專利名稱：環(huán)丙氨嗪、三聚氰胺殘留二聯(lián)檢快速檢測試紙條及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食品藥物殘留免疫學(xué)快速檢測技術(shù)領(lǐng)域。具體涉及環(huán)丙氨嗪、三聚氰胺殘留二聯(lián)膠體金免疫層析快速檢測試紙條及其制備方法。
背景技術(shù)：
環(huán)丙氨嗪(cyromazine，CA)是一種高效的昆蟲生長調(diào)節(jié)劑。在養(yǎng)殖業(yè)中，它主要用做預(yù)混劑，通過飼料途徑殺滅蠅蛆。環(huán)丙氨嗪的主要功能就是控制動物廄舍內(nèi)的蒼蠅、蠅蛆。環(huán)丙氨嗪作為預(yù)混劑拌入全價料中，通過飼喂方式進入動物體內(nèi)，其絕大部分(約99 % ) 以原形及其代謝產(chǎn)物(三聚氰胺)的形式隨糞便排出體外并沉積在糞便中，從而在糞便中殺滅蠅蛆。環(huán)丙氨嗪急、慢性毒性均很低，而且無致畸、致癌、致突變作用，其主要代謝產(chǎn)物三聚氰胺毒性也特別低。環(huán)丙氨嗪在動物體內(nèi)基本不被吸收。雞攝入環(huán)丙氨嗪后，有99. 1% 被排泄出體外。環(huán)丙氨嗪的殘留非常低。在雞體內(nèi)，肝臟的殘留最高，為0.1 ppm，腎臟、肌肉、脂肪，包括雞蛋的殘留均低于0.05 ppm。在羊體內(nèi)，肝臟、腎臟、肌肉、脂肪的最大殘留限制均低于0. 03 ppm。三聚氰胺(Melamine，ΜΑ)是一種三嗪類含氮雜環(huán)有機化合物，重要的氮雜環(huán)有機化工原料。由于其氮的含量很高，加之其生產(chǎn)工藝簡單、成本很低，被一些不法商人用作食品添加劑。2007年，美國爆發(fā)寵物食品受污染事件，美國食品藥品管理局(FDA)查明參雜了低于6. 6%三聚氰胺的小麥蛋白粉是寵物食品導(dǎo)致中毒的原因。2008年9月，中國甘肅省有14名嬰兒患腎結(jié)石，導(dǎo)致嬰幼兒泌尿系統(tǒng)產(chǎn)生高度結(jié)石的罪魁禍?zhǔn)滓彩桥浞侥谭壑刑砑恿巳矍璋?。兩起事件發(fā)生后，世界各國和地方政府對于食品和飼料的三聚氰胺的檢測趨于高度重視。三聚氰胺是一種白色粉末狀物質(zhì)，呈堿性，ΡΗ8.0。與鹽酸、硫酸、草酸等都能形成三聚氰胺鹽。在中性或微堿性情況下，與甲醛縮合而成羥甲基三聚氰胺，在微酸性中與羥甲基的衍生物進行縮聚反應(yīng)而生成樹脂產(chǎn)物。遇強酸或強堿水溶液水解，胺基逐步被羥基取代，先生成三聚氰酸二酰胺，進一步水解生成三聚氰酸一酰胺，最后生成三聚氰酸。 其結(jié)構(gòu)式及化學(xué)反應(yīng)關(guān)系式如下
權(quán)利要求
1.一種環(huán)丙氨嗪、三聚氰胺殘留二聯(lián)檢快速檢測試紙條，包括背板(2)、吸水墊(3)、硝酸纖維膜(4)、結(jié)合墊(7)、樣品墊(8)，其特征在于所述背板(2)上依次連續(xù)粘附有吸水墊 (3)、硝酸纖維膜(4)、結(jié)合墊(7)和樣品墊(8)，所述樣品墊(8)靠結(jié)合墊(7)—端搭接在結(jié)合墊(7)上，所述吸水墊(3)上表面吸附有手控區(qū)封膜(1)，所述樣品墊(8)上表面吸附有樣品端封膜(9)，所述硝酸纖維膜(4)上包被有兔抗鼠的IgG質(zhì)控線(5)和MA-BSA、CA-BSA 兩條檢測線(6)；結(jié)合墊(7)上包被有所述的抗MA藥物單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物和抗CA 藥物單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物。
2.—種權(quán)利要求1所述環(huán)丙氨嗪、三聚氰胺殘留二聯(lián)檢快速檢測試紙條的制備方法， 其特征在于按如下步驟進行1)將半抗原MA、CA與牛血清白蛋白偶聯(lián)合成偶聯(lián)物MA-BSA、CA-BSA；2)將步驟1)合成的2種偶聯(lián)物免疫原免疫小鼠，通過細(xì)胞融合篩選得到分別抗MA單克隆細(xì)胞株、抗CA藥物單克隆細(xì)胞株，分別將得到單克隆細(xì)胞株注射小鼠腹腔，得到抗MA 藥物單抗、CA藥物單抗體；3)用檸檬酸三鈉與氯金酸反應(yīng)制備膠體金；4)提取小鼠IgG免疫健康家兔，得到兔抗鼠IgG抗體；5)將步驟2)制成的分別抗MA、CA單克隆抗體加入步驟3)制備的膠體金中，得到抗MA 單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、抗CA單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物；6)將抗MA單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、抗CA單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物分別包被在結(jié)合墊上；7)將步驟1)合成MA-BSA、CA-BSA分別包被在硝酸纖維素膜(4)得到兩條檢測線(6)， 分別為T1、T2;8)將步驟4)兔抗鼠IgG包被在硝酸纖維素膜(4)得到質(zhì)控線(5)；9)將手控區(qū)封膜(1)、吸水墊(3)、硝酸纖維素膜(4)結(jié)合墊(7)、樣品墊(8)和樣品端封膜(9 )依次粘貼在背板(2 )上。
全文摘要
本發(fā)明公開了環(huán)丙氨嗪、三聚氰胺殘留二聯(lián)檢快速檢測試紙條及其制備方法，硝酸纖維膜(4)上包被有兔抗鼠的IgG質(zhì)控線(5)和MA-BSA、CA-BSA兩條檢測線(6)；結(jié)合墊(8)上包被有的抗MA藥物單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物、抗CA藥物單克隆抗體-膠體金標(biāo)記物。本發(fā)明應(yīng)用免疫學(xué)技術(shù)篩選出抗MA藥物單克隆抗體、抗CA藥物的單克隆抗體，通過膠體金的制備及膠體金標(biāo)記條件的探索研究，在應(yīng)用抗MA藥物單克隆抗體、抗CA藥物單克隆抗體和膠體金技術(shù)研究建立抗MA、CA藥物二聯(lián)檢測膠體金試紙條，并對其性能進行測定。試紙條檢測樣品范圍較寬，假陽性低，檢測靈敏、準(zhǔn)確、可靠，適用于動物可食性組織如肌肉、肝臟和腎臟等組織及牛奶中CA、MA藥物殘留的二聯(lián)檢檢測。
文檔編號G01N33/577GK102297970SQ20111014002
公開日2011年12月28日 申請日期2011年5月27日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月27日
發(fā)明者樂濤, 魏啟明 申請人:重慶市科學(xué)技術(shù)研究院