專利名稱：一種治療或輔助治療腫瘤疾病的制劑中黃芪的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥制劑鑒別和含量測定技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種中藥制劑中黃芪的鑒別和含量測定方法。
背景技術(shù)：
本發(fā)明人研制出一種治療或輔助治療腫瘤疾病的中藥復(fù)方制劑，該制劑由紫河車、黃芪、熟地黃、黨參、白術(shù)、當(dāng)歸、甘草、女貞子、黃精、地丁、天花粉十一味中藥制成臨床上適宜的各種劑型，包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、丸劑等。功能益氣養(yǎng)血；主治用于氣血兩虛型腫瘤疾病的治療或輔助治療，特別適用于腫瘤放、化療以及術(shù)后體虛引起的氣血兩虛證。為了控制上述中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量，擬制定該中藥復(fù)方制劑中所含黃芪的鑒別方法，并以毛蕊異黃酮葡萄糖苷計(jì)，測定該中藥復(fù)方制劑中所含黃芪的含量。中華人民共和國藥典(2010年版一部，下同)中關(guān)于黃芪藥材的鑒別方法之一是 將黃芪藥材的甲醇提取液過中性氧化鋁柱，以甲醇洗脫，洗脫液蒸干后加水溶解，正丁醇提取，蒸干正丁醇后的殘?jiān)约状既芙夂笞鳛楣┰嚻啡芤?，以黃芪甲苷甲醇溶液為對(duì)照品溶液，采用薄層色譜法，以三氯甲烷-甲醇-水(13 7 2)為展開劑展開后進(jìn)行鑒別。中華人民共和國藥典中關(guān)于黃芪的鑒別方法之二是將黃芪藥材的乙醇提取液蒸干，殘?jiān)詺溲趸c溶液溶解，乙酸乙酯提取作為供試品溶液，以黃芪對(duì)照藥材同法制成對(duì)照品溶液，采用薄層色譜法，以三氯甲烷-甲醇(10 1)為展開劑展開后進(jìn)行鑒別。中華人民共和國藥典中關(guān)于黃芪的含量測定方法之一是以黃芪甲苷甲醇溶液為對(duì)照品溶液，將黃芪藥材用甲醇提取，蒸干后加水溶解，正丁醇提取，蒸干正丁醇后的殘?jiān)运芙?，過DlOl吸附樹脂柱，收集70%乙醇溶液洗脫液，蒸干，甲醇溶解后作為供試品溶液，采用高效液相色譜法，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-水(32 68)為流動(dòng)相，測定黃芪甲苷的含量。測定方法之二是以黃芪藥材的甲醇提取液為供試品溶液，以毛蕊異黃酮葡萄糖苷甲醇溶液為對(duì)照品溶液，采用高效液相色譜法，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈為流動(dòng)相A，0. 2%甲酸溶液為流動(dòng)相B，梯度洗脫測定毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量。以上藥典中的鑒別和含量測定方法均是針對(duì)單一黃芪藥材而制定的，對(duì)于中藥復(fù)方制劑中的黃芪，由于可能存在其他藥味的干擾，則上述鑒別和含量測定方法的專屬性不強(qiáng)。含量測定方法中，黃芪甲苷含量測定方法只能使用蒸發(fā)光散射檢測器，蒸發(fā)光散射檢測器沒有紫外檢測器常用，而且相對(duì)平均偏差比使用紫外檢測器大3%左右。使用藥典中方法測定上述中藥復(fù)方制劑中黃芪含量，黃芪甲苷含量測定供試品回收率不穩(wěn)定，重復(fù)性不理想；毛蕊異黃酮葡萄糖苷含量測定對(duì)照品分離度或峰形有時(shí)會(huì)出現(xiàn)原因不明的不穩(wěn)定，檢測結(jié)果不穩(wěn)定，重復(fù)性差，色譜條件范圍窄
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種黃芪的檢測方法，以適用于背景技術(shù)中藥復(fù)方制劑中黃芪的鑒別和含量測定。
背景技術(shù)：
所述中藥復(fù)方制劑的處方重量配比為紫河車3 7、黃芪20 50、熟地黃10 30、黨參5 20、白術(shù)5 20、當(dāng)歸5 15、甘草5 15、女貞子5 20、黃精5 15、地丁 5 20、天花粉5 20。其中，所述的地丁可以是臨床上使用的各種地丁，包括苦地丁、甜地丁或紫花地丁。所述中藥復(fù)方制劑的制備方法是將紫河車粉碎，其余黃芪等十味加水煎煮1 3 次，每次0. 5 3小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液精制成稠膏，加入紫河車粉末，按照常規(guī)制劑制備方法制成臨床上可接受的各種劑型，包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、丸劑等。所述復(fù)方制劑中，每克制劑含生藥量相當(dāng)于黃芪0. 5 1. 5g。本發(fā)明給出了上述中藥復(fù)方制劑中黃芪的含量測定方法
色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，按照乙腈甲醇=0.1 2 13的體積比配制流動(dòng)相A，以體積百分比0. 1 1. 0%的磷酸溶液為流動(dòng)相B，按下表進(jìn)行梯度洗脫； 檢測波長^Onm，柱溫15 45°C，流速0. 8 1. 2ml/分鐘。
權(quán)利要求
1.一種治療或輔助治療腫瘤疾病的制劑中黃芪的檢測方法，其特征是按照下述方法測定制劑中的黃芪含量色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，按照乙腈甲醇=0.1 2 13的體積比配制流動(dòng)相A，以體積百分比0. 1 1. 0%的磷酸溶液為流動(dòng)相B，按下表進(jìn)行梯度洗脫； 檢測波長^Onm，柱溫15 45°C，流速0. 8 1. 2ml/分鐘；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療或輔助治療腫瘤疾病的制劑中黃芪的檢測方法，其特征是按照下述方法測定制劑中的黃芪含量色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，按照乙腈甲醇=0.8 1.2 13的體積比配制流動(dòng)相A，以體積百分比0. 5 0. 8%的磷酸溶液為流動(dòng)相B，按下表進(jìn)行梯度洗脫；檢測波長260nm ；柱溫35°C，流速1. Oml/分鐘樣量；
3. 一種治療或輔助治療腫瘤疾病的制劑中黃芪的檢測方法，其特征是按照下述方法鑒別制劑中的黃芪取黃芪對(duì)照藥材，加甲醇10 200ml，加熱回流1 6小時(shí)或者超聲處理5 60分鐘， 濾過，取濾液或續(xù)濾液回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状际谷芙猓瑸V過，取濾液或續(xù)濾液配制成與毛蕊異黃酮葡萄糖苷對(duì)照品溶液濃度相適應(yīng)的黃芪對(duì)照藥材溶液，按照含量測定的色譜條件，吸取對(duì)照藥材溶液、含量測定項(xiàng)下的對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別注入液相色譜儀， 測定，記錄色譜圖，黃芪鑒別的供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上有相同的色譜峰，可判定樣品中含有黃芪。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療或輔助治療腫瘤疾病的制劑中黃芪的檢測方法，其特征是取黃芪對(duì)照藥材0. 25 2g，加甲醇20 100ml，加熱回流2 3小時(shí)或者超聲處理10 45分鐘，濾過，濾液回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状? IOml使溶解，濾過，取續(xù)濾液作為黃芪對(duì)照藥材溶液，按照含量測定的色譜條件，吸取對(duì)照藥材溶液、含量測定項(xiàng)下的對(duì)照品溶液和供試品溶液各10 20μ 1，分別注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖，黃芪鑒別的供試品色譜中，在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上有相同的色譜峰，可判定樣品中含有黃芪。
全文摘要
一種治療或輔助治療腫瘤疾病的制劑中黃芪的檢測方法，是將所述中藥復(fù)方制劑加水溶散，用水飽和的正丁醇提取，回收溶劑，甲醇純化后配制成供試品溶液，將毛蕊異黃酮葡萄糖苷對(duì)照品配制成對(duì)照品溶液，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-甲醇(0.1～2︰13)為流動(dòng)相A，0.1～1.0%磷酸溶液為流動(dòng)相B，梯度洗脫，在檢測波長260nm條件下，測定樣品中以毛蕊異黃酮葡萄糖苷計(jì)的黃芪含量，還以毛蕊異黃酮葡萄糖苷對(duì)照品溶液、黃芪對(duì)照藥材同時(shí)為對(duì)照，以含量測定的色譜條件鑒別樣品中是否含有黃芪。本發(fā)明建立的所述中藥復(fù)方制劑中黃芪的檢測方法可以很好地滿足該制劑中黃芪的質(zhì)量控制要求。
文檔編號(hào)G01N30/88GK102288717SQ20111012486
公開日2011年12月21日 申請(qǐng)日期2011年5月16日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月16日
發(fā)明者原慶泓, 朱平, 王志敏, 陳慶 申請(qǐng)人:王志敏