拉硫磷、甲胺磷、久效磷、倍硫磷、百克威、抗芽威和西維因等。這些農(nóng)藥是通過抑制昆蟲中樞神經(jīng)中的膽堿酯酶使之死亡而發(fā)揮殺蟲作用的。但這些農(nóng)藥對人體內的膽堿酯酶也有抑制作用，它能阻斷神經(jīng)遞質的傳遞，引起肌肉麻痹造成中毒。國家雖明文規(guī)定劇毒、高毒農(nóng)藥不得用于蔬菜、瓜果、茶葉和中草藥材，例如氧化樂果、 對硫磷、甲拌磷、甲胺磷、水胺硫磷、呋哺丹等。但某些地區(qū)的菜農(nóng)仍然使用甲胺磷、甲基對硫磷等劇毒高毒農(nóng)藥于蔬菜，不時出現(xiàn)消費者因食用含有甲胺磷農(nóng)藥的蔬菜而急性中毒。肟菌酯隸屬于甲氧基丙烯酸酯類。烯肟菌酯殺菌譜廣、活性高、具有預防及治療作用、與環(huán)境生物有良好的相容性、且與苯基酰胺類殺菌劑無交互擾性，對由鞭毛菌、結合茼、子囊菌、擔子菌及半知菌引起的多種植物病害有良好的防治效果。室內試驗結果表明 烯肟菌酯對黃瓜霜霉病的盆栽殺菌活性(EC90值)為11. 192 μ g/ml ；烯肟菌酯在100 200 yg / ml的處理劑量下。施藥2 3次，對黃瓜霜霉病有非常優(yōu)異的防治效果，防效優(yōu)于甲霜靈、霜霉威、苯氧菌酯，與安克、安克·錳鋅及嘧菌酯的防效相當。肟菌酯外觀為白色或灰色精狀粉末。熔點72. 9°C，沸點312°C。毒性原藥急性經(jīng)口 LD5tl大于5000mg/kg，急性經(jīng)皮LD5tl > 2000 mg/kg。肟菌酯是一種呼吸抑制劑，它通過鎖住細胞色素b與cl之間的電子傳遞而阻止細胞ATP合成，從而抑制其線粒體呼吸而發(fā)揮抑菌作用。肟菌酯不僅殺菌譜廣，而且具有優(yōu)良的保護、治療和滲透活性。耐雨水沖刷，持效期長等特點。戊唑醇，原藥為無色晶體，熔點為102.4°C，蒸氣壓為0.013mPa(20°C )，溶解性 (200C )水3ang/L、二氯甲烷> 200g/L、甲苯50 100g/L。毒性原藥急性經(jīng)口 LD5tl約 4000mg/kg，急性經(jīng)皮LD5tl > 5000 mg/kg。戊唑醇是一種可被植物吸收并向頂端傳導的三唑類殺菌劑，如所有三唑類殺菌劑一樣，戊唑醇是真菌留醇生物合成中脫甲基化的抑制劑。 是用于種子處理或葉面噴灑的高效內吸性殺菌劑。
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由于待測成分受方法本身靈敏度的限制，絕大多數(shù)化學檢測及分析方法要求事先對試樣進行有效的、合理的處理，即在進行分析測定前對試樣進行物理的、化學的處理，將待測成分從樣品中提取出來，排除其它成分對待測成分的干擾。同時還要將待測成分濃縮或稀釋或轉變成分析測定所要求的狀態(tài)，使待測成分的量及存在形式適應所選分析方法的要求，從而使測定順利進行，以保證分析測定結果準確可靠。因此，是否能準確的檢測出微量的殘留其關鍵是樣品的前處理方法，樣品處理的好，可以減少雜質干擾，減少雜質對儀器的污染，提高分析結果的靈敏度和準確度。這就要求對樣品的前處理應加以特別重視，對不同的樣品及測定項目的不同，應選擇適當?shù)姆椒ㄒ詽M足測定要求。本專利所建立的樣品前處理方法為我單位自行研制的方法，對肟菌酯和戊唑醇農(nóng)產(chǎn)品殘留樣的處理具有很強的專屬性，同時具有處理簡單，節(jié)約成本等優(yōu)點。
發(fā)明內容
本專利所描述的含有肟菌酯和戊唑醇殘留樣品測定前的處理方法可以同時檢測肟菌酯及其代謝物肟菌酸和戊唑醇，既含有肟菌酯及其代謝物肟菌和戊唑醇的混合農(nóng)藥的水稻樣品，也可以檢測單獨還有肟菌酯及其代謝物肟菌或者戊唑醇的水稻樣品。通過查新檢索，國內未見有相關方面的方法報道。為了評價肟菌酯和戊唑醇在水稻田中使用后的安全性，本發(fā)明建立了使用氣相色譜法測定水稻中肟菌酯和戊唑醇殘留量的方法。具體是使用有機溶劑提取水稻中肟菌酯和戊唑醇，液液分配進行凈化，利用旋轉蒸發(fā)將過濾后的有機溶劑完全濃縮至干并定容，最后采用氣相色譜法檢測。采用此方法的測定結果顯示
最小檢出量肟菌酯8. 5X IO-Hg ；戊唑醇:8· ox 10-ng ;肟菌酸:2.0X10-10go最低檢出濃度植株、籽粒、稻殼、土壤和水樣的肟菌酯、戊唑醇最低檢出濃度均為0. 008mg/kg ；肟菌酸為 0. 015 mg/kg。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了專署性強的農(nóng)產(chǎn)品殘留樣測定前的處理方法 一種含有肟菌酯和戊唑醇殘留樣品測定前的處理方法，其特征在于稱樣品20. 0g，加
水30-40ml，再加入50-100mL丙酮振蕩提取20-30min，過濾，殘渣用20mL丙酮分數(shù)次洗滌， 合并濾液轉移至分液漏斗中；加入5%氯化鈉溶液20-30mL，振蕩，再用30_40mL石油醚萃取兩次，合并上層有機相，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，濃縮近干，用丙酮/正己烷體積比1 :1定容待測；最后采用外標法測定含量。本發(fā)明所述的處理方法，其中的樣品為植株、籽粒、稻殼和土壤樣品。本發(fā)明更加詳細的測定方法如下 1、前處理分析步驟
分別稱取植株、籽粒、稻殼和土壤20g，水40克。置于具塞錐形瓶中，加入50mL丙酮振蕩提取30min，過濾，殘渣用20mL丙酮分數(shù)次洗滌，合并濾液轉移至分液漏斗中。加入5%氯化鈉溶液30mL，分別用40mL石油醚萃取兩次，合并上層有機相，經(jīng)無水硫酸鈉脫水后，濃縮近干，用體積比為1:1的丙酮/正己烷定容待測。儀器條件色譜條件Agi 1 ent6890N 氣相色譜儀(NPD ) 進樣口 260°C，脈沖不分流進樣色譜柱(HP-5ms) :30mX0. 25mm, 0. 25 μ m
柱溫:60°C (2min) 20°C /min 200°C 5°C /min 250°C 20°C /min 270V (4min)
載氣=N2 (彡 99. 999%)
柱流速:1. 5mL/min
檢測器(NPD) 270 °C
氫氣流速3mL/min
空氣流速60mL/min
補充氣:15mL/min
3、試驗相關數(shù)據(jù)
3. 1標準曲線
本試驗采用外標法(峰面積)測定含量。在上述條件下，測定肟菌酯、戊唑醇進樣量與峰面積相關性，詳見表1。結果如下
月虧菌酯Y=30. 136Χ+3. 6194，r=0. 9939 戊唑醇γ=44. 722Χ+6. 346，r=0. 9903， 月虧菌酸:Y=15. 715Χ+0. 2307，r= 0. 9991。
表1后菌酯/戊唑醇標準樣品進樣量和峰面積相關性
進樣重(ng)0.10.20,412峰面積 (μνδ)肟菌醒3,610.316.237.562.0戊唑醇 .Ο15.125.458.792.0月虧菌酸1.53.56,216』31.3
3. 2最小檢出量和最低檢出濃度
最小檢出量肟菌酯8. 5 X KT11g ；戊唑醇:8. ox 10_ng ;肟菌酸:2.0X10-10go最低檢出濃度植株、籽粒、稻殼、土壤和水樣的肟菌酯、戊唑醇最低檢出濃度均為0. 008mg/kg ；肟菌酸為 0. 015 mg/kg。3. 3添加回收率數(shù)據(jù)
分別在水稻植株、糙米、稻殼、土壤、稻田水中添加農(nóng)藥標準品，肟菌酯添加濃度為0. 008,0. 05mg/kg，戊唑醇添加濃度為0. 008,0. 05mg/kg，肟菌酸添加濃度為0.015、 0.05mg/kg。添加回收率數(shù)據(jù)詳見表2。表2添加回收率表
權利要求
1.一種含有肟菌酯和戊唑醇殘留樣品測定前的處理方法，其特征在于稱取待測樣品 20. 0g，加水30-40ml，再加入50_100mL丙酮振蕩提取20_30min，過濾，殘渣用20mL丙酮分數(shù)次洗滌，合并濾液轉移至分液漏斗中；加入5%氯化鈉溶液20-30mL，振蕩，再用30_40mL 石油醚萃取兩次，合并上層有機相，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，濃縮近干，用丙酮/正己烷體積比 1 1定容待測；最后采用外標法測定含量。
2.權利要求1所述殘留樣測定前的處理方法，其中的樣品為植株、籽粒、稻殼和土壤樣品O
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含有肟菌酯和戊唑醇殘留樣品測定前的處理方法，它是稱樣品20.0g，加水30-40ml，加入50-100ml丙酮振蕩提取20-30min，過濾，殘渣用20ml丙酮分數(shù)次洗滌，合并濾液轉移至分液漏斗中；加入5%氯化鈉溶液20-30ml，振蕩，再用30-40ml石油醚萃取兩次，合并上層有機相，經(jīng)無水硫酸鈉干燥，濃縮近干，用丙酮/正己烷體積比1∶1定容待測；最后采用外標法峰面積測定含量。本發(fā)明公開的殘留樣測定前的處理方法具有測定速度快，設備簡單、測定成本低，準確度、穩(wěn)定性和可靠性高的特點。
文檔編號G01N1/10GK102226787SQ20111008992
公開日2011年10月26日 申請日期2011年4月12日 優(yōu)先權日2011年4月12日
發(fā)明者劉磊, 宋淑榮, 張玉婷, 李娜, 李輝, 邵輝, 郭永澤 申請人:天津市農(nóng)業(yè)科學院中心實驗室