專利名稱：使第二維度梯度適應(yīng)實際第一維度條件的偏移二維分離的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及樣品分離(sample separation)系統(tǒng)。
背景技術(shù)：
在液相色譜法中，流體樣品和洗脫劑(液體流動相)可以被泵送經(jīng)過導(dǎo)管和柱，在柱中進(jìn)行對樣品成分的分離。柱可以包括能夠分離流體分析物的不同成分的材料。填充材料(所謂的珠(bead)，可以包括硅膠)可以被填充在柱管中，柱管可以經(jīng)由導(dǎo)管連接到其他元件(例如，控制單元、含有樣品和/或緩沖劑的容器)。通過由不同流體成分以不同的貢獻(xiàn)組成流動相可以調(diào)節(jié)流動相的成分。流體樣品的二維分離表示執(zhí)行在第一分離單元中的第一分離過程以將流體樣品 分成多個分部(fraction)、并且執(zhí)行在第二分離單元中的第二分離過程以進(jìn)一步將多個分部分成子分部(sub-fraction)的分離技術(shù)。二維液相色譜法(2D LC)可以組合兩種液相色譜法分離技術(shù)。Pavel Jandera、Tomas Hajek、Petr Cesla 發(fā)表于 J. Sep. Sci.的 2010 年第 33卷第 1382-1397 頁的 “Comparison of various second-dimension gradient types incomprehensive two-dimensional liquid chromatography” 公開了梯度洗脫相對于等度(isocratic)條件提供在峰容量中的顯著改進(jìn)。在第二維度中，梯度被限制到分離可用的短時間段。對綜合LC LC中的各種類型的第二維度梯度進(jìn)行比較(i) “分部中的全體”梯度，( ) “分部中的分段”梯度和(iii) “連續(xù)偏移”梯度，這些梯度應(yīng)用于在第一維度中聚乙二醇柱上的酚酸和黃酮、以及在第二維度中兩種類型的多孔外殼熔融核C18柱(AscentisExpress和Kinetex)的正交LC LC分離。多孔外殼柱提供窄帶寬和在中等操作壓力下的快速第二維度分離，這能夠大量節(jié)省綜合LC LC分離中的整體分離時間。研究梯度類型對第二維度中帶寬、理論峰容量、分離時間和柱壓力的影響。梯度程序的類型控制樣品化合物的親油性的范圍，該樣品化合物可以在第二維度反相時間段中被分離?？梢允褂猛榛綐?biāo)準(zhǔn)對該范圍進(jìn)行標(biāo)定，以設(shè)計完全樣品分離的分離條件，避免非洗脫化合物對后續(xù)第二維度分部的不利纏繞。但是，這種二維液相色譜法的概念對于用戶來說是麻煩的，因為第二維度被分成多個完全不相關(guān)的梯度運行，需要用戶分別安排這些梯度運行中的每一者。此外，當(dāng)將2D LC測量的結(jié)果繪制在二維坐標(biāo)系中時，會出現(xiàn)相對大的面積區(qū)域保持空著或基本空著。這相當(dāng)于測量時間的某一部分未有效地利用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目標(biāo)是提供有效操作的二維樣品分離裝置。通過獨立權(quán)利要求來解決這個目標(biāo)。通過從屬權(quán)利要求示出其他實施例。根據(jù)本發(fā)明的示例性實施例，提供用于分離流體樣品的樣品分離裝置的控制裝置，樣品分離裝置包括第一分離單元和第二分離單元，第一分離單元可被供應(yīng)待分離的流體樣品，第二分離單元在第一分離單元的下游并且可被供應(yīng)經(jīng)第一分離單元處理之后的流體樣品，其中，控制裝置構(gòu)造成控制第一分離單元在測量時間段內(nèi)執(zhí)行初級分離序列，以將流體樣品分離成多個分部；控制第二分離單元在測量時間段內(nèi)執(zhí)行多個次級分離序列，以將分離的多個分部的至少一部分進(jìn)一步分離成多個子分部，其中，次級分離序列形成共用樣品分離方法的一部分，共用樣品分離方法由包括一組參數(shù)的、對樣品分離的共用規(guī)范來限定；隨著初級分離序列的進(jìn)展，調(diào)節(jié)至少一個參數(shù)，多個次級分離序列中的至少一者是根據(jù)所述至少一個參數(shù)來執(zhí)行的。根據(jù)本發(fā)明的另一示例性實施例，提供用于分離流體樣品的樣品分離裝置，其中，樣品分離裝置包括第一分離單元，其可被供應(yīng)待分離的流體樣品；第二分離單元，其在第一分離單元的下游并且可被供應(yīng)經(jīng)第一分離單元處理之后的流體樣品；具有上述特征的控制裝置，其用于控制第一分離單元和第二分離單元。根據(jù)本發(fā)明的另一示例性實施例，提供通過第一分離單元和第二分離單元來分離流體樣品的方法，第一分離單元可被供應(yīng)待分離的流體樣品，第二分離單元在第一分離單元下游并且可被供應(yīng)經(jīng)第一分離單元處理之后的流體樣品，其中，該方法包括如下步驟控 制第一分離單元在測量時間段內(nèi)執(zhí)行初級分離序列，以將流體樣品分離成多個分部；控制第二分離單元在測量時間段內(nèi)執(zhí)行多個次級分離序列，以將所分離的多個分部的至少一部分進(jìn)一步分離成多個子分部，其中，次級分離序列形成共用樣品分離方法的一部分，共用樣品分離方法由包括一組參數(shù)的、對樣品分離的共用規(guī)范來限定；隨著初級分離序列的進(jìn)展，調(diào)節(jié)至少一個參數(shù)，多個次級分離序列中的至少一者是根據(jù)所述至少一個參數(shù)來執(zhí)行的。根據(jù)本發(fā)明的另一示例性實施例，提供軟件程序或產(chǎn)品，該軟件程序或產(chǎn)品優(yōu)選存儲在數(shù)據(jù)載體上，并且該軟件程序或產(chǎn)品當(dāng)在數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)(例如計算機)上運行時用于控制或執(zhí)行具有上述特征的方法。本發(fā)明的實施例可以部分地或整體由一個或多個適合的軟件程序來實施或支持，軟件程序可以存儲在任意類型的數(shù)據(jù)載體上或者以其他方式由任意類型的數(shù)據(jù)載體提供，并且軟件程序可以在任意適合的數(shù)據(jù)處理單元中執(zhí)行或由任意適合的數(shù)據(jù)處理單元執(zhí)行。軟件程序或例程優(yōu)選可以在測量控制和測量數(shù)據(jù)分析的背景下應(yīng)用。根據(jù)本發(fā)明的實施例的測量控制和測量數(shù)據(jù)分析可以通過計算機程序(即，通過軟件)、或通過使用一個或多個專用電子優(yōu)化電路(即，在硬件中)、或以混合形式(即，借助于軟件組成部分和硬件組成部分)來執(zhí)行或輔助。在本申請的背景下，術(shù)語“流體樣品”可以具體表示待分析的任意液體和/或氣體介質(zhì)，可選地還包括固體顆粒。這種流體樣品可以包括應(yīng)當(dāng)分離的多個分部的分子或顆粒，例如生物分子(例如蛋白質(zhì))。因為將流體樣品分離成分部包括某種分離標(biāo)準(zhǔn)(例如，質(zhì)量、尺寸、體積、化學(xué)特性、電荷等)，根據(jù)該分離標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行分離，每個分離的分部還可以按另一分離標(biāo)準(zhǔn)(例如，質(zhì)量、尺寸、體積、化學(xué)特性、電荷等)進(jìn)一步分離，從而將一個分部分裂或分離成多個子分部。在本發(fā)明的背景下，術(shù)語“分部”可以具體表示流體樣品的具有共同的某種特性(例如，質(zhì)量、體積、化學(xué)特性等)的一群分子或顆粒，根據(jù)該共同的某種特性可以執(zhí)行分離。但是，與一個分部有關(guān)的分子或顆粒仍然可以具有某種程度的非均一性，有時候僅是因為第一分離處理的分辨(resolution)不足夠充分，但是可以根據(jù)另一分離標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)一步分離。在本發(fā)明的背景下，術(shù)語“子分部”可以具體表示全都與某一分部有關(guān)的分別的分子或顆粒群，這些分別的分子或顆粒群仍然在某一特性(例如，質(zhì)量、體積、化學(xué)特性等)方面彼此不同。因此，相比于第一分離的分離標(biāo)準(zhǔn)，給第二分離應(yīng)用另一分離標(biāo)準(zhǔn)允許通過應(yīng)用這一分離標(biāo)準(zhǔn)使得這些群進(jìn)一步彼此分離，從而獲得進(jìn)一步分離的子分部。在本申請的背景下，術(shù)語“下游”可以具體表示與另一流體構(gòu)件相比被定位在下游的流體構(gòu)件將只能在流體樣品與所述另一流體構(gòu)件(因而布置在上游)相互作用之后才與流體樣品相互作用。因此，術(shù)語“上游”和“下游”與流體樣品的流動方向有關(guān)。對于樣品分離裝置來說，第二分離單元位于第一分離單元的下游。在本申請的背景下，術(shù)語“樣品分離裝置”可以具體表示能夠通過應(yīng)用某種分離技術(shù)來分離流體樣品的不同分部的任意裝置。具體地，當(dāng)樣品分離裝置構(gòu)造成用于二維分離時，兩個分離單元可以設(shè)置在樣品分離裝置中。這表示樣品首先根據(jù)第一分離標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分離，隨后根據(jù)不同的第二分離標(biāo)準(zhǔn)或不同靈敏度的同一標(biāo)準(zhǔn)(參見在兩個柱上具有不同溫度的RP-RP分離)進(jìn)行分離。 術(shù)語“分離單元”可以具體表示流體構(gòu)件，流體樣品傳輸經(jīng)過該流體構(gòu)件，并且該流體構(gòu)件構(gòu)造成在引導(dǎo)流體樣品通過分離單元之后使得該流體樣品分離成不同的分子或顆粒群(分別稱作分部或子分部)。分離單元的示例是液相色譜柱，液相色譜柱能夠捕捉和選擇性地釋放流體樣品的不同分部。在本申請的背景下，術(shù)語“初級分離序列”可以具體表示分離方法或分離方法的一部分，流體樣品將根據(jù)該分離方法或分離方法的一部分在第一分離單元中被分離。這可以包括將連續(xù)執(zhí)行的多個步驟。對這些步驟的執(zhí)行發(fā)生在所謂的測量時間段內(nèi)。在優(yōu)選實施例中，初級分離序列是梯度運行(gradient run),通過該梯度運行,通過逐漸地改變兩個(或多個)溶劑的比率使流體樣品在第一分離單元中被分離，從而在第一分離單元上選擇性地捕獲并之后釋放流體樣品的單獨的分部。在本申請的背景下，術(shù)語“多個次級分離序列”可以具體表示與第一序列具有類似或相同特性、但是將由第二分離單元執(zhí)行的序列。此外，執(zhí)行每個次級分離序列的時間段小于與初級分離序列相關(guān)的測量時間段。也就是說，在初級分離序列的時間段內(nèi)可以執(zhí)行多個或很多次級分離序列。這表示在執(zhí)行初級分離序列期間流體樣品被分裂或分離成各種分部，而次級分離序列通過采用另外的至少部分不同的分離標(biāo)準(zhǔn)將分離的分部進(jìn)一步分離成子分部。例如，與一個初級分離序列有關(guān)的次級分離序列的數(shù)量可以在5至3000之間的范圍內(nèi)，特別是在10至500之間。在本申請的背景下，術(shù)語“(初級)測量時間段”可以具體表示執(zhí)行初級分離序列所需要的時間段。這種時間段可以在Imin(分鐘)至5h(小時)之間的范圍內(nèi)，特別是在5min至Ih之間。這可以與在構(gòu)造成液相色譜柱的第一分離單元上執(zhí)行梯度運行所需要的時間有關(guān)。根據(jù)持久的初級分離序列，樣品可以按第一分離標(biāo)準(zhǔn)(例如，尺寸)被分離成多個分部。隨后，至少部分正交(orthogonal)的次級分離序列可以將在初級分離序列期間分離的每個分部進(jìn)一步分離成多個子分部(具體地，根據(jù)諸如化學(xué)特性(例如溶解度)的另一分離標(biāo)準(zhǔn))。在本申請的背景下，術(shù)語“初級分離序列的進(jìn)展”表示起始至實際測量時間段之間的時間段。有多個次級分離序列并行地執(zhí)行，這些次級分離序列具有的參數(shù)取決于初級分離的進(jìn)展。因此，在執(zhí)行初級分離序列期間，可以執(zhí)行調(diào)節(jié)次級分離序列的參數(shù)。這會需要或簡單地包括將初級分離單元的進(jìn)展(或計時)通知給第二分離單元，或反之亦然。在本申請的背景下，術(shù)語“參數(shù)(多個分離序列中的一者根據(jù)該參數(shù)執(zhí)行)”可以具體地表示在測量時間段持續(xù)期間可以在控制單元的控制下和/或基于用戶輸入而改變的一個或多個定量值(例如，溶劑成分、溫度、次級分離序列的持續(xù)時間的值)和/或一個或多個定性測量參數(shù)(例如，分離單元進(jìn)行操作所依據(jù)的操作模式)。在本申請的背景下，術(shù)語“由包括一組參數(shù)的、對樣品分離的共用規(guī)范來限定的共用樣品分離方法”可以具體地表示限定樣品分離裝置將如何操作或運行的工作流程、算法或一組操作參數(shù)。因此，共用樣品分離方法可以包括在提供至樣品分離裝置時限定本樣品分離裝置的復(fù)雜操作的完整的一組數(shù)據(jù)。例如，共用樣品分離方法可以限定通過樣品分離裝置分離流體的不同成分的過程(例如，如何運行液相色譜法、氣相色譜法或凝膠電泳試驗的處方)或需要官方批準(zhǔn)的過程(例如，在美國，是FDA(食品和藥品管理局)的批準(zhǔn)過程)、對裝置進(jìn)行沖洗的過程(例如，提供沖洗溶液以去除來自之前的研究的流體痕跡從而 抑制不期望的串?dāng)_或污染的算法)、對用于樣品分離裝置的溶劑的選擇(例如，選擇這種溶劑的多種成分、它們的相對含量等)、將濃度梯度應(yīng)用于樣品分離裝置的過程(例如，以使用色譜柱執(zhí)行液相色譜法分析)和/或?qū)τ糜跇悠贩蛛x裝置的操作溫度(和/或其他物理參數(shù)(例如壓力))的選擇。操作模式可以限定可提供至樣品分離裝置以對樣品分離裝置進(jìn)行操作的一系列指令。這一系列指令足以根據(jù)期望的方案運行流體裝置。具體地，在二維液相色譜法領(lǐng)域中，樣品分離可以是色譜方法。根據(jù)本發(fā)明的示例性實施例，以可參數(shù)化的方式執(zhí)行流體樣品的二維分離(即，基于兩種不同分離標(biāo)準(zhǔn)對流體樣品的分離)，這涉及到在第二維度中的分離。通常，梯度被安排成時間表(TTBL)，在時間表中在特定時間點指示固定值，但是現(xiàn)在在簡單方法中，例如在該TTBL中，輸入所謂的“關(guān)鍵”值，對于該“關(guān)鍵”值在給定的執(zhí)行時刻監(jiān)視第一維度分離的進(jìn)程，由此填入這些關(guān)鍵值。在TTBL中可以給出這些關(guān)鍵值的演變或梯度。這提供限定這種發(fā)展的執(zhí)行協(xié)議的用戶友好且直觀的方式。也就是說，不需要嚴(yán)格執(zhí)行某些初級和次級分離序列，而是與此相反，通過控制參數(shù)組來例如連續(xù)地調(diào)節(jié)這種二維分離系統(tǒng)的第二維度。例如，相應(yīng)二維分離的結(jié)果可沿著二維坐標(biāo)系繪制出，沿著一個軸繪制第一分離標(biāo)準(zhǔn)(例如，第一液相色譜色譜法分離的保留時間)并沿著第二軸繪制第二分離標(biāo)準(zhǔn)(例如，根據(jù)不同的第二液相色譜法分離的保留時間)。在該二維區(qū)域內(nèi)與分別的分部和子分部有關(guān)的分別的峰值的均等分布假設(shè)兩種分離標(biāo)準(zhǔn)完全正交(即，兩種分離標(biāo)準(zhǔn)之間沒有相關(guān)性)。但是，實際上并不總是如此。例如，可以根據(jù)質(zhì)量考慮第一分離標(biāo)準(zhǔn)，并根據(jù)顆粒的體積考慮第二分離標(biāo)準(zhǔn)。不可能具有超大質(zhì)量的顆粒同時具有超小的體積?？紤]到兩個分離標(biāo)準(zhǔn)之間與完全正交性的這種部分偏差，在二維繪制區(qū)域內(nèi)峰值的布置不是均勻的，從而不能有效地使用二維繪圖。此外，在只能找到幾個感興趣的峰值或者找不到感興趣的峰值的區(qū)域中，在(與測量有關(guān)的)二維繪圖的特定區(qū)域中找不到測量時間的值。本發(fā)明的示例性實施例現(xiàn)在解決這種現(xiàn)象，并允許調(diào)節(jié)次級分離序列的參數(shù)以在測量時間、樣品分離裝置及其結(jié)果的顯示方面更有效地使用資源。依據(jù)初級分離序列的進(jìn)程來限定次級分離序列的操作過程的分級方法已經(jīng)被證明為能夠使得二維分離過程對于用戶來說更有效和更靈活。通過構(gòu)造樣品分離系統(tǒng)以使得次級分離序列形成共用樣品分離方法的一部分，該共用樣品分離方法由包括一組參數(shù)(例如，存儲在一個文件中的一個數(shù)據(jù)組)的對樣品分離的共用規(guī)范限定，可以確保在執(zhí)行樣品分離期間或在測量時間段中分離方法總是保持相同(即，不改變)。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，方法的改變將需要大量的時間(例如至少10秒)，以致于隨著第一分離序列的進(jìn)展改變方法以調(diào)節(jié)參數(shù)將涉及顯著延遲，并且甚至?xí)恋K樣品分離或者會使分離效果降低。與此相反，本發(fā)明的實施例限定依據(jù)單一共用分離方法的至少全部的次級分離序列同時允許隨著第一分離序列的進(jìn)展調(diào)節(jié)次級分離序列的參數(shù)。具體地，該實施例可以表示為調(diào)諧型參數(shù)調(diào)節(jié)概念。盡管在上述有關(guān)關(guān)鍵值的示例中，系統(tǒng)以更類似查找表的方式工作，但是調(diào)諧型參數(shù)的概念具有更多的自保持特性。例如，這種概念可以通過規(guī)則(例如，“開始于5，以2%遞增直到達(dá)到8為止”)來限定參數(shù)的發(fā)展。此外，這里可以限定復(fù)雜的數(shù)學(xué)函數(shù)，該數(shù)學(xué)函數(shù)甚至可以考慮來自此前的分離實驗或?qū)＜乙?guī)則的數(shù)據(jù)或結(jié)果。例如，可以執(zhí)行搜索運行過程，其中，當(dāng)前峰值分布被用于改進(jìn) 或優(yōu)化對二維顯示區(qū)域的使用?？梢酝ㄟ^使用占位符(placeholder)在第二維度中安排形狀(例如梯度)，占位符可以隨著第一維度的進(jìn)展(運行時間或測量時間段)而呈現(xiàn)不同的值。因此，僅通過非常有限的一組支持點(例如，采樣點)，或者甚至通過關(guān)系或函數(shù)，就能實現(xiàn)很多次級分離序列的選擇性適應(yīng)或調(diào)整。在下文中，將說明控制裝置的其他示例性實施例。但是，這些實施例也可應(yīng)用于樣品分離系統(tǒng)、方法、以及軟件程序或產(chǎn)品。在實施例中，共用樣品分離方法的共用規(guī)范包括參數(shù)化的形狀關(guān)系，該關(guān)系是對次級分離序列中的至少兩個(特別是全部的)序列共用地限定的；發(fā)展指令，其隨著第一分離序列的進(jìn)展而給所述至少兩個(特別是全部的)次級分離序列限定形狀關(guān)系的參數(shù)。術(shù)語“參數(shù)化的形狀關(guān)系”(或包絡(luò)線)可以具體表示對這兩個或所有的次級分離序列的群組限定處理流程的實驗變量(例如，測量時間和溶劑成分)之間的關(guān)系。例如，對色譜法梯度運行而言，每個次級分離序列可以由緩慢上升沿之后是快速下降沿的一般形狀限定，可能在緩慢上升沿和快速下降沿之間具有恒定值段。一個或多個參數(shù)可以對于不同的次級分離序列不同地把這樣的一般形狀關(guān)系個性化。也就是說，一般形狀關(guān)系可以對于兩個或全部次級分離序列的群組而言是相同的，而一般形狀關(guān)系的參數(shù)可以對于不同的次級分離序列而言是不同的，從而對于分別的次級分離序列來區(qū)分或調(diào)整這些參數(shù)。在實施例中，形狀關(guān)系可以是形狀函數(shù)。形狀關(guān)系的至少一部分參數(shù)可以是隨著初級分離序列的進(jìn)程進(jìn)行調(diào)節(jié)的一個或多個參數(shù)的至少一部分。在實施例中，發(fā)展指令包括發(fā)展關(guān)系，發(fā)展關(guān)系限定了參數(shù)的發(fā)展，S卩，限定了參數(shù)值與依時間順序的多個次級分離序列之間的抽象關(guān)系。術(shù)語“發(fā)展關(guān)系”可以具體表示對參數(shù)依據(jù)關(guān)系或規(guī)則針對每個次級分離序列的發(fā)展進(jìn)行限定的(數(shù)學(xué))關(guān)系，特別是(數(shù)學(xué))函數(shù)。例如，發(fā)展關(guān)系可以是多項式函數(shù)或三角函數(shù)。為了對多個(例如五十個)次級分離序列調(diào)節(jié)某一參數(shù)的發(fā)展，對于用戶來說簡單地以抽象術(shù)語限定發(fā)展指令就足夠了，而不需要對于每個次級分離序列分別人工輸入大量的參數(shù)值(如果每個次級分離序列構(gòu)造成單獨的分離方法，則需要這種人工輸入)。這使得調(diào)節(jié)參數(shù)的任務(wù)或者甚至重新調(diào)節(jié)現(xiàn)有方法的參數(shù)的任務(wù)對于用戶來說是可行的。在實施例中，發(fā)展指令可以包括根據(jù)來自之前的分析分離的數(shù)據(jù)所計算的樣品特定(sample specific)形狀和進(jìn)展。因此,來自歷史試驗的知識也可以用作確定發(fā)展特性的基礎(chǔ)。附加地或可替換地，發(fā)展指令包括存儲在發(fā)展數(shù)據(jù)庫中的一組特定參數(shù)值，每個特定參數(shù)值依照時間順序被分配給特定的次級分離序列。發(fā)展數(shù)據(jù)庫(例如，查找表)可以在特定參數(shù)值方面限定用于每個次級分離序列的參數(shù)。因此，通過以機器可讀的方式存儲參數(shù)而不需要用戶人工輸入用于(例如五十個)次級分離序列中每一者的單獨參數(shù)的概念，可以顯著地改進(jìn)用戶引導(dǎo)。因此，發(fā)展指令的概念可以做到隨著測量時間段來調(diào)整次級分離序列。在實施例中，初級分離序列形成與次級分離序列相同的共用樣品分離方法的一部分。因此，可以依據(jù)單一共用樣品分離方法(即，共用的一組指令和參數(shù))來執(zhí)行整個二維分離，使得參數(shù)化可行并且能夠快速處理。對于液相色譜法實施例，這意味著可以依據(jù)共用色譜方法限定初級以及次級分離序列，共用色譜方法在整體上或以集成的體系限定二維液相色譜法分離。 在實施例中，控制裝置構(gòu)造成調(diào)節(jié)至少一個參數(shù)，以使得梯度運行(這些梯度運行作為所述多個次級分離序列)執(zhí)行偏移(drift)(特別是連續(xù)偏移)，而另一梯度運行作為初級分離序列來執(zhí)行。在此實施例中，實現(xiàn)多個梯度曲線，作為次級分離序列。這種梯度(例如，用于形狀函數(shù))可以開始于基準(zhǔn)值(例如，用于形狀函數(shù)的可調(diào)節(jié)參數(shù))，可以沿著恒定線性曲線行進(jìn)直到某一溶劑成分達(dá)到最終值(例如，用于形狀函數(shù)的可調(diào)節(jié)參數(shù))，可以暫時保持恒定(例如，用于形狀函數(shù)的可調(diào)節(jié)參數(shù))，然后可以再次返回到溶劑成分的初始的基準(zhǔn)值。在該實施例中，多個次級分離序列現(xiàn)在使用溶劑成分的相應(yīng)成形的時間相依性，但是該時間相依性會沿著限定溶劑成分的豎直軸彼此相對偏移。因此，在繪制圖中，測量時間的中心可以設(shè)置在期望有很多種類或者特別是感興趣的種類的繪制部分上。這允許在測量時間、軟件和硬件方面更有效地利用資源。在實施例中，初級分離序列和多個次級分離序列當(dāng)中的至少一者與色譜法梯度運行有關(guān)。在此實施例中，兩個分離單元都是填充有球珠的色譜分離柱，用于捕獲和選擇性地釋放流體樣品的單獨的分部。例如，對于兩個柱與流體樣品的化學(xué)相互作用、顆粒尺寸、多孔性、溫度或任意其他有關(guān)分離的特性，兩個柱可以不同。但是，在其他實施例中，可以結(jié)合其他類型的分離技術(shù)，例如，色譜法與電泳、質(zhì)譜法等。在實施例中，多個次級分離序列中的至少一者被參數(shù)化，其中，根據(jù)預(yù)定進(jìn)展規(guī)貝U，相應(yīng)參數(shù)的至少一部分隨著初級分離序列的進(jìn)展而調(diào)節(jié)。這種進(jìn)展規(guī)則可以是抽象規(guī)則(例如，關(guān)系、函數(shù)、迭代規(guī)則、或判定標(biāo)準(zhǔn))，參數(shù)的值根據(jù)該抽象規(guī)則而發(fā)展，而不需要間斷隨時間進(jìn)行的初級分離序列。因此，具體地，可以調(diào)節(jié)表示單獨的次級分離序列的參數(shù)。但是，附加地或可替換地，在用戶和/或控制單元的控制下，還可以執(zhí)行對初級分離序列的調(diào)節(jié)。在實施例中，多個次級分離序列中的至少兩個(特別是每一個)與被限定為梯度曲線的參數(shù)化的形狀關(guān)系有關(guān)，梯度曲線從第一局部極值(作為參照點，例如局部最小或基值、或局部最大或頂值)開始、隨后升高或降低到第二局部極值(作為另一參考點，例如局部最大或頂值、或局部最小或基值)、然后降低或升高到下一個第一局部極值(局部最小或局部最大值)，其中，參數(shù)化的梯度曲線的相應(yīng)參數(shù)的至少一部分隨著初級分離序列的進(jìn)展而調(diào)節(jié)。更具體地，多個次級分離序列中的至少兩個(特別是每一個)與被限定為梯度曲線的參數(shù)化的形狀關(guān)系有關(guān)，梯度曲線從基點開始、隨后升高到頂點、然后降低到下一個基點，其中，參數(shù)化的梯度曲線的相應(yīng)參數(shù)的至少一部分隨著初級分離序列的進(jìn)展而調(diào)節(jié)。因此，上述形狀關(guān)系可以以抽象術(shù)語來限定色譜法梯度運行。在此實施例中，參數(shù)可以是在基點的溶劑成分、在頂點的溶劑成分、梯度的斜率、從底點行進(jìn)到頂點的時間段等。例如，對于每個其他的次級分離序列，基點的溶劑成分可以根據(jù)連續(xù)增加函數(shù)沿著初級分離進(jìn)程進(jìn)行調(diào)節(jié)。在可替換實施例中，還可以是多個次級分離序列中的至少兩個(特別是每一個)與被限定為梯度曲線的參數(shù)化的形狀關(guān)系有關(guān)，梯度曲線從頂點開始、隨后降低到基點、然后升高到下一個頂點，其中，參數(shù)化的梯度曲線的相應(yīng)參數(shù)的至少一部分隨著初級分離序列的進(jìn)展而調(diào)節(jié)。此實施例可以涉及與前一實施例相比沿著相反方向的梯度運行(例如，從95%至40%)的情況(例如，對于親水作用液相色譜法(HILIC)的情況)。在另一可替換實施例中，次級分離序列的參考點不需要是局部極值(即，局部最小值或最大值)，而是還可以與序列中在梯度曲線中產(chǎn)生彎折(即，梯度曲線的一階導(dǎo)數(shù)不連續(xù)的位置)等的位置有關(guān)。在該彎折之前和之后，梯度曲線的一階導(dǎo)數(shù)的代數(shù)符號可以相同，其在，梯度曲線的一階導(dǎo)數(shù)的代數(shù)符號在局部極值處改變。
在實施例中，控制裝置構(gòu)造成使得第一局部極值(基點和/或頂點)經(jīng)調(diào)節(jié)而在多個次級分離序列中的不同次級分離序列之間不同，特別是沿著相繼的多個次級分離序列連續(xù)增大(或可替換地連續(xù)減小)。也就是說，某一次級分離序列在初級測量時間段內(nèi)越晚，則基點將越高，次級分離序列在該基點處開始以進(jìn)行第二維度中的下一次梯度運行。在實施例中，初級分離序列與被限定為從第一局部極值開始、隨后升高或降低到第二局部極值、然后降低或升高到第一局部極值的梯度曲線的參數(shù)化的形狀關(guān)系有關(guān)。更具體地，初級分離序列還與被限定為從基點開始、隨后升高到頂點、然后降低到基點的梯度曲線的參數(shù)化的形狀關(guān)系有關(guān)，或者反之亦然。因此，不僅次級分離序列可以被參數(shù)化，而且第一分離序列也可以由同樣可調(diào)節(jié)的一個或多個參數(shù)限定。從而，系統(tǒng)的靈活性可以進(jìn)一步提聞。在實施例中，控制裝置包括確定單元，該確定單元構(gòu)造成確定二維繪圖，二維繪圖表示流體樣品沿著第一維度分離成多個分部、并且用于表示分離的多個分部沿著第二維度分離成多個子分部。在此實施例中，二維繪圖可以顯示在顯示裝置(例如監(jiān)視器)上，以使得用戶可以從視覺上獲知流體樣品分離的結(jié)果。兩個維度或軸可以垂直，以使得可以例如沿著橫軸繪制根據(jù)第一分離單元的分離、以及由此的第一分離標(biāo)準(zhǔn)，而第二分離單元的分離可以沿著縱軸繪制，或者反之亦然。然后，可以觀察到每個分部或子分部，作為該二維坐標(biāo)系中的某一峰值或點。在實施例中，控制裝置構(gòu)造成根據(jù)規(guī)則或優(yōu)化算法來調(diào)節(jié)至少一個參數(shù)以增加均一性程度，子分部根據(jù)該均一性程度沿著二維繪圖的二維區(qū)域進(jìn)行分布。因此，可以執(zhí)行對一個或多個參數(shù)的調(diào)節(jié)，以更好地使用繪圖的可獲得的二維顯示區(qū)域。通過跳過或快速掃描期望或預(yù)計沒有峰值、沒有感興趣的峰值、或者僅有非常小密度的峰值的顯示區(qū)域，可以更有效地使用測量資源。在實施例中，控制裝置構(gòu)造成調(diào)節(jié)至少一個參數(shù)，以沿著二維繪圖的二維區(qū)域均等地分布子分部。峰值在二維顯示區(qū)域中的這種均等分布好像在第一視圖中控制的。因此，為了向用戶表示已經(jīng)由于調(diào)節(jié)參數(shù)而執(zhí)行對軸線的重新標(biāo)度，通過標(biāo)記或者采用由色碼顯示出這種顯示密度的條可以沿著軸示出沿著兩個軸中一者的表示偏離線性表示的相應(yīng)函數(shù)。在實施例中，控制裝置構(gòu)造成確定表征在二維繪圖的二維區(qū)域中與子分部有關(guān)的峰值的至少一個局部低密度區(qū)域的信息，并且控制裝置構(gòu)造成調(diào)節(jié)至少一個參數(shù)，以使得由于調(diào)節(jié)而引起峰值的密度在二維繪圖的至少一個局部低密度區(qū)域中增大(可以在至少一個高密度區(qū)域中減小)。通過采用這種措施，未充分使用的顯示區(qū)域資源可以被檢測到，分離序列可以經(jīng)調(diào)節(jié)以更有效地使用這些顯示區(qū)域。在實施例中，控制裝置構(gòu)造成根據(jù)用戶輸入來調(diào)節(jié)至少一個參數(shù)。因此，例如在用于只對與某一部分的分部有關(guān)的信息感興趣、而對其他分部或子分部不感興趣的情況下，還可以根據(jù)用戶偏好或用戶選擇來執(zhí)行次級分離序列。然后，測量可以集中于這些感興趣的點，之后可以更精確地或更快速地檢測這些感興趣的點。此外，通過由用戶相應(yīng)地調(diào)節(jié)參數(shù)(例如，梯度曲線的斜率、次級分離序列花費的時間、特定溶劑成分等)也可以調(diào)節(jié)單獨 的峰值的顯示特性。在實施例中，控制裝置構(gòu)造成在色譜法運行期間調(diào)節(jié)作為至少一個參數(shù)的溶劑成分。例如，這種溶劑可以是水和乙腈(ACN)的混合物。然后，溶劑成分是這兩種(或更多)溶劑之間的比率，例如水和ACN之間的比率。這種比率以及溶劑成分隨著時間改變所依據(jù)的特性可以被參數(shù)化并隨著初級分離序列的進(jìn)展進(jìn)行調(diào)節(jié)。在實施例中，控制裝置構(gòu)造成在色譜法運行期間調(diào)節(jié)作為至少一個參數(shù)的時間體積比特性(特別是流率)。例如，時間可以表示測量時間段的擴展。體積或體積相關(guān)參數(shù)可以是任意流體體積，例如流動相和/或流體樣品的流體體積。通過調(diào)節(jié)時間和體積之間的關(guān)系，可以調(diào)節(jié)流率。在實施例中，控制裝置構(gòu)造成調(diào)節(jié)作為至少一個參數(shù)的第一分離單元和/或第二分離的溫度。因此，外部參數(shù)(例如溫度或者甚至壓力)也可以針對分離單元進(jìn)行調(diào)節(jié)，以修改由兩個至少部分正交的分離過程所應(yīng)用的分離標(biāo)準(zhǔn)。在下文中，將說明樣品分離系統(tǒng)的其他示例性實施例。但是，這些實施例也可以應(yīng)用于控制裝置、方法、以及軟件程序或產(chǎn)品。在實施例中，第一分離單元和第二分離單元構(gòu)造成根據(jù)不同的分離標(biāo)準(zhǔn)(特別是根據(jù)至少部分正交但并非完全正交的分離標(biāo)準(zhǔn))執(zhí)行分別的樣品分離。在此背景下，術(shù)語“正交”可以具體表示在二維液相色譜法系統(tǒng)中兩個不同的分離標(biāo)準(zhǔn)完全解耦的通常但并不非常精確的理解。實際上并非如此，因為例如相對于質(zhì)量的分離和相對于顆粒(例如分子)體積的分離并不完全獨立。本發(fā)明的示例性實施例受益于這種認(rèn)知，并提出在考慮到兩個分離單元的分離標(biāo)準(zhǔn)并不完全彼此獨立的事實的情況下調(diào)節(jié)參數(shù)。這對于二維色譜圖中獲得高密度分部的可能性高于其他區(qū)域的區(qū)域有影響。這可以通過調(diào)節(jié)參數(shù)來解決。在實施例中，第一分離單元和第二分離單元構(gòu)造成在同一分離介質(zhì)上執(zhí)行分別的樣品分離、但是具有不同的操作條件。這些操作條件可以是不同溶劑、不同斜率的洗脫梯度、不同的柱溫度、不同的流動和/或不同的壓力，以使得分離標(biāo)準(zhǔn)部分正交但并非完全正交。但是，并不是分離單元與非完全正交分離有關(guān)、或并不僅是分離單元與非完全正交分離有關(guān)，而是附加地或可替換地，可以通過使用類似的或者甚至相同的分離技術(shù)實現(xiàn)部分正交性，并通過調(diào)節(jié)裝置特性以獲得部分正交性。例如，可以兩次使用相同的分離柱，但是在不同的溫度下和/或采用不同的溶劑或溶劑成分來進(jìn)行操作。在實施例中，第一分離單元和第二分離單元構(gòu)造成在同一分離介質(zhì)上執(zhí)行分別的樣品分離、但是具有不同的操作條件，操作條件特別是由不同溶劑、不同斜率的洗脫梯度、不同的柱溫度、不同的流動和不同的壓力組成的群組中的至少一者，以使得分離標(biāo)準(zhǔn)部分正交但并非完全正交。但是，并不是分離單元與非完全正交分離有關(guān)、或并不僅是分離單元與非完全正交分離有關(guān)，而是附加地或可替換地，可以通過使用類似的或者甚至相同的分離技術(shù)實現(xiàn)部分正交性，并通過調(diào)節(jié)裝置特性以獲得部分正交性。例如，可以兩次使用相同的分離柱，但是在不同的溫度下和/或采用不同的溶劑或溶劑成分來進(jìn)行操作。在實施例中，第一分離單元和第二分離單元中的至少一者構(gòu)造成根據(jù)由液相色譜法、超臨界流體色譜法、毛細(xì)管電色譜法、電泳和氣相色譜法組成的群組中的一者來執(zhí)行分離。但是，也可以應(yīng)用其他分離技術(shù)。
在實施例中，樣品分離裝置構(gòu)造成二維液相色譜法樣品分離裝置?？梢詰?yīng)用所謂的中心切割方法。在這種操作模式中，僅針對特定區(qū)域特定地并單獨地執(zhí)行第二維度(與次級分離序列有關(guān))，例如因為沿著第一軸的分離已經(jīng)顯示出可能值得進(jìn)一步對相應(yīng)分部的子分部進(jìn)行分離。每個經(jīng)識別的分部可以由不同的第二維度操作條件或序列來分離。第一和/或第二分離單元可以填充有分離材料。這種分離材料也可以表示為固定相，這種分離材料可以是允許具有與樣品相互作用的可調(diào)節(jié)度以能夠分離這種樣品的不同成分的任意材料。分離材料可以是液相色譜柱填充材料或填充料，其包括由聚苯乙烯、沸石、聚乙烯醇、聚四氟乙烯、玻璃、聚合物粉末、二氧化硅、和硅膠、以及具有化學(xué)改性(涂覆、覆蓋等)表面的任意上述材料組成的群組中的至少一者。但是，例如由于填充材料和分析物的分部之間的不同類型的相互作用或親和性，可以使用具有使得分析物經(jīng)過該材料而被分離成不同成分的材料特性的任意填充材料。第一分離單元和第二分離單元組成的群組中的至少一者的至少一部分可以填充有流體分離材料，其中，流體分離材料可以包括具有在約O. Ιμπι至約50 μ m范圍內(nèi)的尺寸的球珠。因此，這些球珠可以是可填充在微流體裝置的分離部分內(nèi)部的小顆粒。球珠可以具有孔，孔具有在約O. 01 μ m至約O. 2 μ m范圍內(nèi)的尺寸。流體樣品可以經(jīng)過孔，其中，在流體樣品和孔的表面之間產(chǎn)生相互作用。樣品分離裝置可以構(gòu)造成用于分離樣品的成分的流體分離系統(tǒng)。當(dāng)例如通過施加高壓使包括流體樣品的流動相經(jīng)過流體裝置時，柱的填充物和流體樣品之間的相互作用可以實現(xiàn)分離樣品的不同成分，如在液相色譜法裝置中所執(zhí)行的。但是，樣品分離裝置還可以構(gòu)造成用于凈化流體樣品的流體凈化系統(tǒng)。通過在空間中分離流體樣品的不同分部，可以對多成分樣品(例如蛋白質(zhì)溶液)進(jìn)行凈化。當(dāng)在生化實驗室中已經(jīng)制備蛋白質(zhì)溶液時，蛋白質(zhì)溶液仍然可以包括多個成分。例如，如果只對該多成分液體中的單一蛋白質(zhì)感興趣，可以使得樣品經(jīng)過柱。由于不同蛋白質(zhì)分部與(例如，使用凝膠電泳裝置或液相色譜法裝置的)柱的填充物的不同相互作用，不同的樣品可以被區(qū)分開，一個樣品或一組材料可以被選擇性地隔離，作為經(jīng)凈化樣品?？梢栽诓煌募夹g(shù)環(huán)境中實現(xiàn)樣品分離裝置，例如傳感器裝置、測試裝置、用戶化學(xué)、生物和/或藥物分析的裝置、毛細(xì)管電泳裝置、毛細(xì)管電色譜法裝置、液相色譜法裝置、氣相色譜法裝置、電子測量裝置、或質(zhì)譜法裝置。具體地，第一維度可以是高效液相色譜法(HPLC)裝置，可以對分析物的不同分部進(jìn)行分離、檢驗和/或分析。樣品分離單元構(gòu)件可以是用于分離流體樣品的成分的色譜柱。因此，可以在液相色譜法裝置的背景下具體實現(xiàn)示例性實施例。樣品分離裝置可以被構(gòu)造成以高壓(特別是至少600bar，更具體地是至少1200bar)引導(dǎo)流動相經(jīng)過系統(tǒng)。樣品分離裝置可以構(gòu)造成微流體裝置。術(shù)語“微流體裝置”可以具體表示本文描述的流體裝置，該流體裝置能夠傳送流體經(jīng)過微通道，微通道具有的尺度小于500 μ m的數(shù)量級(特別是小于200 μ m,更具體地是小于100 μ m、或小于50 μ m或更小)。樣品分離裝置還可以被構(gòu)造成納流體裝置。術(shù)語“納流體裝置”可以具體表示本文描述的流體裝置，該流體裝置能夠傳送流體經(jīng)過納米通道，納米通道具有比微通道更小的尺寸。


通過參照下列對本發(fā)明的更詳細(xì)描述以及附圖可以更容易領(lǐng)會并更好地理解本發(fā)明的實施例的其他目標(biāo)和很多相伴的優(yōu)點。實質(zhì)上或功能上等效或類似的特征將由相同的附圖標(biāo)記表示。圖I示出根據(jù)示例性實施例的二維液相色譜法系統(tǒng)。圖2示出根據(jù)本發(fā)明的示例性實施例的具有控制裝置的用于二維液相色譜法的樣品分離裝置。圖3示出表示作為從二維液相色譜法獲得的流體樣品的經(jīng)分離分部和子分部的示圖。圖4示出表示由二維液相色譜法裝置(作為圖2中所示的裝置)中的第一液相色譜柱所執(zhí)行的初級分離序列的示圖。圖5示出表示在與圖4有關(guān)的液相色譜分析期間當(dāng)操作第二色譜柱時所執(zhí)行的多個次級分離序列的示圖。圖6示出表示具有與圖5中不同的其他參數(shù)的第二分離柱的可替換操作的另一示圖。圖7示出由二維液相色譜法裝置的上游色譜柱所執(zhí)行的初級分離序列的另一示例。圖8示出與圖7的初級分離序列有關(guān)的次級分離序列的相應(yīng)順序并且示出各種參數(shù)，各種參數(shù)可修改以隨著根據(jù)圖7的初級分離序列的進(jìn)展來調(diào)節(jié)次級分離序列。圖9示出疊加的多個次級分離序列，以表示參數(shù)如何隨著各種次級分離序列而連續(xù)改變。圖10示出與圖3的示圖類似的示圖，其中，繪制出次級分離序列的參數(shù)修改對峰值位置的影響以及對控制可獲得的顯示區(qū)域的影響。圖11示出繪制根據(jù)本發(fā)明的示例性實施例的共用二維色譜法的初級分離序列和多個次級分離序列的示圖。圖12示出表示用于根據(jù)圖11的多個次級分離序列的形狀函數(shù)的圖。
圖13示出表示發(fā)展函數(shù)的示圖，發(fā)展函數(shù)限定用于根據(jù)圖11和圖12的多個次級分離序列的形狀函數(shù)的參數(shù)的發(fā)展。附圖中的示例是示意性的。
具體實施方式
在二維分離技術(shù)的實施例中，第一維度分離的過程伴隨有沿著第二維度對參數(shù)的連續(xù)或逐漸調(diào)節(jié)。在下文中，將提及本發(fā)明人的某些基本概念，根據(jù)這些基本概念開發(fā)出本發(fā)明的實施例。在實施例中，提供二維液相色譜法(2D-LC)系統(tǒng)，第二維度梯度適應(yīng)于實際第一維度條件。也就是說，在第一維度運行一梯度時，第二維度參數(shù)可以偏移。在二維色譜法系統(tǒng)中，通常獨立地對分別的分離進(jìn)行優(yōu)化。為了優(yōu)化最大峰容量(PC)，優(yōu)選的目標(biāo)是實現(xiàn)兩個維度中的正交分離。只有那時，理論上可實現(xiàn)的最大pc值等于第一維度的PC值PC-Ist和第二維度中的PC值pc-2nd的乘積pc = pc-lst*pc_2nd但是實際上這經(jīng)常沒有實現(xiàn)?？色@得的固定相或樣品成分的特性中的限制通常導(dǎo)致在兩個分別的分離中發(fā)現(xiàn)某些共同的成分。在很多實例中，可以發(fā)現(xiàn)存在很大程度的共同性。峰值在整個顯示空間上非隨機地分配，但是較多峰值布置成緊密圍繞中心線。在很多情況下，峰值洗脫在第一維度中較早而在第二維度中非常晚的可能性很小。同樣地，在第一維度中較晚的峰值洗脫在第二維度中的較早洗脫的可能性低。相應(yīng)地，采用兩個分別的分離維度的非常獨立的操作，一個分離維度會失去調(diào)諧能力。首先從第二維度開始，為了滿足Nyquist采樣標(biāo)準(zhǔn)，期望盡可能快地運行。所以可以采用非常短的分析周期1.為了在第二維度柱的開始具有足夠的堆集，可能期望慢速開始并具有梯度。2.為了確保在下一周期之前第二維度柱被清潔，可能將洗脫強度提高至最大。自然的結(jié)果是將會在全跨度中運行快速維度，對于RP(反相)分離，通常在最大速度下0%至100%有機物。根據(jù)本發(fā)明的示例性實施例，樣品分離系統(tǒng)的調(diào)諧型控制允許組合來自兩個維度的方法。在存在給出的很大程度非正交性的情況下，通過2D繪圖中空的區(qū)域可以被使用并填充有峰值的事實，該依賴性操作可以增加峰容量?；旧?，用戶可以縮放到實際存在感興趣的峰值的區(qū)域中，沿著給定的區(qū)域散布這些給定的峰值。要點是用于第二維度的方法可以以支持調(diào)諧型參數(shù)的方式建立。代替參數(shù)列表，該特定第二方法現(xiàn)在包括受控變量(在還依據(jù)參數(shù)和參數(shù)化討論的該應(yīng)用的其他部分中)。在下文中，討論兩種情況情況I :作為簡單示例，這種變量可以是第二維度柱的柱溫度。例如，用戶采用不同的柱在兩個維度中進(jìn)行RPxRP分離。存在一個柱能夠分離在另一個柱上沒有分離的物質(zhì)的一定幾率，反之亦然。在這種狀況下，可以沿著第一維度時間，被調(diào)制到第二維度中的預(yù)先選擇的物質(zhì)然后在第二維度梯度中選擇性地相當(dāng)晚地洗脫。如果用戶現(xiàn)在將第二維度柱中的柱溫度安排成從一次第二維度運行到另一次第二維度運行逐漸增高，則可以調(diào)動后來的樣品組更早地洗脫。即使在高溫下，某些樣品組仍然可以更晚洗脫。所以可以有利地增大峰容量。
情況2 :可以具有偏移梯度。假設(shè)用戶采用不同的柱在兩個維度中進(jìn)行RPxRP分離的情況，但是現(xiàn)在用戶命令在梯度設(shè)定上偏移。因為在第一維度時間的早期調(diào)制的峰值群顯示出較少保留(否則峰值群將不會較早顯示)，用戶可以不需要一直運行到100%有機物以清潔第二維度柱。所以用戶將指示第二維度梯度初始傾斜O(jiān)至60%有機物，而對于相繼的第二維度運行，將組合物的頂端從60%至100%逐漸增加到具有O至100%梯度的最終階段。以此方式，通過更平坦的梯度洗脫可以獲益，更好地分離低保留峰值群(例如填充顯示區(qū)域的左上區(qū)域)，而與此同時，可以接近第一維度運行結(jié)束采用更強的洗脫。類似地，可以通過使第二維度梯度的初始值偏移而獲益。盡管用戶可以在有機物中慢速開始以實現(xiàn)表現(xiàn)出低保留性，在約10% B的基質(zhì)中洗脫，仍然在之后的第一維度運行時間中實現(xiàn)足夠的堆集，其中峰值在50% B的基質(zhì)中洗脫。所以用戶可以指示第二維度梯度初始傾斜O(jiān)至100%有機物，而對于相繼的第二維度運行，用戶可以將組合物的低端逐漸增加到40至100%。以此方式，用戶可以通過更平坦的梯度洗脫而獲益，更好的分離低保留峰值群，這時更接近第一維度運行結(jié)束時實現(xiàn)更快速的第二維度洗脫(例如填充顯示區(qū) 域的右下區(qū)域)。現(xiàn)在更詳細(xì)地參照附圖，圖I示出液體分離系統(tǒng)10的一般性示意圖。第一泵20接收來自第一溶劑供應(yīng)源25的通常經(jīng)過第一脫氣器27的流動相(也表示為流體)，第一脫氣器27進(jìn)行脫氣并因此減少流動相中的溶解氣體的量。第一泵20(作為流動相驅(qū)動裝置)驅(qū)動流動相經(jīng)過包括固定相的第一分離裝置30 (例如色譜柱)。采用單元40可以設(shè)置在第一泵20和第一分離裝置30之間以將樣品流體(也表示為流體樣品)接受或增加(通常稱作樣品引入)到流動相中。第一分離裝置30的固定相構(gòu)造成分離樣品液體的化合物。第二泵20’接收來自第二溶劑供應(yīng)源25’的通常經(jīng)過第二脫氣器27’的另一流動相(也表示為流體)，第二脫氣器27’進(jìn)行脫氣并因此減少另一流動相中的溶解氣體的量。通過流體閥90，圖I的二維液相色譜法系統(tǒng)10的第一維度(附圖標(biāo)記20、30、……)可以流體聯(lián)接到第二維度(附圖標(biāo)記20’、30’、……)。流體樣品被第一維度分離成多個分部，每個分部或分部的一部分/切片被調(diào)制到第二分離路徑中并進(jìn)一步由第二維度分離成多個子分部。檢測器50設(shè)置為對樣品流體的分離化合物進(jìn)行檢測。光學(xué)另一檢測器55設(shè)置在閥90的上游，并且可以用于在中心切割(heart-cutting)操作中操作裝置10。分餾單元60可以設(shè)置成輸出樣品流體的分離化合物。盡管每個流動相可以僅有一種溶劑組成，但是每個流動相還可以由多個溶劑混合成。這種混合可以是低壓混合并設(shè)置在泵20、20’的上游，以使得各個泵20、20’已經(jīng)接收并泵送作為流動相的混合溶劑?？商鎿Q地，泵20、20’可以由多個單獨的泵送單元組成，其中多個泵送單元中的每一者接收并泵送不同的溶劑或混合物，以使得在高壓下在泵20、20’ (或泵20、20’的一部分)的下游產(chǎn)生流動相的混合(由分別的分離裝置30、30’接收)。流動相的成分(混合)可以隨著時間保持恒定(所謂的等度模式)或者隨著時間改變(所謂的梯度模式)。數(shù)據(jù)處理單元70可以是常規(guī)PC或工作站，數(shù)據(jù)處理單元70可以聯(lián)接到液體分離系統(tǒng)10中的一個或多個裝置，以接收信息和/或控制操作。例如，數(shù)據(jù)處理單元70可以控制泵20、20’的操作(例如，設(shè)定控制參數(shù))并從泵20、20’接收有關(guān)實際工作狀況的信息(例如，泵的出口處的輸出壓力、流率等)。數(shù)據(jù)處理單元70還可以控制溶劑供應(yīng)源25、25’的操作(例如，設(shè)定待供應(yīng)的一種或多種溶劑或溶劑混合物)和/或脫氣器27、27’的操作(例如，設(shè)定控制參數(shù)，例如真空度等)，并且可以從溶劑供應(yīng)源25、25’和脫氣器27、27’接收有關(guān)實際工作狀況的信息(例如，隨著時間所供應(yīng)的溶劑成分、流率、真空度等)。數(shù)據(jù)處理單元70還可以控制采樣單元40的操作(例如，控制樣品注入或使樣品注入與泵20的操作條件同步)。分別的分離裝置30、30’也可以由數(shù)據(jù)處理單元70控制(例如，選擇特定流路或柱、設(shè)定操作溫度等)，并作為回應(yīng)將信息(例如操作條件)發(fā)送至數(shù)據(jù)處理單元70。相應(yīng)地，檢測器50可以由數(shù)據(jù)處理單元70控制(例如，關(guān)于頻譜或波長設(shè)定、設(shè)定時間常數(shù)、開始/停止數(shù)據(jù)獲取)，并將信息(例如，有關(guān)檢測到的樣品化合物)發(fā)送至數(shù)據(jù)處理單元70。數(shù)據(jù)處理單元70還可以控制分餾單元60的操作(例如，結(jié)合從檢測器50接收的數(shù)據(jù))并提供回數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)處理單元70可以包括存儲裝置75，存儲裝置75能夠存儲分析處理的全部或經(jīng)選擇的信息，并且還檢索來自之前的分析處理的存儲的信息(該信息可以對上述搜索操作有利)。
在下文中，參照圖2，將更詳細(xì)地說明根據(jù)本發(fā)明的示例性實施例的二維液相色譜法分尚系統(tǒng)200。在描述根據(jù)本發(fā)明的實施例的操作或控制模式之前，將描述二維液相色譜法裝置200的結(jié)構(gòu)。設(shè)置控制單元202，其可以是處理器(例如微處理器或中央處理器(CPU))或者一組處理器，控制單元202構(gòu)造成控制二維液相色譜法裝置200的整體操作。在多級方法中，某些或全部的單獨功能可以具有它們自己的處理器，以使得處理器由此進(jìn)行通信以執(zhí)行協(xié)定的功能(例如，使得第二維度泵能夠獲得有關(guān)第一維度的過程的信息)。如下文將更詳細(xì)描述的，控制單元202中央控制二維液相色譜法裝置200的所有其他組件。這在圖2中由虛線示出。提供第一維度泵204，其能夠?qū)⒂糜谝合嗌V法分離的期望的溶劑組合物泵送經(jīng)過圖2中所示的各種流體構(gòu)件。在自動進(jìn)樣器206中，待分離的流體樣品可以被注入到由第一維度泵204提供的流動相中。第一維度分離柱208布置在自動進(jìn)樣器206的下游。第一維度分離柱208對應(yīng)于圖I中所示的第一分離單元30。梯度運行或者任意其他操作模式(例如等度模式)可以應(yīng)用于將流體樣品分離成不同的分部，然后不同的分部將經(jīng)過第一維度柱208下游的進(jìn)一步分離。由此，如圖2中虛線所示，分離的分部可以被導(dǎo)入到具有不同流體端口的第一流體閥210中。此外，在圖2中的第一流體閥210處示出很多弓形槽，根據(jù)第一流體閥210的切換狀態(tài)，弓形槽與端口中的特定一者流體互連。第一流體閥210由兩個閥構(gòu)件(轉(zhuǎn)子和定子)形成，一個閥構(gòu)件具有端口，另一個閥構(gòu)件具有槽?？商鎿Q地，可以用兩個轉(zhuǎn)子形成第一流體閥210，每個轉(zhuǎn)子具有獨立的運動裝置。可替換地，通過連接的開/關(guān)閥的組合可以實現(xiàn)閥功能。在圖2所示的操作模式中，在第一維度柱208下游的分離的流體樣品分部隨后被引導(dǎo)經(jīng)過第一流體閥210進(jìn)入第一環(huán)路218 (第一環(huán)路218例如具有20μ I的體積)。當(dāng)經(jīng)過環(huán)路218時，分離的流體樣品推動環(huán)路的內(nèi)含物經(jīng)過第二流體閥216，第二流體閥216與第一流體閥210類似地構(gòu)成。由此，第一環(huán)路218的原始內(nèi)含物可以被引導(dǎo)至廢物容器220。對于綜合2D-LC操作，期望不浪費任意原始樣品物質(zhì)。以此方式，樣品化合物的定量化能夠被校正。
但是，在相應(yīng)地對閥210、216進(jìn)行切換之后，流體樣品在被第一分離柱208分離成多個分部之后，可以被引導(dǎo)經(jīng)過第二環(huán)路214(第二環(huán)路214具有例如20μ I的內(nèi)部容積)，而與此同時，第二維度泵212驅(qū)動第一環(huán)路218的實際內(nèi)含物(前一分部的切片)由此經(jīng)過第二流體閥216到達(dá)第二維度分離柱222中。在圖示的實施例中，如虛線框所示，第二維度柱222可以布置在烘箱中，以在第二維度分離期間被加熱到例如70°C的溫度。在經(jīng)過第二維度柱222時，已經(jīng)被第一維度柱208分離的流體樣品的每個分部可以進(jìn)一步分離成多個子分部，多個子分部然后可以被傳送到檢測器224以單獨地進(jìn)行檢測和/或定量化。在下文中，將更詳細(xì)地描述樣品分離裝置200的控制。裝置200包括用戶界面250，用戶界面250與控制單元202雙向聯(lián)接，并且用戶界面250適合于使用戶能夠選擇待執(zhí)行的某一色譜方法、并且在顯示裝置(例如，液晶顯示器、陰極射線管、等離子體顯示器等)上以視覺方式顯示該方法或操作模式以及測量結(jié)果。這種用戶界面250可以包括輸入單元(例如，觸感屏、操作桿、鍵盤、按鈕等)，以使得用戶能夠向控制單元202輸入命令、參數(shù)、數(shù)據(jù)和指令。采用這種用戶界面250，用戶可以以便利的方式設(shè)計、存儲和記錄操作裝置200的方法。 樣品分離裝置200經(jīng)構(gòu)造以使得在第一維度柱208上執(zhí)行的初級分離序列和在第二維度柱222上執(zhí)行的次級分離序列形成封閉的共同單一色譜方法的一部分，由對樣品分離的封閉的單一共同規(guī)范(或描述)(包括一組參數(shù))來限定該封閉的共同單一色譜方法。也就是說，應(yīng)用的色譜方法的體系使得第一和第二維度分離集成在一起并不可分割。因此，在整體分離過程中或者在測量時間段中，可以防止分離方法在執(zhí)行樣品分離的過程中或者在測量時間段中需要由用戶改變，這對于用戶來說是麻煩的。在第二分離序列方面，該色譜方法的特征在于參數(shù)化的形狀函數(shù)(例如參見圖12)，該形狀函數(shù)一致地限定為用于至少兩個或全部的次級分離序列，S卩，次級分離序列在重復(fù)多次以將分部分離成子分部時限定溶劑成分的時間相依性的一般形狀。用戶可以選擇的一個或多個形狀函數(shù)可以被存儲在形狀函數(shù)數(shù)據(jù)庫252中，控制單元202可以訪問形狀函數(shù)數(shù)據(jù)庫252。形狀函數(shù)被參數(shù)化，這表示只有形狀函數(shù)的一般形狀被預(yù)先確定，而可以選擇很多參數(shù)以對于每個第二分離序列單獨地分別考慮形狀函數(shù)。這些參數(shù)可以在發(fā)展指令方面進(jìn)行描述并從發(fā)展指令得出，發(fā)展指令沿著第一分離序列的進(jìn)程限定形狀函數(shù)的參數(shù)。可以借助發(fā)展函數(shù)數(shù)據(jù)庫254中存儲的發(fā)展函數(shù)(例如參見圖13)來限定這種發(fā)展指令，發(fā)展函數(shù)限定參數(shù)的發(fā)展。還可以是，借助于發(fā)展數(shù)據(jù)庫256中存儲的具體參數(shù)值來限定發(fā)展指令(發(fā)展數(shù)據(jù)庫256對于每個次級序列限定單獨的參數(shù)組，該參數(shù)組分別考慮或限定相應(yīng)的次級分離序列)。通過這種使得控制單元202能夠訪問預(yù)先填充的或用戶定義的數(shù)據(jù)庫252、254、256以沿著初級分離序列的進(jìn)程調(diào)整次級分離序列的方法，使得2D色譜法系統(tǒng)的第二維度的適應(yīng)性非常用戶友好，從而對于用戶來說并非必需人工選擇數(shù)十、數(shù)百或數(shù)千參數(shù)。圖3現(xiàn)在示出可以利用類似圖2中所示的布置獲得的二維色譜圖。沿著橫軸302，繪制第一保留時間(即，表示第一維度柱208的分離性能)。因此，沿著圖300中的橫軸302布置不同的分部。沿著圖300的縱軸304，繪制出各自與某一分部相關(guān)的子分部，該子分部將由第二維度柱222進(jìn)一步分離。從圖3可以看出，在接近對稱軸306處(即，在圖300的二維繪制區(qū)域的中央部分中)存在相應(yīng)峰值308(各自與某一子分部相關(guān))的聚集。與此相反，在區(qū)域310和312中，幾乎沒有可見的峰值或者僅有幾個可見的峰值。相應(yīng)地，為區(qū)域310和312花費的測量時間沒有有效地利用。這背后的原因是由第一維度柱208和由第二維度柱222應(yīng)用的兩個分離標(biāo)準(zhǔn)不同，但是彼此沒有完全獨立。可以這樣講，兩個分離標(biāo)準(zhǔn)共用共同的分量或矢量。根據(jù)這種認(rèn)知，可以以下列方式構(gòu)造控制單元302，使得尤其是第二維度柱222的分離過程經(jīng)調(diào)整，以使得圖3中的繪制區(qū)域可以被更有效地利用(即，測量時間以及因此的測量區(qū)域310、312所需要的資源被利用、和/或這種測量區(qū)域被用于繪制圖300的具有更好選擇性和/或更高精度的(即，在不同的峰值之間具有更大的距離并因此具有更好的分辨率)感興趣部分)。為此，控制裝置202控制第一維度柱208以在測量時間段420 (測量時間段420對應(yīng)于沿著圖3中的橫軸302所示的約30分鐘)內(nèi)執(zhí)行初級分離序列，以將流體樣品分離成多個分部。圖4中示出表征初級分離序列的處理流程的相應(yīng)的圖400。圖400具有橫軸402，沿著橫軸402繪制時間。沿著縱軸404，繪制溶劑成分，表示所述的色譜梯度運行的溶劑成 分的時間相依性。因此，從基準(zhǔn)的408開始，溶劑成分沿著線性梯度曲線410連續(xù)增加，直到到達(dá)頂點412為止。由此初級分離序列完成并且沿著基本豎直的線414返回到基準(zhǔn)點416，從而重新調(diào)整分離柱以為開始新的允許做準(zhǔn)備。因為液相色譜裝置200構(gòu)造成用于二維色譜法，控制裝置202還以更快速的方式控制第二維度柱222的操作，以使得在為圖4所示的初級分離序列花費的測量時間中執(zhí)行多個次級分離序列。這例如在圖5中更詳細(xì)地示出，圖5示出表示各種次級分離序列504、506,508,……的圖500，在控制裝置202的控制下在第二維度柱222中執(zhí)行各種次級分離序列504、506、508、……。沿著橫軸502，繪制出時間。沿著縱軸404’，還繪制出在作為次級分離序列所執(zhí)行的多個梯度運行期間溶劑成分的時間相依性。從圖5可以看出，在圖4所示的初級分離序列400的測量時間中，執(zhí)行多個次級分離序列504、506、508。通過這些次級分離序列504、506、508中的每一者，由第一維度柱208分離并由調(diào)節(jié)閥90分開的一個分部被第二維度柱222進(jìn)一步分尚成多個子分部。在圖5所示的實施例中，如附圖標(biāo)記510所示，各種梯度運行504、506、508、……
的基準(zhǔn)點連續(xù)增大。返回到圖3和區(qū)域310、312中的測量，通過使得控制裝置202以自作用方式或在用戶的控制下調(diào)節(jié)參數(shù)可以避免這種測量區(qū)域，各種次級分離序列(圖5中的504、506、508)根據(jù)該參數(shù)進(jìn)行操作。盡管在圖5中沒有用附圖標(biāo)記示出，但是這些梯度運行也可以由參數(shù)(例如，利用附圖標(biāo)記408、410、412、414、416對圖4的初級分離序列所示出的參數(shù))來識別。圖6示出替換圖600，替換圖600與圖500類似，除了各種次級分離序列602、604、606、……現(xiàn)在就它們各自沿著橫軸502延伸的參數(shù)方面受到控制。這將對圖300中峰值的分布具有其他影響。圖7示出圖700，圖700表示另一初級分離序列但是非常類似于圖4。根據(jù)該初級分離序列，可以在相應(yīng)的次級分離序列中修改的各種參數(shù)在圖8的圖800中示出，圖800具有縱軸802。具體地，可以對每個次級分離序列單獨調(diào)整圖示的參數(shù)X、y、z。
圖9示出不同觀察角度的情況。橫軸現(xiàn)在是第二維度時間，其中相繼的周期重疊。箭頭902表示第一維度分離的進(jìn)程。這里示出有利的實施例，其中次級分離序列的各種梯度運動的基準(zhǔn)點隨著測量時間段的前進(jìn)以及初級分離序列的前進(jìn)而連續(xù)增大。這通過箭頭902示意性示出，表示相繼的次級分離序列(1)、⑵、⑶、⑷和(5)的參數(shù)的發(fā)展。從圖10可以得出適當(dāng)參數(shù)化、以及沿著初級分離序列選擇用于次級分離序列的參數(shù)的影響。如這里雙箭頭所示，單獨的峰值308可以在相應(yīng)改變次級分離序列的參數(shù)之后偏移。圖11示出根據(jù)本發(fā)明的示例性實施例的初級分離序列1102和多個次級分離序列1104重疊的圖1100。沿著橫軸1106，繪制出時間。沿著圖1100的縱軸1108，繪制出溶劑成分(ACN)。區(qū)分出第一時間分段1120、第二時間分段1130、第三時間分段1140、以及第四時間分段1150。限定次級分離序列1104的梯度運行的基準(zhǔn)點或起始點的參數(shù)隨著初級分離序列1102的進(jìn)展而連續(xù)增大。圖12示出根據(jù)圖11的用于多個次級分離序列1102的形狀函數(shù)1202的圖1200。 沿著橫軸1204，繪制出時間。沿著圖1200的縱軸1206，繪制出溶劑成分(ACN)。由參數(shù)P1、P2、P3來限定參數(shù)化形狀函數(shù)1202。圖13示出根據(jù)圖11和圖12的示出發(fā)展函數(shù)1302的圖1300，發(fā)展函數(shù)1302限定用于多個次級分離序列1104的形狀函數(shù)1202的參數(shù)Pl至P3的發(fā)展。對于每個分段1120、1130、1140、1150，繪制出參數(shù)Pl至P3的分別的發(fā)展。參數(shù)Pl至P3在分段1120中保持恒定，在分段1130中略有增加，在分段1140中強烈增加，在分段1150中再次略有增加?？商鎿Q地，還可以是分別的形狀函數(shù)在參數(shù)Pl至P3的幅度方面以及在時間關(guān)系方面(例如參見圖5和圖6)單獨描述參數(shù)Pl至P3的發(fā)展。應(yīng)當(dāng)理解，多個次級分離序列隨著第一維度分離時間的進(jìn)展還可以由復(fù)雜數(shù)學(xué)項或函數(shù)限定，例如，形狀可以表示為一系列Bezier函數(shù)，它們的參數(shù)的前進(jìn)發(fā)展可以由三角函數(shù)(trigonomical function)限定?？商鎿Q地，控制單元202可以使用來自之前的分析運行的結(jié)果，以構(gòu)造相繼次級分離序列的優(yōu)化方案，目標(biāo)是更有效地利用分離空間。應(yīng)當(dāng)理解，術(shù)語“包括”并不排除其他元件或特征，冠詞“一”并不排除多個。此外，結(jié)合不同實施例而描述的元件可以組合。還應(yīng)當(dāng)理解，權(quán)利要求書中的附圖標(biāo)記不應(yīng)認(rèn)為是對權(quán)利要求的限制。
權(quán)利要求
1.一種樣品分離裝置的控制裝置，所述樣品分離裝置用于分離流體樣品，所述樣品分離裝置包括第一分離單元和第二分離單元，所述第一分離單元可被供應(yīng)待分離的流體樣品，所述第二分離單元在所述第一分離單元的下游并且可被供應(yīng)經(jīng)所述第一分離單元處理之后的流體樣品，其中，所述控制裝置被構(gòu)造成 控制所述第一分離單元在測量時間段內(nèi)執(zhí)行初級分離序列，以將所述流體樣品分離成多個分部； 控制所述第二分離單元在所述測量時間段內(nèi)執(zhí)行多個次級分離序列，以將經(jīng)分離的多個分部的至少一部分進(jìn)一步分離成多個子分部，其中，這些次級分離序列形成共用樣品分離方法的一部分，所述共用樣品分離方法由包括一組參數(shù)的、對樣品分離的共用規(guī)范來限定; 隨著所述初級分離序列的進(jìn)展，調(diào)節(jié)至少一個參數(shù)，所述多個次級分離序列中的至少一者是根據(jù)所述至少一個參數(shù)來執(zhí)行的。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的控制裝置，其中，對所述共用樣品分離方法的共用規(guī)范包括 參數(shù)化的形狀關(guān)系，它是對這些次級分離序列中的至少兩個序列一致地限定的，特別是對這些次級分離序列中全部的序列；和 發(fā)展指令，其隨著第一分離序列的進(jìn)展而限定用于這些次級分離序列中的所述至少兩個序列的形狀關(guān)系的參數(shù)，特別是這些次級分離序列中全部的序列。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的控制裝置，其中，所述發(fā)展指令包括由下列項構(gòu)成的群組中的一項 發(fā)展關(guān)系，特別是發(fā)展函數(shù)，所述發(fā)展關(guān)系限定參數(shù)的發(fā)展；和 用于發(fā)展數(shù)據(jù)庫中存儲的參數(shù)的漸進(jìn)參數(shù)值；和 根據(jù)此前的分析分離所得的數(shù)據(jù)所計算的樣品特定形狀和進(jìn)展。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的控制裝置，其中，所述初級分離序列形成與所述次級分離序列相同的共用樣品分離方法的一部分。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的控制裝置，其中，所述控制裝置構(gòu)造成調(diào)節(jié)至少一個參數(shù)，以使得作為所述多個次級分離序列的梯度運行執(zhí)行偏移，特別是連續(xù)偏移，而另一梯度運行作為所述初級分離序列來執(zhí)行。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的控制裝置，其中，所述多個次級分離序列和所述初級分離序列當(dāng)中的至少一者與色譜法梯度運行有關(guān)。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的控制裝置，其中，所述多個次級分離序列中的至少一者被參數(shù)化，其中，根據(jù)預(yù)定進(jìn)展規(guī)則，相應(yīng)參數(shù)的至少一部分隨著所述初級分離序列的進(jìn)展而被調(diào)節(jié)。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的控制裝置，其中，所述多個次級分離序列中的至少兩個序列，特別是每個序列，與被限定為梯度曲線的參數(shù)化的形狀關(guān)系有關(guān)，所述梯度曲線從第一局部極值開始、隨后升高或降低到第二局部極值、然后降低或升高到下一個第一局部極值，其中，這些參數(shù)化的梯度曲線的相應(yīng)參數(shù)的至少一部分隨著所述初級分離序列的進(jìn)展而被調(diào)節(jié)。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的控制裝置，其中，所述控制裝置構(gòu)造成使得所述第一局部極值被調(diào)節(jié)成對于所述多個次級分離序列中的不同序列而言不同，特別是沿著相繼的所述多個次級分離序列而連續(xù)增大或連續(xù)減小。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的控制裝置，其中，所述初級分離序列與下述參數(shù)化的形狀關(guān)系有關(guān)該形狀關(guān)系被限定為從第一局部極值開始、隨后升高或降低到第二局部極值、然后降低或升高到第一局部極值的梯度曲線。
11.根據(jù)權(quán)利要求I所述的控制裝置，包括確定單元，所述確定單元被構(gòu)造成確定二維繪圖，所述二維繪圖表示所述流體樣品沿著第一維度分離成多個分部、并且用于表示所分離的多個分部沿著第二維度分離成多個子分部。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的控制裝置，其中，所述控制裝置被構(gòu)造成調(diào)節(jié)所述至少一個參數(shù)以增加均一性程度，所述子分部是根據(jù)所述均一性程度在所述二維繪圖的二維區(qū)域上分布的。
13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的控制裝置，其中，所述控制裝置被構(gòu)造成調(diào)節(jié)所述至少一個參數(shù)，以在所述二維繪圖的二維區(qū)域上均等地分布這些子分部。
14.根據(jù)權(quán)利要求11所述的控制裝置，其中，所述控制裝置被構(gòu)造成確定表征在所述二維繪圖的二維區(qū)域上與這些子分部有關(guān)的峰值的至少一個局部低密度區(qū)域的信息，并且被構(gòu)造成調(diào)節(jié)所述至少一個參數(shù)，以使得由于此調(diào)節(jié)而引起峰值的密度在所述二維繪圖的所述至少一個局部低密度區(qū)域中增大。
15.根據(jù)權(quán)利要求I所述的控制裝置，其中，所述控制裝置被構(gòu)造成根據(jù)用戶輸入來調(diào)節(jié)所述至少一個參數(shù)。
16.根據(jù)權(quán)利要求I所述的控制裝置，包括下列特征中的至少一項 所述控制裝置被構(gòu)造成在色譜法運行期間調(diào)節(jié)作為所述至少一個參數(shù)的溶劑成分； 所述控制裝置被構(gòu)造成在色譜法運行期間調(diào)節(jié)作為所述至少一個參數(shù)的時間與體積關(guān)系特性，特別是流率； 所述控制裝置被構(gòu)造成調(diào)節(jié)作為所述至少一個參數(shù)的、由所述第一分離單元和所述第二分離單元組成的群組中的至少一者的溫度。
17.一種用于分離流體樣品的樣品分離裝置，所述樣品分離裝置包括 第一分離單元，其可被供應(yīng)待分離的流體樣品； 第二分離單元，其在所述第一分離單元的下游并且可被供應(yīng)經(jīng)所述第一分離單元處理之后的流體樣品； 根據(jù)權(quán)利要求I所述的控制裝置，其用于控制所述第一分離單元和所述第二分離單J Li ο
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的樣品分離裝置，包括下列特征中的至少一項 所述第一分離單元和所述第二分離單元被構(gòu)造成根據(jù)不同的分離標(biāo)準(zhǔn)來執(zhí)行各自的樣品分離，特別是根據(jù)至少部分正交但并非完全正交的分離標(biāo)準(zhǔn)； 所述第一分離單元和所述第二分離單元被構(gòu)造成對同一分離介質(zhì)但在不同的操作條件下執(zhí)行各自的樣品分離，所述不同的操作條件特別是由不同溶劑、不同斜率的洗脫梯度、不同的柱溫度、不同的壓力構(gòu)成的群組中的至少一者，以使得分離標(biāo)準(zhǔn)部分正交但并非完全正交； 所述第一分離單元和所述第二分離單元中的至少一者被構(gòu)造成根據(jù)由液相色譜法、超臨界流體色譜法、毛細(xì)管電色譜法、電泳和氣相色譜法構(gòu)成的群組中的一者來執(zhí)行分離；所述樣品分離裝置被構(gòu)造成二維液相色譜法樣品分離裝置； 所述樣品分離裝置被構(gòu)造成分析所述流體樣品的至少一個化合物的至少一個物理、化學(xué)和/或生物參數(shù)； 所述樣品分離裝置包括由色譜法裝置、液相色譜法裝置、HPLC裝置、氣相色譜法裝置、毛細(xì)管電色譜法裝置、電泳裝置、毛細(xì)管電泳裝置、凝膠電泳裝置和質(zhì)譜法裝置構(gòu)成的群組中的至少一者； 所述樣品分離裝置被構(gòu)造成以高壓力引導(dǎo)流體樣品； 所述樣品分離裝置被構(gòu)造成以至少IOObar的壓力引導(dǎo)流體樣品，特別是至少500bar，更特別地是至少IOOObar ； 所述樣品分離裝置被構(gòu)造成引導(dǎo)液態(tài)流體； 所述樣品分離裝置被構(gòu)造成微流體裝置； 所述樣品分離裝置被構(gòu)造成納流體裝置； 由所述第一分離單元和所述第二分離單元構(gòu)成的群組中的至少一者被構(gòu)造成保留所述流體樣品的一部分成分而允許所述流體樣品的其他成分通過； 由所述第一分離單元和所述第二分離單元構(gòu)成的群組中的至少一者包括分離柱； 由所述第一分離單元和所述第二分離單元構(gòu)成的群組中的至少一者包括色譜柱；由所述第一分離單元和所述第二分離單元構(gòu)成的群組中的至少一者的至少一部分填充有分離材料； 由所述第一分離單元和所述第二分離單元構(gòu)成的群組中的至少一者的至少一部分填充有分離材料，其中，所述分離材料包括尺寸在Ιμπι至50 μ m范圍內(nèi)的球珠； 由所述第一分離單元和所述第二分離單元構(gòu)成的群組中的至少一者的至少一部分填充有分離材料，其中，所述分離材料具有孔，所述孔的尺寸在Ο.ΟΙμπι至0.2μπι范圍內(nèi)。
19.一種通過第一分離單元和第二分離單元來分離流體樣品的方法，所述第一分離單元可被供應(yīng)待分離的流體樣品，所述第二分離單元在所述第一分離單元下游并且可被供應(yīng)經(jīng)所述第一分離單元處理之后的流體樣品，其中，所述方法包括 控制所述第一分離單元在測量時間段內(nèi)執(zhí)行初級分離序列，以將所述流體樣品分離成多個分部； 控制所述第二分離單元在所述測量時間段內(nèi)執(zhí)行多個次級分離序列，以將所分離的多個分部的至少一部分進(jìn)一步分離成多個子分部，其中，所述次級分離序列形成共用樣品分離方法的一部分，所述共用樣品分離方法由包括一組參數(shù)的、對樣品分離的共用規(guī)范來限定; 隨著所述初級分離序列的進(jìn)展，調(diào)節(jié)至少一個參數(shù)，所述多個次級分離序列中的至少一者是根據(jù)所述至少一個參數(shù)來執(zhí)行的。
20.一種存儲在數(shù)據(jù)載體上、并且當(dāng)在數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)上運行時用于執(zhí)行根據(jù)權(quán)利要求19的方法的軟件程序或產(chǎn)品。
全文摘要
本發(fā)明涉及使第二維度梯度適應(yīng)實際第一維度條件的偏移二維分離。提供了用于樣品分離裝置的控制裝置，包括第一分離單元和第二分離單元，第二分離單元位于第一分離單元下游并被供應(yīng)經(jīng)第一分離單元處理之后的流體樣品?？刂蒲b置構(gòu)造成控制第一分離單元在時間段內(nèi)執(zhí)行初級分離序列，以將流體樣品分離成分部；并控制第二分離單元在時間段內(nèi)執(zhí)行次級分離序列，以將分離的分部進(jìn)一步分離成子分部，其中，次級分離序列形成共用樣品分離方法的一部分，共用樣品分離方法由包括一組參數(shù)的、對樣品分離的共用規(guī)范來限定；隨著初級分離序列的進(jìn)展，調(diào)節(jié)至少一個參數(shù)，多個次級分離序列中的至少一者是根據(jù)該至少一個參數(shù)來執(zhí)行的。
文檔編號G01N30/06GK102866216SQ201210237370
公開日2013年1月9日 申請日期2012年7月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月8日
發(fā)明者克勞斯·威特 申請人:安捷倫科技有限公司