專(zhuān)利名稱(chēng)：用于在離心分析儀中測(cè)定血小板功能的裝置和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及凝固診斷學(xué)領(lǐng)域，更精確地，涉及血小板功能診斷學(xué)領(lǐng)域，還涉及用于在離心分析儀中測(cè)定血小板功能的裝置和方法。
背景技術(shù)：
術(shù)語(yǔ)止血包括這樣的生理過(guò)程其首先確保血液在血管系統(tǒng)中的流動(dòng)性,其次確保通過(guò)形成血塊來(lái)避免血管外失血。在調(diào)節(jié)止血中涉及許多蛋白因子以及諸如血小板(凝血細(xì)胞)等細(xì)胞組分。在血管損傷的情況下，血小板首先積累在內(nèi)皮下膠原上。該粘附由諸如von Willebrand因子(VWF)等粘附蛋白介導(dǎo)。在粘附過(guò)程中，血小板被活化，并從它們的顆粒釋放出介質(zhì)，其結(jié)果是，誘導(dǎo)其它血小板的聚集和活化的增加。這實(shí)現(xiàn)初步的血管壁阻塞(初期止血)，其僅被血漿凝固系統(tǒng)的進(jìn)一步反應(yīng)穩(wěn)定化(二期止血)。這些過(guò)程的失調(diào)可以導(dǎo)致血栓形成傾向或出血傾向，并根據(jù)嚴(yán)重性程度，可以具有危及生命的后果。 在凝固診斷學(xué)中開(kāi)發(fā)了不同的體外實(shí)驗(yàn)方法，這些可以用于測(cè)定患者的血液是否可以適當(dāng)?shù)啬?，或是否存在凝固缺陷。在凝固缺陷的情況下，經(jīng)常有必要得到關(guān)于存在的缺陷的原因的更精確的信息，以便能夠選擇最佳的治療措施。以以靶向方式進(jìn)行檢查的凝固系統(tǒng)的一個(gè)重要的子功能是初期止血，這基本上依賴(lài)于血小板的功能。測(cè)定凝血細(xì)胞或血小板的功能是止血診斷學(xué)的一個(gè)常規(guī)目的，它在眾多臨床情形下是重要的，例如在心血管疾病的早期檢測(cè)中，用于診斷遺傳性或獲得性血小板功能缺陷，用于在外科手術(shù)之前排除出血并發(fā)癥，或用于監(jiān)測(cè)抗血栓治療。抑制血小板聚集的藥物主要被用于預(yù)防和治療動(dòng)脈栓塞性事件，諸如心肌梗塞或中風(fēng)。具有血小板聚集抑制作用的最普遍的藥物是乙酰基水楊酸(ASA，阿司匹林 )和噻吩并吡啶類(lèi)藥物氯吡格雷和噻氯匹定。現(xiàn)有技術(shù)已經(jīng)公開(kāi)了用于檢查血小板功能的不同方法。測(cè)定出血時(shí)間是檢測(cè)初期止血的總體內(nèi)試驗(yàn)。如下測(cè)定出血時(shí)間在患者上切開(kāi)小切口或穿刺損傷，并測(cè)量在出血停止之前的時(shí)間。這是一個(gè)粗略地提供信息的試驗(yàn)，其難以標(biāo)準(zhǔn)化，主要用于緊急情況，以便得到初期止血的概況。血小板聚集抑制劑的攝入導(dǎo)致出血時(shí)間的增加。測(cè)定出血時(shí)間的缺點(diǎn)是，在正常出血時(shí)間的情況下，不可能排除血小板功能缺陷。不同的體外方法允許明顯更靈敏地檢測(cè)血小板功能缺陷。在這些方法中，通常通過(guò)加入活化劑和/或通過(guò)施加剪切力，在全血樣品或富含血小板的血漿(PRP)樣品中誘導(dǎo)血小板的聚集，并測(cè)量聚集反應(yīng)。最常用于誘導(dǎo)血小板聚集的活化劑如下ADP (腺苷5’ -二磷酸)、膠原、腎上腺素(epinephrine、adrenalin)、利托菌素(ristocetin)和它們的不同組合，以及凝血酶、凝血酶受體活化蛋白(TRAP)或血清素。為了在體外施加剪切力(所述剪切力是血小板在體內(nèi)聚集的重要觸發(fā)因素)，使用不同的方法，例如攪拌血小板樣品，或穿過(guò)具有小直徑的插管或孔引導(dǎo)或壓迫血小板樣品。在常規(guī)光透過(guò)集合度測(cè)定(LTA，其也稱(chēng)作Born血小板聚集)的情況下，在有聚集誘導(dǎo)物存在下，在集合度計(jì)中光度測(cè)定地測(cè)量富含血小板的血漿中血小板的聚集效率。作為聚集體形成的結(jié)果，PRP樣品的光透過(guò)增加，所以測(cè)量光透過(guò)使得可能測(cè)定例如聚集體形成的速率。光透過(guò)集合度測(cè)定也使得可能檢測(cè)用作藥物的血小板聚集抑制劑的治療效果。光透過(guò)集合度測(cè)定的一個(gè)缺點(diǎn)是，僅富含血小板的血漿可以用作樣品材料。富含血小板的血漿不僅缺少血液的重要組分例如紅血細(xì)胞和白血細(xì)胞，而且需要耗費(fèi)時(shí)間的且易出錯(cuò)的樣品制備。VerifyNow 系統(tǒng)(Accumetrics)是光透過(guò)集合度測(cè)定的一種發(fā)展,其允許檢查全血樣品中的血小板功能。在該系統(tǒng)中，通過(guò)加入纖維蛋白原包被的微粒，增加血小板的聚集反應(yīng)。在血小板功能分析儀(PFA-100 ，PFA-200Siemens Healthcare Diagnostics)中，實(shí)現(xiàn)了完全不同的測(cè)定血小板功能的試驗(yàn)原理。這是通用的、自動(dòng)化的和標(biāo)準(zhǔn)化的體外全血試驗(yàn)，其中在流動(dòng)條件下并因此在強(qiáng)剪切力存在下，測(cè)量初期止血。為了模擬在相對(duì)小的動(dòng)脈血管中普遍的流動(dòng)條件和剪切力,在專(zhuān)門(mén)的測(cè)量池中產(chǎn)生大約-40毫巴(mbar)的負(fù)壓，并使位于樣品蓄池中的檸檬酸鹽化的全血流過(guò)具有大約200 μ m直徑的毛細(xì)管。所述毛細(xì)管在測(cè)量室中開(kāi)口，所述測(cè)量室被分隔件(例如膜)封閉，所述分隔件含有毛細(xì)管樣中心 開(kāi)口(孔)，血液因?yàn)樨?fù)壓而穿過(guò)所述中心開(kāi)口。通常向膜中(至少在所述孔周?chē)膮^(qū)域)添加一種或多種誘導(dǎo)血小板聚集的活化劑，使得流過(guò)它的血液與所述孔區(qū)域中的聚集誘導(dǎo)物接觸。作為誘導(dǎo)的血小板粘附和聚集的結(jié)果，在孔區(qū)域中形成血小板塞(血塊)，它閉合膜開(kāi)口，并停止血流。在該系統(tǒng)中，測(cè)量封閉膜開(kāi)口所需的時(shí)間。該所謂的閉合時(shí)間與血小板的功能效率相關(guān)聯(lián)。在例如WO 97/34698中，描述了在基于閉合時(shí)間來(lái)測(cè)定血小板功能的方法中使用的測(cè)量池。作為實(shí)例，使用配有膜的測(cè)量池，所述膜被膠原(Col)和另外的ADP或腎上腺素(Epi)包被。在例如WO 96/00899 Al中，描述了不同的分隔件以及它們的生產(chǎn)和應(yīng)用。也用于測(cè)定血小板功能的另一個(gè)試驗(yàn)原理是基于血液或富含血小板的血漿被迫穿過(guò)濾器。Uchiyama, S.等人(Thrombosis Research 31: 99-116，1983)描述了所謂的濾器出血時(shí)間(FBT)試驗(yàn)。在該方法中，引導(dǎo)處于恒壓(大約150 mmHg)的全血穿過(guò)聚酯纖維濾器(Dacixm )。血小板聚集體堵塞濾器孔，并減小流速。出血時(shí)間FBT是流動(dòng)開(kāi)始至流速已經(jīng)下降至低于I滴/ 30秒所經(jīng)歷的時(shí)間。GB 2175691 A描述了根據(jù)Uchiyama等人的FBT試驗(yàn)的一種發(fā)展。在這里,借助于正壓，使全血樣品穿過(guò)由纖維網(wǎng)絲組成的濾器。濾器具有不同尺度的孔，并允許具有最高達(dá)10 μ m直徑的顆粒穿過(guò)。其效應(yīng)是,在僅20-100 mmHg的更低壓力，可以壓迫樣品穿過(guò)濾器。相對(duì)大的血小板聚集體堵塞孔，并逐漸地阻斷樣品材料的穿過(guò)。測(cè)定流速或?qū)Ρ葹V過(guò)的洗脫液中的血小板數(shù)目與未濾過(guò)的樣品中的血小板數(shù)目提供關(guān)于血小板的聚集效率以及因而血小板功能的洞察。另一種測(cè)定血小板功能的方法(其基于血液或富含血小板的血漿被迫穿過(guò)濾器的原理)是所謂的保留試驗(yàn)Homburg (RTH) (Krischek, B.等人，Seminars in Thrombosisand Hemostasis 31(4): 449-457，2005; Krischek, B.等人，Seminars in Thrombosisand Hemostasis 31(4): 458-463，2005)。在該方法中，借助于離心力(llOXg, 10 分鐘)，使全血或富含血小板的血衆(zhòng)穿過(guò)Porex 濾器單元,所述濾器單元具有2. 3 mm的高度和16-22 μ m的孔尺度。測(cè)定在樣品穿過(guò)濾器之前和之后的血小板數(shù)目之間的差異，并計(jì)算保留指數(shù)(RI%)。濾器中減小的血小板保留指示血小板功能的喪失。濾器中增加的血小板保留指示增加的血小板活性。最后提及的兩種方法的一個(gè)缺點(diǎn)是，除了實(shí)際上進(jìn)行試驗(yàn)以外，必須測(cè)定每個(gè)樣品中的血小板數(shù)目2次。為此目的，首先，需要專(zhuān)門(mén)的分析儀器，其次，必須處理每個(gè)樣品多次。用于自動(dòng)化凝固診斷學(xué)的不同的可商業(yè)得到的 儀器(凝固分析儀)包括離心單元。后者通常由比色杯轉(zhuǎn)子組成，在所述比色杯轉(zhuǎn)子上安置有分光光度計(jì)單元，使得在比色杯轉(zhuǎn)子旋轉(zhuǎn)過(guò)程中可以光度測(cè)定地測(cè)量樣品。因此，特別希望提供可以在可得到的具有離心單元的儀器上進(jìn)行的血小板診斷學(xué)方法。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明基于下述目的提供用于測(cè)定血小板功能的裝置和方法，其允許使用離心分析儀可靠地、簡(jiǎn)單地且快速地測(cè)定血小板功能。通過(guò)獨(dú)立權(quán)利要求的技術(shù)特征，實(shí)現(xiàn)了該目的。從屬權(quán)利要求說(shuō)明了本發(fā)明的其它實(shí)施方案。本發(fā)明涉及一種用于測(cè)定血小板功能的測(cè)量池，所述測(cè)量池包括下述組件
a.第一室，所述第一室用于接納含有血小板的液體樣品，
b.第二室，所述第二室在離心力作用于所述測(cè)量池的條件下捕集來(lái)自第一室的液體樣品，和
c.多孔分隔件，所述分隔件使所述第一室和所述第二室彼此分開(kāi)，
且其中所述分隔件含有至少一種影響血小板活性的可溶物。


借助于下面討論的例證附圖，更詳細(xì)地解釋了本發(fā)明。在這里應(yīng)當(dāng)指出，所述附圖僅僅具有描述性質(zhì)，無(wú)意以任何方式限制本發(fā)明。圖I
圖I顯示了根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池(I)的一個(gè)實(shí)施方案。測(cè)量池(I)包括用于接納含有血小板的液體樣品的第一室(11)，和第二室(12)，所述第二室在離心力作用于所述測(cè)量池的條件下捕集來(lái)自第一室的液體樣品。所述測(cè)量池另外包括多孔分隔件(13)，所述分隔件橫過(guò)中空體的整個(gè)直徑使所述第一室和所述第二室彼此分開(kāi)。分隔件(13)含有至少一種影響血小板活性的可溶物。圖2
圖2顯示了根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池(2)的另一個(gè)實(shí)施方案。測(cè)量池(2)包括用于接納含有血小板的液體樣品的第一室(21)，和第二室(22)，所述第二室在離心力作用于所述測(cè)量池的條件下捕集來(lái)自第一室的液體樣品。所述測(cè)量池另外包括多孔分隔件(23)，所述分隔件橫過(guò)中空體的整個(gè)直徑使所述第一室和所述第二室彼此分開(kāi)。分隔件(23)含有至少一種影響血小板活性的可溶物。此外，在第二室(22)中，這里顯示的測(cè)量池(2)包括斜坡樣組件形式的裝置(24)，所述裝置用于將第二室的空間細(xì)分成第一部分(221)和第二部分(222)。第一部分(221)用于捕集和運(yùn)輸穿過(guò)分隔件的樣品液體。第二部分(222)用于測(cè)量捕集在第二室(22)中的樣品液體(29)的液體量。所述第一部分和所述第二部分在所述第二室的遠(yuǎn)端一半(即在虛線以下)中互連，使得捕集和運(yùn)輸?shù)臉悠芬后w僅可以在測(cè)量池尖部附近從所述第一部分進(jìn)入所述第二部分。其優(yōu)點(diǎn)在于，在離心過(guò)程中穿過(guò)分隔件(23)的樣品液體不以不受控的方式潤(rùn)濕整個(gè)第二室(24)，而是使樣品液體被以靶向方式捕集、收集和運(yùn)輸?shù)剿龅诙业倪h(yuǎn)端區(qū)。因而運(yùn)輸?shù)臉悠芬后w(29)收集在第二室(22)中，更具體地，在第二室(22)的第二部分(222)中，從底部(遠(yuǎn)端)至在測(cè)量池尖部中的頂部(近端)。此外，這里顯示的測(cè)量池(2)包括用于檢測(cè)填充水平的不同長(zhǎng)度的電極(25)。隨著第二室(22)(更具體地，在第二室(22)的第二部分(222))中的液體水平增加，越來(lái)越多的電極接觸樣品液體。圖3
圖3顯示了根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池(3)的另一個(gè)實(shí)施方案。測(cè)量池(3)包括用于接納含有血小板的液體樣品的第一室(31)，和第二室(32)，所述第二室在離心力作用于所述測(cè)量池的條件下捕集來(lái)自第一室的液體樣品。所述測(cè)量池另外包括多孔分隔件(33)，所述分隔件橫過(guò)中空體的整個(gè)直徑使所述第一室和所述第二室彼此分開(kāi)。分隔件(33)含有至少一種影響血小板活性的可溶物。此外，在第二室(32)中，這里顯示的測(cè)量池(3)包括裝置(34)，所述裝置用于將第二室的空間細(xì)分成第一部分(321)和第二部分(322)。將第二室的空間(32)細(xì)分成第一部分和第二部分的裝置(34)具有第一區(qū)段(341)，所述第一區(qū)段具有相對(duì)于所述多孔分隔件成一定角度的平面。裝置(34)此外具有第二部分區(qū)段(342)，所述第二部分區(qū)段接連第一部分區(qū)段(341)，與限定第二室的空間(32)的壁(36)基本上平行地延伸，并與所述壁形成管狀結(jié)構(gòu)，所述管狀結(jié)構(gòu)延伸至第二室
(32)的遠(yuǎn)端一半。該實(shí)施方案的優(yōu)點(diǎn)在于，所述第二室的第一部分(321)(捕集區(qū))被減小至第二室的空間(32)的最小值，使得所述第二部分(322)(測(cè)量區(qū))可以得到盡可能大的第二室空間(32)。作為實(shí)例，其優(yōu)點(diǎn)在于，最大可能量的可利用面積被用于可能的測(cè)量裝置，所述測(cè)量裝置安置在測(cè)量池上。此外，這里顯示的測(cè)量池(3)包括用于檢測(cè)填充水平的不同長(zhǎng)度的電極(35)。隨著第二室(32)(更具體地，在第二室(22)的第二部分(322))中的液體水平增加，越來(lái)越多的電極接觸樣品液體(39)。圖4
圖4顯示了根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池(4)的另一個(gè)實(shí)施方案。測(cè)量池(4)包括用于接納含有血小板的液體樣品的第一室(41)，和第二室(42)，所述第二室在離心力作用于所述測(cè)、量池的條件下捕集來(lái)自第一室的液體樣品。所述測(cè)量池另外包括多孔分隔件(43)，所述分隔件橫過(guò)中空體的整個(gè)直徑使所述第一室和所述第二室彼此分開(kāi)。分隔件(43)含有至少一種影響血小板活性的可溶物。此外，在第二室(42)中，這里顯示的測(cè)量池(4)包括裝置(44)，所述裝置用于將第二室的空間細(xì)分成第一部分(421)和第二部分(422)。
在該情況下，將第二室的空間(42)細(xì)分成第一部分和第二部分的裝置(44)具有漏斗樣形狀，漏斗樣裝置的管狀區(qū)域延伸至第二室(42)的遠(yuǎn)端一半。在圖4A中顯示的測(cè)量池⑷包括用于檢測(cè)填充水平的不同長(zhǎng)度的電極(45)。在在圖4B中顯示的測(cè)量池(4)中，測(cè)量池的壁和至少漏斗形裝置(42)的管狀區(qū)域由透光材料組成。測(cè)量池的該實(shí)施方案特別適用于測(cè)量在測(cè)量池的第二室中的樣品液體
(49)的流速。再借助于沿著測(cè)量池的縱向軸線安置的光源和光檢測(cè)器(未圖解)，光度測(cè)定地測(cè)量漏斗形裝置(44)的管狀區(qū)域中的流速?；蛘?，通過(guò)激光多普勒測(cè)速法(LDA)的裝置，也可以測(cè)量漏斗形裝置(44)的管狀區(qū)域中的流速。圖5
圖5顯示了根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池(5)的另一個(gè)實(shí)施方案。測(cè)量池(5)包括用于接納含有血小板的液體樣品的第一室(51)，和第二室(52)，所述第二室在離心力作用于所述測(cè) 量池的條件下捕集來(lái)自第一室的液體樣品。所述測(cè)量池另外包括多孔分隔件(53)，所述分隔件橫過(guò)中空體的整個(gè)直徑使所述第一室和所述第二室彼此分開(kāi)。分隔件(53)含有至少一種影響血小板活性的可溶物。此外，在第二室(52)中，這里顯示的測(cè)量池(5)具有裝置(54)，所述裝置用于將第二室的空間細(xì)分成第一部分(521)、第二部分(522)和第三部分(523)。第一部分(521)(捕集區(qū))用于捕集和運(yùn)輸樣品液體，所述樣品液體穿過(guò)分隔件，沿著第二室(52)的縱向軸線，進(jìn)入近端一半的遠(yuǎn)端。第一部分(521)連接至第二室(52)的遠(yuǎn)端一半中的第二部分
(522)上，使得被捕集和運(yùn)輸?shù)臉悠芬后w可以從第一部分(521)進(jìn)入第二部分(522)。第二部分(522)(測(cè)量區(qū))用于測(cè)量捕集在第二室(52)中的樣品液體的流速。在這里，第二部分(522)具有毛細(xì)管的形式，所述毛細(xì)管在所述第二室的近端一半的方向從遠(yuǎn)端一半升起，且具有在它的末端處的開(kāi)口(57)，所述開(kāi)口建立與第三部分(523)的連接。第三部分
(523)(溢流區(qū))用作來(lái)自第二部分(522)的樣品液體(59)的溢流。測(cè)量池的該實(shí)施方案特別適用于基于測(cè)量樣品液體的流速來(lái)測(cè)定血小板功能。圖6
圖6顯示了根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池轉(zhuǎn)子(7)的平面視圖，所述測(cè)量池轉(zhuǎn)子具有許多以弧形形式安置的測(cè)量池(6)，其中每個(gè)測(cè)量池(6)包括用于接納含有血小板的液體樣品的第一室(61)，和第二室(62)，所述第二室在離心力作用于所述測(cè)量池的條件下捕集來(lái)自第一室的液體樣品。所述測(cè)量池另外包括多孔分隔件(63)，所述分隔件橫過(guò)中空體的整個(gè)直徑使所述第一室和所述第二室彼此分開(kāi)。分隔件￠3)含有至少一種影響血小板活性的可溶物。測(cè)量池(6)沿著它們的縱向軸線具有彎曲形狀。含有分隔件(63)的測(cè)量池(6)的區(qū)域具有比測(cè)量池的剩余區(qū)域更小的直徑。在測(cè)量池轉(zhuǎn)子⑵的上側(cè)，存在吸液孔(68)，穿過(guò)所述吸液孔，可以將樣品材料導(dǎo)入測(cè)量池出)的第一室￠1)中。箭頭指示測(cè)量池轉(zhuǎn)子
(7)的旋轉(zhuǎn)方向。引用符號(hào)的列表
測(cè)量池1，2，3，4，5，6
測(cè)量池轉(zhuǎn)子7
用于接納樣品的第一室11，21，31，41，51，61用于捕集來(lái)自第一室的樣品的第二室12，22，32，42，52，62
分隔件13，23，33，43，53，63
用于細(xì)分第二室空間的裝置24，34，44，54
第二室的第一部分(捕集區(qū))221，321，421，521
第二室的第二部分(測(cè)量區(qū))222，322，422，522
電極25，35，45
樣品液體29，39，49，59
用于細(xì)分第二室空間的裝置的第一區(qū)段341
用于細(xì)分第二室空間的裝置的第二區(qū)段342
壁36
第二室的第三部分(溢流區(qū))523
開(kāi)口57
吸液孔68。
具體實(shí)施方案術(shù)語(yǔ)“凝血細(xì)胞”和“血小板”同義地使用。術(shù)語(yǔ)“含有血小板的液體樣品”應(yīng)當(dāng)理解為表示含有人或動(dòng)物血小板的液體樣品，更具體地，全血、富含血小板的血漿(PRP)或其它血小板制品。全血樣品優(yōu)選地是新采集的、靜脈的、抗凝化的人或動(dòng)物血液。優(yōu)選地，通過(guò)加入抗凝血藥，使全血抗凝化。下述藥劑適合用作抗凝血藥結(jié)合鈣的檸檬酸鹽緩沖溶液例如3. 2或3. 8%檸檬酸鈉緩沖溶液、EDTA、肝素，和天然的或合成的直接凝血酶抑制劑例如水蛭素、PPACK (D-Phe-Pro-Arg-氯甲基酮，HCl)阿加曲班和美拉加群,或天然的或合成的直接因子X(jué)a抑制劑例如antistasin、壁 風(fēng)抗凝肽、yagin、draculin、GGACK (H-Glu-Glu-Arg-氯甲基酮)、二脒基因子X(jué)a抑制劑和單苯甲脒因子X(jué)a抑制劑。術(shù)語(yǔ)“多孔分隔件”應(yīng)當(dāng)理解為表示這樣的分隔物其使所述第一室和第二室彼此完全分開(kāi)，且由允許單個(gè)血細(xì)胞穿過(guò)、但是阻止細(xì)胞團(tuán)塊(尤其是聚集的血小板的血小板聚集體)穿過(guò)的材料組成。為此，所述材料優(yōu)選地具有2-20 μ m、特別優(yōu)選5 μ m的孔尺度。此夕卜，所述分隔件未受損，即它不具有任何類(lèi)型的穿孔、切口或孔。所述多孔分隔件含有至少一種影響血小板活性的物質(zhì)，當(dāng)含有血小板的液體樣品接觸所述分隔件時(shí)，所述物質(zhì)可溶于所述液體樣品中。所述分隔件優(yōu)選地以膜的形式體現(xiàn)。優(yōu)選的材料是吸收液體的，所以影響血小板活性的物質(zhì)可以應(yīng)用于溶液中。特別優(yōu)選的材料是纖維素酯、陶瓷制品、尼龍、聚丙烯、聚醚砜和聚偏氟乙烯(PVDF)。優(yōu)選地干燥被希望的物質(zhì)潤(rùn)濕或浸濕的所述多孔分隔件。作為液體樣品與分隔件接觸的結(jié)果，所述物質(zhì)從所述分隔件溶解，并與含有血小板的樣品混合。術(shù)語(yǔ)“影響血小板活性的物質(zhì)”包括能夠誘導(dǎo)或抑制血小板聚集的物質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述多孔分隔件含有至少一種血小板活化劑，其優(yōu)選地來(lái)自下述組ADP (腺苷5’-二磷酸)2-MeSADP (2-甲硫基腺苷5’- 二磷酸)、膠原、腎上腺素、利托菌素、凝血酶、TRAP (凝血酶受體活化蛋白)、花生四烯酸、U46619 ((Z) _7_[ (1S，4R，5R, 6S) -5- [ (E, 3S) -3-輕基辛_1_烯基]-3-氧雜雙環(huán)[2. 2. I]庚燒_6_基]庚-5-烯酸)、PMA (佛波醇12-肉豆蘧酸酯13-乙酸酯)和血清素。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述多孔分隔件含有至少一種血小板抑制劑，其優(yōu)選地來(lái)自下述組前列腺素El (PGE I)、前列腺素12、福司柯林(forskolin)、伊洛前列素(iloprost)和西卡前列素(cicaprost)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在所述分隔件中可以含有來(lái)自血小板活化劑組和血小板抑制劑組的一種或多種物質(zhì)。作為實(shí)例，ADP和PGE I的組合特別適用于測(cè)定樣品中的血小板活性，所述樣品來(lái)自正在用來(lái)自P2Y(12)拮抗劑組的抗血栓治療劑(例如氯吡格雷或噻氯匹定)治療的患者。本領(lǐng)域技術(shù)人員知曉哪種物質(zhì)或物質(zhì)組合可以用于測(cè)定血小板活性。根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池優(yōu)選地是整體的，優(yōu)選圓柱形或圓錐形的中空體，其中可以以定制方式插入多孔分隔件，使得所述分隔件使所述第一室和第二室彼此完全分開(kāi)，即橫 過(guò)中空體的整個(gè)直徑。整體的中空體優(yōu)選地是具有大約ΙΟΟμ 至I Cm的內(nèi)徑的管。第一室用于接納含有血小板的液體樣品，并為此具有開(kāi)口。第二室用于捕集來(lái)自第一室的液體樣品，所述樣品在離心力作用于所述測(cè)量池的條件下穿過(guò)分隔件?；蛘撸鶕?jù)本發(fā)明的測(cè)量池可以是雙組件反應(yīng)器，其由第一中空體和第二中空體組成，所述第一中空體在一側(cè)開(kāi)口，并形成第二室，所述第二中空體在兩側(cè)開(kāi)口，并形成第一室。使雙中空體組件互連，使得第二組件的開(kāi)口安置在第一組件的一個(gè)開(kāi)口上。所述多孔分隔件要么精確地應(yīng)用在這2個(gè)組件之間，要么應(yīng)用在第一組件的一個(gè)開(kāi)口中或應(yīng)用在第二組件的朝向第一組件的開(kāi)口中。整體的反應(yīng)器或多組件反應(yīng)器的組件優(yōu)選地由透光材料組成，優(yōu)選地由塑料或玻璃組成。在第二室(從所述多孔分隔件看，其具有沿著其縱向軸線的近端一半和遠(yuǎn)端一半)的內(nèi)部，根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案具有這種的裝置所述裝置用于將第二室的空間細(xì)分成第一部分和第二部分。所述第一部分用于捕集和運(yùn)輸穿過(guò)分隔件的樣品液體。樣品液體從所述第二室的近端一半運(yùn)輸至遠(yuǎn)端。所述第二部分用于測(cè)量捕集在第二室中的樣品液體的液體量。所述第一部分和所述第二部分在所述第二室的遠(yuǎn)端一半中互連，使得捕集和運(yùn)輸?shù)臉悠芬后w可以從所述第一部分進(jìn)入所述第二部分。將第二室的空間細(xì)分成第一部分(捕集區(qū))和第二部分(測(cè)量區(qū))的優(yōu)點(diǎn)在于，在離心過(guò)程中穿過(guò)分隔件的樣品液體不以不受控的方式潤(rùn)濕整個(gè)第二室，所述不受控的方式可能導(dǎo)致第二測(cè)量室中填充水平或其它參數(shù)的測(cè)量失誤。將第二室的空間細(xì)分成第一部分(捕集區(qū))和第二部分(測(cè)量區(qū))確保樣品液體以靶向方式被捕集、收集和運(yùn)輸?shù)剿龅诙业倪h(yuǎn)端區(qū)，這確保在所述第二部分(測(cè)量區(qū))中的樣品液體從底部(遠(yuǎn)端)收集到在測(cè)量池尖部中的頂部(近端)。用于將第二室的空間細(xì)分成第一部分和第二部分的裝置可以具有不同的設(shè)計(jì)。在一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)施方案中，用于將第二室的空間細(xì)分成第一部分和第二部分的裝置可以具有這樣的平面所述平面相對(duì)于所述多孔分隔件成一定角度，或僅僅由具有成角的平面的連續(xù)斜面組成，所述成角的平面從近端延伸至所述第二室的遠(yuǎn)端一半。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用于將第二室的空間細(xì)分成第一部分和第二部分的裝置具有第一區(qū)段和第二部分區(qū)段，所述第一區(qū)段具有相對(duì)于所述多孔分隔件成一定角度的平面，所述第二部分區(qū)段接連(follow)所述第一部分區(qū)段，與限定第二室的空間的壁基本上平行地延伸，并與所述壁形成管狀結(jié)構(gòu)，所述管狀結(jié)構(gòu)延伸至所述第二室的遠(yuǎn)端一半。該實(shí)施方案的優(yōu)點(diǎn)在于，所述第二室的第一部分(捕集區(qū))被減小至第二室的空間的最小值，使得所述第二部分(測(cè)量區(qū))可以得到盡可能大的第二室空間。作為實(shí)例，其優(yōu)點(diǎn)在于，最大可能量的可利用面積被用于可能的測(cè)量裝置，所述測(cè)量裝置安置在測(cè)量池上。在另一個(gè)實(shí)施方案中，用于將第二室的空間細(xì)分成第一部分和第二部分的裝置具有漏斗樣形狀，漏斗樣裝置的管狀區(qū)域延伸至所述第二室的遠(yuǎn)端一半。具有用于將第二室的空間細(xì)分成第一部分和第二部分的裝置的測(cè)量池的一個(gè)實(shí)施方案可以設(shè)計(jì)成，使得所述第二室的第二部分(測(cè)量區(qū))具有用于電學(xué)地測(cè)量填充水平的裝置，優(yōu)選多個(gè)電極對(duì)。根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池的另一個(gè)實(shí)施方案具有將第二室的空間細(xì)分成第一部分、第二部分和第三部分的裝置。所述第一部分(捕集區(qū))用于捕集和運(yùn)輸樣品液體，所述樣品液體穿過(guò)分隔件，沿著所述第二室的縱向軸線，進(jìn)入近端一半的遠(yuǎn)端。所述第一部分連接至所述第二室的遠(yuǎn)端一半中的第二部分上，使得被捕集和運(yùn)輸?shù)臉悠芬后w可以從所述第一部分進(jìn)入所述第二部分。所述第二部分(測(cè)量區(qū))用于測(cè)量捕集在所述第二室中的樣品液體 的流速。所述第二部分(測(cè)量區(qū))具有毛細(xì)管的形式，所述毛細(xì)管在所述第二室的近端一半的方向從遠(yuǎn)端一半升起，且具有在它的末端處的開(kāi)口，所述開(kāi)口建立與第三部分的連接。所述第三部分(溢流區(qū))用作來(lái)自所述第二部分的樣品液體的溢流。測(cè)量池的該實(shí)施方案特別適用于基于測(cè)量樣品液體的流速來(lái)測(cè)定血小板功能。本發(fā)明的另一個(gè)主題涉及用于離心分析儀的裝置，所述裝置具有至少2個(gè)根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池。根據(jù)該實(shí)施方案，這樣的裝置可以具有最多100個(gè)測(cè)量池。這樣的裝置的優(yōu)點(diǎn)包括，能夠同時(shí)進(jìn)行許多血小板功能測(cè)定。在該過(guò)程中，可能同時(shí)地測(cè)定一個(gè)樣品的許多等分試樣或不同樣品的等分試樣。在它們的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)方面，或在用影響血小板活性的物質(zhì)包被分隔件方面，所述多個(gè)測(cè)量池可以是類(lèi)似的或不同的。用于離心分析儀的裝置的一個(gè)實(shí)施方案(其具有至少2個(gè)根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池)是圓盤(pán)，所述測(cè)量池以弧線和放射形式安置在所述圓盤(pán)上。在下文中，這樣的裝置也稱(chēng)作測(cè)量池轉(zhuǎn)子。在測(cè)量池轉(zhuǎn)子的一個(gè)特別的實(shí)施方案中，所述測(cè)量池沿著它們的縱向軸線不具有直線形狀，而是具有彎曲的形狀。其優(yōu)點(diǎn)在于，在測(cè)量池轉(zhuǎn)子旋轉(zhuǎn)過(guò)程中，恒定的流動(dòng)條件在測(cè)量池中占優(yōu)勢(shì)。至少含有分隔件的測(cè)量池區(qū)域優(yōu)選地具有比測(cè)量池的剩余區(qū)域更小的直徑。該區(qū)域優(yōu)選地具有大約50至500 μ m的直徑。根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池轉(zhuǎn)子可以由例如透光塑料組成，且/或由上部件和下部件裝配而成。在裝配好的測(cè)量池轉(zhuǎn)子中上部件和下部件的彼此相對(duì)的側(cè)面可以具有凹陷部和/或凸起部，它們隨后形成希望的測(cè)量池形狀。所述上部件含有每個(gè)測(cè)量池的吸液孔，穿過(guò)所述吸液孔，可以將樣品材料導(dǎo)入測(cè)量池的第一室中。在裝配上部件和下部件之前，可以將所述多孔分隔件單獨(dú)地插入作為單個(gè)單元的每個(gè)測(cè)量池中，或者可以將它以連續(xù)條的形式插入，所述連續(xù)條由合適的多孔材料制成，其同中心地安置在上部件和下部件之間，因而穿過(guò)轉(zhuǎn)子的所有測(cè)量池。用一種或多種影響血小板活性的物質(zhì)包被多孔材料可以發(fā)生在插入單獨(dú)的分隔件或連續(xù)條之前，或者可以在原位發(fā)生，即當(dāng)所述分隔件或所述條已經(jīng)連接至所述上部件或下部件上時(shí)。至少部分地由透光材料組成的測(cè)量池轉(zhuǎn)子使得測(cè)量在第二室中捕集的液體的量成為可能，或使得通過(guò)光度測(cè)定方法來(lái)測(cè)量樣品液體穿過(guò)分隔件的流速成為可能。為此，優(yōu)選地將一個(gè)或多個(gè)光源、優(yōu)選發(fā)光二極管(LED)安置在測(cè)量池轉(zhuǎn)子的上面，并優(yōu)選地將分別連接的光檢測(cè)器安置在測(cè)量池轉(zhuǎn)子的下面，或反之亦然，使得可以與旋轉(zhuǎn)平面垂直地穿過(guò)測(cè)量池的測(cè)量區(qū)發(fā)出光束。本發(fā)明的另一個(gè)主題是，用于測(cè)定血小板功能的方法，其中使用根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池或包含至少2個(gè)根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池的裝置。所述方法至少包括下述步驟
i.將含有血小板的液體樣品裝入根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池的第一室中， .將離心力施加于含有液體樣品的測(cè)量池上，
iii.測(cè)量在第二室中捕集的液體的量，或測(cè)量所述樣品液體穿過(guò)分隔件的流速。作為作用于其上面的離心力的結(jié)果從第一室穿過(guò)分隔件并被捕集在所述第二室中的液體量(或液體體積)與血小板功能負(fù)相關(guān)。
穿過(guò)分隔件并被捕集在所述第二室中的樣品液體的流速也與血小板功能負(fù)相關(guān)。隨著血小板聚集減少(作為降低的血小板功能的結(jié)果)和減少分隔件中孔的堵塞，在給定的時(shí)間間隔中可以穿過(guò)分隔件的樣品液體的量增加，因此流速或流量增加，在第二室中捕集的液體的量也增加。隨著血小板聚集增加(作為增強(qiáng)的血小板功能的結(jié)果)和增加分隔件中孔的堵塞，在給定的時(shí)間間隔中可以穿過(guò)分隔件的樣品液體的量減少，因此流速或流量減少，在第二室中捕集的液體的量也減少。根據(jù)本發(fā)明施加于測(cè)量池上的離心力優(yōu)選地在50_2000Xg范圍內(nèi)?？梢越柚诔Ｒ?guī)離心單元，施加離心力?？梢砸圆煌姆绞?，測(cè)量穿過(guò)分隔件并被捕集在第二室中的液體的量。在第一個(gè)實(shí)施方案中，光度測(cè)定地測(cè)定在第二室中捕集的液體的量。為此，在根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池中所述第二室的至少一個(gè)部分區(qū)段由透光材料組成。此外，許多光源(優(yōu)選發(fā)光二極管(LED))和分別連接的光檢測(cè)器沿著所述第二室的縱向軸線且垂直于根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池或根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池轉(zhuǎn)子的旋轉(zhuǎn)平面安置。在測(cè)量過(guò)程中，所述光源發(fā)射光，由分別分配給光源的檢測(cè)器測(cè)量光的強(qiáng)度I。如果樣品液體位于光源和檢測(cè)器之間，則光強(qiáng)度減小。吸光度E=-Iog (It/I0) (It =在時(shí)間t的光強(qiáng)度，I。=在時(shí)間O的光強(qiáng)度)與在光源和檢測(cè)器之間的吸光材料的量成比例。光源相對(duì)于所述第二室的縱向軸線的相對(duì)定位提供關(guān)于流過(guò)分隔件的樣品體積的說(shuō)明。光源/檢測(cè)器對(duì)的數(shù)目指示了不同體積的辨別。在最簡(jiǎn)單的情況下(n=3)，僅可能做出關(guān)于正常還是病態(tài)的數(shù)字說(shuō)明，當(dāng)n=6時(shí)，存在5種可能的體積辨別。確定在給定時(shí)點(diǎn)處的吸光度是大于指示閾值(光路中的樣品液體)還是小于該閾值(光路中的空氣)。在檢測(cè)器離容器底部的距離和容器中液體的量之間存在簡(jiǎn)單的關(guān)系。如果檢測(cè)器是在離具有半徑r的圓柱形容器的底部距離h處，大吸光度意味著容器中液體的最小量由r2 π h給出。測(cè)量隨時(shí)間變化的吸光度使得以時(shí)間依賴(lài)性的方式測(cè)定液體的量成為可能V = V(t)。通過(guò)相對(duì)于時(shí)間數(shù)學(xué)地微分化液體的總量(d/dt V(t))，測(cè)定時(shí)間依賴(lài)性的流速。在第二個(gè)實(shí)施方案中，電學(xué)地測(cè)定在第二室中捕集的液體的量。為此，在第二試驗(yàn)室上安置許多用于檢測(cè)填充水平的電極對(duì)，它們具有不同的長(zhǎng)度。隨著第二室中的液體體積增加，越來(lái)越多的電極接觸樣品液體。在電極離容器底部的距離和容器中液體的量之間存在簡(jiǎn)單的關(guān)系。電極的數(shù)目指示了不同體積的辨別。在最簡(jiǎn)單的情況下(n=3)，僅可能做出關(guān)于正常還是病態(tài)的數(shù)字說(shuō)明，當(dāng)n=6時(shí)，存在5種可能的體積辨別。在最簡(jiǎn)單的情況下，通過(guò)電導(dǎo)率進(jìn)行測(cè)量(歐姆測(cè)量法)。如果在電極之間存在空氣(所述電極之間存在工作電勢(shì))，則沒(méi)有電流流過(guò)，因?yàn)榭諝馐请娊^緣體。但是，隨著該室裝入樣品液體，電極之間的各個(gè)回路能夠因此閉合，因?yàn)檠夯蜓獫{是電學(xué)上有傳導(dǎo)性的(作為溶解的鹽的結(jié)果)。在第三個(gè)實(shí)施方案中，借助于激光多普勒測(cè)速法(LDA)，測(cè)定流速。為此，根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池的第二室的至少一個(gè)部分區(qū)段由透光材料組成。一個(gè)激光束被分成2束，這2束被定位，使得它們穿過(guò)所述第二室的區(qū)域。在所述束穿過(guò)的測(cè)量點(diǎn)處，建立干涉圖樣。檢測(cè)器測(cè)量由流動(dòng)的樣品液體生成的2個(gè)散射波。測(cè)量信號(hào)是2個(gè)散射波的疊加，結(jié)果，存在由多普勒效應(yīng)造成的搏動(dòng)，所述搏動(dòng)的頻率(多普勒頻率)與流動(dòng)的樣品液體的速度成比例?？梢栽诮o定的時(shí)間間隔內(nèi)連續(xù)地測(cè)量在第二室中捕集的液體的量。為此，測(cè)量穿過(guò)分隔件的時(shí)間依賴(lài)性的流動(dòng)。或者，可以在給定的時(shí)間測(cè)量在第二室中捕集的液體的量一次。作為實(shí)例，可以通過(guò)測(cè)定終點(diǎn)來(lái)進(jìn)行測(cè)量。為此，測(cè)定在特定時(shí)間時(shí)已經(jīng)穿過(guò)分隔件的液體的總量。優(yōu)選地，通過(guò)對(duì)比來(lái)自樣品的測(cè)量結(jié)果和含有已知血小板活性的一種或多種對(duì)照品的測(cè)量結(jié)果，測(cè)定未知樣品中的血小板功能。對(duì)照品/校準(zhǔn)品優(yōu)選地由來(lái)自健康人的血液/血漿捐獻(xiàn)物的集合組成。優(yōu)選地，從由來(lái)自該集合的樣品測(cè)定出的測(cè)量結(jié)果確定中值，并將來(lái)自未知樣品的測(cè)量結(jié)果與其建立關(guān)聯(lián)。因?yàn)榇┻^(guò)分隔件的樣品液體的量與血小板功能成反比，在所述第二室中捕集的液體量V的倒數(shù)(1/V)特別適合作為血小板功能的量度。如果未知樣品的倒數(shù)1/V低于預(yù)先建立的中值閾值，則樣品具有降低的血小板功能和出血風(fēng)險(xiǎn)。如果未知樣品的倒數(shù)1/V高于預(yù)先建立的中值閾值，則樣品具有增強(qiáng)的血小板功能和血栓形成風(fēng)險(xiǎn)。下面的示例性的實(shí)施方案用于例證根據(jù)本發(fā)明的方法，不應(yīng)解釋為限制性的。
實(shí)施例實(shí)施例I:根據(jù)本發(fā)明測(cè)定全血樣品中的血小板活性
如下生產(chǎn)根據(jù)本發(fā)明的測(cè)量池將圓錐形地形成的離心管(由透明塑料制成的50 mlFalcon管，Becton Dickson)從大致中間向上切掉。將具有PVDF膜的一次性使用的濾器附件(Millipore Millex -SV, 5 μ m孔尺度)連接至截?cái)嗟腇alcon管的開(kāi)口上。根據(jù)本發(fā)明，使用含有膠原和腎上腺素(各自0.5 mg/ml)的血小板活化劑混合物，預(yù)處理PVDF膜。為此，將O. 8 ml混合物放在Millipore Millex _SV—次性使用的濾器附件的上面，隨后風(fēng)干。作為對(duì)照，將O. 8 ml水放在Millipore Millex _SV—次性使用的濾器附件的上面，隨后風(fēng)干?，F(xiàn)在，將由塑料制成的一次性使用的注射器(Omnifix , 5 ml, B. BraunMelsungen AG)(沒(méi)有柱塞和注射針)連接至Millipore Millex _SV—次性使用的濾器附件上，后者連接至截?cái)嗟腇alcon管上?，F(xiàn)在，將I. 5 ml正常的檸檬酸鹽血液樣品導(dǎo)入測(cè)量池的第一室(一次性使用的注射器)中，在離心機(jī)(Rotixa R50, Andreas Hettich GmbH & Co. KG)中在 22°C在 50Xg離心測(cè)量池75秒。通過(guò)體積法測(cè)定在第二室(截?cái)嗟腇alcon管)中捕集的液體的量。
從表I可以看出，用血小板活化劑膠原和腎上腺素浸潰的分隔件的應(yīng)用導(dǎo)致減少的樣品液體流，這是由于在血液樣品中誘導(dǎo)的血小板聚集。表I
權(quán)利要求
1.一種用于測(cè)定血小板功能的測(cè)量池(1、2、3、4、5、6)，所述測(cè)量池包括 a.第一室(11、21、31、41、51、61)，所述第一室用于接納含有血小板的液體樣品， b.第二室(12、22、32、42、52、62)，所述第二室在離心力作用于所述測(cè)量池的條件下捕集來(lái)自第一室的液體樣品,和 c.多孔分隔件(13、23、33、43、53、63)，所述分隔件使所述第一室和所述第二室彼此分開(kāi)， 其特征在于， 所述分隔件(13、23、33、43、53、63)含有至少一種影響血小板活性的可溶物。
2.如在權(quán)利要求I中要求保護(hù)的測(cè)量池，其中所述至少一種影響血小板活性的可溶物是血小板活化劑，其優(yōu)選地來(lái)自下述組ADP、2-MeSADP、膠原、腎上腺素、利托菌素、凝血酶、TRAP、花生四烯酸、U46619、PMA和血清素。
3.如在權(quán)利要求I中要求保護(hù)的測(cè)量池，其中所述至少一種影響血小板活性的可溶物是血小板抑制劑，其優(yōu)選地來(lái)自下述組前列腺素E1、前列腺素12、福司柯林、伊洛前列素和西卡前列素。
4.如在前述權(quán)利要求之一中要求保護(hù)的測(cè)量池，其中所述分隔件另外含有氯化鈣離子。
5.如在前述權(quán)利要求之一中要求保護(hù)的測(cè)量池，其中所述分隔件(13、23、33、43、53、.63)具有2-20 μ m、優(yōu)選5 μ m的孔尺度。
6.如在前述權(quán)利要求之一中要求保護(hù)的測(cè)量池，其中所述第二室(12、22、32、42、52、.62)的至少一個(gè)部分區(qū)段由透光材料組成。
7.如在權(quán)利要求1-6之一中要求保護(hù)的測(cè)量池，其中在所述第二室(12、22、32、42、52、.62)上安置有許多用于電學(xué)地測(cè)量填充水平的電極對(duì)(25、35、45)。
8.如在權(quán)利要求1-7之一中要求保護(hù)的測(cè)量池(2、3、4、5)，其中從所述多孔分隔件開(kāi)始的所述第二室(22、32、42、52)沿著其縱向軸線具有近端一半和遠(yuǎn)端一半，具有在內(nèi)部的裝置(24、34、44、54)，所述裝置用于將第二室的空間細(xì)分成第一部分(221、321、421、521)和第二部分(222、322、422、522)， 其中所述第一部分用于捕集和運(yùn)輸穿過(guò)分隔件的樣品液體，且 其中所述第二部分用于測(cè)量捕集在第二室中的樣品液體的液體量，且 其中所述第一部分和所述第二部分在所述第二室的遠(yuǎn)端一半中互連，使得捕集和運(yùn)輸?shù)臉悠芬后w可以從所述第一部分進(jìn)入所述第二部分。
9.如在權(quán)利要求8中要求保護(hù)的測(cè)量池(2)，其中用于將第二室的空間(22)細(xì)分成第一部分(221)和第二部分(222)的裝置(24)具有這樣的平面所述平面相對(duì)于所述多孔分隔件成一定角度，并從近端延伸至所述第二室的遠(yuǎn)端一半。
10.如在權(quán)利要求8中要求保護(hù)的測(cè)量池(3)，其中用于將第二室的空間(32)細(xì)分成第一部分(321)和第二部分(322)的裝置(34)具有 第一區(qū)段(341)，所述第一區(qū)段具有相對(duì)于所述多孔分隔件成一定角度的平面，和 第二部分區(qū)段(342)，所述第二部分區(qū)段接連所述第一部分區(qū)段，與限定第二室的空間的壁(36)基本上平行地延伸，并與所述壁形成管狀結(jié)構(gòu)，所述管狀結(jié)構(gòu)延伸至所述第二室的遠(yuǎn)端一半。
11.如在權(quán)利要求8中要求保護(hù)的測(cè)量池(4)，其中用于將第二室的空間(42)細(xì)分成第一部分(421)和第二部分(422)的裝置(44)具有漏斗樣形狀，所述漏斗樣裝置的管狀區(qū)域延伸至所述第二室的遠(yuǎn)端一半。
12.如在權(quán)利要求8-11之一中要求保護(hù)的測(cè)量池(2、3、4)，其中用于測(cè)量捕集在第二室中的樣品液體的液體量的所述第二室的第二部分(222、322、422)具有用于電學(xué)地測(cè)量填充水平的裝置，優(yōu)選許多電極對(duì)(25、35、45)。
13.如在權(quán)利要求1-6之一中要求保護(hù)的測(cè)量池(5)，其中從所述多孔分隔件開(kāi)始的所述第二室(52)沿著其縱向軸線具有近端一半和遠(yuǎn)端一半，具有在內(nèi)部的裝置(54)，所述裝置用于將第二室的空間細(xì)分成第一部分(521)、第二部分(522)和第三部分(523)， 其中所述第一部分(521)用于捕集和運(yùn)輸穿過(guò)分隔件(53)的樣品液體，且其中所述樣品液體沿著所述第二室(52)的縱向軸線被運(yùn)輸至近端一半的遠(yuǎn)端，且其中所述第二部分(522)用于測(cè)量捕集在所述第二室(52)中的樣品液體(59)的流速，且 其中所述第三部分(523)用作來(lái)自所述第二部分(522)的樣品液體的溢流，且 其中所述第一部分(521)和所述第二部分(522)在所述第二室的遠(yuǎn)端一半中互連，使得捕集和運(yùn)輸?shù)臉悠芬后w可從所述第一部分進(jìn)入所述第二部分，且 其中所述第二部分(522)具有毛細(xì)管的形式，所述毛細(xì)管在所述第二室的近端一半的方向從遠(yuǎn)端一半升起，且具有在它的末端處的開(kāi)口(57)，所述開(kāi)口建立與第三部分(523)的連接。
14.一種用于同時(shí)測(cè)定多個(gè)樣品中的血小板功能的裝置(7)，其特征在于，它包括至少2個(gè)如在權(quán)利要求1-13之一中要求保護(hù)的測(cè)量池(6)。
15.一種用于測(cè)定血小板功能的方法，所述方法包括下述步驟 i.將含有血小板的液體樣品裝入如在權(quán)利要求1-13之一中要求保護(hù)的測(cè)量池的第一室中， .將離心力施加于含有液體樣品的測(cè)量池上， iii.測(cè)量在第二室中捕集的液體的量，或測(cè)量所述測(cè)量池的第二室中的樣品液體的流速， 其中所述捕集的液體的量和所述流速與血小板功能負(fù)相關(guān)。
16.如在權(quán)利要求15中要求保護(hù)的方法，其中通過(guò)光度測(cè)定裝置或電裝置測(cè)量在測(cè)量池的第二室中捕集的液體的量。
17.如在權(quán)利要求15中要求保護(hù)的方法，其中通過(guò)激光多普勒測(cè)速法測(cè)量在測(cè)量池的第二室中的樣品液體的流速。
18.如在權(quán)利要求15-17之一中要求保護(hù)的方法，其中在給定的時(shí)間間隔內(nèi)連續(xù)地測(cè)量所述在測(cè)量池的第二室中捕集的液體的量或所述流速。
19.如在權(quán)利要求15-17之一中要求保護(hù)的方法，其中在給定的時(shí)間測(cè)量所述在測(cè)量池的第二室中捕集的液體的量或所述流速一次。
20.如在權(quán)利要求15-19之一中要求保護(hù)的方法，其中在離心力作用于測(cè)量池時(shí)，測(cè)量所述在測(cè)量池的第二室中捕集的液體的量或所述流速。
21.如在權(quán)利要求15-20之一中要求保護(hù)的方法，其中所述施加于測(cè)量池的離心力是在50-2000 Xg范圍內(nèi)。
全文摘要
本發(fā)明涉及血小板功能診斷學(xué)領(lǐng)域，還涉及用于在離心分析儀中測(cè)定血小板功能的裝置和方法。本發(fā)明基于下述目的提供用于測(cè)定血小板功能的裝置和方法，其允許使用離心分析儀可靠地、簡(jiǎn)單地且快速地測(cè)定血小板功能。本發(fā)明的目的通過(guò)一種用于測(cè)定血小板功能的測(cè)量池實(shí)現(xiàn)，所述測(cè)量池包括下述組件a.第一室，所述第一室用于接納含有血小板的液體樣品，b.第二室，所述第二室在離心力作用于所述測(cè)量池的條件下捕集來(lái)自第一室的液體樣品，和c.多孔分隔件，所述分隔件使所述第一室和所述第二室彼此分開(kāi)，且其中所述分隔件含有至少一種影響血小板活性的可溶物。
文檔編號(hào)G01N1/40GK102759614SQ20121006813
公開(kāi)日2012年10月31日 申請(qǐng)日期2012年3月15日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月15日
發(fā)明者A.雷希納, J.恩德曼, N.燦德 申請(qǐng)人:西門(mén)子醫(yī)療診斷產(chǎn)品有限責(zé)任公司