專利名稱：中藥組合物制劑中紅景天、甘草含量測定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥復(fù)方制劑的含量測定方法，特別涉及一種中藥組合物制劑中紅景天、甘草含量測定方法，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
景天清肺膠囊收載于中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)部分，標(biāo)準(zhǔn)編號 WS-10866 (ZD-0866)-2002。景天清肺膠囊是由如下重量配比的藥材制成的紅景天150g、 石灰華150g、桔梗100g、甘草100g，以上四味，粉碎成細(xì)粉，混勻，裝入膠囊，即得。具有清熱利肺，祛痰止咳等作用。用于痰熱阻肺所致咳嗽痰多，及慢性支氣管炎有很好的療效，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于臨床?，F(xiàn)在市面銷售產(chǎn)品主要為景天清肺膠囊(青海金訶格薩爾王藏藥制藥有限責(zé)任公司)及景天清肺丸(青海金訶格薩爾王藏藥制藥有限責(zé)任公司)兩種。景天清肺膠囊的藥物療效已經(jīng)得到臨床的肯定，但藥物的療效只有在質(zhì)量可控的前提下才能得到保證，藥物原有的質(zhì)量控制方法極其簡單粗糙，根本不能全面準(zhǔn)確的反映和控制該復(fù)方制劑的質(zhì)量。原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中對紅景天中紅景天苷進(jìn)行了控制，但僅對其中一味藥材進(jìn)行了質(zhì)量控制，難以保證藥物的安全性及有效性。如果再增加甘草的含量測定，但需繁瑣操作，影響分析速度。專利炮天紅養(yǎng)身酒中葛根素和紅景天苷的含量檢測方法(CN101441201)提供了炮天紅養(yǎng)身酒中紅景天苷的含量檢測方法。專利一種通脈養(yǎng)心丸的質(zhì)量控制方法 (CN101396519)公開了通脈養(yǎng)心丸的質(zhì)量控制方法，所述方法包括對內(nèi)容物制何首烏、五味子進(jìn)行鑒別，根據(jù)藥典的方法對內(nèi)容物進(jìn)行檢查，同時對含有的甘草進(jìn)行含量測定。目前沒有對制劑中紅景天和甘草的同時進(jìn)行含量測定的方法。

發(fā)明內(nèi)容
針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的是提供一種中藥組合物制劑中紅景天、甘草含量測定方法。發(fā)明概述本發(fā)明使用一個色譜條件同時對含有紅景天和甘草的中藥組合物制劑中紅景天、 甘草進(jìn)行了質(zhì)量控制，操作簡便，分析數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。既節(jié)省了分析人員的分析時間，提高了工作效率，同時又提高了制劑的安全性、有效性及可控性。術(shù)語說明景天清肺膠囊是國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編(中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)部分)記載的藥品名稱。標(biāo)準(zhǔn)編號WS-10866(ZD-0866)-2002。景天清肺丸是國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編(中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)部分)記載的藥品名稱。標(biāo)準(zhǔn)編號YBZ03012006。利舒康膠囊是國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編(中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)部分)記載的藥品名稱。標(biāo)準(zhǔn)編號WS-10677(ZD-0677)-2002。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種中藥組合物制劑中紅景天、甘草含量測定方法，步驟如下照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以體積份數(shù)比0. 2 %磷酸溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式 Omin — IOmin — 35min — 40min — 45min,乙臆8% — — 50%— 100%— 8% ;體積份數(shù)比O. 2%磷酸溶液92%— 92%- 50%- 0%- 92%，檢測波長為215nm_235nm ;理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于3000 ；對照品溶液的制備取紅景天苷對照品、甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加體積百分比60% -70%乙醇制成每Iml含紅景天苷、甘草酸銨各80 μ g的混合溶液，即得；供試品溶液的制備將含有紅景天和甘草的中藥組合物制劑研細(xì)后，取粉末
O.5g，置具塞的錐形瓶中，加入體積百分比60-70 %乙醇50ml，稱定重量，密塞，超聲處理 30min-40min，放冷，再稱定重量，用60% -70 %乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。所述的含有紅景天和甘草的中藥組合物制劑是指含有紅景天和甘草的組合物原料藥，按常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料制備成臨床可接受的任何一種劑型，包括膠囊劑、丸劑、微丸、滴丸、片劑、軟膠囊、顆粒、口服液。所述的梯度洗脫方式為梯度性地改變洗脫液的組分(成分、離子強(qiáng)度等)或pH，以期將層析柱上不同的組分在合理的時間內(nèi)洗脫出來的方法。根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，一種原料藥組成為紅景天150重量份、石灰華150重量份、桔梗100重量份、甘草100重量份的中藥組合物景天清肺膠囊中紅景天、甘草含量測定方法， 步驟如下照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以體積份數(shù)比0. 2 %磷酸溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式 Omin — IOmin — 35min — 40min — 45min,乙臆8% — — 50%— 100%— 8% ;體積份數(shù)比O. 2%磷酸溶液92%— 92%- 50%- 0%- 92% ;檢測波長為225nm ;理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于3000 ；對照品溶液的制備取紅景天苷對照品、甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加體積百分比70%乙醇制成每Iml含紅景天苷、甘草酸銨各80 μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備將中藥組合物景天清肺膠囊內(nèi)容物研細(xì)后，取粉末O. 5g， 精密稱定置具塞的錐形瓶中，加入體積百分比70 %乙醇50ml，稱定重量，密塞，超聲處理 30min，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得；中藥組合物景天清肺膠囊中紅景天含量以紅景天苷計，不得少于O. 33mg/g ;甘草含量以甘草酸計，不得少于3. 3mg/g。
根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，一種原料藥組成為紅景天150重量份、石灰華150重量份、桔梗100重量份、甘草100重量份的中藥組合物景天清肺丸中紅景天、甘草含量測定方法，步驟如下照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以體積份數(shù)比0. 2 %磷酸溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式 Omin — IOmin — 35min — 40min — 45min,乙臆8% — — 50%— 100%— 8% ;體積份數(shù)比O. 2%磷酸溶液92%— 92%- 50%- 0%- 92% ;檢測波長為225nm ;理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于3000 ；對照品溶液的制備取紅景天苷對照品、甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加體積百分比70%乙醇制成每Iml含紅景天苷、甘草酸銨各80 μ g的混合溶液，即得；供試品溶液的制備將中藥組合物景天清肺丸研細(xì)后，取粉末O. 5g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，加入體積百分比70%乙醇50ml，稱定重量，密塞，超聲處理30min，放冷， 再稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得；中藥組合物景天清肺丸中紅景天含量以紅景天苷計,不得少于O. 34mg/g ;甘草含量以甘草酸計，不得少于3. 4mg/g。根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，一種原料藥組成為手參540重量份、甘青青蘭540重量份、紅景天256重量份、烈香杜鵑370重量份、黃柏296重量份、甘草370重量份的中藥組合物利舒康膠囊中紅景天、甘草含量測定方法，步驟如下照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以體積份數(shù)比0. 2 %磷酸溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式 Omin — IOmin — 35min — 40min — 45min,乙臆8% — — 50%— 100%— 8% ;體積份數(shù)比O. 2%磷酸溶液92%— 92%- 50%- 0%- 92% ;檢測波長為225nm ;理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于3000 ；對照品溶液的制備取紅景天苷對照品、甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加體積百分比70%乙醇制成每Iml含紅景天苷、甘草酸銨各80 μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備將中藥組合物利舒康膠囊內(nèi)容物研細(xì)后，取粉末O. 5g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，加入體積百分比70%乙醇50ml，稱定重量，密塞，超聲處理 30min，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得；中藥組合物利舒康膠囊中紅景天含量以紅景天苷計，不得少于O. 33mg/g，甘草含量以甘草酸計，不得少于2. 3mg/g。本說明書中所述的重量份與體積份的單位對應(yīng)關(guān)系為g/ml或kg/1。本發(fā)明使用一個色譜條件同時對含有紅景天和甘草的中藥組合物制劑中的紅景天及甘草進(jìn)行了質(zhì)量控制，操作簡便，分析數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。既節(jié)省了分析人員的分析時間，提高了工作效率，延長了色譜柱的使用壽命，降低了成本，同時保證了制劑的穩(wěn)定性，提高了可控性。例如中藥組合物景天清肺膠囊原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項下只有紅景天的含量測定方法。不能有效的檢測其他主要成分的含量。本發(fā)明對現(xiàn)有的景天清肺膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了相應(yīng)提高， 使用一個色譜條件同時對紅景天及甘草進(jìn)行了質(zhì)量控制，提高了工作效率，同時保證了制劑的穩(wěn)定性，提高了可控性，從而確保了其臨床療效和廣大患者的身體健康。下述實驗例和實施例用于進(jìn)一步說明但不限于本發(fā)明。實驗例I含量測定實驗I.儀器、試藥和供試樣品儀器日立L-2100泵，日立L-2400紫外檢測器，島津AUW-220D型電子天平。對照品紅景天苷對照品(中國藥品生物制品檢定所)批號110818-200404，甘草酸銨對照品(中國藥品生物制品檢定所)批號110731-200615。樣品景天清肺膠囊(青海金訶格薩爾王藏藥制藥有限責(zé)任公司)，批號 20100618，20100619，20100620。2.檢測波長的選擇取紅景天苷及甘草酸銨對照品，于200_400nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描，見附圖

I、附圖2。由圖知紅景天苷在225nm處有最大吸收峰；甘草酸銨在250nm處有最大吸收峰， 在225nm處有次最大吸收峰。制劑中紅景天苷含量(紅景天中紅景天苷含量O. 5wt%左右) 較甘草酸含量(甘草中甘草酸含量2. 0wt%左右)低，故選擇紅景天苷最大吸收峰225nm為檢測波長。由圖知215nm-235nm均可用于測定，以225nm為最優(yōu)。3.流動相選擇紅景天苷與甘草酸極性相差較大，采用等度洗脫很難對兩種成分進(jìn)行同時測定， 故選擇梯度洗脫進(jìn)行色譜分離。使用甲醇-水體系進(jìn)行色譜分離時發(fā)現(xiàn)，在225nm下甲醇-水體系易形成較大的梯度峰，影響測定。使用乙腈-水進(jìn)行梯度洗脫時，以上問題得到解決，但甘草酸峰形較差，且不易穩(wěn)定。使用乙腈-酸的水溶液時，問題得到解決。研究發(fā)現(xiàn)酸的水溶液可以是1%冰醋酸溶液-O. I %冰醋酸溶液，也可以是O. 5%磷酸溶液-O. 05%磷酸溶液，均為體積百分比，其中以O(shè). 2%磷酸溶液最為穩(wěn)定為最優(yōu)。故確定流動相A為乙腈，B為體積百分比O. 2%磷酸溶液。4、梯度洗脫時間的選擇乙腈-體積百分比O. 2%磷酸溶液在體積份數(shù)比6-10 94-90時，紅景天苷峰保留時間及分離度均合適，當(dāng)乙腈-體積百分比0.2%磷酸溶液在體積份數(shù)比30-50 70-50 時甘草酸開始洗脫且峰保留時間及分離度合適。通過摸索發(fā)現(xiàn)按以下時間進(jìn)行洗脫時，紅景天苷與甘草酸均能達(dá)到很好的檢測要求。見表I和附圖3、附圖4。表I梯度洗脫表
權(quán)利要求
1.一種中藥組合物制劑中紅景天、甘草含量測定方法，其特征在于步驟如下照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以體積份數(shù)比O. 2 %磷酸溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式 Omin — IOmin — 35min — 40min — 45min,乙臆8% — — 50%— 100%— 8% ;體積份數(shù)比O. 2%磷酸溶液92%— 92%- 50%- 0%- 92%，檢測波長為215nm_235nm ;理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于3000 ；對照品溶液的制備取紅景天苷對照品、甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加體積百分比60% -70%乙醇制成每Iml含紅景天苷、甘草酸銨各80 μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備將含有紅景天和甘草的中藥組合物制劑研細(xì)后，取粉末O. 5g， 置具塞的錐形瓶中，加入體積百分比60-70 %乙醇50ml，稱定重量，密塞，超聲處理 30min-40min,放冷，再稱定重量，用60&-70 %乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液， 即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得。
2.權(quán)利要求I所述的一種中藥組合物制劑中紅景天、甘草含量測定方法，其特征在于， 所述的含有紅景天和甘草的中藥組合物制劑是指含有紅景天和甘草的組合物原料藥，按常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料制備成臨床可接受的任何一種劑型，包括膠囊劑、丸劑、微丸、滴丸、 片劑、軟膠囊、顆粒、口服液。
3.權(quán)利要求I所述的一種中藥組合物制劑中紅景天、甘草含量測定方法，其特征在于， 一種原料藥組成為紅景天150重量份、石灰華150重量份、桔梗100重量份、甘草100重量份的中藥組合物景天清肺膠囊中紅景天、甘草含量測定方法，步驟如下照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相Α，以體積份數(shù)比O. 2 %磷酸溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式 Omin — IOmin — 35min — 40min — 45min,乙臆8% — — 50%— 100%— 8% ;體積份數(shù)比O. 2%磷酸溶液92%— 92%- 50%- 0%- 92% ;檢測波長為225nm ;理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于3000 ；對照品溶液的制備取紅景天苷對照品、甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加體積百分比70%乙醇制成每Iml含紅景天苷、甘草酸銨各80 μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備將中藥組合物景天清肺膠囊內(nèi)容物研細(xì)后，取粉末O. 5g，精密稱定置具塞的錐形瓶中，加入體積百分比70 %乙醇50ml，稱定重量，密塞，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得;中藥組合物景天清肺膠囊中紅景天含量以紅景天苷計，不得少于O. 33mg/g ;甘草含量以甘草酸計，不得少于3. 3mg/g0
4.權(quán)利要求I所述的一種中藥組合物制劑中紅景天、甘草含量測定方法，其特征在于， 一種原料藥組成為紅景天150重量份、石灰華150重量份、桔梗100重量份、甘草100重量份的中藥組合物景天清肺丸中紅景天、甘草含量測定方法，步驟如下照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VID)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以體積份數(shù)比O. 2 %磷酸溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式 Omin — IOmin — 35min — 40min — 45min,乙臆8% — — 50%— 100%— 8% ;體積份數(shù)比O. 2%磷酸溶液92%— 92%- 50%- 0%- 92% ;檢測波長為225nm ;理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于3000 ；對照品溶液的制備取紅景天苷對照品、甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加體積百分比70%乙醇制成每Iml含紅景天苷、甘草酸銨各80 μ g的混合溶液，即得；供試品溶液的制備將中藥組合物景天清肺丸研細(xì)后，取粉末O. 5g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，加入體積百分比70 %乙醇50ml，稱定重量，密塞，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得;中藥組合物景天清肺丸中紅景天含量以紅景天苷計，不得少于O. 34mg/g ;甘草含量以甘草酸計，不得少于3. 4mg/g。
5.權(quán)利要求I所述的一種中藥組合物制劑中紅景天、甘草含量測定方法，其特征在于， 一種原料藥組成為手參540重量份、甘青青蘭540重量份、紅景天256重量份、烈香杜鵑370 重量份、黃柏296重量份、甘草370重量份的中藥組合物利舒康膠囊中紅景天、甘草含量測定方法，步驟如下照高效液相色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI D)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A，以體積份數(shù)比O. 2 %磷酸溶液為流動相B，采用梯度洗脫方式 Omin — IOmin — 35min — 40min — 45min,乙臆8% — — 50%— 100%— 8% ;體積份數(shù)比O. 2%磷酸溶液92%— 92%- 50%- 0%- 92% ;檢測波長為225nm ;理論板數(shù)按紅景天苷峰計算應(yīng)不低于3000 ；對照品溶液的制備取紅景天苷對照品、甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加體積百分比70%乙醇制成每Iml含紅景天苷、甘草酸銨各80 μ g的溶液，即得；供試品溶液的制備將中藥組合物利舒康膠囊內(nèi)容物研細(xì)后，取粉末O. 5g，精密稱定， 置具塞的錐形瓶中，加入體積百分比70 %乙醇50ml，稱定重量，密塞，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得;中藥組合物利舒康膠囊中紅景天含量以紅景天苷計，不得少于O. 33mg/g，甘草含量以甘草酸計，不得少于2. 3mg/g。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種中藥組合物制劑中紅景天、甘草含量測定方法，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明使用一個色譜條件同時對含有紅景天和甘草的中藥組合物制劑中的紅景天及甘草進(jìn)行了質(zhì)量控制，操作簡便，分析數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。既節(jié)省了分析人員的分析時間，提高了工作效率，延長了色譜柱的使用壽命，降低了成本，同時保證了制劑的穩(wěn)定性，提高了可控性。
文檔編號G01N30/88GK102590425SQ201210077118
公開日2012年7月18日 申請日期2012年3月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月21日
發(fā)明者劉玉芹, 孫緒丁, 常建暉, 李懷平, 邵成雷 申請人:山東阿如拉藥物研究開發(fā)有限公司