一種紅豆杉中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的薄層色譜檢測(cè)方法
【專(zhuān)利摘要】一種紅豆杉中10-去乙?；涂ㄍあ蟮谋由V檢測(cè)方法，涉及一種檢測(cè)方法，具體涉及一種紅豆杉中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的薄層色譜檢測(cè)方法，所述方法包括如下步驟：⑴10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ對(duì)照品溶液制備；⑵樣品溶液制備；⑶薄層色譜檢測(cè)。本發(fā)明有益效果是檢測(cè)10-去乙?；涂ㄍあ蠓椒ê?jiǎn)單、實(shí)用和經(jīng)濟(jì)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】—種紅豆杉中10-去乙?；涂ㄍII的薄層色譜檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種檢測(cè)方法，具體涉及一種紅豆杉中10-去乙?；涂ㄍII的薄層色譜檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]紫杉醇是紅豆杉屬植物中的一種復(fù)雜的次生代謝產(chǎn)物，也是目前所了解的惟一一種可以促進(jìn)微管聚合和穩(wěn)定已聚合微管的藥物。同位素示蹤表明，紫杉醇只結(jié)合到聚合的微管上，不與未聚合的微管蛋白二聚體反應(yīng)。細(xì)胞接觸紫杉醇后會(huì)在細(xì)胞內(nèi)積累大量的微管，這些微管的積累干擾了細(xì)胞的各種功能，特別是使細(xì)胞分裂停止于有絲分裂期，阻斷了細(xì)胞的正常分裂。通過(guò)I1-1II臨床研究，紫杉醇主要適用于卵巢癌和乳腺癌，對(duì)肺癌、大腸癌、黑色素瘤、頭頸部癌、淋巴瘤、腦瘤也都有一定療效。
[0003]10-去乙?；涂ㄍII可以通過(guò)化學(xué)合成為紫杉醇，所以檢測(cè)10-去乙?；涂?br>
亭III是重要的。
[0004]常規(guī)的10-去乙?；涂ㄍII檢測(cè)方法為HPLC檢測(cè)，填料為反相填料。流動(dòng)相為乙腈-水，檢測(cè)器是紫外檢測(cè)器。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]常規(guī)的HPLC檢測(cè)10-去乙酰基巴卡亭III方法要求高:
[0006]⑴需要一臺(tái)HPLC，一臺(tái)HPLC價(jià)格通常10萬(wàn)以上，HPLC價(jià)格高，普及率低；
[0007](2) HPLC需要有專(zhuān)業(yè)的人員操作、維護(hù)和維修；
[0008](3) HPLC檢測(cè)需要大量溶劑，大量溶劑的使用對(duì)環(huán)境也造成了極大的污染；
[0009](4) HPLC檢測(cè)每次只能檢測(cè)一個(gè)樣品，檢測(cè)時(shí)間也長(zhǎng)。
[0010]本發(fā)明提供了一種易于操作、能定性半定量和經(jīng)濟(jì)的薄層色譜檢測(cè)方法，該方法解決HPLC檢測(cè)的部分弊端。
[0011]一種紅豆杉中10-去乙?；涂ㄍII的薄層色譜檢測(cè)方法，所述方法包括如下步驟:
[0012]⑴稱(chēng)取10-去乙?；涂ㄍII 0.1?lmg，用Iml有機(jī)溶劑溶解，得到10-去乙酰
基巴卡亭III對(duì)照品溶液；
[0013]⑵將紅豆杉原料粉碎，用醇溶液浸提三次，合并三次浸提溶液，濃縮浸提溶液至原體積的1/3?1/2，用等體積有機(jī)溶劑I萃取三次，合并三次萃取相，蒸干萃取相，稱(chēng)取蒸干粉末0.1?lmg，用Iml有機(jī)溶劑II溶解，得到樣品溶液；
[0014]⑶吸取步驟⑴和⑵制備的溶液各5?10 μ 1，點(diǎn)在同一硅膠G薄層板上，展開(kāi)劑是鹵代烴和醇，鹵代烴和醇的體積比是100:10?I,展開(kāi),取出，晾干,用5?10%濃硫酸乙醇溶液顯色，用105°C烘干薄層板至斑點(diǎn)顯色。
[0015]所述方法步驟⑴中的有機(jī)溶劑優(yōu)選為甲醇、無(wú)水乙醇或N，N-二甲基甲酰胺，N，N-甲基甲酰胺溶解10-去乙?；涂ㄍII溶解度高，甲醇和無(wú)水乙醇沸點(diǎn)低。[0016]所述方法步驟⑴紅豆杉原料優(yōu)選為樹(shù)皮、枝葉和樹(shù)根。
[0017]所述方法步驟⑵醇溶液優(yōu)選為甲醇、無(wú)水乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。
[0018]所述方法步驟⑵有機(jī)溶劑I優(yōu)選為二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯。
[0019]所述方法步驟⑵有機(jī)溶劑II優(yōu)選為甲醇、無(wú)水乙醇或N，N-二甲基甲酰胺，N，N-甲基甲酰胺溶解10-去乙酰基巴卡亭III溶解度高，甲醇和無(wú)水乙醇沸點(diǎn)低。
[0020]所述方法步驟⑶鹵代烴優(yōu)選為二氯甲烷或三氯甲烷。
[0021]所述方法步驟⑶醇優(yōu)選為甲醇或無(wú)水乙醇。
[0022]本發(fā)明有益效果是:
[0023]⑴10-去乙?；涂ㄍII檢測(cè)方法簡(jiǎn)單、實(shí)用和經(jīng)濟(jì)。
[0024]⑵一次檢測(cè)可以同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品。
[0025]⑶檢測(cè)結(jié)果可以定性和半定量。
【具體實(shí)施方式】
[0026]下述非限制性實(shí)施例可以使本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
[0027]實(shí)施例1
[0028]一種紅豆杉中10-去乙?；涂ㄍII的薄層色譜檢測(cè)方法，所述方法包括如下步驟:
[0029]⑴稱(chēng)取10-去乙?；涂ㄍII標(biāo)準(zhǔn)品0.5mg，用Iml甲醇超聲溶解，得到10-去乙?；涂ㄍII對(duì)照品溶液，濃度0.5mg/ml，作為定性和半定量的標(biāo)準(zhǔn)；
[0030]⑵將紅豆杉樹(shù)皮、枝葉和樹(shù)根粉碎，粉碎后用無(wú)水乙醇浸提三次，合并三次浸提溶液，減壓蒸餾法濃縮浸提溶液，真空度0.8MPa，水浴溫度55°C，濃縮至原體積的1/3，用等體積二氯甲烷萃取濃縮液三次，合并三次萃取相，減壓蒸餾法蒸干萃取相，真空度0.4MPa，水浴溫度35°C，稱(chēng)取蒸干粉末0.5mg，用Iml甲醇超聲溶解，得到樣品溶液；
[0031]⑶用玻璃點(diǎn)樣毛細(xì)管吸取步驟⑴和⑵制備的溶液各10 μ 1，點(diǎn)在同一硅膠G薄層板、距板底Icm處同一水平線上，展開(kāi)劑是三氯甲烷和無(wú)水乙醇，三氯甲烷和無(wú)水乙醇的體積比是100:5，平衡5?lOmin，展開(kāi)，展開(kāi)至距板頂Icm處取出，取出，用熱風(fēng)吹干，用10%濃硫酸乙醇溶液顯色，用105°C烘干薄層板至斑點(diǎn)顯色。
【權(quán)利要求】
1.一種紅豆杉中10-去乙酰基巴卡亭III的薄層色譜檢測(cè)方法，所述方法包括如下步驟: ⑴稱(chēng)取10-去乙酰基巴卡亭III 0.1?lmg，用Iml有機(jī)溶劑溶解，得到10-去乙?；涂ㄍII對(duì)照品溶液；⑵將紅豆杉原料粉碎，用醇溶液浸提三次，合并三次浸提溶液，濃縮浸提溶液至原體積的1/3?1/2，用等體積有機(jī)溶劑I萃取三次，合并三次萃取相，蒸干萃取相，稱(chēng)取蒸干粉末0.1?lmg，用Iml有機(jī)溶劑II溶解，得到樣品溶液； ⑶吸取步驟⑴和⑵制備的溶液各5?10 μ 1，點(diǎn)在同一硅膠G薄層板上，展開(kāi)劑是鹵代烴和醇，鹵代烴和醇的體積比是100:10?I,展開(kāi),取出，晾干,用5?10%濃硫酸乙醇溶液顯色，用105°C烘干薄層板至斑點(diǎn)顯色。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步驟⑴有機(jī)溶劑是甲醇、無(wú)水乙醇或N，N-甲基甲酰胺。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步驟⑴紅豆杉原料是樹(shù)皮、枝葉和樹(shù)根。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步驟⑵醇溶液是甲醇、無(wú)水乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步驟⑵有機(jī)溶劑I是二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步驟⑵有機(jī)溶劑II是甲醇、無(wú)水乙醇或N，N-甲基甲酰胺。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步驟⑶鹵代烴是二氯甲烷或三氯甲烷。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述方法步驟⑶醇是甲醇或無(wú)水乙醇。
【文檔編號(hào)】G01N30/90GK103808850SQ201210460334
【公開(kāi)日】2014年5月21日 申請(qǐng)日期:2012年11月15日 優(yōu)先權(quán)日:2012年11月15日
【發(fā)明者】劉勝遠(yuǎn) 申請(qǐng)人:劉勝遠(yuǎn)