專利名稱：運用微波輻射水浴透熱的快速石蠟制片方法和裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物組織標(biāo)本快速石蠟制片的方法和裝置，應(yīng)用在醫(yī)院病理、檢驗以及科研等部門開展生物組織標(biāo)本的快速石蠟制片和病理診斷。
背景技術(shù)：
目前，國內(nèi)外普遍應(yīng)用冰凍切片技術(shù)和其它快速診斷技術(shù)來解決手術(shù)中的病理診斷問題。盡管冷凍切片技術(shù)仍然是首選，但由于該技術(shù)常有切片太厚、組織細胞形態(tài)模糊、冰晶人工假象和切片標(biāo)本不能長久保存等缺點。另外，有關(guān)非冰凍切片技術(shù)的傳統(tǒng)快速石蠟切片法主要是利用酒精燈、電爐或水浴鍋直接加熱處理組織，以縮短組織的固定、脫水、透明和浸蠟的時間；但這類方法的缺點是要求組織標(biāo)本體積太小、受熱時間和程度難以準(zhǔn) 確地控制，時常引起組織過脆或處理不充分，從而影響診斷。盡管市面上商業(yè)化提供的超聲波快速組織脫水裝置或組織處理儀(中國專利申請?zhí)?2153488. 8)能滿足快速石蠟切片的基本應(yīng)用要求，但由于每次只能處理1-3個標(biāo)本，工作效率不高，仍使用傳統(tǒng)的二甲苯和丙酮等毒害和危險試劑。欲購買專業(yè)的微波快速生物組織處理儀(中國專利申請?zhí)?01120067102. 7)不僅儀器價格相當(dāng)昂貴，而且試劑的消耗使用量又非常大，對廣大普通用戶來說很不經(jīng)濟實用。因此，發(fā)明一種穩(wěn)點可靠、不使用毒害和危險試劑又經(jīng)濟實用的生物組織標(biāo)本快速石蠟制片方法和裝置，應(yīng)用于醫(yī)院病理、檢驗和科研部門的病理診斷工作中非常必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為針對克服上述背景技術(shù)中的缺陷與不足，利用微波輻射分子熱力學(xué)原理的水浴透熱方式，為醫(yī)院病理、檢驗以及科研部門的生物組織標(biāo)本的快速石蠟切片和病理診斷提供一種經(jīng)濟實用、操作簡單和工作效率高的儀器裝置以及專用試劑和行之有效的組織標(biāo)本處理制片方法。本發(fā)明所解決的技術(shù)問題采用以下技術(shù)方案來實現(xiàn)一種運用微波輻射水浴透熱的快速石蠟制片裝置該裝置包括具有組織標(biāo)本快速處理功能的微波輻射水浴透熱部分和具有組織標(biāo)本快速浸蠟功能的真空負壓浸蠟部分；前述微波輻射水浴透熱部分的特征組成包括微波爐、盛水容器、組織標(biāo)本盒、試劑管和試劑管架，盛水容器的體積大小應(yīng)在200毫升至5000毫升之間，試劑管的體積大小應(yīng)在20毫升至200毫升之間，能裝載I至10個組織標(biāo)本盒，試劑管架能裝載1-20個試劑管；所述真空負壓浸蠟部分的特征組成包括真空泵、有孔蓋玻璃干燥器和水浴鍋，用管路將真空泵和干燥器的上蓋的孔相聯(lián)通，干燥器放在60 80°C的水浴鍋內(nèi)，真空泵運行產(chǎn)生的真空負壓在30 80千帕；獨立使用微波輻射水浴透熱部分和與真空負壓浸蠟部分聯(lián)合使用完成快速石蠟制片功能。上述盛水容器的特征是指包括用玻璃、陶瓷、聚乙烯、聚苯乙烯和聚四氟乙烯的透微波材料制造而成的。上述微波輻射水浴透熱的快速石蠟制片裝置，其特征在于使用水的比熱容大來增強微波輻射量的吸收，幫助吸收能量較弱的試劑和石蠟快速加熱，達到快速組織處理和浸蠟的目的。上述快速石蠟制片裝置的盛水容器，其特征在于它的水面添加液體石蠟防止水分蒸發(fā)，減少水受熱蒸發(fā)的速度。本發(fā)明快速石蠟制片裝置所使用的微波輻射工具是使用普通商業(yè)微波爐、專用微波快速組織處理儀和微波消解儀，其特征在于它們的基礎(chǔ)參數(shù)是磁電管頻率2450 MHz，功率輸出可以程序控制或火檔控制到不大于1000瓦特的功率范圍內(nèi)。本發(fā)明中所使用微波輻射水浴透熱的快速石蠟制片方法，其特征在于所采用的組織處理專用試劑包括快速固定液、快速脫鈣液、快速脫水透明劑和石蠟。上述的組織處理專用試劑，其成分特征在于快速固定液的化學(xué)組成質(zhì)量百分比 為甲醛或乙二醛4 10%，乙醇40 80%和冰乙酸I 5%，PH值范圍4 8 ;快速脫水透明劑的化學(xué)組成質(zhì)量百分比為異丙醇30 100%，無水酒精10 60%，聚乙二醇(分子量300)10 30%和二甲基亞砜(DMSO) I 2%;上述石蠟選用的熔點范圍在56 60°C之間。本發(fā)明快速石蠟制片方法，其特征的組織處理操作步驟為快速固定液固定組織5 60分鐘(溫度范圍40 70°C)、一次或兩次快速組織脫水透明劑分別處理5 60分鐘(溫度范圍50 80°C)和在30 80千帕的真空負壓條件下浸蠟5 60分鐘(溫度范圍60 80°C)，工作時間長短取決于選用組織的厚度。本發(fā)明快速石蠟制片方法，其特征在于骨組織脫鈣處理過程中在燒杯內(nèi)盛裝的快速脫鈣液的液面加上液體石蠟，防止酸類分子濺出和蒸發(fā)。上述的快速脫鈣液，其特征在于配方的化學(xué)組成質(zhì)量百分比為鹽酸5 10%、醋酸5 10%、水楊酸5 10%和蒸餾水70 85%。有益效果在實際運用過程中，微波直接輻射對不同試劑和不同組織所產(chǎn)生的效能不一致。由于水能夠最快、最有效地吸收微波輻射能量，本發(fā)明應(yīng)用微波輻射水浴透熱法處理組織。首先預(yù)熱，用高火檔將水溫短時間迅速提高到處理組織的最佳溫，然后，僅用低火檔將水溫恒溫，這樣就能使處理組織的環(huán)境溫度始終保持適當(dāng)且相對穩(wěn)定，防止試劑過快揮發(fā)蒸干。并且，石蠟吸收微波能量較弱，水能幫助增強微波輻射量可達到快速浸蠟的目的。本發(fā)明具備單個和批量處理組織標(biāo)本的靈活性，同時處理不同種類的組織標(biāo)本，組織厚度可達到3毫米；每3小時能處理100個以上組織標(biāo)本，能滿足醫(yī)院病理科當(dāng)日內(nèi)完成常規(guī)數(shù)量病理送檢標(biāo)本的制片，滿足快速病理診斷服務(wù)的要求。采用專用的快速脫水透明劑代替?zhèn)鹘y(tǒng)毒性較強的丙酮和二甲苯試劑，充分保證了處理過程的環(huán)保性，減少對工作人員健康的危害。經(jīng)此方法制得的切片質(zhì)量較好，染色鮮艷，組織結(jié)構(gòu)完整，細胞核、核膜及核仁清晰?？膳c傳統(tǒng)常規(guī)石蠟切片媲美，且制片質(zhì)量穩(wěn)定，診斷可靠，術(shù)后診斷符合率聞。


圖I為用作微波輻射工具的普通商業(yè)微波爐示意圖。圖2為快速石蠟制片裝置的水浴透熱部分部件組成示意圖。
圖3為快速石蠟制片裝置的真空負壓浸蠟部分部件組成示意圖。
具體實施例方式為了更細致地理解本發(fā)明的具體內(nèi)容、方法和裝置結(jié)構(gòu)組成，下面結(jié)合附圖和實施例作進一步說明。實施例I :
結(jié)合圖I、圖2和圖3。圖I為用作微波輻射工具的普通商業(yè)微波爐示意圖。包括微波爐外殼I、爐腔2、爐門3，把準(zhǔn)備好標(biāo)本和試劑的盛水容器4放置在爐腔2底的中央，盛有試劑的試劑管5內(nèi)放組織標(biāo)本盒6，試劑管5的試劑部分浸在盛水容器4的水中，調(diào)整到中央位置，關(guān)好爐門3，設(shè)立好火檔位，啟動運行。圖2為快速石蠟制片裝置的水浴透熱部分部件組成示意圖。向一個體積為1000 暈升的盛水容器4內(nèi)裝水500暈升；同時,倒30暈升試劑如快速固定液于試劑管5內(nèi)并加蓋，將2個組織標(biāo)本分別放入2個組織標(biāo)本盒6內(nèi)、試劑管5內(nèi)裝入2個組織標(biāo)本盒6，把每個試劑管5都安放在一個試劑管架7的管孔內(nèi)，然后將整體試劑管架7放在盛水容器4內(nèi)。圖3為快速石蠟制片裝置的真空負壓浸蠟部分部件組成示意圖。把真空泵8和有孔蓋玻璃干燥器9用管道10相聯(lián)通，將有孔蓋玻璃干燥器9放置在水浴鍋11的水中，揭開干燥器9的蓋，把完成組織固定、脫水和透明后的整體組織標(biāo)本盒6放在干燥器9的蠟杯12內(nèi)，蓋好蓋并確認(rèn)密封，開啟電源，真空泵8運行工作。實施例2
I)材料配制快速固定液(10%甲醛液15毫升、95%乙醇80毫升和冰醋酸5毫升)；配制快速脫水透明劑(100%異丙醇500毫升、無水酒精400毫升、聚乙二醇(分子量300)100毫升和二甲基亞砜(DMSO) I毫升；熔點58 60°C石蠟。儀器WP750格蘭仕家用微波爐。熔化的石蠟100毫升倒入燒杯中放在電熱恒溫箱內(nèi)隨時備用，快速石蠟制片裝置按上述實施例I安裝圖I微波爐和圖2水浴透熱部件以及圖3真空負壓浸蠟部件。2)操作步驟(I)預(yù)熱1000毫升的燒杯加水約500毫升，放入微波爐內(nèi)用高火檔3 5分鐘將水預(yù)熱至60°C。(2)快速組織固定將取好的組織塊大小約10毫米X 15毫米X I 2毫米，裝入組織標(biāo)本盒，將組織標(biāo)本盒放入加有30毫升快速固定液的50毫升試管中，把試管放入預(yù)熱好的燒杯水中，用低火檔3分鐘(以下步驟均在燒杯水中進行)。
(3)快速組織脫水將固定好的組織標(biāo)本盒放入加有30毫升快速脫水透明劑的試管中，低火檔15分鐘。(4)快速組織透明將組織標(biāo)本盒放入第二個加有30毫升快速脫水透明劑的試管中，低火檔各15分鐘。(5)快速組織浸蠟組織標(biāo)本盒放入已熔58 60°C石蠟杯中，放入圖3真空負壓浸蠟部件的干燥器內(nèi)在40千帕的真空負壓條件下浸蠟30分鐘。然后，將組織標(biāo)本盒快速包埋于預(yù)先備好的蠟塊中后冷卻，切片厚4 5微米，快速HE染色，中性樹膠封固。實施例3
I)材料配制快速脫鈣液依次加入16毫升鹽酸、10毫升醋酸、20克水楊酸和174毫升蒸餾水中混合，該液水楊酸呈不溶性沉淀。使用和實施例I中相同儀器。2)操作步驟取材取體積為(I I. 5) cmX (0. 7 l)cmX (0. 3 0. 5) cm的待脫鈣標(biāo)本置于組織標(biāo)本盒中。將200毫升快速脫鈣液倒入500毫升玻璃燒杯中，將組織標(biāo)本盒放入其中。再取一個1000毫升燒杯，加水500毫，把小燒杯固定放置在大燒杯水中，然后把兩個相套的燒杯放在微波爐腔中央，用高火檔10加熱5分鐘，再用低火檔I或2繼續(xù)加熱30分鐘。用注射針頭輕松穿透來判斷脫鈣情況，如需要再重復(fù)操作一次。把用微波輻射水浴透熱法快速制作的石蠟切片與冷凍切片和超聲波相關(guān)的其它方法進行了比較，優(yōu)點總結(jié)列入表一和表二。認(rèn)為冷凍切片雖然大小組織均可做、觀察病變范圍較全面、時間較短，但切片質(zhì)量不如石蠟切片，冷凍切片過程中易造成各種人為假象，如冰晶形成、細胞腫脹、細胞形態(tài)不典型等，常導(dǎo)致病理醫(yī)師誤診。但是，微波水浴輻射快速石蠟切片不僅切片質(zhì)量優(yōu)于冷凍切片，而且制片質(zhì)量穩(wěn)定，速度也不亞于冷凍切片，必要時可同時做幾個取材組織塊、增大觀察范圍。另外，病理醫(yī)師習(xí)慣看石蠟切片，有利于及時準(zhǔn)確地做出診斷，可增強基層醫(yī)院病理醫(yī)師開展手術(shù)中病理診斷的信心。本發(fā)明不需昂貴的設(shè)備，而且所用器材價格低廉、操作安全、方法可靠、易學(xué)，適合各級醫(yī)院，尤其是基層醫(yī)院。以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征和優(yōu)點。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該 了解，本發(fā)明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的基本原理和主要特征，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的本發(fā)明的范圍內(nèi)，本發(fā)明要求保護的范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。表一、微波快速石蠟切片和冰凍切片的比較。
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不_ 議5*wf■擁誦_. mmm* mmmmmmim __規(guī)切片■理珍斷不符s_表二、微波快速石蠟制片和傳統(tǒng)或超聲波快速石蠟制片的區(qū)別
目I微波快速石蠟制片I傳統(tǒng)或超聲快速石錯制片■
制片原■￥利用物質(zhì)吸收微波并釋放高頻熱能使內(nèi)部分子劇烈運動。酒精燈、電爐和超聲波快速處理儀等的直接熱效應(yīng)和機械震蕩。
操作流 1~簡化取材一微波處理一包埋一切片一染色一封片。Ii:取材一固定一沖洗-脫水一透明一浸蠟一包埋一切片一染色一封片。
試劑差W環(huán)保試劑無毒、無公害?！R林和二甲苯有毒和致癌劑。
安全差■￥無明火，容易控制、安全。—下操作，容易發(fā)生火災(zāi)和意外。
IilF操作條件控制恒定，技術(shù)穩(wěn)定。操作隨意、條件難控制、制片不穩(wěn)定。■
標(biāo)本數(shù)■￥可以大規(guī)模處理厚組織標(biāo)本。合處理少量和薄小組織標(biāo)本。
免疫組化I免疫組化抗原己修復(fù)，染色好。I免疫組化染色效果稍差一些。^
權(quán)利要求
1.一種運用微波輻射水浴透熱的快速石蠟制片裝置包括具有組織標(biāo)本快速處理功能的微波輻射水浴透熱部分和具有組織標(biāo)本快速浸蠟功能的真空負壓浸蠟部分；前述微波輻射水浴透熱部分的特征組成包括微波爐、盛水容器、組織標(biāo)本盒、試劑管和試劑管架；所述真空負壓浸蠟部分的特征組成包括真空泵、有孔蓋玻璃干燥器和水浴鍋，真空泵和干燥器上蓋的孔用管路相聯(lián)通，干燥器放在60 80°C的水浴鍋內(nèi)，真空泵運行產(chǎn)生的真空負壓在30 80千帕；獨立使用微波輻射水浴透熱部分和與真空負壓浸蠟部分聯(lián)合使用完成快速石臘制片功能。
2.如權(quán)利要求I中所述盛水容器的特征是指包括用玻璃、陶瓷、聚こ烯、聚苯こ烯和聚四氟こ烯的透微波材料制造而成的。
3.如權(quán)利要求I中所述微波輻射水浴透熱的快速石蠟制片裝置，其特征在于使用水的比熱容大來增強微波輻射量的吸收，幫助吸收能量較弱的試劑和石蠟快速加熱，達到快速組織處理和浸蠟的目的。
4.如權(quán)利要求I中所述快速石蠟制片裝置的盛水容器，其特征在于盛水容器的水面添加液體石蠟防止水分蒸發(fā)和減少水受熱蒸發(fā)的速度。
5.如權(quán)利要求I中所述快速石蠟制片裝置的微波輻射工具是使用普通商業(yè)微波爐、專用微波快速組織處理儀和微波消解儀，其特征在于它們的基礎(chǔ)參數(shù)是磁電管頻率2450MHz，功率輸出可以程序控制或火檔控制到不大于1000瓦特的功率范圍內(nèi)。
6.一種運用微波輻射水浴透熱的快速石蠟制片方法，其特征在于所采用的組織處理專用試劑包括快速固定液、快速脫鈣液、快速脫水透明劑和石蠟。
7.如權(quán)利要求6中所述的組織處理專用試劑，其成分特征在于快速固定液的化學(xué)組成質(zhì)量百分比為甲醛或こニ醛4 10 %，こ醇40 80 %和冰醋酸I 5 %，PH值范圍4 8;快速脫水透明劑的化學(xué)組成質(zhì)量百分比為異丙醇30 100%，無水酒精10 60%，聚こニ醇(分子量300) 10 30%和ニ甲基亞砜(DMSO) I 2%，以及單用上述醇類的一種至三種。
8.如權(quán)利要求6中所述的快速石蠟制片方法，其特征的組織處理操作步驟為快速固定液固定組織5 60分鐘(溫度范圍40 70°C)、一次或兩次快速組織脫水透明劑分別處理5 60分鐘(溫度范圍50 80°C )和在30 80千帕的真空負壓條件下浸蠟5 60分鐘(溫度范圍60 80°C)。
9.如權(quán)利要求6中所述的快速石蠟制片方法，其特征在于骨組織脫鈣處理過程中在燒杯內(nèi)盛裝的快速脫鈣液的液面加上液體石蠟，防止酸類分子濺出和蒸發(fā)。
10.如權(quán)利要求6中所述的快速脫鈣液，其特征在于配方的化學(xué)組成質(zhì)量百分比為鹽酸5 10%、冰醋酸5 10%、水楊酸5 10%和蒸餾水70 85%。
全文摘要
本發(fā)明提供一種生物組織標(biāo)本快速石蠟制片方法和裝置，運用微波輻射水浴透熱方式，幫助吸收能量較弱的試劑和石蠟快速加熱。石蠟制片裝置的特征組成包括具有組織標(biāo)本快速處理功能的微波輻射水浴透熱部分和具有組織標(biāo)本快速浸蠟功能的真空負壓浸蠟部分。石蠟制片步驟包括快速組織固定、一次或兩次快速組織脫水透明和快速浸蠟。石蠟制片的專用處理試劑包括快速固定液、快速脫水透明劑和快速脫鈣液。方法和裝置具備單個和批量處理組織標(biāo)本的靈活性，同時處理不同種類的組織標(biāo)本，制片質(zhì)量穩(wěn)定可靠。應(yīng)用在醫(yī)院病理、檢驗以及科研等部門開展生物組織標(biāo)本的快速石蠟制片和病理診斷。
文檔編號G01N1/44GK102768145SQ20121021946
公開日2012年11月7日 申請日期2012年6月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月29日
發(fā)明者錢正澤, 錢津悅, 錢翔 申請人:長沙康柏恩醫(yī)療科技有限公司