專利名稱：一種二維液相色譜裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種液相色譜裝置，尤其是涉及一種溶劑自適應(yīng)的二維液相色譜裝置。
背景技術(shù)：
二維液相色譜是在高效液相色譜基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù)，它通過(guò)在技術(shù)上及設(shè)備上的改進(jìn)，組合不同的分離模式構(gòu)建二維系統(tǒng)。與一維液相色譜系統(tǒng)相比，二維液相色譜主要的優(yōu)勢(shì)在于提供了更大的峰容量，從而能夠較有效地解決復(fù)雜體系樣品的分析問(wèn)題?，F(xiàn)有的二維液相色譜裝置存在一些明顯的缺點(diǎn)。首先價(jià)格昂貴，二維液相色譜為了實(shí)現(xiàn)第I維和第2維色譜的梯度洗脫，需要至少配備2套二元高壓梯度泵，或者2套低壓混合泵及脫氣機(jī)，設(shè)備的投入比較大。其次，在第I維和第2維色譜使用相同分離機(jī)制 (如0DSX0DS)進(jìn)行分離，且第I維液相色譜使用梯度洗脫進(jìn)行分離的情況下，由于從第I 維色譜流出的樣品保留能力是變化的，兩維色譜分離條件的匹配存在問(wèn)題如果第2維液相色譜使用等度洗脫，很難保證在樣品的完全洗脫及良好分離；如果第2維液相色譜采用相同的梯度洗脫條件，為了適應(yīng)樣品保留能力的巨大變化，第2維液相色譜梯度洗脫的溶劑比例跨度及相應(yīng)的洗脫時(shí)間不得不延長(zhǎng)，即使如此，也無(wú)法取得理想的分離效果；要以較短的分析時(shí)間取得理想的分離效果，應(yīng)該使用與第I維洗脫出來(lái)的樣品相適應(yīng)的梯度洗脫條件，然而，現(xiàn)有的二維液相色譜難以完全模擬這種理想的分離條件。中國(guó)專利CN102313784A公開(kāi)一種在加熱模塊加熱中可以安全地進(jìn)行恒溫槽內(nèi)部的操作的液相色譜裝置。該液相色譜裝置具有恒溫槽(5);設(shè)置在恒溫槽前側(cè)面的外門 (55、56);加熱模塊(51);加熱模塊的加熱器(512);加熱模塊的溫度傳感器(511);使恒溫槽內(nèi)的空氣與外部流通的流通單元(9);和基于溫度傳感器的結(jié)果控制向加熱器的電力供給的控制單元(7)。外門(55)與加熱模塊之間包括有內(nèi)門(57)，內(nèi)門具有中空的內(nèi)門主體；絕熱件(573)，其收容在內(nèi)門內(nèi)，使得絕熱件和內(nèi)門主體內(nèi)的外門側(cè)表面之間形成空氣室(572);和設(shè)置在內(nèi)門主體內(nèi)的流入、流出用狹縫(575、576)。由于內(nèi)門內(nèi)的空氣通過(guò)這些狹縫與流通單元流出，因此內(nèi)門的溫度可以降低。中國(guó)專利CN101169392公開(kāi)一種二維高效液相色譜裝置及其通過(guò)同一檢測(cè)器依次檢測(cè)復(fù)雜體系樣品中不同疏水性小分子組分的二維高效液相色譜方法，由五個(gè)高壓液相色譜溶劑輸送泵、一個(gè)溶劑混合器、一個(gè)十通閥、一個(gè)六通閥、兩根分別適用于疏水性組分和親水性組分分離的液相色譜分析柱和一根組分轉(zhuǎn)移柱構(gòu)成；本發(fā)明系統(tǒng)適用于復(fù)雜體系樣品中多種不同疏水性小分子組分的分離檢測(cè)，應(yīng)用時(shí)操作簡(jiǎn)便，普適性強(qiáng)，靈活性好，可以采用質(zhì)譜、蒸發(fā)光散射等特殊檢測(cè)器，進(jìn)一步提高分析的分辨率，增加峰容量和選擇性； 非常有利于代謝組學(xué)、系統(tǒng)生物學(xué)等目前熱點(diǎn)研究領(lǐng)域所關(guān)注的具有重要意義的非揮發(fā)性小分子物質(zhì)的分離分析，提供更全面的樣品信息。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種溶劑自適應(yīng)的二維液相色譜裝置，以解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問(wèn)題。本發(fā)明設(shè)有渦旋梯度混合器、第I維液相色譜泵、第I維液相色譜柱、切換閥、富集柱或定量環(huán)、第2維液相色譜泵、第2維液相色譜柱和檢測(cè)器；所述渦旋梯度混合器的輸出端分別與第I維液相色譜泵的輸入端和第2維液相色譜泵的輸入端連接，所述第I維液相色譜泵的輸出端與所述第2維液相色譜柱的輸入端連接，第2維液相色譜柱的輸出端與切換閥的輸入端連接，第2維液相色譜泵輸出端與切換閥的輸入端連接，切換閥的輸出端與第2維液相色譜柱輸入端連接，第2維液相色譜柱輸出端與檢測(cè)器輸入端連接；切換閥的切換口與富集柱或定量環(huán)的兩端連接。所述渦旋梯度混合器可設(shè)有用于實(shí)現(xiàn)溶液混合的磁力攪拌器、磁力攪拌子以及2 個(gè)溶劑儲(chǔ)罐，其中I個(gè)溶劑儲(chǔ)罐用于儲(chǔ)存低洗脫力溶劑，稱為低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐，另I個(gè)溶劑儲(chǔ)罐用于儲(chǔ)存高洗脫力溶劑，稱為高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐，2個(gè)溶劑儲(chǔ)罐的底部相互聯(lián)通。所述第I維液相色譜泵和第2維液相色譜泵均可采用單泵，均從所述低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐中抽取溶劑。所述切換閥可采用二位多通閥，尤其是二位六通閥等。若所述二維液相色譜裝置僅設(shè)有I個(gè)渦旋梯度混合器，則所述第I維液相色譜泵和第2維液相色譜泵均從該渦旋梯度混合器的低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐中抽取溶劑。若所述二維液相色譜裝置設(shè)有2個(gè)渦旋梯度混合器，則所述第I維液相色譜泵和第2維液相色譜泵分別從低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐和高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐中抽取溶劑。本發(fā)明不僅以較低的成本實(shí)現(xiàn)了二維液相色譜的梯度洗脫，而且第I維和第2維色譜的洗脫溶劑基本同步，因此，從第I維色譜流出的樣品在第2維色譜上能夠取得很好的分離效果，同時(shí)分析的時(shí)間也由于洗脫能力適中而大大縮短，從而實(shí)現(xiàn)二維液相色譜的第I 維和第2維分離條件的自動(dòng)適應(yīng)。


圖I為本發(fā)明實(shí)施例I的結(jié)構(gòu)組成示意圖。在圖I中，各部件的標(biāo)記為1、渦旋梯度混合器；21、第I維液相色譜泵；22、第I維液相色譜柱；31、切換閥；32、富集柱或定量環(huán)； 41、第2維液相色譜泵；42、第2維液相色譜柱；5、檢測(cè)器。圖2為本發(fā)明實(shí)施例2的結(jié)構(gòu)組成示意圖。在圖I中，各部件的標(biāo)記為1、渦旋梯度混合器；11、高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐；12、低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐；13、溶劑通孔；14、磁力攪拌器； 15、攪拌子；21、第I維液相色譜泵；22、第I維液相色譜柱；31、切換閥(采用二位六通閥)； 32、富集柱或定量環(huán)；41、第2維液相色譜泵；42、第2維液相色譜柱；5、檢測(cè)器；6、廢液儲(chǔ)罐。圖3為本發(fā)明實(shí)施例2的液相圖譜。在圖3中，橫坐標(biāo)為時(shí)間(min)，縱坐標(biāo)為強(qiáng)度。圖4為本發(fā)明實(shí)施例3的結(jié)構(gòu)組成示意圖。在圖I中，各部件的標(biāo)記為1、第I 渦旋梯度混合器；11、第I高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐；12、第I低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐；13、第I連通閥； 14、第I磁力攪拌器；15、第I攪拌子;1，、第2渦旋梯度混合器；11’、第2高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐；12’、第2低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐；13’、第2連通閥；14’、第2磁力攪拌器；15’、第2攪拌子；21、第I維液相色譜泵；22、第I維液相色譜柱；31、切換閥(采用二位十通閥);31’、稀釋液加注泵；32’、混合器；32、富集柱；41、第2維液相色譜泵；42、第2維液相色譜柱；5、檢測(cè)器； 6、廢液儲(chǔ)罐。圖5為本發(fā)明實(shí)施例3的液相圖譜。在圖3中，橫坐標(biāo)為時(shí)間(min)，縱坐標(biāo)為強(qiáng)度。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的描述。實(shí)施例I如圖I所示，本發(fā)明實(shí)施例I設(shè)有渦旋梯度混合器I、第I維液相色譜泵21、第I 維液相色譜柱22、切換閥31、富集柱或定量環(huán)32、第2維液相色譜泵41、第2維液相色譜柱 42和檢測(cè)器5 ;所述渦旋梯度混合器I的輸出端分別與第I維液相色譜泵21的輸入端和第2維液相色譜泵41的輸入端連接，所述第I維液相色譜泵21的輸出端與所述第2維液相色譜柱22的輸入端連接，第2維液相色譜柱22的輸出端與切換閥31的輸入端連接，第 2維液相色譜泵41輸出端與切換閥31的輸入端連接，切換閥31的輸出端與第2維液相色譜柱42輸入端連接，第2維液相色譜柱42輸出端與檢測(cè)器5輸入端連接；切換閥31的切換口與富集柱或定量環(huán)32的兩端連接。所述第I維液相色譜泵21和第2維液相色譜泵41均可采用單泵。所述二維液相色譜裝置僅設(shè)有I個(gè)渦旋梯度混合器1，所述第I維液相色譜泵21 和第2維液相色譜泵41均從該渦旋梯度混合器I的低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐中抽取溶劑。實(shí)施例2參見(jiàn)圖2和3，本發(fā)明實(shí)施例2設(shè)有渦旋梯度混合器I、高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐11、低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐12、溶劑通孔13、磁力攪拌器14、磁力攪拌子15、第I維液相色譜泵21、第 I維液相色譜柱22、切換閥(采用二位六通閥)31、富集柱或定量環(huán)32、第2維液相色譜泵 41、第2維液相色譜柱42、檢測(cè)器5和廢液儲(chǔ)罐6 ;所述渦旋梯度混合器I的輸出端分別與第I維液相色譜泵21的輸入端和第2維液相色譜泵41的輸入端連接，所述第I維液相色譜泵21的輸出端與所述第2維液相色譜柱22的輸入端連接，第2維液相色譜柱22的輸出端與切換閥31的輸入端連接，第2維液相色譜泵41輸出端與切換閥31的輸入端連接，切換閥31的輸出端與第2維液相色譜柱42輸入端連接，第2維液相色譜柱42輸出端與檢測(cè)器5輸入端連接；切換閥31的切換口與富集柱或定量環(huán)32的兩端連接。所述渦旋梯度混合器I設(shè)有用于實(shí)現(xiàn)溶液混合的磁力攪拌器14、磁力攪拌子15、 高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐11和低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐12，其中高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐11用于儲(chǔ)存高洗脫力溶劑，低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐12用于儲(chǔ)存低洗脫力溶劑，2個(gè)溶劑儲(chǔ)罐的底部通過(guò)溶劑通孔 13相互聯(lián)通。所述第I維液相色譜泵21和第2維液相色譜泵41均可采用單泵，由于所述二維液相色譜裝置僅設(shè)有I個(gè)渦旋梯度混合器1，則所述第I維液相色譜泵21和第2維液相色譜泵41均從該渦旋梯度混合器I的低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐12中抽取溶劑。樣品大黃水提取物500mg。切換接口 二位六通閥，接20ml的定量環(huán)。
自洗脫溶劑系統(tǒng)低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐，30%甲醇/7jC，2000ml;高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐 70% 甲醇 / 水，2000ml。第I維液相色譜參數(shù)中低壓輸液泵，流速O. 5ml/min ;色譜柱Φ 2. 2cmX20cm, 以粒徑75 μ M的ODS填充。第2維制備型高效液相色譜參數(shù)制備型HPLC泵，流速8ml/min ;色譜柱Φ 2cmX 20cm, 5 μ m, ODS ;每個(gè)分離周期 30 40min ；DAD檢測(cè)器。經(jīng)第I維中低壓液相色譜粗分的樣品經(jīng)定量環(huán)暫存后，在切換閥的控制下，每隔 30min送入第2維的HPLC進(jìn)行分離，所得到的HPLC圖譜(第I 7流份)如圖3所示。實(shí)施例3參見(jiàn)圖4和5，本發(fā)明實(shí)施例3設(shè)有第I渦旋梯度混合器I、第I高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐11、第I低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐12、第I連通閥13’、第I磁力攪拌器14、第I磁力攪拌子15、 第2渦旋梯度混合器I’、第2高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐11’、第2低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐12’、第2連通閥13”、第2磁力攪拌器14’、第2攪拌子15’、第I維液相色譜泵21、第I維液相色譜柱
22、切換閥(采用二位十通閥)31、稀釋液加注泵31’、混合器32’、富集柱或定量環(huán)32、第2 維液相色譜泵41、第2維液相色譜柱42、檢測(cè)器5和廢液儲(chǔ)罐6。所述第I渦旋梯度混合器I設(shè)有用于實(shí)現(xiàn)溶液混合的第I磁力攪拌器14、第I磁力攪拌子15以及2個(gè)溶劑儲(chǔ)罐(即第I高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐11和第I低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐 12)，其中第I低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐12用于儲(chǔ)存低洗脫力溶劑，第I高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐11用于儲(chǔ)存高洗脫力溶劑，2個(gè)溶劑儲(chǔ)罐的底部通過(guò)第I連通閥13’相互聯(lián)通。所述第I維液相色譜泵21和第2維液相色譜泵41均可采用單泵。所述二維液相色譜裝置設(shè)有2個(gè)渦旋梯度混合器，則所述第I維液相色譜泵和第2維液相色譜泵分別從低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐和高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐中抽取溶劑。所述第2渦旋梯度混合器I’設(shè)有用于實(shí)現(xiàn)溶液混合的第2磁力攪拌器14’、第2 攪拌子15’以及2個(gè)溶劑儲(chǔ)罐(即第2高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐11’和第2低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐 12’)，其中第2低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐12’用于儲(chǔ)存低洗脫力溶劑，第2高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐11’ 用于儲(chǔ)存高洗脫力溶劑，2個(gè)溶劑儲(chǔ)罐的底部通過(guò)第2連通閥13”相互聯(lián)通。樣品深海來(lái)源青霉菌株P(guān)enicillium sp. Fll,發(fā)酵液提取物500mg。切換接口 二位十通閥，二個(gè)富集柱(Φ 3. OcmXl. 5cm)。自洗脫溶劑系統(tǒng)第I低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐，30%甲醇400ml ;第I高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐60%甲醇400ml。第2低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐，30%甲醇400ml ;第2高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐60%甲醇400ml。第I維液相色譜參數(shù)中低壓輸液泵，流速lml/min ;色譜柱Φ 2. 2cmX20cm,以粒徑75 μ m的ODS填充。稀釋液加注參數(shù)稀釋液水；稀釋液流速lml/min (與洗脫液I : I混合)第2維制備型高效液相色譜參數(shù)制備型HPLC泵，流速8ml/min ;色譜柱Φ 2cmX 20cm, 5 μ m, ODS ;每個(gè)分離周期 30 40min ；DAD檢測(cè)器。
經(jīng)第I維中低壓液相色譜粗分的樣品稀釋液稀釋，富集于富集柱，在切換閥的控制下，每隔30min送入第2維的HPLC進(jìn)行分離，所得到的HPLC圖譜(第I 7流份)如圖 5所示。從上述實(shí)施例可以看出，本發(fā)明提供的溶劑自適應(yīng)的二維液相色譜裝置，其第I 維和第2維液相的輸液泵雖然均為單泵，卻能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)復(fù)雜成分的自動(dòng)梯度洗脫，第2維液相每次的分離時(shí)間均在30 40min，且對(duì)樣品具有良好的分離能力。
權(quán)利要求
1.一種二維液相色譜裝置，其特征在于設(shè)有渦旋梯度混合器、第I維液相色譜泵、第I 維液相色譜柱、切換閥、富集柱或定量環(huán)、第2維液相色譜泵、第2維液相色譜柱和檢測(cè)器; 所述渦旋梯度混合器的輸出端分別與第I維液相色譜泵的輸入端和第2維液相色譜泵的輸入端連接，所述第I維液相色譜泵的輸出端與所述第2維液相色譜柱的輸入端連接，第2維液相色譜柱的輸出端與切換閥的輸入端連接，第2維液相色譜泵輸出端與切換閥的輸入端連接，切換閥的輸出端與第2維液相色譜柱輸入端連接，第2維液相色譜柱輸出端與檢測(cè)器輸入端連接；切換閥的切換口與富集柱或定量環(huán)的兩端連接。
2.如權(quán)利要求I所述的一種二維液相色譜裝置，其特征在于所述渦旋梯度混合器設(shè)有用于實(shí)現(xiàn)溶液混合的磁力攪拌器、磁力攪拌子、低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐和高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐，低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐和高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐的底部相互聯(lián)通。
3.如權(quán)利要求I所述的一種二維液相色譜裝置，其特征在于所述第I維液相色譜泵和第2維液相色譜泵均采用單泵。
4.如權(quán)利要求I所述的一種二維液相色譜裝置，其特征在于所述切換閥采用二位多通閥。
5.如權(quán)利要求4所述的一種二維液相色譜裝置，其特征在于所述二位多通閥為二位六通閥。
6.如權(quán)利要求I所述的一種二維液相色譜裝置，其特征在于所述二維液相色譜裝置設(shè)有I個(gè)渦旋梯度混合器，所述第I維液相色譜泵和第2維液相色譜泵均從所述低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐中抽取溶劑。
7.如權(quán)利要求I所述的一種二維液相色譜裝置，其特征在于所述二維液相色譜裝置設(shè)有2個(gè)渦旋梯度混合器，所述第I維液相色譜泵和第2維液相色譜泵分別從低洗脫力溶劑儲(chǔ)罐和高洗脫力溶劑儲(chǔ)罐中抽取溶劑。
全文摘要
一種二維液相色譜裝置，涉及一種液相色譜裝置。設(shè)有渦旋梯度混合器、第1維液相色譜泵、第1維液相色譜柱、切換閥、富集柱或定量環(huán)、第2維液相色譜泵、第2維液相色譜柱和檢測(cè)器；所述渦旋梯度混合器的輸出端分別與第1維液相色譜泵的輸入端和第2維液相色譜泵的輸入端連接，所述第1維液相色譜泵的輸出端與所述第2維液相色譜柱的輸入端連接，第2維液相色譜柱的輸出端與切換閥的輸入端連接，第2維液相色譜泵輸出端與切換閥的輸入端連接，切換閥的輸出端與第2維液相色譜柱輸入端連接，第2維液相色譜柱輸出端與檢測(cè)器輸入端連接；切換閥的切換口與富集柱或定量環(huán)的兩端連接。
文檔編號(hào)G01N30/08GK102590396SQ201210024959
公開(kāi)日2012年7月18日 申請(qǐng)日期2012年2月3日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月3日
發(fā)明者丘鷹昆, 吳振, 莊萍, 陳琳 申請(qǐng)人:廈門大學(xué)