專(zhuān)利名稱(chēng)：地溝油的鑒別方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種地溝油的鑒別方法。
背景技術(shù)：
地溝油是一個(gè)泛指的概念，英文翻譯為“illegal cooking oil”，也可稱(chēng)為 "swill-cooked dirty oil”，是人們對(duì)于各類(lèi)劣質(zhì)油的通稱(chēng)。本發(fā)明中的地溝油指以下三類(lèi)一是狹義的地溝油，即將下水道中的油膩漂浮物經(jīng)過(guò)加工、提煉出的油；二是飯店的剩飯菜(通稱(chēng)泔水)經(jīng)過(guò)加工、提煉出的油，又稱(chēng)為“泔水油”、“潲水油”；三是劣質(zhì)豬牛肉、內(nèi)臟、皮或其它動(dòng)物的組織經(jīng)加工以及提煉后產(chǎn)出的油。目前地溝油問(wèn)題在我國(guó)凸顯，引起社會(huì)各層的高度重視，甚至導(dǎo)致部分民眾產(chǎn)生恐慌心理，極大地影響了政府和監(jiān)管部門(mén)在民眾心目中的形象。從醫(yī)學(xué)和生理角度講，長(zhǎng)期食用地溝油可能會(huì)破壞白血球和消化道黏膜，引起食物中毒，甚至致癌。地溝油中可能存在的黃曲霉毒素，其毒性是砒霜的100倍。油脂反復(fù)煎炸，與氧接觸，發(fā)生水解、氧化、聚合等復(fù)雜反應(yīng)，致使油黏度增加，色澤加深，過(guò)氧化值升高，并產(chǎn)生一些揮發(fā)物及醛、酮、內(nèi)酯等有刺激性氣味的物質(zhì)，這些物質(zhì)也具有致癌作用。根據(jù)目前國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道，地溝油的檢測(cè)研究一般分為四大類(lèi)方法。一類(lèi)為感官檢驗(yàn)，主要通過(guò)看、聞、嘗、聽(tīng)、問(wèn)五個(gè)方面來(lái)鑒別；第二類(lèi)為理化檢驗(yàn)方法，分別檢驗(yàn)諸如水分、比重、折光率、皂化值、酸值、羰基值、過(guò)氧化值、碘值、重金屬、揮發(fā)性有機(jī)物、脂肪酸相對(duì)不飽和度、膽固醇、氯化鈉殘留、谷氨酸鈉殘留、氧化產(chǎn)物等指標(biāo)；第三類(lèi)為快速檢測(cè)方法，如快速檢測(cè)試紙以及利用金屬離子濃度與電導(dǎo)率之間的關(guān)系，通過(guò)檢測(cè)油的電導(dǎo)率來(lái)進(jìn)行識(shí)別；第四類(lèi)為儀器檢測(cè)方法，包括低場(chǎng)核磁共振、拉曼光譜等。經(jīng)我們大量研究，特對(duì)以上方法進(jìn)行評(píng)判。精煉的地溝油的相對(duì)密度、折射率、過(guò)氧化值、皂化值、羰基價(jià)、重金屬等指標(biāo)值與正常食用油接近，不宜用作廢油脂的鑒別指標(biāo)。張璇等認(rèn)為水分、酸值、碘值、硫酸根離子、氧化值、脂肪酸等可作為鑒別指標(biāo)。其中感官性狀、酸值、氧化值、硫酸根離子、脂肪酸相對(duì)不飽和度、揮發(fā)性有機(jī)物中的醛類(lèi)和酮類(lèi)化合物等指標(biāo)可用于鑒別泔水油；碘值指標(biāo)可用于鑒別煎炸老油，但不能鑒別泔水油。文獻(xiàn)來(lái)源餐飲業(yè)廢油脂有害成分及特征指標(biāo)研究(廣州環(huán)境科學(xué)，張璇等)。但是我們發(fā)現(xiàn)，地溝油經(jīng)過(guò)幾級(jí)精煉，其微生物指標(biāo)、水分指標(biāo)也可以合格，顏色可以變淺，酸價(jià)也可以通過(guò)改變工藝降低至合格狀態(tài)。為使地溝油易于分離，加工過(guò)程中可能會(huì)使用硫酸，但硫酸并不是唯一可用或必用的化學(xué)物質(zhì)，所以測(cè)定硫酸根也就只能針對(duì)使用了硫酸的地溝油。酸價(jià)和過(guò)氧化值是國(guó)家規(guī)定的食用油檢測(cè)指標(biāo)，而網(wǎng)上提供的原料不但聲稱(chēng)可以脫臭、脫色，而且可對(duì)地溝油的酸價(jià)和過(guò)氧化值進(jìn)行處理，可將酸價(jià)為70至100多的地溝油降至3以下。另外，網(wǎng)絡(luò)上現(xiàn)在有不少人在叫賣(mài)地溝油脫色、去臭方法及設(shè)備、原料。其中一種名為脫色砂的化學(xué)制品，不僅可以幫助地溝油脫色，而且其PH值呈堿性，可有效防止地溝油氧化變色；而一種名為油脂凈的化學(xué)制品則可以為地溝油脫色去酸，雖然我們懷疑其技術(shù)的真實(shí)性，但是絕不低估不法分子的智商，三聚氰胺就是一個(gè)鮮明的例子。武漢工業(yè)學(xué)院王樂(lè)等發(fā)現(xiàn)Fe、Pb、Cr、Zn、Mn在地溝油中含量明顯超出食用油，揮發(fā)性物質(zhì)D-甘油酸在揮發(fā)性物質(zhì)中相對(duì)含量最高，此物質(zhì)在食用油中未檢出。其有關(guān)重金屬的研究成果與張璇等研究結(jié)果相悖，這可能是由于樣品來(lái)源或者加工工藝的不同引起。 揮發(fā)性物質(zhì)D-甘油酸我們未在地溝油中發(fā)現(xiàn)。氯化鈉、谷氨酸鈉、膽固醇等文獻(xiàn)報(bào)道的指標(biāo)成分的測(cè)定研究。對(duì)于氯化鈉，在地溝油的精煉過(guò)程中實(shí)際上已經(jīng)有很多已經(jīng)被除去；另外也完全可以采用技術(shù)將地溝油中氯化鈉除去，比如我們可以借鑒GB/T 12457-90食品中氯化鈉的測(cè)定法方，考慮在地溝油酸化處理后，加入過(guò)量的硝酸銀溶液，使生成氯化銀沉淀，則氯化鈉測(cè)定將無(wú)從談起；同時(shí)，由于加工工藝的不同或者因?yàn)椴环ㄉ倘丝桃庖?guī)避，一般外源性物質(zhì)(比如硫酸、氯化鈉等)很難被檢測(cè)到或者容易被除去。由于餐飲業(yè)廢棄物中提取的地溝油成分復(fù)雜，往往會(huì)有大量的動(dòng)物性食品。因此， 餐飲廢棄物中不可避免地混有動(dòng)物脂肪。動(dòng)植物組織中都含有留醇，動(dòng)物油脂的特征性甾醇是膽固醇，而植物油中一般不含或含有極少量的膽固醇。植物油中主要含有谷留醇、豆甾醇、菜油留醇等多種植物留醇。因此通過(guò)測(cè)定油中膽固醇的量，即可判定植物油中是否含有動(dòng)物油脂，從而推斷該油是否混有地溝油。這個(gè)方法理論上可行，但在檢測(cè)中出現(xiàn)假陽(yáng)性的可能性很大。熒光分析法分析十二烷基苯磺酸鈉鑒別潲水油；劉薇等在實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，潲水油中含有洗潔精的主要成分十二烷基苯磺酸鈉。潲水油經(jīng)過(guò)水洗預(yù)處理，在水相中的十二烷基苯磺酸鈉具有特征熒光波峰出現(xiàn)，合格食用植物油的水相在此波長(zhǎng)處無(wú)波峰出現(xiàn)。該技術(shù)我們目前未作驗(yàn)證。但是多級(jí)精煉的地溝油工藝有步驟就是進(jìn)行水洗，那么十二烷基苯磺酸鈉大部分會(huì)被洗掉。電導(dǎo)率檢測(cè)法只能針對(duì)初級(jí)精煉的地溝油，薄層色譜法主要是檢測(cè)地溝油中的極性物質(zhì)，但是極性物質(zhì)很容易被白土等吸附掉。研究發(fā)現(xiàn)，地溝油中含有大量有機(jī)物，長(zhǎng)時(shí)間高溫條件下有機(jī)物分解產(chǎn)生苯并芘等多環(huán)芳烴類(lèi)有害物質(zhì)，這些也可以作為地溝油鑒別的研究方向。但是多環(huán)芳烴很容易被活性炭吸附，而活性炭也是犯罪分子精煉地溝油時(shí)會(huì)用到的一種脫色原料；利用儀器檢測(cè)方法時(shí)，由于低場(chǎng)核磁共振、拉曼光譜等儀器十分昂貴，較難普及， 而且難以定量只能定性，故不適合推廣應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種地溝油的鑒別方法，主要解決了上述背景技術(shù)中存在的問(wèn)題，該地溝油的鑒別方法主要是利用測(cè)定棕櫚油酸在油脂中占脂肪酸總量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，來(lái)確定其是否為地溝油，具有靶點(diǎn)明確，特征性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性強(qiáng)，適用于快速檢測(cè)等特點(diǎn)。本發(fā)明的具體技術(shù)解決方案如下該地溝油的鑒別方法，包括以下步驟1]設(shè)定檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)以棕櫚油酸在油脂中占脂肪酸總量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)作為檢測(cè)地溝油的標(biāo)準(zhǔn)；棕櫚油酸在油脂中占脂肪酸總量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于0. 19%時(shí)，則為地溝油或摻有地溝油，棕櫚油酸在油脂中占脂肪酸總量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)小于0. 19%時(shí)，則為正常油品；2]檢測(cè)測(cè)定待測(cè)樣品中棕櫚油酸在油脂中占脂肪酸總量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)；3]對(duì)比定性將步驟2檢測(cè)的結(jié)果與步驟1設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對(duì)比，確定待測(cè)樣品是否為地溝油。上述步驟2]檢測(cè)具體是2. 1]取待測(cè)樣品試樣；2. 2]對(duì)步驟2. 1中所取待測(cè)樣品試樣進(jìn)行皂化處理；2. 3]對(duì)經(jīng)步驟2. 2處理完成的待測(cè)樣品試樣進(jìn)行甲酯化處理；2. 4]對(duì)經(jīng)步驟2. 3中處理完成的待測(cè)樣品采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法或者氣相色譜法測(cè)定，用峰面積或峰高歸一化法定量。計(jì)算棕櫚油酸在油脂中占脂肪酸總量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。上述步驟2. 2皂化處理具體是稱(chēng)取100_500mg試樣將試樣置于燒瓶中，加入氫氧化鈉甲醇溶液及沸石，然后迅速向燒瓶中導(dǎo)入5min IOmin干燥氮?dú)鈱⒖諝馀诺簦諝馀磐旰蠼由侠淠?，水浴回流直至油滴消失，用移液管從冷凝器頂部加?mL的三氟化硼甲醇溶液于沸騰的溶液里；空氣排出過(guò)程中每30s 60s緩緩搖動(dòng)燒瓶，以防止氫氧化鈉形成固態(tài)附著在瓶壁上；上述步驟2. 3甲酯化處理具體是對(duì)步驟2. 2中加入三氟化硼甲醇溶液于沸騰的溶液繼續(xù)回流3min，再?gòu)睦淠茼敳烤芗尤?mL異辛烷，取下冷凝器，拿出燒瓶，立即加入20mL飽和氯化鈉溶液，振搖至少15s，繼續(xù)加入飽和氯化鈉溶液至燒瓶頸部，靜置分層， 精密吸取上層異辛烷溶液lmL，通過(guò)適量無(wú)水硫酸鈉除去痕量的水，轉(zhuǎn)移至25mL量瓶中，加異辛烷至刻度，供氣相色譜-質(zhì)譜儀或氣相色譜儀分析；上述步驟2. 4采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法的條件為色譜柱為弱極性毛細(xì)管色譜柱，以柱長(zhǎng)30m，內(nèi)徑0. 25mm，涂布厚度0. 25 μ m的 HP-5MS毛細(xì)管色譜柱為佳；柱溫為程序升溫，初始溫度140°C，保持3min，以;TC . mirT1升溫至220°C，保持15min ；也可根據(jù)分離情況適度調(diào)節(jié)；載氣為氦氣，載氣流量0. 50 1. 5mL. min-1，分流進(jìn)樣(分流比根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整)；離子源為EI源，溫度為180 350°C ；接口溫度180 350°C ；電子轟擊能量70eV;質(zhì)量分析器為四極桿，kan模式，質(zhì)量掃描范圍 20 600amu ；進(jìn)樣口溫度 150 350°C。上述步驟2. 4采用氣相色譜法的條件為色譜柱為弱極性毛細(xì)管色譜柱，以柱長(zhǎng)30m，內(nèi)徑0. 25mm，涂布厚度0. 25 μ m的 HP-5毛細(xì)管色譜柱為佳；柱溫為程序升溫，初始溫度140°C，保持:3min，以5°C .mirT1升溫至 250°C，保持IOmin ；也可根據(jù)分離情況適度調(diào)節(jié)；用氫火焰離子化檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)器溫度 180 3500C ；進(jìn)樣口溫度150 350°C ；載氣為氮?dú)饣蚝猓d氣流量0. 5 1. 5mL. min"1, 分流進(jìn)樣(分流比根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整)；進(jìn)樣口溫度150 350°C。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于1、靶點(diǎn)明確，特征性強(qiáng)。經(jīng)我們研究，棕櫚油酸僅在動(dòng)物油脂中含量較高，常見(jiàn)植物油只有橄欖油略高，其它植物油中均不含有或含量顯著低于動(dòng)物油脂。所以本方法不針對(duì)橄欖油。有文獻(xiàn)報(bào)道澳洲堅(jiān)果油(澳洲堅(jiān)果蒿)和沙棘油(沙棘)中棕櫚油酸含量較高，但是這兩種油脂在我國(guó)未作為食用油脂。2、普通精煉工藝難以除去該物質(zhì)。棕櫚油酸屬于十六碳單不飽和脂肪酸，與植物油中的其它脂肪酸性質(zhì)相近，并且碳鏈長(zhǎng)度適中，與油脂中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)油酸、棕櫚酸等接近或一致。若要除去該物質(zhì)，需要很高的技術(shù)，那么違法成本就會(huì)大大提高。目前所知，沒(méi)有這樣的精煉工藝。3、操作簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性強(qiáng)，儀器普及率高。本方法采用歸一化法，因此對(duì)稱(chēng)樣等操作的準(zhǔn)確性要求較低，操作較為簡(jiǎn)單，不同實(shí)驗(yàn)室、不同人員操作的結(jié)果重現(xiàn)性非常高；而且氣相色譜在全國(guó)普及率很高，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀在各檢測(cè)機(jī)構(gòu)也多有配備。4、適用于快速檢測(cè)。目前，車(chē)載式或便攜式氣相色譜、氣相色譜-質(zhì)譜儀在一些檢測(cè)單位已有配備，并且價(jià)格適中，適用于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。


圖IEI質(zhì)譜總離子流圖；圖2氣相色譜示意圖；圖3初加工地溝油氣質(zhì)總離子流圖；圖4精煉地溝油氣質(zhì)總離子流圖。
具體實(shí)施例方式食用植物油等油脂衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中的衛(wèi)生學(xué)指標(biāo)反映的是食用成品油的基本特性，只能判斷油脂質(zhì)量的優(yōu)劣，以衛(wèi)生指標(biāo)作為判定廢棄食用油脂的直接證據(jù)具有很大片面性， 不利于依法實(shí)施食品衛(wèi)生監(jiān)督。同時(shí)，廢棄食用油脂來(lái)源復(fù)雜，如煎炸油、地溝油等，在實(shí)際工作中不可能在區(qū)分其來(lái)源后再對(duì)樣品進(jìn)行檢驗(yàn)，因此鑒別指標(biāo)必須具有較為普遍適用性與可操作性，基于上述原則，本發(fā)明以棕櫚油酸在油脂中占脂肪酸總量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)做為檢測(cè)地溝油的標(biāo)準(zhǔn)。棕櫚油酸，英文名cis-9-Hexadecenoic Acid 或 Palmitoleic Acid。是一種單不飽和脂肪酸，也稱(chēng)棕櫚一烯酸、(ζ)-9-十六碳烯酸，可以縮寫(xiě)為16:1Δ9，分子式C16H3(102。表1棕櫚油酸甲酯質(zhì)譜特征
權(quán)利要求
1.一種地溝油的鑒別方法，其特征在于，包括以下步驟1]設(shè)定檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)以棕櫚油酸在油脂中占脂肪酸總量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)作為檢測(cè)地溝油的標(biāo)準(zhǔn)；棕櫚油酸在油脂中占脂肪酸總量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于0. 19%時(shí)，則為地溝油或摻有地溝油，棕櫚油酸在油脂中占脂肪酸總量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)小于0. 19%時(shí)，則為正常油品；2]檢測(cè)測(cè)定待測(cè)樣品中棕櫚油酸在油脂中占脂肪酸總量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)；3]對(duì)比定性將步驟2檢測(cè)的結(jié)果與步驟1設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對(duì)比，確定待測(cè)樣品是否為地溝油。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的地溝油的鑒別方法，其特征在于所述步驟2]檢測(cè)測(cè)定待測(cè)樣品中棕櫚油酸在油脂中占脂肪酸總量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，其具體是2. 1]取待測(cè)樣品試樣；2. 2]對(duì)步驟2. 1中所取待測(cè)樣品試樣進(jìn)行皂化處理；2. 3]對(duì)經(jīng)步驟2. 2處理完成的待測(cè)樣品試樣進(jìn)行甲酯化處理；2.4]對(duì)經(jīng)步驟2. 3中處理完成的待測(cè)樣品采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法或氣相色譜法測(cè)定，用峰面積或峰高歸一化法定量，計(jì)算棕櫚油酸在油脂中占脂肪酸總量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的地溝油的鑒別方法，其特征在于所述步驟2.2皂化處理具體是稱(chēng)取100-500mg試樣將試樣置于燒瓶中，加入氫氧化鈉甲醇溶液及沸石，然后迅速向燒瓶中導(dǎo)入5min IOmin干燥氮?dú)鈱⒖諝馀诺?，空氣排完后接上冷凝器，水浴回流直至油滴消失，用移液管從冷凝器頂部加?mL的三氟化硼甲醇溶液于沸騰的溶液里；空氣排出過(guò)程中每30s 60s緩緩搖動(dòng)燒瓶，以防止氫氧化鈉形成固態(tài)附著在瓶壁上。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的地溝油的鑒別方法，其特征在于所述步驟2.3甲酯化處理具體是對(duì)步驟2. 2中加入三氟化硼甲醇溶液于沸騰的溶液繼續(xù)回流3min，再?gòu)睦淠茼敳烤芗尤?mL異辛烷，取下冷凝器，拿出燒瓶，立即加入20mL飽和氯化鈉溶液，振搖至少 15s,繼續(xù)加入飽和氯化鈉溶液至燒瓶頸部，靜置分層，精密吸取上層異辛烷溶液lmL，通過(guò)適量無(wú)水硫酸鈉除去痕量的水，轉(zhuǎn)移至25mL量瓶中，加異辛烷至刻度，供氣相色譜-質(zhì)譜儀或氣相色譜儀分析。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的地溝油的鑒別方法，其特征在于所述步驟2.4采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法的條件為色譜柱為弱極性毛細(xì)管色譜柱，柱溫為程序升溫，初始溫度 140°C，保持3min，以3°C . mirT1升溫至220°C，保持15min ；或根據(jù)分離情況適度調(diào)節(jié)；載氣為氦氣，載氣流量0. 50 1.5mL. min-1，分流進(jìn)樣；離子源為EI源，溫度為180 350°C;接口溫度180 350°C;電子轟擊能量70eV ；質(zhì)量分析器為四極桿，Scan模式，質(zhì)量掃描范圍 20 600amu ；進(jìn)樣口溫度 150 350°C。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的地溝油的鑒別方法，其特征在于所述色譜柱是柱長(zhǎng)30m，內(nèi)徑0. 25mm,涂布厚度0. 25 μ m的HP-5MS毛細(xì)管色譜柱。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的地溝油的鑒別方法，其特征在于所述步驟2.4采用氣相色譜法的條件為色譜柱為弱極性毛細(xì)管色譜柱，柱溫為程序升溫，初始溫度140°C，保持 3min,以5°C . mirT1升溫至250°C，保持IOmin ；或根據(jù)分離情況適度調(diào)節(jié)；用氫火焰離子化檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)器溫度180 350°C ；進(jìn)樣口溫度150 350°C ；載氣為氮?dú)饣蚝?，載氣流量0. 5 1. 5mL. mirT1，分流進(jìn)樣；進(jìn)樣口溫度150 350 0C0
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的地溝油的鑒別方法，其特征在于所述色譜柱是柱長(zhǎng)30m，內(nèi)徑0. 25mm,涂布厚度0. 25 μ m的HP-5毛細(xì)管色譜柱。
全文摘要
本發(fā)明提供一種地溝油的鑒別方法，主要解決了現(xiàn)有地溝油鑒別方法中存在的問(wèn)題，該地溝油的鑒別方法主要是利用測(cè)定棕櫚油酸在油脂中占脂肪酸總量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，來(lái)確定其是否為地溝油，實(shí)際檢測(cè)中，試樣經(jīng)皂化、甲酯化后，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法或者氣相色譜法測(cè)定，用峰面積或峰高歸一化法定量后以判定是否為地溝油，該方法具有具有靶點(diǎn)明確，特征性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性強(qiáng)，適用于快速檢測(cè)等特點(diǎn)。
文檔編號(hào)G01N30/06GK102393426SQ20111033331
公開(kāi)日2012年3月28日 申請(qǐng)日期2011年10月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月28日
發(fā)明者劉海靜, 呂卓, 徐翔, 朱小紅, 李濤, 楊智海, 林芳, 馬鵬飛 申請(qǐng)人:李濤, 陜西省食品藥品檢驗(yàn)所