專利名稱：甘藍(lán)中抗蚜威及其代謝物殘留量的測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明 屬于農(nóng)藥殘留量的測定技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及甘藍(lán)中抗蚜威及其代謝物 (去甲基抗蚜威、去甲基甲酰胺基抗蚜威)的殘留量測定方法。
背景技術(shù)：
甘藍(lán)是人們經(jīng)常且大量食用的十字花科蔬菜。日本科學(xué)家認(rèn)為，甘藍(lán)的防衰老、抗氧化的效果與蘆筍、菜花同樣處在較高的水平。甘藍(lán)的營養(yǎng)價(jià)值與大白菜相差無幾，其中維生素C的含量還要高出一倍左右。卷心菜能提高人體免疫力，預(yù)防感冒，在抗癌蔬菜中，甘藍(lán)排在第五位。蚜蟲是甘藍(lán)種植中主要害蟲之一，蚜蟲繁殖快，多著生在甘藍(lán)心葉及葉背皺縮處， 刺吸植物汁液，造成葉片卷曲變形，植株生長不良，包心不正常；此外蚜蟲還傳播多種病毒病，造成的為害遠(yuǎn)超過蚜害本身。抗蚜威，別名辟蚜霧，英文通用名稱pirimicarb。具有觸殺，熏蒸和葉面滲透作用，是選擇性很強(qiáng)的殺蚜劑，只對蚜蟲有高效，對有機(jī)磷產(chǎn)生抗性的蚜蟲亦有效，對其他害蟲無效，對捕食蚜蟲或寄生在蚜蟲體內(nèi)的害蟲天敵，如瓢蟲、草蛉、步甲、煙蚜繭蜂等殺傷作用較小。是綜合防治的理想藥劑，適用于防治蔬菜、煙草、糧食作物上的蚜蟲。由于抗蚜威高效、選擇性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，使得在甘藍(lán)和其它蔬菜種植中得到了廣泛和大量的應(yīng)用，但也因此而造成了食品安全和生態(tài)環(huán)境污染等問題。農(nóng)藥殘留聯(lián)席會(huì)議(JMPR)對抗蚜威的殘留定義為抗蚜威、去甲基抗蚜威 (demethyl pirimicarb)及去甲基甲酉先胺基抗蟲牙威(demethyl formamido pirimicarb)之和，以抗蚜威表示。目前，國內(nèi)外的方法大多是檢測抗蚜威母體，也有同時(shí)檢測抗蚜威和去甲基抗蚜威的報(bào)道，但是未見有同時(shí)檢測抗蚜威、去甲基抗蚜威和去甲基甲酰胺基抗蚜威3 種化合物殘留量的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
為了評價(jià)抗蚜威在甘藍(lán)上使用后的安全性，本發(fā)明建立了使用超高效液相-質(zhì)譜 /質(zhì)譜聯(lián)用儀(UPLC/MS/MS)法測定甘藍(lán)中抗蚜威及其代謝物(去甲基抗蚜威、去甲基甲酰胺基抗蚜威)的殘留量測定方法。具體是使用有機(jī)溶劑提取乙腈和水提取甘藍(lán)中抗蚜威及其代謝物，然后在提取液中加入飽和的氯化鈉，通過液液分配分離出有機(jī)溶劑層，并利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)將分離出的有機(jī)溶劑層完全濃縮至干并定容，最后采用超高效液相色譜_串聯(lián)質(zhì)譜 (UPLC/MS/MS)檢測。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下的技術(shù)方案
一種甘藍(lán)中抗蚜威及其代謝物殘留量的測定方法，其特征在于按如下的步驟進(jìn)行 (1)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線
用本測定方法的前處理方法處理的不含有抗蚜威及其代謝物的甘藍(lán)空白溶液，配制抗蚜威及其代謝物混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液系列濃度5、2. 5,0. 5,0. 1,0. 025和0. 01 μ g/mL，分別進(jìn)樣5 μ L，以進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。(2)前處理
稱樣IOg (精確到0. Olg)，加20mL水和30mL乙腈振蕩30min,過濾至分液漏斗，再加 20mL乙腈洗滌殘?jiān)?，洗滌液過濾至分液漏斗中，加IOg氯化鈉振搖2min，靜置5min，待分層后棄去下層水相，取上層乙腈相減壓濃縮至干，加2mL甲醇，渦旋Imin，過0. 22 μ m濾膜，轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣小瓶待測； (3)儀器條件
色譜系統(tǒng):Waters Acquity Ultra Performance LC ；
色譜柱:Acquity BEH C18(2. 1 mmX50 mm, 1. 7 μ m)；柱溫 30°C；進(jìn)樣量 5 μ L ；流動(dòng)相 乙腈/水的體積比為50/50 ；流速0. 2 mL/min，運(yùn)行3 min ； 質(zhì)譜系統(tǒng):ffaters Quattro Premier XE ；
離子源ESI(正離子模式)；毛細(xì)管電壓3.0 KV;離子源溫度110°C ；脫溶劑氣溫度 400°C ；錐孔反吹氣流量50 L/h;脫溶劑氣流量500 L/h ；檢測方式為多反應(yīng)監(jiān)測掃描模式
權(quán)利要求
1. 一種甘藍(lán)中抗蚜威及其代謝物殘留量的測定方法，其特征在于按如下的步驟進(jìn)行(1)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線用本測定方法的前處理方法處理的不含有抗蚜威及其代謝物的甘藍(lán)空白溶液，配制抗蚜威及其代謝物混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液系列濃度5、2. 5,0. 5,0. 1,0. 025和0. 01 μ g/mL，分別進(jìn)樣5 μ L，以進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線；(2)前處理稱樣IOg (精確到0. Olg),加20mL水和30mL乙腈振蕩30min,過濾至分液漏斗，再加 20mL乙腈洗滌殘?jiān)?，洗滌液過濾至分液漏斗中，加IOg氯化鈉振搖2min，靜置5min，待分層后棄去下層水相，取上層乙腈相減壓濃縮至干，加2mL甲醇，渦旋Imin，過0. 22 μ m濾膜，轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣小瓶待測；(3)儀器條件色譜系統(tǒng):Waters Acquity Ultra Performance LC ；色譜柱:Acquity BEH C18(2. 1 mmX50 mm, 1. 7 μ m)；柱溫 30°C；進(jìn)樣量 5 μ L ；流動(dòng)相 乙腈/水的體積比為50/50 ；流速0. 2 mL/min，運(yùn)行3 min ；質(zhì)譜系統(tǒng):ffaters Quattro Premier XE ；離子源ESI(正離子模式)；毛細(xì)管電壓3.0 KV;離子源溫度110°C ；脫溶劑氣溫度 400°C ；錐孔反吹氣流量50 L/h;脫溶劑氣流量500 L/h ；檢測方式為多反應(yīng)監(jiān)測掃描模式
全文摘要
本發(fā)明公開了一種甘藍(lán)中抗蚜威及其代謝物殘留量的測定方法。它是稱樣10g(精確到0.01g)，加20mL水和30mL乙腈振蕩30min，過濾至分液漏斗，再加20mL乙腈洗滌殘?jiān)?，洗滌液過濾至分液漏斗中，加10g氯化鈉振搖2min，靜置5min，待分層后棄去下層水相，取上層乙腈相減壓濃縮至干，加2mL甲醇，渦旋1min，過0.22μm濾膜，轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣小瓶；最后采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC/MS/MS)檢測。本發(fā)明公開的甘藍(lán)中抗蚜威及其代謝物殘留量的測定方法為首次建立，具有速度快、成本低、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性和可靠性高的特點(diǎn)。
文檔編號G01N30/14GK102221595SQ20111015644
公開日2011年10月19日 申請日期2011年6月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月13日
發(fā)明者邵輝 申請人:天津市農(nóng)業(yè)科學(xué)院中心實(shí)驗(yàn)室