檢測齊帕特羅的化學發(fā)光免疫檢測試劑盒的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種檢測齊帕特羅的化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，屬于免疫學檢測領(lǐng)域。本發(fā)明的試劑盒由包被有齊帕特羅-載體蛋白偶聯(lián)物的不透明白色酶標板、齊帕特羅標準品、齊帕特羅-過氧化物酶標記抗體工作液、發(fā)光底物液、濃縮樣品稀釋液、濃縮洗滌液組成。所述齊帕特羅-載體蛋白偶聯(lián)物是將齊帕特羅與載體蛋白通過混合酸酐法或碳二亞胺法偶聯(lián)得到，濃縮洗滌液含有0.05%吐溫-20。與傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附分析法比較，本發(fā)明的試劑盒具有更高的靈敏度，且檢測時間短、費用低，可用于動物尿液、血樣、組織及內(nèi)臟等樣品中齊帕特羅的殘留量檢測。
【專利說明】檢測齊帕特羅的化學發(fā)光免疫檢測試劑盒
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種檢測齊帕特羅的化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，用于檢測動物源性食品中如動物組織、內(nèi)臟、血液、尿液和飼料、飼料原料中的齊帕特羅含量或殘留量。屬于免疫學檢測領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]用β 2_腎上腺素受體激動劑能增加肌肉/脂肪比，可明顯提高飼養(yǎng)動物瘦肉率。但大量使用或長期超量使用，且不遵守安全停藥期，則會在飼養(yǎng)動物組織中蓄積，人食用了這種動物組織后會引起中毒甚至死亡，因此很多國家和國際組織已經(jīng)禁止這類化合物用于食品動物飼養(yǎng)。運動員大劑量使用該類藥物，可以增加肌肉/脂肪比并提高肌肉力量，還對呼吸系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)有興奮作用，可以在比賽中瞬間爆發(fā)，獲得超常水平的發(fā)揮，有違公平競賽的原則，所以國際奧委會明令禁止參賽運動員使用此類藥物。
[0003]齊帕特羅(ZilpateiOl)是一種新型β 2 -腎上腺素能激動劑，其化學結(jié)構(gòu)(見式I)與常見的苯胺類-腎上腺素類激動劑(克侖特羅和沙丁胺醇)和苯酚類β -腎上腺素類激動劑(萊克多巴胺)是完全不同的，它的作用效果相當于克侖特羅的十分之一，但比萊克多巴胺更有效。在墨西哥和南非齊帕特羅被允許作為宰殺期牛的飼料添加劑使用，但是在歐盟被明令禁止使用。
【權(quán)利要求】
1.一種檢測齊帕特羅的化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，其特征在于試劑盒中的以下成份: (1)包被有齊帕特羅-載體蛋白偶聯(lián)物的不透明白色酶標板；所述齊帕特羅-載體蛋白偶聯(lián)物是將齊帕特羅與載體蛋白通過混合酸酐法或碳二亞胺法偶聯(lián)得到，所述載體蛋白為人血清白蛋白、牛血清白蛋白、雞蛋白蛋白、鼠血清蛋白或兔血清蛋白； (2)齊帕特羅標準品； (3)齊帕特羅-過氧化物酶標記抗體:該成分為用過氧化物酶標記的齊帕特羅抗體，所述齊帕特羅抗體為單克隆抗體； (4)發(fā)光底物液:該發(fā)光底物液是以魯米諾貨異魯米諾為發(fā)光劑的化學發(fā)光底物液，分為A液和B液保存，在使用前按1:1混合使用；其中A液為發(fā)光增強劑加魯米諾貨發(fā)光增強劑加異魯米諾，B液為過氧化氫溶液或尿素過氧化氫溶液； (5)2倍濃縮稀釋液； (6)20倍濃縮洗滌液； 根據(jù)權(quán)利要求1的齊帕特羅的化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，其中，所述不透明白色酶標板為96孔的可拆卸或不可拆卸的不透明白色酶標板。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的齊帕特羅的化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，其中，所述齊帕特羅標準品的濃度為0.01-16.0 Pg/L的濃度區(qū)間。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的齊帕特羅的化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，其中，所述齊帕特羅-過氧化物酶標記抗體工作液是用抗體稀釋液稀釋成1:20000比例； 根據(jù)權(quán)利要求1的齊帕特羅的化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，其中，所述發(fā)光底物液為商品化的任一種以魯米諾貨異魯米諾為發(fā)光劑的化學發(fā)光底物液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的齊帕特羅的化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，其中，所述2倍濃縮稀釋液，其成分為0.01mol/L, pH7.4的磷酸緩沖液、甘氨酸-HCl緩沖液或Tris-HCl緩沖液，使用前請按1:1稀釋(1份濃縮樣品稀釋液+1份去離子水)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的齊帕特羅的化學發(fā)光免疫檢測試劑盒，其中，所述20倍濃縮洗滌液，其包含0.05%吐溫-20，0.01mol/L的PBST，pH值范圍7.0-7.5之間，使用前請按I:19稀釋(1份濃縮稀釋液+19份去離子水)。
【文檔編號】G01N21/76GK103808933SQ201210438102
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2012年11月6日 優(yōu)先權(quán)日:2012年11月6日
【發(fā)明者】杜道林, 洪霞 申請人:江蘇維賽科技生物發(fā)展有限公司