專利名稱：一種基于免疫磁珠的cea時(shí)間分辨熒光免疫分析試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物分析化學(xué)、納米生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，涉及一種基于免疫磁珠的CEA時(shí)間分辨熒光免疫分析試劑盒。
背景技術(shù)：
癌胚抗原(CEA)是1965年Gold和Freedman首先從胎兒及結(jié)腸癌組織中發(fā)現(xiàn)的。 CEA的編碼基因位于19號(hào)染色體，是一種分子量為22000的多糖蛋白復(fù)合物，45%為蛋白質(zhì)。一般情況下，CEA是由胎兒胃腸道上皮組織、胰和肝細(xì)胞所合成。通常在妊娠前6個(gè)月內(nèi)CEA含量增高，出生后血清中含量已很低。正常情況下，CEA經(jīng)胃腸道代謝，而腫瘤狀態(tài)時(shí)的CEA則進(jìn)入血液和淋巴循環(huán)，引起血清CEA異常增高。目前認(rèn)為，CEA廣泛存在于內(nèi)胚葉起源的消化系統(tǒng)癌中，如胃癌、大腸癌、肝癌、胰腺癌，也可存在于小細(xì)胞肺癌、乳腺癌、甲狀腺髓樣癌中。因此，檢測(cè)血清中CEA含量對(duì)上述癌癥的診斷具有輔助價(jià)值。目前常規(guī)的癌胚抗原檢測(cè)大多采用酶免疫分析(Enzymatic immunoassay, EIA), 化學(xué)發(fā)光免疫分析(Chemilinescent immunoassay, CLIA)和時(shí)間分辨熒光免疫分析 (Time-resolved fluoroimmunoassay, TRFIA)等。酶聯(lián)免疫法試劑盒為定性或半定量試劑，不能為臨床醫(yī)生提供精確的定量，很難有效指導(dǎo)臨床的治療。CLIA與其它標(biāo)記技術(shù)相比有許多優(yōu)點(diǎn)①無(wú)放射性輻射的危害；②靈敏度高，檢測(cè)線性范圍寬；③穩(wěn)定性好、自動(dòng)化程度高；④應(yīng)用范圍寬，可檢測(cè)不同分子大小的抗原、 半抗原和抗體，又可以用于核酸探針的檢測(cè)。缺點(diǎn)是發(fā)光過(guò)程短、樣品不能重復(fù)檢測(cè)、本底較高及易受環(huán)境物質(zhì)干擾。目前國(guó)內(nèi)使用大部分為Roche、Abbott、Beckman為代表的進(jìn)口試齊LUTRFIA技術(shù)是繼放射免疫分析之后標(biāo)記物發(fā)展的一個(gè)新里程碑，已成為生物醫(yī)學(xué)研究和臨床超微量生化檢驗(yàn)中一項(xiàng)最有發(fā)展前景的分析手段。TRFIA以稀土離子作為標(biāo)記物，具有制備簡(jiǎn)便、儲(chǔ)存時(shí)間長(zhǎng)、無(wú)放射性污染、標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍寬、不受樣品自然熒光干擾和應(yīng)用范圍十分廣泛等優(yōu)點(diǎn)。然而，目前國(guó)內(nèi)外廠家均采用基于微孔板TRFIA技術(shù)，由于微孔板的固液相反應(yīng)面積小，需要的免疫反應(yīng)時(shí)間較久；微孔板包被抗體或抗原是通過(guò)物理吸附包被，包被抗體或抗原很難標(biāo)準(zhǔn)化，使得檢測(cè)結(jié)果精密度較差；微孔板TRFIA技術(shù)主要為半自動(dòng)檢測(cè)，或前處理加上TRFIA檢測(cè)儀的準(zhǔn)全自動(dòng)檢測(cè)，使得樣本需要積累到一定量后才能檢測(cè)。免疫磁珠是免疫學(xué)和磁載體技術(shù)相結(jié)合而發(fā)展起來(lái)的一類新型材料，是一種磁珠表面包被特異性配基，可與抗體/抗原特異性的結(jié)合形成磁珠_(kāi)抗體/抗原復(fù)合物，然后通過(guò)外加磁場(chǎng)的作用，使磁珠和溶液快速分離，磁珠與傳統(tǒng)的微孔板相比具有以下的特點(diǎn) 表面積更大，能結(jié)合更多的蛋白分子；②可以通過(guò)共價(jià)鍵與探針?lè)肿舆B接，比聚苯乙烯為材料的微孔板的物理吸附作用更牢固；③是一種小型的、流動(dòng)的固相載體，使反應(yīng)能更快的達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡，從而加快反應(yīng)速度；④表面結(jié)合的密度高，使熒光信號(hào)更集中；⑤可以和不同的探針?lè)肿咏Y(jié)合，使檢測(cè)同一樣本中不同的待測(cè)物成為可能；⑥磁珠的外觀和包被過(guò)程的靈活性更大，可以根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行選擇。磁珠的上述特點(diǎn)與時(shí)間分辨熒光免疫分析結(jié)合后可以減少反應(yīng)所需的樣本量，加快反應(yīng)時(shí)間，易自動(dòng)化，實(shí)驗(yàn)樣本隨到隨做功能。目前免疫磁珠在化學(xué)發(fā)光免疫分析、核酸提取等領(lǐng)域已有廣泛的應(yīng)用，但免疫磁珠結(jié)合時(shí)間分辨熒光免疫分析檢測(cè)一些腫瘤相關(guān)抗原尚無(wú)文獻(xiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種基于免疫磁珠的CEA時(shí)間分辨熒光免疫分析試劑盒。本發(fā)明檢測(cè)方法的基礎(chǔ)是雙抗體夾心的免疫反應(yīng)通過(guò)磁珠與抗體連接形成復(fù)合物，即免疫磁珠，用免疫磁珠、銪標(biāo)記抗體及樣本中CEA抗原在反應(yīng)管中經(jīng)過(guò)震蕩孵育后形成免疫磁珠-CEA抗原-銪標(biāo)抗體復(fù)合物。加入增強(qiáng)液震蕩反應(yīng)后，在紫外光的激發(fā)下發(fā)射出很強(qiáng)的熒光，用時(shí)間分辨儀器測(cè)定其熒光強(qiáng)度。熒光強(qiáng)度與樣品中的CEA濃度成正比，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可確定樣品中抗原的量。本發(fā)明的基于免疫磁珠的CEA時(shí)間分辨熒光免疫分析試劑盒包括
1)校準(zhǔn)品
2)連接抗CEA抗體的磁珠
3)銪標(biāo)記抗CEA抗體
4)分析緩沖液
5)洗滌液(25x)
6)增強(qiáng)液
上述連接抗CEA抗體的磁珠的制備步驟為磁珠活化一與抗CEA單克隆抗體連接一洗滌一封閉一保存等步驟制備得到偶聯(lián)有高特異性的抗-CEA單克隆抗體的免疫磁珠。上述銪標(biāo)記抗CEA抗體的制備步驟為選用抗CEA-單克隆抗體進(jìn)行Eu3+標(biāo)記，抗體與Eu3+標(biāo)記物的比例為5:1 (質(zhì)量比)為最佳比例，標(biāo)記率太高，影響被標(biāo)記抗體的免疫活性；標(biāo)記率太低，信號(hào)強(qiáng)度不夠，降低檢測(cè)靈敏度。上述校準(zhǔn)品的制備步驟為用含2 g/L BSA及1 g/L NaN3的50 mmol/1 pH7. 8 Tris-Hcl緩沖液，將CEA抗原配制成0、1、5、10、100及560 ng/mL系列濃度的校準(zhǔn)溶液，按每瓶ImL分裝凍干，4°C保存?zhèn)溆?。上述分析緩沖液配方為T(mén)ris-HCl(50mmol/L,)、PEG6000 (1. 5%)、BSA (0. 2%)、 Proclin300 (0· 1%)、牛 IgG (0. 02%)、Tween 20 (0· 1%)和 NaCl (0. 84%) ρΗ7· 8 緩沖液。上述洗滌液(25χ)配方為T(mén)ris-HCld.25匪ol/L，)、Tween 20(2.5%)和 NaCl (21%) pH7. 8 緩沖液。上述增強(qiáng)液配方為由β 2 二酮體、三辛基氧化磷(TOPO)、Triton200、醋酸和鄰苯二甲酸氫鉀(pH 2. 0 3. 2)組成。本發(fā)明的測(cè)定方法為往反應(yīng)管中加入用分析緩沖液以體積比為1:25稀釋的免疫磁珠50 μ 1，然后加入CEA校準(zhǔn)品或樣品25 μ 1，再加入用分析緩沖液以體積比為1:50稀釋的Eu3+標(biāo)記抗體200 μ 1 ；室溫震蕩孵育反應(yīng)30 min,運(yùn)用磁性分離技術(shù)將吸附CEA 的免疫磁珠與上清分離洗滌，最后每孔加入200 μ 1增強(qiáng)液振搖5 min后在時(shí)間分辨熒光檢測(cè)儀上按所編程序測(cè)定。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果
1、本發(fā)明首先對(duì)所用的原材料進(jìn)行篩選試驗(yàn)和質(zhì)量檢定，包括免疫磁珠和銪標(biāo)標(biāo)記抗體的活性、標(biāo)記物和抗體的比例、標(biāo)記物的稀釋度等通過(guò)反復(fù)探索和試驗(yàn)比對(duì)最終找到了簡(jiǎn)便、效率高、成本低、質(zhì)量可靠的連接和標(biāo)記方法。2、本發(fā)明公開(kāi)了基于上述探索試驗(yàn)得到的各種試劑配方，包括洗滌液配方、分析緩沖液配方、增強(qiáng)液配方，進(jìn)一步公開(kāi)了銪標(biāo)記抗體及免疫磁珠的制備過(guò)程。3、本試劑盒采用磁分離技術(shù)并結(jié)合TRFIA技術(shù)，除擁有TRFIA技術(shù)的靈敏度高、儲(chǔ)存時(shí)間長(zhǎng)、無(wú)放射性污染、標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍寬等諸多優(yōu)點(diǎn)外，還通過(guò)免疫磁珠的富集作用以及磁珠在液體中充分?jǐn)U散使得結(jié)合表面積擴(kuò)大，大大縮短反應(yīng)時(shí)間，提高檢測(cè)靈敏度。磁珠與抗體通過(guò)化學(xué)基團(tuán)定向連接，大大減少配對(duì)抗體用量以及提高檢測(cè)的精密度。另外該技術(shù)容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，克服了傳統(tǒng)微孔板式TRFIA技術(shù)需要樣本累積到一定數(shù)量才能檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)了樣本即時(shí)檢測(cè)。


圖1為實(shí)施例3基于免疫磁珠CEA時(shí)間分辨熒光免疫分析試劑盒定標(biāo)品標(biāo)準(zhǔn)曲線 (雙對(duì)數(shù)擬合)。圖2為實(shí)施例3基于免疫磁珠CEA時(shí)間分辨熒光免疫分析試劑盒國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線(雙對(duì)數(shù)擬合)。圖3為實(shí)施例4本發(fā)的試劑盒與Roche公司CEA電化學(xué)發(fā)光試劑盒檢測(cè)血清CEA 的相關(guān)性(回歸分析)
圖4為實(shí)施例4本發(fā)的試劑盒與廣州市達(dá)瑞抗體工程技術(shù)有限公司微孔板式TRFIA試劑盒檢測(cè)血清CEA的相關(guān)性(回歸分析)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1本發(fā)明的試劑盒的制備 (1)免疫磁珠的制備具體步驟
第一步，磁珠的預(yù)處理用渦旋混合器充分混勻懸浮磁珠(Merck公司產(chǎn)品，編號(hào) 39572001)，取Iml (IOmg)懸浮液于離心管中，并置于磁分離器上Imin (或更長(zhǎng)時(shí)間)，小心移去上清。加入Iml Binding Buffer，用渦旋混合器充分混勻懸浮磁珠，并置于磁分離器上Imin (或更長(zhǎng)時(shí)間)小心移去上清，重復(fù)該步驟2次后加入25 μ 1 EDC(10mg/ml)和40 μ 1 NHS(10mg/ml)，用樣本旋轉(zhuǎn)混合器，室溫旋轉(zhuǎn)30min。加入Iml Binding Buffer，用渦旋混合器充分混勻懸浮磁珠，并置于磁分離器上Imin (或更長(zhǎng)時(shí)間)小心移去上清，重復(fù)該步驟2次。第二步，磁珠偶聯(lián)在第一步去除上清的磁珠中加入100 mg抗體(芬蘭Medix公司產(chǎn)品，編號(hào)5910)，用渦旋混合器充分混勻懸浮磁珠，用樣本旋轉(zhuǎn)混合器，室溫旋轉(zhuǎn)3h。
第三步，洗滌將第二步中的離心管置于磁分離器上Imin(或更長(zhǎng)時(shí)間)，小心移去上清，加入Iml洗滌液，用渦旋混合器充分混勻懸浮磁珠，并置于磁分離器上Imin (或更長(zhǎng)時(shí)間)小心移去上清，重復(fù)該步驟2次。第四步，封閉在清洗后的磁珠中加入3ml封閉液，用樣本旋轉(zhuǎn)混合器，室溫旋轉(zhuǎn) 3h離心管置于磁分離器上Imin (或更長(zhǎng)時(shí)間)，小心移去上清，加入Iml Binding Buffer, 用渦旋混合器充分混勻懸浮磁珠，并置于磁分離器上Imin (或更長(zhǎng)時(shí)間)小心移去上清。第五步，保存在磁珠中加入Iml保存液TBST，2-8°C保存。第一步中所述Binding Buffer為含有MES (0. 1M)、pH 5.0的緩沖液。第一步中所述EDC為1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽，NHS為N-羥基硫代琥珀酰亞胺。第三步中所述洗滌液為T(mén)ris-Hcl (25mM)、Nacl (0. 15M)、Tween20 (0· 05%)、ρΗ7· 2 的緩沖液。第四步中所述封閉液為蔗糖(15%)、小牛血清(10%)、pH7. 0的緩沖液。第五步中所述保存液為T(mén)ris-Hcl (25mM)、Nacl (0. 15M)、Tween20 (0· 05%)、ρΗ7· 2 的緩沖液。(2 )銪標(biāo)記抗CEA抗體制備步驟為
抗體純化和濃縮將Img抗CEA單克隆抗體(芬蘭Medix公司產(chǎn)品，編號(hào)5909)加入 0. 5ml標(biāo)記緩沖液(50mmol/L，Na2C03, pH 9. 0)，混勻后，用Millipore公司帶有濾膜的 G-50離心管IOOOOrpm離心5min，再重復(fù)洗滌6次，倒轉(zhuǎn)離心收集抗體，體積控制在200μ1
左右ο抗體標(biāo)記將純化的CEA抗體加入0. 2mg Eu3+標(biāo)記試劑(PerKin Elmer公司產(chǎn)品， 編號(hào)1244-302)，充分混勻，25°C振蕩過(guò)夜。上樣與洗脫用S印hadex G-50層析柱(1x30cm)分離純化，洗脫液(含0. 9% NaCl 的50mmol/l Tris-HCl )洗脫，同時(shí)收集流出液(lml/管)，逐管測(cè)量吸光度(A280nm)，合并峰管，測(cè)蛋白含量并計(jì)算標(biāo)記率。確定稀釋度并管后的銪標(biāo)記物，進(jìn)行稀釋度摸索，選擇線性較好，靈敏度較低的稀釋度；分裝銪標(biāo)記物用連續(xù)加樣槍分裝，體積為1.0 ml/瓶，真空冷凍干燥。保存凍干后2°C _ 8°C。(3)校準(zhǔn)品制備步驟為用含 2 g/L BSA 及 1 g/L NaN3 的 50 mmol/1 pH7. 8 Tris-Hcl緩沖液，將CEA抗原(美國(guó)Biodesign公司產(chǎn)品，編號(hào):A41107H)配制成1、5、10、 100及560 ng/mL系列濃度的校準(zhǔn)溶液，按每瓶ImL分裝凍干，4°C保存?zhèn)溆谩?4)分析緩沖液配方為T(mén)ris-HCl (50mmol/L,)、PEG6000 (1. 5%)、BSA (0. 2%)、 Proclin300 (0· 1%)、牛 IgG (0. 02%)、Tween 20 (0. 1%)和 NaCl (0. 84%) ρΗ7· 8 緩沖液。(5)洗滌液(25χ)配方為T(mén)ris-HCl (1. 25mmol/L,)、Tween 20 (2. 5%)和NaCl (21%) PH7. 8緩沖液。(6)增強(qiáng)液配方為由β-萘甲酰三氟丙酮(β-ΝΤΑ) (15 μ mol/L)、三辛基氧化磷 (TOPO) (50 μ mol/L)、Triton X-100 (0. 1%)、醋酸(0.6%)組成，用適量鄰苯二甲酸氫鉀調(diào)整 pH 為 3. 0-3.2。實(shí)施例2本發(fā)明的試劑盒的使用方法 (1)樣本收集
采靜脈血l_2ml于凝血管中，4°C放置2小時(shí)以上，待血清析出后取25ml血清即可。血清樣品在2-8°C可以保存7天，如果需要長(zhǎng)期保存，請(qǐng)?jiān)赺20°C保存，避免反復(fù)凍融。樣品需要在含干冰的保溫瓶或其它裝置條件下運(yùn)輸。(2)試劑的準(zhǔn)備
1)洗滌液將50 mL濃縮洗液和1200 mL去離子水混合，作為工作洗滌液。2)標(biāo)記物工作液使用前一小時(shí)將每瓶標(biāo)記物用1 mL去離子水溶解，用分析緩沖液以1:50倍稀釋作為銪標(biāo)抗體工作液。3)免疫磁珠使用前需震蕩懸浮。(3)操作步驟
1)每管加入50 μ 1免疫磁珠，然后加入25 μ 1校準(zhǔn)品或樣品，再加入200 μ 1銪標(biāo)抗體工作液，室溫震蕩孵育30min。2)將反應(yīng)管置于磁力分離架上2分鐘，使磁珠凝集。3)吸棄上清，用洗滌液沖洗4次，洗滌液加入量為300 μ ，每次加入洗滌液后需
靜置30秒，使磁珠重新凝集。4)吸棄洗液，每孔加增強(qiáng)液200 μ 1，震蕩孵育5分鐘。5)測(cè)定。實(shí)施例3本發(fā)明的試劑盒的方法學(xué)檢定
按照本領(lǐng)域中常規(guī)的制造和檢定規(guī)程對(duì)通過(guò)實(shí)施例1中制備成的試劑盒進(jìn)行檢定，結(jié)果如下
1)準(zhǔn)確度
對(duì)校準(zhǔn)品與相應(yīng)濃度的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品同時(shí)進(jìn)行分析測(cè)定后，用雙對(duì)數(shù)數(shù)學(xué)模型 (log-log)擬合，兩條劑量-反應(yīng)曲線基本平行(圖1 為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品的劑量一反應(yīng)曲線； 圖2 為校準(zhǔn)品的劑量一反應(yīng)曲線；Cps為每秒鐘熒光計(jì)數(shù))，兩條曲線的斜率分別為0. 461 和0. 458 U檢驗(yàn)PX). 05)。以CEA國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品為對(duì)照品，校準(zhǔn)品的實(shí)測(cè)效價(jià)與標(biāo)示效價(jià)的比值在0. 9^1. 1之間。劑量-反應(yīng)曲線的線性相關(guān)系數(shù)(r) =0. 998。2)分析靈敏度和線性范圍
以零參考標(biāo)準(zhǔn)品當(dāng)作樣品測(cè)量8次，計(jì)算其熒光值及標(biāo)準(zhǔn)差。以該點(diǎn)熒光測(cè)定平均值加2倍標(biāo)準(zhǔn)差所得的熒光值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算得出的濃度值為其靈敏度，經(jīng)測(cè)定本試劑分析靈敏度為0. 15ng/ml。將抗原稀釋成不同濃度進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為 0.15 1000ng/ml。3)精密度(CV%)
用本發(fā)明試劑盒對(duì)自制的CEA質(zhì)控品(質(zhì)控品I、11、111，預(yù)期濃度分別為8. 76、25.8、 84.9ng/ml)進(jìn)行測(cè)定，各設(shè)10個(gè)復(fù)孔。結(jié)果本發(fā)明試劑盒的批內(nèi)變異系數(shù)(CV%)為 3. 3%-6. 8%和批間變異系數(shù)(CV%)為5. 5%-8. 5%。較杭建鋒等報(bào)道的微孔板CEA TRFIA批內(nèi)和批間的變異系數(shù)(CV%)為7. 2%-8. 6%和8. 9%-13. 2%要好。表1批內(nèi)精密度測(cè)試結(jié)果(/ 二州)
權(quán)利要求
1.一種基于免疫磁珠的CEA時(shí)間分辨熒光免疫分析試劑盒，其特征在于包括校準(zhǔn)品， 連接抗CEA抗體的磁珠，銪標(biāo)記抗CEA抗體，分析緩沖液，洗滌液和增強(qiáng)液。
2.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述校準(zhǔn)品的制備步驟為用含2g/L BSA 及 1 g/L NaN3 的 50 mmol/1 ρΗ7· 8 Tris-Hcl 緩沖液，將 CEA 抗原配制成 0、1、5、10、 100及560 ng/mL系列濃度的校準(zhǔn)溶液。
3.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述連接抗CEA抗體的磁珠的制備步驟為磁珠活化，與抗CEA單克隆抗體連接，洗滌，封閉，保存。
4.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述銪標(biāo)記抗CEA抗體的制備步驟為選用抗CEA-單克隆抗體進(jìn)行Eu3+標(biāo)記，抗體與Eu3+標(biāo)記物的質(zhì)量比例為5:1。
5.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述分析緩沖液配方為 Tris-HCl (50mmol/L,)、PEG6000 (1. 5%)、BSA (0. 2%)、Proclin300 (0· 1%)、牛 IgG (0. 02%)、 Tween 20 (0. 1%)、NaCl (0. 84%)，ρΗ7· 8 緩沖液。
6.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述洗滌液配方為=Tris-HCl(1. 25mmol/ L)、Tween 20 (2. 5%)、NaCl (21%)，ρΗ7· 8 緩沖液。
7.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述增強(qiáng)液配方包括由β-萘甲酰三氟丙酮(β -ΝΤΑ) (15 μ mol/L)、三辛基氧化磷(TOPO) (50 μ mol/L)、Triton X-100 (0· 1%)、 醋酸(0. 6%)組成，用適量鄰苯二甲酸氫鉀調(diào)整pH為3. 0-3. 2。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種基于免疫磁珠的CEA時(shí)間分辨熒光免疫分析試劑盒。該試劑盒包括校準(zhǔn)品，連接抗CEA抗體的磁珠，銪標(biāo)記抗CEA抗體，分析緩沖液，洗滌液和增強(qiáng)液。通過(guò)雙抗體夾心的免疫反應(yīng)，形成免疫磁珠-CEA-銪標(biāo)記抗-CEA單克隆抗體復(fù)合物，再通過(guò)磁性分離將吸附CEA的免疫磁珠與上清分離洗滌，加入增強(qiáng)液并通過(guò)時(shí)間分辨儀器測(cè)值。本發(fā)明除擁有TRFIA技術(shù)優(yōu)點(diǎn)外，還通過(guò)免疫磁珠富集作用以及磁珠在液體中充分?jǐn)U散使得結(jié)合表面積擴(kuò)大，大大縮短反應(yīng)時(shí)間，提高檢測(cè)靈敏度。磁珠與抗體通過(guò)化學(xué)基團(tuán)定向連接，大大減少配對(duì)抗體用量以及提高檢測(cè)精密度。該技術(shù)容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，克服了傳統(tǒng)微孔板式TRFIA技術(shù)需要樣本累積到一定數(shù)量才能檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)了樣本即時(shí)檢測(cè)。
文檔編號(hào)G01N33/577GK102507947SQ20111035693
公開(kāi)日2012年6月20日 申請(qǐng)日期2011年11月11日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月11日
發(fā)明者吳英松 申請(qǐng)人:南方醫(yī)科大學(xué)