專利名稱：一種檢測樣本中被分析物的溶液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于疾病診斷系統(tǒng)，特別的，本發(fā)明涉及一種用于檢測液體樣本中是否存在被分析物的溶液以及包括該溶液的檢測系統(tǒng)。
背景技術(shù)：
毒品檢測目前被大多數(shù)國家作為必要的常規(guī)檢測手段，特別是在入職、駕駛或查 毒過程中常常需要對人員進行測試。唾液作為一個對被檢測者沒有創(chuàng)傷的檢測越來越普及，而唾液中的被分析物質(zhì)，例如毒品濫用因為濃度小而不容易被檢測出，另外還存在一些毒品小分子，容易被收集樣本的器具所吸附，從而增加了檢測的難度，容易造成漏檢。這就需要提供一個更好的改進的方法對這些收集的樣本進行處理，以提高檢測的靈敏度，同時避免傳統(tǒng)技術(shù)中的一些缺陷。

發(fā)明內(nèi)容
為了更好的解決以上現(xiàn)有技術(shù)的問題，一方面，本發(fā)明提供一種用于檢測樣本中被分析物質(zhì)的溶液，包括環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物、起緩沖作用的緩沖系統(tǒng)。另一方面，本發(fā)明提供一種用于檢測樣本中是否存在被分析物質(zhì)的系統(tǒng)，包括含有環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物的溶液系統(tǒng)，和樣本收集器，其包括吸收樣本的部件。另一方面，本發(fā)明還提供一種檢測樣本中是否存在被分析物質(zhì)的方法，該方法包括用收集器收集液體樣本，讓含有環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物的溶液與收集器接觸病進行洗脫，檢測從收集器上洗脫下來的液體，獲得被分析物質(zhì)含量。其中檢測的方式可以用測試元件進行檢測。優(yōu)選的，以上所述的環(huán)糊精選自甲基環(huán)糊精、環(huán)糊精、α-環(huán)糊精、甲基環(huán)糊精、羥丙基環(huán)糊精、羥乙基環(huán)糊精、磺丁基環(huán)糊精、羧甲基-環(huán)糊精、麥芽糊精、吡羅昔康-β -環(huán)糊精、磺丁基醚-環(huán)糊精中的一種或幾種。更優(yōu)選的，所述的環(huán)糊精為甲基環(huán)糊精、β -環(huán)糊精、α -環(huán)糊精、甲基-β -環(huán)糊精中的一種或幾種。更優(yōu)選的，所述的環(huán)糊精的質(zhì)量百分比濃度至少為O. 02-5%。作為優(yōu)選的方案，所述的緩沖系統(tǒng)選自磷酸鹽、醋酸中的一種或幾種。優(yōu)選的，所述的溶液還包括抗四氫大麻酚或A9-THC的抗體。優(yōu)選的，抗體與生物素耦聯(lián)。優(yōu)選的，所述的溶液還包BSA，其中BSA與生物素耦聯(lián)。優(yōu)選的，吸收樣本的部件包括濾紙、無紡布或海綿。更優(yōu)選的，吸收樣本的部件為濾紙。另一方面，本發(fā)明還提供一種檢測樣本中被分析物質(zhì)的測試元件，該測試元件包括檢測區(qū)域，位于檢測區(qū)域上游的樣本施加區(qū)域；檢測區(qū)域包括被固定的一種特異結(jié)合分子，其中，在檢測區(qū)域的上游還包括以干的形式存在的環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物。其中檢測元件可以是檢測試紙條。優(yōu)選的，在測試元件中，讓液體樣本先與測試元件上的環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物接觸合適的時間形成混合液體，然后再讓混合液體流到檢測區(qū)域中。合適的時間可以是10秒-30分鐘，可以是1，2、3、4、5、6、10、15或20分鐘。優(yōu)選的，測試元件包括標(biāo)記區(qū)域，標(biāo)記區(qū)域位于樣本施加區(qū)域和檢測區(qū)域之間。更優(yōu)選的，標(biāo)記區(qū)域包括抗THC的抗體以及膠體金顆粒；檢測區(qū)域上固定的分子包括THC抗原或半抗原。優(yōu)選的，環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物位于樣本施加區(qū)域上。另一方面，本發(fā)明提供一種收集液體樣本的裝置，其中在收集裝置上包括以干的形式存在的環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物。優(yōu)選的，在該裝置中，讓液體樣本先與收集裝置上的環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物接觸并進行洗脫；然后測試洗脫液中被分析物質(zhì)的含量。另一方面，本發(fā)明提供一種檢測液體樣本中的方法，該方法包括讓液體樣本先和環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物接觸形成混合液體，然后再讓該混合液體被檢測，從而獲得檢測結(jié)果。其中所述的環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物存在緩沖液體中或以干的形式存在載體上。所述的載體包括濾紙、玻璃纖維素、無紡布等吸水性多孔載體上。有益效果通過本發(fā)明，可以提高毒品檢測的靈敏度，同時避免漏檢。


圖IA為本發(fā)明的一個具體實施方式
中檢測試紙條的立體結(jié)構(gòu)示意圖；圖IB為本發(fā)明的一個具體實施方式
中檢測試紙條的俯視結(jié)構(gòu)示意圖；附圖標(biāo)記說明檢測試紙條101 ;標(biāo)記片121，樣本接收片111，檢測片131，吸水片141 ;支撐片151 ;檢測線131 ;檢測結(jié)果控制線133。
具體實施例方式下面對本發(fā)明及的結(jié)構(gòu)或這些所使用的技術(shù)術(shù)語做進一步的說明。環(huán)糊精環(huán)糊精是從淀粉得到的六個以上D-卩比喃葡萄糖單元以alpha-1,4-糖苷鍵連結(jié)的具有環(huán)狀疏水圓錐型結(jié)構(gòu)(右上旋轉(zhuǎn)的環(huán)糊精模型)的低聚糖非還原性化合物系列。在這個環(huán)糊精系列中，它們的命名基于環(huán)中葡萄糖基的數(shù)量，以6個D-吡喃葡萄糖單元組成的環(huán)狀糊精，稱為α -環(huán)糊精(alpha-⑶)，以此類推，7個的稱為β -環(huán)糊精(beta-⑶)，8個的稱為Y _環(huán)糊精，(gamma-⑶)。以上這二種環(huán)糊精是最常用的，我們也稱以上這二種環(huán)糊精為基礎(chǔ)環(huán)糊精。經(jīng)過對這三種基礎(chǔ)環(huán)糊精進行化學(xué)修飾和改性之后，我們稱之為基礎(chǔ)環(huán)糊精的衍生物。也叫做環(huán)糊精的衍生物。Villiers在1891年的時候最先發(fā)現(xiàn)了環(huán)糊精，他從土豆淀粉中用芽胞桿菌通過培養(yǎng)基分離出一種晶狀的物質(zhì)(后來被稱為環(huán)糊精)?，F(xiàn)在，工業(yè)生產(chǎn)環(huán)糊精的細(xì)菌是使用一種天然的酶，環(huán)糊精葡萄糖轉(zhuǎn)移酶(CGTase)從兩端剪斷呈螺旋狀的淀粉后把它連接起來組成一個疏水的圓錐型環(huán)狀，由于剪出來的淀粉長度不同，這樣就產(chǎn)生了三種不同的環(huán)狀糊精。環(huán)糊精是淀粉經(jīng)環(huán)糊精葡萄糖基轉(zhuǎn)位酶作用后形成的一系列環(huán)狀寡聚糖，常用的分別是由6，7，8個葡萄糖分子構(gòu)成的a-環(huán)糊精，β-環(huán)糊精和Y —環(huán)糊精，其中又以β —環(huán)糊精的用途最廣目前。本發(fā)明中的溶液或體統(tǒng)中都可以包括以上環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生、物。在一些優(yōu)選的方式中，β —環(huán)糊精或以β —環(huán)糊精為基礎(chǔ)的衍生物被作為本發(fā)明中的成分使用，可以較好的減少取樣裝置上吸收樣本的部件對被分析物質(zhì)的吸附，例如對THC的吸附。例如，甲基-β -環(huán)糊精、羥丙基-β -環(huán)糊精、羥乙基-β -環(huán)糊精、磺丁基-β -環(huán)糊精、羧甲基-β -環(huán)糊精、吡羅昔康-環(huán)糊精、磺丁基醚-環(huán)糊精中的一種或幾種。更優(yōu)選的，所述的環(huán)糊精為甲基環(huán)糊精、β -環(huán)糊精、α -環(huán)糊精、甲基-β -環(huán)糊精。這些舉例只是有限的列舉，并不對本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。
作為以溶液存在的環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物，溶劑可以是水等任何可以讓其溶解、懸浮其中的試劑。在一些優(yōu)選的方式中，溶液中還包括一些起緩沖作用的試劑，例如磷酸、鹽酸、醋酸、Tris-鹽酸等等。以溶液形式存在的這樣的試劑可以更好的與樣本中被分析物質(zhì)接觸或讓被分析物質(zhì)從取樣載體上洗脫下來。取樣載體包括取樣器、取樣器中吸收樣本的部件可以使任何能夠保留樣本的載體，載體包括任何可以吸收液體樣本的多孔載體或非吸水載體。吸水多孔載體包括，例如海綿、棉花、濾紙、無紡布；或者非吸水載體包括塑料、玻璃等。環(huán)糊精的濃度選擇也是另外一個因素，可以根據(jù)不同的種類選擇不同的濃度，例如占洗脫液重量百分比為O. 05-5%，0. 2-3% ；0. 2-2. 5% ;0. 2_2。0% ;例如，當(dāng)選擇的環(huán)糊精為甲基-β -環(huán)糊精的時候，洗脫液中甲基-β -環(huán)糊精的濃度為O. 2-5%,優(yōu)選的為O. 2-3%，例如為 O. 1%,0. 5%,O. 25%,O. 6%,O. 8% ；2. 5% ；3. 0%等。以上的實施方式特別適用洗脫收集器對THC的吸附。當(dāng)然如果針對其他的被分析物質(zhì)的時候，可以通過一些簡單的試驗確定使用環(huán)糊精的種類以及不同種類需要的濃度，這是本領(lǐng)域的一般技術(shù)人員通過閱讀本發(fā)明容易想到的，而且通過有限次試驗可以確認(rèn)的。當(dāng)環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物以溶液(又稱為洗脫液)存在的時候，提供一種方法，先讓樣本與洗脫溶液接觸或讓帶有樣本的收集器與洗脫溶液接觸并進行洗脫，然后對從收集器洗脫的溶液進行測試，從而獲得測試結(jié)果。測試包括用測試元件進行測試，也包括用液相色譜、氣相色譜或質(zhì)普儀器進行測試。洗脫的方式可以是讓含有環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物的溶液直接與收集器接觸一段時間，也可以讓收集器在洗脫溶液中反復(fù)擠壓，漂洗，或者讓洗脫溶液沖洗收集器合適的時間等等。在另一方面，以上的這些環(huán)糊精不僅可以以溶液的形式存在，還可以直接處理在檢測裝置上并以干的形式存在，例如一些測試元件上并以干的形式存在，測試元件包括檢測試紙條，例如硝酸纖維素膜上。例如，把環(huán)糊精配置成溶液，然后在測試元件的樣本施加區(qū)域上處理一定體積的糊精溶液，然后烘干。在進行測試的時候，先讓液體樣本與測試元見上處理有環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物的溶液的區(qū)域接觸形成混合液體，然后再讓混合液體流到測試元見的檢測區(qū)域上。經(jīng)過我們的試驗發(fā)現(xiàn)，這樣的方式也可以減少樣本施加區(qū)域因為材質(zhì)的不同而對一些小分子物質(zhì)的吸附，例如對THC分子的吸附。因此，本發(fā)明提供一種測試元件，包括位于測試區(qū)域上游的樣本施加區(qū)域；檢測區(qū)域，其包括固定在檢測區(qū)域的特異結(jié)合分子；其中，在檢測區(qū)域的上游包括以干的狀態(tài)存在的環(huán)糊精分子或其衍生物。另一方面，本發(fā)明還提供一種收集液體樣本的裝置，其中，該裝置包括以干的狀態(tài)存在的環(huán)糊精分子或其衍生物。這種收集裝置包括以海綿頭，濾紙等材料組成的吸收液體樣本的部件，在這些吸收樣本的部件上包括環(huán)糊精分子或其衍生物。上述闡述的環(huán)糊精的不同種類和濃度都可以被包括在此一些具體的實施方式中。
樣本任何類型的樣本都能夠用本發(fā)明的裝置進行試驗，包括體液(例如，尿液和其它體液，以及臨床樣本)。液體樣本可能源自固體的或者半固體的樣本，包括糞，生物組織和食物樣本。這些固體的和半固體的樣本可以通過任何適合的方法轉(zhuǎn)變成液體樣本，例如在一種適當(dāng)?shù)囊后w中混合，跺碎，浸軟，孵育，溶解或者酶解固體樣本(例如，水，磷酸鹽緩沖液或者其它緩沖液)。“生物樣本”包括源自活的動物、植物和食物的樣本，也包括尿液、唾液、血液和血液成分、腦脊液、陰道拭子，精液、糞便、汗液、分泌物、組織、器官、腫瘤、組織和器官的培養(yǎng)物，細(xì)胞培養(yǎng)物和那里的條件介質(zhì)，不管是人的還是動物的。食物樣本包括加工過的食物成分和最后的產(chǎn)品，肉，奶酪，酒，牛奶和飲用水。植物樣本包括源自任何植物、植物組織、植物細(xì)胞培養(yǎng)物和那里的條件介質(zhì)的樣本?！碍h(huán)境樣本”是那些源自環(huán)境的樣本(例如，湖水樣本或者其它水體的樣本，污水樣本，土壤樣本，地下水樣本，海水樣本，廢物廢水的樣本)。污水和相關(guān)的廢物也可以包含在環(huán)境樣本中。被分析物用本發(fā)明可以分析任何被分析物質(zhì)。能夠用本發(fā)明穩(wěn)定檢測的被分析物的例子包括(但是不僅僅包括)人絨毛膜促性腺激素(hCG)，黃體生成素(LH)，卵巢刺激素(FSH)，丙肝病毒(HCV)，乙肝病毒(HBV)，乙肝表面抗原，艾滋病病毒和任何濫用的藥物。被分析物能夠在任何的液體或者液化樣本中檢測到，例如尿液，唾液，口水，血液，血漿，或者血清。其它的被分析物的例子還有肌氨酐酸，膽紅素，亞硝酸鹽，蛋白質(zhì)(非特異性的)，血液，白細(xì)胞，血糖，重金屬和毒素，細(xì)菌成分(例如，特定類型的細(xì)菌的特殊的蛋白質(zhì)和糖分，例如大腸桿菌0157: H7，金黃色葡萄球菌，沙門氏菌，產(chǎn)氣莢膜梭菌，彎曲桿菌，單核增生李斯特菌，腸炎弧菌，或者臘狀芽孢桿菌)。任何其它的適合側(cè)流試驗形式的被分析物都可以用本裝置檢測。被分析物還可以是有傳染性物質(zhì)或可提示感染期的物質(zhì)。被分析物可以是藥品(如濫用藥物)，激素，蛋白，核酸分子，病原體。“濫用藥物”(DOA)是指非醫(yī)學(xué)目的地使用藥品(通常起麻痹神經(jīng)的作用)。濫用這些藥物會導(dǎo)致身體和精神受到損害，產(chǎn)生依賴性、上癮并且/或者死亡。藥物濫用的例子包括可卡因；安非他明(例如，黑美人、白色安非他命藥片、右旋安非他命、右旋苯異丙胺藥片、Beans);甲基苯丙胺(crank、甲安菲他明、crystal,speed);巴比妥酸鹽(如Valium , Roche Pharmaceuticals, Nutley, New Jersey);鎮(zhèn)靜劑(即睡覺輔助藥品);麥角酸酰二乙胺(LSD);抑制劑(downers, goofballs, barbs, bluedevils, yellow jackets,安眠酮)；三環(huán)類抗抗抑郁劑(TCA,即丙咪嗪、阿密曲替林和多慮平);苯環(huán)己哌唆(PCP);四氫大麻醇(THC、pot, dope, hash, weed,等。)、Δ 9-THC ;鴉片制劑(即嗎啡、鴉片、可待因、海洛因，羥二氫可待因酮)以及他們在動物體內(nèi)的代謝產(chǎn)物。使用該檢測試紙條也可以用于屬于醫(yī)學(xué)用途但又容易服藥過量的檢測，如三環(huán)類抗抑郁藥(丙米嗪或類似物)和乙酰氨基酚。測試元件測試元件可以選用橫向流動的檢測試紙條，它可檢測多種被分析物。當(dāng)然，其他合適的測試元件也可以運用在本發(fā)明。各種測試元件可以被組合在一起運用到本發(fā)明中。一種形式是檢測試紙。用于分析樣本中的被分析物(如毒品或表明身體狀況的代謝物)的檢測試紙可以是各種形式，如免疫測定或化學(xué)分析的形式。檢測試紙可以采用非競爭法或競爭法的分析模式。檢測試紙一般包含一具有樣本加樣區(qū)的吸水材料，試劑區(qū)和測試區(qū)。加樣本至樣本加樣區(qū)，通過毛細(xì)管作用流到試劑區(qū)。在試劑區(qū)，如果存在被分析物，樣本與試劑結(jié)合。然后樣本繼續(xù)流動到檢測區(qū)。另一些試劑，如與被分析物特異性結(jié)合的分子被固定在檢測區(qū)。這些試劑與樣本中的被分析物(如果存在)反應(yīng)并將被分析物結(jié)合在該區(qū)，或者與試劑區(qū)的某一個試劑結(jié)合。用于顯示檢測信號的標(biāo)記物存在與試劑區(qū)或分離的標(biāo)記區(qū)。典型的非競爭法分析模式是如果樣本中含有被分析物，信號就會產(chǎn)生，如果不包含被分析物，就不產(chǎn)生信號。在競爭法中，如果被分析物不存在于樣本中，信號產(chǎn)生，如果存在被分析物，則不產(chǎn)生信號。測試元件也可以是檢測試紙，可以選用吸水或非吸水的材料。檢測試紙可包括多種材料用于液體樣本傳遞。其中一種檢測試紙的材料可覆蓋在另一種材料上，如濾紙覆蓋在硝酸纖維素膜上。檢測試紙的一個區(qū)可以選用一種或多種材料，而另一區(qū)選用其他不同的一種或多種材料。檢測試紙可以被黏附在某種支持物或者硬質(zhì)表面用于提高拿捏檢測試紙的強度。被分析物通過信號發(fā)生系統(tǒng)而被檢測到，如利用與本分析物發(fā)生特異性反應(yīng)的一種或多種酶，利用如前述將特異結(jié)合物質(zhì)固定在檢測試紙上的方法，將一種或多種信號發(fā)生系統(tǒng)的組合物固定在檢測試紙的被分析物檢測區(qū)。產(chǎn)生信號的物質(zhì)可在加樣區(qū)，試劑區(qū)，或檢測區(qū)，或整個檢測試紙上，該物質(zhì)可以充滿檢測試紙的一種或多種材料上。將含有信號物的溶液加到試紙的表面或?qū)⒃嚰埖囊环N或多種材料浸沒在含信號物的溶液中。使加入含信號物溶液的試紙干燥。檢測試紙的各個區(qū)可以按以下方式排列加樣區(qū)，試劑區(qū)，檢測區(qū)?；蛴斜匾€可以包括控制區(qū)，以及確定樣本是否摻假的區(qū)域，液體樣本吸收區(qū)。控制區(qū)位于檢測區(qū)之后。所有的區(qū)可以被安排在只用一種材料的一條試紙上。也可是不同區(qū)采用不同的材料。各個區(qū)可以直接和液體樣本接觸，或不同的區(qū)依據(jù)液體樣本流動的方向排列，將各區(qū)的末端與另一區(qū)的前端相連并交疊。所用的材料可以是吸水性較好的材料如濾紙，玻纖或者硝酸纖維素膜等。檢測試紙也可以采用其他形式。用于所公開的測試元件可以為現(xiàn)有技術(shù)中任何已知的測試元件，這樣的測試元件包括但是不局限于現(xiàn)有技術(shù)中所熟知的免疫測定，化學(xué)測定和酶的試驗，例如但不局限于，單一抗體免疫測定，多種抗體免疫測定，復(fù)合免疫測定，對比的免疫測定，非對比的免疫測定等等，包括利用辣根過氧化酶，堿性磷酸酶，熒光素酶，抗體配對，抗體片斷，熒光標(biāo)記抗體，改性抗體，標(biāo)記抗體，膠體金顆粒的抗體，或以著色乳膠體顆粒標(biāo)記的抗體等等，它們都是現(xiàn)有技術(shù)中所熟知的?？梢詺w入本裝置的一些測試元件的實例可以在下面的美國專利中找到US 4857453 ；US 5073484 ；US 5119831 ；US 5185127 ；US 5275785 ；US5416000 ；US5424193 ；US 5504013 ；US 5602040 ；US 5622871 ；US 5654162 ；US 5656503 ；US5686315 ；US 5766961 ；US 5770460 ；US 5916815 ；US 5976895 ；US 6248598 ；US 6140136 ；US 6187269 ；US 6187598 ；US 622 8660 ；US 6235241 ；US 6306642 ；US 6352862 ；US6372515 ；US 6379620 ；US 6403383 ；US6656744 ；US6979576 ；US6372513 ；US 6372513。更進一步地，可以歸入本裝置的一些測試元件的實例可以在下面的美國專利申請中找到序列號為 09/579672 ；09/579673 ；09/653032 ；60/233739 ;09/915494，10/211199 和 09/860408。撿濕
檢測表示化驗或測試一種物質(zhì)或材料是否存在，比如，但并不限于此，化學(xué)物質(zhì)、有機化合物、無機化合物、新陳代謝產(chǎn)物、藥物或者藥物代謝物、有機組織或有機組織的代謝物、核酸、蛋白質(zhì)或聚合物。另外，檢測表示測試物質(zhì)或材料的數(shù)量。進一步說，化驗還表示免疫檢測，化學(xué)檢測、酶檢測等。實施例為了更清楚的闡述本發(fā)明如何實現(xiàn)，現(xiàn)在以有限的實驗進行說明，這些說明僅在本發(fā)明的權(quán)利要求的精髓下做有限的舉例，并不構(gòu)成對本發(fā)明權(quán)利要求的限制。沒有特別指明，本發(fā)明所用的百分比均為質(zhì)量百分比。
實施I :緩沖液中存在甲某-β-環(huán)糊精(RMCD)與不存在甲某-β-環(huán)糊精(RMCD)對檢測唾液中大麻原型的比較。材料唾液收集器-40個海綿棒，40條檢測試紙均為本公司自行生產(chǎn)，選取同一批號的產(chǎn)品；基礎(chǔ)緩沖液體磷酸緩沖溶液(PH = 8. 3);比色卡。步驟I.配置100ng/ml A9-THC陽性大麻原型標(biāo)準(zhǔn)品2.向20個唾液收集器上的每個加3毫升100ng/ml Λ 9-THC的陽性大麻原型(或大麻酹)標(biāo)準(zhǔn)品溶液；3.用基礎(chǔ)緩沖液配置成表I中A，B兩種不同的緩沖液體，然后把這些緩沖液分別盛裝在10個玻璃瓶內(nèi)，每個玻璃瓶盛裝3毫升緩沖溶液，然后把唾液收集器插入到這些玻璃瓶中，讓玻璃瓶里的緩沖液體盡量淹沒吸收液體的海綿體，然后來回擠壓10次左右，丟棄唾液收集器，分別得到洗脫液體共20份(A處理10份；B處理10份)；4.另外用3毫升的基礎(chǔ)緩沖液與3毫升100ng/ml Δ 9-THC陽性大麻原型標(biāo)準(zhǔn)品混合得到C處理10份；另外用3毫升的含I % RMCD的基礎(chǔ)緩沖液與3毫升100ng/ml Δ 9-THC陽性大麻原型標(biāo)準(zhǔn)品混合得到D處理10份；5.把收集的以上四中液體各自滴加100微升到檢測試紙的樣本施加區(qū)域，每個處理10個檢測試紙條；10分鐘后用肉眼觀察檢測區(qū)是否有線條出現(xiàn)，并用標(biāo)準(zhǔn)的色卡(表2)來比較檢測線條的顏色深淺程度。并與標(biāo)準(zhǔn)的色卡進行比較來判讀檢測結(jié)果(“ + ”表示陽性，表示陰性)。6.檢測試紙條的準(zhǔn)備按照如下方法準(zhǔn)備如圖IA所示的試劑條101用來說明本實驗所用本發(fā)明的試劑條的部件和制作方法。6. I.硝酸纖維素膜的處理。檢測片131為硝酸纖維素膜(NC)，在硝酸纖維素膜上有兩條線條，一個是檢測線207，位于檢測線下游的檢測結(jié)果控制線206。在檢測線132上固定連接有IgG的鏈霉親和素(streptavidin-IgG);在檢測結(jié)果控制線133上固定羊抗兔IgG。固定的方法可以用自動噴膜處理機器來自動處理，其中在處理檢測線條的濃度為O. 3毫克/毫升，稀釋緩沖液體為磷酸緩沖液(PBS);在檢測結(jié)果控制線上固定羊抗兔IgG抗體；濃度為O. 3毫克/毫升，稀釋緩沖液體為磷酸緩沖液(PBS)。把處理好的硝酸纖維素膜放在37°C烘箱里烘干即可。6. 2標(biāo)記片121的處理。標(biāo)記片為聚脂膜，被膠體金顆粒標(biāo)記好的帶有耦聯(lián)蛋白分子BSA的THC半抗原被處理在聚脂膜上。處理溶液的OD值為75，稀釋溶液為I倍PBS緩沖溶液，其中還含有1%的BSA。在標(biāo)記片上還處理有膠體金標(biāo)記的兔IgG抗體。把處理好的標(biāo)記片放在37°C烘箱里烘干即可。6. 3樣本接受片111的處理。樣本接受片為玻璃纖維素膜，在該膜上處理的溶液為=Borax(O. 07M/L) ；Tween20(l% ) ；Cholic Acid(l% ) ；Tris (O. 1M)。把處理好的樣本接受片放在37°C烘箱里烘干即可。6.4.試劑條的組裝。把處理好的各個部件按照圖IB所示的樣子組裝，讓樣本接受片位于標(biāo)記片的上游，標(biāo)記片位于檢測片和樣本接受片之間，在檢測片的下游放置吸水的濾紙。這些部件都放置在一個非吸水性的支撐片上。測試結(jié)果如下表I表I，含有環(huán)糊精與不含環(huán)糊精對被分析物THC吸附效果的影響
權(quán)利要求
1.一種用于檢測樣本中是否存在被分析物質(zhì)的溶液，包括環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物、起緩沖作用的緩沖系統(tǒng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的溶液，其中，所述的環(huán)糊精選自a_環(huán)糊精，￠-環(huán)糊精和Y-環(huán)糊精中的一種或幾種。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的溶液，其中，所述的環(huán)糊精為￠-環(huán)糊精。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的溶液，其中，所述的￠-環(huán)糊精為甲基-￠-環(huán)糊精、羥丙基-￠-環(huán)糊精、羥乙基-￠-環(huán)糊精、磺丁基-￠-環(huán)糊精、羧甲基-￠-環(huán)糊精、吡羅昔康-P -環(huán)糊精、磺丁基醚-P -環(huán)糊精中的一種或幾種。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的溶液，其中，所述的緩沖系統(tǒng)選自磷酸鹽、醋酸，Tris-鹽酸中的一種或幾種。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的溶液，其中，所述的溶液還包括抗四氫大麻酚或A9-THC的抗體，其中抗體與生物素耦聯(lián)。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的溶液，其中，所述的溶液還包括BSA，其中BSA與生物素耦聯(lián)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7之一所述的溶液，其中，所述的環(huán)糊精的質(zhì)量百分比濃度為0.2-5%。
9.一種用于檢測樣本中是否存在被分析物質(zhì)的系統(tǒng)，包括包括有環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物的溶液系統(tǒng),和包括樣本收集器,其包括吸收樣本的部件。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的系統(tǒng)，其中，吸收樣本的部件包括濾紙、無紡布或海綿。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的系統(tǒng),其中，吸收樣本的部件為濾紙。
12.根據(jù)權(quán)利要求9所述的系統(tǒng)，其中，所述的溶液還包括抗四氫大麻酚或A9-THC的抗體，其中抗體與生物素耦聯(lián)。
13.根據(jù)權(quán)利要求9所述的系統(tǒng)，其中，所述的溶液還包BSA，其中BSA與生物素耦聯(lián)。
14.根據(jù)權(quán)利要求9所述的系統(tǒng)，其中，所述的環(huán)糊精的質(zhì)量百分比濃度至少為0.2-5%。
15.根據(jù)權(quán)利要求9所述的系統(tǒng)，其中，所述的環(huán)糊精為￠-環(huán)糊精、a-環(huán)糊精和Y-環(huán)糊精的一種或幾種。
16.一種用于檢測樣本中是否存在被分析物質(zhì)的檢測試紙，其中該試紙包括檢測區(qū)域，以及位于檢測區(qū)域上游并以干的形式存在的環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物。
17.一種用于檢測樣本中是否存在被分析物質(zhì)的方法，包括用收集器收集液體樣本；讓含有環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物的溶液洗脫該收集器；測試洗脫液中的被分析物質(zhì)。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中，用測試元件測試洗脫液中的被分析物質(zhì)。
全文摘要
本發(fā)明提供一種用于檢測樣本中是否存在被分析物質(zhì)的溶液，包括環(huán)糊精或環(huán)糊精的衍生物、起緩沖作用的緩沖系統(tǒng)。利用該溶液可以提高毒品檢測的靈敏度，特別是針對THC的檢測，提高靈敏度的效果更明顯。
文檔編號G01N33/68GK102636376SQ20121007386
公開日2012年8月15日 申請日期2012年3月20日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月20日
發(fā)明者伍欣, 吳銀飛, 趙福銓, 陳杰 申請人:艾博生物醫(yī)藥(杭州)有限公司