專利名稱：一種中藥材麝香的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種中藥材的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法，特別涉及ー種中藥材麝香的指 紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
麝香的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載在2010年版中國(guó)藥典一部，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定檢查性狀、純度、干燥失重，總灰分及采用氣相色譜法測(cè)定麝香酮的含量。但由于麝香資源的不斷稀缺，人為因素等原因?qū)е瞒晗阗|(zhì)量下降，僅采用現(xiàn)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)難以客觀地反映麝香的質(zhì)量。故很有必要建立一種能較全面地反映麝香中揮發(fā)性成分的質(zhì)量檢測(cè)方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于建立ー種中藥材麝香的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法。該方法采用氣相色譜法建立了麝香的氣相色譜指紋圖譜，并通過氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析技術(shù)對(duì)不同麝香的化學(xué)成分進(jìn)行分析。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。本發(fā)明提供了ー種中藥材麝香的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法采用氣相色譜法進(jìn)行檢測(cè)，具體包括如下步驟供試品溶液制備取家養(yǎng)麝香、天然麝香或人工麝香O. 2 2重量份，家養(yǎng)麝香、天然麝香在稱重前需經(jīng)減壓干燥12 36小時(shí)，研成粉末，過5號(hào)篩；精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，精密加入無水こ醇10 20體積份，密塞，稱定重量；冰水中超聲處理10 20分鐘，功率300W，頻率40kHz ;取出，放至室溫，再稱定重量，用無水こ醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；色譜條件為HP-1彈性石英毛細(xì)管柱30mX0. 25mm X O. 25 μ m,進(jìn)樣ロ溫度250°C，載氣為N2，流速O. 8 1.21111*1^11_1，進(jìn)樣量1 34 1，分流比1 3 1，程序升溫初始溫度80°C，保持2分鐘，以每分鐘5°C的速率升溫至160°C，再以每分鐘1°C的速率升溫至200°C，保持20分鐘，再以每分鐘5°C的速率升溫至260°C，保持20分鐘；檢測(cè)器溫度280°C ;理論塔板數(shù)按麝香酮峰計(jì)算應(yīng)不低于20000 ；測(cè)定將供試品溶液注入氣相色譜儀，進(jìn)行檢測(cè)，即得。測(cè)得家養(yǎng)麝香的指紋圖譜有63個(gè)共有峰(包括麝香酮)；以對(duì)照指紋圖譜麝香酮的保留時(shí)間為1，共有峰I 63號(hào)的GC相對(duì)保留時(shí)間分別為0. 139,0. 149,0. 155,0. 163、O. 168,0.180,0. 190,0. 218,0.243,0.252,0.259,0.265,0.298,0.378,0.410,0.434、O. 536,0. 658,0. 716,0. 774,0. 782,0. 809,0. 823,0. 841,0. 866,0.873,0.880,0.894、
0.909,0. 920,0. 942,1. 000,1. 035,1. 052,1. 163,1. 176,1. 229,1. 292,1. 348,1. 370、
1.380,1. 440,1. 457,1. 469,1. 743,1. 868,1. 899,1. 914,2. 358,2. 383,2. 401,2. 452、
2.478,2. 500,2. 913,3. 083,3. 165,3. 236,3. 492,3. 502,3. 557,3. 781,3. 857 ；以對(duì)照指紋圖譜麝香酮的峰面積為1，I 63號(hào)共有峰的峰面積與麝香酮的峰面積比分別為(X10_2)O. 638,0. 830,0. 641,0. 327,0. 617,0. 402,1. 000,1. 934,4. 220,1. 288,0. 633,0. 286、O. 512,1. 010,0. 549,0. 447,0. 460,0. 539,1. 916,0. 319,1. 000,0. 456,0. 228,0. 339、
3.017,2. 711,0. 261,0. 297,0. 539,0. 924,1. 103,100. 000,1. 034,0. 854,0. 417,0. 388、O. 456,1. 093,0. 553,4. 326,2. 910,1. 042,2. 353,2. 015,6. 598,21. 069,0. 550,0. 830、10. 478,5. 781,1. 221,1. 922,1. 705,5. 091,0. 675,0. 318,0. 264,0. 255,16. 303,3. 845、 O. 873,0. 501,0. 250。將家養(yǎng)麝香供試品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜進(jìn)行匹配，相似度應(yīng)達(dá)O. 90以上。測(cè)得天然麝香的指紋圖譜有20個(gè)共有峰(包括麝香酮)；以對(duì)照指紋圖譜麝香酮的保留時(shí)間為1，共有峰I 20號(hào)的GC相對(duì)保留時(shí)間分別為0. 200,0. 241,0. 713,0. 791、O. 856、I. 000、I. 034、I. 050、I. 243、I. 640、I. 856、2. 350、2. 372、2. 488、2. 904、3. 157、
3.367,3. 484,3. 494,3. 549 ;以對(duì)照指紋圖譜麝香酮的峰面積為1，I 20號(hào)共有峰的峰面積與麝香酮的峰面積比分別為(X10-2) :0. 999,0. 328,0. 517,1. 357,0. 541,100. 000、O. 820,0. 917,7. 002,5. 807,2. 214,3. 568,1. 323,0. 776,0. 257,0. 475,0. 214,10. 836、1.938、0.328。將天然麝香供試品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜進(jìn)行匹配，相似度應(yīng)達(dá)O. 90以上。測(cè)得人工麝香的指紋圖譜有25個(gè)共有峰(包括麝香酮)；以對(duì)照指紋圖譜麝香酮的保留時(shí)間為1，共有峰I 25號(hào)的GC相對(duì)保留時(shí)間分別為0. 134,0. 262,0. 278、
0.581,0. 825,0. 839,0. 876、I. 000、I. 061、I. 122、I. 158、I. 177、I. 242、I. 363、I. 525、
1.600,1. 627,1. 696,2. 462,2. 472,2. 510,3. 045,3. 083,3. 487,3. 601 ；以對(duì)照指紋圖譜麝香酮的峰面積為1，I 25號(hào)共有峰的峰面積與麝香酮的峰面積比分別為的相對(duì)峰面積分別為(X10-2) 28. 517,58. 815,0. 642,1. 122,0. 273,0. 454,1. 206,100. 000,0. 122,0. 123、O.422,0.340,8.018,0. 147,1.103,1. 175,6.112,3.237,33.865,8.717,0. 141,0.413、O. 173,2. 909,0. 272。將人工麝香供試品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜進(jìn)行匹配，相似度應(yīng)達(dá)O. 90以上。上述相似度還可按如方法計(jì)算將麝香供試品指紋圖譜去除麝香酮峰的積分后再與對(duì)照指紋圖譜進(jìn)行匹配。去除麝香酮峰積分后的家養(yǎng)麝香供試品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜相似度應(yīng)達(dá)O. 80以上。去除麝香酮峰積分后的天然麝香供試品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜相似度應(yīng)達(dá)O. 50以上。去除麝香酮峰積分后的人工麝香供試品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜相似度應(yīng)達(dá)
O.90以上。所述供試品溶液的制備優(yōu)選如下方法取家養(yǎng)麝香、天然麝香或人工麝香O. 2重量份，家養(yǎng)麝香、天然麝香在稱重前需經(jīng)減壓干燥24小時(shí)，研成粉末，過5號(hào)篩；精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，精密加入無水こ醇10體積份，密塞，稱定重量，冰水中超聲處理15分鐘，功率300W，頻率40kHz，取出，放至室溫，再稱定重量，用無水こ醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。所述色譜條件優(yōu)選為HP-1彈性石英毛細(xì)管柱30mX0. 25mmX0. 25 μ m，進(jìn)樣ロ溫度250°C，載氣為N2，流速Iml .mirT1,進(jìn)樣量2μ1，分流比I 1，程序升溫初始溫度80°C，保持2分鐘，以每分鐘5°C的速率升溫至160°C，再以每分鐘1°C的速率升溫至200°C，保持20分鐘，再以每分鐘5°C的速率升溫至260°C，保持20分鐘；檢測(cè)器溫度280°C ;理論塔板數(shù)按麝香酮峰計(jì)算應(yīng)不低于20000 ；本發(fā)明還提供了另外ー種中藥材麝香的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法采用氣相-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用的方式進(jìn)行檢測(cè)，具體包括如下步驟
供試品溶液制備取家養(yǎng)麝香、天然麝香或人工麝香O. 2 2重量份，家養(yǎng)麝香、天然麝香在稱重前需經(jīng)減壓干燥12 36小時(shí)，研成粉末，過5號(hào)篩；精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，精密加入無水こ醇10 20體積份，密塞，稱定重量；冰水中超聲處理10 20分鐘，功率300W，頻率40kHz ;取出，放至室溫，再稱定重量，用無水こ醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；色譜條件為HP-1MS彈性石英毛細(xì)管柱30mX0.25_X0.25ym，進(jìn)樣ロ溫度250°C，載氣為He，流速O. 8 1.2ml .mirT1,進(jìn)樣量I 3μ1，分流比I 3 1，程序升溫初始溫度80°C，保持2分鐘，以每分鐘5°C的速率升溫至160°C，再以每分鐘1°C的速率升溫至200°C，保持20分鐘，再以每分鐘5°C的速率升溫至260°C，保持20分鐘；離子源溫度230°C，四極桿溫度150°C，GC-MS接ロ溫度280°C ;離子化方式EI ;電子能量70eV ；掃描范30-550m/z。測(cè)定將供試品溶液注入氣相色譜儀，采用GC-MC聯(lián)用，依色譜條件測(cè)定，鑒定各共有峰的化合物。采用GC-MC聯(lián)用，測(cè)得家養(yǎng)麝香含有的共有化合物有17個(gè)，其中7號(hào)峰為4_甲基苯酚；10號(hào)峰為苯甲酸；21號(hào)峰為I-こ基-環(huán)十二醇；29號(hào)峰為降麝香酮；32號(hào)峰為磨香酮；34號(hào)峰為1,15-十六碳ニ烯酸；37號(hào)峰為η-十六酸；40號(hào)峰為(IS, 15S)- ニ環(huán)[13. I. O]十六碳-2-酮；43號(hào)峰為順-9-十六碳醒；46號(hào)峰為醋酸去氫表雄酮；49號(hào)峰為(3 α，5β)-3-羥基-雄甾-17-酮；52號(hào)峰為雄酮/異雄酮、；53號(hào)峰為ニ氫雄甾酮；54號(hào)峰為(3 α，5α，17β)_雄甾_3，17-ニ醇；59號(hào)峰為(3β)_膽甾_5_烯_3_醇；60號(hào)峰為膽甾烷醇；61號(hào)峰為(3 β，5 α )-膽甾-7-烯_3_醇。采用GC-MC聯(lián)用，測(cè)得天然麝香含有的共有化合物有10個(gè)，其中6號(hào)峰為麝香酮；8號(hào)峰為1，15-十六碳ニ烯酸；9號(hào)峰為η-十六酸；10號(hào)峰為油酸；11號(hào)峰為醋酸去氫表雄酮；12號(hào)峰為(3 α，5 β ) -3-輕基-雄留-17-酮；14號(hào)峰為(3 α，5 α，17 β )-雄甾-3，17-ニ醇；18號(hào)峰為(3β)_膽甾-5-烯-3-醇；19號(hào)峰為膽甾烷醇；20號(hào)峰為(3 β，5 α)-膽甾-7-烯-3-醇。采用GC-MC聯(lián)用，測(cè)得人工麝香含有的共有化合物有8個(gè)，其中7號(hào)峰為十四酸；8號(hào)峰為麝香酮；13號(hào)峰為η-十六酸；17號(hào)峰為油酸；18號(hào)峰為硬脂酸；19號(hào)峰為普拉雄酮；20號(hào)峰為雄酮/異雄酮；24號(hào)峰為(3 β )_膽甾-5-烯-3-醇。所述供試品溶液的制備優(yōu)選如下方法取家養(yǎng)麝香、天然麝香或人工麝香O. 2重量份，家養(yǎng)麝香、天然麝香在稱重前需經(jīng)減壓干燥24小時(shí)，研成粉末，過5號(hào)篩；精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，精密加入無水こ醇10體積份，密塞，稱定重量，冰水中超聲處理15分鐘，功率300W，頻率40kHz，取出，放至室溫，再稱定重量，用無水こ醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。所述色譜條件優(yōu)選為HP-1MS彈性石英毛細(xì)管柱30mX0.25mmX0.25ym，進(jìn)樣CN 102914597 A
書
明
說
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ロ溫度250°C，載氣為He，流速Iml · mirT1，進(jìn)樣量2μ 1，分流比I 1，程序升溫初始溫度80°C，保持2分鐘，以每分鐘5°C的速率升溫至160°C，再以每分鐘1°C的速率升溫至200°C，保持20分鐘，再以每分鐘5°C的速率升溫至260°C，保持20分鐘；離子源溫度230°C，四極桿溫度150°C，GC-MS接ロ溫度280°C ;離子化方式EI ;電子能量70eV ;掃描范30-550m/zo
本發(fā)明所述重量份/體積份的単位對(duì)應(yīng)關(guān)系為g/ml的對(duì)應(yīng)關(guān)系。本發(fā)明經(jīng)過實(shí)驗(yàn)研究最終確定了技術(shù)方案所述的供試品制備方法及色譜檢測(cè)條件，并驗(yàn)證了該方法的穩(wěn)定性、精密度和重復(fù)性，結(jié)果滿意。本發(fā)明建立了家養(yǎng)麝香、天然麝香、人工麝香的指紋圖譜，在麝香酮積分的條件下，各樣品對(duì)比其對(duì)照指紋圖譜的相似度均大于O. 90。在麝香酮不積分條件下，三種麝香的相似度發(fā)生了變化，說明在麝香酮積分的條件下，樣品與對(duì)照?qǐng)D譜的整體相似度容易受其左右。去除麝香酮后積分的結(jié)果顯示，人工麝香的相似度最好(> O. 90)，家養(yǎng)麝香其次(> O. 80)，天然麝香相似度最低(> O. 50)?？赡苁怯捎谌斯晗銥槿斯ず铣僧a(chǎn)物，實(shí)驗(yàn)所取得的家養(yǎng)麝香樣品產(chǎn)地相對(duì)固定、動(dòng)物來源相對(duì)固定，故二者所含成分均相對(duì)固定，相似度較高。而天然麝香樣品天然麝香藥材屬于多來源中藥材，2010年版中國(guó)藥典一部規(guī)定其為“鹿科動(dòng)物林磨Moschus berezovskiiFlerov、馬磨 Moschus sifanicus Przewalski 或原磨 Moschus moschiferus Linnaeus 成熟雄體香囊中的干燥分泌物。”由于其為多種屬來源，且產(chǎn)地亦多分散，故導(dǎo)致天然麝香成分差異較大，因此去掉權(quán)重較大的麝香酮后，整體相似度最低，共有峰數(shù)相比前二者少。麝香酮不積分條件下得到的三種麝香相似度的結(jié)果，為鑒定三種不同麝香的質(zhì)量提供了更準(zhǔn)備的依據(jù)。實(shí)驗(yàn)說明本發(fā)明建立的三種麝香對(duì)照指紋圖譜能夠具備較好的專屬性。統(tǒng)計(jì)采用氣相-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用的方式鑒別得到的三種麝香各自的共有化合物，共有21個(gè)，其中有部分化合物為三種麝香均存在的化合物，部分為其它兩種麝香的非共有化合物，部分為其它麝香中不存在的化合物。比較三種麝香已知共有物質(zhì)的異同，及在各自圖譜中的分布情況分別如表I和

圖1-3所示。表I比較三種麝香已知共有物質(zhì)的異同
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權(quán)利要求
1.ー種中藥材麝香的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法采用氣相色譜法進(jìn)行檢測(cè)，其特征在于該方法包括如下步驟 供試品溶液的制備取家養(yǎng)麝香、天然麝香或人工麝香O. 2 2重量份，家養(yǎng)麝香、天然麝香在稱重前需經(jīng)減壓干燥12 36小時(shí)，研成粉末，過5號(hào)篩；精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，精密加入無水こ醇10 20體積份，密塞，稱定重量；冰水中超聲處理10 20分鐘，功率300W，頻率40kHz ;取出，放至室溫，再稱定重量，用無水こ醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得； 色譜條件=HP-I彈性石英毛細(xì)管柱30mX0. 25mmX0. 25 μ m，進(jìn)樣ロ溫度250°C，載氣為N2，流速O. 8 1.2ml ^irT1,進(jìn)樣量I 3μ 1，分流比I 3 1，程序升溫初始溫度80°C，保持2分鐘，以每分鐘5°C的速率升溫至160°C，再以每分鐘1°C的速率升溫至200°C，保持20分鐘，再以每分鐘5°C的速率升溫至260°C，保持20分鐘；檢測(cè)器溫度280°C ;理論塔板數(shù)按麝香酮峰計(jì)算應(yīng)不低于20000 ； 測(cè)定將供試品溶液注入氣相色譜儀，進(jìn)行檢測(cè)，即得。
2.如權(quán)利要求I所述的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于 測(cè)得家養(yǎng)麝香的指紋圖譜有63個(gè)共有峰，包括麝香酮；以對(duì)照指紋圖譜麝香酮的保留時(shí)間為1，共有峰I 63號(hào)的GC相對(duì)保留時(shí)間分別為0. 139,0. 149,0. 155,0. 163,0. 168、.O. 180,0. 190,0. 218,0.243,0. 252,0.259,0.265,0.298,0.378,0.410,0.434,0.536、.O. 658,0. 716,0. 774,0. 782,0. 809,0. 823,0. 841,0. 866,0.873,0.880,0.894,0.909、.0.920,0. 942,1. 000,1. 035,1. 052,1. 163,1. 176,1. 229,1. 292,1. 348,1. 370,1. 380、.1.440,1. 457,1. 469,1. 743,1. 868,1. 899,1. 914,2. 358,2. 383,2. 401,2. 452,2. 478、.2.500,2. 913,3. 083,3. 165,3. 236,3. 492,3. 502,3. 557,3. 781,3. 857 ；以對(duì)照指紋圖譜麝香酮的峰面積為1，I 63號(hào)共有峰的峰面積與麝香酮的峰面積比分別為0. 638,0. 830、.O. 641,0. 327,0. 617,0. 402,1. 000,1. 934,4. 220,1. 288,0. 633,0. 286,0. 512,1. 010、.O. 549,0. 447,0. 460,0. 539、I. 916,0. 319,1. 000,0. 456,0. 228,0. 339、3. 017、2. 711、.O.261,0.297,0.539,0.924,1.103,100.000,1.034,0.854,0.417,0.388,0. 456,1. 093、.0.553,4. 326,2. 910,1. 042,2. 353,2. 015,6. 598,21. 069,0. 550,0. 830,10. 478,5. 781、.1.221,1. 922,1. 705,5. 091,0. 675,0. 318,0. 264,0. 255,16. 303,3. 845,0. 873,0. 501、.0.250 ;將家養(yǎng)麝香供試品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜進(jìn)行匹配，相似度應(yīng)達(dá)O. 90以上； 測(cè)得天然麝香的指紋圖譜有20個(gè)共有峰，包括麝香酮；以對(duì)照指紋圖譜麝香酮的保留時(shí)間為1，共有峰I 20號(hào)的GC相對(duì)保留時(shí)間分別為0. 200,0. 241,0. 713,0. 791,0. 856、.1.000,1. 034,1. 050,1. 243,1. 640,1. 856,2. 350,2. 372,2. 488,2. 904,3. 157,3. 367、.3.484,3. 494,3. 549 ;以對(duì)照指紋圖譜麝香酮的峰面積為1，I 20號(hào)共有峰的峰面積與麝香酮的峰面積比分別為0. 999,0. 328,0. 517,1. 357,0. 541,100. 000,0. 820,0. 917,7. 002、.5. 807,2. 214,3. 568,1. 323,0. 776,0. 257,0. 475,0. 214,10. 836,1. 938,0. 328 ;將天然麝香供試品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜進(jìn)行匹配，相似度應(yīng)達(dá)O. 90以上； 測(cè)得人工麝香的指紋圖譜有25個(gè)共有峰，包括麝香酮；以對(duì)照指紋圖譜麝香酮的保留時(shí)間為1，共有峰I 25號(hào)的GC相對(duì)保留時(shí)間分別為0. 134,0. 262,0. 278,0. 581,0. 825、.0.839,0. 876、I. 000、I. 061、I. 122、I. 158、I. 177、I. 242、I. 363、I. 525、I. 600、I. 627、.1.696,2. 462,2. 472,2. 510,3. 045,3. 083,3. 487,3. 601 ；以對(duì)照指紋圖譜麝呑酮的峰面積為1，I 25號(hào)共有峰的峰面積與麝香酮的峰面積比分別為的相對(duì)峰面積分別為28. 517、.58.815,0.642,1.122,0.273,0.454,1.206,100.000,0.122,0.123,0.422,0.340,8.018、.O.147,1. 103,1. 175,6. 112,3. 237,33. 865,8. 717,0. 141,0. 413,0. 173,2. 909,0. 272 ;將人エ麝香供試品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜進(jìn)行匹配，相似度應(yīng)達(dá)O. 90以上。
3.如權(quán)利要求2所述的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于將麝香供試品指紋圖譜去除麝香酮峰的積分后再與對(duì)照指紋圖譜進(jìn)行匹配； 去除麝香酮峰積分后的家養(yǎng)麝香供試品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜相似度應(yīng)達(dá)O. 80以上； 去除麝香酮峰積分后的天然麝香供試品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜相似度應(yīng)達(dá)O. 50以上； 去除麝香酮峰積分后的人工麝香供試品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜相似度應(yīng)達(dá)O. 90以上。
4.如權(quán)利要求1、2或3所述的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于所述供試品溶液的制備方法為取家養(yǎng)麝香、天然麝香或人工麝香O. 2重量份，家養(yǎng)麝香、天然麝香在稱重前需經(jīng)減壓干燥24小時(shí)，研成粉末，過5號(hào)篩；精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，精密加入無水こ醇10體積份，密塞，稱定重量，冰水中超聲處理15分鐘，功率300W，頻率40kHz，取出，放至室溫，再稱定重量，用無水こ醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
5.如權(quán)利要求1、2或3所述的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于色譜條件為 HP-I彈性石英毛細(xì)管柱30mX0. 25mmX0. 25 μ m，進(jìn)樣ロ溫度250°C，載氣為N2，流速Iml · mirT1，進(jìn)樣量2μ 1，分流比1 1，程序升溫初始溫度80°C，保持2分鐘，以每分鐘5°C的速率升溫至160°C，再以每分鐘1°C的速率升溫至200°C，保持20分鐘，再以每分鐘5°C的速率升溫至260°C，保持20分鐘；檢測(cè)器溫度280°C ;理論塔板數(shù)按麝香酮峰計(jì)算應(yīng)不低于20000。
6.ー種中藥材麝香的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法采用氣相-質(zhì)譜聯(lián)用的方式進(jìn)行檢測(cè)，其特征在于該方法包括如下步驟 供試品溶液的制備取家養(yǎng)麝香、天然麝香或人工麝香O. 2 2重量份，家養(yǎng)麝香、天然麝香在稱重前需經(jīng)減壓干燥12 36小時(shí)，研成粉末，過5號(hào)篩，精密稱定；置50ml具塞錐形瓶中，精密加入無水こ醇10 20體積份，密塞，稱定重量；冰水中超聲處理10 20分鐘，功率300W，頻率40kHz ;取出，放至室溫，再稱定重量，用無水こ醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得； 色譜條件=HP-IMS彈性石英毛細(xì)管柱30mX O. 25mmX O. 25 μ m，進(jìn)樣ロ溫度250°C，載氣為He，流速O. 8 1.2ml -mirT1,進(jìn)樣量I 3μ1，分流比I 3 1，程序升溫初始溫度80°C，保持2分鐘，以每分鐘5°C的速率升溫至160°C，再以每分鐘1°C的速率升溫至200°C，保持20分鐘，再以每分鐘5°C的速率升溫至260°C，保持20分鐘；離子源溫度230°C，四極桿溫度150°C，GC-MS接ロ溫度280°C ;離子化方式EI ;電子能量70eV ;掃描范:30_550m/z ； 測(cè)定將供試品溶液注入氣相色譜儀，采用GC-MC聯(lián)用，依色譜條件測(cè)定，鑒定各共有峰的化合物。
7.如權(quán)利要求6所述的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于采用GC-MC聯(lián)用，測(cè)得家養(yǎng)麝香含有的共有化合物有17個(gè)，其中7號(hào)峰為4-甲基苯酚；10號(hào)峰為苯甲酸；21號(hào)峰為I-こ基-環(huán)十二醇；29號(hào)峰為降麝香酮；32號(hào)峰為麝香酮；34號(hào)峰為1，15-十六碳ニ烯酸；37號(hào)峰為η-十六酸；40號(hào)峰為(1S，15S)-ニ環(huán)[13. 1.0]十六碳-2-酮；43號(hào)峰為順-9-十六碳醒；46號(hào)峰為醋酸去氫表雄酮；49號(hào)峰為(3 α，5 β ) -3-羥基-雄甾-17-酮；52號(hào)峰為雄酮/異雄酮、；53號(hào)峰為ニ氫雄甾酮；54號(hào)峰為(3 α ,5 α，17β)_雄甾_3，17-ニ醇；59號(hào)峰為(3β)_膽甾_5_烯_3_醇；60號(hào)峰為膽甾烷醇;61號(hào)峰為(3 β，5 α )-膽甾-7-烯_3_醇； 采用GC-MC聯(lián)用，測(cè)得天然麝香含有的共有化合物有10個(gè)，其中6號(hào)峰為麝香酮；8號(hào)峰為I，15-十六碳ニ烯酸；9號(hào)峰為η-十六酸；10號(hào)峰為油酸；11號(hào)峰為醋酸去氫表雄酮；12號(hào)峰為(3α，5β)-3_羥基-雄甾_17_酮；14號(hào)峰為(3 α，5 α，17 β )-雄甾_3，17_ ニ醇；18號(hào)峰為(3 β)_膽留-5-烯-3-醇；19號(hào)峰為膽留烷醇；20號(hào)峰為(3β，5α)_膽留~ ~烯_3_醇； 采用GC-MC聯(lián)用，測(cè)得人工麝香含有的共有化合物有8個(gè)，其中7號(hào)峰為十四酸；8號(hào)峰為麝香酮；13號(hào)峰為η-十六酸；17號(hào)峰為油酸；18號(hào)峰為硬脂酸；19號(hào)峰為普拉雄酮；20號(hào)峰為雄酮/異雄酮；24號(hào)峰為(3 β )-膽甾-5-烯-3-醇。
8.如權(quán)利要求6或7所述的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于供試品溶液的制備方法為取家養(yǎng)麝香、天然麝香或人工麝香O. 2重量份，家養(yǎng)麝香、天然麝香在稱重前需經(jīng)減壓干燥24小時(shí)，研成粉末，過5號(hào)篩；精密稱定，置50ml具塞錐形瓶中，精密加入無水こ醇10體積份，密塞，稱定重量，冰水中超聲處理15分鐘，功率300W，頻率40kHz，取出，放至室溫，再稱定重量，用無水こ醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
9.如權(quán)利要求6或7所述的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于色譜條件為 HP-I MS彈性石英毛細(xì)管柱30mX0. 25mmX0. 25 μ m，進(jìn)樣ロ溫度250°C，載氣為He，流速1ml ^irT1進(jìn)樣量2μ 1，分流比1 1，程序升溫初始溫度80°C，保持2分鐘，以每分鐘5°C的速率升溫至160°C，再以每分鐘1°C的速率升溫至200°C，保持20分鐘，再以每分鐘5°C的速率升溫至260°C，保持20分鐘；離子源溫度230°C，四極桿溫度150°C，GC-MS接ロ溫度2800C ;離子化方式=EI ;電子能量70eV ;掃描范30_550m/z。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種中藥材麝香的指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法。該方法采用氣相色譜法建立了麝香的氣相色譜指紋圖譜，并通過氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析技術(shù)對(duì)不同麝香的化學(xué)成分進(jìn)行分析。本發(fā)明指紋圖譜質(zhì)量檢測(cè)方法采用特定的方法處理供試品，并對(duì)色譜檢測(cè)進(jìn)行了優(yōu)化，實(shí)驗(yàn)證明具有穩(wěn)定性、精密度和重復(fù)性，建立的三種麝香對(duì)照指紋圖譜具備較好的專屬性。本發(fā)明還在麝香酮積分與不積分條件下，對(duì)三種麝香的相似度進(jìn)行了研究，為鑒定三種不同麝香的質(zhì)量提供了更準(zhǔn)確的依據(jù)。另外本發(fā)明采用氣相-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用的方式鑒別得到三種麝香各自的共有化合物，可以作為進(jìn)一步鑒定人工麝香、家養(yǎng)麝香與天然麝香的依據(jù)。
文檔編號(hào)G01N30/06GK102914597SQ201110220830
公開日2013年2月6日 申請(qǐng)日期2011年8月2日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月2日
發(fā)明者潘杰, 陳紀(jì)鵬, 于娟, 夏松 申請(qǐng)人:漳州片仔癀藥業(yè)股份有限公司