專利名稱：一種連翹的增熒光薄層鑒別方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥材的薄層鑒別方法，具體地，涉及一種連翹的增熒光薄層鑒別方法。
背景技術(shù)：
目前在國家各類中藥制劑質(zhì)量標準中，其藥材的薄層鑒別增訂率低，平均約為處方中藥材總量的30%，無法全方位監(jiān)控制劑質(zhì)量。尤其是提取制劑，藥材的顯微特征已不附存在，顯微鑒別對其束手無策，薄層鑒別再尋找不到特征性檢測信息，就無法控制制劑質(zhì)量。造成一些不法經(jīng)營者在藥品的生產(chǎn)過程中偷工減料，以劣代優(yōu)、以假充真的情況發(fā)生， 輕者貽誤患者的病情，重者直接危害患者的健康。

發(fā)明內(nèi)容
為拓寬薄層鑒別檢測途徑，提高中藥成方制劑中的薄層鑒別增訂率，發(fā)明人對多種無檢測信息的中藥材進行了增熒光研究，并獲得理想的結(jié)果。本發(fā)明提供了一種中藥材的增熒光檢測薄層鑒別方法，該方法包含如下步驟
a、分別取供試品藥材和對照藥材粉末0.01-0. 5克，加甲醇3-10毫升，超聲處理10-15 分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各2-4微升，分別點于同一GF254薄層板上，以展開劑展開，取出，晾干；
c、薄層板上噴以熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視，供試品色譜在與對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點。作為優(yōu)選方案，本發(fā)明薄層鑒別方法種的中藥材優(yōu)選為蟾酥、白術(shù)、連翹、人工牛黃、烏藥、茵陳、牡丹皮或香附中的一種，增熒光劑優(yōu)選為10%硫酸乙醇溶液或1%三氯化鋁乙醇溶液。理論上，原本無任何檢測信息的中藥材，都可以通過本發(fā)明的增熒光的方法進行薄層鑒別，發(fā)明人特別優(yōu)選了幾種藥材的增熒光檢測薄層鑒別方法，分別如下
1、蟾酥的增熒光檢測薄層鑒別方法優(yōu)選為
a、分別取蟾酥藥材和蟾酥對照藥材粉末0.05克，加甲醇3毫升，超聲處理15分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各2微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為4 6 :0.2的環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸為展開劑展開，取出，晾干；
c、薄層板上噴以10%硫酸乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視，蟾酥供試品色譜在與蟾酥對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點。2、白術(shù)的增熒光檢測薄層鑒別方法優(yōu)選為
a、分別取白術(shù)藥材和白術(shù)對照藥材粉末0.5克，加甲醇5毫升，超聲處理10分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各4微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為 8 2 :0.2的環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸為展開劑展開，取出，晾干；
c、薄層板上噴以10%硫酸乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視，白術(shù)供試品色譜在與白術(shù)對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點。3、連翹的增熒光檢測薄層鑒別方法優(yōu)選為
a、分別取連翹藥材和連翹對照藥材粉末0.4克，加甲醇5毫升，超聲處理10分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各4微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為 10 2 :0.2的環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸為展開劑展開，取出，晾干；
c、薄層板上噴以10%硫酸乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視，連翹供試品色譜在與連翹對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點。4、人工牛黃的增熒光檢測薄層鑒別方法優(yōu)選為
a、分別取人工牛黃藥材和人工牛黃對照藥材粉末0.15克，加甲醇6毫升，超聲處理10 分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各2微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為 10 25 2 3的環(huán)己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇為展開劑展開，取出，晾干；
c、薄層板上噴以10%硫酸乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視，人工牛黃供試品色譜在與人工牛黃對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點。5、烏藥的增熒光檢測薄層鑒別方法優(yōu)選為
a、分別取烏藥藥材和烏藥對照藥材粉末0.3克，加甲醇4毫升，超聲處理10分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各4微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為 8 2 :0.2的環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸為展開劑展開，取出，晾干；
c、薄層板上噴以10%硫酸乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視，烏藥供試品色譜在與烏藥對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點。6、茵陳的增熒光檢測薄層鑒別方法優(yōu)選為
a、分別取茵陳藥材和茵陳對照藥材粉末0. 4克，加甲醇8毫升，超聲處理10分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；b、吸取供試品溶液和對照品溶液各4微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為 7 3的環(huán)己烷-乙酸乙酯為展開劑展開，取出，晾干；
c、薄層板上噴以10%硫酸乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視，茵陳供試品色譜在與茵陳對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點。7、牡丹皮的增熒光檢測薄層鑒別方法優(yōu)選為
a、分別取牡丹皮藥材和牡丹皮對照藥材粉末0.01克，加甲醇10毫升，超聲處理10分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各3微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為 8210.2的環(huán)己烷-乙酸乙酯-丙酮-甲酸為展開劑展開，取出，晾干；
c、薄層板上噴以1%三氯化鋁乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視，牡丹皮供試品色譜在與牡丹皮對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點。8、香附的增熒光檢測薄層鑒別方法優(yōu)選為
a、分別取香附藥材和香附對照藥材粉末0.5克，加甲醇4毫升，超聲處理10分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各4微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為 10 2 :0.2的環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸為展開劑展開，取出，晾干；
c、薄層板上噴以10%硫酸乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視，香附供試品色譜在與香附對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點。從8種藥材增熒光前后的薄層色譜圖對比分析，增熒光之前，不論254nm還是 365nm下，都無清晰的檢測信息呈現(xiàn)，無法對結(jié)果做出判斷，但增熒光之后，信息量大幅度增多，靈敏度提高，如烏藥呈現(xiàn)出8 9個藍、綠色熒光斑點；白術(shù)呈現(xiàn)出5 6個藍、綠色熒光斑點；連翹呈現(xiàn)出3個黃與亮藍色熒光斑點等，斑點清晰，強度很高，可用于定性甚至定量研究，詳見實施例檢測結(jié)果的各薄層色譜圖?？傊?，本發(fā)明增熒光檢測薄層鑒別方法具有靈敏、快捷、高效的特點，解決了既無紫外吸收、又無熒光的藥材的鑒別問題，使這些藥材的鑒別能夠高靈敏度、準確地進行，對提高中藥材和中藥成方制劑的薄層鑒別增訂率，無疑是一項非常有使用價值發(fā)明。


圖1蟾酥薄層鑒別圖譜，A為增熒光前254nm紫外燈下檢視照片，B為增熒光前 365nm紫外燈下檢視照片，C為增熒光后365nm紫外燈下檢視照片，斑點從左到右前三個為樣品，后三個為對照藥材。圖2白術(shù)薄層鑒別圖譜，A為增熒光前254nm紫外燈下檢視照片，B為增熒光前 365nm紫外燈下檢視照片，C為增熒光后365nm紫外燈下檢視照片，斑點從左到右前三個為樣品，后三個為對照藥材。圖3連翹薄層鑒別圖譜，A為增熒光前254nm紫外燈下檢視照片，B為增熒光前365nm紫外燈下檢視照片，C為增熒光后365nm紫外燈下檢視照片，斑點從左到右前三個為樣品，后三個為對照藥材。圖4人工牛黃薄層鑒別圖譜，A為增熒光前254nm紫外燈下檢視照片，B為增熒光前365nm紫外燈下檢視照片，C為增熒光后365nm紫外燈下檢視照片，斑點從左到右前三個為樣品，后兩個為對照藥材。圖5烏藥薄層鑒別圖譜，A為增熒光前254nm紫外燈下檢視照片，B為增熒光前 365nm紫外燈下檢視照片，C為增熒光后365nm紫外燈下檢視照片，斑點從左到右前三個為樣品，后兩個為對照藥材。圖6茵陳薄層鑒別圖譜，A為增熒光前254nm紫外燈下檢視照片，B為增熒光前 365nm紫外燈下檢視照片，C為增熒光后365nm紫外燈下檢視照片，斑點從左到右前三個為樣品，后兩個為對照藥材。圖7牡丹皮薄層鑒別圖譜，A為增熒光前254nm紫外燈下檢視照片，B為增熒光前 365nm紫外燈下檢視照片，C為增熒光后365nm紫外燈下檢視照片，斑點從左到右前三個為樣品，后三個為對照藥材。圖8香附薄層鑒別圖譜，A為增熒光前254nm紫外燈下檢視照片，B為增熒光前 365nm紫外燈下檢視照片，C為增熒光后365nm紫外燈下檢視照片，斑點從左到右前三個為樣品，接下來三個為對照藥材，最后兩個為醋制香附。
具體實施例方式下述實施例用于舉例說明本發(fā)明方法的具體實施方式
，但其不能對本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制，為證實本發(fā)明方法的技術(shù)效果，各實施例均在以展開劑展開晾干以后，噴增熒光以前，在254nm和365nm紫外燈下檢視拍照，以作增熒光后色譜圖進行比較。實施例1
蟾酥的增熒光檢測薄層鑒別
a、分別取蟾酥藥材和蟾酥對照藥材粉末0.05克，加甲醇3毫升，超聲處理15分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各2微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為 4 6 0. 2的環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸為展開劑展開，取出，晾干，分別在254nm和365nm紫外燈下檢視拍照；
c、薄層板上噴以10%硫酸乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視拍照；
結(jié)果見圖1，可見增熒光以后蟾酥供試品色譜在與蟾酥對照品色譜相應(yīng)的位置上顯4 個相同顏色的熒光斑點，而未增熒光的薄層色譜中，在254nm和365nm紫外燈下均未顯示明顯斑點。實施例2
白術(shù)的增熒光檢測薄層鑒別
a、分別取白術(shù)藥材和白術(shù)對照藥材粉末0.5克，加甲醇5毫升，超聲處理10分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各4微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為8 2 0. 2的環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸為展開劑展開，取出，晾干，分別在254nm和365nm紫外燈下檢視拍照；
c、薄層板上噴以10%硫酸乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視拍照；
結(jié)果見圖2，可見增熒光以后白術(shù)供試品色譜在與白術(shù)對照品色譜相應(yīng)的位置上顯多個相同顏色的熒光斑點，而未增熒光的薄層色譜中，在254nm和365nm紫外燈下均未顯示明顯斑點。實施例3
連翹的增熒光檢測薄層鑒別
a、分別取連翹藥材和連翹對照藥才分末0.4克，加甲醇5毫升，超聲處理10分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各4微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為 10 2 0. 2的環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸為展開劑展開，取出，晾干，分別在2Mnm和365nm紫外燈下檢視拍照；
c、薄層板上噴以10%硫酸乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視拍照；
結(jié)果見圖3，可見增熒光以后連翹供試品色譜在與連翹對照品色譜相應(yīng)的位置上顯3 個相同顏色的熒光斑點，而未增熒光的薄層色譜中，在254nm和365nm紫外燈下均未顯示明顯斑點。實施例4
人工牛黃的增熒光檢測薄層鑒別
a、分別取人工牛黃藥材和人工牛黃對照藥材粉末0.15克，加甲醇6毫升，超聲處理10 分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各2微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為 10 25 2 3的環(huán)己烷-乙酸乙酯-醋酸-甲醇為展開劑展開，取出，晾干，分別在254nm和 365nm紫外燈下檢視拍照；
c、薄層板上噴以10%硫酸乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視拍照；
結(jié)果見圖4，可見增熒光以后人工牛黃供試品色譜在與人工牛黃對照品色譜相應(yīng)的位置上顯4個相同顏色的熒光斑點，而未增熒光的薄層色譜中，在254nm和365nm紫外燈下均未顯示明顯斑點。實施例5
烏藥的增熒光檢測薄層鑒別
a、分別取烏藥藥材和烏藥對照藥材粉末0.3克，加甲醇4毫升，超聲處理10分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各4微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為 8 2 0. 2的環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸為展開劑展開，取出，晾干，分別在254nm和365nm紫外燈下檢視拍照；
c、薄層板上噴以10%硫酸乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；d、置365nm紫外燈下檢視拍照；
結(jié)果見圖5，可見增熒光以后烏藥供試品色譜在與烏藥對照品色譜相應(yīng)的位置上顯多個相同顏色的熒光斑點，而未增熒光的薄層色譜中，在254nm和365nm紫外燈下均未顯示明顯斑點。實施例6
茵陳的增熒光檢測薄層鑒別
a、分別取茵陳藥材和茵陳對照藥材粉末0.4克，加甲醇8毫升，超聲處理10分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各4微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為
73的環(huán)己烷-乙酸乙酯為展開劑展開，取出，晾干，分別在254nm和365nm紫外燈下檢視拍照；
c、薄層板上噴以10%硫酸乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視拍照；
結(jié)果見圖6，可見增熒光以后茵陳供試品色譜在與茵陳對照品色譜相應(yīng)的位置上顯多個相同顏色的熒光斑點，而未增熒光的薄層色譜中，在254nm和365nm紫外燈下均未顯示明顯斑點。實施例7
牡丹皮的增熒光檢測薄層鑒別
a、分別取牡丹皮藥材和牡丹皮對照藥材粉末0.01克，加甲醇10毫升，超聲處理10分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各3微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為
82 1 :0.2的環(huán)己烷-乙酸乙酯-丙酮-甲酸為展開劑展開，取出，晾干，分別在2Mnm和 365nm紫外燈下檢視拍照；
c、薄層板上噴以1%三氯化鋁乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視拍照；
結(jié)果見圖7，可見增熒光以后牡丹皮供試品色譜在與牡丹皮對照品色譜相應(yīng)的位置上顯1個相同顏色的熒光斑點，而未增熒光的薄層色譜中，在254nm和365nm紫外燈下均未顯示明顯斑點。實施例8
香附的增熒光檢測薄層鑒別
a、分別取香附藥材和香附對照藥材粉末0.5克，加甲醇4毫升，超聲處理10分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；
b、吸取供試品溶液和對照品溶液各4微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為 10 2 0. 2的環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸為展開劑展開，取出，晾干，分別在2Mnm和365nm紫外燈下檢視拍照；
c、薄層板上噴以10%硫酸乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；
d、置365nm紫外燈下檢視拍照；
結(jié)果見圖8，可見增熒光以后香附供試品色譜在與香附對照品色譜相應(yīng)的位置上顯多個相同顏色的熒光斑點，而未增熒光的薄層色譜中，在254nm和365nm紫外燈下均未顯示明顯斑點。
權(quán)利要求
1. 一種連翹的增熒光薄層鑒別方法，其特征在于該方法包含如下步驟a、分別取連翹藥材和連翹對照藥材粉末0.4克，加甲醇5毫升，超聲處理10分鐘，取上清液作為供試品溶液和對照品溶液；b、吸取供試品溶液和對照品溶液各4微升，分別點于同一GF254薄層板上，以體積比為 10 2 :0.2的環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸為展開劑展開，取出，晾干；c、薄層板上噴以10%硫酸乙醇溶液作為熒光增強劑，105°C加熱至斑點顯色清晰；d、置365nm紫外燈下檢視，連翹供試品色譜在與連翹對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種中藥材的增熒光檢測薄層鑒別方法，該方法在普通薄層鑒別的基礎(chǔ)上增加增熒光劑，對多種無檢測信息的中藥材進行鑒別獲得了理想的結(jié)果，大大拓寬薄層鑒別檢測途徑，可有效提高中藥成方制劑中的薄層鑒別增訂率。
文檔編號G01N30/90GK102323373SQ20111024624
公開日2012年1月18日 申請日期2010年11月2日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月2日
發(fā)明者封淑華, 李向軍, 李曉燕, 許紅輝, 韓桂茹 申請人:河北以嶺醫(yī)藥研究院有限公司