專(zhuān)利名稱(chēng)：一種快速檢測(cè)液態(tài)飲品中噻菌靈殘留量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食品農(nóng)藥殘留分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及農(nóng)藥噻菌靈的檢測(cè)方法，特別涉及一種快速檢測(cè)液態(tài)飲品中噻菌靈殘留量的方法。
背景技術(shù)：
噻菌靈屬苯并咪唑類(lèi)殺菌劑，是高效、廣譜的內(nèi)吸性殺菌劑，常用于蔬菜、水果的防腐保鮮。由于生產(chǎn)過(guò)程的不規(guī)范以及噻菌靈本身自然降解速度慢等原因，容易在水果、蔬菜及相應(yīng)的果蔬飲品中殘留。這些殘留的噻菌靈對(duì)人體有一定的毒性，主要侵害人體的肝臟，神經(jīng)系統(tǒng)和骨髓。我國(guó)及國(guó)際上對(duì)水果及果汁中噻菌靈的殘留量都十分重視，分別制定了各自的殘留限量標(biāo)準(zhǔn)。
目前噻菌靈的殘留檢測(cè)方法主要有分光光度法、液相色譜法、氣相色譜法和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC/MS)技術(shù)。這些方法主要存在方法復(fù)雜費(fèi)時(shí)、成本高等特點(diǎn)。本發(fā)明采用表面增強(qiáng)拉曼光譜法對(duì)液態(tài)飲料中的噻菌靈進(jìn)行快速靈敏檢測(cè)，測(cè)量極限達(dá)到2μ g/L。目前，未見(jiàn)有基于表面增強(qiáng)拉曼檢測(cè)噻菌靈殘留的研究報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種利用表面增強(qiáng)拉曼光譜法快速檢測(cè)飲品中噻菌靈含量的方法，該方法具有檢測(cè)限低、樣品無(wú)須預(yù)處理、需要樣品少、測(cè)試時(shí)間短等特點(diǎn)。具體地，本發(fā)明提供了一種用于快速檢測(cè)飲品中噻菌靈的高濃度高穩(wěn)定性活性納米銀膠體的制備方法，該方法包括如下步驟將100ml IO^3M的AgNO3水溶液油浴加熱至沸騰后，逐滴加入25ml l%wt的檸檬酸鈉水溶液和I滴聚乙烯基吡咯烷酮；混合液在攪拌下繼續(xù)沸騰I小時(shí)，冷卻至室溫，即得到灰綠色的銀膠體溶液，離心取下層溶膠即為納米銀膠體。本發(fā)明還提供了一種快速檢測(cè)液態(tài)飲品中噻菌靈含量的方法，該方法應(yīng)用上述納米銀膠體制備方法制備得到的納米銀膠體，納米銀膠體的使用保證了表面增強(qiáng)拉曼光譜法實(shí)施的準(zhǔn)確性和高效性，具體的，該方法包含以下步驟( I)按照上述方法制備納米銀膠體；(2)取待測(cè)液態(tài)飲品5ml與步驟(I)中的納米銀膠體按體積比1:1混合，調(diào)節(jié)pH至 2. 5-6. 5 ；(3)將步驟(2)中的樣品放入激發(fā)波長(zhǎng)為1064nm FT-Raman拉曼光譜儀中進(jìn)行測(cè)定，根據(jù)噻菌靈的特征峰定性識(shí)別和定量分析待測(cè)液態(tài)飲品中的噻菌靈。上述方法中，所述的噻菌靈的特征峰位置為223011^300011^78501^1010011'1284cm \ 1581cm S 其中 223cm \300cm \785cm \ 1010cm \ 1284cm \ 1581cm 1 為喔菌靈的定性識(shí)別峰，1581CnT1為噻菌靈的定量峰。上述方法中，所述的液態(tài)飲品為水果汁飲品、蔬菜汁飲品等，優(yōu)選為蘋(píng)果汁或黃瓜汁。上述方法中，優(yōu)選地，步驟(2)中，調(diào)節(jié)pH至5. 5-6. 5。尤其具體的，本發(fā)明提供了一種蘋(píng)果汁或黃瓜汁中噻菌靈濃度的測(cè)量的方法，該方法包括如下步驟將100ml IO^3M的AgNO3水溶液油浴加熱至沸騰后，逐滴加入25ml 1%的檸檬酸鈉水溶液和I滴聚乙烯基吡咯烷酮；混合液在攪拌下繼續(xù)沸騰lh，冷卻至室溫，即得到灰綠色的銀膠體溶液，轉(zhuǎn)速3000轉(zhuǎn)/分離心，離心后取下層溶膠，即得納米銀膠體，以水為溶劑，配制噻菌靈的不同濃度梯度溶液各50mL，以及待測(cè)蘋(píng)果汁或黃瓜汁，用HCl和NaOH將上述溶液調(diào)節(jié)PH值至6. O,分別與上述納米銀膠體按體積比I :1混合并放入激發(fā)波長(zhǎng)為1064nm FT-Raman拉曼光譜儀中進(jìn)行測(cè)定，由223(^^300011-^785011'1010cm^U28WU581cm^峰定性識(shí)別是否含有噻菌靈，根據(jù)噻菌靈不同濃度梯度中 1581cm-1峰強(qiáng)度與蘋(píng)果汁或黃瓜汁中1581CHT1峰強(qiáng)度計(jì)算蘋(píng)果汁和黃瓜汁中噻菌靈的含量。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)一是與紅外光譜相比，不受水存在的干擾；二是與其他短波長(zhǎng)常規(guī)拉曼相比可以有效地避開(kāi)熒光干擾，且靈敏度極高；三是與目前噻菌靈檢測(cè)方法相比具有無(wú)需樣品前處理、所需的樣品少、測(cè)試時(shí)間短、檢測(cè)極限低等優(yōu)點(diǎn)。該方法適用在液態(tài)飲品領(lǐng)域的科研、工業(yè)、生活實(shí)踐過(guò)程中噻菌靈殘留的有效檢測(cè)。


圖I是噻菌靈的表面增強(qiáng)拉曼光譜圖。圖中a :噻菌靈標(biāo)準(zhǔn)品的常規(guī)拉曼光譜；b :納米銀膠體測(cè)500 μ g/L的噻菌靈表面增強(qiáng)拉曼光譜。其中22301^30001^785011'1010cm_1> 1284cm_1> 1581cm-1為定性識(shí)別峰，1581cm-1為定量分析峰；c :納米銀膠體的常規(guī)
拉曼光譜。圖2是噻菌靈的表面增強(qiáng)拉曼光譜圖。圖中a :噻菌靈標(biāo)準(zhǔn)品的常規(guī)拉曼光譜；b 納米銀膠體測(cè)500 μ g/L的噻菌靈表面增強(qiáng)拉曼光譜；c :納米銀膠體測(cè)蘋(píng)果汁得到的表面增強(qiáng)拉曼光譜；d:納米銀膠體的常規(guī)拉曼光譜。
具體實(shí)施例方式為了理解本發(fā)明，下面以實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但不限制本發(fā)明。實(shí)施例I:蘋(píng)果汁中噻菌靈濃度的測(cè)量將IOOml IO^3M的AgNO3水溶液油浴加熱至沸騰后，逐滴加入25ml 1%的檸檬酸鈉水溶液和I滴聚乙烯基吡咯烷酮；混合液在攪拌下繼續(xù)沸騰lh，冷卻至室溫，即得到灰綠色的銀膠體溶液，離心(轉(zhuǎn)速3000轉(zhuǎn)/分)取下層溶膠，即得納米銀膠體。以水為溶劑，配制噻菌靈的不同濃度梯度溶液(20mg/L、IOmg/L、5mg/L、lmg/L、0. 5mg/L)各50mL，以及待測(cè)蘋(píng)果汁。用HC I和NaOH將上述溶液調(diào)節(jié)PH值至6. O,分別與上述納米銀膠體按體積比I :1混合并放入激發(fā)波長(zhǎng)為1064nm FT-Raman拉曼光譜儀中進(jìn)行測(cè)定。由223cm \300cm \785cm \ 1010cm \ 1284cm \ 1581cm 1峰定性識(shí)別是否含有喔菌靈，根據(jù)噻菌靈不同濃度梯度中1581CHT1峰強(qiáng)度與蘋(píng)果汁或黃瓜汁中1581CHT1峰強(qiáng)度計(jì)算蘋(píng)果汁和黃瓜汁中噻菌靈的含量。
結(jié)果參見(jiàn)圖I和圖2，圖I表示的是納米銀膠體中O. 5mg/L(也就是500ug/L)的噻菌靈曲線b符合噻菌靈標(biāo)準(zhǔn)品的特征峰，圖2表示的是納米銀膠體中是否含有噻菌靈的測(cè)量曲線 c,發(fā)現(xiàn)曲線 c 和曲線 b 的 223cm \300cm \785cm \ 1010cm \ 1284cm \ 1581cm 1 峰基本相同，同時(shí)在1581CHT1峰，兩者高度基本相同，蘋(píng)果汁中的噻菌靈的濃度約為O. 5mg/L。實(shí)施例2 :黃瓜汁中噻菌靈濃度的測(cè)量黃瓜汁中的噻菌靈的測(cè)量方法與實(shí)施例I中的蘋(píng)果汁中的噻菌靈的測(cè)量方法相同?！?br> 權(quán)利要求
1.一種用于快速檢測(cè)飲品中噻菌靈的高濃度高穩(wěn)定性活性納米銀膠體的制備方法，該方法包括如下步驟 將IOOml 10_3M的AgNO3水溶液油浴加熱至沸騰后，逐滴加入25ml l%wt的檸檬酸鈉水溶液和I滴聚乙烯基吡咯烷酮；混合液在攪拌下繼續(xù)沸騰I小時(shí)，冷卻至室溫，即得到灰綠色的銀膠體溶液，離心取下 層溶膠即為納米銀膠體。
2.一種快速檢測(cè)液態(tài)飲品中噻菌靈含量的方法，該方法應(yīng)用權(quán)利要求I所述的方法制備得到的納米銀膠體，該方法包含以下步驟 (O按照權(quán)利要求I所述方法制備納米銀膠體； (2)取待測(cè)液態(tài)飲品5ml與步驟(I)中的納米銀膠體按體積比1:1混合，調(diào)節(jié)pH至2.5-6. 5 ； (3)將步驟(2)中的樣品放入激發(fā)波長(zhǎng)為1064nmFT-Raman拉曼光譜儀中進(jìn)行測(cè)定，根據(jù)噻菌靈的特征峰定性識(shí)別和定量分析待測(cè)液態(tài)飲品中的噻菌靈； 其中噻菌靈的特征峰位置為223cm_1,300cm_1,785cm_1,10IOcm-1,1284cm_1,1581 cm-1,中 223cm \300cm \785cm \ 1010cm \ 1284cm \ 1581cm 1 為喔菌靈的定性識(shí)別峰，1581cm 1為噻菌靈的定量峰。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中液態(tài)飲品為水果汁飲品、蔬菜汁飲品，優(yōu)選為蘋(píng)果汁或黃瓜汁。
4.一種蘋(píng)果汁或黃瓜汁中噻菌靈濃度的測(cè)量的方法，該方法包括如下步驟 將100ml 10_3M的AgNO3水溶液油浴加熱至沸騰后，逐滴加入25ml 1%的檸檬酸鈉水溶液和I滴聚乙烯基吡咯烷酮；混合液在攪拌下繼續(xù)沸騰lh，冷卻至室溫，即得到灰綠色的銀膠體溶液，轉(zhuǎn)速3000轉(zhuǎn)/分離心，離心后取下層溶膠，即得納米銀膠體， 以水為溶劑，配制噻菌靈的不同濃度梯度溶液各50ml，以及待測(cè)蘋(píng)果汁或黃瓜汁，用HCl和NaOH將上述溶液調(diào)節(jié)PH值至6.0，分別與上述納米銀膠體按體積比I :1混合并放入激發(fā)波長(zhǎng)為1064nm FT-Raman拉曼光譜儀中進(jìn)行測(cè)定，由223(^^300011-^785011'1010cm^U28WU581cm^峰定性識(shí)別是否含有噻菌靈，根據(jù)噻菌靈不同濃度梯度中1581cm-1峰強(qiáng)度與蘋(píng)果汁或黃瓜汁中1581CHT1峰強(qiáng)度計(jì)算蘋(píng)果汁和黃瓜汁中噻菌靈的含量。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種快速檢測(cè)液態(tài)飲品中噻菌靈殘留量的方法。該方法包括以下步驟制備高濃度高穩(wěn)定性活性納米銀膠體；將飲料與納米銀膠體溶液按一定比例混合，PH值調(diào)至2.5-6.5；用激發(fā)波長(zhǎng)為1064nm的FT-Raman拉曼光譜儀檢測(cè)待測(cè)樣品中的噻菌靈。本發(fā)明靈敏度高、檢測(cè)周期短、樣品無(wú)需預(yù)處理，實(shí)現(xiàn)對(duì)飲品中殘留噻菌靈農(nóng)藥的快速定量檢測(cè)。
文檔編號(hào)G01N21/65GK102901722SQ201210376809
公開(kāi)日2013年1月30日 申請(qǐng)日期2012年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月29日
發(fā)明者裴克梅, 陳林, 黃凱, 許照林 申請(qǐng)人:浙江理工大學(xué)