專利名稱：一種治療痛經(jīng)的中藥組合物的檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥組合物的檢測(cè)方法，特別是涉及一種治療痛經(jīng)的中藥組合物的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
痛經(jīng)是指婦女在經(jīng)期及其前后，出現(xiàn)小腹或腰部疼痛，甚至痛及腰骶。每隨月經(jīng)周期而發(fā)，嚴(yán)重者可伴惡心嘔吐、冷汗淋漓、手足厥冷，甚至昏厥，直接影響正常工作和生活。目前治療痛經(jīng)多采用止痛等西藥治療，長(zhǎng)期每月服藥，不僅易使機(jī)體產(chǎn)生抗藥性及成癮性，而且還會(huì)使肝、腎、胃等器官產(chǎn)生病變，副作用十分明顯。另外，現(xiàn)有技術(shù)公開了一種治療痛經(jīng)的中藥組合物及其制備方法，專利申請(qǐng)?zhí)枮?00510069315. 2，該產(chǎn)品為純中藥制劑，具有 活血化瘀、行氣止痛的功效，對(duì)于治療痛經(jīng)，尤其是原發(fā)性痛經(jīng)具有顯著療效，但缺少對(duì)該制劑的質(zhì)量控制方法，不能保證臨床應(yīng)用的安全有效，不利于藥品的標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)，也不符合現(xiàn)代化中藥發(fā)展的趨勢(shì)。該制劑的處方為丹參75重量份白茍 75重量份醋炎香附30重量份醋炙延胡索 50重量份炒川楝子25重量份小茴香 12. 5重量份蜜炙甘草 30重量份該制劑的制備方法為以上7味，取香附、小茴香浸泡6小時(shí)，水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油，蒸餾后的揮發(fā)油用6倍量的￠-環(huán)糊精，于40°C條件下，采用飽和水溶液法包結(jié)后，干燥備用，藥液濾過；取白芍以50%乙醇，提取二次，每次I小時(shí)，每次6倍量；延胡索以70%乙醇，提取三次，每次I小時(shí)，每次4倍量；提取液濾過，合并，回收乙醇；丹參以85%乙醇，提取二次，第一次I. 5小時(shí)，8倍量，第二次I小時(shí)，6倍量，提取液濾過，回收乙醇；丹參醇提后藥渣與川楝子、甘草加水煎煮二次，每次I小時(shí)，6倍量，藥液濾過；與上述四種藥液合并，濃縮至相對(duì)密度60 65°C測(cè)為I. 35 I. 38，0. 08Mpa，60 70°C減壓干燥，粉碎為細(xì)粉，力口糊精適量及香附與小茴香揮發(fā)油的￠-環(huán)糊精包結(jié)物，混勻，依照本領(lǐng)域常規(guī)技術(shù)，制成顆粒劑、片劑、膠囊劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述缺點(diǎn)，提供一種治療痛經(jīng)的中藥組合物的檢測(cè)方法，以保證藥品的安全性和有效性，提高產(chǎn)品質(zhì)量，便于藥品的標(biāo)準(zhǔn)化、現(xiàn)代化生產(chǎn)。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了一種治療痛經(jīng)的中藥組合物的檢測(cè)方法，該方法是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本組合物制劑的檢測(cè)方法包括鑒別和含量測(cè)定所述組合物由如下原料藥制成丹參 50-90重量份白茍50-90重量份醋炎香附15_45重量份醋炙延胡索30-70重量份炒川楝子15-45重量份小茴香10-30重量份蜜炙甘草20-50重量份；鑒別方法包括如下方法鑒別A、取組合物制劑研細(xì)，加乙醚超聲處理，濾過，殘?jiān)哟姿嵋阴ト芙猓鳛楣┰嚻啡芤?；另取丹參酮II A對(duì)照品，加醋 酸乙酯制成對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 ii I,分別點(diǎn)于同一娃膠G薄層板上，以16-22 : I的為展開劑,展開,取出，晾干；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；所述苯-醋酸乙酯優(yōu)選19 : I ;B、取組合物制劑研細(xì)，加乙醇超聲處理15-30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙猓盟柡偷恼〈继崛?，用水洗滌，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)右胰芙?，加中性氧化鋁，在水浴上攪勻干燥，置于已處理好的中性氧化鋁柱上，以1-2 1-2醋酸乙酯-甲醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，作為供試品溶液；另取芍藥苷?duì)照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一娃膠G薄層板上，以35-45 : 3-8 : 8-12 : 0. 1-0. 5的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；所述氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸的比例優(yōu)選為40 5 10 0. 2；C、取組合物制劑，研細(xì)，加石油醚超聲處理，濾過，濾液揮干，殘?jiān)哟姿嵋阴ト芙?，作為供試品溶液；另取a-香附酮對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以85-98 3-7 3-7的苯-醋酸乙酯-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同熒光、顏色的斑點(diǎn)；噴以2，4_ 二硝基苯肼乙醇試液，放置片刻，斑點(diǎn)漸變?yōu)槌燃t色；所述苯-醋酸乙酯-冰醋酸優(yōu)選為92 : 5 : 5。D、取組合物制劑，研細(xì)，加甲醇超聲處理15-30分鐘，濾過，濾液蒸干；殘?jiān)铀芙?，加濃氨試液調(diào)PH值為10，用乙醚提取，蒸干乙醚，殘?jiān)蛹状既芙?，作為供試品溶液；另取延胡索乙素?duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以8-13 6-10的石油醚-醋酸乙酯為展開劑，置氨蒸氣飽和的層析缸內(nèi)，預(yù)飽和后，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；所述石油醚-醋酸乙酯的比例優(yōu)選10 8. 5；含量測(cè)定包括如下方法E、丹參酮IIA的定量檢測(cè)照高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以85-95 8-12甲醇-水為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm ;理論板數(shù)按丹參酮IIA峰計(jì)算，應(yīng)不低于2000 ;對(duì)照品溶液的制備精密稱取丹參酮IIA對(duì)照品加甲醇得每Iml中含丹參酮IIA的溶液16ii g ;供試品溶液的制備取組合物制劑研細(xì)，加入甲醇超聲處理20-40分鐘，濾過，取濾液作為供試品溶液；測(cè)定法分別精密吸取供試品溶液各5iU，對(duì)照品溶液15 yl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品含丹參以丹參酮IIA的量應(yīng)不低于0. 75mg/g ；其中甲醇-水的比例優(yōu)選90 : 10 ;F、芍藥苷的定量檢測(cè)照高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；10-20 80-90的乙腈-水為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm ;理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算，應(yīng)不低于2500 ；對(duì)照品溶液的制備稱取芍藥苷對(duì)照品，加 甲醇制成每Iml含0. 05mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備取組合物制劑研細(xì)，40-60%乙醇超聲處理15-35分鐘，濾過，取濾液作為供試品溶液；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各lOiil，注入液相色譜儀，測(cè)定；所述乙腈-水的比例優(yōu)選為15 85。本發(fā)明采用了專屬性較高的高效液相色譜法對(duì)丹參酮IIA和芍藥苷的含量進(jìn)行測(cè)定及丹參、白芍、香附、延胡索的薄層色譜法進(jìn)行定性鑒別，質(zhì)量控制方法簡(jiǎn)單易行，準(zhǔn)確可靠，精確度高。本發(fā)明能很好的控制該組合物的質(zhì)量，保證用藥的安全性，從而確保其臨床療效。實(shí)驗(yàn)例I :丹參的定量檢測(cè)I.儀器與試劑惠普1050型高效液相色譜儀，DAD檢測(cè)器，化學(xué)工作站及超聲波清洗機(jī)(CX-250型250W 40KHz北京醫(yī)療設(shè)備廠)。流動(dòng)相用水為雙蒸餾水，甲醇為色譜純。丹參麗II A對(duì)照品購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所2.色譜條件色譜柱(YWGC18 (250 X 4. 6mm, 10 y m)。柱溫為室溫，甲醇-水(90 10)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm，理論塔板數(shù)按丹參酮II A計(jì)算，應(yīng)不低于2000。3.試驗(yàn)條件的選擇(I)提取溶劑及提取方法的考察根據(jù)文獻(xiàn)及丹參酮II A的性質(zhì)可知，丹參酮II A在脂溶性溶媒中有較好的溶解性能。取本發(fā)明適量，精密稱定，加100倍溶劑，超聲提取測(cè)定，試驗(yàn)結(jié)果見表I。表I提取溶劑考察結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種治療痛經(jīng)的中藥組合物的檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下鑒別和含量測(cè)定方法 所述組合物由如下原料藥制成 丹參50-90重量份白茍50-90重量份醋炎香附15-45重量份 醋炙延胡索30-70重量份炒川楝子15-45重量份小茴香10-30重量份蜜炙甘草20-50重量份 鑒別方法包括如下方法 鑒別 A、取組合物制劑研細(xì)，加乙醚超聲處理，濾過，殘?jiān)哟姿嵋阴ト芙?，作為供試品溶液；另取丹參酮II A對(duì)照品，加醋酸乙酯制成對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種 溶液各5 ii I,分別點(diǎn)于同一娃膠G薄層板上，以16-22 : I的為展開劑,展開,取出，晾干；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； B、取組合物制劑研細(xì)，加乙醇超聲處理15-30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙?，用水飽和的正丁醇提取，用水洗滌，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)右胰芙?，加中性氧化鋁，在水浴上攪勻干燥，置于已處理好的中性氧化鋁柱上，以1-2 1-2醋酸乙酯-甲醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)右掖际谷芙?，作為供試品溶液；另取芍藥苷?duì)照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以35-45 3-8 8-12 0. 1-0. 5的氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； C、取組合物制劑，研細(xì)，加石油醚超聲處理，濾過，濾液揮干，殘?jiān)哟姿嵋阴ト芙?，作為供試品溶液；另取a-香附酮對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，以85-98 3-7 3-7的苯-醋酸乙酯-冰醋酸為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同熒光、顏色的斑點(diǎn)；噴以2，4_ 二硝基苯肼乙醇試液，放置片刻，斑點(diǎn)漸變?yōu)槌燃t色； D、取組合物制劑，研細(xì)，加甲醇超聲處理15-30分鐘，濾過，濾液蒸干；殘?jiān)铀芙?，加濃氨試液調(diào)PH值為10，用乙醚提取，蒸干乙醚，殘?jiān)蛹状既芙猓鳛楣┰嚻啡芤?；另取延胡索乙素?duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以8-13 6-10的石油醚-醋酸乙酯為展開劑，置氨蒸氣飽和的層析缸內(nèi)，預(yù)飽和后，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； 含量測(cè)定包括如下方法 E、丹參酮IIA的定量檢測(cè) 照高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以85-95 8-12甲醇-水為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm ;理論板數(shù)按丹參酮II A峰計(jì)算，應(yīng)不低于2000 ;對(duì)照品溶液的制備精密稱取丹參酮IIA對(duì)照品加甲醇得每Iml中含丹參酮IIA的溶液16ii g ;供試品溶液的制備取組合物制劑研細(xì)，加入甲醇超聲處理20-40分鐘，濾過，取濾液作為供試品溶液；測(cè)定法分別精密吸取供試品溶液各5 yl，對(duì)照品溶液15 iU，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品含丹參以丹參酮IIA的量應(yīng)不低于0. 75mg/g ；其中甲醇-水的比例優(yōu)選90 : 10 ； F、芍藥苷的定量檢測(cè) 照高效液相色譜法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；10-20 80-90的乙腈-水為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm;理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算，應(yīng)不低于 2500 ； 對(duì)照品溶液的制備稱取芍藥苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含0. 05mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備取組合物制劑研細(xì)，40-60%乙醇超聲處理15-35分鐘，濾過，取濾液作為供試品溶液；測(cè)定法，分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各lOiil，注入液相色譜儀，測(cè)定。
2.如權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于鑒別A中苯-醋酸乙酯的比例優(yōu)選19 I。
3.如權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于鑒別B中所述氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸的比例優(yōu)選為40 : 5 : 10 : 0. 2。
4.如權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于鑒別C中所述苯-醋酸乙酯-冰醋酸優(yōu)選為92 : 5 : 5。
5.如權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于鑒別D中所述石油醚-醋酸乙酯的比例優(yōu)選10 8. 5。
6.如權(quán)利要求I所述的方法，其特征在于芍藥苷的定量檢測(cè)中所述乙腈-水的比例優(yōu)選為15 85。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療痛經(jīng)的中藥組合物的檢測(cè)方法，該中藥組合物原料藥為丹參、白芍、醋炙香附、醋炙延胡索、炒川楝子、小茴香、蜜炙甘草。本發(fā)明采用了專屬性較高的高效液相色譜法對(duì)丹參酮II A和芍藥苷的含量進(jìn)行測(cè)定及丹參、白芍、香附、延胡索的薄層色譜法進(jìn)行定性鑒別，方法簡(jiǎn)單易行，準(zhǔn)確可靠，精確度高。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102788862SQ201110129359
公開日2012年11月21日 申請(qǐng)日期2011年5月18日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月18日
發(fā)明者付建家, 付立家 申請(qǐng)人:北京亞東生物制藥有限公司