專利名稱：絲網(wǎng)印刷電極及多重修飾方法和檢測(cè)玉米赤霉烯酮的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及屬于檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用自組裝膜(Nafion膜、碳納米管和膠體金)修飾的絲網(wǎng)印刷電極及其制備方法和檢測(cè)玉米赤霉烯酮的方法。
背景技術(shù)：
玉米赤霉烯酮毒素aearalenone，ZEN)是鐮刀菌屬的一些菌株在一定濕度和溫度條件下繁殖所產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物。研究者在小麥、大麥、玉米、黑麥、高粱等谷物中檢測(cè)到玉米赤霉烯酮，也在一些動(dòng)物組織或產(chǎn)物中檢測(cè)到，包括牛奶、雞蛋等。玉米赤霉烯酮毒素可引發(fā)人和動(dòng)物的多種疾病，主要為致癌促癌毒性，其與自發(fā)性乳腺癌等多種癌癥，輸卵管和子宮水腫、增生，精細(xì)胞畸變、凋亡等多種生殖系統(tǒng)疾病有重要關(guān)系。玉米赤霉烯酮毒素具有分布廣泛、殘留時(shí)間長(zhǎng)、難處理、和其他毒素一起有增強(qiáng)毒性的現(xiàn)象。加入WTO之后， 農(nóng)產(chǎn)品及相關(guān)食品的國(guó)際貿(mào)易量日益增加，隨之對(duì)進(jìn)出口產(chǎn)品的生物安全性的要求也越來越高，為了保證這類產(chǎn)品的順利上市和食用者的健康，出入境檢疫、海關(guān)、生產(chǎn)企業(yè)、監(jiān)督部門等部門迫切需要一種特異、快速、簡(jiǎn)便的玉米赤霉烯酮檢測(cè)方法。電化學(xué)傳感器是將感受的物理量、化學(xué)量等信息按一定規(guī)律轉(zhuǎn)換成便于測(cè)量和傳輸?shù)碾娦盘?hào)的裝置。它由固定化的生物敏感材料作為識(shí)別元件，經(jīng)過理化換能器產(chǎn)生間斷的或連續(xù)的信號(hào)，再由接受裝置放大或直接收集處理。因?yàn)閾Q能器產(chǎn)生的信號(hào)強(qiáng)度與被分析物濃度成比例，因此電化學(xué)傳感器在一定程度上能精確定量被測(cè)物。隨著電化學(xué)檢測(cè)方法的發(fā)展，利用納米材料作為電極修飾物從而提高電子轉(zhuǎn)移速度、放大檢測(cè)信號(hào)、提高檢測(cè)靈敏度，成為電化學(xué)傳感器的重要領(lǐng)域。其中，多壁碳納米管由于具有較大表面積、為電子轉(zhuǎn)移提供良好通道、孔穴結(jié)構(gòu)更能增強(qiáng)電子轉(zhuǎn)移的特點(diǎn)，在電化學(xué)傳感器的研究上廣泛應(yīng)用。而絲網(wǎng)印刷電極相比較普通玻碳電極而言，除了具有良好的電化學(xué)表現(xiàn)，還具有以下優(yōu)勢(shì)1.三電極系統(tǒng)整合在體積較小的基板上；2.可拋棄式，無須再次研磨；3.可大量使用，利于大規(guī)模現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)；4.可進(jìn)行任意修飾，并保存較長(zhǎng)時(shí)間。關(guān)于玉米赤霉烯酮的檢測(cè)國(guó)內(nèi)外已建立了多種方法。目前檢測(cè)玉米赤霉烯酮的方法主要為高效液相色譜法(HPLC)和酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)然而，由于玉米赤霉烯酮本身既沒有特異的紫外吸收基團(tuán)，同時(shí)也沒有熒光特性，但在一定條件下玉米赤霉烯酮可同某些物質(zhì)反應(yīng)形成具有熒光的衍生物，因此熒光衍生劑和衍生方法的選擇與HPLC檢測(cè)玉米赤霉烯酮的準(zhǔn)確度和靈敏性有密切關(guān)系。此外該法需要對(duì)檢測(cè)樣品進(jìn)行嚴(yán)格的預(yù)處理，還需要高效液相色譜儀等貴重儀器，同時(shí)要求有專業(yè)的操作人員，不利于現(xiàn)場(chǎng)常規(guī)檢測(cè)使用。 而ELISA方法雖然較HPLC簡(jiǎn)單，可以大批量檢測(cè)，但是靈敏度有限，且不宜進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。 本方法使用儀器體積小、重量輕，便于攜帶，適于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，同時(shí)具有檢測(cè)靈敏的特點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種絲網(wǎng)印刷電極及多重修飾方法和檢測(cè)玉米赤霉烯酮的方法。本發(fā)明使用Nafion-多壁碳納米管/膠體金/殼聚糖混合物作為電極的修飾系統(tǒng)，充分利用了多壁碳納米管、膠體金和Nafion膜的特點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)了有效放大檢測(cè)信號(hào)，提高了檢測(cè)玉米赤霉烯酮的靈敏度。其中，多壁碳納米管由于具有較大表面積、為電子轉(zhuǎn)移提供良好通道、孔穴結(jié)構(gòu)，能增強(qiáng)電子轉(zhuǎn)移；膠體金由于具有球體結(jié)構(gòu)， 在附著在多壁碳納米管上后能增強(qiáng)電子轉(zhuǎn)移；Nafion膜是優(yōu)良的陽(yáng)離子交換劑，用作電極修飾材料具有良好的離子選擇性，它只與陽(yáng)離子發(fā)生選擇性交換，排斥中性分子和陰離子， 其離子簇形成的多孔狀結(jié)構(gòu)，由Inm的通道相連，提供陽(yáng)離子傳輸?shù)耐ǖ溃⑶揖哂谢瘜W(xué)惰性、耐腐蝕性。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明涉及一種絲網(wǎng)印刷電極，所述絲網(wǎng)印刷電極的工作電極的工作區(qū)域涂覆有 Nafion-多壁碳納米管-膠體金-殼聚糖混合物膜層。優(yōu)選的，所述膠體金為16 18nm。本發(fā)明還涉及一種制備上述的絲網(wǎng)印刷電極的方法包括如下步驟步驟一，將多壁碳納米管活化，并和Nafion混合，制備Nafion-多壁碳納米管；步驟二、制備膠體金，利用殼聚糖將Nafion-多壁碳納米管和膠體金混合均勻；步驟三、將步驟二制得的混合物涂覆在絲網(wǎng)印刷電極的工作電極的工作區(qū)域上， 37°C干燥成膜，即得。優(yōu)選的，步驟一中，所述碳納米管活化方法為將5mg多壁碳納米管溶于15ml活化溶液中，超聲30min后，9000rpm離心5min，去除上清后，加入超純水洗滌，9000rpm離心 5min，去除上清，合并殘留物，60°C烘箱烘干，加入5ml水，配制成lmg/ml溶液，4°C貯存?zhèn)溆?；所述活化溶液中HNO3和H2SO4的體積比為1 3。優(yōu)選的，步驟一中，所述Nafion-多壁碳納米管制備方法為將Img所述活化后的多壁碳納米管溶解于Nafion溶液中，超聲分散30分鐘后即可，4°C貯存?zhèn)溆?；所述Nafion 溶液中Nafion質(zhì)量占溶液總體積的百分比為0. 1%。優(yōu)選的，步驟二中，所述膠體金的制備方法具體為將IOOml的HAuCl4溶液加熱至沸騰，加入1. 2ml的檸檬酸三鈉溶液，煮沸7 lOmin，最后加三蒸水至100ml，制得膠體金溶液；所述檸檬酸三鈉溶液中檸檬酸三鈉質(zhì)量占溶液總體積的百分比為1%，所述HAuCl4 溶液中HAuCl4質(zhì)量占溶液總體積的百分比為0. 01%。優(yōu)選的于，步驟二中，所述殼聚糖與Nafion-多壁碳納米管和膠體金的混合具體為將10 μ 1 Nafion-多壁碳納米管溶液和50 μ 1膠體金溶液加入至50 μ 1殼聚糖溶液中， 超聲混勻；所述殼聚糖溶液中殼聚糖質(zhì)量占溶液總體積的百分比為2%。本發(fā)明還涉及一種用前述的絲網(wǎng)印刷電極檢測(cè)玉米赤霉烯酮GEN)的方法，包括如下步驟步驟一，將6μ 1 ZEN-OVA滴加在所述工作電極區(qū)域，37°C放置30min ；步驟二，使用0. OlM PBST洗滌工作電極，并晾干，滴加8μ 1 BSA溶液，以封閉工作電極，37°C放置30min ；所述BSA溶液中BSA質(zhì)量占溶液總體積的百分比為；步驟三，取0.7 待測(cè)樣品，加入3ml甲醇溶液，震蕩、靜置、離心后，使用0. OlMPBS 稀釋5倍，取5μ1備用；步驟四，將抗ZEN單克隆抗體分別與不同濃度的ZEN標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品稀釋液混合，37 °C 孵育 60min ；
步驟五，使用0. OlM PBST洗滌工作電極，并晾干，滴加6 μ 1抗ZEN單克隆抗體和 ZEN標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品稀釋液的混合溶液，37°C放置30min ；步驟六，使用0. OlM PBST洗滌工作電極，并晾干，滴加6 μ 1 HRP標(biāo)記的羊抗鼠二抗，37 °C 放置 30min ；步驟七，使用0. OlM PBST洗滌工作電極，并晾干，將絲網(wǎng)印刷電極放入IOml pH為 7. 4的0. OlM PBS的緩沖液中，測(cè)定背景電流，記錄為I0 ；步驟八，將絲網(wǎng)印刷電極取出，使用0. OlM PBST洗滌工作電極，并晾干，放入 IOmlpH為7. 4的0. OlM PBS的緩沖液中，再加入過氧化氫和氫醌，使其濃度分別為2mM和 0. ImM，攪拌溶液20min后，停止攪拌，測(cè)定電流，記錄為I，電流變化值ΔΙ = I-I0 ；步驟九；使用Excel軟件，將ZEN標(biāo)準(zhǔn)品不同濃度與相對(duì)應(yīng)的ΔΙ繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線， 將待測(cè)樣品相對(duì)應(yīng)的ΔΙ帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，得到ZEN濃度，并乘以稀釋因子，即為待測(cè)樣品中 ^N含量。優(yōu)選的，步驟三中，所述離心為3000轉(zhuǎn)離心15分。優(yōu)選的，步驟三中，所述甲醇溶液為體積比為80 20的甲醇和水。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下的有益效果本發(fā)明檢測(cè)對(duì)象單一且針對(duì)性強(qiáng)， 準(zhǔn)確率高，靈敏度強(qiáng)，靈敏度大于常用的酶聯(lián)免疫吸附法。可以滿足糧食儲(chǔ)存銷售機(jī)構(gòu)、出入境、海關(guān)等檢驗(yàn)部門快速、正確地判斷ZEN毒素含量的要求，并且便于基層推廣和運(yùn)用。


圖1為本發(fā)明實(shí)施例示意圖；其中，1為參比電極，2為工作電極，3為對(duì)電極，4為膠體金，5為Nafion-多壁碳納米管，6為0VA-ZEN，7為抗ZEN單克隆抗體，8為羊抗鼠HRP標(biāo)記二抗。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例作詳細(xì)說明本實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實(shí)施，給出了詳細(xì)的實(shí)施方式和具體的操作過程，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于下述的實(shí)施例。下面實(shí)施例中，未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，或按照制造廠商所建議的條件。實(shí)施例本發(fā)明實(shí)施例的示意圖如圖1所示，所述絲網(wǎng)印刷電極包括參比電極1、工作電極 2、對(duì)電極3 ；所述工作電極2的工作區(qū)域涂覆有Nafion-多壁碳納米管5-膠體金4-殼聚糖復(fù)合物膜層；用所述絲網(wǎng)印刷電極檢測(cè)樣品中的ZEN時(shí)，首先將OVA-FBl 6滴加在已涂覆有混合物膜層的工作電極上，干燥后再加入抗FBl單克隆抗體7與待測(cè)樣品萃取液的混合溶液，干燥后再加入HRP標(biāo)記的羊抗鼠二抗8，最后加入底物溶液H2A和HQ。制備本發(fā)明的絲網(wǎng)印刷電極以及用其檢測(cè)玉米赤霉烯酮的方法具體步驟如下步驟一，碳納米管的活化將5mg碳納米管溶于15ml混合酸溶液(體積比為1 3的HNO3和&S04)中，超聲混勻30分鐘。將溶液分裝，置于離心機(jī)中，9000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，去除上清后，再用超純水洗滌一次，具體為9000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘。去除上清后，合并殘留物，置于60°C烘箱烘干。最后加入5ml水，4°C儲(chǔ)存?zhèn)溆?。步驟二，Nafion-多壁碳納米管的制備Img活化后的碳納米管溶解于0. 1% (ff/V)Nafion溶液中，超聲分散30分鐘后即可，4°C貯存?zhèn)溆?。步驟二，膠體金的制備先將IOOml的0. 001 % (ff/V) HAuC14溶液加熱至沸騰，迅速加入1. 3ml的1 % (W/ V)檸檬酸三鈉水溶液，開始有些藍(lán)色，然后淺藍(lán)、藍(lán)色，再加熱出現(xiàn)紅色，煮沸7 IOmin出現(xiàn)透明的酒紅色，最后加三蒸水至100ml。使用電鏡鏡檢，確保制備的金顆粒盡量使其大小一致，均勻，顆粒直徑在16 18nm。步驟三，在絲網(wǎng)印刷電極上修飾復(fù)合納米材料將10 μ 1 Nafion-多壁碳納米管溶液和50 μ 1膠體金溶液加入至50 μ 1 2% (W/ V)殼聚糖溶液中。超聲混勻5分鐘后，取6μ1滴加在絲網(wǎng)印刷電極的工作電極上，室溫干燥30分鐘即可。步驟四，樣品處理取0. 75g待測(cè)樣品，加入:3ml甲醇溶液(甲醇和水的體積比為80 20)，震蕩 15min后，靜置10min，3000轉(zhuǎn)離心15分后，使用0. OlM PBS稀釋5倍，取5μ 1備用。步驟五，檢測(cè)過程將6 μ 1 ^N-OVA滴加在工作電極區(qū)域，37°C放置30min。使用0. OlM PBST洗滌工作電極，并晾干，滴加8μ 1 1% (W/V)BSA溶液，以封閉工作電極，37°C放置30min。將抗^N單克隆抗體分別與ZEN標(biāo)準(zhǔn)品(0,0. 1,0. 5、1、5、10、50、100ng/ml)和待測(cè)樣品稀釋液混合，37°C孵育60min。使用0. OlM PBST洗滌工作電極，并晾干，滴加6 μ 1抗 ZEN單克隆抗體和ZEN標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品稀釋液的混合溶液，37°C放置30min。使用0. OlM PBST洗滌工作電極，并晾干，滴加6μ 1 HRP標(biāo)記的羊抗鼠二抗，37°C放置30min。使用0. OlM PBST洗滌工作電極，并晾干，將絲網(wǎng)印刷電極放入IOml 0.01M PBS(pH 7.4)的緩沖液中， 測(cè)定背景電流，記錄為Itl;將絲網(wǎng)印刷電極取出，使用0. OlM PBST洗滌工作電極，并晾干， 放入IOml 0.01M PBS (pH7. 4)的緩沖液中，再加入過氧化氫(H2O2)和氫醌(HQ)，使其濃度分別為2mM和0. ImM，攪拌溶液20min后，停止攪拌，測(cè)定電流，記錄為I，電流變化值ΔΙ = I-I0 ；使用Excel軟件，將ZEN標(biāo)準(zhǔn)品不同濃度與相對(duì)應(yīng)的ΔΙ繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，將待測(cè)樣品相對(duì)應(yīng)的ΔΙ帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，得到ZEN濃度，并X稀釋因子0X5)，即為待測(cè)樣品中ZEN含量(μ g/kg)ο綜上所述，本發(fā)明檢測(cè)ZEN毒素的方法是鑒于待測(cè)樣品若有ZEN毒素，則與抗ZEN 抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，使與電極上的^N-OVA結(jié)合的抗體量減少，并由此使電極上HRP-羊抗鼠二抗的量也減少，并影響電流變化值ΔΙ ；然后根據(jù)ZEN標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線來判定谷物檢測(cè)樣品中ZEN的含量。可以看出，本實(shí)施例的方法可直接定量檢測(cè)樣品中的^Ν，不需要專業(yè)培訓(xùn)，操作方便、快速。
權(quán)利要求
1.一種絲網(wǎng)印刷電極，其特征在于，所述絲網(wǎng)印刷電極的工作電極的工作區(qū)域涂覆有 Nafion-多壁碳納米管-膠體金-殼聚糖混合物膜層。
2.如權(quán)利要求1所述的絲網(wǎng)印刷電極，其特征在于，所述膠體金為16 18nm。
3.一種制備如權(quán)利要求1所述的絲網(wǎng)印刷電極的方法，其特征在于，包括如下步驟 步驟一，將多壁碳納米管活化，并和Nafion混合，制備Nafion-多壁碳納米管； 步驟二、制備膠體金，利用殼聚糖將Nafion-多壁碳納米管和膠體金混合均勻； 步驟三、將步驟二制得的混合物涂覆在絲網(wǎng)印刷電極的工作電極的工作區(qū)域上，37°C干燥成膜，即得。
4.如權(quán)利要求3所述的絲網(wǎng)印刷電極的制備方法，其特征在于，步驟一中，所述碳納米管活化方法為將5mg多壁碳納米管溶于15ml活化溶液中，超聲30min后，9000rpm離心 5min，去除上清后，加入超純水洗滌，9000rpm離心5min，去除上清，合并殘留物，60°C烘箱烘干，加入5ml水，配制成lmg/ml溶液，4°C貯存?zhèn)溆?；所述活化溶液為體積比為1 3的 HNO3 和 H2SO4。
5.如權(quán)利要求4所述的絲網(wǎng)印刷電極的制備方法，其特征在于，步驟一中，所述 Nafion-多壁碳納米管制備方法為將Img所述活化后的多壁碳納米管溶解于Nafion溶液中，超聲分散30分鐘后即可，4°C貯存?zhèn)溆?；所述Nafion溶液中Nafion質(zhì)量占溶液總體積的百分比為0. 1%。
6.如權(quán)利要求5所述的絲網(wǎng)印刷電極的制備方法，其特征在于，步驟二中，所述膠體金的制備方法具體為將IOOml的HAuCl4溶液加熱至沸騰，加入1. 2ml的檸檬酸三鈉溶液，煮沸7 lOmin，最后加三蒸水至IOOml，制得膠體金溶液；所述檸檬酸三鈉溶液中檸檬酸三鈉質(zhì)量占溶液總體積的百分比為1%，所述HAuCl4溶液中HAuCl4質(zhì)量占溶液總體積的百分比為 0. 01%。
7.如權(quán)利要求6所述的絲網(wǎng)印刷電極的制備方法，其特征在于，步驟二中，所述殼聚糖與Nafion-多壁碳納米管和膠體金的混合具體為將10 μ 1 Nafion-多壁碳納米管溶液和 50 μ 1膠體金溶液加入至50 μ 1殼聚糖溶液中，超聲混勻；所述殼聚糖溶液中殼聚糖質(zhì)量占溶液總體積的百分比為2%。
8.一種用如權(quán)利要求1所述的絲網(wǎng)印刷電極檢測(cè)玉米赤霉烯酮的方法，其特征在于， 包括如下步驟步驟一，將6 μ 1 ZEN-OVA滴加在所述工作電極區(qū)域，37°C放置30min ； 步驟二，使用0. OlM PBST洗滌工作電極，并晾干，滴加8μ 1 BSA溶液，以封閉工作電極，37°C放置30min ；所述BSA溶液中BSA質(zhì)量占溶液總體積的百分比為；步驟三，取0. 75g待測(cè)樣品，加入3ml甲醇溶液，震蕩、靜置、離心后，使用0.01M PBS稀釋5倍，取5μ1備用；步驟四，將抗ZEN單克隆抗體分別與不同濃度的^N標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品稀釋液混合， 37 °C 孵育 60min ；步驟五，使用0. OlM PBST洗滌工作電極，并晾干，滴加6 μ 1抗ZEN單克隆抗體和ZEN 標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品稀釋液的混合溶液，37°C放置30min ；步驟六，使用0. OlM PBST洗滌工作電極，并晾干，滴加6 μ 1 HRP標(biāo)記的羊抗鼠二抗， 37°C 放置 30min ；步驟七，使用0. OlM PBST洗滌工作電極，并晾干，將絲網(wǎng)印刷電極放入IOml pH為7. 4 的0. OlM PBS的緩沖液中，測(cè)定背景電流，記錄為I0 ；步驟八，將絲網(wǎng)印刷電極取出，使用0. OlM PBST洗滌工作電極，并晾干，放入IOmlpH為 7. 4的0. OlM PBS的緩沖液中，再加入過氧化氫和氫醌，使其濃度分別為2mM和0. ImM，攪拌溶液20min后，停止攪拌，測(cè)定電流，記錄為I，電流變化值ΔΙ = I-I0 ；步驟九；使用Excel軟件，將ZEN標(biāo)準(zhǔn)品不同濃度與相對(duì)應(yīng)的ΔΙ繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，將待測(cè)樣品相對(duì)應(yīng)的ΔΙ帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，得到ZEN濃度，并乘以稀釋因子，即為待測(cè)樣品中ZEN含量。
9.如權(quán)利要求8所述的絲網(wǎng)印刷電極檢測(cè)玉米赤霉烯酮的方法，其特征在于，步驟三中，所述離心為3000轉(zhuǎn)離心15分鐘。
10.如權(quán)利要求9所述的絲網(wǎng)印刷電極檢測(cè)玉米赤霉烯酮的方法，其特征在于，步驟三中，所述甲醇溶液為甲醇與水體積比為80 20。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種絲網(wǎng)印刷電極及其制備方法和檢測(cè)玉米赤霉烯酮的方法。所述絲網(wǎng)印刷電極的工作電極區(qū)域涂覆有Nafion-多壁碳納米管-膠體金-殼聚糖混合物膜層。制備時(shí)將多壁碳納米管活化后和Nafion混合；制備膠體金，利用殼聚糖將Nafion-多壁碳納米管和膠體金混合均勻；將混合物涂覆工作電極的工作區(qū)域上，37℃干燥成膜。本發(fā)明檢測(cè)ZEN的方法是鑒于待測(cè)樣品若有ZEN毒素，則與抗ZEN抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，使與電極上ZEN-OVA結(jié)合的抗體量減少，由此使電極上HRP-羊抗鼠二抗量也減少，并影響ΔI；然后根據(jù)ZEN標(biāo)準(zhǔn)品繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線來判定谷物檢測(cè)樣品中ZEN的含量。本發(fā)明檢測(cè)對(duì)象單一且針對(duì)性強(qiáng)，準(zhǔn)確率高，靈敏度強(qiáng)。
文檔編號(hào)G01N27/333GK102565163SQ20121000234
公開日2012年7月11日 申請(qǐng)日期2012年1月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月6日
發(fā)明者嚴(yán)亞賢, 孫建和, 王元?jiǎng)P, 王斌, 秦易 申請(qǐng)人:上海交通大學(xué)