專利名稱:擬除蟲菊酯類農(nóng)藥單克隆抗體特異性鑒定方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥檢測領(lǐng)域,具體涉及一種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥單克隆抗體特異性鑒定方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù):
擬除蟲菊酯類農(nóng)藥因其具有殺蟲譜廣、活性高、用量少、殘留量低等特點(diǎn)而在農(nóng)業(yè)、林業(yè)、衛(wèi)生業(yè)等領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用。近年來,隨著一批高毒農(nóng)藥的禁用,菊酯類農(nóng)藥在中國的使用量越來越大,其在農(nóng)產(chǎn)品中的殘留也越來越引起人們的重視。目前擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留量檢測的常規(guī)方法有氣相色譜法和高效液相色譜法等。 這些方法的檢測限低、靈敏度高,已有相關(guān)的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)可供參考,但樣品前處理復(fù)雜、儀器昂貴、操作技術(shù)要求高,對于中國農(nóng)產(chǎn)品安全監(jiān)控中要求的大批量樣品快速初篩工作無法勝任。免疫分析是一種快速、靈敏的用于痕量檢測的方法,近十年來研究應(yīng)用發(fā)展迅速, 據(jù)文獻(xiàn)報道約有60多種農(nóng)藥可用于酶免疫分析。由于免疫方法特異性強(qiáng),多殘留分析就需要采用不同的農(nóng)藥抗體進(jìn)行多次檢測分析,這就增加了檢測成本和工作量,將單種藥劑的檢測研究發(fā)展為對多種類似化合物通用檢測篩選法,測定每類農(nóng)藥的總殘留量,是較為適用的現(xiàn)場篩選檢測方法。有鑒于此,本發(fā)明提供一種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥單克隆抗體特異性鑒定方法及其應(yīng)用,本案由此產(chǎn)生。
發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)的不足,本發(fā)明提供了一種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥單克隆抗體特異性鑒定方法,該方法可以快速檢測擬除蟲菊酯類農(nóng)藥。為達(dá)到上述目的,本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥單克隆抗體特異性鑒定方法,采用碳二亞胺法先將擬除蟲菊酯類農(nóng)藥與交聯(lián)劑預(yù)反應(yīng)成中間產(chǎn)物,再與載體蛋白交聯(lián)合成擬除蟲菊酯類農(nóng)藥人工抗原, 通過紫外掃描鑒定擬除蟲菊酯類農(nóng)藥與載體蛋白的偶聯(lián)比,根據(jù)偶聯(lián)比檢測擬除蟲菊酯類農(nóng)藥單克隆抗體與檢測抗原分子反應(yīng)特異性。上述擬除蟲菊酯類農(nóng)藥為具有間苯氧基苯甲酸(PBA)結(jié)構(gòu)的農(nóng)藥。上述擬除蟲菊酯類農(nóng)藥為溴氰菊酯、甲體氯氰菊酯、甲氰菊酯、氰戊菊酯或聯(lián)苯菊本發(fā)明還提供一種上述擬除蟲菊酯類農(nóng)藥單克隆抗體特異性鑒定方法在擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留檢測領(lǐng)域中的應(yīng)用。本發(fā)明中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥主要為溴氰菊酯、甲體氯氰菊酯、甲氰菊酯、氰戊菊酯、聯(lián)苯菊酯等。這些擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的分子式中均含有間苯氧基苯甲酸(PBA)結(jié)構(gòu)。間苯氧基苯甲酸(PBA)的結(jié)構(gòu)式如下所示
權(quán)利要求
1.擬除蟲菊酯類農(nóng)藥單克隆抗體特異性鑒定方法,其特征在于采用碳二亞胺法先將擬除蟲菊酯類農(nóng)藥與交聯(lián)劑預(yù)反應(yīng)成中間產(chǎn)物,再與載體蛋白交聯(lián)合成擬除蟲菊酯類農(nóng)藥人工抗原,通過紫外掃描鑒定擬除蟲菊酯類農(nóng)藥與載體蛋白的偶聯(lián)比,根據(jù)偶聯(lián)比檢測擬除蟲菊酯類農(nóng)藥單克隆抗體與檢測抗原分子反應(yīng)特異性。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥單克隆抗體特異性鑒定方法,其特征在于所述擬除蟲菊酯類農(nóng)藥為具有間苯氧基苯甲酸結(jié)構(gòu)的農(nóng)藥。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥單克隆抗體特異性鑒定方法,其特征在于所述擬除蟲菊酯類農(nóng)藥為溴氰菊酯、甲體氯氰菊酯、甲氰菊酯、氰戊菊酯或聯(lián)苯菊酯。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥單克隆抗體特異性鑒定方法在擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留檢測領(lǐng)域中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供一種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥單克隆抗體特異性的鑒定方法,其特征在于采用碳二亞胺法先將擬除蟲菊酯類農(nóng)藥與交聯(lián)劑預(yù)反應(yīng)成中間產(chǎn)物,再與載體蛋白交聯(lián)合成擬除蟲菊酯類農(nóng)藥人工抗原,通過紫外掃描鑒定擬除蟲菊酯類農(nóng)藥與載體蛋白的偶聯(lián)比,以檢測擬除蟲菊酯類農(nóng)藥單克隆抗體與檢測抗原分子反應(yīng)特異性。該鑒定方法可廣泛應(yīng)用于多種菊酯類農(nóng)藥(如溴氰菊酯、甲體氯氰菊酯、甲氰菊酯、氰戊菊酯和聯(lián)苯菊酯等,具有間苯氧基苯甲酸結(jié)構(gòu)的農(nóng)藥)的殘留檢測。本發(fā)明也為多種菊酯類農(nóng)藥殘留檢測試劑盒的開發(fā)提供了可能。
文檔編號G01N33/577GK102393465SQ20111038381
公開日2012年3月28日 申請日期2011年11月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月28日
發(fā)明者吳敏, 周昱, 徐敦明, 方恩華, 鄭向華, 陳達(dá)捷 申請人:廈門出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心