專利名稱：一種快速測定筋骨痛消丸制劑中丹參酮iia 含量的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領域，特別是一種快速測定筋骨痛消丸制劑中丹參酮IIA含量的方法。
背景技術：
筋骨痛消丸是國家三類中藥，由丹參、雞血藤、香附、桂枝、白芍、川牛膝等組成，具有活血行氣、溫經(jīng)通絡、消腫止痛的功能，主治骨質增生引起的關節(jié)疼痛、腫脹、活動受限等癥。其質量標準收載于國家食品藥品監(jiān)督管理局，國家藥品標準新藥轉正標準第二十八冊， 采用高效液相色譜法(簡稱HPLC法)對丹參酮IIA的含量進行測定。筋骨痛消丸制劑的生產過程涉及一系列單元操作，任意一個環(huán)節(jié)出現(xiàn)波動都會導致最終產品中丹參酮IIA含量的不穩(wěn)定。利用高效液相色譜法對制劑進行質量控制時，其對樣品的前處理較為復雜， 費用高，且為離線檢測，無法快速反饋其在生產過程中的質量問題，不利于中藥的現(xiàn)代化發(fā)展，因此，需要一種快速、高效，準確的新分析方法。近紅外(NIR)技術是20世紀80年代后期發(fā)展起來的一種新興技術，是近幾十年來發(fā)展最為迅速、最引人注目的綠色分析方法，目前已經(jīng)廣泛地應用于石油化工、農業(yè)、食品和藥物的定性定量分析。與傳統(tǒng)分析技術相比，近紅外光譜分析技術通過對樣品的一次近紅外光譜簡單測量，即可在幾秒至幾分鐘之內同時測定一個樣品的幾種至十幾種性質數(shù)據(jù)或濃度數(shù)據(jù)，而且被測樣品用量小、無破壞、無污染，具有高效、快速、成本低和綠色的優(yōu)點。那么能否用近紅外光譜分析檢測筋骨痛消丸制劑中丹參酮IIA含量呢，至今未見有關報道。

發(fā)明內容
針對上述情況，為克服現(xiàn)有技術缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種快速測定筋骨痛消丸制劑中丹參酮IIA含量的方法，可有效解決筋骨痛消丸制劑中丹參酮IIA含量的測定問題。本發(fā)明解決的技術方案是，收集筋骨痛消丸分別作為校正樣品集和驗證樣品集， 將校正樣品集中的樣品利用近紅外儀器進行掃描得到校正樣品集光譜圖，對校正樣品集光譜圖預處理和譜區(qū)選擇，得校正樣品集特征光譜，運用偏最小二乘法(PLQ將校正樣品集特征光譜和利用高效液相色譜法測得的丹參酮IIA含量值相結合，建立校正模型，再將驗證樣品集以和獲得校正樣品集特征光譜同樣的方法和條件得到驗證樣品集特征光譜，將驗證樣品集特征光譜信息代入校正模型中，得出驗證樣品集OTR預測值(又稱驗證樣品集的近紅外模型預測值)，并與利用HPLC法測定的驗證樣品集中丹參酮IIA的含量對照，對校正模型驗證和完善以后，將待測樣品粉碎，掃描其近紅外圖譜，并對掃描的近紅外圖譜進行預處理和譜區(qū)選擇后，輸入校正模型中，得該制劑中丹參酮IIA的含量值。本發(fā)明的校正模型建立成功后只需要一臺近紅外光譜儀用于控制分析，就可以替代多臺分析儀器，節(jié)省了大量設備、人力和物力，對中藥的推廣與應用有實際的意義。
具體實施例方式以下結合實施例對本發(fā)明的具體實施方式
作詳細說明。本發(fā)明測定筋骨痛消丸制劑中丹參酮IIA含量的方法具體步驟如下(1)建立校正模型收集筋骨痛消丸，干燥后粉碎，過80目篩，得藥材粉末，作為筋骨痛消丸樣品，選擇3/4作為校正樣品集，余下的作為驗證樣品集，校正樣品集用于建立光譜校正模型，將校正樣品集中的樣品運用近紅外光譜儀進行掃描，采集校正樣品集原始光譜數(shù)據(jù)，用TQ定量分析軟件，對原始光譜數(shù)據(jù)預處理和譜區(qū)選擇(通過對原始光譜數(shù)據(jù)預處理來消除各種因素引起的光譜偏差，把原來隱藏的信號差異放大出來，通過譜區(qū)選擇來去除大量的冗雜信息，從而提高光譜的質量)，得到校正樣品集中丹參酮IIA含量的特征光譜信息，同時，利用HPLC法測定校正樣品集中的丹參酮IIA的含量，將測得的含量數(shù)據(jù)與校正樣品集中丹參酮IIA含量的特征光譜信息相結合，采用PLS法建立校正模型；(2)校正模型的驗證將驗證樣品集中的樣品，通過近紅外光譜儀掃描，得到驗證樣品集原始光譜數(shù)據(jù)，進行光譜預處理和譜區(qū)選擇后，輸入校正模型中，得出驗證樣品集 NIR預測值，并與利用HPLC法測定的驗證樣品集中丹參酮IIA的含量對照，對校正模型進行驗證，判定驗證樣品集是否為界外點，正確認定后，加入界外點重新按校正模型建立步驟重新建立校正模型，對校正模型不斷完善，優(yōu)化和檢驗校正模型的性能，循環(huán)優(yōu)化各建模參數(shù)，以確定最佳的參數(shù)；(3)用驗證和完善過的校正模型對待測樣品中丹參酮IIA的含量進行預測，將待測樣品粉碎，掃描其近紅外光譜圖，而后對掃描的近紅外圖譜進行預處理和譜區(qū)選擇，提取特征光譜輸入到驗證和完善過的校正模型中，即得到該筋骨痛消丸中丹參酮IIA的含量。本發(fā)明在具體實施中是采用以下步驟實現(xiàn)(1)選擇和收集樣品收集不同批次(如20090236、20090342、20090648)不同生產日期(如2009年1月-10月)的筋骨痛消丸100份，分別干燥后粉碎，過80目篩，得藥材粉末，作為筋骨痛消丸樣品；O)、建立校正模型A、取筋骨痛消丸樣品中的3/4作為校正樣品集，運用近紅外光譜儀對校正樣品集中的藥材粉末進行掃描各取8g藥材粉末，分別放入石英樣品杯中，混合均勻，以空氣為參比，扣除背景采集光譜圖，采用積分球漫反射，分辨率=ScnT1,掃描次數(shù)64次，掃描范圍 12000 4000CHT1，溫度18 25°C，每個樣品重復掃描3次，求平均光譜，即得校正樣品集的原始光譜數(shù)據(jù)；B、采用TQ8. 0定量分析軟件，對校正樣品集的原始光譜數(shù)據(jù)進行預處理和譜區(qū)選擇，得校正樣品集丹參酮IIA含量的特征光譜信息，在近紅外光譜儀采集光譜時，由于外部環(huán)境、儀器工作狀態(tài)、樣品物理性質的差異，會對模型的建立造成比較大的影響，通過對光譜進行預處理可以最大限度的減少影響，以建立較為準確的模型，所述的光譜預處理是采用一階導數(shù)、二階導數(shù)、平滑處理，多元散射校正、矢量歸一化法等方法中的一種對校正樣品集的原始光譜數(shù)據(jù)進行預處理，評價模型性能的指標有決定系數(shù)(R2)、交叉檢驗誤差均方根(Root Mean Square Error of Calibration, RMSECV)，預測誤差均方根(Root Mean Square Error of Validation, RMSEP)，并以決定系數(shù)(R2)和RMSECV為考核指標，對預處理結果進行分析，由表1可以看出二階導數(shù)的預處理方法效果最好；
表1不同處理方法的建模結果
光譜預處理方法
R2
RMSECV
權利要求
1. 一種快速測定筋骨痛消丸制劑中丹參酮IIA含量的方法，其特征在于，由以下步驟實現(xiàn)(1)建立校正模型收集筋骨痛消丸，干燥后粉碎，過80目篩，得藥材粉末，作為筋骨痛消丸樣品，選擇3/4作為校正樣品集，余下的作為驗證樣品集，校正樣品集用于建立光譜校正模型，將校正樣品集中的樣品運用近紅外光譜儀進行掃描，采集校正樣品集原始光譜數(shù)據(jù)，用TQ定量分析軟件，對原始光譜數(shù)據(jù)預處理和譜區(qū)選擇，得到校正樣品集中丹參酮IIA 含量的特征光譜信息，同時，利用HPLC法測定校正樣品集中的丹參酮IIA的含量，將測得的含量數(shù)據(jù)與校正樣品集中丹參酮IIA含量的特征光譜信息相結合，采用PLS法建立校正模型；(2)校正模型的驗證將驗證樣品集中的樣品通過近紅外光譜儀掃描，得到驗證樣品集原始光譜數(shù)據(jù)，進行光譜預處理和譜區(qū)選擇后，輸入校正模型中，得出驗證樣品集NIR預測值，并與利用HPLC法測定的驗證樣品集中丹參酮IIA的含量對照，對校正模型進行驗證， 判定驗證樣品集是否為界外點，正確認定后，加入界外點重新按校正模型建立步驟重新建立校正模型，對校正模型不斷完善，優(yōu)化和檢驗校正模型的性能，循環(huán)優(yōu)化各建模參數(shù)，以確定最佳的參數(shù)；(3)用驗證和完善過的校正模型對待測樣品中丹參酮IIA的含量進行預測，將待測的筋骨痛消丸樣品粉碎，按和掃描校正樣品集相同的方法和條件掃描得到待測的筋骨痛消丸樣品近紅外圖譜數(shù)據(jù)，并對掃描的近紅外圖譜數(shù)據(jù)進行預處理和譜區(qū)選擇后，代入到校正模型中，得到該筋骨痛消丸中丹參酮IIA的含量值，其中，近紅外圖譜數(shù)據(jù)預處理和譜區(qū)選擇的方法和條件與校正樣品集的原始光譜數(shù)據(jù)預處理和譜區(qū)選擇的方法和條件相同；所述的收集筋骨痛消丸樣品收集不同批次不同生產日期的筋骨痛消丸100份，分別干燥后粉碎，過80目篩，得藥材粉末，作為筋骨痛消丸樣品；所述的采集校正樣品集原始光譜數(shù)據(jù)取筋骨痛消丸樣品中的3/4作為校正樣品集， 運用近紅外光譜儀對校正樣品集中的藥材粉末進行掃描各取8g藥材粉末，分別放入石英樣品杯中，混合均勻，以空氣為參比，扣除背景采集光譜圖，采用積分球漫反射，分辨率 8cm—1，掃描次數(shù)64次，掃描范圍12000 4000cm-1，溫度18 25°C，每個樣品重復掃描3 次，求平均光譜，即得校正樣品集的原始光譜數(shù)據(jù)；所述的光譜預處理是采用二階導數(shù)方法對校正樣品集的原始光譜數(shù)據(jù)進行預處理； 譜區(qū)選擇4258. 33 6066. 68cm_1 ；所述的利用HPLC法測定校正樣品集中的丹參酮IIA的含量采用waters高效液相色譜儀，色譜條件為DIKMA C18色譜柱250mmX 4. 6mm, 5 μ m ；流動相甲醇與水的體積比為 75 25 ；檢測波長:268nm ；溫度30°C;進樣量=IOyL ；流速:lmL/min ；對照品溶液的制備 稱取丹參酮IIA對照品0. lOOOmg，加甲醇制成每ImL含10 μ g丹參酮IIA的溶液，即得；供試品溶液的制備分別取校正樣品集中的樣品0. 4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入甲醇 30mL,稱定重量，在功率600W，頻率40kHz的條件下，超聲處理45min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量至0. 4g，搖勻，過濾，即得；測定法分別吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ L注入waters高效液相色譜儀，測定，即得HPLC法測定校正樣品集中丹參酮IIA 的含量值。
全文摘要
本發(fā)明涉及快速測定筋骨痛消丸制劑中丹參酮IIA含量的方法，有效解決筋骨痛消丸制劑中丹參酮IIA含量的測定問題，將校正樣品集掃描得光譜圖，預處理和譜區(qū)選擇得特征光譜，運用偏最小二乘法將校正樣品集特征光譜和利用高效液相色譜法測得的丹參酮IIA含量值相結合，建立校正模型，將驗證樣品集以和獲得校正樣品集特征光譜同樣的方法和條件得驗證樣品集特征光譜，代入校正模型，得驗證樣品集NIR預測值，與利用HPLC法測定的驗證樣品集中丹參酮IIA的含量對照，對校正模型驗證，將待測樣品粉碎，掃描其近紅外圖譜，進行預處理和譜區(qū)選擇后，輸入校正模型，本發(fā)明只需一臺近紅外光譜儀用于控制分析，節(jié)省了大量設備、人力和物力。
文檔編號G01N30/88GK102564990SQ201110447480
公開日2012年7月11日 申請日期2011年12月28日 優(yōu)先權日2011年12月28日
發(fā)明者李磊, 王星, 白雁, 謝彩俠, 雷敬衛(wèi) 申請人:河南中醫(yī)學院